UNIVERSIDAD NACIONAL

DEL SANTA

FACULTAD DE CIENCIAS

METABOLISMO DE LOS
CARBOHIDRATOS, PROTEINAS Y
LIPIDOS

DOCENTE:
Dr. Biol. Microbio. Carlos Azaero Daz

CURSO:
Microbiologa

ALUMNOS:
 I. INTRODUCCION
La caracterstica ms importante de los carbohidratos es la propiedad de crecer.
Eventualmente la clula se divide, y esa divisin significa duplicacin ordenada de todos
los elementos celulares, esta duplicacin garantiza la transmisin de las caractersticas
de una generacin a otra.
Para realizar un trabajo qumico tan complicado los microorganismos necesitan captar
del exterior sustancias qumicas como los carbohidratos, protenas, lpidos, etc., que
necesariamente deben ser incorporadas a los medios de cultivos.
Como fuente de carbono los microorganismos pueden utilizar monosacridos como
glucosa, disacridos como sacarosa, maltosa, etc. Y polisacridos como almidn
celulosa, etc. La capacidad de utilizar o no un determinado sustrato dependen de la
presencia o no de las enzimas especficas que estn gobernadas genticamente.
La glucosa
La glucosa es un monosacrido que es utilizado por la mayora de microorganismos,
cuando es incorporado a un medio de cultivo puede ser metabolizado por diferentes
vas metablicas y derivar fcilmente en la produccin de cido/gas.
La formacin de cido se puede evidenciar adicionando al medio un indicador de pH
como el rojo de fenol que en alcalinidad es rojo y en acidez es amarillo. La observacin
de gas puede ser observada mediante la acumulacin de gas en tubos invertidos
(campana de Durham) que son incorporados en los tubos con medio glucosado.
El almidn
El almidn es un polmero de glucosa y es usado como fuente de carbono por aquellos
microorganismos que tienen capacidad de hidrolizarlos en sustancias simples y
asimilables. Esta capacidad est gobernada genticamente por la sntesis o no de
amilasas que son enzimas producidas por ciertos microbios cuando crecen en presencia
de almidn.
Los microorganismos que producen amilasas y por consiguiente hidrolizan el almidn
(almidn negativo) y la aparicin de zonas claras indica la ausencia de almidn
(almidn positivo)

II. OBJETIDOS
Demostrar la degradacin de la glucosa en forma aerbica, anaerbica y por
fermentacin.
Determinar la hidrolisis de almidn, gelatina, urea y lecitina. Por
microorganismos.
Enumerar el mtodo y tipo de microorganismos que degradan y/o utilizan la
glucosa, el almidn, la gelatina, la urea y lecitina.
Afianzar las destrezas en la siembra por puntura en medio slido.

III. MATERIALES Y METODOS

 a. Material
Material biolgico:
Escherichia coli, Pseudomonas sp, proteus sp, bacillus sp.

Medio de cultivo:
Caldo de glucosa rojo fenol
Agar almidn
Medio gelatina
Agar casein
Agar urea
Material de vidrio:

Lmina portaobjetos
Campana de Durham+Placas petri
Tubos de ensayo 13x100mm
Otros:

Lugo
Asa bacteriolgica

b. Procedimiento
A. Degradacin de la glucosa
A tres tubos conteniendo solo glucosado colocar una campana de
Durham invertida y sembrar por separado E. coli, Pseudomonas sp y
Proteus sp.
Incubar a 37 C por 24 horas.
Observar la degradacin de la glucosa con la formacin de cido,
mediante el viraje a amarillo del indicador rojo de fenol.
Observar la degradacin de la glucosa con la formacin de un gas
mediante la acumulacin de un gas en la campana de Durham.
Anotar los resultados.

