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1 FOSFOLPIDOS
Los fosfolpidos componen uno de los grupos importantes de sustancias semejantes a las grasas
ampliamente distribuidas en las clulas de los tejidos en el organismo animal. Son esteres
complejos de alto peso molecular en cuya composicin entran alcoholes de distintas clases,
cidos grasos saturados y no saturados, acido fosfrico y una base nitrogenada.

Su frmula general es la siguiente:

O
H2C O C R1
O
HC O C R2
O
H2C O P O X X Base nitrogenada
OH
Los fosfolpidos, junto con las protenas, son los principales componentes de las membranas de
las clulas y de sus organelas. Los fosfolpidos se distinguen por su capacidad de disolverse en
solventes orgnicos.

1.1.1 Aislamiento de los fosfolpidos

Unos objetos cmodos para el aislamiento y el estudio de la composicin qumica de los
fosfolpidos son el tejido nervioso, la yema de huevo, el hgado, la leche, donde ellos se
encuentran en considerable cantidad.

1.1.1.1 Aislamiento de las lecitinas de la yema de huevo

Instrumentos:
Vaso qumico
Soporte con tubos do ensayo
Embudos
Filtros de papel
Varilla de vidrio

Reactivos:
Yema de huevo
Alcohol etlico, al 96%
Acetona.

Procedimiento:
En el vaso se pone la mitad de una yema, se aaden 20 mL de alcohol caliente y se mezcla con
una varilla de vidrio. La mezcla se enfra y se filtra en un tubo de ensayo seco. Al ser turbio el
extracto, la filtracin se repite.
Para detectar la lecitina en el filtrado, en un tubo de ensayo seco se vierten 5 rnL de acetona y
se le aade, gota a gota, el filtrado obtenido. La aparicin de turbidez indica precipitacin de
lecitina. En el otro tubo de ensayo seco se vierten 3 mL de filtrado y se aade, gota a gota, "agua.
Se forma una emulsin estable. El filtrado que queda se utiliza para otras reacciones de
reconocimientos de las lecitinas.

1.1.2 Aislamiento de los fosfolpidos del tejido nervioso

Instrumentos:
Balanza de torsin
Mortero de porcelana
Arena de cuarzo
Matraz erlenmeyer
Embudos
Filtros de papel
Desecador

Reactivos:
Cerebro de animal
ter dietlico
Acetona

Procedimiento:
El tejido cerebral (de 3 a 4 g) se homogeniza en el mortero con arena de cuarzo, se le aade
volumen 5 veces mayor de ter y se extraen en frio los fosfolpidos durante un tiempo de 24 a 48
h. Luego la disolucin etrica se filtra en un matraz erlenmeyer y al filtrado transparente se le
aade un volumen triple de acetona. La lecitina precipitada se separa por filtracin, se lava con
acetona y se seca en el desecador sobre cido sulfrico. La lecitina obtenida se protege de la
oxidacin en tubos de ensayo soldados.

1.1.3 Aislamiento del colesterol del tejido nervioso

Instrumentos:
Estufa
Soporte con tubos de ensayo
Mortero de porcelana
Placa de vidrio
 Esptula
Embudos
Filtros de papel

Reactivos:
Sesos de un animal, desmenuzados en una picadora de carne
Cloroformo
Yeso

Procedimiento:
3 g de cerebro desmenuzados se trituran cuidadosamente en el mortero con 6 g de yeso. La
masa espesa obtenida se aplica con la ayuda de la esptula sobre la placa de vidrio en una capa
fina y se seca en el armario secador a 40C. La masa reseca se separa de la placa en un mortero
seco y se tritura convirtindola en polvo. El polvo se traslada a un tubo de ensayo, se le vierten
6 mL de cloroformo, se agita cuidadosamente durante 5 min y se filtra. El filtrado obtenido se
utiliza para las reacciones coloreadas de reconocimiento del colesterol.

1.1.4 Reacciones coloreadas del colesterol

El principio del mtodo. Bajo la accin de los agentes deshidratantes el colesterol se transforma
en un hidrocarburo con dobles enlaces conjugados: el colesterileno, que al interaccionar con el
cido sulfrico y el anhdrido actico, da compuestos complejos intensivamente coloreados.
Reacciones semejantes son caractersticas tambin para otros esteroles.

Instrumentos:
Soporte con tubos de ensayo

Reactivos:
Colesterol: extracto en cloroformo
cido actico glacial
Anhdrido actico
cido sulfrico concentrado

1.1.4.1 Reaccin con el cido sulfrico (Reaccin de Schiff)

Procedimiento:
En un tubo de ensayo seco se vierte 1 mL de extracto de colesterol en cloroformo y con cuidado,
por la pared, se hace deslizar 1 mL de cido sulfrico concentrado. En el contacto de los lquidos
se observa la aparicin de un anillo de color rojo.
1.1.4.2 Reaccin con el cido sulfrico (Reaccin de Salkovsky)

Procedimiento:
En un tubo de ensayo seco se vierten 1 mL de extracto de colesterol en cloroformo y 1 mL de
cido sulfrico, los lquidos se mezclan agitando el tubo de ensayo. Al separarse las capas, el
estrato superior de cloroformo resulta coloreado de rojo y el inferior de un color amarillento con
fluorescencia verde. Si al estrato inferior de lquido se le aade 1 mL de cido actico glacial,
aparece una coloracin roja rosada, mientras que la fluorescencia se mantiene.

1.1.4.3 Reaccin con el anhdrido actico y cido sulfrico (Reaccin de Liebermann

Burkhardt)

Procedimiento:
En un tubo de ensayo se vierten 2 mL de extracto de colesterol en cloroformo, se aaden 1 mL
de anhdrido actico, 2 gotas de cido sulfrico, y se mezcla todo cuidadosamente. El lquido
adquiere primero una coloracin roja, luego una violeta, azul y, por ltimo, verde.