Manual de Micro Pem 2015

FAMURP
Microbiologa
Profesor Dr. N. Domnguez N.
MANUAL
DE MICROBIOLOGA
PARA ESTUDIANTES
DE MEDICINA
Profesor
Nicanor Domnguez Navarrete
Universidad Ricardo Palma

Facultad de Medicina
2015
1
FAMURP
Microbiologa
NDICE
SECCIN I 03 - 27
Captulo 1 Bacterias: Introduccin. Estructura. Clasificacin
Captulo 2 Fisiologa y gentica bacteriana
Captulo 3 Antibacterianos: Agentes fsicos, qumicos y antibiticos
Captulo 4 Relacin husped microorganismo. Poder patgeno
SECCIN II 28 - 111
Captulo 5 Infecciones localizadas y sistmicas. Gnero Staphylococcus
Captulo 6 Infecciones localizadas y sistmicas. Gnero Streptococcus
Captulo 7 Infecciones localizadas y sistmicas. Bacillus anthracis. Neisseria meningitidis
Captulo 8 Infecciones con colonizacin. Gneros Corynebacterium, Actinomyces y Nocardia
Captulo 9 Infecciones con colonizacin. Gneros Haemophilus, Bordetella y Gardnerella
Captulo 10 Infecciones entricas. Gneros Escherichia, Salmonella y Shigella
Captulo 11 Infecciones entricas ulcerosas. Gneros Campylobacter y Helicobacter
Captulo 12 Infecciones entricas secretoras. Gneros Vibrio y Aeromona
Captulo 13 Bacterias ambientales. Gneros Pseudomonas, Acinetobacter y Legionella.
Captulo 14 Bacterias zoonticas. Gneros Brucella y Yersinia
Captulo 15 Bacterias invasivas con vida intracelular. Gneros Bartonella y Listeria
Captulo 16 Bacterias anaerobias. Gneros Bacteroides y Clostridium
Captulo 17 Bacterias espirilares. Gneros Leptospira y Borrelia
Captulo 18 Bacterias de transmisin sexual: Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi,
Neisseria gonorrhoeae, Klebsiella granulomatis y Linfogranuloma venreo.
Captulo 19 Gnero Mycobacterium: M. tuberculosis, M. leprae
Captulo 20 Bacterias filtrables. Gneros Rickettsia, Chlamydia y Mycoplasma
SECCIN III 112 - 148

Captulo 21 Virus: Estructura. Genoma. Replicacin. Patogenia. Diagnstico.
Captulo 22 Virus bacterianos: bacterifago
Captulo 23 Virus de la Hepatitis: VHA, VHB, VHC, VHD
Captulo 24 Virus respiratorios: Ortomyxovirus, Paramyxovirus, Rubeola, Adenovirus
Captulo 25 Virus entricos: Rotavirus, Enterovirus
Captulo 26 Herpesvirus: VHS, VVZ, CMV, VEB
Captulo 27 Virus transmitidos por artrpodos y roedores
Captulo 28 Virus de la rabia
Captulo 29 Retrovirus
SECCIN IV 149 - 161

Captulo 30 Hongos: Generalidades. Hongos filamentosos ambientales
Captulo 31 Levaduras: Candida albicans, Criptococcus neoformans
Captulo 32 Hongos productores de micosis cutneas y superficiales
Captulo 33 Hongos productores de micosis subucutneas y sistmicas
2
FAMURP
Microbiologa
SECCIN I
CAPTULO 1
BACTERIAS: INTRODUCCIN. ESTRUCTURA. CLASIFICACIN
_______________________________________________________________
INTRODUCCIN
El conocimiento de los microorganismos comienza en 1674 con la construccin del

microscopio, que permiti descubrir un mundo hasta ese entonces desconocido. El mundo
microbiano incluye a organismos vivientes muy pequeos (0,2 20 m), agrupados por sus
caractersticas estructurales en tres dominios: Eucaria, Archaea y Bacteria.
El dominio Eucaria, est formado por clulas eucariotas, y comprende a las algas, hongos y
protozoarios. Los dominios Archaea y Bacteria estn formados por clulas procariotas (ncleo
primitivo o nucleoide), caracterizadas por tener una pared externa rgida que las rodea y no
poseer membrana nuclear.
Los microorganismos integrantes del dominio Archaea no son patgenos para las plantas
ni los animales, algunas de sus protenas son muy semejantes a las contenidas en las clulas
eucariotas y la composicin qumica de la pared y membrana citoplasmtica es diferente a la de
las clulas procariotas. Algunas especies del dominio Archaea tienen comportamientos extremos,
como vivir en medios hipertnicos (mar muerto o salado), en los polos y a temperaturas
superiores a 100C (geiseres), hbitat de la especie Thermos aquaticus, de donde se obtuvo la ADN
polimerasa, til para la prueba de reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Los integrantes del dominio Bacteria son clulas procariotas con una pared constituida por
un polisacrido nico, denominado peptidoglucano; la membrana celular contiene cidos grasos
propios, y su genoma corresponde a un filamento de ADN bicatenario.
La vida en la Tierra est representada en su mayora por microorganismos, y debe tenerse

en consideracin el papel benfico que ellos desempean, ya que son responsables de la
supervivencia de otros seres vivientes, creando nichos ecolgicos propios. Se pueden sealar
algunas funciones exclusivas de ellos, como: a) ser los encargados de degradar la celulosa de las
plantas, que los animales y los humanos no pueden digerir; b) conjuntamente con las plantas
reponen el oxgeno ambiental, indispensable para la vida; y c) slo las bacterias pueden convertir
el gas nitrgeno en forma qumica, til para las plantas y humanos.
En ste manual se hace un apretado resumen de los microorganismos que tienen un rol
como causales de enfermedades infecciosas en el ser humano, destacando sus caractersticas
biolgicas, rol patgeno, mtodos de diagnstico y medidas preventivas.
3
FAMURP
Microbiologa
ESTRUCTURA BACTERIANA
Las bacterias presentan tres formas bien definidas: redondas (cocos), alargadas (bacilos) y
helicoidal larga (espiroquetas). A su vez, los cocos se pueden agrupar en pares (diplo), en cadenas
(estrepto) y en racimos (estfilo). As mismo los bacilos pueden diferenciarse en cortos, largos y
curvados (vibriones). Todas las bacterias estn constituidas por estructuras bien definidas como la
pared, la membrana citoplasmtica, el genoma disperso en el citoplasma y estructuras externas
opcionales como los pili, flagelos y cpsula. Algunos gneros bacterianos tienen la capacidad de
formar una estructura interna denominada endospora.
A.PARED BACTERIANA
Es la estructura rgida que rodea a la clula bacteriana, le da forma y resiste la presin

interna de las bacterias, que es de 5 a 20 atmsferas. La composicin qumica es exclusiva de las
bacterias, una macromolcula denominada peptidoglucano o murena.
El peptidoglucano est constituido por dos molculas de hexosas: N-acetilmurmico

(NAM) y N-acetilglucosamina (NAG), unidas entre ellas en forma alterna, para formar un polmero
lineal. Estos polmeros lineales se unen entre s por puentes peptdicos, formando una malla. Los
puentes peptdicos unen los polmeros lineales entre las molculas de NAM y estn constituidos
por cuatro aminocidos (D-alanina, lisina o cido diamino pimlico, cido D-glutmico y glicina).
La composicin qumica de la pared bacteriana explica el comportamiento inmunognico

y los mecanismos de patogenia de la bacteria. As mismo, divide a las bacterias en dos categoras
cuando son coloreadas con Gram. El colorante cristal violeta y el yodo forman un complejo con los
ribonuicletidos bacterianos. Cuando se aade el decolorante (alcohol-acetona) no se puede
extraer el complejo en bacterias con pared gruesa, luego se tieen de violeta: grampositivas. En
cambio, en otros grupos bacterianos el complejo se extrae fcilmente quedando incoloras,
debiendo teirlas con un colorante de contrase rojo (fucsina o safranina), son las gramnegativas.
4
FAMURP
Microbiologa
1. Bacterias grampositivas: se caracterizan por poseer una capa gruesa de peptidoglucanos

(30 capas), contienen molculas de cido teicoico unidas al NAM y de lipoteicoico unidas a
la membrana citoplasmtica. Ambas molculas sobresalen al exterior y se comportan
como antgenos de superficie, de utilidad para diferenciar el grupo bacteriano en
serotipos. Adems cumplen una funcin importante como adherente a la clula receptora
del husped.
Las micobacterias son una excepcin del grupo, porque estn rodeadas de un lpido
complejo, el cido miclico, que les otorga comportamiento tintorial, patognico e
inmunognico diferente.
2. Bacterias gramnegativas: estas bacterias tiene una pared compleja formada por una
delgada capa de peptidoglucanos, rodeada de una membrana externa, separadas ambas,
por el espacio periplasmtico.
La membrana externa es una bicapa lipdica, que tiene por funcin proteger a las bacterias
de macromolculas y de condiciones ambientales adversas. La capa externa de esta
membrana est constituida por dos sustancias: a) un lipopolisacrido (LPS), conocido
como endotoxina, con actividad antignica, pirgena y capaz de ocasionar la reaccin
Schwartzman (coagulacin intravascular diseminada) y, b) un polisacrido que sobresale al
exterior, y que constituye el antgeno O de superficie.
Un grupo de protenas denominadas porinas, se ubican en la membrana externa, y son las
que permiten la difusin de molculas hidrfilas (metabolitos y antibiticos).
El espacio periplasmtico es un compartimento que contiene enzimas (fosfatasas, lipasas,
nucleasas, etc.), las que se encargan del transporte y degradacin de los nutrientes, y
tambin es un reservorio de factores de virulencia (hialuronidasas, proteasas, beta
lactamasas, etc.).
Las espiroquetas tienen una pared semejante a los gramnegativos, pero con flagelos
situados en el espacio periplasmtico.
Los Micoplasmas son bacterias estructuralmente diferentes, pues carecen de pared, vale
decir de peptidoglucano; luego estos microorganismos no tienen forma, no se tien con los
colorantes habituales y sobreviven en medios hipertnicos. Ms aun, su membrana citoplasmtica
est constituida por esteroles, como las clulas eucariotas.
Por otro lado, hay situaciones en que las bacterias pueden perder la capacidad de formar
pared, por accin de una enzima (lisozima), crendose estructuras denominadas protoplastos,
cuando el proceso ocurre en grmenes grampositivos, y esferoplastos, si ocurre en grmenes
gramnegativos. Otras veces, los bacilos gramnegativos pierden la capacidad de formar pared por
accin de los antibiticos beta lactmicos, pudiendo aun sobrevivir temporalmente, constituyendo
las formas L de bacteria.
5
FAMURP
Microbiologa
B. MEMBRANA CITOPLASMTICA
Es una estructura delgada que rodea a la bacteria y est compuesta por dos capas de
fosfolpidos unidas por protenas, pero carentes de esteroles (con excepcin de los micoplasmas).
Las funciones de la membrana citoplasmtica son: a) permeabilidad selectiva, b) participar en los
mecanismos de transporte de metabolitos, c) participar en los procesos de excrecin de las
sustancias sintetizadas por las bacterias, d) poseer una cadena de transporte de electrones con la
que forma una gradiente de protones, generando energa suficiente para la movilidad de los
flagelos, y e) presentar los receptores de quimiotaxis.
El cromosoma bacteriano est fijado a la membrana citoplasmtica en un punto

denominado mesosoma. Esta zona tiene singular inters, porque es all donde se inicia y termina
la replicacin del ADN, as como la zona donde se produce la divisin celular.
C. ESTRUCTURAS INTERNAS
1. El genoma: la composicin interna de las bacterias es bsicamente molculas de cido

nucleico. El cromosoma de los procariotes es una molcula nica de ADN circular de doble cadena
enrollada, que contiene 1000 a 9000 kb y est ubicada en una zona denominada nucleoide, sin
membrana que la rodee. En algunas bacterias, como Vibrio cholerae, se han encontrado ms de
un nucleoide (cromosoma). Una caracterstica de las bacterias es que muchos de los genes
implicados en una funcin determinada se agrupan en fragmentos del ADN, constituyendo el
elemento funcional denominado operon. Ejemplo: el metabolismo de lactosa, los factores de
virulencia, etc.
2. Dispersas en el citoplasma o integradas al cromosoma bacteriano se encuentran otras

molculas de ADN (extracromosmicas), de tamao muy pequeo (1.5 a 400 kb), denominadas
plsmidos. Estas molculas de ADN contienen informacin gentica que le otorga caractersticas
especiales a las bacterias (fenotpicas), como produccin de toxinas, enzimas, formacin de pili y
factores de resistencia a los antibiticos. No son indispensables para la vida de la bacteria. Son
muy mviles y pueden ser transferidas de una bacteria a otra.
3. Transposones e Integrones: son molculas de ADN ms pequeas que las anteriores

(150 a 1500 b), que para replicarse deben estar adheridas al cromosoma bacteriano; son muy
mviles y pueden cambiar de un sitio a otro en el mismo cromosoma de la bacteria. Los integrones
captan genes exgenos (resistencia a antibiticos) y los integran al cromosoma.
4. Bacterifagos: son molculas de ADN viral (fagos) que parasitan a las bacterias, las que
pueden producir lisis bacteriana, o permanecer inactivas, sea en el citoplasma o adheridas al
cromosoma, codificando protenas que le otorgan propiedades diferentes a la bacteria. Ejemplo:
produccin de toxinas.
6
FAMURP
Microbiologa
5. Las bacterias poseen numerosos ribosomas, que son estructuras que se fijan al ARNm y
permiten la unin de los aminocidos para la formacin de protenas. La molcula del ribosoma
bacteriano es 70S, formada por dos sub unidades (30S y 50S); estas estructuras son el objetivo de
la accin de algunos antibiticos.
Adems, se encuentran dispersos grnulos de almacenamiento de energa, como

glucgeno, beta hidroxibutrico y de volutina o metacromtico.
6. Endospora: algunos gneros bacterianos (Bacillus y Clostridium) son capaces de formar

esta estructura, que les permite permanecer viables por mucho tiempo, soportando cambios
ambientales de temperatura, desecacin, radiacin y deficiencia nutricional. El proceso de
esporulacin implica cambios en la clula bacteriana, como la formacin de una capa gruesa que la
rodea y concentra calcio unido al cido dipicolnico. Cuando las condiciones ambientales son
favorables a la reproduccin de la bacteria, la endospora se vuelve a la forma vegetativa. En el
gnero Clostridium, la endospora deforma al bacilo (engruesa) y puede estar ubicada en la zona
central, terminal o subterminal, ubicacin que contribuye a la identificacin de la especie.
D. ESTRUCTURAS EXTERNAS
1. Cpsula: Muchas bacterias se rodean de una capa gelatinosa, formada en la mayora por
polisacridos, slo en el Bacillus anthracis la composicin qumica es un polipptido. A esta
estructura se le denomina cpsula o glucoclix, la que tiene diversas funciones: a) adherirse a la
superficie celulare ; b) crear micropelculas, como la placa dental; y c) bloquear los mecanismos de
defensa innatos como la fagocitosis, por lo que su peresencia se considera un factor de virulencia.
En los cultivos las bacterias capsuladas forman colonias lisas, brillantes y mucoides (colonias S).
2. Flagelos: Son estructuras proteicas helicoidales (flagelina) unidas desde la membrana

citoplasmtica hacia el exterior, encargadas de la movilidad bacteriana. Segn la ubicacin del
flagelo le proporciona a la bacteria un tipo de movilidad diferente. Si la ubicacin del flagelo es
polar, se denomina monotrico, si dispone de varios flagelos en un extremo, se denomina lofotrico,
en cambio si posee flagelos en todo su rededor, se denomina peritrico. La movilidad tambin
puede ser direccionada hacia un sustrato determinado, propiedad caracterstica del fenmeno de
quimiotaxis.
El constituyente proteico del flagelo tiene propiedad antignica (antgeno H), luego los
anticuerpos formados por el husped contra el flagelo, son utilizados en clnica como marcadores
de respuesta inmune.
Las espiroquetas carecen de flagelos, pero poseen filamentos axiales que recorren a la
bacteria de un extremo a otro, ubicados en el espacio periplasmtico, y que les ofrecen
movimientos de rotacin, flexin y extensin.
7
FAMURP
Microbiologa
3. Pili o fimbria: Son pequeos apndices proteicos que rodean a las bacterias, cuya
funcin principal es la de adherirse a la clulas husped, como primer paso para la colonizacin
bacteriana; reciben tambin otras denominaciones como adhesinas, lectinas o agresinas. Hay un
tipo de pili especial, denominado pili sexual, cuya formacin est codificada por genes del
plsmido F (fertilidad), y participa en la trasferencia de material gentico entre bacterias mediante
el mecanismo denominado conjugacin.
CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS
El objetivo biolgico es la especie bacteriana, y se define como el conjunto de individuos

que tienen caractersticas genticas, morfolgicas y fisiolgicas semejantes; que pueden
intercambiar naturalmente sus genes, y compartir un mismo nicho ecolgico. La denominacin de
una especie tiene dos palabras, la primera corresponde al gnero y lleva la primera letra con
mayscula y la segunda es la propia especie y se escribe con minscula, por ejemplo: Escherichia
coli, Mycobacterium tuberculosis, Salmonella typhi, etc.
El texto de referencia para la clasificacin de los Procariotes es el de Bergey, que utiliza la

informacin relacionada con la similitud gentica y con las caractersticas fenotpicas. Para ello se
siguen procedimientos que pueden ser divididos en dos categoras:
A) Con la finalidad de aislar in vitro al microorganismo, se utilizan medios de cultivo inertes

(lquidos o slidos) o de tejidos vivos. Despus del cultivo y con el germen puro, se identifica en
gnero y especie, empleando procedimientos basados en la morfologa (coloracin de Gram);
comportamiento metablico frente a diversos sustratos; pruebas genticas (secuenciacin del
ARNr 16S, reaccin en cadena de la polimerasa, homologacin de ADN-ADN); pruebas qumicas
para identificar las cadenas de los lpidos de la membrana citoplasmtica; o el uso de mtodos
inmunolgicos.
B) Sin cultivo, cuando por razones clnicas o propias de la bacteria, no se puede realizar el
aislamiento in vitro. Luego se utilizan tcnicas que permitan detectar la presencia de los antgenos
bacterianos en el paciente: coloraciones apropiadas a partir de las secreciones, deteccin de
fracciones antignicas (inmunofluorescencia, enzima inmunoensayo, PCR); o la deteccin de
anticuerpos en lquidos orgnicos (serologa).
8
FAMURP
Microbiologa
ALGORITMO PARA IDENTIFICACIN DE GRMENES GRAMNEGATIVOS
Cocos Bacilos cortos Bacilos Bacilos curvados
Neisserias Haemophilus fermentan no fermentan oxidasa ++

(oxid ++) Brucella lactosa lactosa
Bordetella Vibrio
Campylobacter
Helicobacter
maltosa E. coli oxidasa
++ -- Klebsiella -- ++
N. gonorrhoeae Enterobacter
N.meningitidis Serratia Salmonella Pseudomonas
Otras Shigella
Proteus
ALGORITMO PARA IDENTIFICACIN DE GRMENES GRAMPOSITIVOS
Cocos Bacilos Bacilos

Filamentosos
Corynebacterium
Catalasa Listeria Actinomyces
++ -- Bacillus (anaerobios)
Staphylococcus Clostridium (anaerobios)
Nocardia
Streptococcus (aerobios
hemlisis
alfa beta gamma
S. neumoniae S. pygenes Enterococcus

(optochin S) (bacitracina S)
S. viridians S. agalactiae Peptoestreptococcus
(optochin R) otros St. (anaerobio)
9
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 2
FISIOLOGA Y GENTICA BACTERIANA
_______________________________________________________________
FISIOLOGA BACTERIANA
El conocimiento de la fisiologa microbiana deviene del estudio de lneas celulares aisladas

que crecen en condiciones ptimas; en cambio, en el medio ambiente natural los microorganismos
compiten para mantener su nicho ecolgico y probablemente su estado fisiolgico sea distinto.
En la prctica se evala el comportamiento fisiolgico de una poblacin bacteriana uniforme, con
un mismo origen denominada cepa, que se expresa por el crecimiento y multiplicacin de la
bacteria.
A. CRECIMIENTO BACTERIANO
Para que una bacteria realice los procesos de biosntesis y pueda reproducirse, debe encontrar
en el medio ambiente que la rodea, alimentos energticos, alimentos constitutivos, y condiciones
fsico qumicas compatibles con la vida de dicha bacteria, que favorecen su multiplicacin.
1. Alimentos energticos: las bacterias que son comensales para el hombre toman la energa
necesaria para la biosntesis a partir de los procesos de oxido-reduccin de un sustrato
orgnico, por lo que se les denomina microorganismos quimiotrofos. El agente reductor
(donador de electrones), generalmente es un azcar, un aminocido o un cido orgnico.
2. Alimentos constitutivos: son las sustancias fuentes de carbono, de nitrgeno y de minerales
en estado inico (fosfato, sulfato, calcio, cloro, sodio, hierro, etc.). Si la bacteria obtiene el
carbono a partir de una molcula orgnica se dice que es heterotrofa; en cambio, si lo obtiene
a partir del CO2 ambiental se le denomina autotrofa.
3. Alimentos especficos: muchas bacterias son capaces de crecer con alimentos simples y se les
dice prototrofas, es decir son capaces de sintetizar todas las enzimas y los metabolitos
esenciales para su crecimiento. Sin embargo, ciertas cepas salvajes o mutantes prototrofas,
son incapaces de sintetizar algn metabolito esencial, por lo tanto, no podrn crecer si en el
medio ambiente que las rodea no est presente dicho metabolito indispensable o factor de
crecimiento, y se les denomina cepas auxotrofas.
4. Factores fsico qumicos: para la mayora de bacterias de inters mdico, la temperatura
ptima para el desarrollo in vitro es de 37C, y se les denomina mesfilas (20C a 45C). Hay
excepciones como Campylobacter jejuni, Pseudomonas aeruginosa y Pasteurella pestis, que
desarrollan tambin a 42C, o el caso de Bartonella bacilliformis que lo hace a 29C.
Los sistemas enzimticos de la mayora de bacterias funcionan a pH alrededor de 7.0, por ello
para el desarrollo in vitro, los medios de cultivo deben contener tampones que regulen los
cambios bruscos del pH.
La concentracin de solutos que ejercen presin osmtica en el medio que rodea a las
bacterias, es similar a la del ser humano, con excepcin de las bacterias de origen marino, que
10
FAMURP
Microbiologa
soportan concentraciones hasta diez veces superiores de cloruro de sodio, llamadas bacterias
haloflicas.
La mayora de bacterias requieren para su desarrollo la presencia de oxgeno como aceptador
final de electrones, y se les denomina aerobias. En cambio hay un grupo de bacterias que no
pueden realizar la fosforilacin oxidativa, son las anaerobias estrictas, incluso el oxgeno les es
letal porque carecen de las enzimas peroxidasa, catalasa y superxido dismutasa. Hay un
grupo de bacterias aerotolerantes, a las que el oxgeno no les es perjudicial y desarrollan tanto
en aerobiosis como en anaerobiosis.
B. CRECIMIENTO BACTERIANO EN MEDIO LQUIDO
El uso de medios de cultivo lquidos tiene por finalidad incrementar la poblacin inicial de
una cepa bacteriana. El desarrollo bacteriano se aprecia por turbidez del medio lquido, que es
proporcional a la masa bacteriana y puede ser cuantificado midiendo la luz absorbida en un
espectrofotmetro (que mide la densidad ptica de una solucin).
Cuando experimentalmente se inocula una bacteria en un volumen definido de medio

lquido, luego de un tiempo de incubacin, se apreciar la presentacin de turbidez, que va en
incremento conforme avanza el tiempo y dibuja una curva llamada curva de desarrollo
bacteriano. En las dos primeras horas de iniciado el proceso, la poblacin bacteriana se mantiene
constante, llamada fase de latencia. Luego viene una etapa en que la bacteria se multiplica en
forma exponencial, en esta etapa se puede calcular la tasa de crecimiento o tiempo de
multiplicacin, ya que la bacteria se multiplica en forma constante en razn del tiempo.
Posteriormente cuando se agotan los nutrientes, el nmero de bacterias viables es constante,
denominndole fase estacionaria. Por ltimo el medio se acidifica, se incrementan los desechos
metablicos y el nmero de bacterias viables disminuye, es la fase de declinacin.
11
FAMURP
Microbiologa
C. CRECIMIENTO BACTERIANO EN MEDIO SLIDO
Los medios de cultivo slidos se logran aadiendo agar al medio lquido, lo que ofrece una
serie de ventajas en la identificacin de las bacterias. La siembra por dispersin permite la
formacin de colonias en la superficie del medio; cada colonia independiente constituye un clon
puro, formado por clulas todas provenientes de la misma bacteria y que poseen por lo tanto el
mismo patrimonio hereditario y las mismas caractersticas fisiolgicas.
Los grmenes formarn colonias con caractersticas propias a cada gnero o especie, en
relacin al tamao, opacidad, bordes, elevacin, superficie, pigmento, etc., elementos que son
tiles para la identificacin. Al agregar sustancias qumicas, colorantes o antibiticos en el medio
de cultivo slido, se obtienen los medios selectivos para determinado grupo bacteriano, de gran
utilidad en el diagnstico clnico, porque facilita la identificacin del patgeno.
D. METABOLISMO
En los procesos de sntesis, las clulas bacterianas deben formar subunidades, que luego
se constituyen en macromolculas bsicas (cidos nucleicos, polisacridos y lpidos), las que en
presencia de elementos constitutivos y energa se ensamblan en estructuras definidas de la clula
bacteriana como ribosomas, membrana, pared, etc.
La glucosa 6 fosfato es la subunidad base precursora de los carbohidratos: triosas,

pentosas, hexosas y polisacridos. As mismo las triosas, con la participacin de la coenzima
nicotinamida del cido dinucletido, formarn la triosa fosfato, necesaria para la construccin de
ciertos aminocidos. La mayora de los aminocidos tienen como origen al fosfoenol piruvato; y el
nitrgeno necesario lo obtienen a partir del amonio (NH4). Las subunidades cido graso y glicerol,
necesarias para la sntesis de lpidos, utilizan como precursores a la acetil coenzima A y la
dihidroxil acetona fosfato respectivamente.
En los procesos metablicos de descomposicin, catabolismo, las sustancias qumicas

generan energa. En la degradacin de los carbohidratos se utilizan tres vas: a) Gluclisis:
mediante la cual se genera piruvato y molculas de ATP y NADH. b) Ciclo de pentosas: que genera
precursores metablicos como gliceraldehido fosfato, ribosa fosfato y eritrosa fosfato. y c) Ciclo
tricarboxilo: que produce ATP por fosforilacin oxidativa. Otros compuestos orgnicos se
destruyen por la accin enzimtica especfica, como las disacaridasas, amilasas, lipasas, y las
proteasas que rompen los enlaces peptdicos, reutilizando luego el grupo amino.
En el anabolismo bacteriano se habla de respiracin aerbica, cuando al final del proceso

de xido reduccin, los electrones excedentes son recibidos por el oxgeno molecular. En cambio,
de respiracin anaerbica, cuando el receptor final de electrones es un compuesto qumico
inorgnico (nitrato o sulfato). Para algunas bacterias el oxgeno no les es til, incluso puede ser
txico, y utilizan como receptor final de electrones a un compuesto orgnico: el piruvato; a este
proceso se le denomina fermentacin, de gran utilidad, ya que los productos qumicos que se
generan son cidos orgnicos (lctico, butrico, propinico), o alcoholes (etlico, butanodiol, etc.).
12
FAMURP
Microbiologa
GENTICA BACTERIANA
El tamao pequeo de las bacterias y la rapidez de su reproduccin (cada 10 a 30

minutos), son condiciones que las bacterias disponen para formar, en espacios reducidos y en
poco tiempo, grandes poblaciones. Situacin muy favorable para observar in vitro la aparicin de
cambios en las nuevas generaciones bacterianas, los que pueden ser fenotpicos o genotpicos.
Replicacin: Las bacterias tienen una replicacin semiconservadora y bidireccional. El proceso

sucede en tres etapas: iniciacin, elongacin y terminacin. La enzima ADN polimerasa facilita el
aadido de los ribonucletidos, con participacin de la topoisomerasa e helicasa. Las bacterias no
poseen intrones.
Las bacterias en el medio ambiente realizan cambios continuos, con la finalidad de

adaptarse con rapidez y competir con otras bacterias en el nicho ecolgico; a estas modificaciones
se les denomina variaciones fenotpicas, que son el resultado de la activacin o restriccin de
determinados genes, haciendo cambios reversibles, inestables y no hereditarios. Otros cambios
obedecen a mutaciones o variaciones genotpicas, que producen modificaciones bruscas de un
carcter, transmisible hereditariamente, creando un individuo diferente, que se distingue del tipo
normal o salvaje. Los descendientes constituyen un nuevo clon.
A. LAS MUTACIONES
La mutacin es un cambio en la secuencia de las bases nitrogenadas del ADN de la

bacteria. Si el cambio producido corresponde a uno o varios nucletidos y no conduce a ninguna
modificacin observable, se trata de una mutacin silenciosa. Pero cuando el cambio es ms
profundo y compromete a un aminocido, da como resultado la formacin de una protena no
funcional, que conduce a una bacteria dependiente de dicho aminocido, denominndole
bacteria auxotrofa. En la literatura se le consigna con un signo negativo. Ejemplo: dependiente
del aminocido triptfano: Trp-.
1. Mutacin espontnea: ocurre en el ambiente natural, al azar y con una frecuencia

caracterstica para cada grupo bacteriano, que puede ser en el rango de 10-7 a 10-12., a lo
que se denomina tasa de mutacin. En raras ocasiones el nucletido retorna a su estado
original, este cambio se llama reversin. La mutacin ms comn es el resultado de un
error en la sntesis del ADN al incorporar una base incorrecta, llamado sustitucin de
bases. Si slo se cambia un par de bases, se denomina mutacin puntual. Puede haber
tambin deleccin o adicin de nucletidos que modifica el marco de lectura, de manera
que la protena sintetizada ser incompleta o no funcional.
2. Mutaciones inducidas: cuando las bacterias son sometidas a la accin de sustancias
qumicas mutgenas o radiaciones, stas pueden incrementar la tasa de mutacin. En
gentica experimental se utiliza la bacteria Escherichia coli para ampliar los conocimientos
metablicos y propiedades de los microorganismos, estudios que dieron nacimiento a la
biotecnologa. Las sustancias qumicas con propiedades mutgenas son los agentes
13
FAMURP
Microbiologa
alquilantes, que alteran las purinas y pirimidinas, o los agentes intercalantes como el
bromuro de etidio. Las radiaciones ultravioletas y los rayos X producen alteraciones y
rupturas de los enlaces peptdicos.
En la prctica mdica, durante el proceso de terapia antibitica, se eliminan las bacterias

susceptibles al antibitico empelado; pero indirectamente se seleccionaron (no mueren) las
bacterias que mutaron espontnemente, con cambios en el aminocido o protena objetivo del
antibitico. Se crea as una bacteria mutante resistente a la terapia antibitica empleada. Ejemplo:
bacterias del mbito hospitalario resistentes a los antibiticos aminoglucsidos.
B. TRANSFERENCIA DE GENES
Es comn entre las bacterias el intercambio de material gentico, lo que permite la

aparicin de cepas nuevas con comportamientos diferentes. Este intercambio puede ser
beneficioso para la bacteria que recepciona los genes, sobre todo cuando le otorgan cambios en el
mecanismo de resistencia a los antibiticos. Ejemplo: bacterias hospitalarias multiresistentes. La
fraccin de ADN transferido puede integrarse al cromosoma de la bacteria receptora o
mantenerse libre en el citoplasma como un elemento extra cromosmico.
Los plsmidos son molculas circulares bicatenarias de ADN, que contienen entre 1,5 a
400 kpb., no son indispensables para la vida de la bacteria. La informacin que ellos transmiten le
otorgan diferencias a la bacteria, ejemplo: metabolizacin de sustratos, produccin de toxinas,
resistencia a los antibiticos, etc.
Los transposones son secuencias de ADN muy pequeas de 150 a 1.500 pares de bases,
que pueden transferir ADN de una posicin a otra del genoma bacteriano o entre distintas
molculas de ADN. Algunos transposones pueden insertarse dentro de los genes e inactivar sus
funciones.
Los bacterifagos o fagos, son virus que infectan a las clulas bacterianas. En su forma
infecciosa se replican dentro de ellas hasta producir lisis celular y los nuevos bacterifagos
infectaran nuevas bacterias. Otras veces, los fagos denominados temperados, infectan a las clulas
bacterianas pero sin producir lisis celular, se integran al cromosoma bacteriano creando un estado
denominado lisognico. Cada cierto tiempo los fagos temperados se liberan del cromosoma
bacteriano, se replican y lisan las clulas, esta situacin puede ser inducida por las radiaciones
ultravioletas.
Tres son los mecanismos que utilizan las bacterias para transferirse el material genrico:
transformacin, transduccin y conjugacin-
1. Transformacin: descrito por Griffith en 1928, mediante el cual una bacteria incorpora a
su cromosoma fragmentos de ADN desnudo, provenientes de bacterias cuya pared se ha
14
FAMURP
Microbiologa
destruido. Muchas bacterias grampositivas (Streptococcus pneumoniae) y gramnegativas

(Haemphilus influenzae y Neisserias) son capaces de captar y conservar el ADN en
forma estable integrado, adquiriendo nuevas propiedades. Ejemplo: resistencia del
neumococo a la penicilina.
2. Transduccin: en ste mecanismo participa un bacterifago, el cual cuando infecta a la
bacteria husped e inicia el proceso de replicacin, capta fragmentos del ADN de la
clula husped y los almacena en su interior. El nuevo fago liberado al medio ambiente
al infectar nuevas clulas bacterianas suministra su ADN ms fragmentos del ADN de la
bacteria husped anterior, luego ste es incorporado al genoma de la nueva bacteria
infectada. Se denomina transduccin especializada cuando el fago transfiere algunos
genes especficos; en cambio, generalizada cuando transfiere fragmentos del genoma
bacteriano husped. Este mecanismo es muy comn en una gran variedad de bacterias.
Ejemplo: produccin de la toxina del clera, de la toxina eritrognica del S. pygenes.
3. Conjugacin: es el mecanismo de transferencia gentica reportado por Lederberg en el

ao 1946, en el que se requiere contacto entre bacterias de la misma especie o
relacionadas. Para ello la bacteria que dona el ADN (bacteria macho) debe poseer el
plsmido F (fertilidad), que codifica pili sexual, filamento tubular que sirve para
acoplarse a la clula receptora (bacteria hembra). El plsmido F es un ADN circular
monocatenario, ubicado en el citoplasma bacteriano, que tiene los genes necesarios
para transferirse por s solo a otra clula, y convertirla en una nueva bacteria macho (F+).
Cuando el plsmido F se encuentra integrado en el cromosoma de la bacteria donante,
se denomina Hfr (alta frecuencia de fertilidad), y permite transferir porciones del
cromosoma de la bacteria donante. Este concepto bsico permiti conocer la carta
gentica o ubicacin de los genes en el cromosoma de las bacterias.
La conjugacin es un ejemplo de la transferencia de genes (de virulencia o resistencia a
los antibiticos) en forma horizontal a otras bacterias, formando nuevas poblaciones
bacterianas en un nicho ecolgico determinado.
15
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 3
ANTIBACTERIANOS: AGENTES FSICOS, QUMICOS Y ANTIBITICOS
_______________________________________________________________
ANTIBACTERIANOS
Los procedimientos fsicos, como la temperatura, radiaciones o filtracin, se utilizan para

eliminar las bacterias de un material determinado; propiedad muy utilizada en medicina para
obtener la esterilidad del material mdico empleado en ciruga, en procedimientos invasivos, o en
insumos del laboratorio. As mismo, se cuenta con numerosas sustancias qumicas con actividad
antimicrobiana, empleadas para eliminar las bacterias presentes en instrumentos y en la superficie
contaminada de la piel, y as evitar infecciones iatrognicas.
A.CONCEPTOS
1. Estril: ausencia total de microorganismos en un medio definido.

2. Esterilizacin: procedimiento por el cual se consigue la destruccin total de los
microorganismos de un medio determinado
3. Desinfeccin: la destruccin de los microorganismos ubicados en medios inertes, capaces de
producir infeccin, empleando procedimientos fsicos o qumicos.
4. Antisptico: soluciones de uso tpico que disminuyen el nmero de bacterias e impiden la
infeccin (prevencin de infeccin).
B.AGENTES FSICOS
Los agentes fsicos ms empleados en medicina para destruir a los microorganismos son el
calor, la filtracin y las radiaciones.
Las temperaturas elevadas destruyen a los microorganismos por desnaturalizacin de las

protenas, desecacin, y toxicidad debido a la elevada concentracin de los electrolitos. El calor
seco aplicado en los hornos, a la temperatura de 180C durante una hora, se utiliza para esterilizar
material metlico y de vidrio. El calor hmedo, (bao mara) destruye rpidamente las enzimas de
las bacterias mesfilas a 60C durante una hora, y toda forma vegetativa a 80C durante 10
minutos. Con la finalidad que se preserven las protenas de los alimentos lcteos se utiliza la
pasteurizacin, en la que se eleva la temperatura a 62C durante 30 minutos, seguido de
enfriamiento rpido; con lo que se obtiene la destruccin de formas vegetativas bacterianas, como
M. tuberculosis y Brucella sp. (en otros alimentos se utiliza temperatura de 72C durante 15
segundos u 82C durante 20 segundos). El procedimiento que garantiza la destruccin de toda
forma microbiana, incluso de las esporas, es el calor hmedo a presin o autoclave; que se
consigue luego de 15 minutos de exposicin a una presin de 15 libras por pulgada cuadrada con
la que se obtiene 121 C.
Para la esterilizacin de lquidos o sustancias orgnicas lbiles al calor, es recomendable

tamizar el producto a travs de filtros. Los filtros son muy antiguos en su uso, existiendo de
16
FAMURP
Microbiologa
diversa composicin, as: de tierra (Chamberland), de porcelana (Berkefeld), de asbesto (Seitz) y

los sintticos (Millipore). Actualmente se dispone de membranas porosas con diversos dimetros
de poro; se emplean los de 0,45 m a 0,22 m. Debe tenerse en consideracin que los virus, por
su pequesimo tamao (milsima de micra), atraviesan los filtros.
Las radiaciones de longitud de onda en el rango del ultravioleta (inferior a 300 nm), al ser
absorbida por las clulas generan excitacin de los electrones e inhiben la sntesis del ADN. La luz
solar tiene un contenido de radiaciones ultravioleta (260 nm) con accin bactericida. Las lmparas
de mercurio al estar incandescentes liberan radiaciones UV, y son utilizadas con la finalidad de
esterilizar ambientes, como salas de operaciones, cubculos de siembra en el laboratorio y
superficies diversas. As mismo, hay que tener en cuenta que durante su uso, hay riesgo potencial
de lesin a nivel de la retina. Las radiaciones gamma tambin son utilizadas en la industria
alimentaria por tener mayor capacidad de penetracin.
C.AGENTES QUMICOS
Son numerosos los agentes qumicos con accin antibacteriana, los de utilidad para uso
humano no deben tener toxicidad. El efecto depende de variables como: la concentracin del
compuesto, el tiempo de exposicin, la temperatura, el pH, y la presencia de materia orgnica,
que modifican la actividad del compuesto qumico.
Las sustancias qumicas antibacterianas pueden clasificarse de acuerdo al nivel de accin

en la clula bacteriana, as: A) Las que actan a nivel de la membrana citoplasmtica como el
amonio cuaternario (jabones de cloruro de benzalconio), cationes tensioactivos, compuestos
fenlicos (hexaclorofeno) y alcoholes (etlico a 70, isoproplico); B) Las que desnaturalizan las
protenas, como los cidos, lcalis, alcoholes y solventes orgnicos y, C) Las que alteran los grupos
funcionales de las protenas, como metales pesados, halgenos (Cloro, Yodo), colorantes (azul de
metileno), agua oxigenada, formaldehido (glutaraldehido) y xido de etileno (gas para
instrumentos).
Otro enfoque en la clasificacin de los desinfectantes es por el grado de accin. As, se

consideran de alto grado, los que se utilizan para desinfectar instrumentos invasivos
(endoscopios): glutaraldehido, formol y perxido de hidrgeno. Los de grado medio, que se
emplean para instrumentos de uso semicrtico (laringoscopio): alcoholes y yodados. Por ltimo los
de grado bajo, tiles para desinfectar superficies diversas: amonio cuaternario.
D.ANTIBITICOS
La era del tratamiento de los procesos infecciosos con el uso de sustancias qumicas se
inicia en el ao 1935 con el Prontosil, sustancia que al ingresar a nuestro organismo es
metabolizada y se convierte en sulfanilamida, de accin antimicrobiana. Posteriormente,
Alexander Fleming demuestra que sustancias sintetizadas por algunos microorganismos tienen la
capacidad de impedir el crecimiento de otros microorganismos. El primer antibitico desarrollado
fue la Penicilina, inicindose su uso en humanos en 1941. Luego se desarrollaron, con rapidez,
17
FAMURP
Microbiologa
numerosas sustancias con accin antimicrobiana, y es a partir del los aos 60, que los cientficos
alteran la estructura qumica de los frmacos, obteniendo sustancias semisintticas, con nuevas
propiedades farmacolgicas benficas para el paciente.
Los antibiticos se pueden clasificar en dos categoras, los bacteriostticos, que impiden la
multiplicacin de las bacterias, y los bactericidas que las destruyen. La conveniencia de utilizar
uno u otro ante un proceso infeccioso, lo determinar el conocimiento clnico. En sta seccin se
describirn los mecanismos de accin de los antibiticos, agrupndolos en cinco categoras, de
acuerdo a la zona de accin dentro de la bacteria:
1. Inhiben la sntesis de la pared celular

2. Alteran la funcin de la membrana citoplasmtica
3. Inhiben la sntesis de protenas
4. Inhiben la sntesis del cido nucleico
5. Inhiben vas metablicas
1. Inhiben la sntesis de la pared celular
El componente principal de la pared bacteriana es el peptidoglucano, estructura formada

por polmeros de molculas de N acetilglucosamina y N acetilmurmico, unidas por puentes
peptdicos, que le dan rigidez a la cubierta. Unas proteasas catalizan la formacin de las cadenas y
de los puentes peptdicos, denominadas protenas de unin a la penicilina (PBP).
El grupo de antibiticos cuya estructura qumica bsica es el anillo -lactmico, incluye a

las Penicilinas, Cefalosporinas, Carbapenmicos, Monobactams y Cefaminas; todos comparten un
mecanismo similar de accin, cual es unirse a las proteasas (PBP) mientras la bacteria se encuentra
en proceso de reproduccin, e inhibir la formacin de los puentes entre las cadenas de los
polmeros. Esta alteracin de la biosntesis de la pared conduce a la lisis celular, por lo tanto los -
lactmicos son bactericidas y slo son efectivos cuando las bacterias estn en crecimiento.
Penicilinas:
a. Penicilinas naturales. Son producidas a partir del hongo Penicillium chrysogenum.

