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UNIDAD II
CITOLOGA DIAGNSTICA
Programa de la Asignatura de Patologa Clnica, de la Carrera de
Medicina Veterinaria y Zootecnia
Presenta:
M en C EDV MVZ Ignacio Carlos Rangel Rodrguez
Marzo 2014
I
NDICE
Introduccin . 01
Toma de muestras citolgicas . 01
Puncin- aspiracin con aguja fina 01
Raspado con hisopo . 02
Toma de lquidos .. 03
Fijacin y Tinciones 03
Citologa de tejidos slidos . 04
Clasificacin de la estirpe histolgica 04
Neoplasias de origen epitelial . 05
Neoplasias de clulas fusiformes .. 05
Neoplasias de clulas redondas . 06
Comportamiento biolgico 06
Criterios generales 06
Criterios nucleares 07
Grado de diferenciacin 07
Neoplasias comunes en animales domsticos .. 09
Neoplasias de piel y tejido subcutneo .. 09
Neoplasias de glndula mamaria . 12
Neoplasias testiculares .. 12
Citologa Exfoliativa . 13
Mucosa vaginal 13
Mucosa oral .. 15
Mucosa conjuntival y corneal . 15
Mucosa tica . 16
Mucosa respiratoria . 16
Citologa de lquidos 17
Efusiones . 17
Lquido sinovial ... 18
Lquido cefalorraqudeo .. 20
II
NDICE DE FIGURAS
NDICE DE TABLAS
Tabla 1.- Criterios de malignidad nuclear ... 07
Tabla 2.- Proporcin de clulas en las diferentes etapas del
Ciclo estral en perras y en inflamacin del tracto reproductor . 15
Tabla 3.- Caractersticas diferenciales de las efusiones ... 18
III
UNIDAD 2.- CITOLOGA DIAGNSTICA
INTRODUCCIN
La Citologa es por definicin una rama de la biologa que se encarga del estudio de la
clula como unidad. La Citologa Diagnstica o Citopatologa es un mtodo diagnstico que
permite obtener y analizar clulas de cualquier parte del organismo, claro est, depende de
la ubicacin anatmica de la lesin la facilidad o complejidad del acceso19,26,30. De tal
manera que las lesiones superficiales (cutneas y subcutneas) requerirn un menor
manejo y equipo para la toma de muestra, mientras que las lesiones intracavitarias
necesitarn de mayor manejo del paciente, material y equipo para la toma de muestras;
siendo del uso del ultrasonido la manera ms recomendada para dirigir la toma de muestra
intracavitaria. Cada tejido muestra caractersticas histolgicas y funcionales particulares, lo
que incrementa la complejidad del estudio citolgico. Sin embargo, la citologa
considerando estas caractersticas puede dividirse en tres grandes grupos25:
I.- Citologa de tejidos slidos: En este grupo se localizan todos aquellos tejidos que no
utilizan la descamacin como mtodo de recambio celular, tal es el caso de la dermis y sus
anexos; as como los rganos cavitarios4,25. En estos casos adems de la informacin
obtenida del anlisis de clulas aisladas, nos permite evidenciar ciertos rasgos de
organizacin histolgica que nos permiten clasificar el origen histolgico26. As como la
presencia de elementos estromales y aquellos provenientes de vasos sanguneos
(eritrocitos, leucocitos y plaquetas) para en conjunto determinar si son parte del proceso
patolgico, o atribuibles a la toma de muestra. En el caso de la citologa de tejidos slidos,
el mtodo ideal para realizar el muestreo es la Aspiracin citolgica con aguja delgada
(ACAD), tambin llamada Puncin- Aspiracin con aguja fina (PAAF), biopsia por aspiracin
con aguja fina (BAAF), entre otras sinonimias4,10,17,19,21,22,25,30.
II.- Citologa exfoliativa: Se refiere al grupo de tejidos que de manera normal utilizan la
descamacin como su mtodo habitual de recambio celular, ejemplo de esto son las
mucosas. Por esta caracterstica de descamacin, la mayor parte de las observaciones
citolgicas se realizan en clulas aisladas, que en ocasiones forman pequeos grupos. Por
esta caracterstica y, ya que en la mayora de las mucosas se tiene acceso directo el mtodo
de toma de muestra recomendado es el raspado con hisopo. Mientras que en las mucosas
de difcil acceso como la mucosa traqueal se puede emplear como mtodo de toma de
muestra un lavado17,19,22.
