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Les microfilaments (filaments dactine)

a) Constitution protique, assemblage et structure. - Constitution :

Les microfilaments sont constitus de monomres dactine qui reprsentent, selon le type cellulaire, entre 1 10% de la quantit totale des protines. Dans la cellule ils se prsentent soit sous forme de monomre globulaire (actine G) soit sous forme de polymre (actine F) car ils ont un aspect filamenteux. On distingue 3 classes : actine, prsente dans les cellules musculaires (muscles squelettiques stris et muscles lisses) et actine dans les autres cellules

Assemblage et structure :
Lactine G se polymrise en prsence dATP (li lactine) et le filament form est une structure polaire. Il a une extrmit croissance rapide (nomm e + ) puisque environ 1000 monomres peuvent tre ajouts par seconde et uneextrmit croissance lente, voire trs lente, (nomme ). A noter que lATP nest pas indispensable la polymrisation mais il est requis lors de la dpolarisation et converti en ADP. De nombreuses protines (ARP2/3= Actin Related Proteins ; CapZ) initient la polymrisation alors que la gelsoline peut crer une scission du filament et viter la repolymrisation. Un microfilament est constitu d'une double hlice d'actine polymrise .

A noter que les filaments d'actine sont associs en microfilaments dans les cellules non musculaires, en myofilaments dans les cellules musculaires.

b) Localisati on cellulaire et protines associes.

Ils sont localiss dans de nombreux espaces intracellulair es o ils sont associs diffrents types de protines (plusieurs dizaines sont connues) qui leur confrent des proprits structurelles et fonctionnelle s. Selon leur localisation intracellulair e et le type de protines associes on dcrit trois modes dorganisatio n spatiale: faisceaux parallles, faisceaux contractiles et mailles. * Dans les microvillosits(structures situes au ple apical des cellules de lpithlium intestinal et qui permettent daugmenter la surface dabsorption des nutriments) ils sorganisent en faisceaux parallles maintenus par une protine intercalaire (fimbrine). * Dans les jonctions adhrentes, lanneau contractile (au cours de la cytodirse), les fibres de tension des points focaux dadhrence et les sarcomres, ils sorganisent en faisceaux contractiles et ils sont maintenus par une protine intercalaire l a -actinine * Dans les lamellipodes etpseudopodes (protrusion de la membrane plasmique) ainsi que dans le rseau situ sous la membrane plasmique (maintien de la membrane) ils sorganisent en mailles grce aux interconnexions avec la filamine.

c) Fonctions
Une des fonctions majeures des microfilaments, comme celles des microtubules, est dassurer les mouvements cellulaires.

* Migration cellulaire :

La migration des neutrophiles vers une source dinflammation sollicite une rorganisation des microfilaments (polymrisation de nouveaux filaments) pour le franchissement de la barrire endothliale et leur dplacement au sein du tissu conjonctif.

* Transport de vsicules :
Les vsicules de scrtion sont essentiellement transportes le long des microtubules. Cependant, dans la phase finale, le transport de la vsicule est assur par les microfilaments grce une protine motrice, la myosine I, qui leur est associe. Ces moteurs molculaires reprsents par les dynines, kinsines et myosines utilisent les filaments du cytosquelette comme cibles le long desquels ils peuvent se mouvoir. Ce sont des enzymes ATPases qui convertissent l'nergie libre par l'hydrolyse de l'ATP en nergie mcanique pour produire des mouvements.

* Cicatrisation :
Cest un phnomne complexe qui met en jeu les fibroblastes et les kratinocytes. Une phase importante de la cicatrisation va ncessiter : - une adhrence des fibroblastes la matrice extracellulaire - une traction des fibroblastes sur la matrice pour diminuer la surface de la plaie. Cette dernire tape est possible grce aux faisceaux contractiles dactine qui sont situs aux points focaux dadhrence. Des protines cytoplasmiques (vinculine, taline et a actinine) assurent le lien entre les microfilaments et les molcules dadhrence (intgrines). Il ne faut pas confondre les points focaux avec leshmidesmosomes car ils ont la mme localisation membranaire (ple basal de la cellule pithliale). Ils diffrent essentiellement par le type de filaments qui leur est associ, il sagit dactine pour les points focaux et de filaments intermdiaires pour les hmidesmosomes.

