Vous êtes sur la page 1sur 5

DOSAGE ELECTROPHOTOMETRIQUE DES

VITAMINES A ET C DANS LE LAIT - INFLUENCE


DE LA STABILISATION ET DE LA CONSERVATION
Mlle Andree Vinet, M. Paul Meunier

To cite this version:


Mlle Andree Vinet, M. Paul Meunier. DOSAGE ELECTROPHOTOMETRIQUE DES VI-
TAMINES A ET C DANS LE LAIT - INFLUENCE DE LA STABILISATION ET DE LA
CONSERVATION. Le Lait, INRA Editions, 1941, 21 (207 208), pp.239-242. <hal-00927852>

HAL Id: hal-00927852


https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-00927852
Submitted on 1 Jan 1941

HAL is a multi-disciplinary open access Larchive ouverte pluridisciplinaire HAL, est


archive for the deposit and dissemination of sci- destinee au depot et a la diffusion de documents
entific research documents, whether they are pub- scientifiques de niveau recherche, publies ou non,
lished or not. The documents may come from emanant des etablissements denseignement et de
teaching and research institutions in France or recherche francais ou etrangers, des laboratoires
abroad, or from public or private research centers. publics ou prives.
Mlle A. VINET ET 1\1. P. MEUNIER. - DOSAGE 239

DOSAGE LECTROPHOTOMTRIQU~
DES VITAMINES AETC DANS LE LAIT - INFLUENCE
DE LA STABILISATION ET DE LA CONSERVATION
par
. MlleANDRE VINET et M. PAUL MEUNIER

Il importe que les besoinsen vitamines de l'enfant soient oouverts;


mme si lon doit recourir aux laits concentrs et conservs. Il est
bon de noter que dans ces dernires annes le dosage des vitamines
A et C du lait est devenu trs accessible aux chimistes et qu'il est
ais de suivre la conservation de ces facteurs au cours des oprabious
industrielles de traitement. Nous .donnons ici les techniques qui
nous ont donn satisfaction et quelques- uns de nos premiers rsultats.

1 Dosage de la vitamine A
Aprs essai de diffrentes techniques pour la prparation de
I'Insaponifiable du lait, nous 'avons retenu la mthode de VAN
BEVER [1] sans isolement pralable des matires grasses.
Extraction :
1 Ajouter 100 cm" de lait, 100 cm'' d'alcool .96 et 20 grammes
de potasse dans 10 cm" d'eau. Porter le mlange au bain-marie
reflux pendant 2 heures;
2 Extraire l'ther de ptrole par deux fois 100cm3 et une
fois 50 crn ;
3 Dessher l'ther sur S04Na2 pur anhydre. Evaporer aprs
filtration et desscher sous vide;
4 R~prendre le rsidu sec dans5 cm" de chloroforme (1).
Dosage:
Pour le dosage proprement dit, nous avons, suivi la technique de
MEUNIERet RAOUL[2].
Solutions ncessaires :
Ractif 'de CARRet PRICE (solution sature de trichlorure d'anti-
moine dans le chloroforme :30% environ de SbCP). III

Anhydride actique pur.


Dans la cuve soude en verre Pyrex de l'lectrophotomtre de
l'un de nous [3], verser 0 cm3' 4 de la solutionchloroformique prc-
dente. Ajouter 2 gouttes d'anhydride actique et complter au trait
de jauge (6 cm") par l~ ractif de CARR~t PRICE.
(1) Le chloroforma d~it bre pralablement distill et recueilli sur CaCl' pour le
priver de toute t'race d'eau ou d'alcool qui prcipiterait sur ssc-.
240 Mlle A. VINET ET M. P. MEUNIER. -'--- DOSAGE

. La solution se colore en bleu et, dans .le cas de la vitamine A


,seulement, cette coloration s'affaiblit rapidement.
Faire les lectures I'lectrophotomtre de 15 en 15 secondes,
, Jusqu' 2 minutes environ, avec l'cran orang de l'appareil.
Tracer la courbe, cintique des absorptions lumineuses et extra-
poler jusqu' l'origine. La diffrence entre ce 'chiffre et la valeur de
l'absorption de base, multiplie par le coefficient d'talonnage de
l'appareil, donne le taux de vitamine A dans la prise d'essai. (L'ab-
sorption de base s'obtient en remplaant le ractif de C.ARRet PRICE
par le chloroforme et en faisant la lecture comme prcdemment.
dans l'cran orang).
En outre, nous avons dtermin parfois la teneur en carotne
du 'lait (provitamine A) et- cel~ par simple absorption ~ans l'cran
bleu (mme cuve) en admettant que -c'est le seul pigment jaune
de la fraction insaponifiable du lait. (Voirvpar exemple, Dnco '[4].)
Voici les teneurs en vitamine A que nous avons obtenues:
En U. 1. par litre
Lait normat Ojco (d'hiver) 0 0 0 0 0 0 0 1.010
Aprs stabilisation (1 jour) 0 0 0 0 0 0 o. 885
Aprs stabilisation (4jours) ~. 0 00 0 0 : 890
Aprs stabilisation (5 jours) 0 00 0 0 0 720
Aprs stabilisation (3 semaines) 0 0 o ", 730

Le carotne ne parat pas se modifier sensiblement et oscille


autour de 200 par litre (300 U. Jo).
Ces laits ontt stabiliss de la faon suivante: homognisation,
dgazification, prchauffage 700, .strilisation brve 126 en
botes mtalliques closes, refroidissement rapide. Comme l'a dj
fait remarquer Mo J.AVILLIER[5] et si l'on se reporte au tableau
ci-dessus, l'ensemble de ces oprations se traduit par une chute de
l'activit vitaminique A, chute qui n'est pas catastrophique et qui,
une fois ralise, ne s'intensifie gure avec le temps .
Pour les laits condenss, nous avons obtenu les chiffres suivants:
En U. 1. par litre
Lait Gloria . 0 0 0 0 0 0 0 0 ; 0 0 .0 0 0 : 1.800
Lait Mont-Blanc o. 0 : 0 0 1.020

