UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DARI EKSTRAK Avicennia marina

TERHADAP BAKTERI Stapylococus aureus

1
Dinur Piranto*
1
Program Studi Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan
Universitas Padjadjaran, Dekanat FPIK Unpad, Jatinangor Km 21 40600,
Jawa Barat, Indonesia
*pirantodinur@outlook.co.id

ABSTRACT
A. marina is almost always found on any of mangrove ecosystems. A. Marina contains
alkaloids, saponins, tannins, phenolics, flavonoids, triterpenoids and glycosides, and there
were no steroids. The purpose of this lab is to determine the antibacterial activity of extracts
of Avicennia marina mangrove against Staphylococus aureus bacterial growth using a liquid
medium (Nutrient Broth). With the principle of determining the concentration of extract of
Avicennia marina in inhibiting the growth of bacteria Staphylococus aureus as the Minimum
Inhibitory Concentration (MIC) in inhibiting bacteria. The method used in this lab using
liquid dilution. Mangrove Avicenia marina has a secondary metabolite can be antibacterial
and can inhibit the bacteria to grow. In the antibacterial activity test that has been done can
be concluded that the bersar concentration that is given the greater the inhibitory power.
Concentration of 50 to an initial limit Avicenia to inhibit bacteria to grow although the effect
is very little using a liquid medium (Nutrient Broth), where the value of the final OD is
highest in the extract concentration of 5000 ppm with a value 1.4098. Of the value of MIC
(Minimum Inhibitory Concentration) is characterized by the increase in OD value before
incubation and after incubation.

Key word : Antibacterial activity, Staphylococus aureus, extracts of Avicennia marina

PENDAHULUAN Wibowo et al. (2009) mengemukakan

Avicennia marina adalah salah satu
jenis mangrove yang masuk ke dalam
kategori mangrove mayor. Status tersebut
menyebabkan A. marina hampir selalu di
temukan pada setiap ekosistem mangrove.
Masyarakat mengenal A. marina sebagai
api-api putih. Sejauh ini di ketahui sekitar
delapan spesies yang menyebar di dua
kawasan perairan utama di wilayah tropis,
yakni di dunia lama (afro-asia dan
Australia) dan Dunia baru (pasifik timur
dan Karibia). Akan tetapi di Indonesia
hanya umum di temukan empat jenis.
Kebanyakan jenisnya merupakan jenis
pionir dan oportunistik, serta mudah
tumbuh kembali. Pohon api-api yang
tumbang atau rusak dapat segera tumbuh
kembali, sehingga mempercepat
pemulihan tegakan yang rusak.
bahwa A. marina yang terdapat di
Indonesia mengandung senyawa alkaloid,
saponin, tanin, fenolik, flavonoid,
triterpenoid, dan glikosida serta tidak
ditemukan adanya steroid. Namun,
Abeysinghe et al. (2006) menemukan
kandungan senyawa steroid pada A.
marina yang terdapat di Sri Lanka.
Terdapat beberapa sumber penghasil
senyawa bioaktif antara lain tumbuhan,
hewan, dan mikroba. Mikroba yang hidup
di dalam jaringan tumbuhan disebut
sebagai mikroba endofit. Mikroba endofit
dalam jaringan tumbuhan, tumbuh
bersama saling menguntungkan satu sama
lain. Mikroba endofit akan memproduksi
senyawa yang berfungsi untuk melindungi
jaringan tumbuhan dari serangan
mikroorganisme yang bersifat patogen.