* Cytodirse :
Cest la dernire tape de la mitose qui permet la scission de la cellule mre en deux cellules filles. Ce phnomne physique est ralis grce la formation dun anneau contractile de filaments et de la myosine (protine associe) .

* Sgrgation tissulaire au cours de lembryogense : formation du tube neural :

La contraction progressive des filaments dactine des ceintures dadhrence ainsi que des expressions diffrentielles de molcules dadhrence participent la formation de la gouttire neurale, puis du tube neural.

* Phagocytose :
Lorsquun dchet cellulaire est repr et ancr la surface du globule blanc, la polymrisation de lactine commence. Elle permet la formation dextensions membranaires qui enrobent progressivement le dchet.

* Transport viral :
Les virus pntrent dans la cellule soit par fusion de leur enveloppe avec la membrane plasmique soit par une voie dendocytose rcepteur dpendante. Pour beaucoup dentre eux les tapes prcoces de transport vers le centre de la cellule (principalement vers le noyau) impliquent le rseau dactine. Les tapes ultrieures requirent les microtubules.

* Cohsion tissulaire :
Dans les cellules pithliales au niveau des jonctions tanches (zonula adherens), les microfilaments sont relis au complexe de catnines ( a et b ) par lintermdiaire de l a -actinine. En interagissant avec la myosine II ils forment des faisceaux contractiles qui sont dautant plus nombreux quil y a de jonctions intercellulaires (jonctions tanches). Lensemble des faisceaux constituant la ceinture dadhrence. Chaque faisceau de microfilaments tant reli aux cadhrines elles permettent le pontage entre chaque ceinture dadhrence de cellules adjacentes. Lensemble forme un rseau intercellulaire qui permet de rsister aux stress mcaniques et par voie de consquence dassurer la cohsion tissulaire.

* Architecture des microvillosits :

Les microvillosits (ou bordure en brosse) sont prsentes dans les cellules ayant un rle important dans rabsorption: cellules du tube proximal rnal, de l'pithlium de l'intestin grle. Dans les microvillosits les microfilaments sont agencs en faisceaux parallles. Les diffrentes protines associes permettent : lancrage membranaire (minimyosine), la consolidation (fimbrine et villine), lancrage de la racine de la microvillosit (spectrine).

* Contraction du muscle squelettique stri :

Lunit de contraction des muscles stris est le sarcomre. Il est constitu dun assemblage de filaments dactine et de filaments de myosine-II (protine motrice ayant une activit ATPase). Lors de lhydrolyse de lATP le changement de la position de la tte de myosine provoque un glissement les filaments dactine sur les filaments de myosine. Le sarcomre se raccourcit, il est alors dans un tat contract.

Les filaments dactine participent aussi la rsistance au stress mcanique lors de la contraction. Ils sont lis la dystrophine qui elle mme est lie un complexe glycoprotique de la membrane plasmique (sarcolemme) . Labsence de dystrophine (due des mutations) chez lhomme est responsable de la maladie de Duchenne (myopathie progressive).

e) Effets de toxines et autre molcule:

La phallodine produite par lamanite phallode a la proprit de se lier aux filaments dactine. Elle soppose leur dpolymrisation causant ainsi leur accumulation et donc un dysfonctionnement cellulaire. La cytochalasine B a aussi une origine fongique et elle inhibe la polymrisation de lactine ce qui altre lorganisation du rseau des filaments dactine.

2- Les filaments intermdiaires a) Constitution protique, assemblage et structure. - Constitution :

A la diffrence des microfilaments et des microtubules, les protines constituant ce rseau sont extrmement varies et leur nature chimique diffre selon le type cellulaire et la localisation

intracellulaire. Par ailleurs, ce ne sont pas des protines globulaires. On distingue 4 grands types:

Assemblage et structure :
Chaque protine possdant une zone centrale en hlice , les monomres sassocient endimres hlicodaux parallles. Puis les dimres sassocient en ttramres anti-parallles qui se mettent bout bout pour former desprotofilaments, un filament intermdiaire tant constitu de 8 protofilaments. - A la diffrence des microfilaments etmicrot ubules : * lassemblage des protines est spontan et elles ne sont pas associes au GTP ou lATP.