La perte de vitamine A est .certainement plus sensible que pour


les laits stabiliss, la concentration tant d'au moins moiti volume.
2 Dosage de la vitamine C.
Pour la dtermination de la vitamine C antiscorbutique, nous
avons employ la mthode de MEUNIER [6] base sur l'tude
cintique de la dcoloration du 2-6 d~chlorophnol-indophnol.
LECTROPHOTOMTRIQUE DES VITAMINES A ET C 241

Cette vitamine tant minmment oxydable, il est ncessaire de


faire le dosage le plus rapidement possible. (Voir ce sujet MEUNIER
et MENTZER [6].) , ,
Extraction :'
Agiter pendant quelques instants 50 cm" de' lait et 50 cm" de la
solution aqueuse suivante :
P03H - 2%
CCL3C02H 40/0'
Filtrer sur Buchner.
Dosage:
Ajouter 5 cm" de cette solution 5 cm" d'une solution tampon
pH 4 (acide actique normal +
1/5e de son volume d'une solution
d'actate de sodium 136 grammes par litre).
Verser dans la cuve de l'lectrophotomtre 5 cm de ce nouveau
mlange, en prendre l'a bsor pt.ion .de base (cran' vert) et aj outer
l cm" de solution de dichlorophnol-ind6phnoHl). Mesurer I'absorp-
tion de 15 en 15 secondes pendant 2 minutes.
La valeur de la dcoloration de l'indophnol la 15e seconde
multiplie par le coefficient d'talonnage de l'appareil donne la
quantit d'acide ascorbique contenue dans 2 cm 5 de lait.
D'aprs les, donnes que nous possdons, le lait de vache prlev
la mamelle contient jusqu' 25 milligrammes d'acide ascorbique
par litre. Ce chiffre est d'ailleurs extrmement varia ble et dpend en
particulier de l'alimentation de la vache laitire. Nous n'avons
jamais obtenu ce chiffre pour la raison que nous indiquions plus haut.
Voici quelques rsultats obtenus sur le lait OFCO, avant et
aprs stabilisation pratique' comme il a dj t indiqu propos
de la vitamine A.

Avant stabilisation Aprs stabilisation

En milligrammes par litre

1re Srie:
Arrive " . 9,3 5,7
Aprs 3 jours . 1,8 5,6
Aprs 4 jours . 1,6 5,6

2e Srie:

Arrive . 14,4 10
Aprs 4 heures . 9 10
Aprs 1 jo ur . 2,8 8,2
(1) Peser 5 mgr. 'de 2-6 dichlorophnol-indophnol dans une fiole jauge de 50 cm".
Ajouter environ 40 cm" d'eau bi-distille rcemment bouillie, 2 cm" d'une solution-
tampon pH 6,8 et complter 50 cm" parl'eau bi-distille.

LE LAIT, 1941 16

L,
242 Mlle A. VINET ET M. P. MEUNIER. - DOS'AGE

Comme il fallait s'y attendre, nous voyons que pour la vitamine


C la chute dactivit au cours de la ste.bilisat.ion- atteint 30 40%,
mais, dans ce cas, les teneurs ne varient plus sensiblement ensuite.

Acide ..ascorbique Lactose


Laits condenss
En milligrammes En grammes
par litre 1~_-.:.- par litre _

Nesbl (non sucr) . 30,24 83


Gloria (non sucr) . D,8' 68
Mont-Blanc (sucr) ~ 34,5 95,6

Conclusions

Comme la pasteurisation dont les effets ont t dj. bien tudis


(voir un rsum rcent dans KAY [8]), le procd dit de sta bilisat.ion
altre peu l'activit en vitamine Adn Iait ; mais abaisse nettement
son titre en vitamin~ C (30 40%). 1

'Quant aux laits condenss, on remarquera queIeurs teneurs en


vitamine A et C diffrent notablement d'un chantillon l'autre.
En tous cas, et quel que soit le mode de conservation chcisi, p
nous parat utile de rechercher comment varient les teneurs en
vitamines avec l~ provenance des laits et avec 'le temps. l ,

Nous pensons qu'avec les mthodes' chimiques relativement'


. simples que nous possdons aujourd'hui, de tels contrles peuvent'
rapidement entrer en pratique.
BIBLIOGRAPHIE
[IJ VAN BEVER. Arch. Nerl ..Physiol., 1938, 23, 552.
[2J P. MEUNIER et Y. RAOUL. Bull. Soc. Ohim. Biol., 1938.)
[3J P.MEUNIER. Bull. 'Soc, Ohim. etsi., 1937,19, 113. Construit par JOBIN
et YVON, Paris- Raspail.
[4] M. DECO. O. R. Soc. Biol., 1939,130,817, 819.
[5] M. JAVILLIER. O. R. Acad. Ayr., 1940,26, 369 .
. [6] P. ,MEUNIER. Bull. Soc. Ohim. Biol., 1937, 19, 877.
[7J P. MEUNIER et Ch. MENTZER. O. R. Soc. Biol., 1938, 129, 1075.
[8] KAY. Nutri. Abs. Re.; 1939,9, 1. \

(Laboratoire de Chimie Biologique de la Facult des Sciences


de Paris, 96, Bd Raspail, Professeur ,M.JAVILLIER).