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PRUEBA DE COMPATIBILIDAD SANGUNEA

(Tcnica salina)
Landsteiner constat que cuando un aglutingeno se pone en contacto con la aglutinina
homloga se produce una aglutinacin.
La compatibilidad sangunea es la posibilidad de mezcla de sangre sin que se produzcan
trastornos, tales como los fenmenos de la lisis o de la aglutinacin.
A causa de este fenmeno biolgico en las transfusiones de sangre no es suficiente con
conocer que la sangre del donante y la del receptor son del mismo grupo, o bien que la
del donante pertenezca al grupo O (cero), sino que es necesario conocer si la
compatibilidad es perfecta, porque ningn otro fenmeno de inmunizacin interfiera. Es
en este sentido por lo que son empleadas las pruebas cruzadas.
Adems de los 6 antgenos del sistema ABO en los eritrocitos humanos, existen
numerosos sistemas de aglutingenos que contienen muchos antgenos individuales en
los eritrocitos (ms de 500.000 millones posibles de fenotipos de grupos sanguneos
conocidos). Para evitar accidentes transfusionales es indispensable tener en cuenta el
sistema Rh adems del ABO.
Del sistema de antgenos Rh es el D, el ms antignico, y el trmino Rh positivo indica
que el individuo presenta aglutingeno D. El individuo Rh negativo no tiene antgeno D y
forma la aglutinina anti-D en contacto con ste.
Las reacciones antgeno-anticuerpo pueden observarse in vitro por:

Hemlisis: la unin antgeno-anticuerpo se traduce en lisis de los eritrocitos en presencia


del complemento (siempre que el anticoagulante empleado no capture los
iones Ca y Mg necesarios para la activacin del complemento).
Aglutinacin: los anticuerpos que reaccionan en medio salino se conocen como
anticuerpos completos o aglutinantes (comnmente tipo IgM).

OBJETIVO: Determinacin de los antigenos del sistema ABO, Rh (D) y su


compatibilidad entre un paciente Donador y un Paciente Receptor.

MATERIAL EQUIPO
*5 Tubos de ensaye. Microcentrfuga.
*6 Pipetas Pasteur. Bao Mara Estufa.
*1Gradilla.
*1 Bulbo.
*Papel Parafilm.

MUESTRA
Muestra de sangre con Anticoagulante EDTA.

REACTIVOS
Antisuero RO-Antiglobulina humana (Poliespecfico Anti IgG C-d)
Para prueba de Coombs.
LABORATORIOS LAFON S.A de C. V.
Fecha de Caducidad: 31-Ene-09
Lote: 406

OBTENIDO DE: www.quimicaclinicauv.blogspot.com 1


Hecho en Mxico
Aspecto: Transparente:
Color: Verde

TCNICA

Lavar los eritrocitos con solucin salina (3 veces).

SALINA RPIDA:
1. Agregar una gota de Eritrocitos Lavados.
2. Diluirlo al 3-5% con solucin salina 0.9%.
3. Agregar 2 gotas de suero.
4. Centrifugar y observar, anotar desprendimiento del botn.

PRUEBA MAYOR PRUEBA MENOR AUTOTESTIGO

G. Rojos del DONADOR G. Rojos del RECEPTOR G. Rojos del RECEPTOR


+ (paciente) (paciente)
Suero del RECEPTOR + +
(paciente) Suero del DONADOR Suero del RECEPTOR
(paciente)

SALINA 37 BAO MARA:


1. Incubar tubos a Bao mara a 37C durante 1 hora (o 20 min).
2. Centirfugar despus de haber pasado el tiempo.
3. Desprender el botn de eritrocitos y observar.
AGLUTINACIN No es compatible.
NO AGLUTINACIN - Lavar 3 veces.

SALINA COOMBS:
1. Con solucin salina 0.9% lavar los eritrocitos de los tubos q no
tuvieron aglutinacin 3 veces.
2. Decantar y agregar 2 gotas de reactivo de Coombs
AGLUTINACIN No es compatible.
NO AGLUTINACIN - Lavar 3 veces.