* le filament na pas de polarit. - Le rseau de filaments est une structure dynamique rgule par des kinases et phosphatases. Il se rorganise au cours de nombreux processus physiologiques : mitose, migration des lymphocytes

b) Localisation intracellulaire et protines associes

Les filaments intermdiaires sont organiss en un rseau supramolculaire complexe qui stend de la surface du noyau la membrane plasmique. Ce rseau implique des interactions avec les autres lments du cytosquelette: Si on altre les microfilaments dactine avec la cytochalasine B on provoque une rorganisation du rseau de kratine (protine des filaments intermdiaires). De mme, laltration des microtubules avec la colchicine provoque une dsorganisation du rseau de vimentine. Ils interagissent avec de nombreuses protines telles que: BPAG1 (bullous pemphigoid antigen) localises dans la plaque dense de lhmidesmosome Plakoglobine, Desmoplakines I & II dans la plaque dense du desmosome Plectine, c ette protine est un lien entre les filaments intermdiaires et : les microtubules et microfilaments la membrane plasmique les complexes transmembranaires (desmosomes et hmidesmosomes) la lamina nuclaire

c) Fonctions - les kratines :

Spcifiques des pithliums, elles participent larchitecture cellulaire en formant un rseau qui sancre dans lesdesmosomes et hmidesmosomes. Ce rseau tant en continuit avec les cellules adjacentes elles participent la rsistance aux forces de traction. Dans lpiderme : les kratines (Ke5 et Ke14) exprimes dans les kratinocytes de la couche basale assurent la cohsion entre cellule et matrice alors que les kratines (Ke1 et Ke10) exprimes en excs dans les kratinocytes de la couche superficielle sont responsables de la formation de la couche corne. Lexcs de kratines dans le cytoplasme provoque la mort des cellules, qui restent attaches au niveau des desmosomes. Le mme phnomne se retrouve au cours de la formation de longle, du poil ou cheveu.

- la vimentine :
participe ladaptation des cellules au stress mcanique. Ce phnomne est illustr lors de la migration des lymphocytes vers le site dinflammation. Dans lespace vasculaire, la vimentine est localise la priphrie du cytoplasme alors quelle est organise autour du noyau lors du passage entre les cellules endothliales. Elle participe aussi la formation du rseau de GFAP (glial fibrillary acidic protein) dans les astrocytes.

- la desmine :
est spcifique des cellules musculaires. Dans les muscles squelettiques, elle entoure les myofibrilles au niveau des disques Z du sarcomre et les rend solidaires les unes des autres. En ralisant lalignement des sarcomres elle confre aux muscles leur aspect stri en microscopie optique.

- les protines des filaments dans les neurones :

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priphrine et nestine participent au dveloppement du systme nerveux priphrique. le neurofilament L (NF-L) a un rle modulateur du calibre des axones ainsi quun rle dans la rgnration des axones. les neurofilaments participent avec les microtubules la constitution du squelette des prolongements des axones et dentrites.

- les lamines :
Elles ont un rle de soutien de lenveloppe nuclaire. Au moment de la mitose le rseau de lamines est dstructur et lenveloppe nuclaire est fragmente en vsicules. Le rseau est reconstitu en fin de mitose.

d) Pathologies
- pidermolyse bulleuse simplex (EBS) : cest une pathologie de la jonction dermo-pidermique chez lhomme (1 nouveau n/50000) qui se traduit sur le plan clinique par des clivages dans la peau (prsence de bulles dair). Elle est due des mutations des kratines K5 ou K14 relies aux protines de plaque des hmidesmosomes. - accumulation anormale de neurofilaments hyperphosphoryls (appele corps de Lewy): dans la maladie de Parkinson laccumulation est observe dans la substance grise (100% des cas) et dans la maladie dAlzheimer laccumulation est corticale (20% des cas). - cardiomyopathies : dues des mutations de lamines qui se traduisent par une diminution de la rsistance au stress mcanique.