III.- Citologa de Lquidos: En este grupo se incluye la evaluacin de los lquidos que de
manera normal se encuentran en cantidades colectables en el organismo como son el
lquido cerebro espinal y el lquido sinovial. Adems de aquellos lquidos que incrementa de
manera patolgica su cantidad en el organismo, siendo el caso del lquido torcico,
pericrdico y abdominal. Para la toma de estas muestras es conveniente el uso una PAAF26.
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realizar asepsia de la zona a muestrear, como para fijar el material citolgico obtenido;
algunos portaobjetos y material con que identificar la laminilla que puede ser desde cinta
adhesiva y lpiz, hasta el uso de un lpiz diamante (punta de carburo de tungsteno). Es un
mtodo seguro pues est demostrado que un muestreo correcto no genera lesiones
posteriores. Es rpido ya que requiere slo un par de minutos para la toma y el tiempo de
procesamiento (segn el mtodo de tincin utilizado) puede ser desde un par de minutos
hasta media hora. Finalmente es confiable ya que bien interpretado nos da un diagnstico
morfolgico que en ms del 90% de los casos es concluyente. Obviamente este ltimo
punto depende en gran medida de la calidad de los frotis y desde luego del entrenamiento
del patlogo, lo que le permitir no sub o sobrediagnosticar los hallazgos
microscpicos10,17,19,21,22,30.
Tambin es importante recalcar que para establecer un mejor diagnstico, es indispensable
recabar una historia clnica completa y, si se sospecha de una neoplasia, se necesita
conocer el curso, tamao, consistencia, aspecto de la tumoracin y la zona de muestreo26,30.
Una vez que se ha realizado la sujecin fsica del paciente es necesario observar la lesin
para determinar los cambios ms superficiales; es decir el aspecto de la piel, posterior a
esto se debe palpar para determinar la consistencia o consistencias de la lesin y decidir si
se puncionar uno o varios sitios de la tumoracin. Una vez que se ha decidido el sitio de
toma, se procede a realizar asepsia de la zona utilizando nicamente una torunda
impregnada con alcohol, tal cual se realiza para cualquier aplicacin de frmaco parenteral.
Se sujeta la jeringa cuidando que la aguja este fuertemente enroscada en la jeringa (para
evitar prdida de presin), se puede o no dejar una pequea cmara de aire colocando el
mbolo ligeramente hacia atrs (aprox. 0.5 ml) aunque no es indispensable. Se introduce
la aguja en el tumor (figura 1A) y se procede a hacer presin negativa fuerte y sostenida
por espacio de algunos segundos (hasta que aparezca material en la cubeta de la aguja);
durante este lapso de tiempo se pueden realizar movimientos de adelante hacia atrs
cuidando que la aguja no salga del tumor. Una vez que ha aparecido el material celular
(rojizo, blanquecino, grisceo, caf, etc) en la cubeta de la aguja, se libera la presin
negativa hasta que el mbolo de la jeringa quede esttico, se retira del tumor, para
posteriormente desconectar la aguja de la jeringa, llenar esta ltima con aire y volver a unir
con la aguja. Finalmente el material se expulsa de manera enrgica sobre un portaobjetos
y se procede a realizar los frotis10,17,19,21,22,30.
Existe una variante en esta tcnica que consiste slo en puncionar sin realizar aspiracin.
Algunos autores coinciden que mediante el uso de este mtodo se reduce la posibilidad de
contaminacin y dilucin de la muestra con sangre19,22,25.
El mtodo idneo para realizar lo frotis es la tcnica de squash (figura 1B)en la cual basta
con poner otro portaobjetos sobre el portaobjetos que tiene el material celular, permitir que
se extienda un poco y deslizar uno sobre otro de manera muy suave. Finalmente estos
preparados deben de fijarse antes de ser teidos17,19,21,22,30.
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esta (figura 1C). Finalmente el material es depositado con movimientos giratorios sobre un
portaobjetos para su posterior fijacin (figura 1D).
Figura 1- Toma de muestras. A) PAAF la imagen muestra la extraccin del material celular haciendo presin negativa.
B) Esquematizacin de la realizacin del frotis mediantes squash, Tomado de Cowell 2008. C) Raspado con hisopo de
conjuntiva palpebral. D) Elaboracin del frotis rotando gentilmente el hisopo sobre la laminilla.