RESULTADOS

Paciente: Madrigal Mndez Luis Eduardo (B+)


Folio: 009164
Fecha:30/10/07

Donador 1: Torres Avils Jos Ramn (O+)


Folio: 022604
Fecha:31/10/07

Donador 2: Rodrguez Nez Jos Angel (A+)

OBTENIDO DE: www.quimicaclinicauv.blogspot.com 2


Folio: 022605
Fecha:31/10/07

SALINA RPIDA:

M1 m1 M2 m2 Autotestigo
GR de donador 1 + GR del paciente + GR de donador 2 + GR del paciente + GR del paciente +
suero del paciente suero de donador 1 suero del paciente suero de donador 2 suero del paciente
- 4+ 4+ 4+ -

SALINA 37 BAO MARA:

M1 m1 M2 m2 Autotestigo
- 4+ 4+ 4+ -
Compatible No compatible No compatible No compatible Compatible

SALINA COOMBS:
M1 Autotestigo
- -

Compatible Compatible

Por lo tanto se puede decir que el donador 1 (O+) puede donar suero al paciente (B+),
debido a que en el suero no hay anticuerpos de ningn tipo que reaccionen con los
antgenos de los eritrocios del Donador 1. Mientras tanto el Donador 2 no puede donar al
Paciente ni suero ni eritrocitos.

INTERPRETACIN

PRUEBA POSITIVA: Existe una aglutinacin de las clulas sanguneas que indica
la presencia del antgeno A o B. En el suero de Coombs notamos si esta la
precencia de Antgeno D en los eritrocitos. La hemlisis no se debe interpretar
como resultado positivo ya que puede indicar contaminacin del reactivo.

PRUEBA NEGATIVA: La no aglutinacin indica un resultado negativo e indica


que las clulas son negativas para Antgenos del sisitema ABO y D

CONCLUSIN

He concluido que en las transfusiones de sangre no es suficiente con conocer que la


sangre del donante y la del receptor son del mismo grupo, o bien que la del donante
pertenezca al grupo O (cero), sino que es necesario conocer si la compatibilidad es
perfecta, porque ningn otro fenmeno de inmunizacin interfiera. Es en este sentido por
lo que son empleadas las pruebas cruzadas.

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Prctica No. 7
Prueba de compatibilidad sangunea (tcnica albumina)

Introduccin:
La tipificacin de sangre identifica el tipo sanguneo determinando antgenos presentes en los eritrocitos,
detecta aloanticuerpos en contra esos antgenos. As los aloanticuerpos pueden aparecer naturalmente o ser
inducidos y pueden ser dirigidos contra del grupo conocido o a los antgenos de superficie de los eritrocitos.
La prueba de compatibilidad sangunea o cross matching esta formada por la prueba mayor y menor.La
prueba de cruzamiento mayor para los aloanticuerpos, consiste en probar el plasma del receptor contra los
glbulos rojos del donante. Es incompatible cuando se genera una reaccin hemoltica, los eritrocitos del
donante se destruyen por los aloanticuerpos del plasma del receptor. La prueba menor es una prueba para los
aloanticuerpos del plasma del donante en contra los glbulos rojos del receptor. Una incompatibilidad menor
es una causa menos frecuente para causar una reaccin en contra una transfusin, porque el volumen de
plasma del donante es menor y es diluido marcadamente en el receptor. Para llevar a cabo dicho
procedimiento se utilizan diversos reactivos como potencializadores que mejoran la unin de eritrocitos con
algn tipo de anticuerpo. Uno de esos potencializadores es la albmina. La albumina bovina polimerizada es
un reactivo muy utilizado en el laboratorio de inmunohematologia y en centros de bancos de sangre, funciona
como un potencializador que facilita la reaccion de aglutinacin de eritrocitos sensibilizados. Al final de la
prueba se prueban los eritrocitos con el reactivo de Coombs. El principio de la prueba de Coombs fue
descrito por Moreschi en 1908, pero Coombs, Mourant y Race, en 1946, la introdujeron en el estudio de los
grupos sanguneos y anticuerpos, cuando una parte de sangre (suero) fue usada para la inoculacin de
animales para inmunizarlos con protena humana, utilizando el anticuerpo obtenido en la deteccin de los
llamados anticuerpos incompletos. Esta prueba se usa para determinar la presencia de anticuerpos no
aglutinantes en el suero de sujetos sensibilizados a uno o mas antgenos sanguneos. Es til en el estudio del
suero de mujeres con isoinmunizacin materno-fetal y se emplea tambin en otro tipo de pruebas como
identificacin de anticuerpos autoinmunes, deteccin de algunos sistemas sanguneos y pruebas de
compatibilidad sangunea. La prueba indirecta se realiza con eritrocitos normales incubados in Vitro con el
suero de estudio. Durante este periodo, si existe un anticuerpo, este se fija sobre su respectivo determinante
antignico. Una vez fijados, los eritrocitos son igualmente lavados y se agrega el reactivo de Coombs,
produciendo aglutinacin. Una prueba de Coombs indirecta positiva significa que existen anticuerpos libres
en el suero de la persona, los cuales puedan ser igualmente auto-anticuerpos o isoanticuerpos.