Penicilina G, de uso parenteral y Penicilina V de uso oral. Ambas son inactivadas por la
enzima beta lactamasa (penicilinasa), que destruye el anillo -lactmico y transforma a
estas bacterias en resistentes a las penicilinas.
b. Penicilinas resistentes a la penicilinasa. Son modificaciones qumicas de los radicales
del anillo -lactmico, que las convierte en resistentes a la enzima penicilinasa. Incluye
a la Meticilina, Oxacilina, Nafcilina.
c. Penicilinas de amplio espectro. Las cadenas laterales de la penicilina han sido
modificadas, lo que les confiere actividad contra bacterias grampositivas y
gramnegativas. Son tambin inactivadas por beta lactamasas. Incluye a la Ampicilina y
Amoxicilina.
18
FAMURP
Microbiologa
d. Penicilinas de espectro extendido. Estas tienen especial actividad contra bacilos

gramnegativos, como las Pseudomonas. Pueden ser destruidas por algunas beta
lactamasas. Incluye a la Ticarcilina y la Piperacilina.
e. Penicilinas + Inhibidor de penicilinasa. Sustancias qumicas como el sulbactam, cido
clavulnico y tazobactam, tienen la propiedad de unirse en forma irreversible con la
enzima beta lactamasa, inactivndola. Al asociar ste producto con una ampicilina o
ticarcilina, se devuelve a la penicilina la actividad de alterar la sntesis de la pared.
Cefalosporinas: Las primeras cefalosporinas fueron aisladas a partir del hongo Cephalosporium
acremonium, resisten a muchas beta lactamasas. La estructura qumica ha sido modificada en el
laboratorio y se han obtenido mejores propiedades farmacolgicas, dando origen a varias
generaciones:
a. Primera generacin o de espectro reducido: Cefalotina, Cefalexina, Cefradina. De uso

contra algunos cocos grampositivos, as como para Escherichia coli.
b. Segunda generacin o de espectro ampliado: Cefaclor, Cefoxitina, Cefuroxima. Se
emplea contra Haemphylus influenzae y Enterobacterias.
c. Tercera generacin o de amplio espectro: Cefotaxima, Ceftazidima, Ceftriaxona,
Cefixima. De uso por va parenteral y con la capacidad de ingresar a lquido cfalo
raqudeo.
d. Cuarta generacin o de mximo espectro: Cefepime. Con actividad para gram
negativos, en especial Pseudomonas aeruginosa.
Carbapenems: presentan resistencia a la mayora de las beta lactamasas, por lo que son tiles en
infecciones por diversas bacterias. Se dispone del Imipenem y del Meropenem.
Monobactams: es resistente a la beta lactamasa y tiene sinergismo con los aminoglucsidos. No es

til para los anaerobios ni para los grmenes grampositivos. El aztreonam se emplea en
infecciones por enterobacterias muy resistentes.
Glucopptidos: antimicrobianos que actan inhibiendo la sntesis de los peptidoglucanos, pero a

nivel del extremo de la D-alanina, provocando una interferencia estrica de la molcula N-
acetilmurmico e impidiendo as la formacin de la pared celular, estn representados por la
Vancomicina. Este antimicrobiano provienen del hongo Streptomyses orientalis, se utiliza para el
tratamiento de infecciones por estafilococo productor de beta lactamasa. La molcula no atraviesa
la membrana externa de los gramnegativos, por lo tanto no debe emplearse en ellos.
Polipptidos: provenientes del Bacillus licheniformis, constituyen la Bacitracina, que interfieren

con el transporte de los precursores del peptidoglucano, as mismo, pueden inhibir la transcripcin
del cido ribonucleico. Slo tienen utilidad tpica.
Ciclocerina: es un anlogo de la D-alanina, por lo que interfiere la formacin del polipptido de la

pared bacteriana. til en el tratamiento de las micobacterias.
19
FAMURP
Microbiologa
Isoniazida y Ethambutol: bloquean la formacin de cido miclico de la pared de las micobacterias.
La resistencia bacteriana a los -lactmicos se produce por tres mecanismos: A) Alteracin de la

zona diana, por sntesis de PBP con poca afinidad por los -lactmicos. B) Alteracin del acceso al
objetivo, por cambio de la permeabilidad de las porinas de los gramnegativos, y C) Produccin de
la enzima beta lactamasa, que catalisa la hidrlisis del anillo -lactmico (codificado por plsmidos
o cromosoma).
2. Alteran la funcin de la membrana citoplasmtica
Las sustancias qumicas que actan a este nivel alteran la permeabilidad de la membrana
citoplasmtica, permitiendo la salida de los componentes endocelulares, lamentablemente estas
sustancias tambin se unen a las clulas eucariotas, por lo que se limitan a uso tpico.
El Bacillus polymyxa genera los polipptidos denominados polimixina B y polimixina E o

colistina, de gran utilidad como uso tpico en infecciones ticas y oculares. La colistina se puede
utilizar en infecciones sistmicas a gramnegativos multiresistentes.
Los polienos, pertenecen al grupo de los macrlidos, y se utilizan fundamentalmente en el

tratamiento de infecciones micticas, ya que se unen al ergosterol, componente de la membrana
citoplasmtica de los hongos, destruyendo su capacidad osmtica. A este grupo pertenecen la
Anfotericina B, de uso parenteral, y la Nistatina, de uso tpico y oral
3. Inhiben la sntesis de protenas
La actividad de estos productos se fundamenta en la accin directa sobre la estructura de

los ribosomas, subunidad 30S (aminoglucsidos y tetraciclinas) y 50S (macrlidos, cloranfenicol,
lincosamidas, oxazolidonas y estreptograminas).
a. Aminoglucsidos: los primeros (Streptomicina, Kanamicina, Neomicina y Tobramicina)

tienen como origen a especies del hongo Streptomyces, y la Gentamicina, del hongo
Micromonospora. La industria ha sintetizado a la Amikacina, Netilmicina y Sisomicina.
Los aminoglucsidos son transportados en forma activa a la clula bacteriana hasta llegar
al citoplasma, este proceso requiere metabolismo aerbico; luego se une en forma
irreversible a la sub unidad 30S del ribosoma, hecho que ocasiona una lectura errnea del
ARN mensajero, produciendo protenas anmalas, por lo que son bactericidas. Su uso est
dirigido a infecciones producidas por bacilos gramnegativos. Son inactivos para los
grmenes anaerobios.
Las bacterias adquieren resistencia por tres mecanismos: A) por mutacin del receptor en
el ribosoma, B) por destruccin enzimtica del frmaco, transferido por un plsmido, y C)
por ausencia de permeabilidad o falta de transporte activo, debido a una mutacin
cromosmica o codificacin por plsmido.
b. Tetraciclinas: las primeras tetraciclinas se obtuvieron a partir de especies ambientales de
Streptomyces, las ltimas, de accin retardada, son modificaciones semisintticas. El
20
FAMURP
Microbiologa
antibitico se une de manera reversible a la sub unidad 30S del ribosoma, bloqueando la
unin al ARN de transferencia. Las tetraciclinas se acumulan dentro de la clula bacteriana
y son bacteriostticos. Se utiliza en diversas infecciones, pero en especial en infecciones
por grmenes de vida intracelular como Rickettsia y Chlamydia. Las de uso actual son la
tetraciclina, doxiciclina y minociclina.
La resistencia de las bacterias a las Tetraciclinas est bajo el control de plsmidos
transferibles, que hace que no se concentre el antibitico, expulsndolo por eflujo.
c. Macrlidos: el producto representativo es la Eritromicina y tiene como origen el
Streptomyces erythreus, las modificaciones de la molcula han creado a la Acitromicina y
la Claritromicina, que tienen un tiempo de vida ms prolongado. Los macrlidos se unen
de manera reversible a la sub unidad 50S e impiden la elongacin de los polipptidos. Son
bacteriostticos y se emplean en infecciones de vas respiratorias.
La resistencia bacteriana a los macrlidos se produce cuando hay un cambio, por
metilacin, del receptor en el ARN, proceso codificado por un plsmido transferible.
d. Cloranfenicol: se obtiene del microorganismo Streptomyces venezuelae, tiene una
actividad similar a las tetraciclinas, se une de manera reversible a la peptidil transferasa de
la sub unidad 50S impidiendo la elongacin peptdica. Es bacteriosttico para la mayora
de las bacterias; aunque a las dosis usuales en infecciones menngeas por neumococo o
meningococo se comporta como bactericida.
Las bacterias que hacen resistencia al cloranfenicol son productoras de la enzima acetil
transferasa, que destruye el antibitico y se codifica por un plsmido.
e. Lincosamidas: aisladas del Streptomyces lincolnensis, inhibe la elongacin de las protenas
al unirse al ribosoma 50S, inhibiendo a la enzima peptidil transferasa. La modificacin
qumica da origen a la Clindamicina, con mejores capacidades farmacolgicas. Es activa
para cocos grampositivos y bacilos gramnegativos anaerobios. Carece de actividad para
bacilos gramnegativos aerobios.
f. Oxazolidonas: antibiticos preparados por sntesis orgnica, que interfieren el inicio de la
sntesis proteica en el ribosoma 50S. Su mecanismo de accin exclusivo no permite la
existencia de resistencia cruzada con otros inhibidores de la sntesis proteica. La Linezolide
representa a este grupo y su uso se reserva para infecciones por cepas de enterococo
multiresistentes.
g. Estreptograminas: son pptidos cclicos producidos por el gnero Streptomyces. Las dos
molculas, quinupristina y dalfopristina, actan en forma sinrgica unindose en forma
irreversible en diferentes sitios de la sub unidad 50S; la primera molcula inhibe la
elongacin peptdica, mientras que la segunda interfiere directamente a la peptidil
transferasa. Este antibitico combinado es bactericida, denominado Synercid, su uso est
restringido para bacterias grampositivas resistentes a beta lactmicos y vancomicina.
h. Nitrofurantoina: es un compuesto sinttico, que al producir reduccin enzimtica se
generan derivados con capacidad de ligarse a las protenas del ribosoma y bloquean la
traduccin. A dosis normales alcanza concentraciones elevadas en el tejido renal y en la
orina, por lo que se utiliza casi exclusivamente en infecciones del tracto urinario.
21
FAMURP
Microbiologa
4. Inhiben la sntesis del cido nucleico
Las enzimas que participan en la sntesis del cido nucleico son bloqueadas por este grupo de
antimicrobianos, luego son bactericidas, entre los que se seala a las quinolonas,
fluoroquinolonas, rifampicinas y metronidazol.
a. Quinolonas: de origen sinttico, actan inhibiendo las enzimas topoisomerasas (girasa),

encargadas de mantener el superenrollado circular del ADN dentro de la clula bacteriana.
El cido nalidxico fue la primera quinolona; las nuevas son modificaciones qumicas que
han dado origen a las fluoroquinolonas (ciprofloxacino, levofloxacino, ofloxacino), con
actividad contra bacterias grampositivas, gramnegativas y micobacterias.
La resistencia a las quinolonas se produce por mutacin cromosmica de la bacteria,
pudiendo ocasionar: a) alteracin de la enzima ADNgirasa, o b) cambio en la
permeabilidad de la membrana externa.
b. Rifampicina: son derivados semisintticos de sustancias producidas por el Streptomyces
mediterranei, que bloquean la polimerasa del ARN de los procariotes al inicio de la
transcripcin. Tienen actividad bactericida para grmenes grampositivos como
gramnegativos, as como contra las micobacterias. Se emplea para el tratamiento de la
tuberculosis y lepra, y para la prevencin en personas expuestas a Neisseria meningitidis.
c. Metronidazol: sustancia qumica que al ingresar a la bacteria reduce su grupo amino, lo
que genera metabolitos txicos que alteran la integridad del ADN bacteriano. El
metronidazol es de utilidad para el tratamiento de infecciones por grmenes anaerobios.
5. Inhiben vas metablicas
a. Sulfonamida: El sustrato de las bacterias para construir el cido flico, es el cido para
aminobenzoico (PABA), estructuralmente similar a la sulfonamida. Luego sta se une a la
dihidropteroato sintetasa y se produce un compuesto anlogo no funcional de cido
flico, que la bacteria no puede utilizar y el crecimiento bacteriano se detiene. El
comportamiento de la sulfonamida es de tipo bacteriosttico. Las clulas de los animales
no sintetizan cido flico luego no son afectadas por este mecanismo.
b. El trimetoprim es un metabolito que inhibe la enzima dihidro folato reductasa,
dificultando la sntesis de purinas. La combinacin con el sulfametoxazol forma un
compuesto con actividad sinrgica, que acta en dos etapas de la sntesis de cido flico.
La asociacin es empleada con xito contra diversas infecciones, principalmente las de vas
urinarias.
c. El cido para amino saliclico (PAS): acta por inhibicin competitiva de la pteridin
sintetaza para la formacin de cido nucleico, se emplea en el tratamiento de la
tubreculosis.
22
FAMURP
Microbiologa
NIVEL DE ACCIN DE LOS ANTIBITICOS EN UNA CLULA BACTERIANA
2 3
5 6
N Zona de Accin Antibitico

1 Pared celular
2 Membrana citoplasmtica
3 Replicacin (ADN girasa)
4 Transcripcin(ADN poilimerasa)
5 Ribosoma 30 S
6 Ribosoma 50 S
7 Inhibicin competitiva del
metabolismo
23
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 4
RELACIN HUSPED MICROORGANISMO. PODER PATGENO
_______________________________________________________________
RELACIN HUSPED MICROORGANISMO
Los microorganismos que residen en nuestro cuerpo, sea en la piel, mucosas o tubo
digestivo, constituyen la flora microbiana normal y son saprofitos. Ellos viven de los productos
terminales de los compuestos orgnicos y aseguran el ciclo biolgico del carbono y del nitrgeno.
Estos grmenes han adquirido propiedades que les permite permanecer por largo tiempo en
determinadas reas o nichos, protegiendo al husped de la colonizacin por grmenes patgenos;
tal es caso de la Escherichia coli en el colon o el Lactobacillus acidphilus en el canal vaginal,
constituyendo la flora residente.
Hay situaciones del husped que lo hacen vulnerable, de tal manera, que las bacterias que
constituyen la flora normal del cuerpo y las del medio ambiente aprovechan esta condicin para
desarrollar enfermedad, por lo que se les denomina patgenas oportunistas. Es el caso de la
infeccin de quemaduras o escaras de decbito producidas por Pseudomonas aeruginosa.
La enfermedad infecciosa es el resultado del dao producido en un tejido u rgano,

ocasionado por una cepa bacteriana portadora de atributos de patogenicidad. Muchos factores
determinantes del rol patgeno de una cepa bacteriana estn contenidos en los genes del
cromosoma, de un plsmido o de un bacterifago; los que generan sustancias qumicas causantes
de alteraciones en clulas del husped, u ocasionan cambios en el comportamiento de las
bacterias frente a los sistemas de defensa del husped. El inculo o cantidad de bacterias que
ingresan al organismo para producir enfermedad es variable, por ejemplo, bastan 200 bacterias
de Shigella para ocasionar colitis; en cambio, para infecciones con Vibrio cholerae o
Campylobacter se necesitan cantidades superiores a 108 microorganismos.
A.BARRERA ANATMICA
La integridad anatmica y funcional de la piel y mucosas es de suma importancia para

impedir el ingreso de los microorganismos patgenos. Las aberturas naturales (boca, nariz, va
respiratoria, ojos, odos, va urogenital y ano) estn protegidas de mucosa con epitelio ciliado, o
epitelio con secrecin de mucus y de sustancias antibacterianas para dificultar el ingreso de los
patgenos. Diversas situaciones, como lesiones de piel que destruyen la capa crnea, o un tejido
tumoral que altera la funcin de la mucosa digestiva, permitirn el ingreso de bacterias al torrente
sanguneo.
La flora bacteriana normal constituye un ecosistema de proteccin del husped humano,

interfiriendo por competicin la colonizacin de bacterias extraas y estimulando al sistema
inmune adquirido. Se puede apreciar, por ejemplo, que durante la administracin oral de
24
FAMURP
Microbiologa
antibiticos, la flora intestinal normal disminuya y permita la proliferacin de cepas productoras

de toxinas, como es el caso del Clostridium difficile.
B. PODER PATGENO Y VIRULENCIA
Se define como microorganismo patgeno a aquel que tiene la capacidad de instalarse en

el husped y producir cambios mrbidos o enfermedad. En cambio se entiende por virulencia a la
medida cuantitativa de la patogenicidad, o a la probabilidad de producir enfermedad. Los factores
de virulencia se refieren a las propiedades (genticas) que permiten que un microorganismo se
establezca en un husped. Ejemplo: el neumococo que forma cpsula es ms virulento que el que
no la forma.
El microorganismo patgeno debe acceder al husped en cantidad suficiente para

colonizar, y debe utilizar los mecanismos que contrarresten las defensas del husped, como
secrecin de proteasas, enzimas, toxinas o formacin de cpsula, para invadir los tejidos. Pero
existen otros microorganismos que son permanentemente patgenos o estrictos, su sola
presencia representa ya un diagnstico de enfermedad. Ejemplo: Treponema pallidum o Neisseria
gonorrhoeae.
Postulados de Robert Koch
En el ao 1884, R. Koch, con la finalidad de establecer cul es el microorganismo agente

etiolgico de una enfermedad infecciosa, formul los siguientes postulados:
1. El microorganismo debe estar presente en el husped enfermo

2. El microorganismo debe crecer en cultivos puros a partir del husped enfermo
3. La enfermedad debe reproducirse en animales susceptibles
4. El microorganismo debe recuperarse del husped experimental
El cumplimiento de los cuatro postulados muchas veces no es posible, ya que hay situaciones
en las que algunos microorganismo an no han sido cultivados in vitro, como el Mycobacterium
leprae o el Treponema pallidum. As mismo, hay enfermedades que slo las padece el ser humano,
como la gonorrea, luego no se dispone de animal para la experimentacin. Por ltimo, con los
conceptos actuales y tcnicas en biologa molecular (reaccin en cadena de la polimerasa), no se
necesita ver ni cultivar el microorganismo, es suficiente con demostrar la presencia del ADN
microbiano.
C. MECANISMOS DEL PODER PATGENO
1. Adherencia y colonizacin: las bacterias patgenas para unirse a las clulas del husped utilizan
adhesinas, que son protenas filamentosas ubicadas en la superficie de las bacterias o de los pili.
Por otro lado, las clulas animales poseen receptores (glucoprotenas o glucolpidos) especficos
con los que interaccionan. As, Neisseria gonorrhoeae se adhiere a las clulas mucosas de la uretra
con la molcula CD46; cepas de Escherichia coli poseen la adhesina 1 que se une a la manosa de
25
FAMURP
Microbiologa
las clulas que recubren el colon; en cambio, las que causan infecciones en vas urinarias producen
el pili llamado P I, y S. pygenes produce la protena F (fibronectina) para adherirse a las mucosas.
Las bacterias deben multiplicarse para colonizar la zona, y para ello debe protegerse de las
defensas del husped, que incluye recambio de pili, secrecin de proteasas o inducir cambios en
la clula husped receptora.
2. Capacidad de invasin: siendo la piel la barrera ms difcil de atravesar por los

microorganismos, algunos patgenos deben esperar un traumatismo que ocasione herida para
poder ingresar; as, Staphylococcus aureus es la causa ms comn de infecciones en heridas de
piel. En cambio las mucosas representan las vas ms comunes para que las bacterias ingresen a
los tejidos, para lo cual las bacterias inducen a las clulas a un proceso de endocitosis.
Algunos patgenos evitan ser fagocitados por los macrfagos y neutrfilos, para lo cual emplean
diversos mecanismos como: a) formacin de cpsula, de protena M, que interfieren la activacin
del complemento C3b, evitando la accin opsnica, b) presencia de receptores Fc, que frustran la
opsonizacin mediada por anticuerpos, y c) produccin de citocinas que destruyen la membrana
de las clulas fagocticas.
En cambio, otras bacterias permiten ser fagocitadas, para luego multiplicarse dentro de los
macrfagos; como es el caso de Salmonella typhi, que una vez fagocitada evita la fusin del
fagosoma con el lisosoma; o como Shigella sp., que produce lisis del fagosoma, o mejor aun como
Listeria monocytogena, que perfora la membrana del fagosoma para escapar al citoplasma. Estas
bacterias se benefician dentro de los fagocitos para producir enfermedad, pues evitan el contacto
con los linfocitos presentadores de antgeno, disminuyendo la respuesta inmune.
3. Elaboracin de toxinas: la palabra toxina viene de toxikon (veneno de arco), son sustancias
qumicas elaboradas por la bacteria que daan directamente los tejidos o activa mecanismos
destructivos. En muchos casos la toxina es la nica responsable de los sntomas de la enfermedad.
Clsicamente se dividen en dos categoras: exotoxinas y endotoxinas.
A) Exotoxinas: son protenas producidas generalmente por grmenes grampositivos, que

ocasionan daos especficos. El origen puede obedecer a genes cromosmicos (V. cholerae,
Pseudomonas, Shigella dysenteriae), a plsmidos (B. anthracis, C. tetani o E. coli) o a fagos (C.
botulinum, C. diphtheriae). En la mayora de casos son secretadas por la bacteria en actividad,
aunque en algunos se difunden luego de la lisis bacteriana (Cl. botulinum). El husped puede
ingerir la toxina preformada en los alimentos, ocasionndole intoxicacin alimentaria, como es el
caso del botulismo, o la enterocolitis por Staphylococcus aureus. Las exotoxinas pueden actuar a
nivel local o ser transportadas y tener efectos sistmicos (C. tetani o C. diphtheriae).
Las exotoxinas, por su composicin proteica, son potentes antgenos, y los anticuerpos formados
por el husped actan inactivando su accin; de all, el beneficio de las vacunas elaboradas a partir
de la toxina desnaturalizada por accin del formol, que crea el toxoide (sin efecto txico).
Ejemplo: vacuna contra la difteria o el ttanos.
26
FAMURP
Microbiologa
El mecanismo de accin de las exotoxinas puede clasificarlas en tres categoras: A) Toxinas A-B:
formadas por dos molculas, la fraccin A, que por lo general es una enzima y es la parte activa o
txica; y la fraccin B, que se une al receptor especfico de la clula blanco. Ejemplo: ADP
ribosiladora del C. diphtheriae que inhibe la sntesis proteica, la activadora de la adenilciclasa del
V. cholerae que incrementa la secrecin de agua de los enterocitos, o las especficas del C.tetani,
que afecta la neurotransmisin produciendo espasmo muscular. B) Toxinas que daan
membranas, las que son verdaderas citotoxinas, como la toxina delta del S. aureus que destruye
eritrocitos o la fosfolipasa del C. perfringes que remueve los fosolpidos de la membrana
citoplasmtica. Y C) Superantgenos: que activan en forma inespecfica a los linfocitos T
cooperadores (TCD4), para que se unan al complejo de histocompatibilidad clase II, liberando
grandes cantidades de citocinas, las que ocasionan la produccin de intermediarios como: a)
factor de necrosis tumoral (activador de neutrfilos y endotelio), b) Interleucina 6 (activador de
eosinfilos), c) Interleucina 2 (activador de linfocitos T) y d) interfern gamma (activador de
monocitos). Debido a los numerosos intermediarios en la clnica se observa diversos sntomas y
signos, por lo que se le denomina insuficiencia multiorgnica. Ejemplo: la toxina 1 del
Staphylococcus aureus, y la toxina del Streptococcus pygenes.
B) Endotoxinas: son molculas de lipopolisacridos (LPS), componentes de la membrana externa

de la pared de las bacterias gramnegativas (en alguna bacterias participan los peptidoglucanos y el
cido teicoico). Se excretan por lisis celular y estn compuestas por dos fracciones; la lipdica A,
con propiedades txicas e iniciadora inespecfica de la inflamacin, y el polisacrido especfico O,
antgeno que permite la identificacin bacteriana.
El lpido A tiene tres niveles de accin: a) activa los macrfagos generando interleucina 1, que es la
causa de: fiebre, factor de necrosis tumoral, hemorragia y de xido ntrico que genera
hipotensin; b) activa el complemento: el C3a, que condiciona edema e hipotensin; el C5a que
activa la quimiotaxis; y d) activa el factor de Hageman, que participa en la generacin del
sndrome de coagulacin intra vascular diseminada.
27
FAMURP
Microbiologa
SECCIN II
CAPTULO 5
INFECCIONES LOCALIZADAS Y SISTMICAS
GNERO STAPHYLOCOCCUS
_______________________________________________________________
STAPHYLOCOCCUS
Los estafilococos son microorganismos ampliamente distribuidos en la naturaleza (agua,

aire y suelo), que viven como comensales en la piel y mucosas de los humanos y los animales.
Fueron descritos por Pasteur en el ao 1880. Este grupo bacteriano se caracteriza por su forma de
cocos agrupados en racimos, por ser productores de la enzima catalasa, que desdobla el perxido
de hidrgeno en agua y oxgeno. Algunas especies forman parte de la flora endgena del ser
humano, como S. aureus, que coloniza las fosas nasales; S. capitis, las glndulas cebceas y S.
hominis y haemolticus, las glndulas apocrinas de la axila. Estas bacterias pueden sobrevivir en
condiciones ambientales variables de temperatura, de humedad y de presin osmtica. La especie
S. aureus es la de mayor poder patgeno, por la capacidad de excretar diversas enzimas y toxinas,
pudiendo ocasionar lesin local con formacin de pus, con la posibilidad de diseminacin
sistmica.
Staphylococcus aureus
A.ESTUDIO BACTERIOLGICO
1. Morfologa y estructura: son cocos de 0,8 a 1,0 m, que se presentan en pares o en

pequeas agrupaciones (racimos), Gram positivos. Son inmviles y poseen una delgada cpsula de
polisacridos, til para clasificarlos en serotipos. La capa de peptidoglucanos de la pared, que es
muy rgida, contiene enzimas denominadas protenas ligadoras de penicilina (PBP), que participan
en la construccin de esta capa, y son el blanco de los antibiticos beta lactmicos. Algunas cepas
han adquirido un gen (mecA) que se localiza en el cromosoma, y codifica PBP con poca afinidad
por los beta lactmicos, a estas cepas se les denomina S. aureus resistente a meticilina (SARM). El
peptidoglucano tambin posee actividad como endotoxina, pirgeno y de formacin de pus. La
superficie del S. aureus est recubierta con la protena A, que tiene afinidad por la fraccin Fc de la
inmunoglobulina G, impidiendo la fagocitosis. Esta protena se utiliza como marcador diagnstico
de antgenos bacterianos (coaglutinacin).
2. Fisiologa: la especie S. aureus es una bacteria aerobia y anaerobia facultativa, que

desarrolla fcilmente en los medios de cultivo en rangos amplios de temperatura, pH y presin
osmtica, soportando concentraciones hipertnicas de cloruro de sodio de hasta 75 g/L. Es
productor de las enzimas catalasa y hemolisina. En medios slidos las colonias toman una
28
FAMURP
Microbiologa
coloracin cremoso-amarillenta a dorado, aspecto que dio origen al nombreaureus. El

metabolismo del carbohidrato manitol es un marcador til para la identificacin de cepas
patgenas.
3. Clasificacin: en base al comportamiento bioqumico se describen ms de 40 especies

en el gnero Staphylococcus, siendo las de mayor inters mdico:
biotipo Coagulasa manitol Novobiocina

S. aureus ++ ++ Sensible
S. epidermidis --- variable Sensible
S. saprophyticus --- variable Resistente
Otras especies de inters, coagulasa negativas, son: S. capitis, S. haemolyticus, S. hominis, y S.

lugdunensis.
4. Enzimas y toxinas: la especie S. aureus puede generar una serie de sustancias que son
nocivas para el ser humano. Con fines didcticos se clasifican en:
I. Enzimas:
a. Coagulasa: protena termoestable que estimula la conversin de fibringeno en fibrina con

la formacin de cogulos; su presencia es considerada como un factor de patogenicidad.
Se describen dos tipos, una ligada a la pared bacteriana y otra excretada.
b. Fibrinolisina: contribuye a la disolucin de los cogulos de fibrina en los abscesos y facilita
la diseminacin sptica.
c. Hialuronidasa: que hidroliza el cido hialurnico de la matriz del tejido conectivo.
d. Nucleasas: que disuelven el ADN e intervienen en la formacin de lesiones tisulares.
e. Beta lactamasas: enzimas codificadas por plsmidos y secretadas por la mayora de cepas;
tienen por funcin hidrolizar el anillo beta lactmico de los antibiticos.
II. Toxinas: son polipptidos de origen cromosmico o extra cromosmico.
a. Citotoxinas: alfa, que lesiona la membrana citoplasmtica de las clulas eucariotas

(hemates, leucocitos, hepatocitos y dermis). Beta, que hidroliza los fosfolpidos de la
membrana de los eritrocitos. Delta, que altera la funcin osmtica de la membrana celular
y est relacionada con diarrea aguda. Gamma o leucocidina de Panton-Valentin, son un
grupo de toxinas que lisan neutrfilos y macrfagos, y estn presentes en todas las cepas
SARM.
b. Toxina exfoliativa: es una proteasa que destruye la adhesin intercelular de las clulas de
la epidermis, produciendo lesiones ampollares, sin presencia de grmenes, ni respuesta
inflamatoria local, constituyendo el sndrome de la piel escaldada.
c. Enterotoxinas: se describen hasta cinco (A E), son estables al calor y resistentes a la
protelisis gstrica, estn relacionadas con las intoxicaciones alimentarias. Las toxinas C y
29
FAMURP
Microbiologa
D se encuentran en productos lcteos contaminados y la toxina B produce colitis

seudomembranosa.
d. Toxina 1: es una toxina que activa ciertos linfocitos T y liberan citocinas con efectos
sistmicos (fiebre, rash, hipotensin y falla multiorgnica). Se denomina sndrome del
shock txico (TSST-1) y acta como superantgeno; la presentacin clnica est asociada al
uso de tampones durante la menstruacin.
B. PODER PATGENO
El ser humano es portador sano de diversas especies de estafilococo, se estima que el 20%
al 50% de la poblacin es portadora de la especie patgena S. aureus en la nasofaringe. Para la
invasin tisular va a requerir la participacin de otros factores, como: adhesin, colonizacin,
produccin de toxinas y enzimas, presencia de cuerpos extraos o traumatismos. Una vez que la
bacteria ha ingresado a travs de la capa mucosa o epitelial, los productos bacterianos estimulan
la movilizacin de polinucleares y macrfagos hacia la lesin (quimotaxis), y se produce la
fagocitosis. Se describen los siguientes cuadros clnicos:
1. Infecciones pigenas oportunistas por invasin directa: fornculos, acn, imptigo,

heridas, abscesos, osteomielitis, artritis sptica y supuracin de rganos.
2. Intoxicaciones alimentarias por accin de enterotoxinas formadas en los alimentos,
productoras de vmitos y diarrea de corta duracin.
3. Exfoliacin drmica producida por accin de la toxina exfoliativa, codificada por
plsmidos o bacterifago, ocasionando el sndrome piel escaldada.
4. Shock txico asociado al uso de tampones vaginales: la toxina activa los linfocitos
TCD4, que liberan gran cantidad de interleucinas, causantes de fiebre, prurito,
descamacin drmica, hipotensin y falla multiorgnica.
C. DIAGNSTICO DE LABORATORIO
1. Microscopa: la coloracin de Gram es muy til, cuando la muestra es material

purulento proveniente de un absceso o lesiones drmicas, y se observan cocos grampositivos
agrupados en racimos. Tener reserva de opinin cuando los frotices provienen de mucosas o piel,
pues no se puede distinguir de los microorganismos que habitan normalmente en dichas zonas.
2. Cultivo: el medio de cultivo ms empleado para el aislamiento es el hipertnico en

cloruro de sodio, que lo hace selectivo para todo el Gnero, al que se le aade manitol como
marcador para diferenciar los biotipos. En medios lquidos produce turbidez homognea y en los
medios slidos forma colonias de tamao mediano, que luego presentan una coloracin dorada.
En medios con sangre se aprecia hemlisis completa alrededor de las colonias.
3. Identificacin: las reacciones bioqumicas como el metabolismo del manitol, o la

produccin de la enzima coagulasa y la sensibilidad a la novobiocina, son suficientes para la
identificacin. Con fines epidemiolgicos, se puede emplear la susceptibilidad a los fagos y el
anlisis del ADN.
30
FAMURP
Microbiologa
D. PREVENCIN Y TRATAMIENTO
En el personal hospitalario el lavado de manos es una medida de suma importancia para

evitar el contagio; el control peridico de los portadores nasales y la limpieza adecuada de la piel
antes de procedimientos invasivos, juegan un rol importante en la prevencin. No hay vacuna.
Los estafilococos poseen proteasas en su pared (PBP) con quienes se unen los antibiticos
con anillo beta lactmico; pero es comn que cepas de Staphylococcus aureus generen la enzima
beta lactamasa, que inactiva en forma especfica a algunos beta lactmicos. Ejemplo: penicilinasa.
En el ao 1960 ingresan al mercado mdico las penicilinas semisintticas (meticilina,

mafcilina, oxacilina y cloxacilina), que son resistentes a la accin de la enzima beta lactamasa, por
lo tanto de indicacin para el tratamiento de infecciones por Staphylococcus aureus.
En las ltimas dcadas se encuentran cepas de S. aureus portadoras del gen mecaA, que
origina bacterias con proteasas (PBP) que tienen poca afinidad para los antibiticos beta
lactmicos, lo que las hace resistentes a todo ste
grupo de antibiticos; debiendo utilizar, en estos casos, la Vancomicina.
Staphylococcus coagulasa negativa
Este grupo de estafilococos ha tomado singular importancia en la etiologa de las

infecciones en las que hay de por medio un cuerpo extrao, como catteres, prtesis o
dispositivos introducidos a travs de la piel. Este grupo de bacterias posee numerosos plsmidos,
que les codifican nuevas propiedades, como: adhesin a superficies plsticas, formacin de
biopelculas o resistencia a los antibiticos; hechos que han llevado a ser considerados como
patgenos hospitalarios.
Todas estas bacterias son residentes saprofitas de la piel humana. Las especie ms
frecuentes en la piel lampia y mucosas son S. epidermidis, S. hominis, S. saccharolyticus, S.
haemolyticus, S. xylosus, S. simulans y S. lugdunensis; en cuero cabelludo, S. capitis; en conducto
auditivo, S. auricularis y en conducto gnitourinario, S. saprophyticus.
Se describen los siguientes cuadros clnicos:

1. Bacteriemia adquirida en el hospital, para la confirmacin diagnstica se deben realizar
hemocultivos seriados, obtenidos de zonas diferentes.
2. Endocarditis por prtesis valvular.
3. Infeccin por catter intravenoso. Como criterio diagnstico se debe realizar cultivo semi
cuantitativo del catter.
4. Infecciones del tracto urinario, asociadas al S. saprophyticus.
5. Osteomielitis, como consecuencia de una prtesis articular.
31
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 6
GNERO STREPTOCOCCUS
STREPTOCOCCUS
Los estreptococos conforman una familia de grmenes ampliamente distribuidos en el

hombre y en los animales, constituyendo parte de la flora microbiana saprofita. Ciertas especies,
con caractersticas metablicas propias, son responsables de enfermedades infecciosas graves en
el hombre. El conocimiento de estos grmenes en patologa humana se inicia en el ao 1874 con
Billroth, que observa, en pacientes con erisipela, la presencia de cocos formando cadenas; luego
Pasteur, en 1879, cultiva al estreptococo a partir de la sangre de pacientes con sepsis puerperal.
Posteriormente Fowler seal la asociacin de la angina a estreptococo con un proceso
inflamatorio articular y cardiaco no supurativo, denominado Fiebre Reumtica.
A. ESTUDIO BACTERIOLGICO
1. Morfologa y estructura: son cocos grampositivos que se orientan en cadenas, poseedores

de cpsula de cido hialurnico. La pared bacteriana posee un carbohidrato especfico, a
partir del cual Lancefield clasifica a los estreptococos en grupos. As mismo, poseen la
proteina M, que se ancla desde la membrana citoplasmtica hasta el exterior, la cual est
asociada a la virulencia, y permite clasificar a los grupos en serotipos (ms de 100
distintos). El anlisis secuencial del gen emm, que codifica protena M, es la base de la
clasificacin epidemiolgica actual de los estreptococos. Otras estructuras de la pared,
como la protena F y el cido lipoteicoico, estn relacionadas con la adhesin a la fibro
nectina de las clulas de piel y mucosas.
2. Fisiologa: los estreptococos son anaerobios facultativos, que requieren de medios de
cultivo enriquecidos con sangre para el crecimiento in vitro. Fermentan carbohidratos
produciendo cido lctico y carecen de la enzima respiratoria catalasa.
3. Clasificacin: No existe un sistema nico de clasificacin de los estreptococos y depende
de una combinacin de cualidades, como los patrones de hemlisis en placas con agar
sangre, composicin antignica de la pared y reacciones bioqumicas.
Al observar las colonias de los estreptococos en cultivos de agar sangre se puede apreciar
que: ciertas cepas se rodean de una zona clara transparente, producida por la lisis total de
los glbulos rojos (hemlisis beta); en cambio las colonias de otras cepas producen una
hemlisis parcial, con pigmento verdoso que rodea las colonias (hemlisis alfa o viridans),
ocasionado por la degradacin de la hemoglobina; y un grupo de cepas no producen
hemlisis de los hemates.
Lancefield clasifica a los estreptococos productores de beta hemlisis, segn la capacidad
antignica del carbohidrato C de la pared bacteriana, en grupos desde A hasta V, de los
cuales los grupos A, B, C, D y G son los ms comunes en humanos.
32
FAMURP
Microbiologa
Los estreptococos alfa hemolticos, entre los que se encuentra el Streptococcus

pneumoniae, para su identificacin precisa ser sometidos a pruebas bioqumicas
adicionales y evidenciar el desarrollo bacteriano en presencia de determinados sustratos.
Tabla I-6-1.
Estreptococos ms frecuentes en enfermedades de los humanos
Nombre Serogrupo Tipo de hemlisis
S. pygenes A beta
S. agalactiae B beta (ocasional negativo)
S. disgalactiae C, G beta
S. anginosus A, C, F, G beta (ocasional negativo)
S. bovis D alfa, beta o negativo
S. viridans no grupable alfa o no hemoltico
S. pneumoniae no grupable alfa
Streptococcus beta hemolticos
4. Enzimas y toxinas: Ciertos estreptococos, en especial los del grupo A, C y G, son capaces
de producir diversas toxinas o enzimas, con caractersticas antignicas.
a) Estreptolisina O, con capacidad de lisar hemates, leucocitos y plaquetas; es lbil al
oxgeno y estimula la formacin de anticuerpos: antiestreptolisina O (ASO), cuya
presencia es diagnstico de infeccin reciente por S. pygenes
b) Estreptolisina S, que tambin puede lisar a los hemates, leucocitos y plaquetas, pero
no tiene funcin antignica, y es responsable de la hemlisis total (tipo beta) que se
observa en los cultivos de agar sangre, ya que es resistente al oxgeno.
c) Estreptocinasa, activador del plasmingeno, que libera mayor cantidad de plasmina,
la que a su vez degrada la fibrina disolviendo los cogulos, til en la prctica mdica
para el tratamiento de trombos coronarios.
d) Desoxiribonucleasas (DNasa), reducen la viscosidad del pus y permiten la diseminacin
del germen. Los anticuerpos producidos contra la DNasa son un buen marcador de
infeccin drmica por S. pygenes.
e) Toxina eritrognica, algunas cepas de Streptococcus del grupo A son portadoras de un
fago en estado temperado (cepa lisognica), que codifica la excrecin de cuatro
toxinas termolbiles (superantgenos), las que interactan con los macrfagos y
linfocitos T cooperadores para liberar citocinas, que son las responsables de las
manifestaciones graves de la infeccin por S. pygenes, como escarlatina, fascitis
necrosante y shock txico.
33
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
La capacidad patognica de los estreptococos es variable, depende de la puerta de

entrada, de las caractersticas de la cepa bacteriana involucrada y de la capacidad de producir
toxinas y enzimas. El factor de virulencia ms importante del S. pygenes es la protena M de la
pared, con cualidades pirgenas, de inactivacin del complemento C3 permitiendo la diseminacin
bacteriana, y de neutralizar la actividad de la inmunoglobilina G, bloqueando la fagocitosis.
Tambin es capaz de adherirse a las clulas superficiales e invadirlas, debido a la actividad del
cido lipoteicoico y la presencia de cpsula, constituida por cido hialurnico. Desde el punto de
vista clnico se pueden distinguir dos niveles de infecciones.
1. Enfermedades por accin directa del estreptococo

a. En la esfera rinofaringe: angina, amigdalitis, faringitis, sinusitis, otitis; que
generalmente se asocian con adenopata regional. Los agentes ms frecuentes
son beta hemolticos del grupo A, C y G.
b. Infecciones cutneo mucosas: imptigo, infeccin de heridas, erisipela,
celulitis, que tienen como principal agente a los del grupo A.
c. Escarlatina: producida por un estreptococo secretor de toxina eritrognica.
d. Fascitis necrosante: infeccin profunda del celular subcutneo que
compromete msculo y tejido adiposo, complicndose con insuficiencia
multiorgnica.
e. Septicemia: ocasionada a partir de un foco de infeccin estreptoccica en
tejido celular subcutneo que llega al sistema linftico, provocando
tromboflebitis; o secundaria a una endometritis en la fiebre puerperal. El
agente ms frecuente pertenece al grupo B.
f. Endocarditis bacteriana: puede ser aguda, secundaria a una septicemia por
estreptococo que ocasiona lesiones valvulares; y subaguda, por invasin de un
estreptococo proveniente de vas respiratorias o intestino, en pacientes con
lesiones cardiacas anteriores. Los agentes responsables suelen ser del grupo C,
D, o G, incluso los no tipificables.
g. Infecciones urinarias: producidas por Streptococcus grupo D
2. Enfermedades post estreptoccicas (no supurativas)
Son enfermedades que se presentan como secuelas, dos a seis semanas despus, de
una infeccin aguda a S. pygenes no tratada, como respuesta auto inmune del
husped a las toxinas de la bacteria.
a. Fiebre reumtica aguda: las faringitis producidas por Streptococcus beta
hemoltico del grupo A, con protena M de los serotipos 1, 3, 5, 6, 18, estn
relacionadas con alteraciones inflamatorias del corazn, articulaciones, vasos
sanguneos y con la presentacin de ndulos subcutneos.
b. Glomerulonefritis aguda: el S. pygnes serotipo 12 aislado en faringitis y el
serotipo 49 aislado en piodermitis, estn muy relacionados con la
34
FAMURP
Microbiologa
presentacin de inflamacin aguda de los glomrulos renales, ocasionando

edema, hipertensin, hematuria y proteinuria.
1. Microscopa: la coloracin de Gram es muy til, cuando la muestra proviene de

secreciones purulentas o lquido cfalo raqudeo (LCR), ya que permite observar cocos
grampositivos en cadenas; en cambio, en muestras de bucofaringe, la microscopa no tiene valor
diagnstico, pues los estreptococos forman parte de la flora normal.
2. Cultivo: las muestras de exudado farngeo son adecuadas; en lesiones cutneas es

conveniente levantar la costra y obtener la secrecin purulenta; si la lesin es ampollar, romperla,
y tomar la muestra del contenido. Tener en cuenta que en lesiones abiertas puede haber sobre
infeccin con estafilococos. El medio de cultivo recomendado es el agar tripticase soya, con 5 % de
sangre de conejo o de carnero. El desarrollo de las colonias se aprecia dentro de 24 a 48 horas de
incubacin a 37C.
3. Identificacin: Observar colonias pequeas constituidas por cocos grampositivos en

cadenas, que no reaccionan con el perxido de hidrgeno (catalasa negativa), y que puede tener
un halo de hemlisis alrededor, tipo beta o alfa. Seguidamente se deben hacer resiembras para
demostrar el comportamiento frente a la bacitracina, optoquina, produccin de la enzima
pilrrolinodil arilamidasa (PYR), solubilidad con la bilis y produccin de acetil metil carbinol (Voges
Proskauer). Las colonias beta hemolticas deben sembrarse cruzando con siembras de
Staphylococcus aureus, para apreciar el fenmeno CAMP (Christie, Atkins, Munch, Petersen)
caracterstico del grupo B. Tambin se pueden realizar reacciones de aglutinacin o precipitacin a
partir de las colonias con antisueros especficos de grupo.
Tabla: I-2-2. Identificacin bioqumica de los estreptococos
Microorganismo Grupo Prueba de identificacin

S. pygenes A Sensible a bacitracina. PYR positivo
S. agalactiae B CAMP positivo. Hidrlisis de hipurato positivo
S. disgalactiae C,G PYR negativo. Voges Proskauer negativo
S. anginosus A,C,F,G PYR negativo. Voges Proskauer positivo
S. pneumoniae -- Sensible a optoquina. Soluble en bilis
S. viridians -- Resistente a optoquina. Insoluble en bilis
Nota: Murray 7ma ed.cap22
La deteccin del carbohidrato especfico de grupo de los estreptococos del grupo A

(pygenes), es posible realizarla en forma directa a partir del exudado farngeo; para ello se
emplean tcnicas de inmuno precipitacin e inmuno fluorescencia, que utilizan anticuerpos
monoclonales.
4. Diagnstico indirecto: es muy importante en las infecciones post estreptoccicas, as

como en las faringitis a S. pygenes. Se debe evidenciar la presencia de anticuerpos contra la
35
FAMURP
Microbiologa
estreptolisina O (ASO), de aparicin tarda pero persistente. En pacientes que tuvieron imptigo,
se buscan los anticuerpos anti ADNasa como marcador de glomerulonefritis.
Las infecciones por estreptococo se diseminan con facilidad por gotitas respiratorias al
toser, gritar, estornudar o en alimentos contaminados a partir de portadores; las condiciones de
hacinamiento facilitan el contagio. No hay vacuna disponible a la actualidad.
El antibitico de eleccin es la penicilina, aunque se observa tolerancia en algunos grupos,

sobre todo en los no tipificables; por este motivo se utiliza la combinacin de penicilina y un
aminoglucsido para las infecciones graves. En faringitis, con la finalidad de prevenir la fiebre
reumtica, se recomienda dosis elevadas y prolongadas, hasta por diez das, con penicilina
benzatnica. El tratamiento alternativo es la eritromicina o las cefalosporinas orales.
Streptococcus pneumoniae
Es un microorganismo habitante del aparato respiratorio superior del hombre. Es el

principal agente de la neumona en adultos. La infeccin por S. pneumoniae es considerada como
el modelo de patgeno bacteriano extracelular; con l se sentaron las bases de la inmunidad
humoral (Avery, 1940), y se demostr, por primera vez, la transferencia de material gentico en la
resistencia bacteriana adquirida (Griffith, 1928).
A. ESTUDIO BACTERIOLGICO
1. Morfologa y estructura: Son cocos grampositivos de forma lanceolada y dispuestos en

pares o cadenas cortas. Las cepas virulentas se encuentran recubiertas de una cpsula compuesta
por polisacridos, base de la clasificacin serolgicas de los neumococos, identificando ms de 90
serotipos diferentes.
La pared del neumococo posee un polisacrido, denominado C, que es capaz de reaccionar

con una globulina del suero que se encuentra en pacientes con procesos inflamatorios agudos; en
clnica es de utilidad diagnstica y de seguimiento de procesos inflamatorios bacterianos,
denominada protena C reactiva.
2. Fisiologa: a las caractersticas generales de los estreptococos se aade que las colonias de
las cepas capsuladas son lisas; en cambio, las no capsuladas desarrollan colonias pequeas y secas.
La hemlisis tipo alfa o viridans, es producto de la degradacin de la hemoglobina por accin de la
neumolisina. Los cultivos de neumococo se autolisan fcilmente, este proceso se evidencia cuando
se aade bilis de buey o desoxicolato de sodio a una suspensin densa de microorganismos.
36
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
La virulencia del neumococo est directamente relacionada con la presencia de la cpsula

y la capacidad de multiplicarse en los tejidos. Las personas que tienen anticuerpos contra el
polisacrido especfico de tipo, estn protegidas contra ese serotipo, concepto base para el uso de
la vacuna. Para la instalacin de la enfermedad neumoccica se pueden establecer 3 etapas, as:
1. Colonizacin: el neumococo coloniza la mucosa nasal y oro faringe, y por accin de las
adhesinas se fija a las clulas epiteliales. La produccin de proteasas, inactivan a la
Inmunoglobulina A; seguidamente la citotoxina (neumolisina) excretada destruye las clulas
ciliadas del aparato respiratorio y a los macrfagos.
2. Resistencia a la fagocitosis: la cpsula del neumococo interfiere la accin del

complemento 3b, responsable de la opsonizacin. Seguidamente se suceden una serie de eventos
como: la inflamacin de los alveolos, la presencia de fragmentos de la pared bacteriana y la accin
de la neumolisina, que activan la ruta clsica del complemento, cuyos productos de degradacin
producen dao tisular.
3. Factores predisponentes: infecciones virales previas, abuso del alcohol, desnutricin e

insuficiencia respiratoria pulmonar, favorecen la infeccin por neumococo.
Cuadros clnicos:
La incidencia de portadores sanos de Streptococcus pneumoniae es variable, se seala en el rango

del 5% al 75%, dependiendo del mtodo utilizado para el aislamiento y de la poblacin estudiada.
1. Neumona: las bacterias proliferan rpidamente en el exudado alveolar y la evolucin de la

enfermedad depende en gran medida de la respuesta inmune humoral. La neumona suele
localizarse en los lbulos inferiores (neumona lobar) y la complicacin septicmica no es
infrecuente, con compromiso menngeo, endocardio o articular.
2. Sinusitis y otitis media: neumococo es el agente etiolgico que con ms frecuencia se encuentra
en senos para nasales y odo, generalmente posteriores a un proceso viral.
3. Meningitis: Puede presentarse en pacientes de todas las edades, como consecuencia de una
bacteriemia. La mortalidad y secuelas neurolgicas de esta infeccin son elevadas.
1. Microscopa: es til en casos de neumona, cuando la muestra de esputo es purulenta, y

se observan diplococos grampositivos lanceolados; as mismo, si la muestra es obtenida por
puncin de reas estriles, como LCR, o seno para nasal.
2. Cultivo: para el desarrollo requiere de medios enriquecidos con sangre, formando

colonias con superficie umbilicada. Las colonias estn rodeadas de un halo verdoso por la
37
FAMURP
Microbiologa
hemlisis tipo alfa. La incubacin en ambiente con 10 % de CO2 mejora el aislamiento. Tambin se
puede detectar el antgeno polisacrido C eliminado por la orina.
3. Identificacin: el desarrollo de colonias productoras de hemlisis alfa debe ser

diferenciado de los Streptococcus viridans, que son saprofitos de va respiratoria alta. S.
pneumoniae es sensible a la etilhidrocupreina (optoquina), observable por la ausencia de
desarrollo alrededor del disco impregnado con esta sal; as como el aclaramiento de la turbidez de
los cultivos lquidos al aadir bilis; y la reaccin de Quellung positiva, que es la hinchazn de la
cpsula cuando se mezclan neumococos con suero anti polisacrido capsular polivalente.
4. Inoculacin: el ratn es un animal altamente susceptible a la infeccin por neumococo,

producindole la muerte en 18 a 48 horas.
La vacuna conjugada compuesta por siete serotipos capsulares est indicada en lactantes,
en cambio, para nios mayores de 2 aos y adultos en riesgo, se recomienda la vacuna con 27
serotipos.
El tratamiento de eleccin es la Penicilina, pero se han descrito cepas resistentes, por lo

que se recomienda el uso de Cefalosporina de tercera generacin. El uso de Cloranfenicol se
reserva para los casos de meningitis.
ENTEROCOCCUS
Varias especies de estreptococos poseen un antgeno similar en la pared celular y forman

el grupo D o Enterococcus. Se diferencian de los otros estreptococos por poseer ciertas
caractersticas, como: a) desarrollar en medios de cultivo con elevadas concentraciones de cloruro
de sodio (6,5 g%), b) desarrollar en presencia de sales biliares, c) desarrollar en medios con pH
alcalino (9,6), y d) hidrolizar la esculina. En patologa clnica, las especies ms frecuentes aisladas
son: faecalis, faecium, durans y bovis.
Los enterococos habitan el tracto gastrointestinal de humanos y animales, por lo que se

les puede encontrar como contaminantes en el agua y los alimentos. Aunque no se ha demostrado
ser portador de factores de virulencia, stos microorganismos revisten importancia en infecciones
adquiridas por estadas hospitalarias prolongadas, complicaciones post operatorias, presencia de
sonda vesical o catteres y terapia antibitica previa recibida por el paciente.
El manejo teraputico es complicado, ya que presenta patrones inusuales de sensibilidad

o resistencia antibitica. En infecciones urinarias, la nitrofurantoina y las fluoroquinolonas han
mostrado ser tiles. En infecciones sistmicas se recomienda la terapia combinada de
aminoglucsido con un agente de accin en la pared celular (ampicilina o vancomicina). En
infecciones con cepas multiresistentes se est empleando la quinupristina/dalfopristina.
38
FAMURP
Microbiologa
Streptococcus viridans
Integran la flora microbiana normal de la orofaringe. Se caracterizan por: a) producir

hemlisis alfa en medios de cultivo con sangre, b) no ser inhibidos en su desarrollo por la accin
del optochin, y c) resistir la accin de las sales biliares. Son saprofitos, pero pueden ocasionar
infecciones dentarias (S. mutans) y endocarditis sub aguda (S. sanguis).
39
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 7
Bacillus anthracis. Neisseria meningitidis
______________________________________________________________
BACILLUS
Las bacterias integrantes del gnero Bacillus tienen como hbitat el medio ambiente
(suelo, agua, vegetacin); se caracterizan por ser aerobias, tener forma bacilar y capacidad de
formar esporas, que les permite sobrevivir a los cambios ambientales. Algunas especies son
utilizadas en biotecnologa para la produccin de alcoholes, vitaminas, enzimas y antibiticos
(polimixina, bacitracina). Slo la especie B. anthracis es patgena para el hombre, causando el
carbunco o ntrax maligno. En las ltimas dcadas, la espora, est siendo utilizada como arma
biolgica en conflictos blicos.
El Bacillus anthracis es la especie reconocida como responsable de la quinta plaga en

