UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO PUNO

AO DE LA PROMOCION DE LA INDUSTRIA RESPONSABLE Y

DEL COMPROMISO CLIMATICO

INFORME N 003 2014 - FCA.- ING. AGRONOMICA-UNA-PUNO.

DE: CHRISTIAM RUDY ASQUI SARAZA

Alumno del II Segundo Semestre Grupo A
A: ING. ANGEL CARI CHOQUEHUANCA
Docente de Qumica Agrcola II
ASUNTO: Informe Sobre ANALISIS DE PROTEINAS.
FECHA: Puno, 21 de Julio del 2014.

Tengo el agrado de dirigirme a usted.Ing de la Escuela

Profesional de Ingeniera Agronmica para informarle sobre anlisis de
protenas como la III Tercera practica realizada en el laboratorio de Agua y
Suelos de la Facultad.

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ANALISIS DE PROTEINAS

I.-INTRODUCCION:

El analista de alimentos comnmente desea saber el contenido protico total de los

alimentos, aunque dicho contenido est conformado por una mezcla compleja de
protenas. Actualmente todos los mtodos para determinar el contenido protico
total de los alimentos son de naturaleza emprica. El aislamiento y pesado directo
de la protena proporcionara un mtodo absoluto, sin embargo, dicho mtodo es
llevado a cabo slo a veces en investigaciones bioqumicas pero es completamente
imprctico para el anlisis de alimentos.
En 1883 el investigador dans Johann Kjeldahl desarroll el proceso bsico del
conocido mtodo actual de anlisis de protenas por el mtodo Kjeldahl, ms
propiamente, para analizar nitrgeno orgnico. En esta tcnica se digieren las
protenas y otros componentes orgnicos de los alimentos en una mezcla con cido
sulfrico en presencia de catalizadores. El nitrgeno orgnico total es convertido en
sulfato de amonio. La mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila
posteriormente en una solucin de cido brico. Los aniones del borato as formado
se titulan con HCl estandarizado, lo cual se convierte en el nitrgeno de la muestra.
El resultado del anlisis representa el contenido de protena cruda del alimento ya
que el nitrgeno tambin proviene de componentes no proticos. Este mtodo ha
sufrido varias modificaciones. As, Kjeldahl us originalmente permanganato de
potasio para llevar a cabo el proceso de oxidacin, sin embargo, los resultados no
fueron satisfactorios, de manera que este reactivo se descart. En 1885 Wilforth
encontr que se poda acelerar la digestin con cido sulfrico aadiendo algunos
catalizadores. Gunning en 1889 sugiri la adicin de sulfato de potasio para elevar
el punto de ebullicin de la mezcla de la digestin para acortar la reaccin. Por lo

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tanto, el procedimiento de esta tcnica es ms correctamente conocido como

Mtodo Kjeldahl-Wilforth-Gunning.

MARCO TEORICO

Se basa en la determinacin del nitrgeno contenido en la planta,mediante el

mtodo semimicro kjeldahl,en las plantas el contenido de nitrgeno varia de 0.2 a
4% , dependiendo de la especie,parte de la planta y la edad. El mtodo consta de
tres fases:

FASE I : DIGESTION:

La cual se basa en la conversin de compuestos amnicos (nitrgeno) en (NH4)2SO4,

en presencia del cido sulfrico concentrado, en el cual el CuSO4 + K2SO4 y
catalizador Selenio, que incrementan la rapidez de oxidacin de la materia orgnica.

Planta + H2SO4 CO + 2SO2 + 2H2O + NH3.(1).

NH3 + H2SO4 (NH4)2SO4(2)

FASE II: DESTILACION:

Consiste en separacin del amonio de la sustancia digerida alcanzando con NaOH

40%, recibiendo el destilado en cido borico,en presencia del indicador tachiro.