Objetivo: Determinacin de los antgenos del sistema ABO, Rh (D) y su compatibilidad entre un paciente
Donador y un Paciente Receptor.

Material y equipo:
5 Tubos de ensaye.
6 Pipetas Pasteur.
1Gradilla.
1 Bulbo.

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Papel Parafilm.
Microcentrfuga.
Bao Mara Estufa.

Material biolgico:
Muestras de sangre de extraccin reciente, recogida con anticoagulante o sin anticoagulante.

Reactivos:
Suero de Coombs*
Albmina bovina

*Suero anti-globulina humana Lafon. Lote 406. Cad: 31/01/09. Color: verde. Aspecto: transparente.
Albumina de bovino polimerizada Interbiol. Lote APO107. Cad: 15/01/09. Color: incoloro. Aspecto: transparente.

Tcnica:

1. Montar prueba mayor 1 y 2, prueba menor 1 y 2, y autotestigo, con el procedimiento ya


anteriormente conocido.
2. Agregar 2 gotas de albmina al 22%.
3. Centrifugar 20 segundos.
4. observar aglutinacin o hemolisis, o no aglutinacin.
5. A los tubos con lecturas negativas, incubar 20 minutos en bao Mara a 37 C.
6. Centrifugar y observar:
Aglutinacin o hemlisis: reportar incompatible.
No aglutinacin: llevar a Coombs.

7. Lavar tres veces, decantar, y quitar el exceso de salina con gasa y agregar 2 gotas de reactivo de
Coombs y centrifugar 20 segundos y observar:
Aglutinacin o hemlisis: reportar incompatible.
No aglutinacin: reportar compatible.

Resultados:
1 PRUEBA MAYOR 1: 2 Gotas de suero del paciente + 1 gota de G.R. al 3-5% del donador 1.
2 PRUEBA MENOR 1: 2 Gotas de suero del donador 1 + 1 gota de G.R. al 3-5% del paciente.
3 PRUEBA MAYOR 2: 2 Gotas de suero del paciente + 1 gota de G.R. al 3-5% del donador 2.
4 PRUEBA MENOR 2: 2 Gotas de suero del donador 2 + 1 gota de G.R. al 3-5% del paciente.
5 AUTOTESTIGO: 2 Gotas de suero del paciente + 1 gota de G.R. al 3-5% del paciente.

M1 m1 M2 m2 Autotestigo
Con albmina. - - - - -
Despus de incubacin a 37 C. - - - - -
Despus de Coombs. - - - - -
Despus de validacin con glbulos positivos. + + + + +

Interpretacin:
Prueba positiva: Alutinacin o hemolisis. Indica no compatibilidad.
Prueba negativa:No aglutinacin. Indica compatibilidad.

Esquemas:

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Conclusin:
Concluyo que la prueba de compatibilidad sangunea en su modalidad con albmina bovina ofrece mucha
ventaja al ser, al igual que otros reactivos, un potencializador de la reaccin antgeno-anticuerpo. Esto
permite que el operador o realizador de la prueba tenga mayor confianza y certeza en los resultados que
obtenga.