Egipto (1500 a.C.), y de la pandemia acaecida en el siglo XVII, llamada peste negra. Robert Koch,
en 1876, cultiva al germen in vitro y descubre el fenmeno de la esporulacin; ms tarde, Luis
Pasteur, demuestra la patogenia de la enfermedad y elabora la vacuna.
1. Morfologa y estructura: son bacilos gruesos, con los extremos rectos, de 4 a 6 m de

largo, que se orientan formando cadenas, son inmviles, y a la coloracin de Gram se tien como
positivos. Las formas vegetativas tienen cpsula, cuya formacin depende del plsmido pXO2, la
cual est compuesta por polipptidos con cido glutmico. Las esporas del ntrax son centrales,
no deformantes y muy resistentes a los cambios ambientales, permaneciendo por aos en
materiales inertes (piel, lana, cerdas, etc.).
2. Fisiologa: B. anthracis es aerobio, de fcil desarrollo en medios de cultivo; las esporas

se forman con facilidad en cultivos viejos, mas no en muestras clnicas. En los cultivos las colonias
son grandes, de superficie spera, no hemolticas, caractersticas que orientan su identificacin.
3. Enzimas y toxinas: poseen un plsmido denominado pXO1, que produce el antgeno

protector (AP), con gran capacidad inmunognica, el cual se une a los receptores de las clulas del
husped para facilitar el ingreso de los otros factores de virulencia. B. anthracis genera dos
protenas: factor edema (FE), que es una adenil ciclasa que origina edema por incremento del AMP
cclico; y factor letal (FL), que es una proteasa que estimula a los macrfagos para excretar el
factor de necrosis tisular y la interleucina 1. Ambos factores necesitan del antgeno protector para
ingresar a la clula.
40
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
El carbunco es una enfermedad propia de los animales herbvoros; el humano la adquiere,

en la mayora de casos, por inoculacin o contaminacin de una herida con tierra o pelo de
animales. En el sitio de la inoculacin se presenta una ppula que se ulcera, y luego se forma una
escara necrtica llamada pstula maligna. Esta lesin puede ser controlada mdicamente, pero
se reportan complicaciones de sepsis, con el 20 % de mortalidad.
Las esporas pueden tambin ingresar por inhalacin, como es el caso de los trabajadores
en curtiembres, los que esquirlan las ovejas, o por acto de terrorismo. En los alveolos pulmonares
las esporas son fagocitadas por los macrfagos y transportadas a los linfticos del mediastino,
donde se transforman en vegetativas y producen el cuadro infeccioso general. Seguidamente la
adenopata produce ensanchamiento del mediastino, observable en la radiografa de trax. Puede
presentarse complicacin menngea y shock; la mortalidad es elevada que puede llegar al 95%.
La infeccin oral con B. anthracis es ms frecuente en animales y muy rara en humanos,

con la presentacin de lceras en la cavidad oral o intestinal y hemorragias.
La enfermedad producida por el B. anthracis es conocida como anthrax, en el idioma

anglosajn; pero en espaol se le denomina carbunco o ntrax maligno.
1. Microscopa: este estudio se realiza en muestras obtenidas de lesiones drmicas,

ganglios linfticos y torrente sanguneo; debido a las numerosas bacterias presentes y al tamao
del germen, el examen resulta sencillo. El examen microscpico supera en calidad cuando se
emplea la tcnica de fluorescencia directa, utilizando anticuerpos contra el polisacrido de la
pared de la bacteria; as mismo la bsqueda de bacilos capsulados en muestras de tejidos es un
procedimiento muy til.
2. Cultivo: desarrolla con facilidad en el agar sangre, forma colonias de tamao grande,
con superficie rugosa, bordes irregulares y no hemolticas. La confirmacin de la especia B.
anthracis, se hace por la presentacin de lisis de un cultivo por accin del fago gamma, o con el
uso de la tcnica de reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
3. Diagnstico indirecto: la deteccin de anticuerpos no tiene utilidad, debido a la agudeza

del proceso infeccioso.
4. Inoculacin experimental: el ratn y el cobayo son muy susceptibles de infectarse por

va subcutnea, produciendo edema local, seguido por hemorragia y septicemia. Este
procedimiento se utiliza para inducir, a la bacteria aislada, a que forme cpsula, demostrable slo
in vivo.
41
FAMURP
Microbiologa
El control de la enfermedad est orientado a la vacunacin del ganado y al cumplimiento

de medidas preventivas en los trabajadores de la industria del cuero y carniceras. La vacuna para
animales es atenuada y procede de una cepa avirulenta. Para los humanos, en riesgo de contagio,
se emplea el filtrado estril del cultivo de una cepa avirulenta.
Para el tratamiento se utiliza penicilina, doxiciclina o ciprofloxacina.
E. OTROS BACILLUS
Los Bacillus ambientales son numerosos, y se puede sealar:
a) Bacillus cereus: potencialmente patgeno, productor de dos toxinas: una termoestable,

que se transmite por la ingesta de arroz cocido, que ocasiona vmitos; y otra termolbil,
que se transmite con la ingesta de carne o verduras y ocasiona diarrea. Esta bacteria
tambin puede producir infeccin ocular (panoftalmitis), en casos de traumatismo ocular
o contaminacin con tierra.
b) Bacillus subtilis: microorganismo ambiental no patgeno.
c) Bacillus sterothermophilus: germen cuya forma esporulada resiste temperaturas elevadas,
y se le utiliza en biotecnologa como marcador del buen funcionamiento del equipo de
esterilizacin con calor hmedo a presin (autoclave).
42
FAMURP
Microbiologa
NEISSERIA
El nmero de microorganismos integrantes de la familia Neisseriaceae se ha

incrementndo en los ltimos tiempos, pero el gnero de mayor inters para los humanos es
Neisseria. El tracto respiratorio alto y otras mucosas del hombre son reservorio de este gnero,
constituyendo parte de la flora microbiana saprofita, slo las especies Neisseria meningitidis y
Neisseria gonorrhoeae, son patgenas exclusivas del hombre.
1. Morfologa y estructura: son diplococos gramnegativos, con la caracterstica propia de

tener el lado adyacente achatado (en grano de caf). La estructura de la bacteria es similar a todos
los grmenes gramnegativos; algunas especies, como N. meningitidis, posen cpsula, base de la
clasificacin en 13 serogrupos. La mayora de neiserias estn rodeadas de pili, que les sirve para
adherirse al epitelio no ciliado de las mucosas, y como mecanismo para la transferencia de
material gentico. En la membrana externa de la pared de las neiserias patgenas, se ubican tres
protenas: porinas, proteina Opa y proteina Rmp, que participan en los mecanismos de
patogenicidad.
2. Fisiologa: son bacterias aerobias, lbiles a variaciones ambientales que les provoca lisis;
son portadoras de la enzima respiratoria citocromo oxidasa y metabolizan los carbohidratos por
va oxidativa. Las especies patgenas son exigentes para desarrollar in vitro, requieren de
medios con sangre calentada (agar chocolate), el agregado de almidn para neutralizar la accin
txica de los cidos grasos y la incubacin a 37C con ambiente que contenga el 10 % de CO 2. El
medio de cultivoTayer Martn es el de eleccin, por su contenido de inhibidores de la flora
saprofita y de factores de enriquecimiento. Las especies saprofitas son menos exigentes, incluso
desarrollan en medios sin sangre.
3. Clasificacin: La diferenciacin de las neiserias saprofitas y patgenas se realiza

mediante el estudio de las caractersticas bioqumicas y de crecimiento.
Tabla: II-7-1
Clasificacin del gnero Neisseria
Glucosa Maltosa Sacarosa Lactosa SH2 DNasa Crecimiento Pigmento

Especie a 22C
-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
N. gonorrhoeae + -- -- -- -- -- -- --
N. meningitidis + + -- -- -- -- -- --
N. lactmica + + -- + + -- -- +
N. sicca + + + -- + -- + --
N. flava + + v -- + -- + --
Moraxella catarrhalis -- -- + -- + + v +
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
43
FAMURP
Microbiologa
Neisseria meningitidis
B. PODER PATGENO
El agente etiolgico de la meningitis epidmica fue descrito por primera vez por
Vieusseaux en el ao 1805, e identificado por Weichselbaum, en 1887, en muestras de lquido
cefalorraqudeo y en la nasofaringe de portadores sanos. Posteriormente Dopter, en 1909, seal
la importancia de los serogrupos bacterianos en la presentacin de epidemias.
La infeccin se adquiere por inhalar gotitas del tracto respiratorio de otras personas. Las
bacterias se adhieren a la mucosa y se multiplican; luego pasan a travs de stas clulas e invaden
el torrente sanguneo para ser transportadas a las meninges y al lquido cefalorraqudeo (LCR). Las
bacterias y los leucocitos en el cerebro originan algunos cambios, como: marcado descenso de
glucosa en el LCR, obstruccin de capilares (infarto cerebral) y dao en los nervios auditivo, visual
o motor. Al destruirse la N. meningitidis en el organismo, se libera la endotoxina que ocasiona
hipotensin y lesin del endotelio capilar, expresndose clnicamente por micro hemorragias
drmicas (petequias). La exposicin repetida a la endotoxina produce sensibilizacin y formacin
de inmuno complejos que conducen al sndrome de coagulacin intravascular diseminada (CID),
as mismo las protenas Rmp liberadas inhiben la actividad bactericida del suero.
El polisacrido capsular permite clasificar a la N. meningitidis en 13 serogrupos

antignicamente distintos, los que inducen a la formacin de anticuerpos especficos de grupo;
concepto base de la vacunacin. Los serogrupos ms frecuentes son: A, B, C, Y y W135. Es preciso
anotar que el serogrupo B tiene baja antigenicidad, razn por la cual las epidemias a ste
serogrupo son ms frecuentes.
1. Microscopa: La coloracin de Gram del LCR es de gran utilidad, la observacin de

diplococos gramnegativos y numerosos leucocitos polimorfonucleares, hacen diagnstico. Las
muestras de exudado naso farngeo no son vlidas para la microscopa.
2. Cultivo: Para el aislamiento in vitro se utilizan muestras de LCR, sangre o exudado

naso farngeo. El medio de cultivo adecuado es el de Tayer Martin con suplemento de
inhibidores, incubado a 37C en ambiente con 10 % de CO 2. La identificacin de las colonias se
realiza mediante la coloracin de Gram y la reaccin de citocromo oxidasa. Para la confirmacin
del biotipo se utilizan los parmetros de la Tabla II-7-1.
3. Deteccin de antgenos: La presencia de antgenos capsulares en muestras de LCR,

sangre u orina puede realizarse empleando tcnicas de aglutinacin de partculas de ltex
recubiertas con anticuerpos monoclonales. El uso de tcnicas moleculares, como la reaccin en
cadena de la polimerasa, es muy til.
44
FAMURP
Microbiologa
La vacuna est compuesta de polisacridos capsulares de los serogrupos A, C, Y, y W135,

disponible para nios; y la conjugada para adultos.
Las personas expuestas a pacientes con meningococemia, (mdicos, enfermeras, etc.),

deben recibir tratamiento profilctico con rifampicina. Los antibiticos de eleccin para el
tratamiento son la penicilina, las cefalosporinas de tercera generacin y el cloranfenicol.
45
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 8
INFECCIONES CON COLONIZACIN
GNEROS CORYNEBACTERIUM, ACTINOMYCES Y NOCARDIA
CORYNEBACTERIUM
El gnero Corynebacterium agrupa bacterias que tienen morfolgica irregular: en mazo,

letra china, extremos gruesos y disposicin diversa. Numerosas especies se encuentran
distribuidas en el medio ambiente, plantas y animales; algunas especies colonizan piel y mucosas
del hombre como saprofitas, aunque pueden comportarse como patgenos oportunistas. Loefler,
en el ao 1884, cultiva y demuestra el rol patgeno de la especie C. diphtheriae en la enfermedad
denominada difteria. Luego Roux y Yersin, confirman que las lesiones orgnicas encontradas lejos
del foco infeccioso son producidas por accin de una toxina. En el ao 1923, Ramn, prepar la
vacuna, luego de transformar la toxina en toxoide.
Corynebacterium diphtheriae
1. Morfologa y estructura: son bacilos con los extremos redondeados, unidos de forma
irregular dando imgenes de letras chinas, algunos tienen los extremos ms gruesos. Son positivos
a la coloracin de Gram y presentan granulaciones de polifosfatos, generalmente de ubicacin
polar. Las formas virulentas presentan una cubierta que es el antgeno K. No forman espora ni
poseen flagelos.
2. Fisiologa: la bacteria es aerobia, aunque puede desarrollar en la profundidad de un

medio semislido, es lbil a la accin de los desinfectantes y muere luego de un minuto a 100C.
Para el desarrollo in vitro requiere de los aminocidos cistina y cido glutmico. Para el
aislamiento a partir de muestras clnicas se utiliza el agar sangre chocolate con telurito de potasio,
el cual inhibe la flora saprofita farngea y se reduce por accin de los Corynebacterium, formando
colonias negras.
3. Toxinas: la produccin de exotoxina por C. diphtheriae depende de la presencia del

bacterifago beta, portador del gen (tox+), que codifica la formacin de toxina. El ADN circular del
fago se integra en el material gentico de la bacteria, creando el estado de profago, lo que impide
la lisis de la clula bacteriana. En la prctica clnica se encuentran cepas de C. diphtheriae no
productoras de toxina, por lo tanto carentes del bacterifago; aunque pueden adquirirlo sin son
expuestas a cepas portadores del fago beta. La toxina es un polipptido, constituida por dos
fracciones: la B, que se une a los receptores especficos de las clulas del corazn y clulas
nerviosas, y la A, que acta interrumpiendo la elongacin de las cadenas peptdicas, y as inhibe la
sntesis de las protenas.
46
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
El ser humano es el nico reservorio del C. diphtheriae, por lo tanto, tiene distribucin
mundial. La enfermedad de la difteria se transmite entre personas por exudados respiratorios y
contacto directo; tiene mayor prevalencia en localidades con hacinamiento y sin programas de
vacunacin. Tras el contagio se desarrollan signos y sntomas locales de inflamacin en el tracto
respiratorio alto (nariz, faringe, laringe y trquea), donde se forman membranas blancas, que se
tornan grises y necrticas, acompaadas con sntomas generales. Luego se presentan sntomas de
miocarditis y neuropata. Las lesiones cutneas son poco frecuentes, y se presentan con lceras de
evolucin crnica, que no se asocian a signos de intoxicacin y que induce a la formacin de
elevados ttulos de antitoxina (inmunizacin natural).
La resistencia a la infeccin por C. diphtheriae est estrechamente relacionada con

niveles de antitoxina circulante superiores a 0,01 unidad de floculacin por mililitro (Uf/ml).
1. Microscopa: los frotices de secreciones coloreados con Gram son slo sugestivos de
difteria y debe realizarse el cultivo.
2. Cultivo: el diagnstico de difteria se fundamenta en el aislamiento del microorganismo y

la demostracin de formacin de exotoxina. Para el aislamiento se utilizan medios enriquecidos
con sangre y selectivos, aadindoles aminocidos y telurito de potasio. Las colonias de color gris
oscuro son sospechosas y se debe investigar la actividad contra la cistena, la produccin de
exotoxina y mejor an, la secuenciacin del cido nucleico.
La demostracin de que la cepa aislada es productora de exotoxina se puede realizar de

tres maneras: a) in vitro, por inmunodifusin (test de Elek), para lo cual, en una placa petri con
agar suero fundido se deposita un trozo de papel de filtro, previamente embebido en antitoxina
diftrica; una vez solidificado el agar, la cepa sospechosa se siembra en estras transversales al
papel de filtro. Luego de 24 a 48 horas de incubacin, cuando la cepa es productora de exotoxina,
se observarn lneas de precipitacin ubicadas en la interseccin entre el papel de filtro y la lnea
de siembra. b) In vivo, para ste fin, la suspensin de la colonia sospechosa se inocula por va
intradrmica a un conejo; luego de 24 horas se observar dermonecrosis en la zona de
inoculacin. Esta reaccin drmica debe ser inhibida por la inyeccin previa de antitoxina. c) La
demostracin de la presencia de exotoxina diftrica en muestras clnicas puede realizarse por la
tcnica de inmunoprecipitacin.
3. Tcnicas moleculares: la reaccin en cadena la polimerasa (PCR) se utiliza para detectar

la presencia del gen tox, a partir de muestras clnicas.
47
FAMURP
Microbiologa
El control de la enfermedad se realiza mediante la inmunizacin. El cuadro clnico de la

enfermedad de la difteria es expresin de la exotoxina, y los anticuerpos antitxicos circulantes
neutralizarn especficamente dicha actividad. La vacuna se obtiene a partir de cultivos en medios
lquidos, los cuales se filtran y se les aade formol, para inactivar la toxina y convertirla en toxoide
(sin actividad txica). La vacunacin se aplica en nios.
El uso de la inmunidad pasiva, mediante la aplicacin de suero con antitoxina diftrica,

est indicado slo en los primeros das de la enfermedad; para lo cual se emplea suero equino
hiperinmune en concentraciones de 60 000 a 100 000 unidades de inmunoglobulinas. La
administracin de antibiticos, como penicilina o eritromicina, es necesaria para erradicar el foco
infeccioso.
ACTINOMYCES
Los microorganismos que integran el gnero Actinomyces son anaerobios, que colonizan
normalmente la boca, el colon y la vagina. Las infecciones producidas por estos grmenes son de
evolucin lenta, y afectan aparato digestivo, respiratorio o genital. Una caracterstica comn de
este grupo bacteriano es la formacin de fstulas por donde drena secrecin con agregados
bacterianos, denominados granos.
1. Morfologa y estructura: son bacilos grampositivos, con tendencia a formar filamentos y

ramificaciones. No forman esporas ni flagelos.
2. Fisiologa: son anaerobios estrictos o facultativos. Para el desarrollo in vitro se requiere

de medios enriquecidos y tardan ms de dos semanas en formar colonias. La identificacin de la
cepa aislada se basa en las caractersticas de la colonia y reacciones bioqumicas frente a la urea,
la gelatina y la formacin de la enzima catalasa.
B. PODER PATGENO
El ingreso del actinomices en los tejidos est en relacin a diversas lesiones producidas en
las mucosas: traumatismos por procedimientos odontolgicos; aspiracin bronquial de alimentos;
presencia de divertculos inflamados, apendicitis o cuerpos extraos; y al uso de dispositivos
endocervicales en enfermedad pelviana. Por lo general las lesiones aparecen como tumefacciones
induradas, fibrosas, nicas o mltiples; que se ablandan y supuran hacia la piel u rganos
adyacentes, formando trayectos fistulosos.
La secrecin purulenta que drena contiene los denominados grnulos de azufre, que son
conglomerados de bacterias cuyos tamaos varan desde microscpicos hasta macroscpicos.
48
FAMURP
Microbiologa
La adecuada obtencin y manipulacin de la muestra es necesaria para el xito en el

diagnstico. La asociacin con estudios histolgicos mejora al mximo el diagnstico. La muestra
debe ser obtenida por aspiracin con aguja, No se deben emplear los hisopos.
1. Microscopa: Depositar una gota de la secrecin en un portaobjetos y observar al

microscopio con objetivo 40X (en fresco); la presencia de grnulos en la muestra y bacilos
filamentosos en la periferia del grnulo es muy sugestivo. A la coloracin de Gram se
comportan como bacilos delgados, ramificados y grampositivos.
2. Cultivo: Sembrar la muestra en condiciones anaerbicas, se recomienda el medio lquido
de thioglicolato. La formacin de colonias se observar a partir de las dos semanas.
La prevencin de ste proceso infeccioso se realiza mediante la buena higiene buco

dental y la profilaxis antibitica cuando se realizan procedimientos diagnsticos invasivos. El
tratamiento se inicia con el drenaje quirrgico del absceso y la administracin, por perodos
prolongados, de penicilina; como alternativa se puede indicar eritromicina, doxiciclina o
clindamicina.
NOCARDIA
El gnero Nocardia pertenece al grupo de los actinomicetos aerobios. El nombre

corresponde a Edmond Nocard que, el 1888, hizo el primer aislamiento en bovinos.
Estructuralmente este gnero tiene dos caractersticas propias: el poseer cido miclico en la
pared, responsable de la resistencia a la decoloracin con alcohol cido, y contener cido diamino
pimlico, en vez de lisina, como integrante de los pptidos del peptidoglucano.
Las especies de Nocardia habitan en el medio ambiente: suelo, materia orgnica en

descomposicin y aguas detenidas. En el ser humano son saprofitas, pero pueden ocasionar
infecciones como consecuencia de contaminacin, sea por inoculacin o inhalacin.
A.MORFOLOGA Y ESTRUCTURA
1. Morfologa y estructura: son bacilos filamentosos, que forman ramificaciones tanto en las
muestras biolgicas como en los cultivos in vitro. Tien dbilmente con el Gram, pero la
estructura de la pared corresponde a una bacteria grampositiva. Son cido-alcohol
resistentes, dbiles, por lo que se recomienda el uso de la coloracin de Kinyoun.
49
FAMURP
Microbiologa
2. Fisiologa: desarrollan con facilidad en la mayora de medios de cultivo, luego de 2 a 3 das

de Incubacin, formando colonias secas de aspecto creo, con presencia de hifas areas.
3. Clasificacin: para la identificacin de especie es necesario el empleo de tcnicas
moleculares, ya que las actividades metablicas in vitro son limitadas. Se describen las
especies N. asteroides, N. brasiliensis, N. nova, N. farcinica, etc.
B. PODER PATGENO
Las infecciones respiratorias se producen por inhalacin, que produce la colonizacin de

las vas areas superiores y el tejido pulmonar. En cambio, las infecciones primarias de la piel, se
producen por inoculacin traumtica, que lleva la formacin de abscesos. Las nocardias resisten a
la accin de la fagocitosis, se reproducen y diseminan en el tejido subcutneo, luego va sangunea
van al sistema nervioso central. La evolucin clnica de las infecciones drmicas es crnica y se
caracteriza por ser indolora, subcutnea y con presentacin de fstulas que supuran; a la lesin
organizada se le denomina micetoma. La especie N. brasiliensis es la que con mayor frecuencia
se diagnostica en humanos.
1. Microscopa: el frotis de la secrecin purulenta, coloreado con kinyoun para bacterias

cido resistentes, es de gran importancia para el diagnstico; se observarn filamentos
ramificados gram positivos plidos, cido resistentes.
2. Cultivo: para el aislamiento se utilizan los medios empleados para el cultivo de los
hongos, como el Sabouraud.
3. Identificacin: para la determinacin de la especie se utilizan tcnicas moleculares.
Es imposible prevenir la colonizacin o infeccin por Nocardia, pues son bacterias de

hbitat ambiental. Para el tratamiento, la asociacin sulfametoxazol con trimetoprim es la
recomendada.
50
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 9
INFECCIONES CON COLONIZACIN
GNEROS HAEMOPHILUS, BORDETELLA Y GARDNERELLA
HAEMOPHILUS
Son microorganismos que, en su mayora, forman parte de la flora bacteriana normal de la

cavidad oral y tracto respiratorio alto. Su nombre obedece a la necesidad de factores presentes en
la sangre para desarrollar in vitro. Las especies patgenas son los agentes que con frecuencia son
aislados en patologa infecciosa humana, y correspondi a Pffeifer, en 1982, identificar al
Haemophilus influenzae como agente causal de la influenza epidmica bacteriana.
1. Morfologa y estructura: son coco-bacilos, pequeos y pleomorfos, gramnegativos.

Muchas especies patgenas poseen un polisacrido capsular que contiene ribosa ribitol
fosfato (RRP), base de la clasificacin en serotipos (a,b,c,d,e,f). Las especies que no poseen
cpsula son menos agresivas. La pared bacteriana est constituida por lipooligosacridos,
que son los responsables de la actividad endotxica. No poseen flagelos.
2. Fisiologa: stas bacterias son aerobias o anaerobias facultativas. Para desarrollar in vitro
necesitan la presencia de factores de crecimiento, como la hemina (factor X, termoestable
que contiene hierro y protoporfirina), y la nicotinamina del cido nucletido (factor V,
termolbil, que contiene coenzimas de la dehidrogenasa); ambos factores estn presentes
dentro de los eritrocitos; para que el factor V sea liberado se requiere calentar
ligeramente el agar sangre. Algunas especies requieren la presencia de CO 2. Es comn que
posean plsmidos que codifican resistencia a los antibiticos, los que son transferidos por
conjugacin; as como un transposn que codifica beta lactamasa.
3. Clasificacin: Se conocen hasta ocho biotipos de Haemophilus, los que se diferencian por
los requerimientos para desarrollar in vitro; as como por la capacidad de metabolizar
azcares, ornitina, urea, y la produccin de catalasa o indol.
Tabla II-9 -1
Biotipos de Haemophilus
biotipo Factor X Factor V Catalasa CO 2 Hemlisis Glucosa Sacarosa
--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
H. influenzae + + + + -- + --
H. aegyptus + + + -- -- + --
H. aprophylus + -- -- -- -- + +
H. parainfluenzae -- + +/- -- -- + +
H. haemolticus + + + -- + + --
H. ducreyi + -- -- +/- +/- -- --
51
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
Haemophilus influenzae
La patogenia de esta especie se fundamenta en varios factores: a) la presencia de pili o

adhesinas que facilitan la colonizacin de las clulas epiteliales de las vas respiratorias superiores;
b) los lipooligosacridos de la pared, que tienen actividad de endotoxina e inactivan los cilios de
las clulas bronquiales; c) la produccin de cpsula, con carcter invasivo e inmunognico, que por
su composicin de RRP, estimula la formacin de anticuerpos; y d) la sntesis de proteasas, que
degradan las inmunoglobulinas A secretoras. A todo ello se aaden factores condicionantes del
husped, como infecciones virales recientes o elementos irritantes presentes (humo). Una vez que
las bacterias colonizan las mucosas respiratorias, pasan a travs de las clulas epiteliales al
torrente sanguneo, donde H. influenzae se provee de cpsula, principal factor de virulencia. Los
cuadros clnicos que produce H. influenzae son: meningitis, epiglotitis, neumona y artritis; siendo
el serotipo b el ms frecuente.
Hay un grupo de H. influenzae, que no se pueden tipificar en los serotipos capsulares

conocidos, y se les denomina no tipificables; el conocimiento de ellos es importante porque son
causa de procesos infecciosos localizados: otitis, sinusitis, conjuntivitis, vaginitis, complicaciones
en pacientes con enfermedad obstructiva crnica y neumona en gerontes. El biotipo H. aegyptus,
merece especial atencin porque es portador de un plsmido y ocasiona conjuntivitis purulenta
con fiebre purprica, denominada enfermedad de Koch-Weeks.
1. Microscopa: La coloracin de Gram es til cuando la muestra procede de cavidades

normalmente estriles, como lquido cefalorraqudeo, donde se puede observar bacilos
gramnegativos cortos y largos (pleomorfos).
2. Cultivo: el uso de agar chocolate (agar sangre calentado), es el recomendado, porque
contiene los dos factores X y V. Si la muestra se cultiva en agar sangre, se debe hacer, a su
vez, un trazo recto de siembra con una cepa de Staphylococcus aureus, la cual al lisar los
eritrocitos libera el factor V. El germen desarrolla en 24 horas dando colonias pequeas,
lisas y opacas alrededor de las colonias del estafilococo (satelitismo).
3. Identificacin: se realiza siguiendo el comportamiento y las necesidades metablicas que
figuran en la tabla II-9-1. Es aplicable el uso de procedimientos moleculares.
4. Deteccin de antgenos en la muestra: la presencia del antgeno capsular ribosa ribitol
fosfato del serotipo b, en LCR o en orina, es detectable mediante la reaccin de
aglutinacin con ltex recubierto de anticuerpos monoclonales. Este estudio es de uso
fcil, pero adolece de limitaciones cuando la infeccin es producida por Haemophilus de
otro serotipo capsular o no tipificable.
52
FAMURP
Microbiologa
Existe la vacuna elaborada a partir del antgeno capsular purificado, que se distribuye en la
forma conjugada, para ser administrada en los esquemas de vacunacin infantil.
Para el tratamiento de un proceso agudo se recomienda el uso de cefalosporinas de

tercera generacin. El uso de ampicilina ha sido descontinuado por el elevado ndice de cepas
productoras de beta lactamasa. Otras alternativas teraputicas son: cloranfenicol, sulfametoxazol-
trimetoprim, fluoroquinolonas y la asociacin de ampicilina con cido clavulnico.
BORDETELLA
Bordetella pertussis, agente causal de una enfermedad muy conocida desde el siglo XVI,
como: tos quintosa, tos convulsiva, coqueluche, pertusis y tos ferina; fue descrita por
primera vez por Bordet y Gengou en 1906. En la actualidad el gnero Bordetella comprende ocho
especies, de las cuales dos son patgenas para el hombre: B. pertussis y B. parapertussis; la
especie B. bronchiseptica es ms frecuente en animales.
1. Morfologa y estructura: son cocobacilos gramnegativos, muy pequeos (inferiores a una

micra); los patgenos humanos son inmviles y presentan cpsula en ciertas etapas.
2. Fisiologa: son bacterias aerobias estrictas, desarrollan colonias diminutas, brillantes,
luego de 3 a 5 das de incubacin. El medio de cultivo con sangre y almidn, ideado por
Bordet y Gengou, sigue siendo el recomendado. La nicotinamida (cido niciotnico) es un
factor de crecimiento indispensable. B. pertussis produce diversas sustancias que se
consideran juegan un papel en el desarrollo de la enfermedad, como: hemaglutinina,
toxina adenilciclasa, toxina pertussis, citotoxina traqueal, toxina dermonecrtica y factores
de colonizacin. As mismo presenta cambios genticos, que se expresan fenotpicamente
por modificaciones del aspecto de las colonias, denominadas variaciones de fase, que
conducen a la prdida de factores de virulencia.
3. Clasificacin: los estudios moleculares no han demostrado diferencias importantes entre
las diversas especies de Bordetella, por lo que aun se sigue utilizando la clasificacin por
biotipos.
Tabla II-9-2
Especies de Bordetella
especies Oxidasa Ureasa Movilidad
B. pertussis ++ -- --
B. parapertussis -- ++ --
B. bronchiseptica ++ ++ ++
53
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
B. pertussis slo afecta al humano y se transmite por va respiratoria; las bacterias se

adhieren al epitelio ciliado con la participacin de adhesinas (pili) y hemaglutininas; luego segrega
tres toxinas: a) la toxina pertussis, que facilita la unin de las bacterias a las clulas ciliadas, y
controla la actividad de la adenil ciclasa produciendo incremento de secreciones respiratorias; as
mismo, la toxina se une a los macrgafos e inhibe la quimiotaxis, y promueve la linfocitosis. b) La
toxina dermonecrtica, que produce necrosis tisular por el mecanismo de vasoconstriccin capilar.
Y c) la citotoxina traqueal, que ocasiona dao a las clulas ciliadas impidiendo su regeneracin, lo
que conlleva a una recuperacin lenta de la enfermedad
La enfermedad se caracteriza por presentar, en la fase catarral, febrcula, enrojecimiento

conjuntival, abundante secrecin nasal y bronquial; luego de una a dos semanas se presenta tos
exigente, paroxstica con estridor, pudiendo estar asociada a vmitos y falta de oxigenacin con
cianosis. En el hemograma se observa leucocitosis con linfocitosis. La evolucin del proceso
infeccioso es lento y tarde 3 a 4 semanas en resolverse.
C. DIAGSTICO DE LABORATORIO
1. Microscopa: se utiliza el frotis de la expectoracin, teido con anticuerpos marcados con

fluorescena, que tiene buena sensibilidad, pero pueden presentarse reacciones cruzadas
que dan falsos positivos.
2. Cultivo: la sensibilidad del cultivo es variable y est en relacin con diversos factores;
mejora cuando el cultivo se procesa en la fase catarral de la enfermedad y cuando se
emplea el medio de cultivo apropiado de Bordet Gengou, modificado con carbn y
glicerol, e incubado en cmara hmeda hasta por diez das.
3. Molecular: el uso de la reaccin en cadena de la polimerasa es de gran ventaja.
4. Identificacin: las colonias desarrolladas se enfrentan a antisueros especficos, mediante
procedimientos de aglutinacin o fluorescencia directa.
La vacuna acelular, que contiene toxina pertussis inactivada y hemaglutinina, otorga un

elevado porcentaje de inmunidad, a diferencia de la antigua que era inactiva entera.
El tratamiento de la infeccin por B. pertussis es bsicamente sintomtico. Los macrlidos

son los antibiticos de eleccin, pudiendo utilizar como alternativa las tetraciclinas o el
sulfametoxazol+trimetoprim.
54
FAMURP
Microbiologa
GARDNERELLA
En el ao 1953, Leopold, describe, en pacientes con prostatitis y cervicitis, la presencia de

microorganismos semejantes a los Haemophilus. Luego, Gardner, los identifica como agentes
causales de las vaginitis inespecficas (vaginosis), denominndole Gardnerella vaginalis, esta
patologa tambin puede ser causada por Mobiluncus sp. , bacterias anaerobias en forma de hoz
gramvariable, que colonizan las clulas epiteliales vaginales.
1. Morfologa y estructura: son bacilos cortos, pleomorfos, que toman la coloracin de Gram
en forma variable, son inmviles y no presentan cpsula ni espora. La presencia de pilli les
facilita la adherencia al epitelio y produce una toxina citoltica.
2. Fisiologa: son anaerobios facultativos, negativos para las reacciones de oxidasa, catalasa,
indol, ureasa y nitratos. A partir de algunos carbohidratos, como dextrosa, maltosa y
almidn, producen cido actico. Tienen la capacidad de desaminar la lisina, ornitina y
arginina, liberando aminas tipo cadaverina, putresina y trimetilamina, que son las
responsables del olor a pescado de la secrecin vaginal. Para el desarrollo in vitro
requieren la presencia de vitaminas y bases purnicas.
B. PODER PATGENO
G. vaginalis habita en la vagina humana, sin producir sntomas ni signos en la mayora de

las mujeres. En el 100% de casos con sndrome de vaginosis bacteriana, est presente en la
vagina, y en la uretra de sus contactos masculinos. La capacidad de adherencia a las clulas
epiteliales vaginales y uretrales es el principal mecanismo de colonizacin, reemplazando a la flora
residente.
1. Microscopa: la observacin microscpica del frotis coloreado con Gram es diagnstico, ya

que se aprecia la presencia de bacilos gramnegativos o grampositivos cortos, que invaden
las clulas epiteliales, conocidas como clue cells o clulas clave. La flora vaginal
residente, constituida por lactobacilos, desaparece.
2. Cultivo: en la prctica mdica este procedimiento es de poca importancia.
3. Otros: pH vaginal superior a 4,5, y si es posible determinar de actividad enzimtica de
sialidasa, prolina y aminopeptidasa en la secrecin vaginal.
No hay vacuna para esta infeccin. El microorganismo es sensible a diversos antibiticos,

se recomienda el uso tpico y sistmico de metronidazol o clindamicina; para rehabilitar la flora
vaginal la terapia se debe asociar a estrgenos.
55
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 10
INFECCIONES ENTRICAS
GNEROS ESCHERICHIA, SALMONELLA Y SHIGELLA
ENTEROBACTERIAS
El nombre de estos microorganismos se debe a que son huspedes naturales del intestino
del ser humano y de muchos animales, aunque se les encuentran tambin en el agua, suelo y
vegetales. La facilidad con que desarrollan in vitro ha permitido estudiar sus propiedades
metablicas, estructura antignica, composicin gentica y mecanismo patognico; as mismo ha
conducido a clasificarlos en gneros, especies, serotipos y fagotipos.
Las caractersticas comunes de las enterobacterias son: a) bacilos gramnegativos, b)

aerobios y anaerobios facultativos, c) metabolizan la glucosa por va fermentativa, d) reducen los
nitratos a nitritos, e) no producen la enzima citocromo oxidasa y f) pueden ser inmviles o mviles
por flagelos distribuidos en forma peritrica.
La funcin de las enterobacterias en el intestino es beneficiosa para el husped, pues

concluyen el metabolismo de las protenas e hidratos de carbono que han sido ingeridos. La
especie representativa de esta familia que coloniza el colon es Escherichia coli. Algunos gneros se
asocian siempre con infecciones intestinales, como Salmonella o Shigella; otros pueden ocasionar
infecciones oportunistas, como Escherichia coli, KJebsiella, Proteus. En cambio hay especies, que
siendo normalmente comensales, pueden adquirir genes de virulencia, de un reservorio animal o
un portador humano, y convertirse en patgenos.
1. Morfologa y estructura: son bacilos de longitud variable, de 1 a 6 micras, con los

extremos redondeados, no forman esporas, la mayora de los gneros presentan flagelos
de tipo peritrico (excepto Klebsiella y Shigella), algunas especies pueden formar cpsula.
A la coloracin de Gram se comportan como negativos.
En la pared de la enterobacterias se encuentra el lipopolisacrido central (LPS), que

corresponde al antgeno somtico O, y es compartido por todos los gneros de esta
familia. El componente polisacrido permite clasificar a las diferentes especies en
serotipos e induce la formacin de anticuerpos IgM en el husped; en cambio el
componente lipdico es el responsable de la actividad endotxica. Los flagelos son
protenas, que constituyen el antgeno H e induce la formacin de anticuerpos tipo IgG.
Algunas especies de esta familia poseen una verdadera cpsula denominada antgeno K
(Klebsiella), en cambio otras poseen una delgada capa llamada antgeno Vi (Salmonella typhi),
ambas estructuras estn relacionadas con la virulencia de la especie bacteriana, al impedir la
unin con los anticuerpos anti somticos.
56
FAMURP
Microbiologa
2. Fisiologa: todas las especies se desarrollan con facilidad en los medios de cultivo en
forma aerbica o anaerbica facultativa, metabolizan numerosos sustratos, base de la
clasificacin en gneros. La ausencia de la enzima citocromo oxidasa hace la diferencia
con otros grupos morfolgicamente similares como Pseudomonas o Vibrios. La capacidad
de fermentar la lactosa, se utiliza para agrupar a estas bacterias en dos categoras, las
positivas (Escherichia, Klebsiella, Enterobacter) y las negativas (Salmonella, Shigella,
Proteus). Algunas especies patgenas son resistentes a la accin de las sales biliares,
comportamiento que se utiliza para incluirla en los medios de cultivo y hacerlo selectivo
para aislarlas a partir de muestras clnicas.
3. Clasificacin: la familia Enterobacteriaceae se clasifica en tribus y gneros, segn la
capacidad metablica sobre diversos sustratos. Se describen ms de 30 gneros, pero los
de mayor importancia en patologa humana son: Escherichia, Shigella, Salmonella,
Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter (Hafnia y Serratia), Proteus, Morganella y Yersinia.
Tabla II-10-1
Biotipos ms frecuentes en patologa humana
Lactosa SH2 Indol Citrato Urea Desami Decarbo Movi V.P.

nasa xilasa lidad
Escherichia ++ -- ++ -- -- -- ++ ++ --
Klebsiella ++ -- -- ++ ++ -- ++ -- ++
Salmonella -- ++ -- ++ -- -- ++ ++ --
Shigella -- -- -- -- -- -- -- -- --
Proteus -- ++ +/- +/- ++ ++ -- ++ --
4. Enzimas y toxinas: Las enterobacterias poseen algunos factores de virulencia comunes,

por ejemplo, el componente lipdico de la endotoxina, que se libera con la lisis bacteriana
y tiene acciones diversas: activar el complemento, liberar citocinas, producir fiebre,
inducir coagulacin intravascular, shock y muerte.
B. PODER PATGENO
Casi todas las bacterias de sta familia estn cubiertas por pilis, estructuras que participan
en la adherencia a la superficie de las clulas mucosas digestivas, primer paso para la colonizacin.
Las especies de los gneros Salmonella y Shigella, son enteropatgenas, y ciertas cepas de la
especie Escherichia coli han adquirido factores de virulencia, luego se comportan tambin como
patgenas intestinales.
En la prctica clnica, las enterobacterias son las que con ms frecuencia ocasionan
infecciones diversas, como: urinarias, heridas operatorias, septicemia, meningitis y neumona;
representando el 80% de los bacilos gramnegativos aislados en pacientes hospitalizados. La
57
FAMURP
Microbiologa
elevada frecuencia de estas bacterias en patologa humana, tal vez sea explicado por su capacidad
de adaptabilidad gentica, adems experimentan intercambios de factores de virulencia y de
resistencia a los antibiticos. A ello se aade, el uso no controlado de antibiticos en la poblacin,
lo que ejerce una presin selectiva de cepas resistentes.
1. Microscopa: la coloracin de Gram, de las heces de pacientes con enterocolitis, no

brinda ningn aporte; pero su presencia en muestras procedentes de heridas, abscesos o lquidos
de puncin, es muy orientador.
2. Cultivo: para el aislamiento de las enterobacterias se utilizan medios selectivos, como:

agar Mac Conkey, agar SS, agar XLD, agar Drigalski, etc., que impiden el desarrollo de cocos y de la
flora saprofita intestinal. Si por diversas razones la muestra no se puede procesar de inmediato,
sta debe inocularse en un medio de conservacin o transporte (Cary Blair), y as evitar el riesgo
de destruccin de los patgenos.
Las colonias aisladas debern ser sometidas a estudios bioqumicos frente a diversos
sustratos, y ubicar el gnero y biotipo al que pertenecen. Frecuentemente es necesario confirmar
el estudio con reacciones inmunolgicas de aglutinacin frente a antisueros especficos (somtico
o flagelar).
4. Indirecto: slo en el caso de infecciones por salmonelas tfica o paratfica, en las que se
producen bacteriemias, se utiliza la bsqueda de anticuerpos en sangre contra los
antgenos somticos O y flagelares H, aunque tienen importancia relativa.
La presencia de las enterobacterias en la flora intestinal y en el medio ambiente, hace

difcil elaborar un protocolo ideal para prevenir las infecciones. La adquisicin de hbitos
higinicos adecuados para la elaboracin y la venta ambulatoria de alimentos, as como la higiene
personal y el lavado de manos, disminuir el riesgo de la infeccin va fecal oral. No se dispone de
vacuna con buena proteccin.
El tratamiento de la infeccin por Salmonella typhi tiene un esquema bien establecido con
cloranfenicol o fluorquinolonas. En enterocolitis por Shigella se recomienda el uso de
sulfatrimetoprim o fluoroquinolonas. En salmonelosis no complicada, el tratamiento sintomtico
es primordial, algunas escuelas no recomiendan el uso de antibiticos; de ser necesario, se puede
emplear amoxicilina, quinolonas o sulfatrimetoprim. Para el tratamiento de las infecciones extra
intestinales, la eleccin del antibitico est basada en pruebas de sensibilidad in vitro.
58
FAMURP
Microbiologa
Escherichia coli
El biotipo correspondiente a E. coli, se refiere a bacterias que metabolizan glucosa y

lactosa, que producen Indol a partir del aminocido triptfano y que no producen hidrgeno
sulfurado. Es la especie saprofita que habita en mayor proporcin en el colon, y a su vez la que con
ms frecuencia se asla en patologa humana.
E. coli, es la causa del 90% de infecciones de las vas urinarias, incluso se relaciona a las
cepas portadoras de ciertos pili como las causantes de pielonefritis; as mismo como la primera
causa de sepsis neonatal. La presencia de esta cepa bacteriana en el agua, se utiliza como
marcador para inhabilitar el agua como potable. Hay 5 cepas de E. coli que han adquirido factores
de patogenicidad y producen gastroenteritis, cada una mediante un mecanismo diferente.
1. E. coli enteropatgena (ECEP): estas bacterias poseen un factor de virulencia, que es

codificado por un plsmido, y les otorga la capacidad de adherirse a las clulas epiteliales del
intestino delgado, destruir las vellocidades y formar micro colonias; todo ello conlleva a la
produccin de diarrea acuosa. Es la diarrea ms frecuente en nios de pases en desarrollo.
2. E. coli enterotoxignica (ECET): estas cepas elaboran dos toxinas, codificadas por un
plsmido transferible, que actan a nivel del intestino delgado. Una de ellas es termolbil, que
activa la enzima adenil ciclasa y la otra es termoestable, que activa la enzima guanil ciclasa,
produciendo incremento del monofosfato de adenosina (AMP cclico), lo que induce a la diarrea
acuosa intensa. Este germen se adquiere por la ingesta de agua o alimentos contaminados con
heces, se le denomina diarrea de los viajeros.
3. E. coli enterohemorrgica (ECEH): el serotipo O:157:H7 es el ms frecuente, ha

adquirido un bacterifago, que es el productor de la toxina tipo shiga. Esta toxina tiene capacidad
de destruir las clulas endoteliales del glomrulo, produciendo alteracin de la funcin renal; as
mismo estimula la actividad de las citocinas inflamatorias y del factor de necrosis tumoral. Los
casos clnicos se relacionan con la ingesta de carne de ternero mal cocido, leche no pasteurizada o
verduras crudas, produciendo colitis hemorrgica, fiebre y riesgo del sndrome hemoltico
urmico. La dosis infectante es muy pequea.
4. E. coli enteroinvasiva (ECEI): pocos serotipos de E. coli poseen los genes transportados
en un plsmido, que les codifiquen la capacidad de invadir y destruir las clulas del colon,
ocasionando diarrea acuosa, en un inicio; luego con sangre y leucocitos (pus), similar a la
producida por Shigella.
5. E. coli entreroagregadora (ECEA): estas bacterias tienen la propiedad de

autoaglutinarse y adherirse firmemente a las clulas epiteliales intestinales formando una
biopelcula que las protege, produciendo diarrea crnica.
59
FAMURP
Microbiologa
Salmonella
El biotipo Salmonella incluye a bacilos mviles que no fermentan lactosa, son productores
de hidrgeno sulfurado (excepto S. paratyphi A), metabolizan el aminocido lisina por
decarboxilacin, y pueden utilizar citrato como nica fuente de carbono (excepto S. typhi y S.
paratyphi A). Salmonella se encuentran en el tracto intestinal de diversos animales mamferos,
aves y reptiles como comensales, pudiendo ejercer accin patgena en el ser humano.
De acuerdo a la composicin antignica somtica y flagelar, se han descrito ms de 2500

serotipos distintos; pero slo algunos serotipos como Salmonella typhi y Salmonella paratyphi (A,
B, o C) se encuentran muy bien adaptadas al ser humano y no poseen otro husped natural. Otros
serotipos se han adaptado mejor a especies animales, como Salmonella typhimurium en roedores,
Salmonella dublin en ganado vacuno, Salmonella cholerasuis en cerdos y Salmonella gallinarum en
los pollos; todas ellas son fuentes de infeccin para el ser humano. Los estudios de hibridacin de
ADN han demostrado la existencia de siete grupos; las cepas que afectan al ser humano
pertenecen al grupo I, y se les denomina Salmonella entrica.
La infeccin por S. typhi y S. paratyphi se adquiere por contacto estrecho con una persona
enferma, una portadora sana o por ingesta de alimentos contaminados (aves de corral, huevos,
productos lcteos, etc.). La dosis infectante para S. typhi es baja (103), en cambio para otras
salmonellas es elevada (106 108). Las bacterias atraviesan la mucosa del intestino delgado, se
localizan en los enterocitos y en las clulas M de las placas de Peyer; seguidamente son
transportadas hasta el tejido linftico submucoso, para luego ingresar a la circulacin linftica y
sangunea, ocasionando bacteriemia; luego colonizan la vescula biliar y reinfectan el intestino.
La infeccin con S. typhi produce la entidad nosolgica fiebre tifoidea y las otras especies
se relacionan con bacteriemias, lesiones focales de rganos y enterocolitis. Para el diagnstico de
estas infecciones se debe demostrar la presencia del agente mediante cultivos de sangre, mdula
sea, bilis (cuerda encapsulada) o heces. La demostracin de anticuerpos contra los antgenos
somtico (O) y flagelar (H), son de utilidad cuando los ttulos son superiores a 1/320.
Shigella
El biotipo corresponde a bacilos inmviles que no fermentan lactosa, no metabolizan el

aminocido lisina, no son productores de hidrgeno sulfurado y no son capaces de utilizar el
carbono a partir del citrato. El ser humano es el nico reservorio y se transmite de persona a
persona, por las manos o alimentos contaminados con heces. El inculo necesario para producir
enfermedad es bajo (100 a 200 bacterias).
Shigella incluye cuatro especies (dysenteriae, flexneri, boydii y sonnei), que se diferencian
por el antgeno somtico; conocimiento que tiene utilidad epidemiolgica. La infeccin es
superficial y el microorganismo raramente penetra mas all de la mucosa; las bacterias invaden las
clulas del colon y se diseminan de una clula a otra, formando micro abscesos en la pared del
intestino grueso e leon terminal. La virulencia de Shigella est asociada a un plsmido, con
60
FAMURP
Microbiologa
regulacin cromosmica, que facilita el ingreso a las clulas de la mucosa intestinal y su replicacin
dentro de ellas, incluso puede sobrevivir dentro de los polimorfonucleares. El cuadro clnico se
caracteriza por espasmos abdominales, diarrea con moco y sangre, se le denomina disentera
bacilar.
La especie Shigella dysenteriae tipo 1, es la nica enterobacteria productora de exotoxina