B. Degradacin del almidn

A tres tubos conteniendo Agar almidn sembrar por puntura Bacillus
sp.
Incubar a 37 C por 48 horas.
Cumplido el tiempo de incubacin, adicionar lugol a las placas.
Dejar reposar unos minutos
Observar resultados y anotar.
Degradacin de la glucosa

Encender el mechero y esterilizar el asa en la flama hasta que se ponga al rojo vivo.
Dejar enfriar el asa para evitar la quema y destruccin de los microorganismos.
 A tres tubos conteniendo caldo glucosado colocar una campana de Durham invertida y
sembrar por separado E. coli, Pseudomona sp y Proteus sp., quitar el tapn del tubo,
flamear la boca e introducir el asa para tomar la muestra. Colocar la muestra en el centro
del tubo.
Incubar a 37 C por 24 horas
Observar la degradacin con la formacin de cido, mediante viraje a amarillo de
indicador rojo fenol.

Prueba positiva (+): color amarillo Prueba positiva (+): Burbujas en la campana
de Durham
Prueba negativa (-): color rojo
Prueba negativa (-): Sin burbujas

Observamos la degradacin de la glucosa con formacin de gas mediante la

acumulacin de gas en la campana de Durham.
Degradacin del almidn

Encender el mechero y esterilizar el asa en la flama hasta que se ponga al rojo vivo.
Dejar enfriar el asa para evitar la quema y destruccin de los microorganismos.
A los tres tubos conteniendo agar almidn sembrar por puntura Bacillus sp,
Incubar a 37 C por 48 horas.
Cumplido el tiempo de incubacin, adicionar lugol a las placas.

IV. RESULTADOS:

A. METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS

A.1. Metabolismo oxidativo fermentativo
Caldo glucosa, rojo fenol; muestra de e.coli; siembra por suspension

El aceite no ha reducido El aceite ha desaparecido, esto se

debe al poder oxidativo de las
Bacterias aerobicas
 Caldo glucosa, rojo fenol; muestra de bacillus sp; siembra por suspension

La muestra casi no presenta cambio, La muestra presenta una reduccion

el aceite no ha reducido de aceite

A.2. Hidrolisis de almidn

Agar almidon, siembra por

puntura; a 37C durante 24 h
B. HIDROLISIS DE NITROGENO

B.1. Accin sobre la gelatina

Medio gelatina, siembra por picadura: a 37C durante 48h

Se observa un, La muestra esta

cambio de color, turbia
la parte superior
un poco celeste y
amarillento la
parte inferior
B.2. Hidrolisis de casena

Se observa un halo
transparente , esto nos indica
la dehidrolisis de la caseina

B.3. Accin sobre la urea

Agar Urea, siembra masiva en superficie. Oncuvacion a 37C durante 24h

Se puede En la muestra Se observa dos

observar de faces En la Fase de
pequeas pseudomonas decolorativas . control no
se puede ocurre nada.
burbujas en el
observar un
centro
color morado
observar un
color morado
 C. HIDROLISIS DE LIPIDOS

Pseudomona, se observa un
color verdusco y un alo
verduzco que lo rodea
Bacillus, le rodea una parte
transparente

E. coli, de coloor
blanco espeso

V. DISCUSIONES
PRINCIPIOS Y PRCTICAS DE LABORATORIO. Evelyn Rodriguez Caballin Pgina 195: Hidrlisis
del almidn El almidn es un homopolisacrido de glucosa, cuyos componentes son la
amilosa lnea y la amilopectina ramificada. Para utilizarlo, algunas bacterias sintetizan una
exoenzima llamada amilasa que hidroliza los enlaces glucosdicos alfa1-4, liberan maltosa e
isomaltosa, que ingresan a la clula y pueden metabolizarse. Para evidenciar la presencia
de amilasa, se recurre a que el almidn forma un complejo de color azul con el yodo. Las
cadenas de amilopectina solo dan un color caf rojizo.
METABOLISMO GENERAL PRCTICAS DE MICROBIOLOGA GENERAL almidn hidrolizado no
da ninguna coloracin. Por lo tanto la ausencia del color azul indica que el almidn ha sido
hidrolizado. MANUAL DE PRCTICAS DE MICROBIOLOGA BSICA Y MICROBIOLOGA DE
ALIMENTOS. Luis Roberto Alarcn. Pgina 36 - 37 Hidrlisis de la gelatina La gelatina es una
protena fibrosa que se obtiene al hervir huecos, cartlago y otros tejidos conectivos que al
enfriarse forman gel. Ciertos microorganismos tienen habilidad para romper la molcula
mediante la exoenzima gelatinasa, liberando aminocidos que se usan como nutrientes. La
gelatina hidrolizada se vuelve lquida. Hidrlisis de la urea La urea o carbamida es una
diamida que se degrada por medio de una amidasa llamada ureasa. Se rompe el enlace del
nitrgeno con el carbono, con liberacin de amoniaco y CO2. El medio con urea es
adicionado un indicador de pH (rojo de fenol). El amoniaco libre alcaliniza el pH y el
indicador vira a color violeta.