PRACTICA No. 8

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PRUEBA DE COMPATIBILIDAD SANGUINEA PRUEBA DE LISS.

FUNDAMENTO:

LISS es utilizado para reducir la fuerza inica del medio de reaccin en los procedimientos
de deteccin e identificacin de anticuerpos y en las pruebas de compatibilidad. La
presencia de este reactivo refuerza la interaccin antgeno - anticuerpo durante la
incubacin.

GENERALIDADES:
El uso de solucin salina de baja fuerza inica fue descrito inicialmente en 1964 por
Hughes-Jones y col. y Elliot y col., pero en ese tiempo su uso era limitado ya que la
concentracin molar obtenida provocaba la hemlisis de los eritrocitos suspendidos.

En 1974, Low y Messeter describieron el uso rutinario de la solucin Liss de 0,03 M que
lograba reducir el tiempo de incubacin y no presentaba tendencia a la hemlisis al ser
suspendidos en salina a baja fuerza inica, restableciendo la presin osmtica de la
solucin mediante la adicin de glicina.
Las soluciones de baja fuerza inica son actualmente las ms utilizadas en
inmunohematologa, provocando un aumento en la velocidad de asociacin entre antgenos
y anticuerpos permitiendo as acortar el tiempo de incubacin de 60 minutos a 10-15
minutos, sin sacrificar la sensibilidad de las mismas y sin costos elevados.Se ha observado
que las reacciones antgeno-anticuerpo se ven potenciadas al reducir la fuerza inica del
medio de reaccin.

La fuerza inica es uno de los factores ms importantes que determinan la tasa y la


cantidad de captacin de anticuerpos por parte de los eritrocitos. El uso de medios de
reaccin de baja fuerza inica permite disminuir el tiempo de incubacin y potenciar las
reacciones de los anticuerpos sin incrementar las reacciones inespecficas.

Los iones Na+ y Cl-, presentes en la solucin salina fisiolgica, se agrupan alrededor de las
molculas de antgeno y anticuerpo neutralizando sus cargas opuestas, lo cual dificulta la
unin entre ellos. Este efecto se reduce utilizando soluciones de baja fuerza inica y
disminuyendo de esta manera la incubacin de las pruebas.

En esta etapa de sensibilizacin, las posibilidades de asociacin pueden incrementarse


mediante agitacin, centrifugacin y/o variacin de la concentracin del anticuerpo.

Despus de que el anticuerpo se ha fijado al antgeno, los eritrocitos sensibilizados deben


unirse para dar lugar a la aglutinacin visible; esta red tambin solidifica y estabiliza la
reaccin.

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En esta etapa la reaccin depende de factores como las caractersticas del anticuerpo,
localizacin en la membrana y nmero de sitios antignicos, fuerzas que mantienen la
distancia entre los eritrocitos.

Las caractersticas del anticuerpo que deben considerarse son el tamao del anticuerpo
involucrado y el nmero de sitios de combinacin con el antgeno. Los anticuerpos IgM
pueden establecer puentes entre los eritrocitos y aglutinarlos espontneamente en solucin
salina, mientras que los IgG no, ya que las IgM, pentamricas poseen 10 sitios de
combinacin con el antgeno y las IgG dmeros slo dos sitios.

Los eritrocitos tienen una carga neta negativa en su superficie, su interaccin con los iones
del medio altera esta carga y producen una carga neta crtica denominada potencial zeta, y
la reduccin de dicha carga permite que los eritrocitos se aproximen lo suficiente para que
sean aglutinados por medio de los IgG que los sensibilizaron.