(shiga), con capacidad txica para el intestino, endotelio renal y neuronal. Es importante sealar
que estas cepas tienen relacin gentica con las cepas de E. coli entero hemorrgica.
OTRAS ENTEROBACTERIAS
Klebsiella
Este gnero se caracteriza por ser bacilos inmviles, que poseen cpsula, la que confiere
un aspecto mucoide a las colonias. El biotipo caracterstico corresponde a bacterias que
metabolizan lactosa y urea, producen acetil metil carbinol a partir de la dextrosa (Voges
Proskawer) y utilizan el citrato como nica fuente de carbono.
La especie K. pneumoniae ocasiona cuadros respiratorios en pacientes hospitalizados, se

presenta con mayor frecuencia en grupos humanos comprometidos (alcohlicos, diabticos,
enfermedad obstructiva crnica). Las especies K. ozaenae y K. rhinoescleromatis estn
relacionadas con rinitis crnica atrfica y enfermedad granulomatosa crnica de la nariz
respectivamente. Recientemente el agente causal de la donovanosis o granuloma inguinal
(enfermedad venrea), ha sido clasificado como Klebisella granulomatis.
Enterobacter y Serratia
Son bacterias integrantes de la Tribu Klebsielleae, pero se diferencian del gnero KJebsiella
por poseer movilidad y una cpsula muy delgada. El gnero Enterobacter est integrado por las
especies E. cloacae, E. agglomerans y E. aerogenes, diferenciables entre ellas por el
comportamiento frente a los aminocidos lisina, arginina y ornitina. El gnero Serratia, en cambio,
se caracteriza por ser la nica enterobacteria productora de la enzima extracelular DNasa; la
especie ms estudiada es S. marcescens.
Estos microorganismos son patgenos oportunistas, responsables de la mayora de

infecciones intrahospitalarias, quemaduras de larga evolucin, heridas operatorias, vas
respiratorias por uso de respiradores y tracto urinario. La terapia antibitica debe estar
fundamentada con pruebas de laboratorio.
61
FAMURP
Microbiologa
Proteus
La tribu Proteeae incluye a los gneros Proteus, Morganella y Providencia, caracterizados

todos por desaminar el aminocido fenilalanina. Los gneros Proteus y Morganella se diferencian
por poseer una potente enzima ureasa, que degrada la urea en dixido de carbono y amonio. Los
miembros del gnero Proteus poseen gran movilidad, que se demuestra por el desarrollo invasivo
de sus colonias.
Es frecuente el aislamiento de cepas de Proteus en heces, y como contaminantes en la

orina que le da un olor amoniacal, por el metabolismo de la urea. As mismo, se menciona que
infecciones crnicas de vas urinarias por Proteus, pueden condicionar la formacin de clculos,
debido a la precipitacin de sales de amonio en mbito alcalino.
62
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 11
INFECCIONES ENTRICAS ULCEROSAS
GNEROS CAMPYLOBACTER Y HELICOBACTER
CAMPYLOBACTER
El nombre Campylobacter proviene del vocablo griego campylos, que significa curvo, para
diferenciarlos de los vibrios. Estos microorganismos se encuentran habitualmente en el intestino
de animales como: vacuno, oveja, cerdo, cabra, perro, gato y aves de corral. La infeccin en el
humano es una zoonosis, descrita desde el ao 1947, siendo en la actualidad una de las causas
ms frecuente de gastroenteritis.
1. Morfologa y estructura: son bacilos curvados, en forma de coma, en vuelo de gaviota, o

en S itlica; pequeos (0,5-5,0 m) y muy delgados (0,2-0,5 m); gramnegativos y mviles
por un solo flagelo polar que le imprime movimiento en dardo. Poseen una protena de
superficie (S) que funciona como cpsula, e interfiere la fagocitosis. El lipopolisacrido de
la membrana externa de la pared es el principal antgeno. No forma esporas.
2. Fisiologa: son bacterias microaerfilas, que para desarrollar in vitro necesitan una
atmsfera con 5% al 10% de CO2. No poseen la enzima citocromo oxidasa, ni metabolizan
los azcares. Desarrollan bien a 37C, pero la especie C. jejuni lo hace mejor a 42C,
caracterstica til para el aislamiento a partir de muestras fecales.
3. Clasificacin: Se reconocen hasta 25 especies diferentes, cuando se utilizan las tcnicas
moleculares (PCR); pero slo cuatro de ellas son las de mayor importancia en patologa
humana: C. jejuni, C. coli, C. upsaliensis y C. fetus.
B. PODER PATGENO
La enfermedad se produce por la ingesta de alimentos (leche o agua) contaminados,

generalmente con heces de aves de corral o de perro; el tamao del inculo es importante, ya que
son sensibles al cido del estmago. El dao tisular se presenta en el yeyuno, leon y colon,
produciendo infiltrado inflamatorio a neutrfilos, degeneracin atrfica, abscesos y ulceracin del
epitelio mucoso. El paciente presenta fiebre, dolor abdominal y diarrea, que puede ser blandas
con moco, acuosa o sanguinolenta. La especie C. jejuni es la ms frecuente en humanos; C. coli es
patgena para los porcinos; C. upsaliensis se asocia a patologas por contaminacin con diarrea en
perros y, C. fetus produce manifestaciones sistmicas con compromiso vascular (endocarditis,
tromboflebitis) y menngeo.
63
FAMURP
Microbiologa
1. Microscopa: la morfologa es caracterstica de bacilo gramnegativo, curvado en vuelo de

gaviota; se observa con mayor facilidad en frotis de heces coloreado con Vag. La
observacin de las heces en fresco, mediante la microscopia de contraste de fases o
campo oscuro, es muy til para el diagnstico en la fase aguda de la enfermedad.
2. Cultivo: para el aislamiento se requiere de medios con sangre o carbn y selectivos con el
agregado de antibiticos; deben ser incubados en atmsfera que contenga 5% a 10% de
CO2. El crecimiento de colonias se observa entre las 24 y 72 horas de incubacin. C. jejuni
desarrolla mejor a 42C, caracterstica que se utiliza para separarlas de las enterobacterias.
Otra tcnica para el aislamiento de esta especie a partir de heces, es depositar una
suspensin de la muestra sobre un filtro millipore de 0,45 m, ubicado en la superficie del
agar sangre; luego de 30 minutos se retira el filtro, y el petri se incuba a 37C. Debido al
delgado grosor del Campylobacter, pasar los poros del filtro y formar colonias, en
cambio las otras bacterias ms gruesas quedarn retenidas en el filtro. La identificacin se
realiza por las caractersticas morfolgicas y pruebas enzimticas.
D. PREVENCIN Y TRATAMIENTO:
La enfermedad se previene con medidas higinicas en el manejo de los alimentos, as

como la ingesta de alimentos lcteos pasteurizados. No hay vacuna para sta infeccin.
La gastroenteritis por Campylobacter se auto limita y slo requiere hidratacin. En caso de

requerir el uso de antibiticos, los macrlidos son los recomendados, en segunda instancia las
tetraciclinas o las quinolonas.
HELICOBACTER
La especie Helicobacter pylori se aisl por primera vez en el humano el ao 1982, y

correspondi a Barry Marshal y Robin Warren demostrar que era el agente etiolgico de la
gastritis y lcera pptica, por lo que recibieron el premio Nobel el ao 2005. El ser humano es el
nico reservorio, y la prevalencia es elevada en diversas regiones del mundo. Una vez que las
personas adquieren la bacteria, son portadoras por dcadas; su presencia en lceras duodenales y
gstricas es considerado un factor de riesgo para el desarrollo de cncer gstrico.
1. Morfologa y estructura: son bacilos espirilares pequeos (1 - 2 m), en los cultivos

adquieren forma bacilar o cocoide, mviles por mltiples flagelos polares, que le dan la
caracterstica de movilidad en sacacorchos. Colorean como gramnegativos. En el cromosoma se
localizan el locus cog A de patogenicidad, y el locus Vac A que codifica una toxina vacuolizadora.
64
FAMURP
Microbiologa
2. Fisiologa: la produccin de la enzima ureasa es la caracterstica ms importante de la

bacteria, pues al producir amonio a partir de la urea le permite sobrevivir en el medio cido del
estmago. Tambin produce peroxidasa y citocromo oxidasa, pero no metaboliza carbohidratos. In
vitro, desarrolla en medios enriquecidos con sangre, almidn o yema de huevo, con antibiticos
inhibidores de contaminantes (Skirrow) y en condiciones microaerfilas.
3. Especies: la especie H. pylori es la ms importante para el hombre, aunque se describen

las especies H. cinaedi y H. fennelliae, de hbitat entrico, aisladas en pacientes con proctitis.
B. PODER PATGENO
H. pylori coloniza la mucosa gstrica. Para ello, neutraliza los cidos del estmago por
accin del amonio, formado a partir de urea. La capacidad mvil le permite a la bacteria atravesar
el moco gstrico y fijarse en las clulas; la secrecin de la citotoxina vacuolizante hace que la
bacteria ingrese a las clulas, luego se producen citocinas pro inflamatorias que activan a los
polinucleares y mononucleares para producir factor de necrosis tumoral y superxido, los que
contribuyen a la inflamacin de la mucosa gstrica y formacin de lcera.
El cuadro clnico ms frecuente es la gastritis, que puede evolucionar a la cronicidad. La

lcera puede localizarse entre el cuerpo y antro del estmago o parte proximal del duodeno.
1. Microscopa: el estudio histolgico de muestras obtenidas por biopsias gstricas tiene un

alto grado de sensibilidad y especificidad
2. Ureasa: la potente enzima ureasa formada por el H. pylori puede ser detectada por dos
procedimientos: a) de manera directa, en que la muestra obtenida por biopsia se pone en
contacto con el reactivo urea, y se apreciar en unos minutos el cambio de color del
indicador por alcalinizacin, debido a la formacin de amonio; y b) de manera no invasiva
(prueba del aliento), en la que se detecta el CO2 con carbono radioactivo en el aire
expirado del paciente; luego de haber ingerido urea marcada con carbono radioactivo. El
CO2, es el producto de la degradacin de la urea en el estmago por accin de la enzima
ureasa, producida por H. pylori. El paciente debe expirar en un detector de radioactividad.
3. Cultivo: es poco prctico para uso en clnica.
4. Indirecto: mediante la tcnica de ELISA, se puede demostrar la presencia de anticuerpos
IgG e IgM en la sangre; ste mtodo tiene sus limitaciones, ya que los ttulos persisten por
mucho tiempo y no se correlacionan con la evolucin de la enfermedad.
No hay vacuna. Para el tratamiento hay numerosos esquemas con antibiticos,

solos o combinados con bismuto. El uso de un macrlido (claritromicina), un betalactmico
(amoxicilina) y un inhibidor de protones (omeprazol) conjuntamente, es el esquema ms
utilizado.
65
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 12
INFECCIONES ENTRICAS SECRETORAS
GNERO VIBRIO
VIBRIO
La familia Vibrionaceae agrupa a microorganismos que se encuentran ampliamente

distribuidos en la naturaleza, sobre todo en ambientes acuticos, y son integrantes del
zooplancton marino. Morfolgicamente son semejantes a las enterobacterias, pero se diferencian
por tener movilidad polar y poseer la enzima citocromo oxidasa. Se incluyen tres gneros: Vibrio,
Aeromona y Plesiomona.
En el gnero Vibrio, la especie patgena V. cholerae es endmica en la India, y ha sido el

agente causal de siete pandemias. Filippo Pacini hizo la primera descripcin de esta especie en el
ao 1854; en el Per se diagnostic por primera vez en el ao 1991.
1. Morfologa y estructura: son bacilos curvados, tien como gramnegativos y son mviles
por un flagelo polar, que le otorga movilidad en dardo. El lpido A, del lipopolisacrido de
la pared, es la endotoxina; y la fraccin polisacrido es el antgeno somtico, base de la
clasificacin en serogrupos. Algunas especies pueden formar cpsula, constituida por
polisacridos.
2. Fisiologa: son grmenes aerobios y anaerobios facultativos, metabolizan glucosa por va
fermentativa. Las especies de origen marino son haloflicas, luego necesitan
concentraciones elevadas de cloruro de sodio para desarrollar in vitro. Todas las especies
cultivan mejor a pH alcalino (8,0 9,0) y desarrollan con rapidez, debido a que el tiempo
de generacin es de diez minutos. Son frgiles a la acidez y a temperaturas superiores a
60C.
3. Clasificacin: el gnero Vibrio est formado por numerosas especies, las de mayor inters
mdico son: V. cholerae, V. parahaemolyticus, V. vulnificus, V. alginoliticus, V. fluvialis, y V.
furnissi. La especie V. cholerae se sub clasifica, en base al antgeno somtico O, hasta en
140 serogrupos.
4. Toxinas: todas las especies producen una toxina accesoria del clera y un factor de
colonizacin; pero la especie V. cholerae posee el bacterifago CTX, integrado al
cromosoma, que codifica la toxina colrica.
66
FAMURP
Microbiologa
B.PODER PATGENO
Vibrio cholerae
El hombre es el nico reservorio. El serogrupo O1, es el responsable de las seis primeras

pandemias y el serogrupo 0139, de la ltima. Los vibrios clera virulentos, son los portadores del
bacterifago CTX, el cual codifica la sntesis de la exotoxina del clera, con capacidad epidmica y
pandmica. Con fines epidemiolgicos, es conveniente conocer que el serogrupo O1 tiene tres
serotipos: Inaba, Ogawa e Hikojima, y dos biotipos: el clsico y El Tor.
La infeccin por V. cholerae se produce por ingesta de agua o comida contaminada con
elevado nmero de bacterias (106-108), por lo tanto, la enfermedad se presenta, con ms
frecuencia, en comunidades con condiciones sanitarias deficientes. Las bacterias se adhieren a la
mucosa del intestino delgado, por accin de los pilli y el factor de adherencia (cep), donde se
reproducen sin alterar el epitelio. Luego las bacterias producen la exotoxina, tipo A-B, que activa
la enzima adenilciclasa, la cual convierte el ATP en AMP cclico, y ste secreta a la luz intestinal
gran cantidad de agua y electrolitos procedentes de la sangre. Los vibrios que no poseen el
bacterifago CTX tambin ocasionan diarrea, por accin de la enterotoxina accesoria (ace), que
excreta lquidos; y la toxina oclusiva (zot) que relaja las uniones epiteliales de la mucosa del
intestino delgado incrementando la permeabilidad.
Los pacientes infectados con V. cholerae toxignico sufren de diarrea intensa, acuosa, con
presencia de mucosidad, que toma el aspecto de agua de arroz. La prdida de lquidos y
electrolitos ocasiona deshidratacin, acidosis metablica, shock e insuficiencia renal. Otros
serotipos de V. cholerae, denominados no aglutinables con el antgeno O, producen cuadros
diarreicos leves o infecciones extra intestinales.
Vibrio parahaemolyticus
Esta especie tiene como hbitat el mar, por lo tanto es haloflica. Se diferencia de otras
especies por la produccin de una hemolisina termoestable, conocida como Kanagawa, que se
expresa produciendo beta hemlisis en el agar sangre de carnero. La enterotoxina que excreta
acta incrementando la permeabilidad vascular.
La infeccin se produce horas despus de haber ingerido alimentos marinos (mejillones,

cangrejos, ostras, almejas, o pescado crudo) muy contaminados, con cuentas bacterianas
superiores a 106 bacterias, manifestndose con diarrea acuosa explosiva.
Vibrio vulnificus
Especie marina cuya virulencia est en relacin a la presencia de cpsula. El germen

ingresa por heridas contaminadas con agua de mar, para luego hacer septicemia, con elevada
mortalidad.
67
FAMURP
Microbiologa
1. Microscopa: la coloracin de Gram de la muestra es slo orientadora, si bien los

bacilos adquieren formas curvadas, pero se confunden con otros bacilos gramnegativos.
2. Cultivo: las muestras deben ser procesadas lo ms rpido posible, porque son muy
sensibles en medios cidos. Depositar una alcuota de la muestra en caldo peptonado alcalino (pH:
8.6), luego de 4 a 6 horas sub cultivar en el medio selectivo agar tiosulfato-citrato-sales biliares-
sacarosa (TCBS). Las colonias desarrolladas deben producir la enzima citocromo oxidasa, luego se
identifican mediante pruebas bioqumicas y desarrollo en diversas concentraciones de cloruro de
sodio (halofilia). La especie V. cholerae metaboliza sacarosa. Las cepas aisladas sospechosas de
clera deben ser confirmadas con el uso de antisueros.
Se han desarrollado diversas vacunas para V.cholerae, pero no han sido efectivas. El
control de la enfermedad es posible mediante buenas condiciones sanitarias y adecuado manejo
de las aguas residuales.
El tratamiento del clera es, bsicamente, el buen manejo del equilibrio hidro electroltico,
para evitar el shock hipovolmico y la acidosis. El antibitico de eleccin es la acitromicina. Las
infecciones por V. vulnficus se controlan con la asociacin de tetraciclina y fluoroquinolona.
AEROMONA
Microorganismos que pertenecen a la Familia Vibrionaceae, con hbitat en agua dulce,

patgenos para animales de sangre caliente. Se les reconoce por no desarrollar en medios
hipertnicos y resistir la accin del compuesto qumico fosfato diamino pteridina (O129).
Aeromona es productora de la enzima beta lactamasa (resiste a los beta lactmicos), enterotoxina
y citotoxina.
68
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 13
BACTERIAS AMBIENTALES
GNEROS PSEUDOMONAS, ACINETOBACTER y LEGIONELLA
BACTERIAS AMBIENTALES
El medio ambiente que nos rodea es hbitat de microorganismos que, de alguna manera,
juegan un rol importante en nuestra vida; muchos de ellos se encargan de destruir los compuestos
orgnicos eliminados por nosotros, otros se han integrado a nuestra flora microbiana normal, y
algunas especies han adquirido notoriedad al colonizar ambientes hospitalarios y ser potenciales
agentes infecciosos oportunistas.
Este grupo bacteriano lo constituyen diversas bacterias que tienen en comn no

metabolizar la glucosa, o hacerlo por la va oxidativa, y se le denomina bacilos gramnegativos no
fermentadores. Est integrado por los gneros Pseudomonas, Acinetobacter, Alcalgnes,
Moraxela, Flavobacterium, Stenotrophomonas, Burkholderia, Eikenella, etc. En las ltimas dcadas
las infecciones producidas por estos agentes son de gran preocupacin, debido a la elevada
resistencia a los antibiticos.
Pseudomonas aeruginosa
1. Morfologa y estructura: son bacilos gramnegativos, delgados, mviles por un flagelo

polar. No forman esporan. Algunas cepas poseen cpsula de polisacridos, que dan el aspecto
mucoide a las colonias. La mayora de cepas producen pigmentos difusibles como la pioverdina
(verde amarillento), piocianina (azul), de all el trmino de bacilo piocinico, piorubina (rojo) y
piomelanina (negro). La presencia de pili les facilita la adhesin a las clulas epiteliales.
2. Fisiologa: Son grmenes que tienen gran capacidad para utilizar diversos compuestos
orgnicos como fuentes de carbono y nitrgeno. Son aerobios, pero pueden desarrollar en
anaerobiosis, cuando el medio contiene nitratos. Poseen, en la membrana citoplasmtica, la
enzima citocromo oxidasa, de gran ayuda para su identificacin. In vitro cultivan bien, tanto a 37C
como a 42C. Estas bacterias soportan la accin de los desinfectantes, pero son frgiles al alcohol y
la desecacin. P. aeruginosa posee numerosos plsmidos y fagos, que los transfiere por los
mecanismos de transduccin y conjugacin, lo que explica la produccin de enzimas como las beta
lactamasas que le otorgan resistencia a diversos antibiticos.
3. Enzimas y toxinas: Pseudomonas aeruginosa produce diversas sustancias que participan

en los mecanismos de patogenicidad, como:
69
FAMURP
Microbiologa
a) Hemolisina: es la fosfolipasa C, con capacidad de destruccin de hemates y leucocitos.

b) Exotoxina A: que altera la sntesis de protenas, y se expresa por necrosis celular en los tejidos
infectados: quemaduras, crnea o tejido pulmonar.
c) Proteasas extracelulares: que degradan la elastina contenida en el tejido pulmonar y vascular,
ocasionando alteracin de la funcin ciliar del epitelio bronquial y destruccin de los vasos
capilares.
d) Exoenzima S: que altera los mecanismos de defensa locales del husped y facilita la
diseminacin bacteriana.
e) Endotoxina: es la fraccin lipdica del lipopolisacrido de la pared, que participa en las
alteraciones fisiopatolgicas observadas en la septicemia, como fiebre, leucopenia, hipotensin y
coagulacin intravascular diseminada.
B. PODER PATGENO
P. aeruginosa es un patgeno oportunista. Debido a la escasa exigencia para multiplicarse

se le encuentra en diversos ambientes: suelo, compuestos orgnicos en descomposicin, reas
hmedas (lavatorios, baos); o contaminando ungentos, desinfectantes, gotas oculares; y
colonizando reas hmedas de la piel (perin, axilas, odo, etc.). Es una de las principales causas de
infecciones adquiridas en el hospital. Para producir enfermedad necesita tener una puerta de
entrada y factores inmunitarios deficientes del husped. Los primeros mecanismos utilizados por
la bacteria son: la fijacin en los tejidos daados, con la participacin de los pili y el
lipopolisacrido; y luego la colonizacin para producir invasin local. La secrecin de toxinas y
enzimas ofrecen la posibilidad de diseminarse sistmicamente.
Las infecciones ms frecuentes son las producidas en la piel lesionada, como es el caso en
quemaduras, escaras de decbito u otitis externa (odo del nadador). La colonizacin del tracto
respiratorio inferior se observa en pacientes con enfermedad pulmonar crnica, insuficiencia
cardiaca congestiva, fibrosis qustica (enfermedad gentica) o por el uso de equipos de asistencia
respiratoria. Las infecciones urinarias siempre estn relacionadas con el cateterismo vesical. En el
mbito hospitalario la bacteriemia por P. aeruginosa tiene elevada prevalencia, y se manifiesta con
lesiones drmicas tipo ectima gangrenoso, a veces con vesculas que se necrosan, donde se
encuentran numerosos bacilos. Existen circunstancias predisponentes para adquirir infeccin por
P. aeruginosa, como es el caso de pacientes inmunodeprimidos y los que estn recibiendo terapia
antibitica prolongada.
1. Microscopa: la presencia de bacilos gramnegativos en los frotices de heridas, es

sugestivo, en el contexto clnico del paciente.
2. Cultivo: la bacteria no es exigente, y es fcil recuperarla en medios de cultivo sencillos.

El reconocimiento de las colonias por el color (pigmentos), olor y aspecto es bastante orientador.
La identificacin debe confirmar que se trata de un bacilo aerobio, oxidasa positiva, mvil polar,
no fermentador de glucosa.
70
FAMURP
Microbiologa
En la prctica hospitalaria es necesario el uso adecuado del material estril para

tratamientos invasivos (respiradores, equipos de dilisis), as como fundamental los cuidados por
el personal sanitario para evitar la contaminacin cruzada de los pacientes; as mismo es
obligatorio el aislamiento de los pacientes con quemaduras infectadas o con septicemia.
P. aeruginosa suele presentar resistencia a la mayora de los antibiticos, condicin que la

adquiere por: a) proceso de induccin, generado por terapias antibiticas previas, b) transferencia
gentica mediada por plsmidos y c) mutacin de genes, que cambian las caractersticas de las
porinas. La eleccin del antibitico requiere de la gua orientadora del antibiograma.
Acinetobacter
1. Morfologa: estas bacterias tienen forma bacilar en cultivos que se encuentran en fase
exponencial, pero adquieren forma cocoide en cultivos con ms de 24 horas de incubacin; esta
variacin hizo que, aos atrs, recibiera diversas denominaciones. Son gramnegativos, no forman
espora ni cpsula y carecen de flagelos.
2. Fisiologa: desarrollan con facilidad en medios de cultivo sencillos, son aerobios

estrictos. A diferencia de las Pseudomonas, carecen de la enzima citocromo oxidasa y pueden
producir acidez (va oxidativa) a partir de glucosa. Se diferencian de la enterobacterias porque no
reducen los nitratos.
3. Clasificacin: el gnero se divide en dos grupos, los que oxidan glucosa: A. baumannii, y
los que no lo hacen: A. lowffii y A. haemolyticus.
B. PODER PATGENO
Este microorganismo habita, en especial, en zonas hmedas del entorno hospitalario, y

puede sobrevivir en fomites secos por varios das. Se estima que un 25% de la poblacin adulta
tiene alguna colonizacin en piel. No se han demostrado factores de virulencia inherentes al
Acinetobacter, luego el factor husped juega un rol importante en el desarrollo de infecciones.
Como patgeno oportunista, se describen infecciones en vas respiratorias, vas urinarias,

heridas operatorias y septicemias.
Las infecciones por Acinetobacter suceden en pacientes que generalmente han recibido
terapias previas con antibiticos de amplio espectro, o han sido sometidos a ventilacin mecnica.
El tratamiento es complicado y es indispensable tener la orientacin del antibiograma.
71
FAMURP
Microbiologa
Legionella
Son coco bacilos gramnegativos, pleomorfos, aerobios estrictos, que para desarrollar in
vitro necesitan medios enriquecidos con L-cistina y hierro; no desarrollan en medio de agar
sangre.La especie L. pneumphila, es la que origina la mayora de las infecciones; la infeccin se
produce por inhalacin de vapor de agua contaminada, a partir de estanques, fuentes
ornamentales, o sistemas de calefaccin.
El proceso infeccioso se caracteriza por un cuadro sistmico con neumona multilobar y

derrame pleural. Hay una forma de presentacin atenuada, tipo gripal, llamada fiebre de Pontiac.
El diagnstico se establece por la deteccin del antgeno bacteriano en la orina, empleando
procedimientos de inmunocromatografa o enzima inmunoensayo. Los ttulos de anticuerpos se
incrementan con lentitud, luego son de utilidad tarda. El aislamiento de la bacteria se consigue
luego de 3 a 5 das, en medios especiales; para la identificacin de las colonias se emplean
antisueros especficos. El tratamiento recomendado es el uso de macrlidos o fluoroquinolonas.
72
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 14
BACTERIAS ZOONTICAS
GNEROS BRUCELLA Y YERSINIA
BACTERIAS ZOONTICAS
Numerosas bacterias producen infecciones en animales domsticos o silvestres, que

pueden ser transmitidas al ser humano por diversos mecanismos, sea en forma accidental,
ingiriendo lcteos no pasteurizados, o por la intervencin de un artrpodo. El mdico debe
conocer la prevalencia de las infecciones que padecen los animales de la regin en la que
desempea sus actividades.
Brucella
Bruce aisl este agente infeccioso en una paciente con fiebre de Malta, en 1886, y ms
tarde, Bang, la identifica como agente causal de los abortos en el ganado vacuno. En los animales
vacuno, cabras, ovejas, cerdos y perros, la brucelosis es una infeccin crnica, que dura toda la
vida; la localizacin preferencial de la bacteria son los rganos de reproduccin, debido al
contenido del azcar eritrol. La Brucella se disemina por la orina, la leche y el producto de la
concepcin del animal. La transmisin a humanos constituye un riesgo profesional, y se produce
en forma directa, por abrasiones cutneas, o por la ingesta de productos lcteos no pasteurizados.
1. Forma y estructura: son coco bacilos pequeos (0,5 1,5 m), gramnegativos, no
poseen cpsula, no forman esporas y carecen de movilidad. El lipopolisacrido de la pared celular
es el principal determinante antignico y el factor de virulencia.
2. Fisiologa: todas las especies de Brucella son productoras de la enzima catalasa, pero
slo algunas producen ureasa, citocromo oxidasa o hidrgeno sulfurado, y no todas tienen la
capacidad de crecer en presencia de los colorantes thionina y fucsina bsica, cualidades que
permiten clasificarlas en biotipos; as mismo todas son frgiles al calor. Para el aislamiento in vitro
de la Brucella se necesita de medios enriquecidos y condiciones aerbicas; en aislamientos
primarios, a partir de muestras patolgicas (sangre o biopsia), es recomendable el suplemento de
CO2 en el ambiente y esperar perodos de 30 a 45 das para la formacin de colonias. Cuando se
hacen resiembras el cultivo desarrolla en 48 horas. Las colonias son pequeas y lisas.
3. Clasificacin: Cuatro especies de Brucella causan enfermedad en el humano, aunque los

estudios de ADN demuestran que todos pertenecen a una sola especie. La clasificacin se
fundamenta en el anfitrin natural de cada una: B. abortus infecta el ganado vacuno; B. melitensis
a cabras y ovejas; B. suis a cerdos y renos; y B. canis a perros y zorros.
73
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
Las vas de ingreso de Brucella son: la oral (productos lcteos) o las mucosas (heridas de
piel o conjuntiva). En el organismo la bacteria favorece los mecanismos de quimiotaxis para atraer
a los polinucleares y facilitar su fagocitosis; dentro de ellos puede sobrevivir y multiplicarse,
inhibiendo la actividad de la peroxidasa y superxido dismutasa. Las bacterias son transportadas al
sistema RES (bazo, hgado, mdula sea y ganglios linfticos), donde se reproducen. El
lipopolisacrido, factor de virulencia, es un potente antgeno que estimula la respuesta de
anticuerpos en el husped, los que son de gran utilidad para establecer el diagnstico, cuando el
aislamiento del agente causal es infructuoso.
La especie B. melitensis es la ms agresiva para los humanos, ocasionando enfermedad

aguda, que puede llevar a la cronicidad. El inicio es lento y la sintomatologa inespecfica,
correspondiente a un proceso infecciosos general. La fiebre puede presentarse por perodos
(ondulante), y es frecuente la presencia de visceromegalia (hgado y bazo), as como el
compromiso osteoarticular.
La infeccin en los animales corresponde bsicamente a la esfera genital (tero, placenta,

epiddimo) y glndulas mamarias; la transmisin es por va sexual.
1. Microscopa: este estudio no tiene utilidad, debido al tamao tan pequeo de la

bacteria y la ubicacin en los tejidos.
2. Cultivo: las muestras para el aislamiento de Brucella pueden ser: sangre (hemocultivo),
mdula sea (mielocultivo), lquidos orgnicos (articular o LCR) y biopsias; el momento
recomendado para tomar la muestra es durante la etapa febril. El medio de cultivo ideal para el
aislamiento es el bifsico de Ruiz Castaeda, preparado a base de tripticase de soya que
contiene dos fases, una solida y una lquida. El cultivo debe ser incubado a 37C, en un ambiente
conteniendo el 10% de CO2; y la presencia de colonias en la fase slida debe observarse hasta los
45 das de incubacin.
3. Diagnstico indirecto: en todos los pacientes infectados con Brucella hay respuesta
humoral. Al inicio se presenta la Inmunoglobulina M, luego las Inmunoglobulinas G y A. La
determinacin del ttulo de anticuerpos se realiza mediante tcnicas de aglutinacin, Rosa de
bengala o de enzima inmuno ensayo (ELISA). En procesos crnicos el ttulo de Inmunoglobulina M
es fundamental para el diagnstico de reagudizacin o reinfeccin.
La brucelosis humana se puede prevenir consumiendo productos lcteos pasteurizados y

mediante el control de la enfermedad en el ganado, por vacunacin o eliminacin de los animales
74
FAMURP
Microbiologa
infectados. El personal de los laboratorios y los trabajadores de los mataderos, deben cumplir con
las medidas de seguridad adecuadas para evitar el contacto con sus mucosas.
El tratamiento antibitico de eleccin es la asociacin de Doxiciclina y Rifampicina.
Yersinia pestis
El gnero Yersinia est considerado como miembro de las enterobacterias. Las yersiniosis
son infecciones propias de los roedores, cerdos y aves; el ser humano es un husped accidental. La
infeccin en el ser humano se denomina peste bubnica y tiene carcter epidmico. La primera
pandemia se present en el siglo VI en Egipto. La que se produjo en el siglo XIV, se le llam peste
negra, que se estima provoc la muerte de la cuarta parte de la poblacin de Europa; y la ltima
pandemia se inici en la dcada del 1890, involucrando a China y Amrica. Al Per lleg a inicios
del ao1903. Correspondi a A. Yersin describir el agente etiolgico en el ao 1894. El principal
reservorio es la rata urbana, la rata silvestre y las ardillas, con su vector de transmisin la pulga
Xenopsylla cheopis.
1. Forma y estructura: son bacilos gramnegativos, que se colorean con ms intensidad en

los extremos de la bacteria, dando la imagen de tincin bipolar. Poseen cpsula, cuyo contenido es
el antgeno antifagoctico. No forma esporas ni posee flagelos. La bacteria contiene tres clases de
plsmidos relacionados con la patognesis de la enfermedad: el ms pequeo, codifica la proteasa
Pla, que disuelve los cogulos; el de tamao intermedio, codifica protenas que interfieren la
fagocitosis; y el plsmido ms grande, codifica la protena F1, constituyente de la cpsula.
2. Fisiologa: este microorganismo desarrolla en aerobiosis; en los medios lquidos forma

una delgada pelcula en la superficie, sin enturbiar el lquido; y en los medios slidos, las colonias
son pequeas y mucoides. La temperatura ptima para su desarrollo es de 28C, aunque lo hace
incluso a 45C.
3. Clasificacin: el gnero Yersinia tiene tres especies de inters mdico: Y. pestis, Y,

enterocoltica y Y. pseudotuberculosis. La diferenciacin entre ellas obedece a la diferente
patologa que producen y a caractersticas metablicas propias, as: las dos ltimas son mviles a
25C y metabolizan urea; Y. pseudotuberculosis metaboliza sacarosa; y Y. pestis metaboliza lactosa.
75
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
La pulga de los roedores constituye el vector principal al parasitar a los roedores

infectados, que luego se mantiene infecciosa por mucho tiempo; por lo tanto, el ser humano es un
husped accidental cuando son picados por estas pulgas. En el vector, las bacterias se multiplican
con tanta intensidad que llegan a obstruir el canal digestivo, de tal manera que, cuando sta pica a
un nuevo husped e intenta ingerir sangre, regurgita los microorganismos. En la sangre, Y. pestis,
es fagocitada por los macrfagos, donde resiste su destruccin e incluso se multiplica dentro de
ellos, gracias a los siguientes factores de virulencia: presencia de cpsula, secrecin de protenas
que inician la apoptosis celular y de proteasas (Pla) que activan el plasmingeno, el cual degrada
los cogulos de fibrina y le facilita la diseminacin sistmica.
La peste bubnica se presenta con fiebre, cefalea e incremento del tamao de los ganglios
regionales, que se tornan dolorosos y con la piel caliente (bubn). Los pacientes presentan
bacteriemias intermitentes, que llevan al shock sptico. La diseminacin hematgena se complica
con neumona secundaria, la que es sumamente contagiosa por va area.
Desde el punto de vista epidemiolgico se sealan dos formas de peste: la salvaje, de

distribucin universal, ubicada en nichos ecolgicos naturales; y la urbana, que se presenta cuando
las pulgas de las ratas domsticas estn infectadas, con riesgo de producir la peste humana.
1. Microscopa: cuando la muestra proviene de puncin ganglionar (bubn), se observa

con facilidad gran nmero de bacilos gramnegativos; mejor aun si se utiliza la fluorescencia
directa.
2. Cultivo: el germen desarrolla en caldo peptonado o agar nutritivo, luego de 48 horas de

incubacin a 30C. La identificacin se realiza mediante estudios metablicos en los sustratos
utilizados para las enterobacterias. Debe realizarse la confirmacin diagnstica, mediante la
observacin de lisis de las colonias en un cultivo de bacilo pestoso, luego de haberlo enfrentado al
bacterifago especfico.
3. Indirecto: se suele buscar la presencia de anticuerpos que producen hemaglutinacin de

hemates sensibilizados con antgeno de Y. pestis.
La prevencin est en relacin directa con el control de los roedores, manejo de la basura
y uso de insecticidas. Existe una vacuna, de tipo inactiva, recomendada para uso en las personas
expuestas en los laboratorios y para el control de las epidemias; esta vacuna ofrece una proteccin
parcial y de corto plazo. Se recomienda el uso de tetraciclina como medida preventiva. El
tratamiento clsico ha sido el uso de estreptomicina, una buena alternativa es la tetraciclina, y el
cloranfenicol en casos de meningitis.
76
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 15
BACTERIAS INVASIVAS CON VIDA INTRACELULAR
GNEROS BARTONELLA Y LISTERIA
BARTONELLA
El gnero Bartonella est formado por bacterias muy pequeas, que tienen la
particularidad de parasitar los hemates y las clulas endoteliales, y ser transmitidas por vectores.
En la actualidad se conocen 16 especies, cada una con su vector especfico. La especie
representativa que infecta al humano, es Bartonella bacilliformis, agente causal de la enfermedad
de Carrin o fiebre de la Oroya, descrita por primera vez en el ao 1905, por el Dr. Alberto Barton,
durante la construccin del ferrocarril central en Lima.
1. Morfologa y estructura: son bacilos gramnegativos de 1 a 1,7 m, algunas veces

adquieren la forma cocoide. No forman cpsula ni esporas. Son mviles por un flagelo polar.
2. Fisiologa: son bacterias aerobias, inactivas frente a los azcares, oxidasa y catalasa
negativas. Para desarrollar in vitro es necesario cultivarlas en medios con sangre e incubarlas a
29C, con atmsfera enriquecida en CO2 No se aprecia turbidez en los medios lquidos, pero en los
slidos se observan pequeas colonias lisas brillantes y poco adherentes, a partir de los 8 a 15 das
de incubacin.
3. Clasificacin: Las diversas especies han sido identificadas segn el reservorio, el vector,
entidad nosolgica o por caractersticas del ADN, siendo las de mayor importancia en medicina
humana:
a) B. bacilliformis, con el vector Lutzomyia verrucarum, produce la bartonelosis

b) B. henselae, con el vector la pulga, produce angiomatosis por araazo de gato
c) B. quintana, que tiene como vector el piojo del cuerpo, produce la fiebre de las
trincheras
B. PODER PATGENO
Bartonella bacilliformis
Agente causal de la bartonelosis, enfermedad que se presenta esencialmente en los valles

de las zons montaosas de la cordillera de los Andes en Per, Ecuador y Colombia (1000 a 2500
msnm), con clima clido y aire enrarecido (zona verrucgena), donde vive el vector, Ludzomyia
verrucarum, mosquito hematfago, de hbito nocturno, descrito por A. Herrer en 1962.
77
FAMURP
Microbiologa
La enfermedad tiene dos formas de presentacin clnica, como lo demostr Daniel Carrin
con su sacrificio. La forma aguda de la enfermedad, hemtica o Fiebre de la Oroya, se produce
luego de la picadura del mosquito; las bacterias penetran en el endotelio vascular y en los glbulos
rojos, los cuales son destruidos por el sistema del RES (bazo, hgado), produciendo anemia aguda y
visceromegalia; fase que puede ser mortal. Luego de un perodo, que puede ser de semanas o
meses, se presenta la forma crnica o verruga peruana, que se caracteriza por lesiones drmicas:
a) pequeas de tipo miliar, b) nodulares subdrmicas, con formacin de neocapilares y c) lesiones
mulares de tamao superior a 5 mm, ssiles, sangrantes, tipo hemangioepitelioma; fase con poca
reaccin sistmica.
Tambin se describen sndromes de bacteriemias asintomticas, antes o despus, de las

dos formas clnicas antes mencionadas; as mismo, es frecuente encontrar pacientes con la fase
verrucosa sin haber presentado el cuadro agudo anmico.
Bartonella henselae
Microorganismo de distribucin mundial entre los gatos, que tiene como vector a la pulga.
La transmisin a humanos es posible por contaminacin de las garras del gato con excremento de
la pulga y la inoculacin al momento del araazo. La lesin inicial es local con presencia de
angiomas en el trayecto de la inoculacin, luego los grmenes son transportados por los
macrfagos a los ganglios linfticos, donde generalmente se detiene la enfermedad. En los casos
de bacteriemia hay dos complicaciones: 1. La angiomatosis bacilar, que es la proliferacin lobulillar
de los vasos sanguneos, con contenido de clulas endoteliales cuboides entremezcladas con
neutrfilos, que involucra piel y ganglios regionales, y 2. La peliosis heptica, que es la formacin
de quistes hepticos llenos de sangre. El diagnstico se puede establecer por la determinacin de
anticuerpos mediante la tcnica de ELISA.
Bartonella quintana
La enfermedad producida por esta bacteria es conocida desde la primera guerra mundial
como fiebre de las trincheras o fiebre quintana, por producir fiebre recurrente con cinco das de
duracin. El paciente puede presentar angiomatosis en el subcutneo, huesos y endocarditis. El
hombre es el reservorio y el piojo del cuerpo, el vector.
1. Microscopa: Es til, slo en la fase hemtica o aguda de la infeccin por B. bacilliformis.

En los frotices de sangre perifrica, coloreados con Wright o Giemsa, se observan los bacilos
dentro de los hemates.
2. Cultivo: Se recomienda utilizar medios slidos enriquecidos con sangre e incubarlos en

ambiente con CO2 durante dos a seis semanas, B. bacilliformis desarrolla mejor a 29C. Tcnicas
de PCR e hibridacin del ADN son empleadas con xito para el diagnstico.
78
FAMURP
Microbiologa
3. Diagnstico indirecto: la serologa, empleando la inmunofluorescencia indirecta, es muy

til, en especial para B. henselae.
No hay vacuna para ninguna forma de bartonelosis. Evitar el contacto con los vectores. En
el caso de la enfermedad de Carrin, hacer uso de mosquiteros cuando se pernocta en zonas
verrucgenas; tener en consideracin que la poblacin de mosquitos se incrementa en horas
posteriores a las lluvias. Las heridas producidas por araazo de gato, deben limpiarse con jabn y
antispticos.
La fase aguda (hemtica) de la enfermedad de Carrin se trata con cloranfenicol o

tetraciclina, aunque es susceptible a diversos antibiticos. En la fase drmica (verruga) se
recomienda el uso de azitromicina. En los casos de infecciones por otras especies de Bartonella se
puede utilizar azitromicina o fluoroquinolonas.
LISTERIA
Las bacterias miembros del gnero Listeria se encuentran ampliamente distribuida en la

naturaleza, como en el suelo, los vegetales e integrando la flora fecal de muchos animales. La tasa
de recuperacin de Listeria en los cultivos de alimentos no procesados, como vegetales crudos,
leche, carnes de pollo o de vaca, est en el rango de 15% al 70%. La especie Listeria
monocytogenes tiene propiedades biolgicas propias, como la capacidad de reproducirse a
temperaturas de refrigeracin (4C) y en medio salino, que hacen posible se mantenga viable en
alimentos adecuadamente conservados, y explicar su rol patgeno. A pesar de su presencia en
intestino de animales domsticos como pollo, conejo, oveja, la incidencia de cuadros clnicos en el
ser humano es escasa y selectiva para embarazadas y recin nacidos.
1. Morfologa y estructura: son bacilos grampositivos finos, cortos, que se orientan en

pares o en cadenas cortas, no forman esporsa ni cpsula y slo son mviles a temperatura
ambiental (22 - 26C).
2. Fisiologa: L. monocytogenes desarrolla con facilidad en los medios de cultivo, es

aerobio y micro aerfilo, puede cultivar desde los 4C hasta los 45C. En medio semislido
inoculado por puntura e incubado a medio ambiente, se puede apreciar desarrollo unos
milmetros debajo de la superficie (en sombrilla). Las colonias son pequeas que se presentan
desde las 24 horas de incubacin. En medios con sangre las colonias muestran una discreta zona
de hemlisis tipo beta.
79
FAMURP
Microbiologa
3. Clasificacin: se describen seis especie de Listeria, pero slo L. monocytogenes es

patgena para el hombre. Se reconocen 13 serotipos basados en el antgeno somtico O y flagelar
H, sin embargo la mayora de casos clnicos se deben a los serotipos 4b, 1/2a y 1/2b.
B. ROL PATGENO
La infeccin se produce por la ingesta de alimentos contaminados con heces de mamferos

o aves (carne poco cocida y vegetales crudos), leche no pasteurizada o queso fresco. Las bacterias
se adhieren a los enterocitos, penetran dentro de ellos y se reproducen; luego migran hacia la
membrana celular para ingresar a la clula contigua o a los macrfagos. Dentro de los macrfagos
perforan el fagosoma y se liberan al citoplasma celular, invaden el torrente sanguneo y el
paciente presenta sntomas de bacteriemia.
La endotoxina de la Listeria es la responsable del fenmeno de Anton, (conjuntivitis

experimental en el conejo), as como del incremento de los leucocitos mononucleares en sangre
perifrica durante el cuadro agudo febril (origen del nombre monocytogenes). La capacidad del
germen de vivir dentro de los macrfagos, le permite evadir la actividad de los anticuerpos, y
explica su presencia en pacientes con deficiencia en inmunidad celular.
La bacteria tiene predileccin por el tejido placentario y sistema nervioso. Las gestantes
son el grupo humano ms afectado, presentando aborto en el tercer trimestre del embarazo con
parto prematuro o feto muerto. El recin nacido puede adquirir la infeccin dentro del tero y
presentar la infeccin generalizada al nacer; o tardamente, luego de dos semanas de nacido. Otra
forma de presentacin es la meningitis en adultos con compromiso del sistema inmune.
1. Microscopa: este procedimiento tiene limitaciones en relacin a la calidad, porque en

muestras biolgicas es posible confundirlo morfolgicamente con corynebacterias, estreptococos
o lactobacilos.
2. Cultivo: el aislamiento se realiza en medios de agar nutritivo o Mueller Hinton, donde

forma colonias pequeas a las 48 horas de incubacin. La demostracin que son bacilos
grampositivos mviles slo a temperatura ambiental (22C a 26C) e inmviles a 37C. es
patognomnica, as como la hidrlisis de la esculina. En muestras de biopsia o secrecin de cuello
uterino, se recomienda inocular la muestra en caldo peptonado e incubarla en refrigeracin (4C)
durante cuatro semanas, para luego hacer resiembra en medio selectivo.
La recomendacin preventiva es evitar comer alimentos crudos o no procesados; los

vegetales empleados para ensaladas deben ser adecuadamente lavadas.
El tratamiento de eleccin es la asociacin de ampicilina con gentamicina, se tiene como

alternativa al sulfametoxazol con trimetoprim.
80
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 16
BACTERIAS ANAEROBIAS
GNEROS BACTEROIDES Y CLOSTRIDIUM
BACTERIAS ANAEROBIAS
El conocimiento de la existencia de bacterias anaerobias es muy antiguo, pero

correspondi a L. Pasteur en 1861, con el Clostridium butyricum, demostrar el fenmeno de la
anaerobiosis; y a Levy en 1891, reportar el primer caso clnico de infeccin por una bacteria
anaerobia. Las bacterias anaerobias estrictas son aquellas que no utilizan al oxgeno como
receptor final de electrones, debido a la carencia de enzimas transportadoras de oxgeno, como: la
catalasa, que cataliza la reaccin: 2H2O2 2H2O + O2 ; o la peroxidasa, que cataliza la reaccin:
NADH + H2O2 NAD + O2 ; o la superxido dismutasa, que cataliza la reaccin: O2 + O2 + 2H
H2O2 + O2. Algunas especies bacterianas son aero tolerantes, por tener escasa concentracin de
radicales de superxido dismutasa.
La flora bacteriana autctona del cuerpo, est constituida predominantemente por

grmenes anaerobios, incluso en zonas expuestas al aire, como la boca, la nariz o la piel; esto es
explicable por el consumo de oxgeno de las bacterias aerobias presentes, y por los
microambientes con bajo potencial de xido reduccin. La funcin ms importantes de la flora
autctona es impedir la colonizacin de los patgenos; as, especies de Propionibacterium
presentes en la piel, hidrolizan triglicridos y producen cidos grasos libres, los que inhiben a los
estafilococos; o como en el intestino delgado, los anaerobios producen cidos grasos voltiles que
inhiben la multiplicacin del E. coli.
La mayora de infecciones producidas por anaerobios son de origen endgeno, y surgen de

la flora autctona, por ello, Bacteroides fragilis es la especie que se aisla con ms frecuencia en
clnica. Las de origen exgeno son las producidas por clostridium, que se presentan posteriores a
un traumatismo, o generadas por la ingesta de exotoxina pre formada. Hay condiciones del
paciente que favorecen una infeccin por anaerobios, como es el caso del uso de dispositivos
intrauterinos, la formacin de lceras de decbito; o infecciones producidas por mordedura,
trauma peri odontal, neumona por aspiracin; o por shock, trauma, fro, que disminuyen la
oxigenacin en los tejidos. Algunas especies de anaerobios producen enzimas como la
hialuronidasa, colagenasa, lecitinasa o fosfolipasa, que participan en el desarrollo de la infeccin.
La clasificacin de los anaerobios es un tanto confusa, nosotros los vamos a agrupar en dos
categoras, los que no forman esporas y los que s las forman.
81
FAMURP
Microbiologa
ANAEROBIOS NO ESPORULADOS
Este grupo de bacterias est constituido por una diversidad muy grande de especies; la
mayora de ellas colonizan la piel, las mucosas, las vas respiratorias, las vas urinarias y el tracto
digestivo. Son patgenos oportunistas, y en muestras clnicas suelen encontrarse asociadas con
grmenes aerobios. Con fines didcticos se les estudia en dos grupos, de acuerdo a la coloracin
con el Gram.
Bacterias anaerobias no esporuladas grampositivas:
1. Cocos: causan infecciones cuando se localizan en zonas normalmente estriles (senos

paranasales, parnquima pulmonar, cavidad intra abdominal, endometrio, celular
subcutneo, etc.). El gnero ms abundante es el Peptoestreptococcus, formado por diez
especies. El segundo gnero es el Peptococcus, dentro del cual se ubican algunas especies
aerotolerantes.
2. Bacilos: son un grupo heterogneo, se describen como ms frecuentes:
a) Propionibacterium: habita la piel y es productor de cido propinico; es el
contaminante aislado con ms frecuencia en muestras obtenidas por puncin de la piel. Se
identifica como causa en infecciones en prtesis, abscesos cerebrales, dentales,
osteomielitis y acn. Su aislamiento amerita evaluacin de toma de la muestra.
b) Bifidobacterium y Eubacterium: son habitantes de la mucosa intestinal, y contribuyen a
la defensa del husped. Se les ha encontrado como causa de peritonitis, abscesos
cerebrales y bacteriemias en procesos malignos.
c) Mobiluncus: bacilo curvado, que se encuentra en mujeres con vaginosis bacteriana.
Bacterias anaerobias no esporuladas gramnegativas:
1. Cocos: el gnero Veillonella es el representante de ste grupo, siendo la especie V.Parvula

la que se encuentra como habitante normal en la boca, vas area superiores y vagina. El
rol patgeno es difcil de definir y se le encuentra como parte de un proceso
polimicrobiano.
2. Bacilos: el gnero Bacteroides es el integrante ms importante de la flora bacteriana
normal del intestino y de la vagina. Se mencionan diversos factores de virulencia, como
cpsula, pili y lipolisacridos, que contribuyen a la formacin de abscesos y formacin de
cido succnico, que impide la fagocitosis. Son responsables de abscesos cerebrales,
infecciones de cavidad oral, intra abdominal, tracto genital femenino, osteomielitis, etc.
a) Bacteroides fragilis: bacilos pleomorfos, que colorean plido con el Gram, forman
colonias brillantes no hemolticas y desarrollan en presencia de bilis.
b) Prevotella melaninognica: se ubica en los surcos gingivales; en los cultivos produce
colonias de color negro
c) Fusobacterium: son bacilos delgados con los extremos afilados, habitantes de vas
respiratorias altas.
82
FAMURP
Microbiologa
ANAEROBIOS ESPORULADOS
El gnero Clostridium se define como bacilos grampositivos, anaerobios, formadores de

esporas deformantes y productores de exotoxinas. Todos son habitantes naturales del suelo,
aguas residuales e integrantes de la flora microbiana en intestino del hombre y de los animales.
Pocas especies son patgenas para el ser humano, las de mayor inters mdico son:
1. Clostridium tetani
2. Clostridium histotxicos
3. Clostridium botulinum
4. Clostridium enterotxicos
Clostridium tetani
1. Forma y estructura: son bacilos de 2 a 4 m de largo, grampositivos, mviles por

flagelos peritricos, la espora es terminal deformante que semeja al palillo de tambor, muy
resistente al medio ambiente y pueden germinar en tiempo indefinido; por el contrario, la forma
vegetativa es muy frgil a las variaciones ambientales.
2. Fisiologa: es una bacteria anaerobia estricta, no metaboliza carbohidratos.
3. Toxinas: es productor de dos exo toxinas: a) la ttanolisina, polipptido producido

durante la fase exponencial de reproduccin del bacilo, lbil al oxgeno, a la acidez, a la alcalinidad
y con capacidad de producir lisis celular, responsable de la hemlisis que muestran las colonias en
los cultivos; y b) la ttanoespasmina, pptido codificado por un plsmido, que se libera durante la
lisis bacteriana, es una toxina tipo A-B que bloquea la liberacin de la Glicina (neurotransmisor) en
las sinapsis inhibidoras, produciendo hiperactividad motineural, que se expresa por espasmo
muscular y parlisis espstica.
B. PODER PATGENO
El Clostridium tetani se encuentra en el suelo frtil y en el intestino del hombre y de

muchos animales. Es un oportunista no invasivo. La espora ingresa por una herida traumtica
sucia, producida por un elemento punzante: astilla, picadura de insectos, mordedura de animales,
inyectable, ciruga de hemorroides, etc., que, en condiciones anaerbicas locales, se revierte a la
forma vegetativa. Sin crear lesin inflamatoria local, elabora las exotoxinas que se difunden va
sangunea o neural ocasionando espasmo muscular.
Luego de unos das de la inoculacin, los msculos maseteros muestran contraccin