(NH4)2SO4 + 2NaOH Na2SO4 +2NH3 + 2H2O(3)

3NH3 + HBO (NH4)3BO3...(4)

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FASE III:TITULACION:

El destilado es absorbido poco a poco por el volumen conocido de solucin con

acido sulfrico en presencia de excesiva. La cual quiere decir que ocurre la siguiente
reaccin:

2(NH4)3BO3 + 3H2SO4 3(NH4)2SO4 + SO4 + 2H3BO3....(5)

II.- OBJETIVOS:

Describir el proceso de determinacin de nitrgeno y protenas totales.

Determinar la cantidad de nitrgeno de la muestra en estudio.
Calcular la protena total, en base a la formula correspondiente.

III.-MATERIALES Y METODOS

III.1.-MATERIALES Y EQUIPOS.
Equipo micro digestor kjeldahl.
Equipos micro destilador kjeldahl.
Balanza analtica.
Soporte universal.
Bereta de 25ml.
Dos probetas de 50ml.
Matraz Erlenmeyer de 250ml.
Una bandeja hermtica.
Esptula para suelos.
Dispersor.
Agitador magntico.
Dos balones de 100ml y 300ml.

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Cucharaditas (1/8 TSP).

Villas de vidrio.
Pipetas graduadas (inyectores).
Extractor de gases.
REACTIVOS
Acido sulfrico H2SO4 95 97 %
Hidroxido de sodio NaOH 40%
Acido sulfrico HSO ; 0.I N
Acido borico H3BO3 2%
Agua destilada H2O (d).
Granallas de zinc.
Indicador tachiro( azul de metileno + rojo de metileno).
Mezcla catalizadora el CuSO4 + K2SO4 + Se
III.2.- METODOLOGIA.
FASE I: DIGESTION.
Pesar 0.1gr de muestra
Envolver con el papel especial y depositar en la bandeja limpia.
Introducir el sobrecito al baln de 100ml.
Agregar aproximado1/4 cucharadita de mezcla catalizadora.
Posteriormente agregar 2.5ml de acido sulfrico concentrado 95 97%.
Colocar el baln al equipo micro digestor e activar el extractor de gases.
Esperar la digestin aproximadamente 1 hora.
Desactivar e enfriarlo un tiempo de 40 minutos.
OBSERVACIONES.
Siempre realizar en orden el procedimiento.
La digestin termina, cuando se observa un liquido residual de color caf claro
a transparente.

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FASE: II DESTILACION:
En el baln de 300ml, introduzca las billas de vidrio (utilizar cucharadita).
Trasvasar el digestado de 300ml con 15 a 200ml destilada.
Agregar al valon 15ml hidrxido de sodio (NaOH) al 40%.
Colocar al destilador.
En el Erlenmeyer de 250ml medir 5ml acido borico (H3BO3) al 2% con
indicador tachiro e aadir 3 a 4 gotas (azul metileno).
Inmediatamente colocar el baln en el destilador con suministro de calor y
recibir en el Erlenmeyer el destilado hasta cambio a color violeta a verde .
Abrir el cao para el agua de refrigeracin.

OBSERVACIONES.
Cuando el acido borico , se le agrega indicador tachiro la solucin vira de
incolora a azul.
La solucin durante el destilado vira azul a verde, lo cual indica la informacin
de borato de amonio.
Controlar el destilado hasta 40ml en vaso ppdo, y luego al finalizar esta fase
(desactivar el equipo micro destilador, sacndolo inmediatamente la
mangera del destilado por lo contrario si lo succiona a la regresin.
FASE III:TITULACION.
Titular con acido sulfrico 0.1 o normalidad conocida.
Leer y anotar el gasto ( utilizar agitador magntico).
OBSERVACIONES.
La titulacin termina , cuando vira de azul violeta a verde.
Siempre lavar el agitador o dispersor con agua destilada en cada ensayo.