Las soluciones de baja fuerza ionica empleadas en banco de sangre tienen un pH entre 6.5
7.0, se recomienda una osmolalidad de 270 305 mosm/kg y una conductividad de 3.7
mm/cm. El control diario implica el examen de su apariencia fsica: ausencia de turbidez,
particulas o sedimento, as como, corroborar la capacidad para generar hemlisis,
crenacion o prueba de coombs positiva en eritrocitos normales. Cada lote nuevo se valora
mediante el rastreo de un anticuerpo ya sea un anti- D, un anti- jk, anti- fy o anti- kell
diluido; se compara su capacidad de deteccin contra un medio salino normal incubando
10min a 37C, en LISS debe poder rastrearse un anticuerpo, en tanto que en medio salino
no.

MATERIAL Y EQUIPO:

Material Cantidad
10 Tubos de ensayo de 12 x 75
1 Gradilla
10 Pipetas pasteur
1 Bulbo
1 Marcador
1 Microcentrfuga
1 Bao Mara

MATERIAL BIOLOGICO:

Glbulos rojos lavados al 3 - 5%


Suero

REACTIVOS:

Reactivo de LISS
Reactivo de Coombs

TECNICA:
1.- Lavar los eritrocitos:

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Separar el suero del paquete de glbulos rojos.
Agregar cierta cantidad de eritrocitos a un tubo de ensayo y
agregarle solucin salina
Centrifugar y decantar
Repetir este proceso 3 veces

2.- Realizar la Prueba de LISS:

Enumerar los tubos


Poner dos gotas de LISS en cada tubo, agregar una gota de eritrocitos lavados y al 3 -
5%, segn el nmero de tubo correspondiente,
Mezclar y centrifugar un minuto, decantar el sobrenadante y con la ayuda de una gasa
limpiar el exceso del reactivo.
Poner nuevamente 2 gota de LISS, resuspender por agitacin, agregar 2 gotas de suero
problema, mezclar, incubar 15 minutos a 37 C. centrifugar 30 seg. A 1000 R.P.M.
Anotar los resultados.

3.- A las pruebas negativas realizar Coombs:

Lavar 3 veces las clulas, agregar suero de Coombs, centrifugar 30 seg.


Leer aglutinaciones y anotar resultados.

REACTIVOS UTILIZADOS:

REACTIVO MARCA FECHA DE ASPECTO COLOR LOTE


CADUCIDAD
Suero Lafon 31/ 01/ 2009 Transparente Verde 406
Antiglobuina
humana
LISS Casero 1 ao Transparente Transpar
realizado ente
en CMN ----------
SIGLO
XXI

PACIENTE: ASCANIO MENDEZ JOSUE O (+)


DONADOR 1: GARCIA CARBAJAL OSCAR O (+)
DONADOR 2: GARCIA SUAREZ ORLANDO A (+)

RESULTADOS:
Tubo Resultado
M1 NEGATIVO
m1 NEGATIVO
M2 POSITIVO
M2 NEGATIVO
AUTOTES. NEGATIVO

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS

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La hemlisis o la aglutinacin representan un resultado positivo e indican la presencia de
una reaccin antgeno-anticuerpo. Los resultados negativos no se vera aglutinacin o
hemolisis.

ESQUEMAS:

CONCLUSIONES:

Concluyo que la prueba de compatibilidad sangunea en su modalidad con liss ofrece mucha ventaja al ser, al
igual que otros reactivos, un potencializador de la reaccin antgeno-anticuerpo. Esto permite que el operador
o realizador de la prueba tenga mayor confianza y certeza en los resultados que obtenga.

PRACTICA 9
INMUNOHEMATOLOGIA

DETERMINACION DE COOMBS DIRECTO

INTRODUCCION:
PRUEBA DE COOMBS DIRECTA

El examen de Coombs directo se utiliza para detectar autoanticuerpos contra los propios
glbulos rojos (GR) de un individuo. Es una prueba que sirve para demostrar el
revestimiento de los eritrocitos in vivo, (mientras los eritrocitos estn circulando en el
individuo). La prueba se realiza agregando directamente el reactivo de Coombs a los
eritrocitos, previamente lavados para eliminar otras protenas no fijadas a el; una prueba
directa positiva significa que la relacin antgeno-anticuerpo ocurri in vivo, es decir que
la fijacin del anticuerpo sobre el antgeno se realizo en el organismo del individuo en
estudio.

