AUTOKLAF

Autoklaf adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk mensterilisasi suatu benda
menggunakan wap bersuhu dan bertekanan tinggi (1210C, 15 lbs) selama kurang lebih 15 minit.
Penurunan tekanan pada autoklaf tidak bertujuan untuk membunuh mikroorganisma, melainkan
meningkatkan suhu dalam autoklaf. Suhu yang tinggi inilah yang akan membunuh
microorganisme. Autoklaf terutama ditujukan untuk membunuh endospora , iaitu sel bertahan
yang dihasilkan oleh bakteria , sel ini tahan terhadap pemanasan, kekeringan, dan
antibiotik. Pada spesies yang sama, endospora dapat bertahan pada keadaan persekitaran yang
boleh membunuh sel vegetatif bakteria tersebut. Endospora boleh dibunuh pada suhu 100C,
yang merupakan titik didih air pada tekanan atmosfera normal. Pada suhu 121C, endospora
boleh dibunuh dalam masa 4-5 minit, di mana sel vegetatif bakteria boleh dibunuh hanya dalam
masa 6-30 saat pada suhu 65C.

Perhitungan masa pensterilan autoklaf bermula apabila suhu di dalam autoklaf mencapai
121C. Jika objek yang disterilkan cukup tebal atau banyak, transfer panas pada bahagian
dalam autoklaf akan melambat, sehingga terjadi perpanjangan waktu pemanasan total untuk
memastikan bahawa semua objek bersuhu 121C untuk waktu 10-15 minit. Lanjutan masa juga
diperlukan ketika cecair dalam jumlah besar akan autoklaf kerana jumlah yang besar
memerlukan waktu yang lebih lama untuk mencapai suhu sterilisasi. Prestasi autoklaf diuji
dengan indicator biologi, contohnya Bacillus stearothermophilus .

Terdapat tiga jenis autoklaf, iaitu gravity displacement , prevacuum atau high vacuum ,
dan steam-siram pressure-pulse. Perbezaan ketiga jenis autoklaf ini terletak pada bagaimana
udara dihilangkan dari dalam autoklaf selama proses sterilisasi.

Gravity Displacement Autoclave

Udara dalam ruang autoklaf dipindahkan hanya berdasarkan graviti . Prinsipnya adalah
memanfaatkan keringanan wap berbanding dengan udara, sehingga udara terletak di bawah
wap . Cara kerjanya bermula dengan memasukan wap melalui bahagian atas autoklaf sehingga
udara tertekan ke bawah. Secara perlahan, wap mula semakin banyak sehingga menekan udara
semakin turun dan keluar melalui saluran di bahagian bawah autoklaf, selanjutnya suhu
meningkat dan terjadi sterilisasi. Autoklaf ini boleh bekerja dengan liputan suhu antara 121-
134C dengan waktu 10-30 minit.
Prevacuum atau High Vacuum Autoclave
Autoklaf ini dilengkapi pam yang memindahkan hampir semua udara dari dalam autoklaf. Cara
kerjanya bermula dengan pengeluaran udara. Proses ini berlangsung selama 8-10 minit. Apabila
keadaan vakum tercipta, wap dimasukkan ke dalam autoklaf. Akibat kevakuman udara, wap
akan berkaitan dengan seluruh permukaan benda, kemudian terjadi peningkatan suhu sehingga
proses sterilisasi berlangsung. Autoklaf ini bekerja dengan suhu 132-135C dengan waktu 3-4
minit.

Steam-Flush Pressure-Pulse Autoclave autoklaf ini menggunakan aliran wap dan dorongan
tekanan di atas tekanan atmosfera dengan rangkaian berulang. Masa kitaran pada autoklaf ini
bergantung pada benda yang disterilkan.