Una vez que se han elaborado los frotis independientemente del mtodo de coleccin, se
proceder a fijarlos, existiendo dos mtodos de fijacin26,30:
a) Fijacin en seco: Este mtodo consiste en que una vez que se ha realizado el frotis
se debe sostener en las manos y realizar movimientos de abanico para propiciar
que el material celular se seque. Una vez desecado se pone en contacto con el
fijador (preferentemente metanol) o bien se pueden enviarse directamente al
laboratorio una vez desecadas. Este mtodo de fijacin se emplea bsicamente
para realizar tinciones tipo Romanoswky (hematolgicas)19,26.
b) Fijacin en hmedo: una vez realizado el frotis se debe poner en contacto con el
fijador (preferentemente alcohol del 96o o 70o, o bien fijador en spray) antes de que
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el material celular se seque. Esta fijacin se emplea para tinciones como
papanicolaou o bien hematoxilina y eosina.
En sentido terico las tinciones tipo Romanoswky (figura 2A) resaltan excelentemente el
detalle citoplasmtico, leucocitos y microorganismos; pero manifiestan pobre detalle
nuclear. Mientras que las tinciones tipo Papanicolaou (figura 2B) resaltan excelentemente
el detalle nuclear, lo que las hace muy tiles en el caso de neoplasia y una menor, aunque
todava muy buena definicin citoplasmtica, de leucocitos y microorganismos. Pero la
decisin de cual tincin emplear depende exclusivamente de la formacin del
citopatlogo19,26.
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muy pequeas caractersticas de organizacin. As, tenemos neoplasias de origen epitelial,
mesenquimatosas (tambin llamadas fusiformes) y el ltimo grupo corresponde a las
neoplasias de clulas redondas o dispersas10,18,25.26.27.32.
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2.- Neoplasias de clulas redondas
Este tipo de tumores se derivan de clulas que tienen funcin relativamente independiente
de otras clulas. Las clulas que componen a este grupo no tienen enlaces intercelulares
entre s, por lo que a travs de la PAAF estas clulas se encuentran dispuestas de manera
aislada, tienden a ser redondas u ovales (figura 3E y F) y con bordes citoplasmticos bien
definidos. Este tipo de neoplasias producen buena celularidad mediante aspiracin. En este
grupo se encuentran slo cinco tipos de neoplasias: Linfoma, histiocitoma cutneo,
mastocitoma, tumor venreo transmisible y plasmocitoma.
Figura 3.- Estirpe histolgica. Ay B) Epitelio, grupos de clulas redondeadas fuertemente unidas. C y D) Fusiformes,
grupos de clulas alargadas de bordes citoplasmticos poco definidos y dispuestas aisladas y en grupos no cohesivos. E y
F) Redondas, clulas redondeadas dispuestas de manera aislada.
COMPORTAMIENTO BIOLGICO
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II.- CRITERIOS NUCLEARES
Este grupo de caractersticas son las de mayor peso para establecer el comportamiento
biolgico de la neoplasia (figura 4), ya que el reconocer ms de tres de estas caractersticas
son sugerentes de un proceso potencialmente maligno4,18,25,26,27. Los criterios de malignidad
nuclear se condensan en la tabla 1
Macronuclolos Los nuclolos son evidentes en clulas que de manera normal los presentan
GRADO DE DIFERENCIACIN
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Figura 4.- Criterios de malignidad nuclear. A) Anisocariosis marcada (flecha) por macrocariosis , Diff Quik 400x. B)
Binucleacin (flecha), diferentes patrones de cromatina, Papanicolaou 1000x. C) Moldeamientos nucleares (flecha), los
ncleos muestran nuclolos angulados, Papanicolaou 400x. D) Anisocariosis, aumento de la relacin ncleo citoplasma y
diferentes patrones de cromatina, Papanicolaou 1000x. E) Aumento de la relacin ncleo citoplasma, nuclolos evidentes,
varios nuclolos angulados con anisonucleoliosis, Papanicolaou 1000x. F) Anisocariosis, al centro se identifica una mitosis
atpica o asimtrica, Papanicolaou 1000x.
Figura 5.- Grado de diferenciacin citoplasmtica. A) Melanoma bien diferenciado, es evidente la presencia de grnulos
dorados en el citoplasma, Papanicolaou 1000x. B) Melanoma pobremente diferenciado, los citoplasmas no muestran grnulos
de melanina, Diff Quik 1000x. C) Mastocitoma bien diferenciado, abundantes grnulos basfilos intracitoplasmticos, Diff
Quik 1000x. D) Melanoma pobremente diferenciado, ntese la ausencia de grnulos en el citoplasma, Wrigth 1000x. E)
Carcinoma de clulas escamosas bien diferenciado, lmina de clulas cohesivas con queratinizacin citoplasmtica (flecha),
Papanicolaou 1000x.
