UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y METALURGIA

Departamento Acadmico de Ingeniera Qumica

ESCUELA DE FORMACIN PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA

Laboratorio de anlisis instrumental

ASIGNATURA: QU-342 ANALISIS INSTRUMENTAL

PRCTICA N 01

DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA DE CIDO CARMNICO EN

MUESTRA DE COCHINILLA

PROFESORDE TEORA: M.Sc. JORGE GARCA BLASQUEZ MOROTE

PROFESORDE PRCTICA: M.Sc. JORGE GARCA BLASQUEZ MOROTE

ALUMNO:
HUASACCA APONTE, Juan Carlos

DA DE PRCTICAS: Mircoles HORA: 8:00 a.m 11:00 a.m

FECHA DE EJECUCIN: 06/09/2015 FECHA DE ENTREGA: 16/09/2015

AYACUCHO - PER

2015
 DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA DE CIDO CARMNICO EN
MUESTRA DE COCHINILLA

I.OBJETIVOS

Cuantificar la presencia del cido carmnico en muestra de cochinilla y

carmn.

II. MARCO TERICO

CIDO CARMNICO
Estructura qumica del cido carmnico.

Frmula molecular C22H20O13

Propiedades fsicas
Apariencia rojo
Masa molar 492,39 g/mol
Punto de fusin 409 K (136 C)

Propiedades qumicas
Solubilidad en agua aprox. 3 g/100 ml

Valores en el SI y en condiciones estndar (25 C y 1 atm), salvo que se indique lo

contrario.

El cido carmnico, es una sustancia qumica compleja utilizada como colorante

rojo extrado de la cochinilla (Dactylopius coccus) u otros insectos. Se utiliza como
colorante en cosmticos (pintalabios, etc.) y como E-120 en la industria alimenticia
para dar un color rojo a los alimentos o a bebidas, aunque se sustituye cada vez
ms por colorantes sintticos ms baratos.
El nombre deriva de la palabra rabe-persa kermes, que es el nombre de una baya
roja.
En Europa se utiliza el cido carmnico obtenido a partir de insectos autctonos al
menos desde la Edad de Hierro, y se han descubierto restos, por ejemplo, en
tumbas de la cultura de Hallstadt
LA COCHINILLA

La cochinilla es un insecto pequeo que vive como husped de la tuna,

alimentndose de la savia de la penca; que parasita en los cladodios o pencas
del cacto nopal, llegan a su edad adulta a los 3 meses.

El macho no tiene aparato bucal pero posee un par de alas que le sirven para
moverse y fecundar a la hembra; ste vive tres das nicamente.

Los insectos que producen esta sustancia son muy pequeos, hasta tal punto
que hacen falta unos 100.000 para obtener 1 kg de producto,[cita requerida]
pero son muy ricos en colorante, alcanzando las hembras adultas hasta el 21%
de producto en su peso seco.

Despus del descubrimiento de Amrica se consigue ms fcilmente de las

hembras de la cochinilla Dactylopius coccus, que vive sobre todo en plantas
suculentas del tipo Opuntia, llegan a su edad adulta a los 3 meses. Para la cra de
este insecto se introdujeron estas plantas incluso en las Islas Canarias y en la
Espaa peninsular

EXTRACCIN

Estructura de la carmina, complejo del cido carmnico con aluminio.

El colorante se forma en realidad al unirse la sustancia extrada de los insectos,
que por s misma no tiene color, con un metal como el aluminio, o el calcio y
para algunas aplicaciones (bebidas especialmente) con el amonaco[cita
requerida].

Para la obtencin del pigmento "carmn" (el complejo del cido carmnico con
aluminio) se secan las cochinillas y se hierven en agua con algo de cido
sulfrico. El cido se disuelve. Luego se precipita aadiendo alumbre y cal. El
cido carmnico se une al ion de aluminio como ligando quelato.

1 kg de los insectos da aproximadamente 50 g de carmn.

UTILIZACIN

Los extractos de cochinilla y el cido carmnico son colorantes orgnicos

naturales, mientras que los carmines son colorantes orgnico-artificiales.

