Ao del buen servicio al ciudadano

INSTITUTO ECOLOGICO TECNICO SUPERIOR SAUSA

DILUSIONES SERIADAS

Presentado por:

FLORES ARELLANO FLOR

Curso :
OPERACIONES BASICAS
Semestre:
I
Profesor:
ROBERT

CARRERA:
LABORATORIO CLINICO

JAUJA - 2017
El presente trabajo est dedicado a
nuestros padres quienes da a da
nos guan y aconsejan para poder
seguir en camino del bien
 CAPITULO I

DILUCIN SERIADA
Una dilucin en serie es la reduccin progresiva, paso a paso, de
la concentracin de una sustancia en disolucin.1 Por lo general, el factor de
dilucin en cada paso es constante, lo que da como resultado una progresin
geomtrica de la concentracin, en forma logartmica. Las diluciones en serie se
utilizan para crear disoluciones muy diluidas con precisin, as como
disoluciones para experimentos en los que se pretenda estudiar curvas de
concentracin con una escala logartmica. Las diluciones en serie son
ampliamente utilizadas en las ciencias experimentales,
incluyendo bioqumica, qumica, farmacologa, microbiologa y fsica.

1. Razn de dilucin
La razn del volumen de la solucin original y el volumen de solvente usado
se llama razn de dilucin. Por ejemplo: una dilucin 1:1 se interpreta que por
cada volumen de solucin se aade un volumen de solvente.

2. Factor de dilucin
Corresponde a la razn entre el volumen de la solucin original que se toma
para preparar la solucin y el volumen total luego de preparada (diluida).
Como la cantidad de soluto permanece constante durante la dilucin tambin
equivale a la razn entre la concentracin de la solucin original y
la concentracin de la solucin preparada (diluida).

3. Relacin razn - factor de dilucin

Si se interpreta la razn de dilucin como a:b , entonces el factor de dilucin
correspondiente ser (asumiendo volmenes aditivos) a/(a+b). as una razn
1:1 corresponde a un factor 1/(1+1) = 1/2 o 0,5. Una razn 1:4 corresponde a
un factor 1/(1+4) = 1/5 o 0,2

Anlogamente se puede obtener la razn a partir del factor de dilucin, si f =

a/(a+b) entonces b = a ( (1/f) - 1), si se asume el antecedente a = 1 se puede
obtener el consecuente.
4. Ejemplo de factor de dilucin

Cuando un volumen de una solucin A de concentracin 0,1 M se diluye con

un volumen de agua destilada, haciendo un total de 2 volmenes de solucin
diluida, se habla de una dilucin 1:2 (tambin expresada como ), y la
concentracin B terica as lograda es 0,05 M.

Si la dilucin buscada es 1:10, se tomara un volumen de la solucin 0,1 M y

se aadiran 9 volmenes de disolvente, con lo que la concentracin terica
lograda sera 0,01 M.

En las diluciones en serie es fcil usar factores de dilucin muy grandes como
1/1000 o 1/10 000, que se hacen mediante sucesivas diluciones consecutivas
de factor 1/10.

5. Progresin de las concentraciones

Una dilucin decimal es llamada dilucin logartmica o log-dilucin. En cada
etapa, se toma una parte de la disolucin anterior y se le aaden nueve
volmenes de agua. Una dilucin en serie de este tipo, podra hacer que las
concentraciones sucesivas fuesen 1 M; 0,1 M; 0,01 M; 0,001 M, y as
sucesivamente.

6. Sistema de dilucin
Para una dilucin en serie logartmica, usando un factor de dilucin de diez,
los viales se llenan de 1 ml de disolvente y 0,111 ml de solucin se transfieren
en serie de cada tubo o vial al siguiente, con homogeneizacin de la mezcla
despus de cada paso de dilucin. Para una dilucin en serie semilogartmica,
se transfieren 0,462 ml de solucin; y para una dilucin en serie con factor de
dilucin 4, se transfieren 1,285 ml de un vial al siguiente, en cada paso.

7. TCNICA DE RECUENTO POR DILUCIN

Mediante el uso de esta tcnica de simple ejecucin y fcil interpretacin, se
pueden evaluar diferentes grupos bacterianos segn el medio de cultivo que
contenga el frasco.
 Es aplicable para evaluar bacterias heterotrficas, aerobias totales (BAT),
bacterias reductoras de sulfato (BRS), anaerobias heterotrficas totales
(BAnT), etc.

7.1. Procedimiento.

La tcnica de dilucin por extincin consiste en inocular una serie de

frascos tipo antibitico que contienen 9 ml del medio de cultivo apropiado
segn el tipo de bacteria que se quiera evaluar.

Se obtiene 1 ml de la muestra usando una jeringa descartable, estril, de 1

o 2 ml de capacidad.

Se inocula el primer frasco, sin retirar la aguja se agita el mismo, se invierte

y se retira 1 ml que se inocula en el 2 frasco.

Con una nueva jeringa, se retira 1 ml del frasco N 2, previamente agitado,

y se inocula el frasco N 3 y as sucesivamente, utilizando una nueva jeringa
para cada frasco.

Una vez inoculados los frascos y rotulados convenientemente, se incuban

durante 7 das (BAT, BAT-RF, MFT) o 14 das (BPA) en estufa de cultivo a 5C
respecto de la temperatura del agua muestreada, efectuando lecturas diarias
para observar aquellos frascos que manifiestan desarrollo positivo. Para el caso
de los medios BRS y BRH, el plazo de lectura es de 28 das mximo, realizando
tambin lecturas peridicas.
1. Banco de diluciones seriadas

En otros casos, muy frecuentes en estudios biolgicos, se intenta analizar la

variacin de algn parmetro que depende de la concentracin de un soluto y
se necesita preparar soluciones con distintas concentraciones del mismo.

En este caso es muy conveniente hacer un banco de diluciones

seriadas que no son ms que un tipo de diluciones sucesivas manteniendo
constante el factor de dilucin en cada paso.

2. PREPARACION
3. Un clculo sencillo

La primera ventaja de un banco de diluciones seriadas es que todo el clculo es

muy sencillo. Slo hay que tener en cuenta la concentracin inicial, el volumen
que se quiere conseguir de cada concentracin y el factor de dilucin.

El volmen necesario se asume que es el mismo para todas las concentraciones

y depende de cada experimento. Es fcil ver que el volumen final que se
consigue de cada concentracin es exactamente igual al volumen fijo de solvente
con que se cargan todos los tubos del banco.

El factor de dilucin se calcula o aproxima sabiendo las concentraciones mxima

y mnima que se quieren estudiar y el nmero de concentraciones distintas que
se quieren hacer.

El clculo de las concentraciones en los tubos sucesivos es tan sencillo como

multiplicar la concentracion del anterior por el factor de dilucin (1/2, 1/10 u otro).
Calculadora

Esta utilidad muestra y permite calcular todos los parmetros relevantes de un

banco de diluciones seriadas.

Si se cambia la concentracin inicial o final, o el nmero de tubos, calcula el

factor de dilucin y el volumen de paso.
Si se cambia el factor de dilucin, calcula la concentracin final y el volumen
de paso.
Si se cambia el volumen fijo, calcula el volumen de paso.
Un ejercicio interesante puede ser la elaboracin manual de los clculos
matemticos que realiza esta pequea aplicacin.

0.1
Concentracin inicial

1.0e-5
Concentracin final

5
Nmero de tubos

0.1
Factor de dilucin

C1 = 0.1
900
Volumen fijo C2 = 0.01
C3 = 0.001
Volumen paso 100 C4 = 1.00e-4
C5 = 1.00e-5
.