PRCTICA 2: ACTIVIDAD ENZIMTICA

PRIMERA PARTE: CATALASA

I. FUNDAMENTO

Las enzimas son molculas proteicas cuya funcin es acelerar (catalizar)

reacciones qumicas que ocurren dentro de la clula y que en ausencia de ellas
no se llevaran a cabo o de lo contrario tomaran muchsimo tiempo. Las
enzimas son especficas para sus sustratos, los cuales quedan unidos
complementariamente al sitio de unin de la enzima donde son modificados
enzimticamente, liberndose al final de la reaccin los productos respectivos.

Existen diversos factores que influyen en la actividad enzimtica: Temperatura,

pH, Concentracin de la enzima, Concentracin del sustrato, Inhibidores.

Las enzimas son clasificadas segn sus funciones o tipo de reacciones

1. Oxidorreductasas: Transfieren electrones (iones hidronios o tomos de

H)
2. Transferasas: Transfieren Grupos.
3. Hidrolasas: Reaccin de hidrlisis (transfiere una molcula de agua)
4. Liasa: Adiciona grupos a dobles enlaces o forma doble enlaces por
remocin de grupos.
5. Isomerasas: transfiere grupos dentro de la de molculas para obtener
formas isomericas.
6. Ligasas: forma enlaces C-C, C-S, C-O y C-N por reacciones de
condensacin acoplada a ruptura de ATP.
La mayora de las enzimas cataliza la transferencia de electrones, tomos o
grupos funcionales. Las enzimas se clasifican en base a cdigos y su nombre
es asignado de acuerdo tipo de reaccin

La catalasa es una enzima que se encuentra en las clulas de los tejidos

animales y vegetales. La funcin de esta enzima en los tejidos es necesaria
porque durante el metabolismo celular, se forma una molcula txica que es el
perxido de hidrgeno, H2O2 (agua oxigenada). Esta enzima, la catalasa, lo
descompone en agua y oxgeno, por lo que se soluciona el problema. La
reaccin de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

II. OBJETIVO.
II.1. Detectar la presencia de la enzima catalasa en un tejido animal y
vegetal.
III. MATERIALES

-Gradillas

- Pipetas-tubos de ensayo

- Hgado de pollo, cualquier rgano vegetal

- Agua oxigenada (H2O2)

IV. MTODOS
IV.1. Poner en una gradilla tres tubos de ensayo y enumerados.
IV.2. En el tubo de ensayo N1 y 2, poner un pequeo trozo de hgado y
en el N3 dos pequeos trozos.
IV.3. Agregar 4ml de H2O2 en el tubo N1 y en los tubos 2y3 solo 2ml en
cada uno.
IV.4. Aparecern burbujas al agregar el H2O2 observar las cantidades que
salen en cada tubo y compararlas.
V. RESULTADO

2
SEGUNDA PARTE: HIDROLISIS DE LA AMILASA

I. FUNDAMENTO

La amilasa o ptialina, es una enzima presente en la saliva. Esta enzima acta

sobre el polisacrido almidn, hidrolizando el enlace O-glicosdico, por lo que el
almidn se terminar por transformar en unidades de glucosa. Es importante
que recuerdes las reacciones caractersticas de glcidos para comprender esta
experiencia.

II. OBJETIVOS.

Comprobar que slo bajo ciertas condiciones las enzimas funcionan

ptimamente catalizando una reaccin enzimtica con su sustrato.

III. MATERIALES

-Tubos de ensayo

- Bao mara

-Gradillas

- Vaso de precipitados

-Solucin diluida de almidn glucosa y sacarosa

- Lugol

IV. MTODOS

1.Poner en una gradilla cinco tubos de ensayo, numerados del 1 al 5.

2.Proceder a llenar los tubos como lo indica el cuadro N1.

3.Agregar 2 gotas de Lugol a cada tubo.

 4.Luego calentar en bao mara cada tubo.

5.Aparecern diferencias entre los 5 tubos dependiendo de si hay o no

almidn en el medio. Recuerda: reaccin positiva, color violeta, hay
almidn. Reaccin negativa, no cambia color, no hay almidn.

CUADRO N1

TUBO N1 TUBO N2 TUBO N3 TUBO N4 TUBO N5

5ml de 5ml de 5 ml de 5 ml de 5 ml de
almidn almidn glucosa fructosa sacarosa
5 ml de agua 5 ml de la 5 ml de la 5 ml de la 5 ml de la
enzima enzima enzima enzima
2 gota de 2 gota de 2 gota de 2 gota de 2 gota de
Lugol Lugol Lugol Lugol Lugol

Nota: Para ayudarte y formar ms saliva, piensa en un limn o en algo que te

apetezca mucho comer... As favoreces que se forme ms saliva.

V. RESULTADOS

5
3 4
2
1
 VI. QUESTIONARIO de ambas partes

1. Qu tipo de enzimas corresponden las enzimas estudiadas, por qu?

En la primera parte la del hgado encontramos la catalasa y es estudiada

porque cataliza la descomposicin del perxido de hidrgeno (H202) en
oxgeno y agua.

En la segunda parte encontramos amilasa o ptialina porque son enzimas

que hidroliza el almidn parcialmente en la boca.

2. En qu parte de las clulas encontramos la enzima catalasa y cul es

la funcin de dicha enzima?

Los encontramos en los peroxisomas.

La catalasa es una enzima perteneciente a la categora de las

oxidorreductasas que cataliza la descomposicin del perxido de hidrgeno
(H202) en oxgeno y agua.

3. Qu factores, adems de la temperatura, podran afectar la actividad

de una enzima?

El pH

Concentracin del sustrato.

Inhibidores

Mecanismos reguladores

Cofactores y coenzimas