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NEOPLASIAS COMUNES EN ANIMALES DOMSTICOS
a) Epidermis: Esta porcin de la piel est compuesto por un epitelio plano escamoso
queratinizado, por lo que la neoplasia epidrmica que se presenta con mayor frecuencia es
el carcinoma de clulas escamosas. Esta neoplasia est conformada por epitelio escamoso
con desarrollo asincrnico con abundantes criterios de malignidad y diferentes grados de
queratinizacin citoplasmtica (figura 6A y 6B).
b) Dermis (anexos de piel): A nivel de dermis existen mltiples estructuras, de las cuales
es factible que se desarrolle una neoplasia. Sin embargo las ms comunes se desarrollan
a partir de glndulas sebceas (adenoma sebceo y hepatoide), de folculos pilosos (quiste
epidermoide) y de epitelio de reserva (tumor de clulas basales)
1.- Adenoma sebceo: Se caracteriza por la presencia de grupos cohesivos de clulas
redondeadas con abundante citoplasma vacuolado (sebocitos) rodeadas por clulas
basales (figura 6C).
2.- Adenoma hepatoide: Es comn encontrar grupos de clulas redondeadas, unidas entre
s y con abundante citoplasma de aspecto granular, ncleos redondos y monomorfos.
Adems de la presencia de clulas basales a la periferia (figura 6D).
3.- Quiste epidermoide: En esta entidad benigna se presenta gran cantidad de clulas
escamosas queratinizadas, anucleadas y sin atpias en grupos sobrepuestos. Adems de
material proteinceo laxo y en ocasiones algunos macrfagos (figura 6E).
4.- Tumor de clulas basales: Son altamente celulares, compuestas por pequeas clulas
(el doble de un eritrocito). Son redondas con ncleo redondo, hipercromtico y monoformo;
y muy escaso citoplasma. Estas clulas se disponen en lminas y cordones (figura 6F).
Figura 6.- Neoplasia epiteliales comunes. A y B) Carcinoma de clulas escamosas bien diferenciado. Binucleaciones y
queratinizacin citoplasmtica (flecha), Papanicolaou 1000x. C) Adenoma sebceo. Grupos de Sebocitos bien diferenciados,
Papanicolaou 1000x. D) Adenoma hepatoide, clulas hepatoides bien diferenciadas delimitadas por epitelio basal (flecha),
Wirgth 1000x. E) Quiste epidermoide, clulas escamosas sobrepuestas, Papanicolaou 1000x. F) Tumor de clulas basales,
Papanicolaou 1000x
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Citolgicamente, al igual que por histopatologa es difcil establecer un diagnstico preciso
de las neoplasias de clulas fusiformes, justamente debido a esta morfologa celular. Sin
embargo apoyados en el largo y grosor de las caudas citoplasmticas, las variaciones en
el patrn de cromatina, en el aspecto y cantidad de la matriz en la que se encuentran
inmersas las clulas tumorales puede elaborarse el diagnstico con mayor precisin. Las
neoplasias mesenquimatosas de clulas fusiformes ms comnmente diagnosticadas a
nivel de piel son los fibrosarcomas, hemangiosarcomas, hemangiopericitomas y
rabdomiosarcomas. Adems de los melanomas y los lipomas4,10,16,23,25,28,32,33.
Figura 7 .- Neoplasias mesenquimatosas comunes. A) Fibrosarcoma, Diff QuiK, 1000x. B) Hemangiosarcoma, ntese la
formacin de luces vasculares, Papanicolaou 1000x. C) Hemangiopericitoma, clulas fusiformes cortas de bordes
citoplasmticos deshilachados, Papanicolaou 1000x. D) Rabdomiosarcoma, clulas plemrficas de citoplasma eosinoflico
y granular, multinucleacin (flecha), Papanicolaou 1000x. E) Melanoma, las clulas presentan moderada cantidad de
pigmento, al centro un melanfago, Papanicolaou 1000x. F) Lipoma, grupo de adipocitos maduros bien diferenciados,
Papanicolaou 100x.