(trismus), seguido por irritabilidad, sudoracin y espasmos de los msculos ms potentes como
bceps y para vertebrales. En el recin nacido se asocia a la contaminacin del mun del cordn
umbilical y ocasiona espasmo generalizado. La unin de la exotoxina con su receptor es
irreversible, luego la recuperacin est en relacin a la formacin de nuevos terminales axonales.
83
FAMURP
Microbiologa
1. Microscopa: no tiene utilidad, debido al escaso nmero de bacterias en la herida y es

imposible observarlas.
2. Cultivo: es necesario que la muestra sea obtenida por biopsia, y el proceso de cultivo
sea de inmediato y en condiciones anaerbicas. La muestra es depositada en medio lquido
(thioglicolato) y el desarrollo es lento. Cultivos negativos no niegan la presencia del C. tetani .
3. Indirecto: La determinacin de toxina o antitoxina en el suero del paciente es negativa,

la primera porque est adherida en los receptores y la segunda porque no hay tiempo suficiente
para la formacin de anticuerpos.
La prevencin se realiza con la vacunacin de toxoide tetnico, la que es obligatoria con la

vacuna triple o penta. Existe una vacuna independiente para casos de urgencia.
El tratamiento de la herida es fundamental para la prevencin, que consiste en limpieza

quirrgica de la lesin y la administracin de antibitico tpico. Luego, la vacunacin pasiva con
inmunoglobulinas antitetnicas y la vacunacin con toxoide tetnico.
Clostridium histotxicos (C. perfringes)
Son un grupo de clostridium que habitan el suelo en estado esporulado; ingresan al

organismo por heridas traumticas contaminadas con tierra (accidentes automovilsticos, heridas
de bala, heridas por explosiones). Muchas de estas especies son aerotolerantes, pero la especie
que con ms frecuencia produce infecciones en humanos, es el Clostridium perfringes. El cuadro
clnico corresponde a la denominada gangrena gaseosa, que compromete los tejidos celular
subcutneo y muscular.
1. Morfologa y estructura: son bacilos grandes que pueden tener hasta 15 m de largo,
grampositivos, inmviles, poco formadores de esporas ovaladas y centrales; poseen una delgada
cpsula.
2. Fisiologa: es un germen aerotolerante que desarrolla rpidamente en los medios en

condiciones anaerobias. En agar sangre, las colonias son grandes y presentan doble halo de
hemlisis, el halo interno es completo y corresponde a la toxina iota; en cambio el halo externo es
incompleto y corresponde a la accin de la toxina alfa. Es productor de lecitinasa, lipasa, fermenta
carbohidratos, hidroliza gelatina y digiere la casena de la leche; todas stas caractersticas
permiten diferenciar a las diversas especies de clostridium. La produccin de lecitinasa se
84
FAMURP
Microbiologa
demuestra in vitro, por la presentacin de un precipitado alrededor de las colonias en el medio

agar yema de huevo, la misma que debe ser inhibida por el anticuerpo especfico.
3. Enzimas y toxinas: Es productor de diversas toxinas, siendo las ms importantes:
Toxina alfa: capaz de lisar eritrocitos, plaquetas, leucocitos y clulas endoteliales, produce
destruccin tisular muscular, toxicidad heptica y miocrdica. Toxina beta: produce necrosis de la
mucosa intestinal, que evoluciona a enteritis necrosante. Toxina psilon: es activada por la tripsina
e incrementa la permeabilidad vascular de la pared del tubo digestivo. Toxina iota: con actividad
de necrosis tisular. Enterotoxina: que se une a los receptores del epitelio del intestino delgado y
altera la permeabilidad, produciendo prdida de lquidos; la tripsina activa la capacidad txica.
4. Clasificacin: todas las cepas de C. perfringes no poseen la totalidad de los factores de

virulencia, lo que ha permitido distinguirlas en tipos: A, B, C, D y E.
Tipo /Toxina alfa beta epsilon iota

A ++ -- -- --
B ++ ++ ++ --
C ++ ++ -- --
D ++ -- ++ --
E ++ -- -- ++
B. PODER PATGENO
El Clostridium perfringes tipo A, es el que ocasiona la mayora de infecciones en el hombre:
a) Infecciones del tejido blando: que tienen como punto de partida infecciones de heridas
(traumticas o quirrgicas), inicindose como una celulitis, que luego puede evolucionar a
miositis o mionecrosis. El tejido afectado muestra edema, con presencia de gas en los
tejidos (gangrena gaseosa). Otras especies de clostridium (septicum, hystoliticum, novy,
sporgenes, sordelli, etc) tambin pueden estar involucrados en este sndrome.
b) Sistmico: producido por bacteriemias, como consecuencia de ciruga abdominal o legrado
uterino, que ocasionan diseminacin y hemlisis intra vascular, con compromiso renal.
c) Infecciones alimentarias: son consecuencia del consumo de carnes altamente
contaminadas y conservasdas a tenpoeraturas del 40C a 60C; condiciones en las que las
esporas germinan. Elsndrome ocasionado corresponde a la enteritis necrotizante, siendo
el Clostridium perfringes tipo C el agente etiolgico.
1. Microscopa: el frotis de la secrecin de heridas, coloreado con Gram, es muy til, dado
que el germen es de tamao grande y la ausencia de respuesta inflamatoria contribuyen a la
orientacin diagnstica.
85
FAMURP
Microbiologa
2. Cultivo: la bacteria desarrolla fcilmente en los medios de cultivo, obteniendo

aislamientos a las 24 horas de incubacin. Para la identificacin hay que observar la doble
hemlisis de las colonias en el agar sangre y demostrar la produccin de lecitinasa en agar yema,
que sern inhibidas por saccin de antisueros.
3. Indirecto: En sospecha de enterocolitis por clostridium, la bsqueda de la enterotoxina

por procedimientos de inmuno anlisis, es lo adecuado.
El cuidado de las heridas traumticas puede evitar la contaminacin por Clostridium.
El tratamiento de la gangrena gaseosa es la cura quirrgica de la lesin, con eliminacin

del tejido necrosado. El antibitico de eleccin es la Penicilina a altas dosis.
Clostridium botulinum
El trmino botulismo viene de botulus o embutido, por la relacin entre la intoxicacin

con la ingesta de embutidos. Fue Von Ermengem en 1897, quien describi al Clostridium
botulinum y demostr la elaboracin de la toxina. Las esporas del germen se encuentran
ampliamente distribuidas en suelo, agua de riego, contaminando las frutas y legumbres; as como
en el sedimento marino, por lo que se le encuentra en alimentos marinos enlatados. La
enfermedad es una intoxicacin, producida por la ingesta de la toxina preformada en los
alimentos, ocasionando parlisis flcida.
1. Morfologa y estructura: son bacilos grampositivos grandes (2 a 20 m), mviles, cuyas

esporas son sub terminales deformantes, muy resistentes, soportan 100C durante 2 a 3 horas y
120C durante 5 minutos. En cambio la forma vegetativa es muy sensible a las temperaturas, se
destruye en 30 minutos a 60C.
2. Fisiologa: son anaerobios estrictos, muy exigentes para el desarrollo in vitro, son
formadores de enzimas proteolticas, toxinas y tienen actividad frente a diversos azcares.
3. Enzimas y toxinas: se describen siete toxinas (A G), con estructura similares, pero con
diferencias antignicas. Las toxinas A, B, E y F producen enfermedad en el ser humano, C y D en
los animales. La toxina es un pptido, codificado por un fago, que se libera con la lisis bacteriana,
de tipo A-B, que acta a nivel pre sinapsis de la placa mioneural, donde bloquea la liberacin de
acetilcolina, produciendo parlisis flcida. La toxina es termolbil (se destruye en 10 minutos a
100C), pero resistente a la acidez gstrica, lo que explica su absorcin digestiva.
86
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
El botulismo es una intoxicacin, debido a la ingesta de alimentos procesados en

conservas, donde las esporas germinaron en condiciones de anaerobiosis y liberaron la exotoxina.
La toxina resiste la digestin gstrica y es absorbida en el intestino delgado, luego se adhiere a los
nervios motores (pares craneales). Las manifestaciones clnicas se presentan luego de 12 a 36
horas de haber ingerido el alimento, con vmitos, visin borrosa, midriasis, flacidez del prpado
superior, disfagia, disartria y luego debilidad de los miembros superiores e inferiores. La
recuperacin es lenta y la mortalidad elevada por insuficiencia respiratoria.
El botulismo en lactantes afecta a nios menores de seis meses y es consecuencia de la

colonizacin del C. botulinum en el intestino del bebe, relacionada con la ingesta de miel de abeja.
La enfermedad se desarrolla en forma progresiva con parlisis flcida hasta la insuficiencia
respiratoria.
Se describe botulismo en pacientes drogadictos, producido por heridas infectadas, que

cursan con perodo de incubacin largos, pero con sintomatologa similar.
1. Microscopa: no es til por la escacez de bacterias y por la lisis de las formas vegetativas
al excretar la exotoxina hace imposible obvservarlas.
2. Cultivo: para aislar el germen, la muestra debe ser sometida a calentamiento de 80C
durante 10 minutos, con la finalidad de eliminar contaminantes aerbicos, luego cultivar en
condiciones de anaerobiosis.
3. Toxina botulnica: para demostrar la presencia de exotoxina botulnica en una cepa

aislada en el cultivo, en los alimentos o en el contenido gstrico del paciente, se procede a
inocular, una alcuota de la muestra, va intra peritoneal, en el ratn. A las 24 horas se observar
la muerte de animal. Luego, repetir el experimento, pero aadindole antitoxina botulnica a la
muestra, y el ratn deber sobrevivir.
Como la toxina es termolbil, se recomienda poner los alimentos enlatados en bao mara
hirviendo durante 10 minutos.
El tratamiento del botulismo se inicia con soporte ventilatorio y la administracin de

antitoxina botulnica polivalente.
87
FAMURP
Microbiologa
Clostridium enterotxico (C. difficile)
La presentacin de diarrea y colitis en pacientes que han recibido antibiticos, ha sido

descrita desde la dcada del 1950, responsabilizando de ste sndrome al Staphylococcus aureus,
Cndida albicans o Clostridium perfringes. Desde el ao 1977 se estableci que Clostridium
difficile, toxignico, es la causa de la colitis seudomembranosa, asociada a la antibioticoterapia con
ampicilina, clindamicina o fluoroquinolonas.
Clostridium difficile es un bacilo grampositivo con espora central deformante, de difcil

desarrollo in vitro, requiere de medios de cultivo complejos y aun as, la recuperacin es pobre. Se
caracteriza por la produccin de una enterotoxina A y una citotoxina B. La toxina A altera la unin
intercelular en el epitelio del colon, incrementando la permeabilidad, y la toxina B destruye el
citoesqueleto celular.
La presencia de C. difficile en la poblacin humana es variable, as: en neonatos se reporta

del 15% al 70%; en adultos ambulatorios de 3% a 8%; y en adultos hospitalizados el 20%. Es
importante destacar que estas personas albergan cantidades no significativas de toxina A o B en
las heces. Se le ha encontrado tambin en el suelo, playas, piscinas de natacin y en animales
domsticos.
La sintomatologa por infeccin debido a C. difficile suele iniciarse una semana despus de
haber recibido tratamiento antibacteriano, cuando la colonizacin del intestino supera los 108
bacterias por gramo de heces. Las toxinas se liberan y ocasionan diarrea similar al clera, asociado
con fiebre, dolor abdominal y leucocitosis.
El diagnstico de la infeccin se realiza mediante la demostracin de la enterotoxina o

citotoxina, utilizando el procedimiento de enzima inmuno ensayo. El tratamiento se inicia con el
retiro de los antibiticos administrados y su reemplazo por metronidazol o vancomicina.
88
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 17
BACTERIAS ESPIRILARES
GNEROS LEPTOSPIRA Y BORRELIA
BACTERIAS ESPIRILARES
Las bacterias que tienen forma de hlice se agrupan en la familia Spirochaetaceae, las que
se caracterizan por su gran longitud (hasta 500 m), su movilidad debido a un aparato locomotor
interno y su flexibilidad. Estn ampliamente distribuidas en la naturaleza, con vida libre en aguas
dulces o marinas, o como parsitos en metazoarios. Las espiroquetas patgenas para el hombre y
animales pertenecen a tres gneros: Treponema, Leptospira y Borrelia.
Todas las espiroquetas estn rodeadas de una envoltura elstica constituida por lpidos y
polisidos, con carcter antignico, que permite diferenciarlas en especies y serotipos. En la cara
interna de la envoltura se ubica una delgada capa de glucolpidos, y luego sigue la membrana
citoplasmtica. El aparato locomotor formado por fibrillas se extienden a lo largo de la bacteria, de
un extremo al otro, y se ubica en el espacio periplasmtico, creado entre la envoltura y la capa de
glucolpidos. Estos flagelos axiales o fibrillas le otorgan a la bacteria movilidad de tipo helicoidal,
de flexin y de rotacin; que se aprecia mejor en preparaciones en fresco observadas con
microscopio de campo oscuro.
En este captulo revisaremos los gneros Leptospira y Borrelia.
LEPTOSPIRA
La enfermedad denominada leptospirosis, es una zoonosis de distribucin mundial, en la

que el animal infectado excreta el microorganismo por va urinaria, y el hombre se contagia por
exposicin a material contaminado. La enfermedad de Weil, descrita en 1914, presenta ictericia,
hemorragia e insuficiencia renal.
1. Forma y estructura: son espiroquetas delgadas (0,1 m), con un extremo doblado en
gancho y con dos flagelos axiales periplasmticos. Son gramnegativas, pero colorean mejor con
Leishman o Wright. La clasificacin de las leptospiras est basada en la variacin antignica del
lipopolisacrido de envoltura.
2. Fisiologa: son aerobias obligadas, cultivan en medios lquidos enriquecidos con cidos
grasos de cadena larga, a temperaturas entre 26C y 30C.,y luego de 1 a 4 meses de incubacin.
3. Clasificacin: el mtodo tradicional de clasificacin est basado en los antgenos de

superficie, y establece dos especies: Leptospira interrogans, patgena y Leptospira biflexa,
saprofita; ambas con numerosos serogrupos de utilidad epidemiolgica.
89
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
El reservorio de las leptospiras son los roedores y otros mamferos, en quienes producen
infecciones asintomticas con compromiso renal; eliminando grandes cantidades de espiroquetas
por va urinaria, las que contaminan las aguas estancadas y tierras hmedas. El hombre y los
animales (perro), se contaminan accidentalmente a travs de mucosas o heridas superficiales.
Leptospira interrogans produce bacteriemia y daa el endotelio vascular, lo que ocasiona
hemorragia pulmonar, isquemia de la corteza renal, y alteracin de la arquitectura heptica que
evoluciona con ictericia. La respuesta inmune facilita la opsonizacin y fagocitosis, eliminando las
espiroquetas de la circulacin.
Muchas infecciones por Leptospiras son asintomticas, o se presentan con sntomas

generales como fiebre y mialgias. Otras evolucionan con ictericia, pero sin necrosis heptica, o
sndrome menngeo, escasos casos presentan compromiso hepato-renal.
1. Microscopa: El estudio del sedimento urinario del paciente, observado al microscopio

de campo oscuro, es el procedimiento clsico, aunque poco sensible. La fluorescencia directa con
anticuerpos marcados mejora la sensibilidad del estudio microscpico.
2. Cultivo: el aislamiento se realiza a partir de muestras de sangre o LCR tomadas en las

dos primeras semanas de la enfermedad; das posteriores se utiliza la orina. El medio de cultivo
lquido de eleccin es el de Fletcher o Reiter, incubado a 30C hasta por cuatro meses. Cada
semana se buscar al microscopio de campo oscuro la presencia de espiroquetas mviles.
3. Identificacin: La espiroqueta aislada se identifica utilizando antisueros especficos,

mediante el examen en fresco, poniendo en contacto una gota de cultivo y una gota del antisuero,
se observar la inmovilizacin de la Leptospira, luego la aglutinacin, seguida por la lisis
bacteriana.
4. Indirecto: La tcnica ms empleada es la determinacin de anticuerpos aglutinantes;

pero debe realizarse en centros especializados, puesto que se debe disponer de cultivos vivos de
los diversos serotipos de Leptospira.
Se recomienda las prcticas higinicas en los corrales, mataderos; uso de ropa protectora
para el personal que labora en cloacas. La inmunizacin en animales puede reducir la transmisin
a otros animales y al hombre. La quimioprofilaxis puede ser una estrategia para personas con
exposicin limitada. Para el tratamiento se emplea penicilina o doxiciclina
90
FAMURP
Microbiologa
BORRELIA
Son espiroquetas grandes (hasta 30 m), que poseen numerosos flagelos periplasmticos.
Son transmitidas al hombre por un artrpodo hematfago. Dos formas de borreliosis se presentan
en el hombre: la fiebre recurrente o tifus recurrente, causante de epidemia en las dos guerras
mundiales, y la enfermedad de Lyme. La borrelia no se encuentra al estado libre en la naturaleza,
slo dentro de un organismo viviente.
Borrelia recurrentis
1. Forma y estructura: son espiroquetas irregulares de 8 a 30 m de largo, que poseen

numerosas fibrillas periplasmticas (8 a 20). Son mviles por flexin y rotacin. Colorean bien con
Giemsa o Wright.
2. Fisiologa: Son microaerfilas y exigentes para desarrollar in vitro. Muy sensibles a la

desecacin y a las radiaciones ultravioletas.
B. PODER PATGENO
El hombre presenta dos formas de borreliosis: la fiebre recurrente epidmica transmitida

por el piojo del cuerpo y la fiebre recurrente endmica transmitida por la garrapata.
En la forma epidmica, el hombre es el nico reservorio, y el piojo del cuerpo (Pedculus

humanus) transmite la enfermedad. El piojo se infecta al ingerir sangre humana infectada, luego
las espiroquetas penetran el intestino y se reproducen en la hemolinfa. La transmisin al hombre
se produce al momento de aplastar al piojo durante la picadura; no se transmite por va digestiva
(picadura o heces). La enfermedad se presenta cuando las condiciones sanitarias son deficientes.
En cambio, en la forma endmica, el reservorio son las garrapatas blandas, roedores y

pequeos mamferos, que se infectan con diversas especies de Borrelia. Las garrapatas infectadas
hacen infeccin generalizada y transmiten las espiroquetas por la saliva y las heces; el reservorio
endmico mantiene la infeccin por transmisin transovrica. Esta infeccin es una zoonosis.
La presentacin clnica de ambas formas es similar, perodos febriles acompaados de

cefalea, mialgia, derrame conjuntival, petequias, hepatomegalia y esplenomegalia, con tres a cinco
das de duracin. Despus de 7 a 10 das sin fiebre los sntomas recurren sbitamente. Durante la
fase febril se encuentran abundantes borrelias en el torrente sanguneo, que luego son
secuestradas por los rganos del RES. La presentacin recurrente de la enfermedad se debe a
variaciones antignicas de la espiroqueta que permiten una nueva invasin sangunea en ausencia
de anticuerpos especficos.
91
FAMURP
Microbiologa
1. Microscopa: los frotices de sangre coloreados con Giemsa o Wright, tomados en la

etapa febril, son de elevada sensibilidad y diagnstico; la sensibilidad del mtodo mejora cuando
se emplea la fluorescencia directa.
2. Cultivo: es utilizado como investigacin, para luego, identificar la cepa en el animal

susceptible especfico.
3. Indirecto: La demostracin de anticuerpos es til, se emplea el procedimiento de

inmuno fluorescencia o ElISA, pero presenta reacciones cruzadas con sfilis.
La higiene personal y la eliminacin de los piojos previenen la enfermedad epidmica. La

erradicacin de las garrapatas es casi imposible, debido a las vastas regiones que habitan. El uso
de repelentes de insectos es aconsejable.
La tetraciclina y la penicilina son los antibiticos de eleccin. Hay que tener en

consideracin una reaccin tipo shock, fiebre e hipotensin, al inicio del tratamiento por
liberacin de endotoxinas.
Borrelia burgdorferi
Es el agente causal de la enfermedad de Lyme, se presenta en Amrica del norte, Europa y

Asia; los vectores son diversas especies de la garrapata dura (Ixodes), y los reservorios ratones y
ciervos de cola blanca.
La enfermedad ocurre en etapas, con manifestaciones clnicas diferentes. La infeccin

temprana se localiza en la zona de inoculacin con eritema, mcula y ppula (eritema migratorio)
que migra a muslos y brazos, luego de unas semanas desaparecen. El segundo estadio se inicia con
la diseminacin hematgena, en la que se presentan numerosas lesiones drmicas anulares con
compromiso articular, neurolgico y cardaco. Las manifestaciones tardas se presentan luego de
varios meses, con ataques intermitentes de tumefaccin y dolor de grandes articulaciones.
El diagnstico se establece mediante la tcnica de ELISA, para detectar niveles de IgG; en

los casos positivos se debe realizar la tcnica de Western Blot. El tratamiento recomendado es el
uso de penicilina o doxiciclina.
92
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 18
BACTERIAS DE TRANSMISIN SEXUAL
Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi, Neisseria gonorrhoeae,
Klebsiella granulomatis y Chlamydia trachomatis
BACTERIAS DE TRANSMISIN SEXUAL
Las bacterias que causan enfermedades de transmisin sexual se caracterizan por ser
transmitidas luego de contacto directo ntimo de persona a persona, y se debe a que los
microorganismos involucrados no pueden sobrevivir en el medio ambiente; as mismo, ocasionan
enfermedades exclusivamente en el ser humano. Entre ellas no hay semejanza microbiolgica y
corresponden a diversos gneros.
Treponema pallidum
Es el agente causal de la sfilis, fue descubierto por Schaudinn y Hoffmann en 1905. La

enfermedad es compleja, evoluciona en forma cclica con manifestaciones clnicas proteiformes; y
se le describe desde el siglo XVI, llegando a ocasionar pandemia en la primera mitad del siglo XX,
conocida como gran pstula, para diferenciarla de la viruela. Se le denomina tambin lues, del
latn lues venereum, que significa pestilencia.
1. Forma y estructura: son espiroquetas con 8 a 14 ondas regulares, que pueden tener de 5 a
20 m de largo, con los extremos afilados. Poseen tres flagelos periplasmticos que les otorgan
movilidad rotatoria y ondulante, observable en microscopa de campo oscuro. Las coloraciones de
impregnacin con plata, se emplean para la observacin de cortes histolgicos.
2. Fisiologa: son aerobios y no cultivan in vitro en medios sintticos; son frgiles a la

sequedad y al oxgeno; pueden mantenerse vivos en el plasma y en la sangre por 2 a 5 das, y a
temperatura de menos 70C. Se pueden conservar viables y virulentos cuando son inoculados en
el testculo de conejo.
3. Clasificacin: el gnero Treponema, de acuerdo a las caractersticas epidemiolgicas y

clnicas, tiene dos especies: la especie: Treponema pallidum, que a su vez lo constituyen tres
subespecies, T. pallidum, agente etiolgico de la sfilis, T. endmicum, agente del bejel y T.
pertenue, agente de la frambesia, (las dos ltimas no son venreas); la otra especie es el
Treponema carateum causante de la pinta.
93
FAMURP
Microbiologa
4. Antgenos: todos los treponemas poseen un antgeno comn, lipdico, denominado

cardiolipina encontrado en el tejido del corazn de buey; y un antgeno proteico especfico del T.
pallidum, responsable de la hipersensibilidad retardada.
B. PODER PATGENO
El hombre es el nico reservorio. La dosis infectante es muy baja (menos 100

espiroquetas), que penetran en las mucosas y en la piel lesionada. La enfermedad tiene una
evolucin natural con varias fases: 1) perodo de incubacin: que puede durar de una a tres
semanas; 2) sfilis primaria: que se caracteriza por la presencia de una lesin cutnea en el sitio de
la inoculacin, rojiza, indolora, que se ulcera, con bordes duros, llamada chancro duro, y que
cicatriza diez a quince das despus; acompaa a la lcera la presencia de un ndulo linftico
regional; 3) perodo secundario: que se presenta luego de dos a diez semanas, como expresin de
la diseminacin hematgena del treponema, con sintomatologa general y presencia de exantema
en toda la superficie del cuerpo, en especial palmas de las manos y plantas de los pies,
denominada roseola sifiltica; algunas veces las lesiones son elevadas en pliegues drmicos,
llamados condilomas; 4) perodo latente: que suele durar meses o aos, asintomtico y slo
detectable con pruebas serolgicas; y 5) sfilis terciaria: con lesiones necrticas llamadas gomas,
en el tejido vascular, cerebral, seo, entre otros. Las lesiones cutneas de la sfilis primaria y del
perodo secundario contienen abundantes treponemas, por lo que son muy contagiosas.
Durante el embarazo T. pallidum cruza la placenta y el feto se infecta; si la infeccin se

detecta antes del cuarto mes de gestacin, es tratable y el feto no desarrollar enfermedad; de no
ser as muchos embarazos terminan en aborto. Otros bebes desarrollan sfilis secundaria con
malformaciones seas, cardiovasculares, dentales, sordera o ceguera, denominada sfilis
congnita.
1. Microscopa: la observacin inmediata de preparaciones en fresco, con microscopio de

campo oscuro, a partir del exudado de lesiones cutneas, es un procedimiento muy til; pero
requiere experiencia en la toma de la muestra. Este procedimiento mejora en calidad si se utiliza la
fluorescencia directa, empleando anticuerpos monoclonales.
2. Cultivo: T.pallidum no desarrolla en medio de cultivo artificial.
3. Indirecto: para la demostracin de anticuerpos se dispone de dos tipos de pruebas: 1)

las no treponmicas, inespecficas y de uso para despistaje, y 2) las treponmicas, que son
especficas y confirmatorias.
No treponmicas: el antgeno empleado es la cardiolipina, obtenido del corazn del buey, que
reacciona con anticuerpos IgG e IgM, llamadas reaginas, que se presentan como respuesta a los
lpidos superficiales de las espiroquetas. Son pruebas de floculacin como el VDRL (laboratorio de
investigacin de enfermedades venreas) o RPR (reagina rpida del plasma). Son muy sencillas,
94
FAMURP
Microbiologa
econmicas y con elevada sensibilidad pero dan reacciones cruzadas con otras enfermedades
puesto que el antgeno no es especfico. Estas reacciones pueden cuantificarse y permiten evaluar
el tratamiento.
Treponmicas: el antgeno empleado es el mismo T.pallidum, procedente de inoculacin

experimental en el testculo de conejo. La prueba clsica es la FTA (fluorescencia con treponemas),
que es una prueba indirecta, en la que, a los cortes histolgicos del testculo de conejo, se les
aade el suero del paciente, luego la antiglobulina marcada con fluorescena; seguidamente se
observa con microscopio de fluorescencia. Este procedimiento es de mucha utilidad para detectar
IgM en recin nacido con sospecha de sfilis congnita. Actualmente se emplean pruebas de
enzima inmuno ensayo (EIA), que utilizan partculas de Treponema pallidum, que tienen elevada
especificidad y sensibilidad.
La mejor prevencin son los hbitos sexuales seguros. No hay vacuna para la sfilis.
La penicilina es el antibitico de eleccin, a dosis elevadas y por periodos prolongados;

como alternativa se puede emplear doxiciclina o ceftriaxona.
Haemophilus ducreyi
Es el agente causal de la enfermedad de transmisin sexual denominada chancro blando,

descrito por Ducrey en 1889, asociada con la prostitucin y de mayor presentacin en hombres.
Para el diagnstico se requiere diferenciar clnicamente, las lceras drmicas de las producidas por
herpes o sfilis.
1. Forma y estructura: son bacilos cortos gramnegativos, no poseen cpsula ni flagelos.
2. Fisiologa: bacteria aerobia, para desarrollar in vitro necesita medios con 20% a 30% de
sangre y perodos de incubacin hasta por 7 das.
B. PODER PATGENO
Las lesiones se presentan luego de 2 a 7 das posteriores a la relacin sexual y afectan en

forma casi exclusiva a los genitales. La lesin del chancroide se inicia con una ppula eritematosa
que rpidamente se hace pstula y luego se ulcera. Las lceras son dolorosas, irregulares, no
induradas, pueden ser solitarias o mltiples; generalmente se ubican en la superficie interna del
prepucio y frenillo en los hombres y en la horquilla y labios en las mujeres. A ello se agrega
adenopata regional dolorosa, que puede supurar al exterior. Las lesiones no desaparecen hasta el
tratamiento.
95
FAMURP
Microbiologa
1. Microscopa: de gran utilidad. Ante una lesin ulcerosa genital es obligatorio realizar
preparaciones en fresco, para observarlas en campo oscuro y descartar treponema; luego frotices
para colorearlos con Gram y Leishman. Se observan numerosos bacilos gramnegativos pequeos,
ordenados en masas.
2. Cultivo: para el aislamiento se utiliza agar con sangre al 20%.
3. Deteccin de antgenos: hay pruebas por inmunofluorescencia y por reaccin en cadena

de la polimerasa para detectar antgeno en muestras obtenidas de las lesiones drmicas.
D.PREVENCIN Y TRATAMIENTO
Evitar el sexo promiscuo. La eritromicina o la azitromicina son los antibiticos de eleccin.

La mayora de cepas de H. ducreyi son resistentes a ampicilina y tetraciclina.
Neisseria gonorrhoeae
La gonorrea o blenorragia es una enfermedad muy antigua. Galeno introdujo el nombre

en el ao 130 (dC), pero fue Neisser en 1879 quien describe al agente etiolgico de esta
enfermedad exclusiva del hombre. La gonorrea es un modelo de enfermedad infecciosa en la que
los factores sociales y conductuales tienen marcada influencia en la epidemiologa.
1. Morfologa y estructura: son diplococos gramnegativos, de aspecto en grano de caf,

inmviles y no forman esporas. Algunas cepas poseen numerosos pili, que les facilita unirse a las
clulas epiteliales de las mucosas y les dan mayor virulencia. Como bacteria gramnegativa posee
en su pared protenas, denominadas porinas, que proveen canales, cuya capacidad antignica es
utilizada para clasificar a los gonococos en serovares. En la membrana externa posee protenas
como PorB, Opa y Rmp, que participan en la payogenia de la infeccin. Muchas cepas son
portadoras de plsmidos que produce betalactamasa o el TEM-1 que da resistencia a la
tetraciclian, transferibles por conjugacin.
2. Fisiologa: N. gonorrhoeae es exigente para desarrollar in vitro, crece bien en agar

chocolate con aminocido cistina y almidn, incubando a 37C en ambiente con 10% de CO2. La
reaccin de citocromo oxidasa es positiva y metaboliza glucosa.
B. PODER PATGENO
La transmisin es fundamentalmente por contacto sexual, el microorganismo tiene

predileccin por las clulas epiteliales no ciliadas del cuerpo, en especial uretra, cuello uterino,
conjuntiva y faringe. La infeccin se inicia con la fijacin de los pili en los receptores de las clulas
96
FAMURP
Microbiologa
husped. En hombres se restringe a la uretra. Luego de 2 a 4 das de incubacin, se presenta

exudado purulento uretral y disuria. En mujeres la infeccin prospera desde la uretra hacia el
crvix y trompas de Falopio. Rara vez N. gonorrhoeae presenta infeccin sistmica, salvo en
mujeres, que pueden presentar fiebre, exantema y artritis supurativa. La conjuntivitis gonoccica
en recin nacidos es consecuencia de la contaminacin en el canal del parto de madres con
gonorrea sintomtica o asintomtica.
1. Microscopa: los frotices de secreciones purulentas, provenientes de uretra o crvix,

coloreados con Gram tienen alta especificidad (50-95%), asociados a la presencia de neutrfilos
con diplococos en su citoplasma.
2. Cultivo: es el mtodo de diagnstico estndar, en especial cuando la muestra proviene

de frotices vaginales, anales o uretritis crnica. Se recomienda el medio Tayer Martin, selectivo
con vancomicina, nistatina y colistina. Tambin se emplean ensayos inmunoenzimticos,
fluorescencia directa y la reaccin en cadena de la polimerasa.
3. Indirecto: No es til la bsqueda de anticuerpos en las fases aguda o crnica.
Las relaciones mongamas y el uso de proteccin son las formas para evitar la infeccin.
No hay vacuna. El tratamiento ha venido cambiando, por la produccin de betalactamasa, que
ofrece resistencia a la penicilina. Actualmente se recomienda ceftriaxone, ciprofloxacino o
doxiciclina.
Chlamydia trachomatis
Llinfogranuloma venreo
Es una enfermedad de transmisin sexual causada por los serotipos L1, L2 y L3 de

Chlamydia trachomatis. Las chlamydias son bacterias de tamao muy pequeo que atraviesan los
filtros de 0.45 micras; tienen vida intracelular obligada y forman inclusiones intra citoplasmticas.
Los serotipos de linfogranuloma venreo (LGV) de C. trachomatis, se replican en los

fagocitos mononucleares del sistema linftico, produciendo destruccin de la clula infectada, y la
respuesta celular forma secrecin purulenta en los ganglios linfticos.
El microorganismo ingresa por una abrasin genital o rectal, donde se forma una lesin
herpetiforme que cura rpidamente. Semanas despus, se presenta adenopata inguinal regional
(inguinales, femorales o ilaca profunda), con piel eritematosa, dolorosa, que luego adquiere la
forma de absceso y drena al exterior; incluso puede abrirse una fstula vaginal o rectal.
Antiguamente se le denominaba enfermedad de Nicols Favre.
97
FAMURP
Microbiologa
1. Microscopa: las muestras obtenidas de exudado de mucosas o ganglio, pueden

colorearse con Giemsa, para observar las inclusiones citoplasmtica.
2. Deteccin de antgenos: la bsqueda de antgenos de clamidias en muestras clnicas,

mediante las tcnicas de inmuno cromatografa, inmuno fluorescencia directa y enzima inmuno
ensayo son muy utilizadas.
3. Pruebas moleculares: la tcnica de amplificacin de los cidos nucleicos es la ms

especfica y adecuada.
4. Cultivo: se puede cultivar en lneas celulares, pero la sensibilidad es inferior que las
tcnicas moleculares.
5. Serolgico: el ttulo de anticuerpos en linfogranuloma es de gran utilidad; en cambio de

poco valor en infecciones urogenitales porque no diferencia infecciones actuales de las antiguas.
Las infecciones genitales se previenen teniendo prcticas sexuales seguras. El tratamiento

recomendao es la doxiciclina durante dos semanas, disponiendo de la eritromicina como
alternativa.
Infeccin urogenital
Actualmente se seala a Ch. trachomatis como responsable del mayor nmero de

pacientes con enfermedades de transmisin sexual. El microorganismo corresponde a los
serotipos D hasta K de Chlamydia trachomatis, que tienen como clulas susceptibles a las del
epitelio cilndrico no ciliado, cbico y de transicin de la mucosa uretral, endocrvix, endometrio,
trompas de Falopio, ano, recto, epiddimo y conjuntiva. Por lo tanto, es agente causal de uretritis
no gonoccicas, endometritis, enfermedad inflamatoria plvica, e infertilidad.
La infeccin se produce por la presencia de pequeas abrasiones en piel o mucosas, por

donde ingresan los cuerpos elementales; su presencia estimula la respuesta a polimorfo nucleares
y linfocitos. La sintomatologa es escasa en la mayora de pacientes y la inmunidad no es
protectora, por lo que se pueden producir reinfecciones.
C. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
1. Microscopa: Las inclusiones de los serotipos de Ch. Trachomatis que ocasionan esta
patologa son yodfilas, luego los frotices de los exudados de la mucosa uretral o de crvix, se
colorean con soluciones de Yodo, para observar las inclusiones citoplasmtica.
98
FAMURP
Microbiologa
2. Deteccin de antgenos: la peresencia de antgenos de Ch. Trachomatis en muestras de

frotis de mucosas, se puede detectar con tcnicas de inmunofluorescencia o inmuno precipitacin.
3. Cultivo: El aislamiento de Ch. Trachomatis en cultivos celulares es el mtodo gold

standard, pero por su elevado costo no es prctico en diagnstico clnico.
4. Pruebas moleculares: la deteccin del antgeno mediante la tcnica de la reaccin en

cadena de polimerasa es muy til.
5. Serolgco: Las determinacin de anticuerpos Ig G e Ig M por el mtodo ELISA es muy

prctico. Pero, muchas veces, los ttulos no se correlacionan con la presencia del antgeno en los
frotices de las mucosas.
Las relaciones mongamas y el uso de proteccin son las formas para evitar la infeccin.
No hay vacuna. El tratamiento recomendado es el uso de doxiciclina por tres semanas.
Klebsiella granulomatis
El agente causal de la enfermedad de transmisin sexual denominada donovanosis, fue

descubierto en 1905 por Donovan, pero la enfermedad ya haba sido descrita por McLead en
1881. Es frecuente en regiones de la India, Caribe, Brasil y Nueva Guinea; con la presentacin de
ulceraciones crnicas, progresivas en la regin genital, denominado granuloma inguinal.
Anteriormente al agente causal se le llamaba Calymatobacterium granulomatis.
1. Morfologa y estructura: son bacilos pequeos (1 a 2 m), gramnegativos que se tien

con ms intensidad en los extremos (coloracin bipolar), inmviles, con cpsula. Se les encuentra
dentro de vacuolas en el citoplasma de los mononucleares.
2. Fisiologa: Es difcil el aislamiento en medios sintticos, se ha logrado obtener desarrollo

en saco vitelino de embrin de pollo y en cultivos celulares Hep2.
3. Clasificacin: por la homologa molecular entre Calymatobacteriurm y Klebsiella, sta

bacteria ha sido insertada en el grupo de la Klebsiella.
B. PODER PATGENO
Luego de un periodo de incubacin de 1 a 60 das, se presenta, en la regin pubiana y

genital externo, una ppula indurada que evoluciona hacia lcera granulomatosa, exuberante, de
99
FAMURP
Microbiologa
color rojo carnoso, con borde bien definido e indolora. Las lesiones se multiplican y se diseminan
va subcutneo, hay compromiso linftico con edema regional.
1. Microscopa: La coloracin de Giemsa de los frotices de la secrecin son muy tiles para
el diagnstico, la presencia de bacilos con coloracin en los extremos (bipolar) dentro del
citoplasma de los mononucleares, es muy sugestivo. El examen histolgico de biopsias obtenidas
por sacabocado es confirmatorio.
Evitar el sexo promiscuo. El tiempo del tratamiento debe ser por perodos prolongados
con doxiciclina, sulfatrimetoprim o eritromicina.
100
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 19
GNERO MYCOBACTERIUM
Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium leprae
MYCOBACTERIUM
La Familia Mycobacteriaceae est formada por bacilos delgados, que tienen la

caracterstica en comn de conservar los colorantes, a pesar de la accin combinada de alcohol y
cidos fuertes como decolorantes, por lo que se les denomina cido alcohol resistentes. Estn
ampliamente distribuidos en la naturaleza, pero slo el gnero Mycobacterium tiene inters
mdico, y comprende:
a) Especies patgenas para el hombre: M. tuberculosis y M leprae.
b) Especies patgenas para los animales y a veces para el hombre: M. bovis, M. avium.
c) Especies saprofitas, pero ocasionalmente patgenas para el hombre: M. atpicas.
Mycobacterium tuberculosis
Las lesiones tuberculosas (granulomas) fueron individualizadas por Laennec, pero Robert
Koch, en 1882, descubre el bacilo y lo cultiva. Investigadores como Calmette y Guerin elaboraron
la vacuna (BCG), utilizada hasta la actualidad como una medida preventiva. M. tuberculosis es un
parsito estricto del hombre y es la causa ms frecuente de muertes en el mundo.
1. Morfologa y estructura: son bacilos rectos y curvados que miden 0,2-0,6 x 2-10 m, no
forman cpsula ni flagelos y se encuentran aislados o formando agregados. Colorean mal con los
colorantes habituales, por la propiedad hidrfoba de su pared, en cambio retienen la fucsina
fenicada con accin del calor (coloracin de Ziehl-Neelsen) y no se decoloran con alcohol ni cidos.
En muestras clnicas se puede apreciar la presencia de granulaciones metacromticas o de volutina
en los extremos del bacilo, que son acmulos de fosfatos. La pared celular es rica en cido miclico
(cido graso con 70 a 90 tomos de Carbono), responsable de las propiedades biolgicas de la
bacteria; y en protenas con cido glutmico, que son los antgenos que condicionan la respuesta
inmune celular.
2. Fisiologa: son bacterias aerobias estrictas que desarrollan lentamente en medios

enriquecidos, ya que el tiempo de generacin es de 15 a 18 horas; producen las enzimas catalasa
(que es destruida a 70C), y la nitrato reductasa; as mismo es capaz de sintetizar cido nicotnico.
M.tuberculosis es sensible a temperatura de pasteurizacin (62C), a las radiaciones ultravioletas y
al alcohol. Es muy resistente a la desecacin (soporta hasta 10 das en reas contaminadas y seis
meses en el esputo protegido del sol), a la accin de los desinfectantes, de los cidos y de las bases
fuertes. Puede permanecer inactivo por aos en los tejidos.
101
FAMURP
Microbiologa
El medio de cultivo clsico es el de Lowenstein Jensen, compuesto a base de huevos,

fcula de papa y glicerina, en el cual tarda de 2 a 4 semanas para formar colonias caracterizadas
por ser secas, rugosas y de color cremoso. El medio sinttico de Middlebrook se usa como
referencia para estudios fisiolgicos de la bacteria; y el medio de Ogawa, que tiene alto contenido
en cido glutmico (aj no moto), es el de mayor uso en la actualidad porque se observa desarrollo
a partir de los 7 das de incubacin.
3. Clasificacin: Los Mycobacterium que mayormente afectan al humano son: M.

tuberculosis, M. leprae, M. bovis, M. kansasii y M. africanum. Hay varias especies de
Mycobacterium saprofitas ambientales, que no se propagan entre las personas, pero pueden
producir infecciones en el ser humano, denominadas Mycobacterium no tuberculosas o atpicas, y
se describen mas 50 en la actualidad. Rouyon, utilizando las caractersticas de los cultivos las
clasific en:
a) Fotocromgenos, que producen pigmento al exponerse a la luz solar: M. kansasii, M. simiae, M.
marinum.
b) Escotocromgenos, que producen pigmento en la oscuridad, no necesitan estimulo solar: M.
scrofulaceum, M. gordonae
c) No cromgenos: M. avium, M. intracellulare, M. terrae y M. xenopi
d) De crecimiento rpido, desarrolla antes de los siete das: M. fortuitum, M. phlei, M. smegmatis..
La diferenciacin entre las especies ms importantes, se aprecia en el cuadro siguiente:
M. tuberculosis M. bovis M. avium M. atpico

