PRACTICA

Accin de agentes fsicos y qumicos.

I. Objetivos.
Conocer los efectos de agente fsico y qumico en el control microbiano.
Analizar la reaccin de dos gneros microbianos a diferentes agentes de control.

II. Introduccin.

Durante distintas labores cotidianas se requiere controlar o disminuir el crecimiento

microbiano, estas se relacionan con actividades de higiene y limpieza, en estas actividades
se aplica agentes fsicos o qumicos los cuales interaccionan con estructuras celulares y
mecanismos fisiolgicos de los microorganismos.

En el laboratorio y en la industria para controlar el crecimiento microbiano se emplean

agentes fsicos (temperatura, radiacin) y qumicos (pH, nutrientes, desinfectantes,
antimicrobianos) los cuales son empleados de manera diferente ya que se deben considerar
si se desea controlar o eliminar microorganismos presentes en superficies inertes, en
alimentos termo sensibles, en clulas vivas (tejidos)

Es importante mencionar que todos los organismos tienen una temperatura ptima para que
desarrollen sus actividades vitales, la cual les permite crecer mejor, de acuerdo a su
temperatura ptima de crecimiento los microrganismos se clasifican en psicrfilos, mesfilos
y termfilos.

La concentracin de iones hidrgeno en el medio afecta directamente a los microrganismos

y la actividad enzimtica adems influye en la disociacin y solubilidad de molculas que
requieren sin embargo tambin existen microorganismos adaptados a distintos pH as
tenemos que se clasifican como acifilos, alcalfilos

III. Equipos, instrumentos e insumos

Plumn indeleble
Tubos de ensayo con caldo nutritivo
Incubadoras a diferentes temperaturas
Medidor de pH
Mechero
Asa de siembra
Pipetas estriles
Pipeta Pasteur
Cultivo de bacterias
Cultivo de levaduras
Solucin HCL
Solucin NaOH
IV. Procedimiento.
a) Control de crecimiento por agente fsico - temperatura:

Inocular 1 mL de Escherichia sp. a cada uno de tres tubos con caldo nutritivo
Homogenizar suavemente
Cada uno de los tubos ser incubado a temperaturas diferentes 15, 37 y 60C por
24 horas.

Inocular 1 mL de Saccharomyces sp. a cada uno de tres tubos con caldo nutritivo
Homogenizar suavemente
Cada uno de los tubos ser incubado a temperaturas diferentes 15, 37 y 60C por
24 horas.

a) Control de crecimiento por agente qumico - temperatura:

Preparar tres tubos conteniendo caldo nutritivo a pH 4, pH 7 y pH 10

Inocular 1 mL de Escherichia sp. a cada uno de tres tubos con caldo nutritivo
Homogenizar suavemente
Los tres tubos sern incubados a 37 por 24 horas.

Preparar tres tubos conteniendo caldo nutritivo a pH 4, pH 7 y pH 10

Inocular 1 mL de Saccharomyces sp.. a cada uno de tres tubos con caldo nutritivo
Homogenizar suavemente
Los tres tubos sern incubados a 37 por 24 horas.

V. Resultados
Reportar los resultados segn el grado de turbidez que muestra cada uno de los medios de
cultivos evaluados

Tabla 1. Resultados del control de crecimiento de Escherichia sp.

Agente de control Turbidez

Temperatura 37 C
Fsico
Temperatura 60C
pH 4
Qumico PH 7
pH 10

Tabla 2. Resultados del control de crecimiento de Saccharomyces sp.

Agente de control Turbidez

Temperatura 37 C
Fsico
Temperatura 60C
pH 4
Qumico PH 7
pH 10
VI. Cuestionario

1. En un proceso de esterilizacin, explique que ocasiona el incremento de temperatura

en la clula microbiana

2. En el control microbiano, explique que ocasiona el aumento o descenso del pH en la

cula microbiana

3. Cules son las temperaturas ptimas para Escherichia sp. y Saccharomyces sp.?,
concuerdan con sus resultados?

4. Cmo se interpreta los resultados del mtodo de difusin del antimicrobiano en

agar?, Cul es el mecanismo de accin de la clindamicina?

5. Proponga tres muestras ambientales y los agentes adecuados para lograr su

esterilizacin

VII. Referencias Bibliogrficas.

a. Presccot, L. M., Harley, J. P., D.A. 1999. Microbiologa. Cuarta edicin. Mc Graw Hill
Interamericana. Mxico.

b. Aquiahuatl, M., M. Prez. 2004. Manual de Prcticas del Laboratorio de

Microbiologa General. Primera edicin. Universidad Metropolitana, Unidad
Iztapalapa. Mxico.

c. Madigan M.T., J.M. Martinko, J. Parker. 2003. Brock Biologa de los Microorganismos.
Dcima Edicin. Prentice Hall. Espaa.