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5.- Melanoma: Son clulas que morfolgicamente pueden parecer las tres estirpes
histolgicas. Los ncleos son eucromticos con un nuclolo prominente y los citoplasmas
con cantidad variable de grnulos caf, segn el grado de diferenciacin (figura 7E)16.
6.- Lipoma: Estn conformados por adipocitos maduros, bien diferenciados y con ncleo
inconspcuo. Estos se disponen en grandes grupos entremezclados con capilares
sanguneos (figura 7F)
Figura 8.- Neoplasias comunes de clulas redondas. A) Aspecto macroscpico del linfoma, las fechas sealan
linfadenomegalia. B) Linfoma, abundantes lifoblastos atpicos con anisocarisosis y nuclolos evidentes, Diff Quik 400x. C)
Mastocitoma bien diferenciado, ntese la presencia de abundantes grnulos basfilos en el citoplasma, Wright 1000x. D)
Tumor venreo transmisible, anisocitosis marcada, nuclolos evidentes y abundantes vacuolas intracitoplasmticas, Diff Quik
400x. E) Histiocitoma en regresin, abundantes clulas redondas de aspecto macrofgico entremezcladas con linfocitos
(flechas) Papanicolaou 400x. F) Plasmocitoma, clulas redondeadas con ncleo tendiente a ser excntrico y citoplasma
densamente basoflico con aspecto de clula flama (flecha) Diff Quik 1000x.
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variable, presentan abundantes mitosis atpicas cuando estn en desarrollo y como son
autolimitantes, cuando estn en regresin presentan linfocitos (figura 8E ).
5.- Plasmocitoma: Son neoplasias moderadamente celulares, las caractersticas
diferenciales incluyen ncleo en localizacin excentrca, citoplasmas densamente
basoflico, puede o no presentar zona clara paranuclear y puede mostrar en el reborde
citoplasmtico tonos rojizos denominndose clulas flama (figura 8F)8.
Figura 9 .- Neoplasias de glndula mamaria y testculo. A) Adenoma mamario, grupo de clulas epiteliales
monomorfas con discretos nuclolos, Papanicolaou 1000x. B) Carcinoma mamario, ntese el incremento de la
relacin ncleo citoplasma, nuclolos evidentes, angulados y multinumerarios, Papanicolaou 1000x. C) Tumor
mixto mamario, se presentan grupos de clulas epiteliales y al centro dos osteoclastos, Papanicolaou 1000x.
D) Testculo, seminoma, proliferacin de epitelio germinal con marcadas caractersticas de malignidad,
Papanicolaou 1000x. E) Testculo, Tumor de clulas de Leydig, ntese los citoplasmas abundantes y
vacuolados, adems de finos nuclolos (flechas), Papanicolaou 1000x. F) Testculo, tumor de clulas de Sertoli,
Papanicolaou 1000x.
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multinucleacin y mitosis atpicas. En segundo trmino se encuentran las neoplasias de
clulas intersticiales (de clulas de Leydig) los cuales son moderadamente celulares (figura
9E), las clulas son ovoides, con abundante citoplasma vacuolado y por lo general exhiben
pocos criterios de malignidad. Finalmente como tercer rubro se encuentran las neoplasias
de clulas sustentaculares (de Sertoli) compuestas por moderada cantidad de clulas
tendientes a ser alargadas con ncleo redondeado, monomorfo y en posicin excntrica
(figura 9F). En todos los casos es evidente la ausencia de espermatognesis3,10,11,15,26.
CITOLOGA EXFOLIATIVA
MUCOSA VAGINAL
La citologa vaginal se puede utilizar en todas las especies, aunque su mayor aplicacin ha
sido en perras, ya que por su relacin directa con los niveles de hormonas reproductivas
(estrgenos y progesterona) es utilizada para evaluar de una manera sencilla y rpida el
estatus hormonal de la hembra, tanto para establecer las diferentes etapas del ciclo estral
como alteraciones en este, infecciones y/o neoplasias. Las clulas que conforman el epitelio
vaginal tienen caractersticas distintivas segn el estadio de maduracin en que se
encuentren (figura 10), cada una de ellas tiene diferentes implicaciones por lo que es
necesario conocer su morfologa.