Catalasa a 22C ++ ++ ++ ++
Catalasa a 70C -- -- ++ ++
Acido nicotnico ++ -- -- --
Nitrato reductasa ++ -- -- --
Antibiticos sensible sensible resistente resistente
Animal experimental Cobayo cobayo pollo --
conejo conejo --
Para la identificacin actual de los Mycobacterium no tuberculosos se emplean mtodos

de cromatografa lquida, basada en la composicin del cido miclico, y mtodos moleculares
como la reaccin en cadena de la polimerasa o sondas genticas para ARN.
B. PODER PATGENO
M. tuberculosis no produce toxinas, pero todos sus constituyentes son antignicos. El

poder patgeno ms importante es la capacidad de multiplicarse dentro de los macrfagos, para
lo cual impide la unin del fagosoma con el lisosoma; produce sulftides (sulfoglicolpidos) que
promueven la supervivencia intracelular y el factor cord (micolato de threalosa), que facilita el
agregado en cordones de los bacilos.
La transmisin se realiza por contacto inter personal, por inhalacin de aerosol con
bacilos; los que alcanzan los espacios areos terminales, donde se multiplican, ocasionando
alveolitis. Las bacterias son ingeridas por los macrfagos alveolares, que secretan interleucina y
102
FAMURP
Microbiologa
factor de necrosis tumoral, que incrementan la inflamacin. La multiplicacin bacteriana destruye

a los macrfagos, luego, linfocitos y monocitos sanguneos se acercan al foco inflamatorio, se
diferencian en macrfagos e ingieren a los bacilos; que luego son transportados por los vasos
linfticos hasta los ganglios linfticos regionales causando adenitis. Ambas lesiones, pulmonar y
ganglionar (alveolitis + adenitis), constituyen el complejo de Gohn. En esta etapa las bacterias
pueden diseminarse va hemtica a todo el cuerpo (zona apical del pulmn, reas menngeas,
seas, etc.), con una tasa de crecimiento muy intensa.
Luego de 3 a 8 semanas se desarrolla la inmunidad celular e hipersensibilidad. En la

mayora de los casos la infeccin se controla y slo queda como huella la hipersensibilidad tarda,
demostrable con la reaccin intradrmica de la tuberculina. En pocos casos el foco inflamatorio
inicial pulmonar se agranda, la concentracin bacteriana se incrementa y la respuesta inmune
celular, a base de macrfagos y linfocitos T secretan interfern gamma, que conduce a la necrosis
tisular, constituyendo una estructura histolgica denominada granuloma. Los granulomas se
encapsulan y protegen a las bacterias de la accin de los macrfagos, pudiendo permanecer stos
en fase latente, o reactivarse luego de aos, cuando la respuesta inmune disminuye.
Inmunologa: la tuberculosis es la enfermedad infecciosa prototipo de infeccin que requiere

respuesta inmune celular para su control, los anticuerpos formados no desempean ningn papel
en los mecanismos de defensa. En las primeras semanas de la infeccin las bacterias se replican
intensamente hasta que se desarrolla la hipersensibilidad e inmunidad celular.
Los linfocitos CD4 reconocen a los antgenos del M. tuberculosis y los presentan a los
macrfagos; luego linfocitos y macrfagos se activan (transforman), proliferan y secretan enzimas
y metabolitos con accin ltica y de necrosis, que forman el granuloma tuberculoso, constituido
por una rea central necrtica y numerosos bacilos, rodeados de clulas epitelioides y clulas de
Langhans. Cuando la poblacin de linfocitos activados alcanza cierto nmero se manifiesta la
reaccin retardada cutnea de la tuberculina.
Tuberculina: (reaccin de Mantoux) el primer preparado de tuberculina fue un extracto de un

cultivo hervido de bacilos tuberculosos. Siebert, en 1934, prepar un precipitado proteico
(derivado proteico purificado: PPD), en el que una dosis de 5 unidades de tuberculina PPD es
equivalente a 0,0001 mg de protena en 0,1 ml de solucin. El preparado se incoula va
intradrmica en el antebrazo y la lectura de la reaccin se realiza a las 48 horas. La interpretacin
es la siguiente: el 90% de las personas que estn infectados con M. tuberculosis reaccionan
formando una ppula de 10 mm o ms de dimetro. Reacciones con ppulas de 5 a 10 mm de
dimetro, en reas endmicas, son sospechosos de infeccin tuberculosa, o es efecto de la
vacunacin con BCG. Reacciones falsas positivas se dan en procesos infecciosos producidos por
micobacterias no tuberculosas. Reacciones falsas negativas se presenta en un 20% de personas
con tuberculosis activa.
103
FAMURP
Microbiologa
1. Microscopa: en muestras clnicas (esputo, LCR, orina, etc.) los frotices coloreados con
Ziehl-Neelsen, son adecuados para observar la presencia de bacilos cido alcohol resistentes. El
uso de colorantes fluorescentes (auramina, rodamina) mejora la calidad del estudio microscpico,
ya que se observa al microscopio con objetivos de 40X 60X, evaluando todo el preparado.
2. Cultivo: se recomienda el uso de muestras voluminosas con el objeto de obtener mayor

posibilidad de xito, lo que obliga a concentrar las muestras por centrifugacin. Debido a la
proliferacin lenta de las micobacterias, se debe destruir las bacterias de desarrollo rpido
contenidas en la muestra, para lo cual se aaden decontaminantes como el hidrxido de sodio al
2%, o fosfato trisdico, durante 30 minutos. Luego se centrifuga y el sedimento es neutralizado
con cido clorhdrico 1N, hasta obtener pH 7.0. Seguidamente se siembra en medios de
Lowenstein Jensen, Middlebrook u Ogawa.
Otros procedimientos son utilizados con la finalidad de disminuir el tiempo de diagnstico,

como: la observacin microscpica de la sensibilidad al frmaco (MODS), que emplea medio de
cultivo lquido con antibiticos, y la observacin microspica del desarrollo bacteriano por la
formacin de cordones; permite obtener resultados en 7 a 10 das, con la sensibilidad antibitica
incluida. As mismo el uso de medios de cultivo que incluye carbono radioactivo, es de gran
utilidad, puesto que no se espera la formacin de colonias sino la presencia de CO2 con carbono
marcado, detectable en la primera semana de siembra como expresin de metabolismo
bacteriano.
Para la identificacin se utilizan las pruebas bioqumicas clsicas o las de amplificacin

mediante la reaccin en cadena de la polimerasa y el uso de sondas de ADN especficos de
especie.
3. Tcnicas moleculares: El uso de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) para

detectar secuencias del cido nucleico presentes en la muestra, son tiles, pero un tanto costosas,
aunque ahorran mucho tiempo en relacin a los cultivos y son de alta especificidad.
4. Inmunolgicas: a) Intradermo reaccin de la tuberculina que detecta personas

infectadas. El inconveniente es que la positividad dura toda la vida. b) Determinacin de la
liberacin de Interfern gamma por los linfocitos T sensibilizados, cuando son expuestos al
antgeno especfico.
5. Inoculacin: el animal susceptible al bacilo tuberculoso es el cobayo. La inoculacin

experimental para el aislamiento del M. tuberculosis est reservada para muestras clnicas con
escasas bacterias (LCR, biopsias), y se debe realizar en Instituciones especializadas que cuenten
con crematorios para eliminar el animal en estudio. La va de inoculacin es la subcutnea, en el
arco crural, para observar, luego de unos das, la presencia de adenopata inguinal. El diagnstico
se realiza con la biopsia del ganglio y con estudios microscpicos, de cultivo y moleculares.
104
FAMURP
Microbiologa
C. PREVENCIN Y TRATAMIENTO
La vacuna contra la tuberculosis es viva atenuada, llamada de Calmette-Guerin (BCG), que

proviene del Mycobacterium bovis. Su uso es recomendado en pases donde la enfermedad es
endmica. El efecto ms importante de la vacuna es que evita totalmente la presentacin de
formas graves de tuberculosis como el compromiso menngeo y la diseminacin sistmica o miliar.
El tratamiento es prolongado (6 a 9 meses) y se emplean combinaciones de varias drogas,

de acuerdo a los esquemas establecidos por las autoridades de Salud, empleando isoniazida,
etambutol, pirazinamida, rifampicina, kanamicina, amikacina o fluoroquinolonas. Se conoce con el
nombre de cepas multiresistentes (MDR) cuando son resistentes al menos a isoniazida y
rifampicina; y las nuevas cepas resistentes de forma amplia (XDR) cuando son resistentes a las
fluoroquinolonas y a una droga de las de segunda lnea.
Micobacterium no tuberculosos
Son micobacterias habitantes del medio ambiente, denominadas atpicas y no son

transferibles de una persona a otra.
1. Complejo avium, formado por las especies M. avium y M. intracelulare (MAC): desarrollan bien
a temperatura de 41C, y son los que ms afectan a los pacientes inmunodeprimidos.
2. M. kansasii y M bovis producen enfermedad pulmonar muy similar a la del M tuberculosis
3. M. escrofulceum: escotocromgeno, que ocasiona compromiso linftico a nivel cervical
4. M. ulcerans y M. marinum: Habitantes en medio acutico, que desarrollan mejor a 31C y

ocasionan lesiones drmicas.
5. M. smegmatis: habitante de la secrecin sebcea en el glande del hombre. Otras micobacterias

de desarrollo rpido como M. fortuitum, M.absessus y M chleonae se asocian a infecciones de
tejido subcutneo como consecuencia de yatrogenia por endovenosos.
Mycobacterium leprae
Es el agente etiolgico de la lepra, enfermedad muy antigua, que por presentar lesiones
drmicas y deformaciones ha conducido a estigmas sociales en muchas culturas. Fue descubierto
por Hansen en 1873. A pesar de la incidencia mundial de lepra, el conocimiento del M. leprae ha
demorado, debido a la incapacidad de la bacteria de desarrollar in vitro. Los progresos se
apreciaron luego de la inoculacin en la almohadilla plantar del ratn y el conocimiento de que es
una enfermedad endmica en el armadillo.
105
FAMURP
Microbiologa
1. Morfologa y estructura: es un bacilo cido alcohol resistente que no se puede

distinguir de otras micobacterias, se presenta formando agregados o masas. El bacilo est rodeado
de una densa capa de lpidos y un glucolpido fenlico (PGL-1), til como antgeno en la prueba
serolgica.
2. Fisiologa: el M. leprae no desarrolla en medios de cultivo sintticos. El bacilo tiene vida

intracelular y se multiplica bien en la almohadilla plantar del ratn, con un tiempo de generacin
de 15 das.
B. PODER PATGENO
Los seres humanos y el armadillo de nueve bandas son los nicos huspedes. La
transmisin de la lepra se realiza por va area; el perodo de incubacin es largo, se estima en
promedio cinco aos. La mucosa nasal es el sitio primario de infeccin, luego se disemina por va
sangunea al tejido subcutneo y a los nervios perifricos, ocasionando prdida de la sensibilidad
termo algsica. El armadillo, por inoculacin experimental, desarrolla la forma clnica lepromatosa
La enfermedad evoluciona en forma muy lenta, y las manifestaciones clnicas son

determinadas por el estado inmunitario del husped. Cuando no hay respuesta celular (anergia),
se presenta la forma lepromatosa, que es maligna, muy contagiosa, con bacteriemias continuas,
lesiones drmicas papulosas infiltradas que se ulceran, donde se encuentran abundantes bacilos
dentro de los macrfagos; la cara adquiere el aspecto de len, con prdida de las cejas; la
neuropata perifrica condiciona cambios trficos en las extremidades. La prueba cutnea a la
lepromina es negativa. En cambio, los pacientes que reaccionan en forma hipersensible al bacilo,
presentan la forma clnica denominada tuberculoide, que es benigna, con lesiones drmicas en
placa, hiperpigmentadas, con bordes ntidos y deterioro neuronal perifrico; en estas lesiones la
presencia de los bacilos es escasa y la prueba cutnea a la lepromina es positiva.
C. DIAGNSTICO
El examen clnico nos muestra alteraciones caractersticas de lesiones en nervio perifrico

con hipertrofia e hipoestesia, y la evidencia de bacilos cido alcohol resistentes en el tejido
afectado. Se puede investigar la presencia de bacilos cido resistentes en mucosa del tabique
nasal.
El uso de la vacuna BCG (bacilos de Calmet y Guerin) tiene moderada eficacia. No est
recomendado el tratamiento con antibiticos a los contactos domsticos,
El tratamiento clsico es el uso de Dapsona (antimetabolito), Clofazimina (bloquea sntesis

de ADN) y Rifampicina (inhibe sntesis de ac. nucleico), administrados por perodos prolongados.
106
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 20
BACTERIAS FILTRABLES
GNEROS RICKETTSIA, MYCOPLASMA Y CHLAMYDIA
BACTERIAS FILTRABLES
En este captulo se ha incluido a tres grupos bacterianos que tienen la caracterstica de ser
muy pequeos, por lo tanto, capaces de atravesar los filtros de 0,45 m; adems cada uno de ellos
posee cualidades propias que los identifica. Se trata del gnero Rickettsia, que tiene vida
intracelular obligada; del gnero Mycoplasma, que carece de pared celular; y del gnero
Chlamydia, que tiene un mecanismo de multiplicacin endocelular propio.
RICKETTSIA
Son bacterias que se caracterizan porque se multiplican dentro de las clulas eucariotas, y
tienen como reservorio a roedores y artrpodos; la especie R. prowazekii es la excepcin, pues el
ser humano es el nico reservorio. Son transmitidas por artrpodos (piojo, pulga, caro y
garrapata). Dos gneros tienen inters para el ser humano, el gnero Rickettsia, que tiene
predileccin por las clulas endoteliales de los vasos sanguneos, y el gnero Ehrlichia que se ubica
dentro de los mononucleares y granulocitos.
Rickettsia prowazekii
Agente causal de la enfermedad denominada tifus exantemtico, epidmico o transmitido

por piojos; enfermedad conocida desde el siglo XVI, descrita por Howard Ricketts en 1910, y que
produjo una elevada mortalidad en la segunda guerra mundial.
1. Morfologa y estructura: son coco bacilos pleomorfos, de 0,3 a 1,0 m de tamao, con las
caractersticas de un germen gramnegativo, por lo tanto liberan endotoxina. Colorean
mal con el Gram, por lo que se utiliza la coloracin de Giemsa.
2. Fisiologa: Desarrollan in vitro en el citoplasma de las clulas eucariotas, donde se
multiplican en forma lenta, pues tienen un tiempo de generacin de 10 horas; el
desarrollo intracelular conduce a lisis celular. La bacteria es frgil a temperaturas
superiores a 36C.
107
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
El ser humano es el principal reservorio, aunque se encuentra en la ardilla voladora de

Norte Amrica El piojo del cuerpo (pedculus humanus) se infecta al picar al hombre, R. prowazekii
se reproduce en las clulas intestinales del piojo y se elimina por las heces; cuando el piojo pica
defeca a la vez, produce escozor y al rascarse la persona se auto inocula. Dos a tres semanas
despus el piojo muere infectado.
La sintomatologa principal es fiebre, cefalea, mialgias y postracin; el compromiso del

endotelio vascular (vasculitis) se expresa por mculas, petequias y micro hemorragia sistmica; el
estado de postracin (tifoso) revela el compromiso del sistema nervioso central.
La determinacin de anticuerpos sricos mediante tcnicas de inmunofluorescencia

indirecta o peroxidasa son tiles, mejor aun el uso de la reaccin en cadena de la polimerasa
(PCR).
D. PREVENCIN Y TRATAMIENTIO
Mejorar las condiciones higinicas de las viviendas y eliminar los piojos son las medidas
preventivas. Para el tratamiento se recominda el uso de tetraciclina o cloranfenicol.
Rickettsia typhi
Es el agente causal del tifus murino o endmico, tiene como reservorio a los roedores, y a
las pulgas como vectores. La infeccin en humanos es accidental y la sintomatologa de tipo
benigno.
Ehrlichia
Estas bacterias son parsitos intracelulares obligados de las clulas hematopoyticas

(monocitos y granulocitos) de los mamferos. Las bacterias permanecen dentro de una vacuola en
la clula anfitriona, donde se multiplican por fisin binaria formando cuerpos elementales y
cuerpos reticulares; los cuerpos elementales se organizan en mrulas y llevan a la lisis celular.
Tienen como reservorio al ciervo de cola blanca, perro, zorro y cabra; y como vector a la
garrapata. La enfermedad es muy ocasional y se presenta con sintomatologa de un proceso
infeccioso general semejante a la gripe, con exantema, leucopenia, trombocitopenia e incremento
de las transaminasas sricas. El diagnstico slo es posible con la tcnica de amplificacin del ADN.
108
FAMURP
Microbiologa
MYCOPLASMA
Los micoplasmas son microorganismos ampliamente distribuidos en el reino vegetal y

animal. Fueron descritos en 1892, por Nocard y Roux, en secreciones respiratorias de bovinos.
Diennes, en 1937, identifica micoplasmas en humanos, a partir de una infeccin en la glndula de
Bartolino.
1. Morfologa y estructura: son bacterias pequeas (0,1 0,3 m), carentes de pared
(peptidoglucano), luego no tienen forma definida (polimorfas). La membrana
citoplasmtica est constituida por tres capas de esteroles, compuesto qumico ausente
en bacterias y virus.
2. Fisiologa: la mayora de especies son anaerobias facultativas, excepto M. pneumoniae
que es aerobia. Para desarrollar in vitro requieren de alto contenido de lpidos en los
medios (30%) con agregado de inhibidores (Penicilina y acetato de talio). Formarn
colonias luego de 7 a 15 das, que se caracterizan por tener la superficie granulosa y la
zona central deprimida, en huevo frito. Metabolizan glucosa, arginina, rea y reducen el
tetrazolium.
3. Clasificacin: las especies de importancia para el ser humano son:
a. M. pneumoniae: traquetis, neumona, pericarditis, artritis.
b. M. genitalium: uretritis no gonoccica, enfermedad infecciosa plvica.
c. M. hminis: pielonefritis, fiebre puerperal
d. Ureoplasma ureolticum: uretritis no gonoccica, aborto espontaneo, pielonefritis.
B. PODER PATGENO
M. pneumoniae
Tambin denominado agente de Eaton, es causante de la neumona atpica por tres

razones: la resistencia al tratamiento con penicilina, porque no se identifica agente alguno en los
estudios microscpicos y cultivo de muestras de esputo, y por la discordancia entre la
sintomatologa y las imgenes radiolgicas. Es un habitante exclusivo del hombre, que coloniza
vas respiratorias altas.
M. pneumoniae posee la adhesina P1 con la que se adhiere al epitelio respiratorio,

destruyendo las clulas ciliadas y dejando la mucosa desprotegida para otros agentes infecciosos.
El sndrome clsico es la trqueobronquitis, que puede persistir ms de dos semanas, y
evolucionar hacia la neumona.
La infeccin genera respuesta inmune protectora con anticuerpos Ig G e Ig A; pero

tambin se forman autoanticuerpos de tipo Ig M, que tienen la caracterstica de aglutinar los iso
antgenos presentes en los hemates a 4C. (crioaglutininas), reaccin que es reversible si
calentamos la sangre a 37C.
109
FAMURP
Microbiologa
El diagnstico microscpico no es til. Los cultivos, a partir de lavado bronquial, pueden

desarrollar colonias microscpicas luego de dos semanas de incubacin, que se identifican porque
el antisuero especfico inhibe la formacin de colonias. El cultivo tiene el inconveniente de que
sigue siendo positivo, incluso despus de alcanzar la mejora del paciente. La presencia de
crioaglutininas en la primera quincena de la enfermedad, puede ser verificable en el 40% a 70% de
casos. El procedimiento es sencillo: se obtiene sangre en tubo con heparina, el cual se guarda en
refrigeracin (4C) por dos horas y se observar la aglutinacin de los eritrocitos, que es reversible
al incubarlo a 37C. Los mtodos de ELISA y fijacin de complemento tambin son utilizados.
Mycoplasmas genitales
Diversas especies de micoplasmas habitan las mucosas genitales, las ms frecuentes son:
M. genitalium, M. hminis y Ureoplasma ureolticum. Se observa una mayor colonizacin en
mujeres; en cambio, en la uretra de los hombres se empieza a observar desde el inicio de las
relaciones sexuales. La especie M. genitalium est muy relacionada con infecciones uretrales no
gonoccicas.
Se recomienda el uso de tcnicas inmunolgicas: fijacin de complemento y ELISA, que

deben realizarse por duplicado con cuatro semanas de diferencia, para demostrar conversin
serolgica
La prevencin es complicada, puesto que hay numerosas personas portadoras

asintomticas. No hay vacuna aceptable. El tratamiento de preferencia es doxiciclina o
eritromicina.
CHLAMYDIA
El grupo bacteriano que comprende al gnero Chlamydia, se caracteriza por ser parsitos
intracelulares obligados, carentes de peptidoglucanos y que tienen un ciclo vital muy particular,
que lleva a la formacin de cuerpos de inclusin. Desde muy antiguo, en China, se conoce una
enfermedad que produce ceguera, denominada tracoma ocular, causada por un miembro de ste
gnero. La especie de mayor inters para el ser humano es Chlamydia trachomatis.
110
FAMURP
Microbiologa
1. Morfologa y estructura: estas bacterias poseen dos formas: a) el cuerpo elemental (CE),
esfrico, de 0,3 m y; b) el cuerpo reticular (CR), de 0,8 1,0 m. Carecen de pared real
con mureina. La membrana citoplasmtica que las rodea tiene dos capas, la capa externa
es una protena nica en cada especie de Chlamydia y responsable de las variantes
serolgicas.
2. Fisiologa: los cuerpos elementales son muy resistentes a cambios ambientales, no se
replican, pero son infecciosos y se adhieren a la superficie de las clulas susceptibles.
Ingresan a las clulas por endocitosis y permanecen dentro de los fagosomas, donde se
convierten en cuerpos reticulares. El CR tiene actividad metablica, se replica por fisin
binaria e incrementa su tamao hasta formar una inclusin. Luego de 24 a 48 horas el
cuerpo reticular se transforma en numerosos cuerpos elementales, los que se liberan al
producirse la lisis celular y son infectantes a otras clulas.
3. Serotipos: se clasifican en relacin a la antigenicidad de la protena de la membrana
externa en:
A, B, Ba, C compromiso conjuntival: tracoma ocular
D hasta K enfermedades del tracto genital y conjuntivitis de inclusin
L1, L2, L3 compromiso ganglionar: linfogranuloma venreo
B. PODER PATGENO
Tracoma
La infeccin ser presenta en zonas endmicas del Africa y Medio Oriente, como una
queratoconjuntivitis folicular crnica. Si la enfermedad progresa se observan cicatrices
conjuntivales y compromiso de la crnea.
Infeccin urogenital
Actualmente se seala a Ch. trachomatis como responsable del mayor nmero de

pacientes con enfermedades de transmisin sexual. (Ver captulo 18)
Conjuntivitis de inclusin
Es una conjuntivitis folicular aguda del adulto, en la que puede apreciarse adenopata pre
auricular. Un porcentaje importante de estos pacientes presenta infeccin genital concomitante a
Ch. trachomatis.
Linfogranuloma venreo (LGV)
Los serotipos de LGV, L1, L2 y L3, son considerados de transmisin va sexual y tienen
como clulas susceptibles a los mononucleares de los ganglios linfticos. (Ver captulo 18).
111
FAMURP
Microbiologa
SECCIN III
CAPTULO 21
VIRUS
ESTRUCTURA. GENOMA. REPLICACIN. PATOGENIA. DIAGNSTICO
_______________________________________________________________
VIRUS
La palabra virus viene del latn y significa fluido venenoso, concepto que procede de los
experimentos realizados por Ivanowski (1892), luego de demostrar que los filtrados de extractos
de plantas infectadas con el mosaico del tabaco, podan aun transmitir la enfermedad. Entonces
se concluy que existan otros agentes ms pequeos que las bacterias, capaces de producir
enfermedades.
Los primeros microbilogos tuvieron dificultad para cultivar in vitro estos nuevos agentes,
aunque utilizaron animales vivos (perros, conejos, ovejas y vacas) para los experimentos con rabia
y viruela. En la dcada del 1930 se iniciaron los aislamientos de los virus utilizando suspensin de
tejido renal y embrin de pollo; luego se desarrollaron los cultivos de clulas de lnea (clulas
cancerosas) y los de clulas diploides humanas. En la actualidad, con el uso de tcnicas de biologa
molecular, se puede identificar a los virus por la secuencia de sus nucletidos.
Los virus se definen como fragmentos de cido nucleico intracelulares obligados, ya que
no tienen la capacidad para obtener energa y de generar biosntesis, por lo cual dependen de la
clula husped para su replicacin.
A.ESTRUCTURA
Los virus estn constituidos por una molcula de cido nucleico, sea ADN o ARN. Su
tamao es muy pequeo, se encuentran en el rango de 20 a 150 nanmetros. Los virus dependen
de la clula anfitriona para la traduccin de la informacin contenida en su genoma, que como
mnimo son tres genes: a) para fabricar la proteina del cpside que proteje al cido nucleico, b) la
estructura receptora a la clula anfitriona y c) la polimeras viral que da incio a la replicacin; el
resto de elementos lo obtiene de la clula husped.
El conocimiento de las diferentes componentes de un virus contribuye para la

identificacin, clasificacin, comprensin del mecanismo de penetracin a la clula husped y su
replicacin. Se describen las siguientes estructuras:
112
FAMURP
Microbiologa
1. cido nucleico (genoma)

La informacin hereditaria de los virus est codificada en una copia de ADN o de ARN,
segn corresponda (slo los retrovirus tienen dos copias de ARN). Los genomas son
variados, pudiendo ser de doble cadena o cadena sencilla, lineales o circulares, y
continuos o segmentados.
Los genomas de los virus contienen menos de 200 genes, y se les puede medir por el
nmero de bases contenidas en el cido nucleico; estando en el rango desde 5.2 hasta 375
kpb. Para los de cadena sencilla se utiliza la expresin Kb (kilo bases), y para los de
cadena doble kpb (kilo pares de bases). Pudiendo ser:
Virus de ADN Virus de ARN

Adenovirus Picronaviridae (polio)
Poxvirus (viruela) Falviviridae (fiebre amarilla)
Herpesviridae (herpes simple) Togaviridae (rubeola)
Hepadnaviridae (Hepatitis B) Myxovirus (Influenza, sarampin)
Papoviridae (papiloma) Rhabdoviridae (rabia)
Parvovirus (B-19) Retroviridae (VIH-1)
Reoviridae (rotavirus)
Coronavirus (SARS)
Filovirus (Ebola)
Arenavirus (LCMV)
Bunyavirus (Hanta)
2. Cpside
Est formado por protenas de estructura idnticas (monmero), que recubren al virus
formando polipptidos esfricos (capsmero), los cuales rodea la partcula viral, cuya
funcin es proteger al cido nucleico y facilitar el ingreso a la clula husped.
Las estructuras 1 y 2 constituyen el nucleocpside.
3. Envoltura
La mayora de virus poseen una cubierta de lpidos, por lo que son frgiles a la sequedad,
acidez, detergentes y solventes orgnicos. Son componentes qumicos, como
glucoprotenas, hemaglutininas, neuroaminidasas, etc. con carcter antignico, que
inducen reaccin inmunitaria protectora. Algunos virus carecen de esta envoltura, como
polio o adeno, y se les denomina desnudo.
A la partcula viral completa se le denomina virin.
La estructura del nucleocpside tiene una organizacin geomtrica, formando simetra

cbica o helicoidal. La simetra cbica es de tipo icosadrico con 20 caras triangulares y 12
vrtices. Esta configuracin permite mantener una apariencia similar cuando se gira sobre
cualquiera de sus ejes. La simetra helicoidal es similar a una escalera de caracol, que es simtrica
a su eje central. Algunos virus, como los poxvirus, tienen estructura compleja. Slo los
bacterifagos, virus de las bacterias, tienen una estructura binaria: cabeza cbica y cola helicoidal.
113
FAMURP
Microbiologa
B. REPLICACIN
Los mecanismos ntimos de la replicacin del genoma viral varan en relacin a la

estructura del genoma, a la forma de penetracin en las clulas susceptibles y al sitio de la
replicacin (citoplasma o ncleo). Pero en lneas generales todos siguen los siguientes pasos:
1. ADSORCIN o unin a la clula diana: los virus se unen a los receptores de las clulas
susceptibles, lo que se define como tropismo celular. Ejemplo: El virus de Ebstein Barr se
une al receptor C3d del linfocito B.
2. PENETRACIN: el virus debe atravesar la membrana citoplasmtica de las clulas y liberar
su genoma, pudiendo hacerlo de tres maneras:
a) Por fusin externa: los virus que carecen de envoltura se adhieren a la membrana
celular y el cido nucleico penetra directamente.
b) Los virus con envoltura, la fusionan con la membrana celular y se interiorizan dentro
de una vacuola, liberando luego el cido nucleico en el citoplasma.
c) Algunos virus penetran en forma similar a la fagocitosis.
3. PRDIDA DE LA COBERTURA DEL GENOMA: el genoma de los virus ADN se introducen en el
ncleo (excepto los virus Pox); en cambio la mayora de virus ARN se quedan en el
citoplasma, donde completan la liberacin de su cobertura (excepto Influenza y
retrovirus).
4. SNTESIS DE MACROMOLCULAS: primero se sinteriza el ARNm, para transcribir las
protenas no estructurales (polimerasas y protenas de unin al ADN). Luego se codifican
las protenas estructurales.
5. REPLICACIN DEL CIDO NUCLEICO: los virus ADN necesitan de polimerasa y desoxi-
ribonucleasa para su replicacin. En cambio los virus ARN ya tienen un ARNm o bien una
plantilla de ARNm y el genoma viral debe codificar las polimerasas de ARN.
6. SNTESIS DE PROTEINAS VIRALES: todos los virus dependen de los ribosomas y del ARNt de
la clula hospedera para fabricar sus protenas.
7. ENSAMBLAJE: es el proceso por el cual se unen todas las partes pre fabricadas del virin,
formando estructuras vacas, para luego rellenarse con el genoma. Algunos lo hacen en el
citoplasma como los poliovirus, en cambio otros, slo en el ncleo como los adenovirus.
8. LIBERACIN: los virus ya formados pueden ser liberados por tres mecanismos: a) Lisis y
muerte celular, denominados tambin virus lticos, ejemplo: polio, sarampin. b) En
algunos casos la clula infectada no muere, se produce una infeccin persistente con una
gradual liberacin de virus por exocitosis, ejemplo: herpes. Y c) las partculas virales se
liberan por gemacin, como es el caso de virus de influenza.
Durante las etapas 4 a 6, el virus pierde carcter infeccioso y no se le puede detectar, por lo que se
denomina a esta etapa perodo de latencia o eclipse. El ciclo de vida viral tarda de 6 a 8 horas y
cada clula infectada puede liberar hasta 10 000 nuevos virus. Es frecuente que durante la
114
FAMURP
Microbiologa
replicacin viral se produzcan mutaciones, lo que da origen a variantes antignicas o variantes no

viables.
C. PATOGENIA
El ser humano est expuesto a numerosos virus ubicuos, pero determinadas situaciones
como la higiene, el hacinamiento, los estilos de vida, o el contacto con vectores, hacen que se
exponga a ciertos virus con capacidad patognica para el hombre. La transmisin puede ser por
contacto directo, va respiratoria, fecal-oral, secreciones, sangre, inyecciones, vectores, etc.
dependiendo de las caractersticas del grupo viral. El virus se adhiere a los receptores especficos
de las clulas susceptibles de ingreso (piel, mucosas, etc.), donde se replican de inicio.
Una vez ingresado el virus al organismo, se va a diseminar, sea por va sangunea, linftica
o neuronal; y por tropismo se dirige hacia el tejido u rgano susceptible. El estado inmunitario del
husped determinar el grado de infeccin, y las manifestaciones clnicas dependern del tipo de
interaccin entre virus y clula hospedera, pudiendo ser:
1. Lisis celular: por interrupcin de la sntesis de proteinas celulares (polio), o por

acumulacin de grandes cantidades de cpside (adenovirus).
2. Fusin celular: glucoproteinas virales ubicadas en la superficie de las clulas que permiten
la unin entre ellas y formacin de clulas gigantes multinucleadas o sincitios
(paramixovirus, respiratorio sincitial, herpes); que facilita que el virus pase de una clula a
otra.
3. Cuerpos de inclusin: son estructuras formadas por la acumulacin de viriones maduros
(reovirus), o reas de la clula con cambios por la replicacin viral; observables al
microscopio de luz, pudiendo ser intracitoplasmticos (rabia, poxvirus) o intranucleares
(citomegalovirus).
4. Formacin de nuevos antgenos en la superficie celular: especificados por el virus
infectante, de manera que marca a las clulas infectadas como ajenas y quedan expuestas
al ataque de los linfocitos T citotxicos (mixovirus, retrovirus).
5. Infeccin persistente: la clula infectada no muere, pero libera constantemente partculas
virales, por mecanismo de exocitosis o gemacin.
6. Infeccin latente: sucede con los virus ADN, que se ubican en clulas que no poseen los
factores necesarios para su replicacin (clulas en reposo), como es el caso del herpes
virus, que se ubica en las races ganglionares dorsales de las neuronas; o como el virus del
papiloma, que se integran a las clulas epiteliales del husped.
7. Oncognesis: algunos virus, por diversos mecanismos, pueden provocar transformacin o
inmortalizacin de la clula husped. Las clulas adquieren un crecimiento continuo sin
envejecimiento, se altera su morfologa y pierden la propiedad de inhibicin de
crecimiento por contacto, que las transforma en tumorales. Ejemplo: el virus de Epstein
Baar, que inmortaliza a los linfocitos B; el virus linfotrpico de linfocitos T humanos (HTLV-
1), codifica protenas que estimula el crecimiento de los linfocitos provocando leucemia a
115
FAMURP
Microbiologa
largo plazo y; los virus de la hepatitis B y C, debido a la infeccin persistente se producen

mutaciones que originan la formacin de tumores.
D. DIAGNSTICO
La historia clnica del paciente orienta al diagnstico y permite excluir infecciones

bacterianas o micticas; adems, debe tenerse en consideracin factores externos, como las
estaciones del ao o antecedentes de viajes a zonas endmicas. La muestra ms adecuada, as
como la metodologa a emplear para hacer el diagnstico, depender de lo que queremos
demostrar: el virus, sus antgenos de estructura o los anticuerpos generados por el husped.
1. Citologa: muchos virus producen alteraciones celulares conocidas como efecto

citoptico, que se pueden expresar como lisis celular (enterovirus); formacin de sincitios
o clulas multinucleadas (herpes virus); o cuerpos de inclusin (rabia, citomegalovirus).
2. Aislamiento: la muestra para el aislamiento del virus debe ser obtenida al inicio de la fase
aguda de la infeccin y ser transportada en cadena de fro. El laboratorio debe disponer de
cultivos tisulares para ello.
El primer tejido utilizado para aislar un virus fue la membrana corio alantoidea del huevo
embrionado, que aun se utiliza para la elaboracin de la vacuna para la gripe. Los cultivos
de clulas primarias, son los obtenidos de un rgano (rin, fibroblastos de embrin de
pollo, suspensin de linfocitos), donde crecen en mono capa, son muy tiles, pero con el
inconveniente de tener corto tiempo de vida. Y los cultivos de lneas celulares tumorales,
que tienen la ventaja de sub cultivarse continuamente sin envejecer (Hela, Hep2, Vero,
etc.). La eleccin del cultivo celular depender del virus a estudiar.
El reconocimiento del virus en los cultivos celulares se realiza por diversos
procedimientos: a) por las caractersticas del efecto citoptico, b) por la presencia de
propiedades del virus (hemaglutinacin), y c) por la demostracin del antgeno viral con
el uso de tcnicas inmunolgicas o moleculares.
3. Protenas virales: el virus en su multiplicacin sintetiza enzimas y protenas, las que
pueden ser separadas por electroforesis e identificadas con el uso de anticuerpos mono
especficos (monoclonales), mediante tcnicas de enzima inmuno ensayo, fluorescencia,
aglutinacin con ltex, etc.
4. Determinacin de material gentico del virus: el uso de sondas de ADN con secuencias
complementarias de regiones especficas del virus y la amplificacin del genoma
empleando la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), son tcnicas actuales de gran
utilidad.
5. Estudio serolgico: se utiliza para determinar si la enfermedad es aguda o crnica y definir
si se trata de infeccin primaria o reinfeccin. La presencia de anticuerpos Ig M nos indica
que se trata de una infeccin primaria reciente. Cuando hay seroconversin, o sea que el
ttulo de anticuerpos se ha incrementado ms del cudruple en un intervalo de 2 a 3
semanas, confirma el diagnstico de la enfermedad. En casos de reinfecciones frecuentes,
116
FAMURP
Microbiologa
se suele mantener el ttulo de anticuerpos elevado. La presencia de anticuerpos contra

ciertos antgenos definidos, se puede utilizar para determinar la evolucin de la
enfermedad (Ejemplo: anticuerpos contra el antgeno de superficie de hepatitis B).
E. CLASIFICACIN
Para clasificar los virus se tienen diversos criterios, como: el tipo de cido nucleico, el
nmero y tipo de cadenas del cido nucleico, la polaridad del ARN, la simetra del nucleocpside,
la presencia o no de envoltura, etc. La clasificacin de Baltimore, basada en el tipo de cido
nucleco y mecanismo de replicacin, divide a los virus en 7 calses. En cambio, el Comit
Internacional de Taxonoma de los Virus del 2005, los clasifica en 73 familias, 287 gneros y ms
de 1950 especies.
Desde el punto de vista mdico prctico, los virus tambin se pueden distinguir por su
afinidad tisular o mecanismo mediante el cual producen enfermedad. Algunos son neurotropos,
dermotropos; otros se replican nicamente en el hgado (hepatitis); y algunos tienen en comn la
va de ingreso como la fecal oral (enterovirus). Es importante tener en consideracin que los
miembros de una familia pueden ocasionar sndromes distintos y a veces se observa superposicin
de sndromes debido a virus diferentes, como es el caso de los sntomas respiratorios.
F. RESISTENCIA DEL HUSPED
Al inicio de la infeccin viral el husped produce factores solubles de defensas no

especficos, como el interfern y el complemento; as mismo hay respuesta inmune celular como
los fagocitos y la actividad de las clulas asesinas (natural Killer). La presencia de anticuerpos
previene infecciones virales posteriores, porque neutraliza la actividad del virus; la respuesta
inmune celular comienza a participar cuando la infeccin ya est establecida.
Los interferones son protenas elaboradas por linfocitos y fibroblastos, desde las primeras
horas de la presencia viral en el husped. Son molculas con actividad inespecfica de virus, pero
especfica de especie animal. Se describen tres interferones antignicamente distintos: alfa,
producido por clulas nucleadas (fibroblastos, leucocitos y macrfagos); beta, producido por
clulas epiteliales y fibroblastos; y gamma, producido por los linfocitos (cooperadores y asesinos).
Los interferones tienen diversas funciones, como bloquear la replicacin viral, producir cambios
profundos en las clulas afectadas, ampliar la distribucin de los antgenos de histocompatibilidad
sobre la superficie celular, y modular la actividad de los linfocitos B y T con el incremento de la
citotoxicidad.
El sistema complemento lo conforma un grupo de nueve glucoprotenas, que se activan de

manera secuencial, y tiene por finalidad la atraccin de las clulas inmunes al rea de la infeccin,
ocasionando lisis de los microorganismos.
117
FAMURP
Microbiologa
Los linfocitos B, con sus receptores de anticuerpo, identifican a las clulas presentadoras
del antgeno especfico y se inicia la proliferacin de clonas celulares con la misma especificidad
antignica. Las clulas clonadas efectoras secretan anticuerpos (inmunoglobulinas), que se
combinarn con los antgenos especficos para neutralizar la actividad del virus.
CAPTULO 22
VIRUS BACTERIANOS
Los virus tiene vida intracelular obligada, luego podrn ubicarse dentro de clulas
eucariotas (vegetales o animales), as como de clulas procariotas (bacterias). Aquellos virus que
infectan a las bacterias se les conoce con el nombre de bacterifagos o fagos. Este conocimiento
se incia con los trabajos de Twort, 1915 y Herelle, 1917, y ha permitido comprender la biologa de
los virus en general. Son tan abundantes en la naturaleza como las bacterias, y participan
activamente en mantener la ecologa acutica en el agua dulce como en la salada.
1. Estructura
La mayora de los bacterifagos tienen una estructura de simetra binaria: cabeza cbica y
cola helicoidal. La longitud vara de 10 a 800 nm. El genoma, en el 96% de los
bacterifagos, es ADN bicatenario; conteniendo de 17 a 500 kb. Los ms conocidos son el
tipo T (T1 a T7) y lambda.
2. Propiedades
Los bacterifagos se adhieren a los receptores de la superficie bacteriana (pili, protenas,
oligosacridos, etc) con las fibras del extremo de la cola; seguidamente sta se contrae e
inyecta el ADN a la bacteria husped, que para ingresar necesita de la digestin enzimtica
del peptidoglucano.
La relacin del bacterifago con la clula bacteriana puede ser de dos formas:
A) Ltica, cuando el ADN viral al ingresar a la clula se replica y fabrica numerosos viriones
que lisan la bacteria, a los que se les llama virus virulentos, ejemplo: bacterifago T4 del
Escherichia coli.
B) Atemperado, cuando el ADN del bacterifago al ingresar se integra al cromosoma
bacteriano, y se replican conjuntamente con la bacteria, permaneciendo inactivo y
produce infeccin latente. La bacteria que lleva el ADN del fago se dice que se encuentra
en estado lisognico, y el fago en estado atemperado, a quien tambin se llama profago.
Ejemplo: Escherichia coli con el fago lambda, o C. diphtheriae con el fago beta.
El 90 % de los fagos se encuentran en estado atemperado. Hay situaciones o condiciones
(radiaciones ultravioleta) que daan el ADN de la bacteria y permiten que los profagos
cambien a la forma ltica, y se expresen destruyendo las bacterias, fenmeno que se
118
FAMURP
Microbiologa
aprecia in vitro, por el aclaramiento de los cultivos lquidos o la formacin de placas de lisis
en las colonias.
El conocimiento de los bacterifagos atemperados ha permitido demostrar uno de los
mecanismos de transferencia de material gentico entre bacterias, denominado
transduccin; mecanismo por el cual el bacterifago es portador de genes de una
bacteria donatriz a una receptora. Concepto que ha contribudo a la gentica experimetal.
Hay un escaso nmero de bacterifagos denominados filamentosos, constituidos por ADN,
que no lisan las bacterias y slo infectan a las bacterias que poseen el plsmido F, el cual
codifica la formacin de pili sexual.
3. Poder patgeno
En principio los bacterifagos son virus de las bacterias, luego no deberan tener rol
patgeno para los humanos, pero algunos contribuyen a la virulencia de ciertas cepas
bacterianas, con la codificacin de protenas txicas. Ejemplo: Streptococcus pygenes,
portador del bacterifago T12, la convierte en una cepa lisognica productora de
exotoxina eritrognica. Corynebacteriun diphtheriae, portador del profago beta es el
causante de la difteria. As mismo Vibrio cholerae, portador del bacterifago CTX;
Escherichia coli, portador del bacterifago H-19B; Staphylococcus aureus, portador de los
bacterifagos lambda y el Clostriodium botulinum, portador de los bacterifagos beta,
causante del botulismo.
4. Utilidad
a) La especificidad de los bacterifagos, frente a los receptores de la superficie de las
bacterias, ha permitido elaborar un sistema para identificar bacterias, basado en el
uso de un panel de bacterifagos. Este sistema tiene utilidad prctica para el
seguimiento epidemiolgico en un brote epidmico. Ejemplo: Staphylocooccus o
Salmonella. Asi mismo para identificar a una cepa bacteriana especfica como Yersinia
pestis.
b) La observacin de Herelle, de la lisis bacteriana de los medios lquidos, al ser
expuestos a filtrados del mismo cultivo, lo llev a acuar el trmino bacterifago,
que se come a las bacterias, y aplicarlo en el tratamiento de infecciones bacterianas.
La terapia con bacterifagos tuvo auge en la era pre-antibitica, sobre todo en la
Unin Sovitica.
c) Muchas bacterias saprofitas colonizan superficies slidas y forman cubiertas viscosas,
que se les denomina biopelculas, y constituyen un problema en pacientes
portadores de catteres, implantes valvulares o dispositivos ortopdicos. Estas
bacterias producen polmeros de polisacridos, que les facilita su adhesin a la
superficie. Es cada vez mayor el inters de pretratar los dispositivos con bacterifagos,
para controlar la formacin de biopelculas.
d) La industria de alimentos, biotecnologa y farmacetica utiliza bacterias en gran escala
para producir enzimas, hormonas, antibiticos, frmacos, alimentos fermentados, etc.
Por ello requiren de un control adecuado para evitar la infeccin con bacterifagos
lticos durante la produccin.
119
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 23
VIRUS DE LA HEPATITIS
_______________________________________________________________
VIRUS DE LA HEPATITIS
Se refiere a un grupo de virus que utiliza a los hepatocitos como principales clulas blanco
para su replicacin, a diferencia de otros procesos infecciosos que lo hacen en las clulas de
Kuppfer, o lesionan al hgado como parte de un proceso sistmico (Ebstein-Baar, citomegalovirus,
fiebre amarilla).
Los virus de la hepatitis (VH) verdadera pertenecen a diferentes familias, as: VHA
(Picornaviridae), VHB (Hepadnaviridae), VHC (Falviviridae), VHD (Deltaviridae), VHE (Calciviridae) y
VHG (Flavivirus); por lo tanto, tienen diferentes estructuras, diferentes mecanismos de replicacin
o transmisin, y la inmunidad post infecciosa conferida es homloga. Desde el punto de vista
clnico las hepatitis virales producen sintomatologa similar, con ictericia e incremento de las
transaminasas sricas.
Virus de la Hepatitis A (VHA)
1. Estructura
Es un virus ARN desnudo, con simetra cbica de 27 nm de dimetro. Codifica cuatro
polipptidos y posee un solo serotipo. Pertenece a la familia Picornaviridae (enterovirus),
pero es la excepcin del grupo, ya que no es citoltico.
2. Propiedades
El VHA es estable al medio cido, a los detergentes y al agua salada o dulce; en cambio es
sensible a las radiaciones UV y al formol.
3. Poder patgeno
La infeccin es de tipo fecal-oral, por la ingesta de agua, alimentos o manos contaminadas
con heces. La mayor incidencia se presenta en nios y adultos jvenes de poblaciones con
deficiente tratamiento de aguas servidas.
El virus alcanza el parnquima heptico, se replica en los hepatocitos y en las clulas de
Kupffer, y luego se excreta por va biliar al intestino. La destruccin celular se presenta en
las reas periportales como consecuencia de la accin de linfocitos T citotxicos y
linfocitos citolticos naturales (killer).
4. Aspectos clnicos
120
FAMURP
Microbiologa
El perodo de incubacin es breve, de 2 a 6 semanas, con malestar general, prdida de

apetito y fiebre; luego se presenta ictericia e incremento de las transaminasas.
Generalmente la Hepatitis A se autolimita y tiene un tiempo de duracin de 2 a 4
semanas. Tambin se le denomina hepatitis infecciosa, no genera estado de portador y la
recuperacin total se observa en la mayora de casos.
5. Diagnstico de laboratorio
En la fase aguda de la enfermedad el diagnstico se establece con la determinacin de la
inmunoglobulina M anti VHA. En cambio la determinacin de los anticuerpos G anti VHA
nos ofrece informacin sobre la prevalencia de la enfermedad en una poblacin.
6. Prevencin y tratamiento
El control de la infeccin en la comunidad depende de la higiene de manos, en especial de
los manipuladores de alimentos, y el tratamiento del agua potable con cloro.
Se recomienda la administracin de la vacuna inactivada con formol a personas que visitan
regiones endmicas.
Virus de la Hepatitis B (VHB)
1. Estructura
Es un virus ADN de 32 kpb, con envoltura, que penetra a la clula por endocitosis y se
replica en el ncleo. El virin completo mide 42 nm y se le llama partcula de Dane. La
protena que rodea al genoma constituye el antgeno del centro vrico (AgHBcore).
La envoltura del virus est formada por glucoproteinas (L, M y S), que se constituyen en
partculas esfricas o tubulares, de 22 nm de dimetro, y son los antgenos de superficie
(AgHBs), denominados inicialmente como antgeno de Australia; estructuras necesarias
para unirse a los receptores de los hepatocitos y participar en el ensamblaje del virus, as
mismo ellos determinan el genotipo del virus (A F).
Adems hay una protena semejante a la del core, que es procesada de manera diferente
y que expresa determinantes antignicos distintos: AgHBe.
2. Propiedades
El virin es muy estable, resiste al ter, al pH bajo, a la congelacin y descongelacin
repetida, pero es sensible a temperaturas superiores a 100C.
3. Poder patgeno
El conocimiento del VHB se inicia en el ao 1964 con la descripcin hecha por Blumber,
de la presencia de anticuerpos, en pacientes multitransfundidos, que reaccionaban con
un antgeno presente en el suero de aborgenes de Australia. Luego se demostr que
dicho antgeno era el virus de la Hepartitis B.
El virus slo se transmite por la sangre y lquidos corporales (transfusin, semen, saliva,
pinchazo de aguja, tatuajes; en recin nacidos durante el parto y leche materna); el riesgo
se incrementa en trabajadores de salud, cuando hay presencia de abrasiones en la piel y
salpicaduras de pequeas gotas de secreciones en el ojo.
121
FAMURP
Microbiologa
El virus se replica en los hepatocitos y las copias de los genomas se integran a la cromatina
celular, permaneciendo latentes por perodos largos sin provocar lesin celular. Hay
produccin de gran cantidad de antgenos de superficie (AgHBs), que dan un aspecto de
vidrio esmerilado a los hepatocitos, luego son liberados al torrente sanguneo. La
respuesta inmunitaria de la persona dictar la evolucin de la enfermedad: aguda, crnica,
sintomtica o asintomtica.
Los linfocitos T citotxicos (CD8+) son los causantes de la lisis de los hepatocitos. El virus
estimula la produccin de interfern (IFN), que a su vez incrementa la distribucin del
antgeno de histocompatibilidad de clase I en las clulas hepticas, para ser presentadas a
los linfocitos T.
4. Aspectos clnicos
El perodo de incubacin es largo (2 a 3 meses), luego se presentan los sntomas clsicos
con fiebre, ictericia, elevacin de las enzimas transaminasas y la presencia, en la sangre,
del antgeno AgHBs, seguido del antgeno AgHBe y de la ADN polimerasa.
En una evolucin deseable, que dura aproximadamente un mes, el primer anticuerpo que
se produce es el antiHBc, el siguiente es el antiHBe, que representa un buen signo de
recuperacin en la mayora de pacientes y es precursor de la desaparicin del antgeno
AgHBe (infectividad). El ltimo anticuerpo en aparecer es el antiHBs, y es indicativo de
recuperacin completa e inmunidad.
Un 5% a 10% de los infectados padecen de hepatitis crnica, porque no forman
anticuerpos antiHBs y los antgenos AgHBs permanecen en la sangre por muchos aos;
mas aun los anticuerpos antiHBe se presentan tardamente.
El 80% de los pacientes que presentan cncer heptico primario son atribuidos a hepatitis
crnica por VHB, y se estima que un paciente de cada mil hace hepatitis fulminante y
muerte.
Se pueden emplear procedimientos como aglutinacin de ltex, hemaglutinacin pasiva,
enzima inmuno ensayo; as como procedimientos moleculares o pruebas rpidas, para la
deteccin de antgenos o anticuerpos.
En la fase aguda y durante la replicacin viral se encuentran en la sangre los antgenos
AgHBs y AgHBe, as como el ADN viral y la ADN polimerasa.
La forma crnica se caracteriza por la presencia de anticuerpos antiHBc y los antgenos
AgHBs y AgHBe.
El paciente considerado curado presenta anticuerpos antiHBc, antiHBs y antiHBe.
Las personas vacunadas tendrn anticuerpos antiHBs.
Como esta infeccin se transmite de persona a persona y la concentracin de partculas
virales en sangre o lquidos orgnicos es elevada, hay que evitar que una persona
infectada llegue a otra sana.
El personal de la salud deber tomar las precauciones y cumplir con los cdigos de la
prctica mdica. Control especial se deber adoptar en unidades de dilisis y Bancos de
122
FAMURP
Microbiologa
sangre. Recomendaciones pertinentes se impartirn a grupos de riesgo portadores del

