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FACULTAD DE ODONTOLOGA.
CURSO DE CRECIMIENTO Y DESARROLLO I
BIOQUMICA.
PRCTICAS DEL
LABORATORIO DE
BIOQUMICA.
cido Ka pKa
cido actico 1.8x10-5 4.75
cido lctico 1.38x10-4 3.86
cido carbnico 7.94x10-7 6.1
cido fosfrico 6.3x10-8 (pKa2) 7.2
A partir del producto inico del agua se pueden derivar los conceptos de pH y
la escala de pH.
Kw H2O= 1x10-14
1x10-7 H3O+
1x10-7 OH-
Log Kw= log[H3O+] + log[OH-]
- 14= log[H3O+] + log[OH-]
14= - log[H3O+] - log[OH-]
pH + pOH = 14
SOLUCIONES AMORTIGUADORAS.
Una solucin amortiguadora (Buffer o Tampn) es capaz de resistir cambios de
pH cuando pequeas cantidades de cido o base son agregadas a la solucin.
Por ejemplo, cuando 0,01 M de cido fuerte y base fuerte son adicionados a
agua destilada, el pH desciende a 2 con el cido y aumenta a 12 con la base.
Si la misma cantidad de cido o base son adicionados a una solucin
amortiguadora formada por cido actico acetato de sodio, el pH puede variar
solamente en una fraccin de unidad.
Materiales:
Procedimiento:
56 Escasa
9 - 11 Moderada
12 14 Buena
14 adelante Excelente
Materiales
Procedimiento.
Para esto se estimula el flujo salival del paciente aplicando cido ctrico
con hisopos en la cara dorsal de la lengua durante 6 min. con una
aplicacin cada 30 seg. La muestra de saliva estimulada se recolecta
temporalmente en un envase de plstico.
Se toman 5 mL. de saliva y se vierten en una fiola y se le agrega 10 mL
de solucin Rojo Fenol. Se agita hasta obtener una coloracin uniforme.
Colocar en un soporte universal una bureta de 25 ml. con solucin de
cido clorhdrico.
En dicho soporte se coloca la fiola con la muestra a evaluar y se le
agrega cido clorhdrico necesario para obtener un cambio colorimtrico
de la muestra, que denota un cambio de pH en la saliva.
La cantidad en gotas de cido clorhdrico utilizado se multiplica por 0.1,
obteniendo de esta forma la Capacidad Buffer Salival o sus meq/gr d
bicarbonato.
COMPONENTES ORGNICOS:
Colgeno: Constituye aproximadamente el 90% de la proteina total en
los tejidos calcificados. Es el mas predominante en el diente, a nivel de
dentina y cemento radicular.
Otras Proteinas: El componente organico mas importante es de
naturaleza protica, constituye un complejo sistema de multiagregados.
Las proteinas presentes en el esmalte son:
Amelogeninas.
Enamelinas.
Ameloplastinas.
Tuftelina
Materiales:
Cada grupo de prctica debe traer 4 dientes humanos sanos o con
escasa destruccin coronal o restauraciones muy pequeas..
1 cureta de periodoncia o un tartrectomo.
1 lata de Coca Cola.
2 limones.
1 pastilla de Alka Seltzer.
Procedimiento:
Remover los tejidos blandos presentes en el diente: clculo, restos de
ligamento periodontal, procesos apicales, etc. Se deben lavar en agua
destilada.
1 de los dientes ser sumergido y almacenado en agua destilada. Los otros 3
dientes sern sumergidos y almacenados en tubos de ensayo con coca cola,
jugo de limn y solucion de alkaseltzer respectivamente.
CARBOHIDRATOS.
Los carbohidratos tambin llamados azcares, osas o sacridos, son
compuestos polimricos de tipo polihidrxialdehidos o polihidroxicetonas o que
por hidrlisis producen aldehidos y acetonas.
De otro lado una propiedad importante que permite identificar los carbohidratos,
y determinar el grado de pureza de los mismos, particularmente monosacrios
es la rotacin ptica ocasionada por la presencia de centros asimtricos o
quirales en la estructura molecular, los cuales desvan el plano de luz
polarizada.
Materiales:
100 mL de almidn lquido.
Lugol.
2 inyectadoras de 1cc (inyectadotas de insulina)
Procedimiento:
Coloque en un tubo de ensayo con una pipeta, 2 mL de la solucin del
carbohidrato. Tome con las inyectadoras 0.2 mL la solucin de Lugol y
agrguelas al tubo de ensayo con el carbohidrato.
Mezcle y observe la formacin de los colores:
rojo para resultado positivo de glicgeno.
azul-violeta para resultado positivo de almidn.
Materiales:
1 Tubo de ensayo.
2 Pipeta.
1 mL de Reactivo de Benedict.
5 mL de Solucin de carbohidrato a investigar (Glucosa o Sacarosa).
Bao de Mara con agua hirviendo.
Procedimiento:
Coloque con la pipeta en un tubo de ensayo 2 mL de la solucin del
carbohidrato. Con otra pipeta agregue 0.1 ml del reactivo de Benedict.
Aprehenda el tubo de ensayo con la pinza para calor y caliente a bao mara
durante 3 minutos.
La formacin de un precipitado amarillo o rojizo, es prueba positiva para
carbohidratos reductores.
3ra PRCTICA:
AMINOCIDOS Y PROTEINAS.
AMINOCIDOS Y PROTEINAS
Las protenas son macromolculas compuestas por unidades de aminocidos
que se unen entre s mediante enlaces peptdicos y que alcanzan un peso
molecular igual o superior a 5000 Kd.
El enlace peptdico, caracterstico de estos compuestos, resulta de la reaccin
del grupo carboxilo de un aminocido con el grupo amino del otro aminocido,
lo cual da lugar a un enlace covalente de tipo carbamida y que tiene algunas
caractersticas peculiares como:
1. El enlace C-N tiene cierto carcter de doble enlace, por lo cual le confiere
rigidez a la molcula.
2. El O2 y el N2 quedan en posicin trans.
3. Todos los elementos que lo componen el enlace se encuentran ubicados en
el mismo plano.
4. La rotacin de la molcula formada queda restringida a los carbonos .
Procedimiento.
Separar la clara de la yema con mucho cuidado evitando que la clara se
contamine con trazas de yema. Una vez separada, colocar una porcin de la
clara en un tubo de ensayo y agregarle con el mechero 5 gotas de cido
actico. Tomar el tubo de ensayo con las pinzas para calor y acercarlo a la
llama del mechero.
Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato cprico (CuSO4), junto con
tartrato de sodio y potasio (KNaC4O64H2O). El reactivo, de color azul, cambia a
violeta en presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con
polipptidos de cadena corta. El Hidrxido de Potasio no participa en la
reaccin, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.
Procedimiento.
Colocar en cada uno de los tubos de ensayo, 2 clara de huevo, solucin de
glicina 0.1M y agua destilada, respectivamente. Luego se aaden 2 mL del
reactivo de Biuret. NO SE APLICA CALOR.