Este colorante es utilizado como aditivo en alimentos, medicamentos y

cosmticos. Posee la clasificacin FD&C de la Administracin de Drogas y
Alimentos (FDA) de los Estados Unidos y est incluido en la lista de aditivos de
la Comunidad Econmica Europea (actual Unin Europea) bajo los parmetros
de toxicidad permitida -Ingesta Diaria Admitida IDA-.

Es probablemente el colorante con mejores caractersticas tecnolgicas de entre

los naturales, pero se utiliza cada vez menos debido a su alto precio. Confiere a
los alimentos a los que se aade un color rojo muy agradable, utilizndose en
conservas vegetales y mermeladas (hasta 100 mg/kg), helados, productos
crnicos y lcteos, como el yogur y el queso fresco (20 mg/kg de producto) y
bebidas, tanto alcohlicas como no alcohlicas.

Este colorante es un sustituto adecuado para los colorantes artificiales como el

rojo 40 pero por ser de origen animal es caro comparado con los sintticos

ESPECTROFOTMETRO

Un espectrofotmetro es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un

haz de Radiacin Electromagntica (REM), comnmente denominado Luz,
separndolo en facilitar la identificacin, calificacin y cuantificacin de su
energa. Su eficiencia, resolucin, sensibilidad y rango espectral, dependern de
las variables de diseo y de la seleccin de los componentes pticos que lo
conforman.

Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida.

El color de las sustancias se debe a que estas absorben ciertas longitudes de

onda de la luz blanca que incide sobre ellas, y slo vemos aquellas longitudes de
onda que no fueron absorbidas.
 Componentes de un espectrofotmetro

1 Fuente de luz

La misma ilumina la muestra. Debe cumplir con las condiciones de estabilidad,

direccionabilidad, distribucin de energa espectral continua y larga vida. Las
fuentes empleadas son lmpara de tungsteno y lmpara de arco de xenn.

2 Monocromador

Para obtener luz monocromtica, constitudo por las rendijas de entrada y

salida, colimadores y el elemento de dispersin. El monocromador asla las
radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el
conjunto.

3 Fotodetectores

En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para

percibir la seal en forma simultnea en 16 longitudes de onda, cubriendo el
espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes mvils
del equipo.

III.MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO

Balanza analtica
Probeta graduada
Pipeta graduada
Vasos de precitados 250 ml y 150 ml
 Estufa elctrica
Varilla de vidrio
Papel filtro
Lunas de reloj
Esptula
Mortero
Termmetro
Plancha de calentamiento
Fiolas de 10 ml a 1000 ml
Embudo simples
Espectrofotmetro
Matraz Erlenmeyer
 REACTIVOS
cido clorhdrico HCl 2N
Muestra Problema: Cochinilla Y Carmn
Agua destilada

IV.PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

PREPARACION DE LA SOLUCION PROBLEMA.

Pesar en un vaso de 250 mL 5,0 g de muestra de cochinilla deshidratada y

pulverizar en un mortero.
Tomar otra porcin de 5 g de la muestra pulverizada y determinar la
humedad en una estufa elctrica a una temperatura de 60-70 C.
Pesar 0.1g de muestra molida y colocar en un matraz de Erlenmeyer de 250
ml y agregar 30 ml de cido clorhdrico HCl 2N.
Tapar el matraz de Erlenmeyer con una luna de reloj y llevar a ebullicin por
10-15 minutos hasta que la extraccin se haya completado. Enfriar la mezcla
hasta temperatura ambiente.
La mezcla resultante pasar a una fiola de 1000 ml y enrasar con agua destilada.
Luego homogenizar.
Filtrar la solucin con papel de porosidad fina y eliminar los primeros 200 ml
de filtrado.
Separar tres fracciones de filtrado de aproximadamente 50 ml y destinar para
el anlisis.

PREPARACION DE LA SOLUCION BLANCO O REFERENCIA.

En un matraz aforado (fiola) de 100 ml verter 3 ml de HCl 2N y enrasar con

agua destilada).

PROCEDIMIENTO INSTRUMENTAL DEL ESCTROFOTOMETRO.

Conectar el instrumento a la lnea de tensin de 220 v y encender con la

tecla de interrupcin.

Dejar el estabilizar el equipo por 15 minutos aproximadamente

Ajustar a la longitud de onda a 4495 nm.