VHB (gestantes y relaciones sexuales).
Se dispone de una vacuna, obtenida por ingeniera gentica, constituida por el antgeno
AgHBs. En grupos de riesgo se recomienda refuerzos a intervalos de cinco aos.
Virus de la Hepatitis C (VHC)
1. Estructura y propiedades
Es un virus ARN de 50 nm de dimetro, nico integrante del gnero Hepacivirus de la
Familia Flaviviridae. El virus se replica en el citoplasma y su genoma acta directamente
como ARNm. Existen seis variantes genticas, siendo el genotipo 1b la ms frecuente.
Codifica diez protenas, de las cuales la C, del cpside, es el componente principal, que
inhiben la apoptosis de las clulas anfitrionas produciendo infeccin persistente.
2. Poder patgeno
En el ao 1975, Prince describe casos de hepatitis postransfusionales que no
corresponden al VHA ni al VHB, acuando el trmino Hepatitis no A no B. Con el uso
tcnicas moleculares, en el ao 1989, se pudo caracterizar el virus de la Hepatitis C.
El virus se transmite por va parenteral (transfusiones, agujas, tatuajes) y sexual. En la
mayora de casos se observa hepatitis asintomtica o de evolucin lenta, con viremia
persistente.
En el tejido heptico se observa infiltracin linfocitaria en el espacio portal e inflamacin
con fibrosis peri portal; respuestas inflamatorias crnicas que llevan a la cirrosis heptica.
Los anticuerpos antiVHC no confieren proteccin.
3. Aspectos clnicos
Luego de un perodo de incubacin de dos meses, slo el 10% al 20% de los infectados
presentan sntomas semejantes a las otras hepatitis; la ictericia en el resto es poco
manifiesta. El 80% de los infectados evoluciona hacia la hepatitis crnica y el 20% de ellos
desarrolla cirrosis heptica.
El fundamento del diagnstico es determinar la presencia de anticuerpos antiVHC
mediante la tcnica de enzima inmuno ensayo (ELISA) o la deteccin del ARN genmico
por la reaccin en cadena de polimerasa (PCR).
El uso de protocolos de descarte de portadores en donantes de sangre y el control en
farmacodependientes reduce la posibilidad de infeccin. No hay vacuna.
El tratamiento basado en la administracin de interfern (INF) combinado con ribavirina
es de moderada eficacia.
Virus de la Hepatitis D (VHD) o agente delta
123
FAMURP
Microbiologa
Es un virus con genoma ARN muy pequeo, de cadena sencilla, cubierto por el centro
vrico y rodeado por una capa externa de antgeno de superficie del virus de hepatitis B
(AgHBs). El agente delta ingresa a los hepatocitos de manera semejante al VHB y se replica
en el ncleo.
2. Poder patgeno
La transmisin se produce por las mismas vas que lo hace el virus de la hepatitis B y la
poblacin de riesgo es la misma. Sin embargo slo provoca enfermedad en pacientes con
infeccin activa por VHB.
La replicacin del VHD produce citotoxicidad del hepatocito y los anticuerpos contra el
agente delta no ofrecen proteccin.
3. Aspectos clnicos
El agente delta puede ingresar, conjuntamente, en la primera infeccin por VHB
(coinfeccin) o posterior a ella (superinfeccin). El perodo de incubacin es muy variable;
puede no haber ningn efecto sobre la infeccin establecida, o agravarla, presentando
cuadro clnico de hepatitis fulminante con encefalopata.
La determinacin de anticuerpos (IgG e IgM) antiVHD mediante la tcnica de enzima
inmuno ensayo (ELISA) o la deteccin del ARN genmico por la reaccin en cadena de
polimerasa (PCR) son los mtodos de diagnstico.
Las medidas preventivas para el VHD, son las mismas utilizadas para VHB. La vacuna
utilizada para VHB previene infecciones contra el agente delta. No hay tratamiento mdico
para esta infeccin.
Virus de la Hepatitis E (VHE)
Es un enterovirus que pertenece a la familia Calciviridae, fue identificado en 1989 a partir

de muestras de un brote epidmico de hepatitis transmitidas por agua, ocurrido en la India. Es un
virus ARN que se transmite por va fecal-oral y evoluciona en forma similar a la producida por VHA.
El diagnstico se establece por la deteccin de anticuerpos IgM antiVHE.
124
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 24
VIRUS RESPIRATORIOS:
ORTOMYXOVIRUS, PARAMIXOVIRUS, RUBEOLA, ADENOVIRUS
CORONAVIRUS, RINOVIRUS
________________________________________________________________________________
VIRUS RESPIRATORIOS
En ste captulo se han agrupado a virus propios del ser humano y que tienen como
mecanismo de transmisin la va respiratoria. La mayora de ellos ocasionan patologa en el tracto
respiratorio alto, con cuadro clnico de un proceso infeccioso general; en cambio otros, durante la
evolucin de la enfermedad se expresan con exantema, enantema, conjuntivitis o adenopata.
Se revisan los Ortomixovirus (influenza o gripe), Paramixovirus (parainfluenza, sarampin,

parotiditis y respiratorio sincitial), Togavirus (rubeola), Adenovirus, Coronavirus y Rinovirus.
Ortomyxovirdae (Virus de influenza)
Son virus que tienen forma redondeada, con 80 a 120 nm de tamao, y cuyo genoma lo
constituyen ocho segmentos de ARN en un nucleocpside helicoidal. Se replican en el
ncleo de la clula diana, pero se ensamblan en el citoplasma y salen por gemacin a
travs de la membrana citoplasmtica. Estos virus tienen una tasa de mutacin muy alta
(1.5x10-5) que ocasiona cambios en los aminocidos de las protenas virales.
Poseen una envoltura lipdica que contiene dos glucoproteinas: hemaglutinina (HA) y
neuraminidasa (NA). La HA tiene como propiedades la de unirse al receptor de la clula
epitelial, estimular la formacin de anticuerpos neutralizantes y aglutinar eritrocitos. En
cambio la NA, facilita la liberacin de los virus de las clulas infectadas. La cara interna de
la envoltura es la protena de matriz (M).
Los miembros de esta familia la integran tres gneros, y se les denomina virus de la
influenza: A, B, y C; todos con capacidad de atacar a las mucoprotenas (myxo = moco). Se
diferencian entre s por la antigenicidad de la matriz y de la nucleoprotena. La
nomenglatura que designa la especie est en relacin a: tipo de virus, especie en la que se
aisl excepto los humanos-, lugar de aislamiento, desigancin de la cepa, ao de
aislamiento y subtipo. Ejemplo: A/HongKong/1/68(H3N2) o A/porcino/Iowa/15/30(H1N1)
El virus de influenza A posee 16 subtipos antignicos de Hemaglutinina diferentes y, 9
125
FAMURP
Microbiologa
Neuraminidasa distintas. Slo infectan al humano los virus con H1, H2, H3, H5, H7 y H9, y
los que contienen N1 o N2. Los virus de las aves poseen H5, pueden transmitirse al
hombre, pero no entre personas. Los otros infectan aves, caballos y cerdos.
Como consevuencia de cambios antignicos producidos por procesos de mutaciones
puntuales en HA y NA, y cambios por recombinacin con otros virus, procedentes de
animales (cerdo y aves), se presentan nuevas epidemias.
El virus de influenza B afecta slo a humanos y no sufre cambios antignicos.
2. Poder patgeno
La infeccin se adquiere por va respiratoria al toser, estornudar o hablar. El virus se
multiplica en la mucosa nasal y senos paranasales destruyendo los cilios y las clulas
mucosas. Ocasionalmente puede comprometer el pulmn y provocar descamacin del
epitelio bronquial y alveolar.
En la recuperacin paricipan macrfagos activados, clulas natural killer, y citocinas;
cuyo exceso provocan falla multiorgnica en el husped.
Los anticuerpos formados anti hemaglutinina neutralizan en impiden la adherencia del
virus; en cambio, los anti neuraminidasa reducen la liberacin viral de las clulas
infectadas y asi se controla la enfermedad.
3. Aspectos clnicos
Despus de un perodo corto de incubacin el paciente presenta malestar general,
escalofros, fiebre y dolor muscular, por un tiempo de 3 a 7 das. En influenza no hay flujo
nasal ni dolor de garganta. Generalmente la recuperacin es completa, pero pueden haber
complicaciones pulmonares por el virus o por bacterias (S. pneumoniae o H. influenzae).
En la prctica el diagnstico es clnico, las pruebas de laboratorio son confirmatorias y
necesarias para conocer el subtipo de la cepa.
El aislamiento del virus se realiza a partir de secreciones respiratorias cultivadas en
membrana corio alantoidea de embrin de pollo o en cultivos de lnea de rin (MDCK).
Tambin se puede detectar al virus por fluorescencia o inmunocromatografa, as como
con las tcnicas de reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) y la de enzima inmuno
ensayo, a partir de secreciones respiratorias.
Las muestras de suero se utilizan para determinar el incremento del ttulo de anticuerpos.
Actualmente se disponde de micromatrices de ADN para la prueba de Reaccin en cadena
de la polimerasa (PCR), y poder detectar gripe A, B, SARS y virus entricos, a la vez
La influenza o gripe ha ocasionado epidemias y pandemias producidas por nuevos
serotipos de virus: (1918 gripe espaola producida por H1N1; 1957 gripe asitica por
H2N2; 1968 gripe de Hong Kong por H3N2; 1977 y 2009 gripe porcina por la cepa
H1N1, como resultado de mutaciones o interrelacin con virus de las aves). Como los
anticuerpos protectores son especficos de subtipo, la poblacin se encuentra
desprotegida ante un nuevo brote epidmico.
126
FAMURP
Microbiologa
El control se realiza aplicando la vacuna a virus muerto con cepas del ao, cultivados en
huevos embrionados, que incluye virus influenza A y B. Tambin se distribuye la vacuna a
virus vivo atenuado, a partir de un pool de virus, que se administra va inhalacin.
Paramyxoviridae
Los seis miembros de esta familia tienen estructura similar, contienen un genoma a ARN
con nucleocpside helicoidal y envoltura de lipoprotenas. Los polipptidos de estructura
estn formados por las glucoprotenas HN y F (fusin a la membrana citoplasmtica) y la
protena M de la matriz. A diferencia de los ortomixovirus, son antignicamente estables.
2. Parainfluenza
Es el causante ms comn de infecciones respiratorias superiores en los nios (rinitis,
faringitis, bronquitis y fiebre), en cambio en adultos se presenta laringotraqueobronquitis,
bronquiolitis y neumona.
Se describen cuatro serotipos con prevalencia propia; el virus produce lesiones celulares y
estimula la formacin de inmunoglobulina A, que confiere proteccin a cada serotipo.
Sarampin
Es un virus con alta contagiosidad, que se transmite por inhalacin de gotitas de las vas
respiratorias, o llegan va mucosa conjuntival. El virus produce infeccin generalizada
(viremia) y se replica en vas respiratorias, donde provoca fusin celular y formacin de
clulas gigantes, luego alcanza ganglios linfticos y son los mononucleares quienes los
llevan a la superficie de la piel y a la conjuntiva. Dos semanas despus se presenta
exantema mculopapuloso en cara, trax y extremidades, incluso en palma de las manos y
planta de los pies, como reaccin de los linfocitos T citotxicos contra el antgeno viral
presente en las clulas cutneas (signo de respuesta inmunitaria).
El sarampin es una enfermedad febril con tos, conjuntivitis y fotofobia; que presenta al
inicio de la enfermedad unas lesiones tpicas en la mucosa oral, junto a los molares, de
color rojo con punto central blanco, deniominadas manchas de Koplic.
La clnica es tan evidente que poco se recurre a mtodos de laboratorio para el
diagnstico. Si se desea la confirmacin, se puede realizar detectando el virus en exudado
farngeo, por inmuno fluorescencia o PCR y por la deteccin de anticuerpos tipo Ig M.
El virus del sarampin posee un solo serotipo y produce inmunidad permanente. Se
dispone de una vacuna atenuada.
Parortiditis
127
FAMURP
Microbiologa
El virus constituye el nico serotipo y provoca infeccin citoltica. La infecin se adquiere

por inhalacin de aerosol, e infecta vas respiratorias superiores; luego de unos das se
produce la diseminacin generalizada (viremia), comprometiendo glndulas partidas,
tiroides, testculos, ovarios, pncreas y a veces meninges.
La enfermedad cursa con fiebre y tumefaccin de la glndula partida, epiddimo o
testculo; por lo general los sntomas desaparecen luego de una semana.
Para el diagnstico confirmatorio se emplea el ttulo de anticuerpos IgM especfico,
procesado por ELISA. Para la prevencin se dispone de vacuna a virus vivo atenuado que
ofrece proteccin hasta por veinte aos.
Respiratorio sincitial (VRS)
Este virus carece de actividad de hemaglutinina y neuraminidasa; se transmite por

secreciones respiratorias, as como a travs de fmites (ropa de cama) y afecta
primordialmente a nios menores de dos aos y ancianos.
El virus invade directamente el epitelio bronquial produciendo sincitios y necrosis epitelial
con la formacin de tapones de mucosidad, fibrina y material necrtico, que obstruyen
los bronquiolos y conducen al colapso de reas pulmonares (atelectasia). La respuesta
inflamatoria peri bronquial puede extenderse y producir neumonitis intersticial.
El virus cultiva en clulas de lnea HeLa produciendo efecto citoptico con formacin de
sincitios. Mediante la tcnica de inmunofluorescencia indirecta se puede demostrar la
presencia del antgeno viral en las secreciones, as como con tcnicas moleculares (PCR), o
el ARN viral.
El virus es muy contagioso y las reinfecciones son frecuentes. No hay vacuna.
Togaviridae (Rubeola)
El virus de la rubeola es el nico del gnero de los togavirus que no es transmitido por
artrpodos. El genoma es ARN con cpside icosadrico y envoltura rodeada por glucoproteinas.
La infeccin se adquiere por secreciones respiratorias; compromete tracto respiratorio

alto, ganglios linfticos superiores y luego se produce diseminacin sistmica (viremia), que se
expresa con exantema macular y adenopata. La enfermedad es frecuente en poblacin joven.
Cuando una gestante es infectada en el primer trimestre del embarazo, hay alto riesgo de que el
feto tenga malformaciones en corazn, ojos o cerebro, as como desarrollar alteraciones tardas
(un ao despus del nacimiento) del cristalino. La infeccin induce a la formacin de elevados
ttulos de anticuerpos IgG e IgM.
La deteccin del virus se realiza mediante tcnicas moleculares; pero para el diagnstico
habitual de infeccin se utiliza la determinacin de inmunoglobulina M especfica, la presencia de
Ig G nos indica inmunidad. En recin nacidos la presencia de Ig M (que no atraviesa la placenta) es
128
FAMURP
Microbiologa
ndice de infeccin fetal. La vacuna atenuada es muy efectiva, pero est contraindicada en mujeres
en el primer trimestre de gestacin.
Adenovirus
Son un grupo de virus que contienen ADN, con cpside en forma de icosaedro sin
envoltura. El virus se replica en el ncleo de la clula epitelial, formando una inclusin densa de
ADN viral, y se excreta por un proceso de lisis celular. Por sus diversas propiedades biolgicas se
han agrupado en 22 grupos, de los cuales siete (A G) afectan al humano; de stos se conocen 52
serotipos distintos ( que explica la prevalencia) , diferenciados por la antigenicidad de las protenas
de adherencia de las fibras (hemaglutininas). Otro grupo de ellos afecta a las aves y mamferos.
Los adenovirus son resistentes a los detergentes y a la desecacin, se transmiten por va

respiratoria, aerosol, agua de las piscinas, alimentos, manos, fmites y heces. El virus infecta
clulas epiteliales de la bucofaringe, conjuntiva, vas respiratorias y tracto intestinal. En la clula
infectada forma inclusin intranuclear densa, con infiltrado mononuclear y necrosis celular. Luego
se produce diseminacin sistmica (viremia) con invasin linftica (adenoides, amgdalas y placas
de Peyer), donde permanecen en estado de latencia, para lo cual, utiliza mecanismos que
neutralizan la accin del interfern y de las citocinas.
El grupo humano ms afectado son los nios, y los diversos sndromes producidos
dependen del serotipo de virus; se observan diversos cuadros clnicos, como: faringitis aguda,
fiebre faringo conjuntival, brotes epidmicos de infeccin en vas respiratorias altas,
gastroenteritis y cistitis hemorrgica. Los anticuerpos formados resuelven la enfermedad y dan
inmunidad para reinfecciones del mismo serotipo.
Para el aislamiento del virus a partir de exudados farngeo o conjuntival se emplean

cultivos celulares de lnea (HeLa o Hep2), tambin se utilizan tcnicas moleculares de amplificacin
de ADN y PCR y la inmunofluorescencia para detectar antgeno viral. Las pruebas serolgicas slo
tienen fines epidemiolgicos.
Coronavirus
Son virus pleomorfos, que poseen en la superficie glucoproteinas filamentosas alargadas

que le dan al virin el aspecto de tener corona. Tienen un genoma de ARN de cadena sencilla con
envoltura, que slo se replica en las clulas epiteliales de las vas respiratorias. Se conocen cuatro
cepas de coronavirus respiratorios humanos. Otros infectan a las aves y mamferos.
Los coronavirus producen infeccin de vas respiratorias altas, debido a la replicacin viral
a temperarturas entre 33C a 35C. Ocasiona cuadro clnco semejante al resfriado comn, con flujo
129
FAMURP
Microbiologa
nasal. La cepa causante del sndrome respiratorio agudo severo (SARS) proviene de un animal,
pero en el humano tiene un comportamiento de proceso infeccioso general con neumona atpica.
El diagnstico etiolgico se establece utilizando la tcnica de PCR, tambin es til la serologa
mediante ELISA para la fase de convalecencia. No hay vacuna.
Rinovirus
Son virus muy pequeos (18 a 30 nm.), descritos en 1960, con genoma ARN sin envoltura,
que conforman un gnero de la familia Picornaviridae, y lo constituyen ms de 100 serotipos.
Tienen la propiedad de multiplicarse a 33C., que explica la predileccin por la mucosa nasal.
Son los causantes del resfriado comn, que se expresa por catarro nasal. La dosis
infectante es muy pequea y la inmunidad es transitoria, detectando Inmunoglobulina A luego de
siete das de enfermedad. El virus puede cultivar en fibroblastos diploides humanos.
Para el diagnstico no es prctico el uso de pruebas serolgicas. La mejor prevencin es el

lavado de manos frecuente y el uso de pauelos faciales con cido ctrico. No hay vacuna.
130
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 25
VIRUS ENTRICOS
ROTAVIRUS. ENTEROVIRUS
VIRUS ENTRICOS
Estos virus se caracterizan por propagarse con rapidez va fecal-oral, ser resistentes en
medio cido y replicarse en el epitelio intestinal. La presentacin de brotes epidmicos est en
relacin a la mala calidad del sistema sanitario, contaminacin del agua potable y lavado
deficiente de manos. Un grupo de estos virus produce gastroenteritis: rotavirus, adenovirus y
calcivirus; en cambio, el otro grupo no provoca enfermedades entricas, pero ejerce su patologa a
distancia: sistema nervioso (polio), dermis (Coxsakie).
Rotavirus
Los Rotavirus pertenecen a la familia Reoviridae; tienen un genoma formado por once
segmentos de ARN, y un cpside icosadrico de tres capas concntricas, constituidas por proteinas
(VP) y carecen de envoltura. Por la antigenicidad de la protena externa (VP6), se les clasifica en 7
serogrupos, de los cuales, los tres primeros (A, B y C) causan infeccin en humanos. Se conocen
numerosos serotipos y genotipos basados en las protenas VP7 y VP4. Los rotavirus son estables a
temperatura ambiente y a rangos amplios de pH (3 a 9).
Los rotavirus sobreviven a la acidez gstrica, lesionan el epitelio de las vellosidades del
intestino delgado, produciendo aplanamiento, atrofia del epitelio e infiltrado mononuclear. La
proteina NSP4 viral tiene actividad de enterotoxina, con la funcin de alterar la absorcin del agua
y la produccin de disacaridasas, que se expresa clnicamente con diarrea acuosa. La presencia de
inmunoglobulinas A en la luz intestinal controlan la infeccin.
Rotavirus es el agente causal ms frecuente de diarrea en nios pequeos. Luego de un

perodo de incubacin corto, se presenta el sndrome caracterstico con vmitos, diarrea, fiebre y
deshidratacin, sin embrago hay cuadros asintomticos; y el paciente elimina numerosas
partculas virales por las heces. La recuperacin es completa, pero las reinfecciones son
frecuentes, debido a que el virus resiste la desecacin y sobrevive en objetos inanimados.
131
FAMURP
Microbiologa
El diagnstico se establece por la demostracin de los antgenos del virus en las heces, sea
con procedimientos rpidos (ltex, cromatografa), o enzima inmuno ensayo (ELISA). Se dispone de
dos tipos de vacuna, la que contiene cinco rotavirus bovinos recombinantes con PV4 o PV7 y la
que contiene rotavirus humano atenuado.
Adenovirus
Las caractersticas generales de los adenovirus se han revisado en el grupo de virus

respiratorios. Los serotipos 40, 41 y 42, (grupo F) de los adenovirus tienen selectividad por el
tracto intestinal y producen diarrea en lactantes. El diagnstico se establece por la presencia del
antgeno viral en las heces, detectado por procedimientos de inmunoprecipitacin o enzima
inmuno ensayo.
Calcivirus (norovirus)
Son virus pequeos con genoma ARN, que tienen como hospederos a diversas especies de
animales. Numerosas cepas ocasionan brotes epidmicos por la ingesta de alimentos o agua
contaminada, y toman el nombre de donde fueron identificados por primera vez (Norwalk, Hawai,
Montaas Nevadas etc.). Los norovirus quer infectan al ser humano no lo hacen a otras especies, y
se caracterizan por lesionar el cepillo intestinal. El cuadro clnico cursa con vmitos y diarrea (sin
sangre) a veces fiebre o dolor abdominal. El diagnstico se estable empleando tcnicas
moleculares como la reaccin en cadena de la polimerasa o mediante la tcnica e ELISA para
detectar antogeno viral en heces.
Enterovirus
La familia Picornaviridae est formada por virus pequeos (30 nm), con genoma ARN,
cpside iscosadrico, sin envoltura, y se incluyen a ms de 230 especies. El gnero enterovirus se
caracteriza por su estabilidad a pH 3.0, la resistencia a cambios ambientales, detergentes, alcohol
y solventes de lpidos, la forma de transmisin fecal-oral, y la actividad citoltica en la clula diana.
A pesar de tener a la va digestiva o respiratoria como va de ingreso, no producen patologa a este
nivel, sino a distancia. Pertenecen a este gnero los poliovirus, coxsackie A y B, y echovirus.
1. Poliovirus
Son virus que tienen como nico reservorio al ser humano y est integrado por tres
serotipos (1, 2 y 3). El virus ingresa por va oral o respiratoria, se replica en el tejido
linfoide de las amgdalas y placas de Peyer. Luego produce viremia y se extiende
directamente, o va axones, al sistema nervioso central (SNC).
El 90% de casos son asintomticos, los sntomas son leves, tipo gripal con dolor de
garganta y transtorno gastro intestinal. Slo el 1% a 2 % presenta meningitis, y en uno de
cada mil casos se comprometen las clulas de las astas anteriores de la mdula espinal,
donde produce destruccin ltica de las clulas motoras, que ocasiona parlisis flccida de
las extremidades (poliomielitis); puede comprometer bulbo y encfalo. Las personas
infectadas eliminarn virus por las heces hasta por dos meses.
132
FAMURP
Microbiologa
La infeccin induce la formacin de anticuerpos especficos, que neutralizan la actividad

del serotipo de virus actuante.
El aislamiento del virus se realiza a partir de exudado farngeo o heces, cultivados en
clulas Hep2. Luego de unos das se observar efecto citoptico; el cual debe ser inhibido
con el antisuero especfico de una de las tres cepas. Al virus aislado se le debe estudiar la
secuencia genmica para determinar si es virus vacuna o salvaje.
Los anticuerpos en sangre se determinan por la capacidad de neutralizar el efecto
citoptico de los poliovirus en cultivos celulares.
Hay dos vacunas para los poliovirus: La inactivada (Salk) elaborada en clulas renales de
mono o Vero y sometida a la accin del formol, la que se administra por va parenteral y
estimula la formacin de anticuerpos sanguneos. La otra vacuna es a virus atenuado
(Sabin), obtenida por pases sucesivos, se administra por va oral, y estimula la formacin
de anticuerpos G, M y A. La eliminacin por las heces del virus vacunal, facilita la
vacunacin a personas de su entorno, en zonas de riesgo, y evita las reinfecciones.
2. Coxsackie
Son virus de distribucin mundial que se transmiten va oral, respiratoria, o fmites. Se
describen dos grupos: el grupo A, con 23 serotipos, que ocasionan lesiones vesiculares en
la mucosa oral (herpangina), en el pi, la mano y la boca a la vez, conjuntivitis hemorrgica
y meningitis. En cambio en el grupo B, tienen 6 serotipos y son causa de meningitis
asptica, miocarditis y pleurodinia (dolor pleural). El diagnstico se establece empleando
tcnicas moleculares como el PCR. No hay vacuna.
3. Echo
Los virus de este grupo son estrictamente entricos y lo conforman 32 serotipos. El cuadro
clnico se caracteriza por diarrea, exantema y meningitis asptica (sin respuesta
inflamatoria). No hay vacuna.
4. Enterovirus tipos del 69 al 71
Son causantes de neumona, conjuntivitis hemorrgica y meningoencefalitis.
5. Enterovirus 72
Ocasiona sndrome de Hepatitis tipo A.
133
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 26
HERPESVIRUS
_______________________________________________________________________________
HERPESVIRUS (HV)
Con este nombre se integra a un grupo de virus que se caracterizan por provocar
infecciones con evolucin clnica diversa, debido al comportamiento distinto frente a la clula
husped: infeccin aguda, persistente, latente o recurrente; incluso algunos de ellos estn
asociadas con cncer. Tienen un genoma de ADN de doble cadena lineal, recubierto de un cpside
icosadrico con 162 capsmeros y rodeados con envoltura de glucolpidos. Los virus codifican ADN
polimerasa que estimula la replicacin del virus en el ncleo y forma cuerpo de inclusin. Los
herpesvirus son sensibles a los cidos, los detergentes y a la desecacin.
La mayora de las especies slo infectan al ser humano, y se clasifican, de acuerdo con las
caractersticas estructurales y biolgicas, en tres subfamilias:
1. Herpes virus alfa: HV simple tipo 1, HV simple tipo 2, Varicela zster (VVZ)
2. Herpes virus beta: Citomegalovirus CMV (5), HV humano 6, HV humano 7
3. Herpes virus gamma: virus Ebstein Barr (4), HV del sarcoma de Kaposi (8)
I. HERPESVIRUS ALFA
Virus herpes simple (VHS)
Es un virus grande que codifica numerosas protenas, tiles para su replicacin e
interaccin con las clulas anfitrionas; as mismo codifica diez glucoproteinas, necesarias
para los procesos de adhesin y evasin del sistema complemento y anticuerpos; de
manera que camufla al virus y a la clula infectada de la respuesta humoral. Comprende
dos tipos de virus, el 1 que afecta sobre todo la parte superior del cuerpo y el 2, que
generalmente afecta los genitales.
2. Poder patgeno
Estos virus tienen como reservorio el hombre, el individuo infectado es fuente de contagio
durante toda su vida. El virus afecta las clulas de las mucosas y del epitelio, donde se
multiplican, forma cuerpos de inclusin intra nucleares, luego causan lisis celular y
formacin de vesculas. Despus de la replicacin local los virus se diseminan a los ganglios
regionales, luego por viremia o por va nervios sensitivos, migran a los ganglios de las races
134
FAMURP
Microbiologa
dorsales de los nervios trigmino y lumbosacro. En estos ganglios nerviosos los virus entran
en estado de latencia, el ADN viral se integra a la clula de las neuronas y bloquea la accin
del interfern gamma sobre la sntesis de protenas virales y evita el reconocimiento de las
clulas infectadas por los linfocitos T CD8. Esta localizacin ser el punto de partida de las
recurrencias.
Hay respuesta de anticuerpos IgG, IgM e IgA a la infeccin por VHS. Los anticuerpos IgG
persisten por muchos aos y no previenen reactivaciones. Los anticuerpos contra el VHS-1
no confieren inmunidad contra el VHS-2.
3. Aspectos clnicos
El VHS-1 suele contagiarse por contacto bucal u objetos contaminados con saliva; se
adquieren en la niez manifestndose por la presencia de vesculas en la mucosa oral
(labios y encas), que constituyen la infeccin primaria; tiempo despus hay recurrencia en
el borde labial, que se vuelven costrosas y sanan; posteriormente en el curso de los aos se
presentan recurrencias. Pueden presentarse infecciones iniciales en los dedos (panadizo
herptico), oftlmicas (querato conjuntivitis herptica) y complicaciones como encefalitis.
En cambio, el VHS-2 generalmente se transmite por contacto sexual o de madre a hijo al
momento del nacimiento; es ms frecuente en adultos y se presentan vesculas en el
glande, vulva, vagina y cuello uterino.
Microscopa: en el frotis tomado de la base de las vesculas se observan clulas
multinucleadas con inclusiones intranucleares. Con el uso de anticuerpos monoclonales
marcados con fluorescena, se aprecian los viriones como puntos fluorescentes y permite
diferenciar los dos tipos de VHS. El uso de sondas de ADN o PCR es muy til para
diferenciar el tipo de virus, asi como para diagnosticar encefalitis herptica.
Cultivo: los virus pueden ser cultivados en clulas diploides humanas, donde se observan
los cambios producidos por el efecto citoptico.
La serologa es til slo para el diagnstico de la infeccin primaria.
No han vacuna para el VHS recomendada por la OMS, aunque hay varias en fase
experimental. En gestantes con diagnstico de infeccin por VHS activa debe evitarse el
parto vaginal. El frmaco aciclovir inhibe la polimerasa del ADN vral, lo que acorta la
evolucin de la enfermedad, pero no elimina la infeccin latente. El VHS es frgil a los
detergentes, jabones y alcohol 70% para la desinfeccin de manos.
Virus varicela zster (VVZ)
El VVZ comparte muchas caractersticas biolgicas con los virus herpes simple, la
diferencia fundamental es que se disemina por va respiratoria, provoca la varicela, y
cuando recurre la enfermedad se presenta el herpes zoster.
2. Poder patgeno
135
FAMURP
Microbiologa
La infeccin primaria se produce por lo general en la infancia, por inhalacin; el virus

infecta las clulas de la mucosa respiratoria, luego se disemina por va sangunea y linftica
hacia el sistema retculo endotelial. Das despus se produce una segunda viremia y se
disemina en todos los tejidos; en la piel se expresa con lesiones tipo exantema vesculo
papulosas, que se distribuyen con ms intensidad en la cara y el tronco, constituyendo la
enfermedad varicela.
Luego de la infeccin primaria, el virus entra en un estado de latencia en los ganglios de la
raz dorsal de los nervios: trigmino, torcicos, cervicales o lumbosacros. Despus de un
tiempo el virus puede reactivarse, replicarse y diseminarse a lo largo de los nervios,
presentando vesculas en el trayecto del nervio, conocido como herpes zster.
Durante la fase aguda de ambas presentaciones de la enfermedad hay respuesta humoral
con anticuerpos IgM, que controlan la diseminacin del virus. La respuesta celular con
linfocitos T tiene un papel importante en la recuperacin del paciente.
3. Aspectos clnicos
La varicela es una de las enfermedades habituales en la infancia, caracterizada por fiebre y
presentacin de vesculas sobre una base eritematosa, que da el aspecto de gota de
roco, distribuidas de preferencia en tronco y cara. En adultos puede presentarse
neumona intersticial.
El herpes zster es una recurrencia de la infeccin anterior, las lesiones son similares, pero
distribuidas en el trayecto de los nervios costales, y precedido de dolor intenso en la
regin.
Al examen microscpico de los frotices de las vesculas, se aprecian las alteraciones
producidas por el efecto citoptico, que son similares a las lesiones del VHS; el diagnstico
se puede mejorar con el uso de anticuerpos fluorescente.
El aislamiento del virus es lento, por lo que se prefiere el uso de tcnicas moleculares,
como el PCR.
La presencia de anticuerpos contra VVZ se determina con el procedimiento de enzima
inmuno ensayo; o por inmuno fluorescencia, utilizando cultivos previamente infectados.
Existe una vacuna atenuada de VVZ, de uso electivo para nios, y otra ms potente para
adultos mayores de 60 aos, para limitar la aparicin del zster. La inmunidad pasiva con
inmunoglobulinas humana es til en los primeros das de la enfermedad.
No hay tratamiento satisfactorio. El uso de lociones para aliviar el dolor o prurito est
recomendado. El aciclovir tiene menos efecto que con el VHS.
II. HERPESVIRUS BETA
Citomergalovirus (CMV)
136
FAMURP
Microbiologa
El CMV tiene un genoma grande, que slo se replica en el ncleo de clulas humanas,
formando un cuerpo de inclusin caracterstico en ojo de bho. El virus se replica en
fibroblastos, clulas epiteliales, macrfagos y se mantiene en forma latente en linfocitos,
mononucleares y en el estroma de la mdula sea.
2. Poder patgeno
El virus se transmite por diversas vas: oral (saliva y besos), sexual, placentaria, leche
materna, transfusiones sanguneas y receptores de transplantes. El virus se disemina sin
ocasionar sintomatologa alguna, pero se replica constantemente en clulas secretoras y
renales, permaneciendo de por vida, encontrndosele en orina y secreciones corporales.
La infeccin altera la funcin de los linfocitos; as el virus impide la presentacin de
antgeno a los linfocitos CD8 como a los CD4 y genera una protena que impide la actividad
de los linfocitos T citotxicos naturales, lo que conlleva a una infeccin crnica.
Slo la infeccin primaria induce anticuerpos Ig M, pero no las reactivaciones. Los
anticuerpos Ig G perduran toda la vida.
3. Aspectos clnicos
Es un patgeno oportunista, se considera la causa ms frecuente de anomalas congnitas
(microcefalia, calcificacin intracerebral, prdida auditiva, retraso mental, etc.). Los recin
nacidos pueden adquirir la enfermedad por la lactancia, o transfusiones. La mayora
adquieren la enfermedad de adultos jvenes, transmitida por besos y relaciones sexuales.
El cuadro clnico corresponde a un sndrome similar al de la mononucleosis infecciosa
(fiebre, adenopata, visceromegalia y alteracin de la funcin heptica).
En muestras de orina y saliva se pueden observar clulas que contienen en el ncleo una
inclusin basfila, densa, en forma de ojo de bho, estructura que se aprecia con las
coloraciones histolgicas. Se pueden utilizar tcnicas de inmuno fluorescencia con
anticuerpos monoclonales y mtodos moleculares como el PCR.
La determinacin de los anticuerpos Ig M, por ELISA, es til sobre todo en recin nacidos,
para diagnosticar infeccin reciente.
No hay vacuna. Realizar control serolgico en donantes de sangre.
Los antivirales tienen poca accin contra el CMV.
Virus herpes humano tipo 6 (VHH-6)
Es un virus ampliamente distribuido en el ser humano, causante de la enfermedad

eruptiva denominada exantema sbito, enfermedad febril que se presenta en la niez, sin
complicaciones. El virus produce efecto citoptico en los linfocitos B y el diagnstico slo amerita
para descartarlo de otras causas de fiebre.
Virus herpes humano tipo 7 (VHH-7)
137
FAMURP
Microbiologa
La mayora de personas poseen anticuerpos contra el VHH-7, el cuadro clnico es similar al

sndrome de la mononucleosis.
III. HERPESVIRUS GAMMA
Virus de Epstein-Barr (VEB)
Este virus, a diferencia de otros herpes virus, tiene un espectro celular restringido a los
linfocitos B, y est relacionado con enfermedad maligna.
Durante la infeccin productiva, el VEB genera numerosas protenas que se agrupan
inmunolgicamente en tres categoras: a) antgeno precoz, que facilita la replicacin, b)
antgeno del cpside y c) antgeno de membrana, blanco de los linfocitos T citotxicos. En
cambio durante la infeccin latente, se forman antgenos nucleares del virus y protenas
latentes de membrana, con la funcin de mantener la infeccin y la inmortalizar a los
linfocitos B (multiplicacin indefinida), proceso que tiene importancia en el potencial
oncognico del virus.
2. Poder patgeno
El VEB se transmite por la saliva, por lo que se le denomina enfermedad del beso; infecta
clulas epiteliales de la bucofaringe, luego se produce viremia y se ubica en los linfocitos
B, produciendo infeccin durante toda la vida, sin producir efecto citoptico.
En la fase aguda de la infeccin el virus activa la proliferacin de los linfocitos B; pero son
los linfocitos T protectores los encargados de limitar sta proliferacin, para lo cual se
activan y ocasionan linfocitosis perifrica (linfocitos atpicos) e hipertrofia de rganos
linfoides. Durante ste perodo se forman anticuerpos contra el cpside y la membrana;
en cambio cuando se resuelve el cuadro agudo de la infeccin se encuentran anticuerpos
contra los antgenos nucleares.
En ausencia de respuesta inmunitaria de linfocitos T, se presentan las enfermedades
linfoproliferativas.
3. Aspectos clnicos
a) Mononucleosis infecciosa: sndrome caracterizado por fiebre, faringitis, adenopata y
disfuncin heptica, que se presenta generalmente a edad temprana. El estudio
hematolgico revela leucocitosis con linfocitosis, de los cuales la mayora de linfocitos
son atpicos (citoplasma azulado y ncleo irregular) correspondientes a linfocitos T.
b) Linfoma de Burkitt: es una neoplasia que afecta la cara y es endmico en nios de
regiones del Africa con malaria.
c) Carcinoma nasofarngeo: cncer endmico en el sur de China, que afecta las clulas
epiteliales, con metstasis a los ganglios cervicales.
d) Leucoplasia vellosa oral: enfermedad que se manifiesta en pacientes con sida, con
placas blanquecinas en la lengua y boca.
138
FAMURP
Microbiologa
Los hallazgos clnicos y la presencia de linfocitosis a clulas atpicas en sangre perifrica,
son muy orientadores del diagnstico. La presencia de anticuerpos IgM, heterfilos, que
reaccionan con eritrocitos de oveja, caballo o vaca (Paul Bunnell) es confirmatoria. La
confirmacin ms precisa se realiza por la presencia de anticuerpos especficos contra los
antgenos del cpside del virus de Epstein Barr, detectable por enzima inmuno ensayo.
No hay vacuna para el VEB. Como no codifica ADN polimerasa, los antivirales son poco
tiles.
Herpes virus asociado con sarcoma de Kaposi
Tambin denominado Virus del herpes humano 8, afecta la dermis a partir de las clulas
endoteliales.
139
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 27
VIRUS TRANSMITIDOS POR ARTRPODOS Y ROEDORES
FIEBRE AMARILLA, DENGUE
FILOVIRUS, ARENAVIRUS, BUNYAVIRUS
________________________________________________________________________________
En este captulo se agrupan a virus que corresponden a diversas familias, pero tienen en
comn, que durante el ciclo de transmisin participa un artrpodo o un roedor. A los virus que
utilizan un artrpodo se les denomina arbovirus, en ellos el vector adquiere la infeccin al ingerir
sangre de un vertebrado con viremia. En cambio, en el caso de los virus que son transmitidos por
roedores, la infeccin se mantiene por transmisin directa de roedor a roedor o por va
transovrica, y el ser humano adquiere la infeccin por contacto directo con lquidos orgnicos o
excretas de los roedores.
Las principales infecciones en el hombre por arbovirus son: Fiebre amarilla, Dengue,
Chikungunya, Fiebre del Nilo Occidental, Fiebre de San Luis y Fiebre Japonesa. Desde el punto de
vista clnico se les puede clasificar en: 1. Fiebre con o sin erupcin, 2. Encefalitis, y 3) Fiebre
hemorrgica, sta ltima se presentan en pases tropicales, y los agentes etiolgicos estn
vinculados con un reservorio animal. A los virus causantes de estas enfermedades tambin se les
denomina virus exticos, y pertenecen a los gneros: Filovirus, Arenavirus y Bunyavirus.
Fiebre amarilla
Corresponde a la familia Flaviviridae, que son virus ARN, con cpside icosadrico y
envoltura de glucoprotenas. La liberacin viral de la clula husped pude realizarse por
exocitosis o luego de la lisis celular.
2. Poder patgeno
El vector es el mosquito Aedes aegypti, que habita en zonas clidas con agua acumulada y
charcos, donde mantiene el ciclo selvtico con el mono como hospedero natural; en el
ciclo urbano el hombre el hospedero. El mosquito se infecta al ingerir sangre de un
vertebrado con viremia; el virus infecta las clulas epiteliales del intestino del vector, luego
atraviesa la lmina basal e infecta las glndulas salivales, donde se establece una infeccin
persistente.
140
FAMURP
Microbiologa
Cuando el ser humano es picado por un mosquito hembra infectado, los virus ingresan a la
sangre y se ubican en las clulas diana (endotelio de los capilares, monocitos y
macrfagos). La primera viremia ocasiona sntomas de un proceso infeccioso general. La
respuesta del husped es con formacin de inmunoglobulinas M y G, las que bloquean la
diseminacin viral, dando proteccin, inclusive, frente a otros virus de la misma familia.
Tambin se forman anticuerpos sin capacidad neutralizante, los que favorecen el ingreso
de los virus a otras clulas que expresen receptores Fc (macrfagos), lo que contribuye a la
presentacin de patologas como encefalitis o hemorragia.
3. Aspectos clnicos
El paciente presenta sintomatologa correspondiente a una enfermedad sistmica grave, la
que cursa con ictericia por degeneracin del hgado, y hemorragia digestiva (vmito negro),
como expresin del compromiso del endotelio vascular.
Se debe determinar la presencia de anticuerpos IgM especfico contra el virus en poblacin
autctona, o el incremento del ttulo en muestras pareadas. Para ello se emplean diversos
mtodos serolgicos (inhibicin de hemaglutinacin, ELISA, aglutinacin con ltex, etc.)
Hay vacuna a virus vivo atenuado a partir de la cepa 17D, til en poblaciones de riesgo, la
que genera proteccin por largos perodos de tiempo.
Dengue
El virus corresponde a un flavivirus y tiene las caractersticas morfolgicas similares a las

de la Fiebre amarilla. Se describen cuatro serotipos que son transmitidos por el mismo mosquito
Aedes.
El sndrome clnico clsico se caracteriza por fiebre y exantema con dolores articulares y
musculares, que duran 5 a 8 das (fiebre quiebra huesos). La convalecencia puede tardar varias
semanas. El sndrome de shock o el hemorrgico se presenta cuando el paciente es reinfectado
por un serotipo diferente, y la linfocitos T memoria secretan citocinas que provocan lisis del
endotelio vascular.
En la fase aguda de la enfermedad, el diagnstico se establece mediante la reaccin en

cadena de la polimerasa (PCR). Los estudios serolgicos son complicados porque se presentan
reacciones cruzadas con otros flavivirus; por lo que deben realizarse anlisis comparativos de la
fase aguda y convalecensia. La metodologa puede ser: ELISA o Inhibicin de la hemaglutinacin.
No hay vacuna. Las medidas de control son orientadas contra el mosquito. El sndrome
hemorrgico se trata con reemplazo hdrico y sanguneo.
141
FAMURP
Microbiologa
FILOVIRUS
Son virus en forma de filamento, que pueden medir hasta 1400 nm, pleomorfos, contienen
ARN y estn rodeados de nucleocpisde helicoidal. El virus infecta fundamentalmente macrfagos
y monocitos, los que generan gran cantidad de citocinas, que son las causantes de la destruccin
del endotelio vascular.
La enfermedad se presenta en brotes epidmicos en el frica. Los probables reservorios

son los murcilagos y los chimpacs, que se transmite al hombre por contacto directo con sangre
o secreciones. Los cuadros clnicos producidos por los virus Marburgo y bola, son muy similares;
caracterizadas por fiebre, dolores de espalda, diarrea y vmitos; luego se presenta exantema
maculopapular y hemorragia nasal, gingival, pulmonar y gastrointestinal; acompaada de
trombocitopenia. La mortalidad es muy elevada.
Pocos laboratorios en el mundo est capacitados para cultivar el virus e identificarlo por
microscopia electrnica o inmunofluorescencia y ELISA.
No se dispone de vacuna. El personal de cuidados de la salud son los de mayor riesgo.
ARENAVIRUS
Son virus que tienen el aspecto de arena dentro de las clulas, al ser observados al
microscopio electrnico. El genoma es ARN.
Se sealan cuatro infecciones humanas: 1) el virus de Junn, que causa de la fiebre

hemorrgica argentina, 2) el virus Machupo, que produce la fiebre hemorrgica boliviana, 3) el
virus Lassa y 4) el virus de la coriomeningitis linfocitaria.
La enfermedad se presenta en Africa y Sudamrica, y depende del roedor hospedero

correspondiente. El ser humano adquiere la enfermedad por contacto con excretas de roedores.
Los virus se diseminan ampliamente en diversos rganos; la infeccin de los macrfagos libera
factor de necrosis tumoral y citocinas, que son la causa del dao vascular. El paciente presenta
fiebre, cefalea, exantema en el cuello; luego puede presentar hemorragia gastrointestinal y
urogenital. La infeccin suele ser persistente y la convalecencia prolongada. Slo la infeccin por
Coriomeningitis linfocitaria se relaciona con hamster y ratones domsticos; y la enfermedad no
produce hemorragia.
142
FAMURP
Microbiologa
El diagnstico se puede establecer por la presencia de anticuerpos IgM e IgG, utilizando el

procedimiento ELISA, y procedimientos genmicos como la reaccin en cadena de la polimerasa.
En todos los casos el manejo clnico de sostn es fundamental. El control de los roedores
puede limitar las infecciones por arenavirus.
BUNYAVIRUS
En este grupo se incluyen numerosos virus que son transmitidos por artrpodos, la
excepcin es el Hantavirus, que se transmite a travs de un roedor y representa para el hombre
una zoonosis. Son virus redondos con ARN segmentado.
La prevalencia del roedor hospedero del hantavirus se ubica en Asia y pases escandinavos,
es transmitido al humano por contacto con las excretas de los roedores. Ocasiona dos
enfermedades en humanos: 1) Fiebre hemorrgica con sndrome renal, caracterizado por fiebre,
dolor abdominal, hipotensin, trombocitopenia y hemorragia; das posteriores se presenta
insuficiencia renal; este proceso clnico tiene una elevada mortalidad. 2) Sndrome pulmonar, que
evoluciona con neumona intersticial, hipotensin y edema pulmonar, aunque sin hemorragia; y
tambin con elevada mortalidad.
La determinacin de anticuerpos IgM, determinados po inmunoensayo, as como la

reaccin en cadena de la polimerasa, son diagnsticos. El tratamiento se limita a la terapia de
sostn en el equilibrio hidroelectroltico.
143
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 28
VIRUS DE LA RABIA
_______________________________________________________________________________
La enfermedad de la rabia (rabere = enloquecer), o tambin llamada hidrofobia, es