Clulas basales: Son las clulas ms pequeas y profundas del epitelio miden entre 13 y
20 m, son redondeadas con un gran ncleo redondeado y funcional, con escaso
citoplasma basfilo y con una relacin ncleo citoplasma 1:1. Se encuentran adheridas a la
membrana basal y de ellas depende el mantener la celularidad de esta mucosa; es decir
corresponde al epitelio germinal. Por esta caracterstica, estas clulas se encuentran
presentes durante toda la vida de la hembra, ya que no responden al estmulo de las
hormonas reproductivas. Sin embargo su presencia en los preparados citolgicos es muy
rara, puesto que estn recubiertas por los otros estratos (figura 10). Las nicas situaciones
en las que podemos encontrarlas son por un lado que no exista estmulo hormonal (hembra
prepber o castrada) y segundo que presente una inflamacin que produzca una exfoliacin
excesiva (vaginitis ulcerativa).
Clulas parabasales: Son levemente ms grandes que las clulas basales (figura 10),
miden alrededor de 25 m. Son redondeadas a ligeramente ovales, con ncleo redondeado
y grande (prcticamente del mismo tamao que las basales ) y de aspecto vesiculado.
Comparativamente con mayor cantidad de citoplasma que las basales, con una relacin
ncleo citoplasma de 1:3. Estas clulas tampoco estn condicionadas al estmulo de las
hormonas reproductivas. Sin embargo, debido a la proliferacin de otros estratos durante
el ciclo estral su cantidad es variable.
Clulas intermedias: Son clulas ligeramente ms grandes que las parabasales (dos
veces aproximadamente) su tamao flucta entre los 20 a 40 m y esta variacin se deriva
de la cantidad de citoplasma pues las ms profundas que estn en contacto con las clulas
parabasales son ovoides y son reflejo de una baja actividad estrognica (figura 10).
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Mientras que las ms grandes muestran abundante citoplasma de forma polidrica, mismo
que responde a un mayor estmulo por parte de los estrgenos. Por su parte los ncleos
son redondeados, vesiculados muy similares a los de las parabasales.
Dentro de las clulas intermedias existe otra variante morfolgica denominada como
clulas naviculares o en forma de barca. Estas son intermedias grandes que por efecto
de progesterona adelgazan su citoplasma, lo que hace que sus bordes se plieguen.
Clulas superficiales: Son las clulas de mayor tamao en el epitelio vaginal, miden entre
40 y 60 m y muestran abundante citoplasma de bordes angulares y con apetencia
eosinoflica. Los ncleos son muy pequeos, algunos de ellos an viables y otros ms en
picnosis; por lo que se denominan superficiales nucleadas no cariopicnticas y
cariopicnticas respectivamente, siendo reflejo de la actividad estrognica incrementada.
Finalmente cuando las concentraciones de estrgenos llegan a su pico mximo estas
clulas superficiales pierden el ncleo denominndose superficiales anucleadas o
escamosas (figura 10).
Figura 10.- Clulas del epitelio vaginal. Se muestran los diferentes tipos de clulas vaginales comparando su estructura
histolgica (izquierda) con su aspecto citolgico (derecha).
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predominio de clulas intermedias. Finalmente es factible evidenciar neoplasias en esta
localizacin, siendo la ms comn el tumor venreo transmisible (TVT) y en menor
proporcin por extensin anatmica puede detectarse un carcinoma de clulas
transicionales proveniente de vejiga urinaria. Las neoplasias de msculo liso (leiomiomas
vs leiomiosarcomas) son comunes en vagina; sin embargo se localizan en la pared
muscular y rara vez invaden la mucosa por lo que su presencia en el frotis vaginal es muy
poco comn2,3,7,8,11,25.
Tabla 2.- Proporcin de clulas en las diferentes etapas del ciclo estral en perra y en
inflamacin de tracto reproductor.
MUCOSA ORAL
Esta conformada por epitelio plano escamoso, siendo una mezcla de clulas superficiales
e intermedias, las cuales coexiste con una flora bacteriana mixta compuesta por cocos y
bacilos ; adems de una bacteria saprfita de orofarnge, denominada Simonsiella sp (figura
11A). Las causas ms comunes por las cuales se decide muestrear esta mucosa son la
presencia de lesiones ulcerativas o de tumoraciones7,10,25.
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MUCOSA TICA
Este tipo de muestras son moderadamente celulares y en su mayor parte estn
conformadas por epitelio plano escamoso queratinizado entremezclados con un material
seruminoso, no se detecta la presencia de leucocitos y microorganismos. Las otitis se
caracterizan por un marcado incremento en la descamacin celular con mayor secresin
seruminosa y cantidad variable de neutrfilos. Es posible identificar la presencia de
bacterias, Malassezia pachydermatis (figura 11C), o bien ectoparsitos como Demodex
canis, Otobius megnini, Notoedres cati entre otros. Las alteraciones neoplsicas tambin
pueden observarse siendo comunes los carcinomas ceruminosos y los
plasmocitomas7,10,21,31.