Colocar en el compartimiento de muestra, la cubeta conteniendo la solucin

blanco y llevar a la absorbancia igual a 0 o 100% de transmitancia.

Remover la cubeta conteniendo la solucin blanco e insertar la cubeta

conteniendo la solucin problema y leer la absorbancia respectiva.
Proceder de igual manera para las diferentes muestras.
Retirar la cubeta, lavarla con cuidado y secarla.
V.DATOS , CALCULOS Y RESUTADOS

Para preparar 100 mL Solucin de HCl 2N

Datos de HCl concentrado

=1.19 g/ml =
PM=36.43g/mol
%m=37%
=
1000 %
=
100 2 /
1.19 1000 0.37 =
= 12.086 mol /l
36.43
= 12.0862 /
= 16.5

DATOS:

MUESTRAS MASA (g) ABSORBANCIA

0.1014 0.233
COCHINILLA 0.1117 0.212
0.1448 0.360
0.1102 0.288
CARMIN 0.1557 0.409
0.2510 0.624

CALCULOS

1. calcular el porcentaje de cido carmnico en las 3 fracciones de solucin

problema y obtener el porcentaje promedio, utilizando las relaciones
matemticas.

Para la muestra 1


=

0.233
= 100 = 16.7626
1.39

()
%1 = 100
1

0.01676
%1 = 100 = 16.53%
0.1014
Promedio de porcentaje:

%1 + %2 + %3
% =
3
16.53 + 13.65 + 17.886
% =
3
% = 16.02 %

De esta manera se hizo los clculos para todas las nuestras y se muestra en el
siguiente cuadro.

2. reportar los resultados en un cuadro resumen

MUESTRAS MASA (g) ABSORBANCIA ppm mg %AC PROMEDIO

0.1014 0.233 16.7626 0.01676 16.5312
COCHINILLA 0.1117 0.212 15.2518 0.01525 13.6543 16.0239
0.1448 0.360 25.8993 0.02590 17.8862
0.1102 0.288 20.7194 0.02072 18.8017
CARMIN 0.1557 0.409 29.4245 0.02942 18.8982 18.5284
0.2510 0.624 44.8921 0.04489 17.8853
VI.CUESTIONARIO

3. ventajas y desventajas presenta el mtodo de anlisis utilizado.

Las ventajas de la espectrofotometra sobre otros mtodos analticos de

laboratorio son varias: es rpida, precisa, verstil, fcil de usar y eficiente en costo.
Los espectrofotmetros se han mejorado en precisin y versatilidad en los ltimos
aos con los avances de tecnologa, y hoy se consideran indispensables en un
laboratorio de qumica analtica.

4. otros mtodos de anlisis para cuantificar el cido carmnico en muestras

de cochinilla

El mtodo finalmente utilizado fue el siguiente: se colectaron los insectos

individuales en la fase de hembra oviplena a punto de iniciar la oviposicin, se
secaron en una estufa con circulacin de aire a 50C por 72 h, se pesaron y luego se
sumergieron en 1 mL de hexano contenido en un tubo Eppendorf y se agitaron con
el fin de eliminar la cera que los recubra. Luego de descartar el hexano, se agreg a
cada individuo 4 mL de solucin amortiguadora de pH 6 (obtenida agregando 56
mL de NaOH 0,1 M a 500 mL de KH2PO4 0,1 M), la suspensin se someti a ondas
ultrasnicas durante 3 h y luego se moli el material slido en morteros
individuales. De esta suspensin se extrajo una alcuota de 0,6 mL. sta se agreg
sobre 0,6 mL de amortiguador pH 6 contenido en un tubo Eppendorf que se
centrifug durante 8 min a 13.000 rpm. Se extrajo una alcuota de 50 L del
sobrenadante y se deposit en una de las cubetas de una placa de 96 cubetas, y se
obtuvo la absorbancia a 490 nm de cada una de las muestras en un
espectrofotmetro (Packard Instrument Co., SpectraCountTM, Downers Grove,
Illinois, USA) con capacidad para la lectura simultnea de 96 muestras.