conocida desde la era anterior a Cristo, y tiene una relevante importancia por su tnica evolucin
clnica, as como por el xito en el desarrollo de la vacuna por Luis Pasateur en 1884. Este virus
pertenece a la familia Rhabdoviridae, que incluye a virus que parasitan diversos animales (incluso
peces e insectos) y vegetales; pero el de la rabia est incluido en el gnero Lyssavirus, que infectan
slo a vertebrados.
El virus de la rabia tiene un nucleocpside helicoidal, dentro del cual se encuentra el ARN
viral moncatenario; rodea al virion una envoltura lipoproteica gruesa que le da forma de
bala y adquiere un tamao de 130 a 360 nm. Est rodeado por numerosos filamentos de
glucoproteina (G), que le sirve para adherirse a las clulas receptoras, e inducen la
formacin de anticuerpos neutralizantes. Protegiendo al cido nucleico se encuentran las
proterinas matriz (M) y nucleoproteina (N). Las replicacin del genoma se realiza en el
ncleo, pero el ensamblaje en el citoplasma, donde se expresa con la formacin del
cuerpo de inclusin. La clula infectada no muere, sino que contina como fuente de
gemacin de virus. El virus es muy frgil a la luz, calor y desecacin.
2. Poder patgeno
Los animales de sangre caliente (zorro, lobo, perro, gato, murcilago) son susceptibles al
virus de la rabia, son los que mantienen el virus en la naturaleza y los verdaderos vectores.
Generalemente el virus ingresa al humano como consecuencia de la morderura o
lamedura de un animal en estado rabioso; pero puede ingresar por inhalacin o contacto
de la conjuntiva con aerosoles, en la cueva de los vampiros.
El virus se replica en la zona de ingreso y luego progresa, va neuronal, hacia los ganglios
dorsales, mdula espinal y cerebro (hipocampo, tronco enceflico, clulas de Purkinje del
cerebelo). Posteriomente el virus realiza diseminacin centrfuga, va nervios perfricos,
hacia las glndulas salivales, crnea, tejido recubierto de pelo (cuello), mucosa nasal, etc.
A pesar de la gran diseminacin viral en el tejido nervioso, no se observan cambios
histolgicos remarcables, con excepcin de la presencia del inclusin acidfila
intracitoplasmtica (corpsculo de Negri).
3. Aspectos clnicos
144
FAMURP
Microbiologa
El perodo de incubacibn de la enfermedad est en relacin a la distancia de la

mordedura (sitio de ingreso) al cerebro, pudiendo ser desde 10 das a un ao o ms.
El perodo prodrmico se carateriza por sntomas generales como fiebre, cefalea,
salivacin y parestesia (hormigueo) en la zona de la mordedura.
Forma furiosa o hidrofoba: es un estado de excitacin con hiperpirexia, ansiedad y deseo
de beber agua, lo que le ocasiona fuerte dolor larngeo slo al ver el lqudo (hidrofobia),
luego ingrea a la fase de parlisis generalizada.
Forma paraltica: el paciente presenta parlisis ascendente progresiva hasta la muerte.
a) Deteccin del antgeno viral: A partir de muestras de tejidos (piel con pelo nuca-,
crnea, tejido nervioso), se busca la presencia de los corpsculos intracitoplasmticos de
Negri, utilizando la tcnica de inmunofluorescencia.
b) Deteccin del genoma viral: en muestras de lquido cefaloraqudeo, saliva o lgrimas, se
busca el ARN viral, empleando la tcnica de reaccin en cadena de la polimerasa.
c) Ttulo de anticuerpos en sangre o lquido cefalorraqudeo, aunque son de presentacin
tarda.
La prevencin de la rabia depende del control de la rabia en animales domsticos (perros y
gatos), utilizando vacunas atenuadas, sean inyectables u orales.
La vacuna para el virus de la rabia ha sufrido cambios en beneficios de la poblacin:
A) La primera vacuna fue elaborada por Luis Pasteur a partir de una cepa salvaje, la que
se obtuvo luego de varios pases sucesivos en cerebro de conejo, y el tiempo de
incubacin se hizo estable en una semana (cepa fija). La dismunicin de la virulencia
del virus se obtuvo desecando la mdula espinal del conejo infectado a medio
ambiente. Esta vacuna fue muy utilizada por el autor, pero tiene el riesgo de producir
reacciones adversas como encefalitis con desmielinizacin, con una frecuencia de
1/200
B) Vacuna elaborada en embrin de pato, luego inactivada qumicamente y requera 21
aplicaciones.
C) Vacuna elaborada en cultivo de clulas diploides humanas, inactivada con agentes
qumicos, por lo que las reacciones adversas son mnimas, de uso actual, como
profilctico y teraputico.
Ante un evento de mordedura por un animal sospechoso de rabia, se debe realizar:
limpieza de la herida con agua y jabn (amonio cuaternario), alcohol o yodo; Instilacin de
de suero antirbico alrededor de la herida; y administracin de la vacuna asociada con una
dosis de inmunoglobulina antirrbica. La vacuna actual se administra en cinco dosis.
A las personas de riesgo de contraer la rabia, deben recibir la vacuna preexposicin en tres
dosis.
No hay tratamiento satisfactorio para la rabia.
145
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 29
RETROVIRUS
________________________________________________________________________________
Con esta denominacin se agrupa a virus ARN con envoltura, cuya forma de replicacin es
propia, que contradice el dogma de la biologa molecular, que dice: la informacin gentica sigue
el sentido del ADN al ARN y luego a las protenas. Los retrovirus codifican una polimerasa de ADN
dependiente del ARN, denominada retrotranscriptasa inversa, luego, la copia del genoma del
virus se integra al cromosoma de la clula husped para quedarse como un gen celular.
Los retrovirus se clasifican en tres subfamilias: a) Lentivirinae, asociados a enfermedades

neurolgicas e inmunodepresoras (virus de inmunodeficiencia humana: VIH-1, VIH-2, virus de
leucosis bovina, virus de la inmunodeficiencia felina, etc.); b) Oncovirinae, virus que inmortalizan
o transforman las clulas diana (virus linfotrpico T humano: VLTH-1, VLTH-2, VLTH-5); y c)
Spumavirinae, virus que provocan un efecto citoptico que da aspecto espumoso a la clula, y no
se relacionan con enfermedades en el ser humano.
Virus de inmunodeficiencia humana (VIH)
En la dcada de los 80, mdicos de los Estados Unidos reportaron una nueva enfermedad
viral, con las siguientes caractersticas: a) de mayor incidencia en hombres homosexuales jvenes,
b) presentacin sbita de un cncer en la piel, hasta la fecha muy raro, llamado sarcoma de kaposi,
c) neumona atpica causada por Pneumocistis carini, d) Incremento de infecciones por
Citomegalovirus, y e) candidiasis de la mucosa bucal. Todo ello hizo pensar que el paciente sufra
de deficiencia de la inmunidad celular.
En el ao 1982, el Centro para el Control de enfermedades (CDC) de los Estados Unidos le

denomina sndrome de inmunodeficiencia adquirida o sida. Luc Montagnier, del Instituto
Pasteur de Francia, y Robert Gallo, del National Institute of Health de USA, publicaron, en forma
casi simultnea, el aislamiento de un retrovirus en un cultivo de linfocitos T; ms tarde se confirm
que se trataba del virus de la inmunodeficiencia humana.
1. Estructura
La partcula viral es icosadrica, de 100 a 120 nm, rodeada de una membrana compuesta
por glucoprotenas. El genoma lo constituyen dos copias de ARN monocatenario, rodeadas
de la protena del cpside, la p24. Las protenas transcriptasa inversa (p64) y la integrasa
146
FAMURP
Microbiologa
(p32) estn unidas al genoma viral. Las glucoprotenas que rodean al virin son la gp120
(cabeza) y la gp41 (espiga).
2. Propiedades
El VIH infecta a los linfocitos T CD4 y los lisa. Puede ubicarse en otras clulas, como
macrfagos, linfocitos T CD8, natural Killer, clulas dendrticas y clulas del sistema
nervioso, pero no les produce lisis. Cuando el VIH se adhiere a una clula, la gp120
interacta con el receptor CD4 y se fusionan, permitiendo el ingreso del virus. En el
citoplasma el ARN viral, con la participacin de la transcriptasa inversa, se convierte en
ADN. El ADN viral y es transportado al ncleo de la clula, donde se integra al cromosoma
de la clula.
El genoma del VIH contiene genes estructurales: gag (p17, protenas de la matriz, p24,
protenas del cpside); pol (p15, p51, transcriptasa inversa, p32, integrasa); env (gp120,
glucoprotena de envoltura externa y gp41, glucoproteina de envoltura de unin). Los
componentes del virin (ARN, protenas y glucoprpotenas) se ensamblan y liberan en los
sitios de brotacin de la membrana citoplasmtica.
El VIH-1 puede infectar de manera ltica y latente; se replica rpidamente y tiene una tasa
de mutacin elevada, se estima que un paciente alberga 100 millones de variantes
antignicas.
3. Poder patgeno
El VIH causa el sida por la destruccin de los linfocitos T CD4; sin estas clulas no hay
respuesta inmune, luego el organismo es incapaz de detener las infecciones o eliminar
clulas cancerosas.
El VIH forma sincitios a clulas gigantes, por fusin de clulas del husped, las que mueren
prematuramente. Se forman anticuerpos neutralizantes contra la gp120, sin embargo, el
virus recubierto de anticuerpos sigue siendo infeccioso.
En el sida hay compromiso de las clulas de la microglia y macrfagos del cerebro, con
complicaciones neurolgicas inflamatorias que afectan el razonamiento cognitivo
(memoria alterada), el funcionamiento motor (temblores, debilidad de las piernas), y el
comportamiento (apata, irritacin o depresin).
Los linfocitos T CD8, por su accin citotxica directa, pueden destruir las clulas infectadas
e inhibir la unin del virus a su correceptor, pero, stos linfocitos deben ser activados por
los linfocitos T CD4, que estn siendo destruidos.
4. Aspectos clnicos
El VIH est presente en la sangre, semen, secreciones vaginales y leche materna. Las vas
ms comunes de transmisin son: relaciones sexuales, compartir agujas contaminadas,
transfusin sangunea o derivados, punciones accidentales en trabajadores de la salud y el
sida congnito.
La infeccin por VIH se puede dividir en tres fases:
a) Infeccin primaria: Se refiere a la etapa desde la infeccin hasta antes que puedan
detectarse los anticuerpos (perodo de ventana). La mayora no experimenta sntomas,
147
FAMURP
Microbiologa
aunque el virus se encuentra en gran cantidad en la sangre. Suele durar pocas semanas o
meses.
b) Fase crnica asintomtica: En esta fase el paciente no presenta signos ni sntomas de
enfermedad. El virus sigue replicndose en el organismo y es detectable la respuesta
inmune. El recuento de linfocitos T CD4 declina hasta cifras no menores de 200 clulas /L.
Este perodo tiene un tiempo de duracin promedio de diez aos.
c) Sida: Fase en la que el paciente presenta sintomatologa diversa, como consecuencia de
infecciones producidas por microorganismos oportunistas (Citomegalovirus, Candida
albicans, Pneumocystis carini, Toxoplasma gondii, Mycobacterium tuberculosis,
Mycobacterium avium, etc.), y los recuentos de linfocitos T CD4 son inferiores a 200
clulas /L. Los sntomas ms comunes son la diarrea por perodos superiores a 30 das y
la prdida de peso. Algunos padecen de neoplasias malignas. Sin terapia antirretroviral los
pacientes fallecen en promedio de dos aos.
A) Las pruebas de despistaje se basan en la deteccin de anticuerpos contra el virus, a
partir de muestras de sangre, orina, o saliva. El mtodo utilizado es el de enzima
inmunoensayo (ELISA), aunque existen pruebas rpidas de inmunoprecipitacin.
B) Cuando las pruebas de despistaje son positivas, se debe realizar la prueba
confirmatoria de Western blot, que consiste en poner el suero del paciente frente a
las protenas fraccionadas del virus. Para ello, previamente se han fraccionado las
protenas del virus, mediante la tcnica de electroforesis, usando como soporte el gel
de poliacrilamida (ste reactivo se expende en tiras en el comercio). La reaccin de las
protenas virales con el suero del paciente se observar por la presencia de bandas
coloreadas, y se debe comparar las bandas con el patrn que permite identificarlas.
Para considerar un caso como positivo debe presentar como mnimo las bandas contra
p24 (cpside), p31 (endonucleasa), gp41 (transmembrana) y gp120 (envoltura).
C) El conteo total de linfocitos T CD4, y la relacin entre CD4 y CD8, nos permite evaluar
el estado de la infeccin por VIH.
D) Para conocer la eficacia del tratamiento de un paciente con VIH se est utilizando la
determinacin de la carga viral, mediante la tcnica de la reaccin en cadena de la
polimerasa (PCR).
El control de la infeccin por VIH, es la educacin en la prctica del sexo seguro, la de no
compartir material inyectable y utilizar las barreras que impidan el contacto con
hemoderivados.
Existen muchos esfuerzos para obtener una vacuna eficaz, pero aun no se ha conseguido.
El tratamiento actual del sida es la administracin combinada de varios antivirales, con
distintos mecanismos de accin (inhibidores de fusin, de transcriptasa inversa o de
proteasas) conocido como TARGA. Estos frmacos poseen diversos efectos adversos y
deben ser modulados para cada paciente.
148
FAMURP
Microbiologa
SECCIN IV
CAPTULO 30
HONGOS: GENERALIDADES. FILAMENTOSOS AMBIENTALES
_______________________________________________________________
A.GENERALIDADES
Los hongos forman el reino Myceleae, integrado por clulas eucariotas con caractersticas
bien definidas, como: pared celular constituida por quitina, glucano y manosa (sustancias que no
pueden ser degradas por enzimas de los mamferos), y membrana citoplasmtica con ergosterol
(molculas sobre la que actan los antimicticos). Para diferenciarlos de las plantas, se debe
sealar que no realizan el proceso de fotosntesis, ni forman clorofila.
Los hongos habitan el medio ambiente, en especial, los que contienen materia orgnica en
descomposicin, ya que son heterotrofos y se encargan de reciclar el carbono y el nitrgeno. La
mayora son aerobios, muchos son productores de metablicos como alcoholes, cido ctrico o
sustancias bactericidas, y pocas especies realizan procesos de fermentacin. No se ha demostrado
la presencias de endotoxinas, pero s algunos son productores de sustancias con actividad txica.
Los hongos se reproducen de dos formas: sexuada o teleomrfica, en que la unidad de

reproduccin es la espora (semilla); y asexuada o anamrfica, en que la unidad de reproduccin se
llama conidia (polvillo) y la divisin es slo por mitosis. El uso de stos dos trminos (espora o
conidia) en la prctica es a veces indistinto. Para la identificacin de los hongos patgenos, se
recurre a la basada en las caractersticas microscpicas convencionales de forma y organizacin de
las estructuras de reproduccin.
1- Levaduras: cuyas clulas son redondeadas, se multiplican por gemacin y al desarrollar in

vitro, forman colonias redondas, cremosas o mucoides, semejantes a las bacterias.
2- Filamentosas o mohos: cuyas clulas son tubulares, llamadas hifa, y el conjunto de ellas
toma el nombre de micelio. Para multiplicarse, el micelio se transforma en conidias,
elementos pequeos, redondeados, cuya forma, organizacin y disposicin da el nombre a
la especie de hongo. En los cultivos in vitro desarrollan colonias vellosas o filamentosas.
Los hongos considerados como patgenos primarios, capaces de ingresar a un organismo

inmunocompetente y seguir el proceso de colonizacin e invasin, slo son cuatro especies:
149
FAMURP
Microbiologa
Blastomyces dermatitidis, Coccidioides immitans, Histoplasma capaulatum y Paracoccidioides

brasiliensis; el resto de hongos actan como patgernos oportunistas, y gerealmente producen
infeccin cuando las barreras cutnea, mucosa o inmune se los permite.
B. HONGOS FILAMENTOSOS CONTAMINANTES
Los hongos contaminantes son los que ms abundan en el medio ambiente, y revisten
inters porque son los microorganismos que con frecuencia contaminan los alimentos, la ropa, los
reactivos del laboratorio, etc. Aunque la mayora son inocuos, algunos son oportunistas, en
huspedes inmunodeprimidos, con severa leucopenia o que han recibido terapia antibitica
prolongada. Muchas esporas o conidias se desprenden y son transportados por el viento, se
comportan como alrgenos y provocan cuadros de hipersensibilidad (alergias). Todos ellos
desarrollan bien en agar Sabouraud luego de 48 horas de incubacin.
1. Penicillium sp. Son los contaminantes ms frecuentes de los alimentos y la ropa hmeda.
Forma colonias pulverulentas de color verde con halo blanquecino. Al microscopio se
observan hifas tabicadas con conidiforos ramificados, y esterigmas donde se disponen
las conidias en el extremo distal, que da la apariencia de pincel.
2. Aspergillus sp. Se describen diecinueve especies; colonizan senos paranasales, vas

respiratorias y cavidades pulmonares preformadas por tuberculosis; los granulomas
pueden diagnosticarse por la deteccin del antgeno galactomanano, por enzima iunmuno
ensayo. Forman colonias aterciopeladas o pulverulentas de color blanco, amarillo, verde,
marrn o negro. Al microscopio se observa hifas tabicadas con ensanchamiento distal
(vescula), que da origen a esterigmas de donde nacen las conidias en cadena.
3. Mucor sp. Se describen en pacientes con inmunodeficiencia, con compromiso pulmonar,

rino cerebral y en vendajes quirrgicos. Forma colonias algodonosas blanco grisceas. Al
microscopio se observa micelios con un esporangio en su extremo, dentro del cual se
ubican las endoesporas.
4. Rhizopus sp. Hongo no patgeno que forma colonias algodonosas, de color blanco a gris
oscuro. Al microscopio se observa hifas con rizoides (races) y un esporangio en el
extremo, dentro del cual se ubican las endoesporas.
5. Cefalosporium sp. Forma colonias vellosas hmedas sin pigmento. Al microscopio se

observa micelios hialinos, con microconidias pequeas, alargadas agrupadas en masas.
6. Fusarium sp. Se describe compromiso de la crnea, en personas con lentes de contacto o

posterior a un trauma. Forma colonias vellosas, secas, de color naranja, violeta o lila. Al
150
FAMURP
Microbiologa
microscopio se observa macroconidias multiseptadas, fusiformes, de 5-8 micras y

microconidias ovoides.
7. Alternaria sp. Forma colonias aterciopeladas con tonalidad caf oscuro. Al microscopio se
observa micelios septados oscuros, con cuerpos nodulares (poroconidias), dispuestos en
cadenas.
C. MICOTOXINAS
Algunos hongos filamentosos contaminantes son productores de toxinas, que son dainas
para el ser humano y los animales; la intoxicacin est relacionada con la ingesta de alimentos, y
los sndromes clnicos que se presentan son variados, pudiendo ser: dermatitis, gastroenteritis,
hepatitis, cuadros neurolgicos, discrasias sanguneas, nefritis, e incluso estn relacionados con
generacin de cncer.
Las micotoxinas que con ms frecuencia se relacionan en patologa humana son:
1) Alfatoxinas: producida por especies de Aspergillus flavus que contaminan el maz o semilla de
algodn, produciendo hepatitis txica.
2) Citronina: producida por especies de Penicillium y Aspergillus, contaminantes del queso, trigo,
avena, maz y arroz; con capacidad nefrotxica.
3)Alcaloides del cornezuelo: hongo del gnero Claviceps, cuya sustancia es un derivado de la
ergotina; se ingiere con el trigo, la cebada o el centeno, y produce vasoconstriccin perifrica con
necrosis distales y gangrena, as como cuadros neurolgicos con convulsiones y alucinaciones.
4) Fumonisinas: sustancias elaboradas por especies del gnero Fusarium; la intoxicacin se

presenta por la ingesta de pan elaborado con maz enmohecido, ocasionando dolor abdominal,
diarrea; ha sido considerado como probable cancergeno.
5) Ocratoxina: formada por especies de Aspergillus y Penicillium contaminantes del caf, pan y
cereales; la accin es fundamentalmente nefrotxica y
6) Tricotecenos: producidos por varios hongos, como el Cefalosporium, Fusarium, Stachybotrys,

etc., que ocasionan cuadros de dermatitis, vmitos, diarrea, lceras y hemorragia en las mucosas,
por la ingesta de cereales enmohecidos.
151
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 31
LEVADURAS
_______________________________________________________________
LEVADURAS
Las levaduras son hongos unicelulares, conocidas desde Hipcrates y Galeno, como causa
de la infeccin en la boca del ser humano (Muguet). En 1923, Berkhaud, acu el trmino de
Candida albicans a la especie ms frecuente. El gnero Candida habita en el ambiente hospitalario,
alimentos, y es comensal en el tubo digestivo, piel y mucosas del ser humano.
Se describen ms de 150 especies del gnero Candida, pero pocas son aisladas de
muestras clnicas, como: C. albicans, C. tropicalis, C. glabrata, C. crusei, C. guilliermondii, entre
otras.
Candida albicans
A.ESTUDIO MICOLGICO
1. Forma y estructura: las clulas elementales son redondas o elipsoides de 3 a 6 m, que

se reproducen por brotacin nica. En los tejidos genera seudomicelios, y cuando se incuba a 37C
con la presencia de suero humano, produce una prolongacin denominada tubo germinativo.
2. Fisiologa: Cndida desarrolla fcilmente en el medio de Sabouraud luego de 24 a 48

horas de incubacin a 37C, dando colonias lisas, blanco cremosas; se describe un fenotipo
variante que forma colonias speras. Al inocularla en el medio agar harina de maz, la especie C.
albicans forma clamidosporas.
B. PODER PATGENO
C. albicans es una levadura comensal de piel, mucosas y tubo digestivo del hombre, se
estima que el 25% de la poblacin sana es portadora en la boca; luego la fuente de infeccin es
generalmente endgena.
Se consideran como factores de patogenicidad del microorganismo, bsicamente, a la

capacidad de adherirse a clulas epiteliales de la mucosa oral o vaginal, as como de materiales
152
FAMURP
Microbiologa
inertes (plstico, acrlico), y a la produccin de proteasas que hidrolizan la inmunoglobulina A

secretora. Aunque tambin se sealan otros factores, como: la capacidad hidrofbica de la pared
de la levadura, la produccin de fosfolipasa que daa la superficie celular y a la capacidad de
cambio fenotpico (levadura a seudomicelio), que le otroga resistencia al dao oxidativo, todo ello
contrubuye a la virulencia.
Se sealan como factores predisponentes del husped para adquirir la infeccin, entre
otros: alteracin de la integridad de la piel por procesos de maceracin y humedad constante;
disminucin de la capacidad fagoctica de los neutrfilos y monocitos; deficiencia de niveles de
complemento C3; y procesos metablicos como embarazo, diabetes, sobrepeso. A ello debemos
agregar factores iatrognicos, como el uso de catteres y la administracin prolongada de
antibiticos.
En clnica se describen cuadros superficiales en la ua, piel y mucosos; as como sistmicos

con compromiso renal y endocardio.
1. Microscopa: cuando la muestra proviene de tejido queratinizado (ua, piel), debe

humedecerse en hidrxido de potasio al 10%, durante una hora, para ablandar la queratina; se
observarn con facilidad las esporas de las levaduras a 40X de aumento. En muestras de mucosas
se suele observar la presencia de pseudohifas.
2. Cultivo: desarrolla con facilidad en el medio de cultivo clsico de Sabouraud formando

colonias cremosas; seguidamente se debe promover la formacin del tubo germinativo en una
suspensin con suero humano.
La prevencin de infecciones por Cndida est orientada a evitar o disminuir los factores
iatrognicos o de riesgo del husped, pues se trata de un microorganismo endgeno. Para el
tratamiento se dispone de una amplia gama de productos de uso tpico, oral y sistmico; que se
utilizan o combinan de acuerdo al caso clnico en particular, a base de Nistatina, fluconasol o
itraconazol.
Criptococcus neoformans
Levadura ampliamente distribuida en la naturaleza, saprofito en el intestino de las

palomas, canarios y loros, que ocasiona micosis sistmica, con compromiso del sistema nervioso
central.
A.ESTUDIO MICOLGICO
153
FAMURP
Microbiologa
1. Morfologa y estructura: levadura esfrica u ovalada de 2 a 20 m, se multiplica por

gemacin nica. Forma cpsula de polisacridos fcilmente observable al microscopio.
2. Fisiologa: desarrolla en medio de Sabouraud en 48 horas, formando colonias grandes,
hmedas, mucoides, de color blanco cremoso. Metaboliza urea y galactosa. Se describen
cuatro serotipos, segn la antigenicidad capsular, encontrando al serotipo A como el
causante de infecciones en humanos.
B.PODER PATGENO
El desarrollo de la criptococosis depende de tres factores: la integridad de la inmunidad

celular, nmero y virulencia de la levadura inhalada. El C. neoformans inhalado es fagocitado por
los macrfagos alveolares, aunque no los destruye, pero secretan citocinas para atraer a los
linfocitos NK, neutrfilos, monocitos e inducir la diferenciacin de linfocitos T y B especficos. La
virulencia de la cepa est centrada en la cpsula, que protege a la clula de la fagocitosis, de las
citocinas, e interfiere los mecanismos de presentacin de antgenos. La respuesta humoral no
otorga proteccin. Cuando la levadura ha vencido estas barreras inmunolgicas se disemina va
sangunea al sistema nervioso central.
1. Microscopa: la observacin del lquido cfalo raqudeo con tinta china permite apreciar
las clulas rodeadas de un halo transparente caracterstico, la cpsula.
2. Cultivo: el aislamiento de la levadura se realiza a partir de muestras de sangre o lquido

cfalo raqudeo. La formacin de colonias mucoidesen agar Sabouraud a las 48 de incubacin y el
metabolizmo de la urea son caractersticos.
3. Deteccin de antgenos: la determinacin del antgeno capsular mediante tcnicas de

aglutinacin con ltex o enzima inmuno ensayo, son de mayor sensibilidad que el cultivo.
La prevencin no es posible. El tratamiento se basa en la administracin de anfotericina B,

va endovenosa, seguido de fluconazol o itraconazol, va oral.
154
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 32
HONGOS PRODUCTORES DE MICOSIS CUTNEAS Y SUPERFICIALES
DERMATOFITOS
_______________________________________________________________
MICOSIS CUTANEAS
Las infecciones de los tegumentos ocasionadas por hongos tienen prevalencia en todo el
mundo y son conocidas desde el siglo XVI, denominadas por los griegos como tia. El primer
agente aislado de una lesin drmica fue Trichophyton schoenleinii, en 1841.
Estos hongos filamentosos que invaden el tejido queratinizado, como piel, pelo y uas, se
denominan dermatofitos, habitan en el suelo y la mayora son patgenos para los humanos y los
animales. De acuerdo a la fuente de infeccin para los humanos, pueden ser zooflicos, si
provienen de una infeccin animal (M. canis, T. mentagrophytes); geoflicos, si provienen del suelo
(M. gypseum); y antropoflicos, los que son transmisible entre humanos (E. floccosum, T. rubrum,
T. tonsurans).
La clasificacin de los dermatofitos no ha sufrido cambios, a pesar de la presencia de

enzimas (ureasa, proteinasas, elastasa, etc.) y de las tcnicas moleculares actuales; manteniendo
la clasificacin ortodoxa en tres gneros: Trichophyton, Microsporum y Epidermophyton,
identificados por las caractersticas macroscpicas de las colonias y microscpicas de los micelios
y conidias.
En clnica, se denomina tia a las lesiones drmicas descamativas, con mrgenes elevados
y un rea central inflamada, adquiriendo nombres de acuerdo a la zona afectada, as: tia de cuero
cabelludo (capitis), tia de la barba (barbis), tia corporal (corpis), tia inguinal (cruris), tia de los
pies (pedis) y tia de la ua (unguis). Las lesiones son asintomticas o con prurito y la respuesta
inmune es casi nula.
A.ESTUDIO MICOLGICO
1. Morfologa y estructura: los tres gneros de los dermatofitos se caracterizan por la

formacin de microconidias y/o macroconidias en los cultivos. Trichophyton produce
abundantes microconidias en forma de lgrimas o en racimo de uvas esfricas,
ocasionalmente hifas enrolladas y macroconidias en forma de lpiz. Microsporum produce
abundantes macroconidias multicelulares, fusiformes, de pared gruesa y rugosa, con
escasas microconidias. Epidermophyton slo produce macroconidias en forma de mazo
con pared lisa.
155
FAMURP
Microbiologa
2. Fisiologa: la afinidad de estos microorganismos por los tejidos superficiales corresponde a

la produccin de proteasas que tienen accin sobre la queratina. In vitro, todos
desarrollan bien en el medio de Sabouraud, incubados a temperatura ambiental (22C-
26C), formando colonias a partir de los siete das. Trichophyton forma colonias
granulosas, algunas de color rojo en el reverso; Microsporum forma colonias vellosas de
color pardusco y Epidermophyton colonias vellosas verde amarillentas.
B. PODER PATGENO
La infeccin se adquiere por transferencia de material que contenga artrosporas o conidias

y/o hifas del dermatofito, a una persona susceptible. Estos elementos se mantienen infectantes
por mucho tiempo en el medio ambiente. Luego de adherirse a las clulas con queratina,
germinan y conducen a la invasin. Hay diversos factores que determinan la infeccin, como la
edad (la tia del cuero cabelludo afecta a nios pre pberes, y la tia del pi afecta a los hombres
adultos), o la humedad de la piel, como es el caso de la presentacin de tia crural o interdigital.
Las manifestaciones clnicas ms frecuentes son: la presentacin de una lesin anular

descamativa, con bordes elevados y con la zona central menos inflamada, o la presencia de placas
circulares de alopeca con eritema y descamacin, aunque pueden ser ppulas, pstulas o
vesculas. La infeccin de las uas produce cambios como engrosamiento, decoloracin, fragilidad
y deformidad. El compromiso del cuero cabelludo se presenta mayormente en pre-pberes y
puede afectar la parte externa del tallo del pelo (ectotrix) o dentro del pelo (endotrix), como es el
caso del T. schoenleinii.
C. DIAGNSICO DE LABORATORIO
1. Microscopa: preparaciones en fresco a partir de escamas de piel tomadas del borde de la

lesin, ua o pelo, suspendidas en solucin de KOH al 10%, son muy tiles para observar
esporas agrupadas en racimos o hifas hialinas.
2. Cultivo: para el aislamiento de los dermatofitos se recomienda el uso del medio de cultivo
agar Sabouraud, con el agregado de ciclohexamida y cloranfenicol, que inhiben a los
hongos ambientales y bacterias contaminantes. Luego de un perodo de incubacin de
una a dos semanas, a temperatura ambiental (22C - 26C), se observaran las colonias
caractersticas.
3. Identificacin: la identificacin de las diversas especies de dermatofito es morfolgica,
observando al microscopio el micelio areo en preparados en fresco con azul de
lactofenol. Se apreciarn las caractersticas de las hifas, microconidias y macroconidias.
156
FAMURP
Microbiologa
Colonia Microconidias Macroconidias Ubicacin

Trichophyton Granulosa, roja Abundantes, Ausentes Piel, Pelo
anverso en lgrima o
racimo
Microsporum Vellosa, Escasas Abundantes, Piel, Pelo, Ua
pardusco fusiformes (+/-)
Epidermophyton Vellosa, verde- Ausentes Numerosas, en Piel, Ua
amarillo mazo
C. PREVENCIN Y TRATAMIENTO
No hay un esquema aceptable que impida la contaminacin, puesto que la infeccin

depende, en gran medida, de la susceptibilidad personal. Pero es aconsejable medidas de higiene
personal y evitar hacer vida comn con animales domsticos. No hay vacuna para los
dermatofitos.
El tratamiento tpico est indicado con la finalidad de producir efecto queratoltico, con el
uso de soluciones de cido saliclico o cido benzoico. En micosis drmica extendida es
recomendable el uso oral de fluconazol, itraconazol o terbinafina. El tratamiento debe extenderse
hasta una semana despus de la remisin clnica.
MICOSIS SUPERFICIALES
Hay algunos hongos que producen infeccin en las capas ms superficiales de la dermis. La
ms frecuente es la levadura lipoflica Maslassezia furfur, comensal de las superficies cutneas, de
forma esfrica u ovalada, con pared gruesa e hifas cortas flexionadas. Para aislarla in vitro se debe
utilizar medio de Sabouraud con aceite de oliva; las colonias de aspecto levaduriformes se forman
luego de 3 a 5 das de incubacin.
A la enfermedad se le denomina pitiriasis versicolor, por las lesiones circulares rosadas (en
personas de tez clara) o hipopigmentadas, con distribucin preferente en cara, cuello y trax, no
pruriginosas; las lesiones dan fluorescencia verde amarillento al exponerse a la luz de Wood. El
diagnstico se establece por la observacin microscpica de las levaduras en racimos en las
escamas de la piel afectada. La aplicacin tpica de locin de sulfuro de selenio o tiosulfato de
sodio durante dos semanas, es lo aconsejable para el tratamiento.
En poblaciones con higiene personal deficiente, se puede observar infecciones del

cabello, denominadas piedra, por la formacin de ndulos o concreciones en el tallo del pelo. Se
describen dos tipos de sta enfermedad: Piedra blanca, causada por la levadura Trichosporum
beigelii, que afecta el pelo axilar y pubiano; y Piedra negra, ocasionada por el hongo filamentosos
pigmentado Piedra hortae. En ambos casos el tratamiento es el afeitado del cabello y el
mejoramiento de las condiciones de higiene.
157
FAMURP
Microbiologa
CAPTULO 33
HONGOS PRODUCTORES DE MICOSIS SISTMICAS Y SUBCUTNEAS
_______________________________________________________________
HONGOS DIMRFICOS
Los hongos denominados dimrficos, son aquellos que adquieren la forma filamentosa en
el medio ambiente en que se encuentran (25C) y la forma de levadura cuando se ubican en los
tejidos del organismo animal o humano (37C). Tambin se les denomina endmicos, porque estn
restringidos a regiones geogrficas definidas; o patgenos sistmicos, por la capacidad de
diseminarse a los diferentes rganos. No se describe transmisin inter humana con stos hongos.
Se revisarn los de presentacin ms frecuente en nuestro pas: Histoplasma capsulatum,

Paracoccidioides brasiliensis y Sporothrix schenkii.
Histoplasma capsulatum
A.ESTUDIO MICOLGICO
1. Hbitat: el hongo se encuentra en el suelo de zonas templadas y hmedas, de preferencia

en los que tienen alto contenido de nitrgeno, por la presencia de heces de aves. Habita en
forma saprofita en el intestino de los murcilagos. En nuestro pas es conocida la cueva de
las lechuzas ubicada en la ciudad de Tingo Mara, como fuente de contaminacin.
2. Morfologa y estructura: la forma micelial se encuentra en la naturaleza; los micelios
revelan dos tipos de conidias, las macroconidias de 8 a 15 m, redondeadas y rodeadas de
espculas o tubrculos, y las microconidias, muy pequeas (2 a 5 m) que son las partculas
infectantes. La forma de levadura se desarrolla dentro de los tejidos, son pequeas, ovales
y unicelulares.
3. Fisiologa: la forma micelial desarrolla en medio de Sabouraud incubado a 25C, formando
colonias algodonosas, blanquecinas, luego de 3 a 4 semanas de incubacin. La forma de
levadura desarrolla in vitro a 37C, en medios enriquecidos con sangre o infusin de
cerebro y corazn. El cambio de forma est contenido en los genes cdc2, que se activa
positivamente con el calor, desencadenndose procesos bioqumicos que les confieren vida
intracelular.
4. Variedades: se describen dos variedades: a) H. capsulatum var. capsulatum que ocasiona
infecciones pulmonares y diseminadas, con prevalencia en Amrica central y del Sur, y b) H.
capsulatum var. duboisii que ocasiona infecciones pulmonares y seas, con prevalencia en
el Africa y Amrica del Norte.
158
FAMURP
Microbiologa
B. PODER PATGENO
Las personas expuestas a remocin de tierras o las que visitan cuevas donde habitan
murcilagos, pueden inhalar las partculas infecciosas. Las microconidias se depositan en los
alvolos, donde se transforman en levaduras, luego son fagocitadas por los macrfagos, con
quienes migran a los ganglios linfticos, hgado, bazo y mdula seas (RES). La inmunidad celular
limita la infeccin primaria, mediante las clulas T CD4 que activan la fagocitosis de los
mononucleares. La infeccin se limita con la formacin de un granuloma que se fibrosa, y la
infeccin permanece latente por mucho tiempo como asintomtica, pudiendo reactivarse
posteriormente. Las formas clnicas ms frecuentes son: pulmonar, mediastnica y diseminada.
1. Microscopa: las muestras procedentes de lavado bronquial, frotis sanguneo, mdula sea
y tejidos, pueden ser coloreados con Giemsa, PAS o HE, para observar las levaduras
pequeas (2 a 4 m) intracelulares formando grupos.
2. Cultivo: es ms probable aislar el hongo en la forma diseminada de la enfermedad. La
formacin de colonias es lenta ( 4 a 6 semanas), una vez formadas las colonias en medio de
Sabouraud, se debe cultivar en agar sangre o agar infusin de cerebro y corazn (BHI),
para revertir a la forma de levadura, o aplicar las pruebas de hibridacin de cido nucleico.
3. Serologa: mediante el procedimiento ELISA se puede determinar la presencia de antgeno
del Histoplasma en suero y orina, procedimiento de gran sensibilidad en la enfermedad
diseminada. La determinacin de anticuerpos por inmunodifusin y fijacin de
complemento, no son tiles en los cuadros agudos.
4. Tcnicas moleculares: el uso de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) a partir de
muestras de tejidos o lquidos, establece un diagnstico rpido y especfico.
D. PREVENCIN Y TRTAMIENTO
No hay medidas preventivas ni vacuna para evitar la histoplasmosis. Muchos pacientes

infectados se recuperan sin tratamiento. En la forma diseminada el uso de anfotericina B est
indicado, seguido de itraconazol, en forma ambulatoria y por perodos de 12 a 24 meses.
Paracoccidioides brasiliensis
A.ESTUDIO MICOLGICO
1. Hbitat: el ambiente ecolgico del P. brasiliensis corresponde a zonas tropicales de la

selva, que son muy hmedas, con exuberante vegetacin, clima clido y suelo cido de
Amrica latina. El husped natural es el hombre y el armadillo.
2. Morfologa y estructura: la forma de filamento corresponde a hifas delgadas, tabicadas
que originan conidias pequeas de 4 a 5 m. En cambio la forma de levadura desarrolla
159
FAMURP
Microbiologa
estructuras grandes de 10 a 60 m, redondas, con pared gruesa y con mltiple gemacin,

dando imgenes de timn de barco o cabeza de ratn Mickey.
3. Fisiologa: la forma micelial desarrolla a 25C, produciendo colonias algodonosas con hifas
tabicadas y clamidosporas. Los cultivos en agar sangre, incubados a 37C, desarrollan
colonias de aspecto cerebriforme. En ambos cultivos se tarda 3 a 4 semanas para observar
colonias.
B. PODER PATGENO
La poblacin ms afectada son los hombres en edad laboral, en trabajadores agrcolas y

en la industria de la madera. La infeccin se produce por inhalacin de conidias de la forma
micelial (aunque se presentan casos por inoculacin traumtica). En el alveolo pulmonar se
transforman en levaduras, las que secretan el antgeno gp43, responsable de la adhesin a los
macrfagos y de la intesa respuesta humoral.
Luego de un perodo de inactividad clnica se presentan problemas respiratorios, con tos,

esputo purulento, adelgazamiento y fiebre; las imgenes radiogrficas revelan ndulos con
infiltraciones. Sntomas y signos que recuerdan a la tuberculosis. Luego de un perodo variable se
presenta la metstasis en zonas cutneas y mucosas de la cara (labios, encas, lengua, paladar
blando y nariz), produciendo lesiones inflamatorias destructivas; tambin se observa compromiso
ganglionar cervical. La enfermedad cnica tiene dos denominaciones: paracoccidiodomicosis o
blastomicosis sudamericana.
1. Microscopa: a partir de muestras de esputo o exudados de las lesiones orales, en

preparaciones en fresco o coloreados con Giemsa, se pueden observar las levaduras de
tamao variado, generalmente grandes multigemadas caractersticas. La biopsia de la
lesin drmica es diagnstico.
2. Cultivo: el aislamiento in vitro es posible en agar Sabouraud incubado a 25C, luego de 3 a
4 semanas. Es conveniente confirmar el dimorfismo trmico.
3. Serologa: La presencia de antgenos de P. brasiliensis circulantes en la sangre se detectan
con el uso de anticuerpos monoclonales, empleando tcnicas de Western blot o enzima
inumo ensayo. El ttulo de anticuerpos Ig G e Ig M se utiliza para el diagnstico y la
evolucin del tratamiento; para lo cual se emplean tcnicas de inmunodifusin, fijacin de
complemento, inmunofluorescencia o ELISA.
No hay medidas preventivas ni vacuna para evitar la blastomicosis sudamericana. Para el

tratamiento se emplea sulfonamidas por perodos prolongados (3 a 5 aos). En casos graves se
debe asociar anfotericina B. En los casos clnicos que no respondan a ste esquema terapetico se
recomienda el uso de ketoconazol.
160
FAMURP
Microbiologa
Sporothrix schenkii
A.ESTUDIO MICOLGICO
1. Hbitat: el hongo se ubica en el suelo y los vegetales en descomposicin de regiones

tropicales y sub tropicales.
2. Morfologa y estructura: la forma micelilal se compone de hifas tabicadas que producen
conidias ovaladas, organizadas en forma de rosetas en ptalos de margarita. La forma de
levadura son esfricas, ovaladas o alargadas que semejan al cigarro, con gemacin nica.
3. Fisiologa: a temperatura ambiental (25C), desarrolla la forma de filamentos y las colonias
en agar Sabouraud son algodonosas, de color blanco que se tornan pardas. En los cultivos
de agar infusin de cerebro y corazn, incubados a 37C, desarrolla colonias con el
aspecto de levadura. En los tejidos, se observan levaduras alargadas con un gemnacin.
B. PODER PATGENO
Las personas ms expuestas a padecer sta infeccin, son las que se relacionan con
actividades en granjas y jardinera; ya que la forma micelial del hongo ingresa por lesin cutnea
con espinas, aguijones o astillas de madera. La lesin inicial se presenta posterior a una lesin
producida en una extremidad, con la presentacin de una ppula nodular eritematosa, no
dolorosa, que con frecuencia se ulcera. Luego se desarrollan lesiones nodulares subcutneas
secundarias, que siguen el trayecto del vaso linftico, construyendo el patrn de linfangitis
nodular. Tambin se describen esporotricosis extracutnea, como la osteoarticular. En pacientes
con SIDA se pueden presentar manifestaciones invasivas atpicas (pulmonar, menngea, heptica,
etc).
1. Microscpico: la biopsia de las muestras obtenidas de las lesiones, son sugestivas de

infeccin por la presencia de levaduras alargadas en forma de cigarro, pero no es
concluyente.
2. Cultivo: el aislamiento del agente a partir del pus o tejido infectado es definitivo para el
diagnstico. En agar Sabouraud, incubado a 25C, desarrollan colonias filamentosas en
una semana; a partir de las cuales se pueden observar las hifas con microconidias ovaladas
ordenadas en rocetas. Se debe revertir a la forma de levadura en medio agar cerebro y
corazn incubado a 37C.
No hay medidas preventivas ni vacunas. El tratamiento clsico es la administracin de

solucin de yoduro de potasio, pero se presentan efectos adversos; el uso de anfotericina
B e itraconazol son recomendados.
161
FAMURP
Microbiologa
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Microbiologa Mdica. Stima edicin
Patrick Murray
Elsevier, 2014 Espaa
2. Microbiologa Mdica. Diecinueveava edicin en espaol

Jawets, Melnick y Adelberg
El Manual Moderno, 2008
3. Microbiologa Humana. Quinta edicin

Nester, Anderson, Roberts y Nester
El Manual Moderno, 2007
4. Virologa Humana. Tercera edicin

Leslie Collier y John Oxford
McGraw-Hill, 2006
5. Virus. Estudio Molecular con Orientacin Clnica

Shors, Teri
Editorial Mdica Panamericana, 2009
162

Manual de Micro Pem 2015

Transféré par

Informations du document

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Manual de Micro Pem 2015

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

FAMURP

Universidad Ricardo Palma

SECCIN III 112 - 148

SECCIN IV 149 - 161

El conocimiento de los microorganismos comienza en 1674 con la construccin del

La vida en la Tierra est representada en su mayora por microorganismos, y debe tenerse

Es la estructura rgida que rodea a la clula bacteriana, le da forma y resiste la presin

El peptidoglucano est constituido por dos molculas de hexosas: N-acetilmurmico

La composicin qumica de la pared bacteriana explica el comportamiento inmunognico

1. Bacterias grampositivas: se caracterizan por poseer una capa gruesa de peptidoglucanos

El cromosoma bacteriano est fijado a la membrana citoplasmtica en un punto

1. El genoma: la composicin interna de las bacterias es bsicamente molculas de cido

2. Dispersas en el citoplasma o integradas al cromosoma bacteriano se encuentran otras

3. Transposones e Integrones: son molculas de ADN ms pequeas que las anteriores

Adems, se encuentran dispersos grnulos de almacenamiento de energa, como

6. Endospora: algunos gneros bacterianos (Bacillus y Clostridium) son capaces de formar

2. Flagelos: Son estructuras proteicas helicoidales (flagelina) unidas desde la membrana

CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS

El objetivo biolgico es la especie bacteriana, y se define como el conjunto de individuos

El texto de referencia para la clasificacin de los Procariotes es el de Bergey, que utiliza la

A) Con la finalidad de aislar in vitro al microorganismo, se utilizan medios de cultivo inertes

ALGORITMO PARA IDENTIFICACIN DE GRMENES GRAMNEGATIVOS

Cocos Bacilos cortos Bacilos Bacilos curvados

Neisserias Haemophilus fermentan no fermentan oxidasa ++

ALGORITMO PARA IDENTIFICACIN DE GRMENES GRAMPOSITIVOS

Cocos Bacilos Bacilos

alfa beta gamma

S. neumoniae S. pygenes Enterococcus

El conocimiento de la fisiologa microbiana deviene del estudio de lneas celulares aisladas

B. CRECIMIENTO BACTERIANO EN MEDIO LQUIDO

Cuando experimentalmente se inocula una bacteria en un volumen definido de medio

C. CRECIMIENTO BACTERIANO EN MEDIO SLIDO

La glucosa 6 fosfato es la subunidad base precursora de los carbohidratos: triosas,

En los procesos metablicos de descomposicin, catabolismo, las sustancias qumicas

En el anabolismo bacteriano se habla de respiracin aerbica, cuando al final del proceso

El tamao pequeo de las bacterias y la rapidez de su reproduccin (cada 10 a 30

Replicacin: Las bacterias tienen una replicacin semiconservadora y bidireccional. El proceso

Las bacterias en el medio ambiente realizan cambios continuos, con la finalidad de

La mutacin es un cambio en la secuencia de las bases nitrogenadas del ADN de la

1. Mutacin espontnea: ocurre en el ambiente natural, al azar y con una frecuencia

En la prctica mdica, durante el proceso de terapia antibitica, se eliminan las bacterias

Es comn entre las bacterias el intercambio de material gentico, lo que permite la

destruido. Muchas bacterias grampositivas (Streptococcus pneumoniae) y gramnegativas

3. Conjugacin: es el mecanismo de transferencia gentica reportado por Lederberg en el

Los procedimientos fsicos, como la temperatura, radiaciones o filtracin, se utilizan para

1. Estril: ausencia total de microorganismos en un medio definido.

Las temperaturas elevadas destruyen a los microorganismos por desnaturalizacin de las

Para la esterilizacin de lquidos o sustancias orgnicas lbiles al calor, es recomendable

diversa composicin, as: de tierra (Chamberland), de porcelana (Berkefeld), de asbesto (Seitz) y

Las sustancias qumicas antibacterianas pueden clasificarse de acuerdo al nivel de accin

Otro enfoque en la clasificacin de los desinfectantes es por el grado de accin. As, se

1. Inhiben la sntesis de la pared celular

1. Inhiben la sntesis de la pared celular

El componente principal de la pared bacteriana es el peptidoglucano, estructura formada

El grupo de antibiticos cuya estructura qumica bsica es el anillo -lactmico, incluye a

a. Penicilinas naturales. Son producidas a partir del hongo Penicillium chrysogenum.

d. Penicilinas de espectro extendido. Estas tienen especial actividad contra bacilos

a. Primera generacin o de espectro reducido: Cefalotina, Cefalexina, Cefradina. De uso

Monobactams: es resistente a la beta lactamasa y tiene sinergismo con los aminoglucsidos. No es

Glucopptidos: antimicrobianos que actan inhibiendo la sntesis de los peptidoglucanos, pero a

Polipptidos: provenientes del Bacillus licheniformis, constituyen la Bacitracina, que interfieren

Ciclocerina: es un anlogo de la D-alanina, por lo que interfiere la formacin del polipptido de la

Isoniazida y Ethambutol: bloquean la formacin de cido miclico de la pared de las micobacterias.

La resistencia bacteriana a los -lactmicos se produce por tres mecanismos: A) Alteracin de la