1
Jaringan tumbuhan akan menyediakan
kebutuhan nutrisi bagi mikroba endofit
agar dapat tetap hidup. Hubungan antara
mikroba endofit dan jaringan tumbuhan ini
dikenal sebagai hubungan simbiosis
mutualisme. Mikroba endofit dapat berupa
bakteri atau jamur. Bakteri Staphylococcus
aureus dan Escherichia coli merupakan
penyebab tersering seseorang terkena diare
di Indonesia. Kedua bakteri ini merupakan
flora normal di saluran pencernaan tubuh
manusia. Oleh karena itu, bakteri S.
Aureus digunakan sebagai bakteri dalam
praktikum.
Tujuan dari praktikum ini yaitu untuk
mengetahui aktivitas antibakteri dari
ekstrak mangrove Avicennia marina
terhadap pertumbuhan bakteri
Staphylococus aureus menggunakan media
cair (Nutrient Broth). Dengan prinsip
menentukan konsentrasi ekstrak Avicennia
marina dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Staphylococus aureus sebagai
Minimum Inhibitory Concentration (MIC)
dalam menghambat bakteri.
BAHAN DAN METODE
Kegiatan praktikum dilaksanakan
pada Senin, 14 November 2016 di
laboratorium Bioteknologi Ilmu Kelautan
gedung 4, Fakultas Perikanan dan Ilmu
Kelautan, Universitas Padjadjaran.
Dalam praktikum ini peralatan yang
digunakan yaitu Bunsen sebagai pensteril
alat pengujian, Mikro pipet sebagat alat
pengukur larutan bahan uji, pipet tetes
sebagai alat memindahkan larutan, tabung
reksi sebagai alat pengujian bakteri dan
ekstrak, vortex sebagai alat penghomogen
bahan uji, incubator untuk menginkubasi
mikroba uji, spektrofotometer digunakan
untuk mengetahui nilai absorban pada
mikroorganisme, kuvet sebagai wadah
standar yang akan di uji menggunakan
spektrofotometer dan rak reaksi sebagai
tempat penyimpanan tabung reaksi agar
tetap tegak. Sedangkan bahan yang
digunakan yaitu ekstrak sampel (Avicenia
marina) sebagai sampel uji, isolasi bakteri
2
uji (Staphylococcus aureus), Nutrient Both
(NB) sebagai media cair, aquades, kertas
label dan tissue laboratorium.
Metode yang dilakukan pada praktikum ini
dengan menggunakan dilusi cair. Dimana
pengujian antibakteri dari ekstrak terhadap
bakteri uji dilakukan dalam wujud larutan
yang berbeda konsentrasinya.
Praktikum uji antibakteri diawali dengan
menyegarkan bakteri uji menggunakan
media cair Nutrient Broth. kemudian
memasukkan bakteri uji sebanyak satu ose
ke dalam media cair yang telah dingin
secara aseptik. Selanjutnya diinkubasi
pada suhu 37 oC selama 24 jam dan
dihitung Optical Density (OD). kemudian
mengencerkan ekstrak senyawa bahan
alam Avicenia marina dalam konsentrasi
10000 ppm. melakukan pengenceran
estrak dalam konsentrasi 5000, 1000, 500,
10, dan 0 ppm dalam suspensi cair bakteri
uji, dengan volume akhir sebanyak 5 mL
di dalam tabung biakan. kemudian
menginkubasi bakteri uji pada suhu 37 oC
selama 24 jam dan menghitung Optical
Density (OD). dan yang terakhir
menentukan konsentrasi paling rendah
yang dapat menghambat pertumbuhan
bakteri sebagai Minimum Inhibitory
Concentration (MIC).
ANALISIS DATA
Hasil dari pengujian selanjutnya
melakukan pengolahan data untuk
mendapatkan grafik data antara ekstraksi
dan nilai OD pada program software
Ms.Excel. Pada praktikum dalam
melakukan pengenceran rumus yang
digunakan yaitu sebagai berikut :
V1 x N1 = V2 x N2
Sedangkan untuk menghitung MIC
dilakukan dengan mengamati tingkat
kekeruhan yang terjadi dan dibandingkan
dengan kontrol positif dan negatif. MIC
terletak pada tabung bening yang terakhir,
atau sebelum tabung keruh pertama.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada praktikum ini uji aktivitas
antibakteri dari stok ekstrak Avicennia
marina yang dibuat dengan konsentrasi
10.000 ppm terhadap bakteri Stapylococus
aureus di dapatkan nilai yang berbeda.
Pada setiap kelompok mengambil
No Konsentrasi ekstrak (ppm)
1 0
2 50
3 100
4 500
5 1000
6 5000
Tabel 1. Rata-Rata Nilai OD
Pada praktikum ini didapatkan
hasil bahwa OD awal dan OD akhir
percobaan menunjukan adanya
peningkatan nilai OD. Jika dibandingkan
berdasarkan konsentrasi ekstrak, nilai OD
akhir tertinggi ada pada konsentrasi
ekstrak 5000 ppm yaitu dengan nilai
1,4098. Sedangkan nilai OD akhir
terendah terdapat pada konsentrasi ekstrak
50 ppm yaitu dengan nilai 0,3565. Dari
grafik dapat dilihat bahwa semakin tinggi
konsentrasi ekstrak maka semakin tinggi
pula nilai OD akhir yang diperoleh.
Untuk kontrol dalam praktikum ini
yaitu pada konsentrasi ekstrak 0 ppm,
artinya tidak ada pengaruh ekstrak
terhadap perubahan OD. Nilai OD akhir
pada kontrol yaitu 0,5315. Jika dilihat
Pada grafik di bawah dapat di
simpulkan bahwa semakin tinggi nilai
kosentrasi yang di berikan maka semakin
besar daya hambat yang di berikan kepada
bakteri. Adapun Ekstrak dari Avicenia
dapat menghambat laju Bakteri S. Aureus.
Uji aktivitas antibakteri ini
menggunakan media cair (Nutrient Broth),
untuk mengetahui ekstrak Avicennia
marina dapat menghambat pertumbuhan
bakteri Stapylococus aureus atau tidak.
Semakin tinggi konsentrasi ekstrak
3
konsentrasi ekstrak dengan jumlah yang
berbeda sesuai dengan perhitungan yang
telah dihitung menggunakan rumus
pengenceran. Begitu juga dengan
banyaknya bakteri uji itu disesuaikan dari
hasil perhitungan.
OD awal Rata - rata OD akhir
0.213 0.5315
0.213 0.3565
0.213 0.3785
0.213 0.5123
0.213 0.5056
0.213 1.4098
perbedaan pertumbuhan bakteri dari nilai
OD, pada konsentrasi 50 ppm dan 100
ppm nilai OD akhir jauh dibawah dari OD
akhir kontrol. Yaitu dengan masing
masing nilai 0,3565 dan 0,3785. Pada
konsentrasi 500 ppm dan 1000 ppm nilai
OD akhir sudah mendekati nilai kontrol
namun masih dibawah nilai kontrol, yaitu
dengan masing masing nilai 0,5123 dan
0,5058. Namun pada konsentrasi ekstrak
5000 ppm perubahan nilai OD akhir jauh
di atas kontrol yaitu dengan nilai 1,4098.
Dari hasil tersebut dapat dikatakan ekstrak
Avicennia marina dapat menghambat baik
pertumbuhan bakteri pada konsentrasi 50
ppm sampai 100 ppm sedangkan diatas
5000 ppm sudah menjadi nutrisi untuk
pertumbuhan bakteri.
mangrove berarti kandungan bahan
antibakteri juga semakin banyak, sehingga
mampu menghambat pertumbuhan bakteri
S. aureus. Uji ini dilakukan dengan
menggunakan uji MIC (minimum
inhibitory concentration). Metode ini
dilakukan dengan cara menentukan
konsentrasi terendah dari ektrak Avicennia
marina yang dibutuhkan untuk
menghambat pertumbuhan bakteri uji.
 Gambar 1. Grafik perbandingan nilai OD awal dan akhir terhadap konsentrasi ekstrak