En cada placa se incluyeron seis estndares con distintas concentraciones de cido

carmnico (Sigma Chemical Co., Saint Louis, Missouri, USA; 90% de pureza), dos
testigos con solucin amortiguadora y un nmero variable de las muestras. Los
valores de CAC en las muestras se interpolaron de una recta de calibracin hecha
con los estndares, luego de restar de las absorbancias ledas el promedio de las
absorbancias de los testigos. La CAC se expres en funcin del peso seco de la
muestra.

Espectroscopia electrnica UV-VIS

Los espectros UV fueron registrados en un espectrmetro Perkin-Elmer Lambda

11, en celdas de cuarzo de 10 mm de paso ptico. Se utiliz una muestra patrn
para medir la concentracin al 22% de cido carmnico, luego se realiz la
medicin con las muestras con un autocero entre cada medicin (agua destilada)
estas mediciones se realizaron en ppm para luego pasarla a porcentaje y as poder
determinar el porcentaje de cido carmnico contenido en las muestras. Las
mediciones se realizaron a 494 nm de longitud de onda debido a que el rango para
poder hacer lecturas para color rojo
5. formular la estructura molecular del cido carmnico y del carmn.
Mencionar las aplicaciones industriales de estos compuestos. Sealar las
propiedades fsicas y qumicas del cido carmnico

CIDO CARMNICO

Frmula estructural

Frmula molecular C22H20O13

Propiedades fsicas
Apariencia rojo
Masa molar 492,39 g/mol
Punto de fusin 409 K (136 C)

Propiedades qumicas
Solubilidad en agua aprox. 3 g/100 ml

Aplicaciones industriales

El cido carmnico, E-120, C.I. 75470, Natural Red 004, es una sustancia qumica
compleja utilizada como colorante rojo extrado de la cochinilla (Dactylopius
coccus) u otros insectos. Se utiliza como colorante en cosmticos (pintalabios, etc.)
y como E-120 en la industria alimenticia para dar un color rojo a los alimentos o a
bebidas, aunque se sustituye cada vez ms por colorantes sintticos ms baratos.
Un sustituto ampliamente utilizado es el Ponceau 4R , un colorante azoico con el
nmero E124.
CARMN

Aplicaciones industriales

Los extractos de cochinilla y el cido carmnico son colorantes orgnicos naturales,

mientras que los carmines son colorantes orgnico-artificiales.

Este colorante es utilizado como aditivo en alimentos, medicamentos y cosmticos.

Posee la clasificacin FD&C de la Administracin de Drogas y Alimentos (FDA) de
los Estados Unidos y est incluido en la lista de aditivos de la Comunidad
Econmica Europea (actual Unin Europea) bajo los parmetros de toxicidad
permitida -Ingesta Diaria Admitida IDA-.

Es probablemente el colorante con mejores caractersticas tecnolgicas de entre

los naturales, pero se utiliza cada vez menos debido a su alto precio. Confiere a los
alimentos a los que se aade un color rojo muy agradable, utilizndose en
conservas vegetales y mermeladas (hasta 100 mg/kg), helados, productos crnicos
y lcteos, como el yogur y el queso fresco (20 mg/kg de producto) y bebidas, tanto
alcohlicas como no alcohlicas
VII.CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

CONCLUSIONES:

Se determin la absorbancia de cada una de las muestras.

Se obtuvo la grfica absorbancia versus la longitud de onda y se ubic la

longitud de onda ptima de las muestras.

Se calcul el porcentaje de absorbancia de las muestras y el promedio de los

porcentajes.

RECOMENDACIONES:

En cada prueba de espectrofotmetro se debe limpiar las cubetas

empleadas.
Al momento de calentar la solucin, se debe cuidar la temperatura

Realizar las pesas con la mxima exactitud posible, para as poder obtener
resultados ms ptimos.

VIII.BIBLIOGRAFIA

ALAN FERSHT Estructura y mecanismo de los enzimas Editorial Reverte, 1980

pginas 400 pag.
GOTH, A. (1996) Y HARRIS, DANIEL C. (1992) Farmacologa Medica, 3ra. Ed. ;
Editorial interamericano
http://dspace.espoch.edu.ec/bitstream/handle/123456789/1580/56T
00261.pdf;jsessionid=2CCF912249B7B7B96B5CF9D51D2845E9?seque
nce=1
Norma Tcnica Nacional. Determinacin de cido carmnico (N.T.N. 011.208)
ITINTEC