Las indicaciones principales de esta prueba son: diagnostico de enfermedades hemolticas,


ictericia o anomalas en la apariencia de los glbulos rojos bajo el microscopio, ya que
estos anticuerpos algunas veces destruyen los glbulos rojos y causan anemia; para
investigar reacciones en transfusiones. Para investigar la induccin de drogas en clulas
rojas sensibilizadas, medicamentos (por ejemplo, quinidina, metildopa, procainamida y
otros) que pueden llevar a la produccin de estos anticuerpos.

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OBJETIVO: Determinar la presencia de anticuerpos en la superficie de los glbulos rojos
del individuo.

MATERIAL

10 Tubos de 12/75
10 Pipetas Pasteur
1 Gradilla.
1 Bulbo.
Papel Parafilm.
Microcentrfuga.
Bao Mara a 37C.

MUESTRA BIOLOGICA:

Eritrocitos lavados de (3-5%) del donador o paciente.


REACTIVO:

Suero de Coombs*
*Suero anti-globulina humana Lafon. Lote 406 Cad: 31/01/09. Color: verde. Aspecto: transparente.

TECNICA:

Colocar en un tubo de ensaye dos gotas de suero de Coombs mas una gota de globulos
rojos (3-5%).
Centrifugar a 1000 rpm durante 20 seg.
Desprender el boton suavemente y buscar la presencia de aglutinacion.
Rotular y enumerar 8 tubos de ensayes con las diferentes diluciones (,,1/8...)
Enumerar 8 tubos mas del 1 al 8.
Agregar a cada tubo de las diluciones 10 gotas de solucion salina mas 10 gotas de suero de
Coombs.
Colocar Al primer tubo de la dilucion 1 gota de globulos rojos (3-5%), mezclar
completamente y agregar al tubo #1
Centrifugar todos los tubos a 1000 rpm durante 20 seg.

LECTURA:

Aglutina.- Prueba de Coombs directa es positiva.


No aglutina.- Prueba de Coombs directa es negativa.

ESQUEMAS y RESULTADOS:
DILUCIONES
positiva
positiva
1/8 positiva
1/16 negativa
1/32 negativa
1/64 negativa
1/128 negativa
1/256 negativa
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CONCLUCION:

He concluido que la prueba de Coombs directa es una prueba que se utiliza para medir la
presencia de anticuerpos en la superficie de los glbulos rojos que se encuentran
circulando en el paciente y se realiza para investigar reacciones en transfusiones adems
sirve para la determinacin de anemia hemoltica autoinmune entre otras afecciones.

Practica 10
IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS IRREGULARES

Fundamento:
Los anticuerpos del sistema ABO aparecen una vez que el individuo entra en contacto con
el medio ambiente y en el cual se encuentran microorganismos como algunas bacterias
coliformes que contienen sustancias qumicas en su estructura parecidas a las de este
sistema. Por anticuerpos regulares debemos identificar a los que existen en todos los
individuos y que stos tendrn durante toda su vida.

Los anticuerpos irregulares son los que no estn de esa manera, aunque en el caso de los
naturales no se conoce a ciencia cierta qu o cmo se induce su produccin. Los adquiridos
se conocen tambin como inmunes y son el resultado de la exposicin a antgenos
desconocidos por el individuo al momento de la transfusin o en las mujeres por el
embarazo; estos anticuerpos son dirigidos contra antgenos de sistemas diferentes al ABO.

Los anticuerpos naturales regulares son preferentemente inmunoglobulinas M, las cuales


fijan de manera tan eficiente el complemento que pueden provocar lisis intravascular y
ocasionar insuficiencia renal o incluso la muerte del paciente. Los anticuerpos adquiridos o
inmunes son generalmente inmunoglobulinas G, las cuales producen hemlisis
extravascular en el bazo o en el hgado mediante fagocitosis del complejo eritrocito ms
anticuerpo.

Los aloanticuerpos irregulares (adquiridos) ms comunes en nuestra poblacin son los que
involucran a los sistemas MNSs, P1, Kidd (Jka, Jkb), Duffy (Fya, Fyb), Kell, Lewis y
Diego.