MUCOSA RESPIRATORIA
La celularidad del tracto respiratorio cambia segn la porcin que sea colectada, por
ejemplo la cavidad nasal se caracteriza por epitelio plano escamoso entremezclado con
algunos leucocitos y una flora bacteriana mixta. A nivel de cornetes y senos nasales el
predominio es el epitelio cilndrico ciliado (figura 11D), y en bronquios se adicionan
abundantes macrfagos (figura 11E), hasta llegar a alveolos en donde se observan finos
hilos de moco alveolar denominados espirales de Curshmann (figura 11D). Este tipo de
muestras son excelentes para detectar inflamacin ya sea aspticas o con participacin de
microorganismos; adems de neoplasias primarias de epitelio respiratorio como son el
carcinoma de clulas escamosas en la porcin anterior y en bronquios carcinoma
bronquiolo alveolar5,7.
Figura 11 .- Citologa de las mucosas. A) Oral, clula escamosa con Simonsiella sp en su citoplasma, Diff
Quik 1000x. B) Conjuntiva, epitelio plano entremezclado con neutrfilos degenerados y bacterias cocoides, Diff
Quik 1000x. C) tica, epitelio plano escamoso y Malassezia sp (flecha), papanicolaou 1000x. D) Nasal, clula
cilndrica ciliada y neutrfilos, Papanicolaou 1000x. E) Bronquial, macrfagos entremezclados con material
proteinceo, Papanicolaou 1000x. E) Alveolar, material proteinceo denso, neutrfilos y espirales de
Curshmann (flecha), Papanicolaou 100x.
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CITOLOGA DE LQUIDOS
Las efusiones corporales segn sus caractersticas fisicoqumicas y citolgicas pueden ser
divididos en tres grandes grupos segn su origen: trasudados simples, trasudados
modificados y exudados. Los dos primeros son resultados de trastornos hemodinmicos
asociados a cambios de presiones oncticas e hidrostticas y los exudados son resultado
de un incremento en la permeabilidad vascular6,20,24,25,29.
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Tabla 3.- Caractersticas diferenciales de las efusiones
TRASUDADO SIMPLE EXUDADO
LQUIDO SINOVIAL
El diagnstico de la enfermedad articular se basa tanto en la historia clnica, como en los
hallazgos a la exploracin fsica; adems del uso de diferentes mtodos diagnsticos como
son la radiologa, cultivos bacteriolgicos, serologa y el anlisis del lquido sinovial entre
los mtodos de laboratorio ms utilizados. El anlisis del lquido sinovial debe incluir las
caractersticas fsicas resaltando la apariencia del fluido; as como su consistencia
(viscosidad), determinacin de protenas, conteo total de clulas nucleadas y evaluacin
microscpica12,20,24,25,29.
Apariencia: Normalmente el lquido sinovial es transparente a ligeramente turbio, es
incoloro a amarillo plido. Si el lquido se torna turbio sugiere incremento en la cantidad de
clulas, lo que se asocia a inflamacin. Puede o no tener cambios de color, lo ms comn
es que se torne rojizo, por lo que se debe diferenciar una hemartrosis de una hemorragia
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iatrognica. En la primera el color es difuso, mientras que en la iatrogenica est
parcialmente mezclado dando la apariencia de hilos rojizos. Adicionalmente este lquido
presenta una caracterstica muy particular que lo diferencia del resto de los lquidos, que es
la tixotropa. Este fenmeno le confiere la capacidad de formar un gel en estado de reposo
y cuando se vuelve a mover recupera su apariencia lquida.
Viscosidad: En condiciones normales el lquido sinovial es viscoso por su alta
concentracin de cido hialurnico (mucina). Por lo que se debe evaluar esta propiedad
viscosa formando estras al separar la aguja de la jeringa, las cuales por lo general alcanzan
una longitud de ms de 2.0 cm, reportndose como normal, disminuida o marcadamente
disminuida. Esta disminucin de la propiedad viscosa es patolgica y se asociada a
inflamacin. Otra manera semicuantitativa de evaluar esta propiedad es a travs de la
prueba de la mucina (figura 13), la cual consiste en colocar una parte de lquido sinovial con
4 partes de cido actico glacial al 2.5%. El cido tiende a coagular la mucina, de tal manera
que podemos obtener diferentes resultados:
Se debe considerar que la adicin de EDTA como anticoagulante altera el resultado de esta
prueba, debido a que el EDTA degrada el cido hialurnico.
