MANIPULAO DO AUTOCLAVE, DESINFEO E EESTERILIZACIN DO

LABORATRIO E SEUS MATERIAIS.

INTRODUO.

A esterilizao um processo essencial para o funcionamento de

um hospital, no qual devem ser utilizados todos os instrumentos cirrgicos,
implante e muitos outros dispositivos absolutamente esterilizados.
A dessecao e a congelao eliminam muitas espcies de
bactrias, mas outras simplesmente permanecem em estado vegetativo. O
calor seco ou mido elimina todas as bactrias combinando adequadamente
fatores como a temperatura que se submetem e o tempo de exposio.
Pode-se esterilizar por calor seco em estufas a mais de 160 C durante meia
hora, ou por calor mido em autoclaves a 120 C durante 20 minutos e a
presso superior atmosfrica.
A ebulio a 100 C no elimina todos os grmenes patognicos
(entre os que no s esto includas as bactrias seno tambm vrus e
fermentos).
Outro mdio habitual de esterilizao, utilizado para objetos no
resistentes ao calor, so os meios qumicos: o cido fnico, iniciador de era-a
da antissepsia (veja-se Fenol), o cido ciandrico (veja-se Cianeto de
hidrognio), o xido de etileno, a clorexidina, os derivados mercurializes, os
derivados do lodo (especialmente a povidona iodada) e muitas outras
substncias. O lcool etlico no produz esterilizao completa. Outro mdio de
esterilizao atual so as radiaes ionizantes (beta, gama).
A esterilizao implica a destruio, de todos os organismos
incluindo esporas, e a desinfeo supe a destruio dos microrganismos
vegetativos que podem causar doenas, mas a desinfeo no mata
necessariamente esporas.
Os mtodos mais usados normalmente nos laboratrios
microbiolgicos so:
Calor vermelho (flameado).
Calor seco (ar quente).
Vapor a presso (calor mido)
Vapor fluente (tyndallizacin)
 Calor vermelho: Os instrumentos tais como as alas e arames de
semeia e varetas secas se esterilizam esquentando na chama do isqueiro
Bunsen at que se ponha vermelho.
Calor seco: Aplica-se em um forno esquentado eletricamente que se
controla mediante termstatos e que esto previstos de um grande ventilador
circulante que assegura a uniformidade da temperatura em todas as partes do
contedo. As equipes modernas podem levar a temperatura ao nvel requerido,
este dispositivo salvaguarda e protege ao pessoal de queimaduras acidentais.
O material que pode esterilizar-se por este mtodo inclui placas petri, frascos,
pipetas de vidro e objetos de metal. O ar no bom motorista do calor, pelo
que as estufas devem ser carregadas sem apertar o contedo, de forma que
fiquem abundantes espaos para permitir que circule o ar quente. Quando se
calculam os tempos de funcionamento para a equipe de esterilizao por ar
quente, devem ser considerados trs perodos.
O perodo de asenso de temperatura, que o tempo necessrio
para que toda a carga atinja a temperatura de esterilizao; pode levar ao redor
de uma hora.
Os perodos de manuteno s diferentes temperaturas de
esterilizao recomendadas pelo
Medical Research Coucil que so 160C durante 45 minutos, 170C
durante 18 minutos, 180C
Durante 7 minutos e 190C durante 1 minutos.
O perodo de esfriamento, que se realiza gradualmente para prevenir
o rompimento do material de vidro como consequncia de um descenso
demasiado rpido de temperatura; este perodo leva duas horas.
Vapor a presso: Realiza-se mediante a esterilizao em autoclave.
As bactrias matam-se mais facilmente pelo calor mido que por calor seco. O
vapor mata as bactrias por desnaturalizao de protenas. Uma condio de
segurana convinda para a esterilizao utilizar vapor a 121C durante 15 a
20 minutos. O ar tem influncia importante na eficcia da esterilizao, porque
sua presena modifica o relacionamento presso/temperatura, ademais, a
existncia de sacas de ar impedir a penetrao do vapor, deve de eliminar-se
todo o ar primeiro todo o ar que rodeia e penetra na carga antes de que possa
comear a esterilizao por vapor.
 Autoclave.
Uma boa esterilizao por autoclave depende da eliminao de todo
o ar da cmera e a carga, dos materiais que vo a esterilizar-se devem ser
colocado sem se apertar. Os artigos limpos podem ser posto em cestas de
arame, mas o material contaminado deve estar em um recipiente de fundo
slido em uma altura no maior a 8 cm. Devem ser deixados grandes espaos
de ar ao redor da cada recipiente e nenhum deve estar fechado. Existem dois
tipos de
Autoclave:
O tipo pote de presso.
O de deslocao pela gravidade.
Por razes pratica s trataremos o tipo pote de presso j que o
que temos no laboratrio.
O tipo pote de presso o mais comum, um aparelho para gua
fervendo a presso. Tem uma cmera vertical de metal prevista de uma tampa
metlica forte que se aperta e fecha hermeticamente mediante um aro de
borracha. Dispem-se na tampa uma torneira para a sada do ar e o vapor, um
indicador de presso e uma vlvula de segurana. A gua do fundo da
autoclave esquenta-se mediante isqueiros de gs exteriores, um aquecedor
eltrico de imerso ou uma serpentina de vapor.