KESIMPULAN Terhadap Staphylococcus Aureus,

Pada uji aktivitas antibakteri yang Escherichia Coli Dan Pseudomonas
telah di lakukan dapat di simpulkan bahwa Aeruginosa Secara In-Vitro
semakin bersar kosentrasi yang di berikan disusun oleh Deby A. Mpila1,
semakin besar pula daya hambatnya. Fatimawali, Weny I. Wiyono
Kosentrasi 50 menjadi batas awal avicenia Halidah. 2014. Avicennia Marina (Forssk.)
untuk menghambat bakteri untuk tumbuh Vierh Jenis Mangrove Yang Kaya
walaupun efeknya sangat sedikit dengan Manfaat. Makassar. EBONI Vol.
menggunakan media cair (Nutrient Broth), 11 No. 1, Mei 2014 : 37 - 44
dimana nilai OD akhir tertinggi ada pada Dewi FK, 2010. Aktivitas Antibakteri
konsentrasi ekstrak 5000 ppm yaitu Ekstrak Etanol Buah Mengkudu
dengan nilai 1,4098. Dari nilai MIC (Morinda citrifolia Linnaeus)
(Minimum Inhibitory Concentration) Terhadap Bakteri Pembusuk
ditandai dengan kenaikan nilai OD Daging Segar. Skripsi. Tidak
sebelum inkubasi dan sesudah inkubasi. dipublikasikan. Surakarta:
DAFTAR PUSTAKA Universitas Sebelas Maret.
Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Irianto, K. 2007. Mikrobiologi: Menguak
Daun Mayana (Coleus Dunia Mikroorganisme. CV.
Atropurpureus [L] Benth) Yrama Widya. Bandung

4
 LAMPIRAN

No Gambar Keterangan

Hasil pengenceran awal ekstrak

bahan alam
1

Larutan ekstrak yang sudah di

tambahkan dengan bakteri uji

Larutan ekstrak dan bakteri yang

telah di vortex dan akan di inkubasi
3 selama 24 jam

5
6