Concentracin de protena: La cuantificacin de protena por lo general se realiza por
refractometra, aunque pueden utilizarse los mtodos de bioqumica clnica
(espectrofotometra), fluctuando entre 1.8 a 4.8 g/dl. Cuando existe inflamacin incrementa
notablemente la cantidad de protenas.
Conteo total de clulas nucleadas: Esta determinacin puede hacerse de manera manual
mediante el uso del hemocitmetro o a travs de un contador automatizado. La cantidad
normal de clulas flucta entre 500 a 3000 cel/l.
Evaluacin citolgica: La evaluacin citolgica representa la parte ms importante del
examen del lquido, ya que con slo una gota se puede obtener suficiente informacin del
tipo de artropata. Lo primero que se tiene que considerar es la cantidad de clulas, es decir
si es adecuada o est incrementada y evaluar la proporcin de clulas; ya que de manera
normal existe un predominio de linfocitos, seguido por macrfagos y en mucha menor
proporcin (<10%) neutrfilos (figura 14A). A continuacin se debe evaluar el aspecto de la
mucina, misma que se aprecia como un material proteinceo muy denso y homogneo, en
el que estn inmersas las clulas. Dada esta viscosidad las clulas se distribuyen formando
lneas. A diferencia de cuadros inflamatorios en los que la mucina se aprecia como un
material fibrilar y las clulas se distribuyen de manera aleatoria. Pudiendo identificarse si la
artropata es degenerativa, inflamatoria, inmunomediada o neoplsica (figura 14B y C).
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LQUIDO CEFALORRAQUIDEO
La citologa del Lquido cefalorraqudeo (LCR) es una herramienta til dentro del protocolo
diagnstico de las enfermedades neurolgicas, en asociacin directa con los datos de la
historia clnica y los estudios de imagen. Pudiendo ser til tambin en pacientes que
presentan dolor en cuello y en aquellos con fiebre de origen inexplicable. El manejo de este
lquido es complicado, puesto que tiene concentraciones muy bajas de protena, lo que trae
como consecuencia que las clulas se lisen muy rpidamente. Considerndose como
tiempo ptimo de procesamiento no ms de 30 minutos. La evaluacin consiste en
determinar la apariencia, la cantidad de protena, el conteo total de clulas nucleadas y por
supuesto la evaluacin microscpica6,9,14,20.
El LCR es incoloro a ligeramente amarillento y transparente, ya que el conteo celular es
muy bajo (< 8.0 cel/l) y estas clulas prcticamente corresponden a linfocitos (figura 14D).
Por su parte la cantidad de protenas es extraordinariamente baja fluctuando entre 14 y 46
mg/dl, lo que hace difcil su determinacin mediante el uso de tiras reactivas o bioqumica
clnica, utilizndose en este caso a la electroforesis.
Cuando existen alteraciones en sistema nervioso central existen cambios en el color y en
el aspecto, ya que tienden a ser rojizos en las hemorragias y cuando existe un incremento
en la cantidad de clulas nucleadas o pleocitosis el LCR se torna turbio. Las pleocitosis
pueden ser neutroflicas cuando existen >50% de neutrfilos, pleocitosis linfoctica si
presenta >75% de linfocitos y mixta si muestra proporciones similares de neutrfilos y
mononucleares (14 E y F).
Figura 14 .- Citologa de lquidos . A) Lquido sinovial sin alteraciones, ntese la linealidad de las clulas, sugerente de
mucina de buena calidad, Papanicolaou 100x. B) Lquido sinovial, artritis degenerativa, macrfagos y mucina de parcialmente
degradada y de aspecto fibrilar (flecha), Papanicolaou 1000x. C) Lquido sinovial, artritis sptica, neutrfilos degenerados y
mucina degradada (flecha), Papanicolaou 1000x. D) LCR sin alteraciones, se muestran linfocitos, Wrigth 1000x. E) LCR
pleocitosis mixta, macrfagos y neutrfilos, Papanicolaou 1000x. F) LCR, pleocitosis neoplsica, abundantes clulas
neoplsicas con anisocariosis, Papanicolaou 1000x.
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