Instrues de funcionamento.
Deve haver gua suficiente dentro da cmera. Carrega-se a
autoclave e aperta-se a tampa mantendo a torneira de baixa aberta. Ajusta-se
seguidamente a vlvula de segurana temperatura requerida e liga-se asa
fonte de calor. Quando a gua ferva, fluir o vapor pela torneira de baixar,
arrastando com ele o ar quente existente na cmera. Deixa-se que saiam
livremente o ar e o vapor at que se tenha eliminado todo o ar. Quando se
tenha atingido esta fase, se fecha a torneira de baixar ar-vapor. A presso do
vapor eleva-se na cmera at que a presso desejada, geralmente 1,054
kg/cm2, se atinge e flui vapor pela vlvula de segurana.
Quando a carga atingiu a temperatura requerida se mantm a
presso de 15 a 20 minuto.
 Ao termino do perodo de esterilizao, desliga-se o aquecedor e
deixa-se que a autoclave se esfrie. Abre-se a torneira de baixar muito
lentamente uma vez que o indicador chegou a zero, se deixa que o material se
enfre at que tenha uma temperatura qual possa ser apanhado com as
mos. Nunca deve ser deixado arrefecer a autoclave por muito tempo, j se
no se abre se forma um vazio, o qual pode romper o material estril.
Bennet elaborou uma fita indicadora, a qual se coloca nos materiais,
e segundo a tonalidade de fita, se sabe se foi uma boa ou m esterilizao.
Ademais, quando as autoclaves se descarregam, os operrios devem levar
viseiras protetoras de toda a cara do tipo que recubra a pele da queixo e da
garganta. Tambm devem usar luvas de proteo trmica.
Tyndallizacin: Utilizar um vaporizador de Koch, que uma caixa
metlica no fundo da qual ferve a gua mediante um isqueiro de gs ou uma
serpentina de vapor. Utiliza-se este mtodo para esterilizar meios de cultivo
que podem ser alterado por exposio a temperaturas mais elevadas. Estes
mdios se vaporizam durante 30-45 minutos ao dia durante trs dias
consecutivos.
A primeira vez matam-se as bactrias vegetativas; qualquer espora
que sobreviva germinar no mdio nutritivo durante toda a noite, dando local a
formas vegetativas que sero morridas durante a segunda e terceira
vaporizaes.
DESINFEO.
Para isto pode ser usado uma grande variedade de substncias
qumicas e todas elas recebem o nome comum de biocidas. Os efeitos do
tempo, temperatura, ph e a natureza fsica e qumica do artigo que se vai
desinfetar e a matria orgnica presente, no so com frequncias totalmente
consideradas. Os tipos de desinfetantes so muitos, e sua efetividade depende
da sensibilidade dos microrganismos, os mais sensveis so as bactrias
vegetativas, os fungos e os vrus que contm lipdeos. As microbactrias e os
vrus que no contm lipdeos so menos sensveis e as esporas so pelo
geral resistente. Na eleio do desinfetante devem ser tomadas em conta
algumas consideraes a cerca de sua toxicidade e dos efeitos prejudiciais que
podem ter sobre a pele, olhos e vias respiratrias. Os desinfetantes mais
utilizados normalmente nos trabalhos de laboratrio so os fenoles e os
hipocloritos. Os aldedos tm uma aplicao limitada e o lcool e as misturas
de lcoois so menos populares, embora meream maior ateno.
Neste quadro resumem-se as principais caratersticas dos
desinfetantes, e depende do pesquisador qual utilizar, segundo lhe convenha.

Estufa de Secagem
Estufas para laboratrios tm objetivo de acumular e conter o calor
ou o resfriamento no seu interior, mantendo assim a temperatura
adequada para os contedos nelas guardadas, por isso de extrema
importncia em qualquer laboratrio. As estufas contm um termmetro do
lado de fora que mantm a temperatura adequada sem alteraes
involuntrias.
Popularmente a estufa conhecida como um aparelho eltrico
utilizado para secagem de substancias slida, evaporao lentas de lquido,
armazenagem de substancias liquidas com temperaturas baixas, secagem de
vidrarias, etc. Alm de laboratrios, estufas tambm so encontradas em
consultrios mdicos, odontolgicos, farmcia de manipulao, clinica de
esttica entre outros. Para cada ambiente tem uma estufa prpria e do
tamanho adequada para o seu uso.

Estufa de esterilizao
Existem alguns tipos de estufas de esterilizao, cada uma com
caractersticas especficas voltadas a determinadas reas. A funo deste
equipamento fazer a esterilizao e secagem de materiais cirrgicos,
mdicos e odontolgicos, por meio do calor seco. Neste tipo de assepsia
promove a eliminao da vida microbiana por meio de uma oxidao, em que
acontece a desidratao das clulas.