OBJETIVO: identificacin del anticuerpo irregular a travs de las diferentes tcnicas.



EQUIPO
1. Microcentrfuga.
2. Bao Mara Estufa.
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MATERIAL
10 Tubos de ensaye.
10 Pipetas Pasteur.
1Gradilla.
1 Bulbo.
Papel Parafim.

MATERIAL BIOLOGICO:
Glbulos rojos lavados al 3 - 5%
Suero

REACTIVOS
Reactivos:
1. Suero de Coombs*
2. Albmina bovina
3. SOLUCION SALINA
4. SOLUCION DE LISS

TCNICA SOLUCION SALINA

Lavar los eritrocitos con solucin salina (3 veces).


SALINA RPIDA:
Agregar una gota de Eritrocitos Lavados.
Dilurlo al 3-5% con solucin salina 0.9%.
Agregar 2 gotas de suero.
Centrifugar y observar, anotar desprendimiento del botn.
SALINA 37 BAO MARA:
1) Incubar tubos a Bao mara a 37C durante 1 hora (o 20 min).
2) Centirfugar despus de haber pasado el tiempo.
3) Desprender el botn de eritrocitos y observar.
AGLUTINACIN No es compatible.
NO AGLUTINACIN - Lavar 3 veces.

SALINA COOMBS:
1) Con solucin salina 0.9% lavar los eritrocitos de los tubos q no
tuvieron aglutinacin 3 veces.
2) Decantar y agregar 2 gotas de reactivo de Coombs
AGLUTINACIN No es compatible.
NO AGLUTINACIN - Lavar 3 veces.

TECNICA LISS

1. Poner dos gotas de LISS en cada tubo, agregar una gota de eritrocitos lavados y al 3
- 5%, segn el nmero de tubo correspondiente,
2. Mezclar y centrifugar un minuto, decantar el sobrenadante y con la ayuda de una
gasa limpiar el exceso del reactivo.

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3. Poner nuevamente 2 gota de LISS, resuspender por agitacin, agregar 2 gotas de
suero problema, mezclar, incubar 15 minutos a 37 C. centrifugar 30 seg. A 1000
R.P.M.
4. Anotar los resultados.

A las pruebas negativas realizar Coombs:

1. Lavar 3 veces las clulas, agregar suero de Coombs, centrifugar 30 seg.


2. Leer aglutinaciones y anotar resultados.

TECNICA ALBUMINA BOVINA


8. Agregar 2 gotas de albmina al 22%.
9. Centrifugar 20 segundos.
10. observar aglutinacin o hemolisis, o no aglutinacin.
11. A los tubos con lecturas negativas, incubar 20 minutos en bao Mara a 37 C.
12. Centrifugar y observar:
Aglutinacin o hemlisis: reportar incompatible.
No aglutinacin: llevar a Coombs.

13. Lavar tres veces, decantar, y quitar el exceso de salina con gasa y agregar 2 gotas
de reactivo de Coombs y centrifugar 20 segundos y observar:
Aglutinacin o hemlisis: reportar incompatible.
No aglutinacin: reportar compatible.

Resultados
ANTICUERPO IRREGULAR: Anticuerpo c.

Interpretacin
Estos anticuerpos son generalmente inmunoglobulinas tipo M y ocasionalmente tipo G, y
debido a esa temperatura de reaccin carecen de importancia clnica salvo que su reaccin
ocurra tambin a 37 C, su importancia radica en pacientes que sern intervenido a 22 c
como es el caso de operacin de corazn.

Los llamados anticuerpos calientes tienen una temperatura ptima de reaccin a 37 C, a Estos
anticuerpos tienen una relevante importancia clnica ya que se les asocia con reacciones transfusionales
de intensidad moderada a severa, que pueden ocasionar la muerte.

Esquemas:

CONCLUSION:
He concluido que es importante determinar los anticuerpos irregulares ya que estos
anticuerpos tienen una relevante importancia clnica ya que se les asocia con reacciones transfusionales
de intensidad moderada a severa.

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