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IV.-RESULTADOS Y DISCUSION:
I CUADRO: PESOS DE LAS MUESTRAS
ALUMNO MUESTRA PESO PAPEL PESO MUESTRA
Collanqui Nabo 0.095 0.188
Chunga Apio 0.069 0.131
Perez Brocoli 0.058 0.128
Quispe Martinez Cebada desnuda 0.070 0.152
Arcaya Quinua 0.067 0.177
Jarata Trigo 0.066 0.172
Cruz Haba verde 0.090 0.152
Asqui Arverja verde 0.069 0.122
Mamani yabar Tarwi 0.069 0.126
Toque Papa peruana 0.057 0.127
Flores Nilda Camote 0.060 0.156
Mamani m. Tunta 0.064 0.131
Castillo Oca 0.072 0.159
Mamani escobar Cebolla 0.066 0.164
Yucra choque Alfalfa 0.059 0.100
Ayamamani Apio 0.070 0.104

II.CUADRO: DETERMINACION DE PORCENTAJE DE NITROGENO Y PROTEINAS.

PESO PESO
% NITROGENO
ALUMNO MUESTRA PAPEL MUESTRA GASTO %PROTEINA
ARCAYA QUINUA 0.067 0.117 2.0 2.98 18.62
YUCRA C. ALFALFA 0.059 0.100 0.85 1.27 7.91

CALCULOS:

%N= G (ml de gasto) N Peso equivalente N 1000

Peso Muestra
Dnde:
%N = nitrgeno total.
G =gasto de cido sulfrico 0.1 N.

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CALCULO PARA LA MUESTRA QUINUA.

2 0.1064 14 100
% Nitrgeno =
0.1

% Nitrgeno = 2.98

2 0.1064 0.014 6.25 100

%Protena =
0.1

%Protena = 18.62

CALCULO PARA LA MUESTRA ALFALFA.

0.85 0.1064 14 100

% Nitrgeno =
0.1

% Nitrgeno = 1.27

0.85 0.1064 0.014 6.25 100

%Protena =
0.1

%Protena = 7.91

V.- CONCLUSIONES:

Esta prctica fue de gran importancia en donde pudimos aprender de las tres
fases como determinar los gastos de una muestra vegetativa y por lo tanto
con ella calcular con las respectivas formulas el porcentaje de nitrgeno y
protena.

VI.-BIBLIOGRAFIA:

Conceptos de bioqumica de Rodney Boyer.

Guia de practica anlisis de protena de Ing Angel Cari C.
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Ediciones Racso Qumica formulas Para anlisis de protenas.

WEBGRAFIA:

http//: analisis de nitrgeno_protenas.pdf.pe..

http//:determinacin de nitrgeno_rincon del vago.pe.45,.
http//:practica de laboratorio_proteinas_metodo de kjeldaht.
www.google .com anlisis de proteinas

VII.- ANEXO:

IMGENES DE LAS TRES FASES:

1) FASE DE DIGESTION.

Introducir en forma de un paquete dentro de un baln de

digestin kejldahl de 100ml

Agregar 01gr. De mezcla catalizadora (0.05gr. de sulfato de cobre y 0.95gr.

de sulfato de potasio)

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Adicionar por las paredes d el valn 2.5ml de acido sulfrico concentrado.

Luego se deja enfriar hasta que empiece a formar cristales.

2).FASE DESTILACION:

Adicionar en un matraz de erlenmeyer de 250ml de capacidad, 5ml de

acido brico al 4% y cuatro gotas de indicador y colocarlo en la parte
inferior del tubo condensador d e tal manera que el extremo del tubo de
unin quede sumergido en acido brico.

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Agregar lentamente por las paredes del baln 25ml. De agua destilada.

Transferir la muestra a otro baln de destilacin de 250ml.

Colocar el baln en el aparato de tecator y conectarlo al tubo

condensador, donde se aade 25ml. De solucin de hidrxido de sodio al
40% con la manivela del alcali del aparato en posicin correcta.

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Se alimenta vapor con la manivela presionando hacia abajo

A los pocos minutos comenzara la ebullicin y destilacin.

3).FASE DE TITULACION:

Titular el contenido del matraz de erlenmeyer con la solucin de HCL

0.05N, agitando suavemente hasta que el color vire aun color violeta
(cada ml. De hasta solucin que se gasta en la titulacin, equivale
a 1.4mg. de nitrgeno).

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Una ves cambiada el color de la muestra contenida en el

erlenmeyer, se hace la lectura correspondiente en al bureta, cuyo dato
se considera como gasto

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