MICROBIOLOGA CLNICA PRCTICA. Pedro Garca Martos, Fernando Paredes Salido, Mara
Teresa Fernndez del Barrio. Pgina 117: Metabolismo de Lpidos Los lpidos no constituyen
cuantitativamente un elemento nutritivo de importancia para las bacterias; slo unas pocas
especies pueden metabolizar algunos de ellos por contener lipasas, lectinasas u otras
enzimas. Investigacin de lipasas: Se lleva a cabo por cultivo sobre agar enriquecido. La
existencia de lipasa se traduce por la aparicin de un halo opaco alrededor de las colonias,
a causa de la precipitacin de los cidos grasos.
ACTIVIDADES BIOQUMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL
PRCTICAS DE MICROBIOLOGA GENERAL VII. CONCLUSIONES Se evidencio el desarrollo
de diferentes microorganismos en diferentes sustratos. Los microorganismos pueden
degradar a casi todo tipo de sustancias orgnicas o inorgnicas, tambin en su manera de
actuar y bajo qu condiciones estrictas (aerobias, anaerobias, etc.). Se llego a entender
cmo actan los mecanismos de estos microorganismos que se valen de enzimas para
degradar el sustrato presente en el exterior para as poder absorberlos y realizar sus
distintas vas metablicas necesarias para su supervivencia. VIII. CUESTIONARIO 1. Qu
importancia tiene la accin degradativa de un determinado sustrato por parte de un
determinado microorganismo? Las bacterias actan sobre las protenas, glcidos y lpidos
(molculas voluminosas) para convertirlas en fragmentos ms pequeos y as puedan
penetrar a travs de la membrana citoplasmtica, mediante la participacin de exoenzimas.
Por ejemplo: Los microorganismos disponen de carbohidratos en forma de polmeros, la
celulosa y el almidn, siendo sus enzimas de tipo extracelular la celulasa y amilasa
respectivamente, las que son secretadas a travs de la pared celular.

ACTIVIDADES BIOQUMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL

PRCTICAS DE MICROBIOLOGA GENERAL degradadas hasta unidades (maltosa, glucosa)
que puedan penetrar a la clula con facilidad. La accin degradativa de un organismo
sobre una protena, por ejemplo la gelatina es debido a la enzima gelatinasa quien logra
producir unidades de aminocidos. Por otro lado, muchos microorganismos degradan
grasa y aceites (liplisis) y obtener un acetato para el metabolismo de carbohidratos y la
sntesis de aminocidos. Los tres procesos metablicos que parecen independientes,
relacionados con los carbohidratos, protenas y lpidos, en realidad estn muy relacionados
entre s. Los tres pueden suplir compuestos activos dentro del ciclo de Krebs,
proporcionando energa para la sntesis y proveyendo unidades estructurales para
componentes celulares 2. Mencione cual es la razn de aadir indicadores acido base a
algunos medios de cultivo. Ejemplos. Indicadores cido-base se aaden a menudo a los
medios de cultivo con objeto de detectar variaciones de pH. Por ejemplo: Fermentacin de
la glucosa: el cambio de color de rojo a amarillo indica formacin de cidos a partir de la
degradacin de la glucosa, lo cual hace virar el indicador de ph contenido en el medio. La
formacin de gas se observa dentro de la campana de Dirham en el tubo de ensayo.
Hidrlisis de la urea: Los grmenes que forman la enzima ureasa utiliza la urea dando como
resultado la formacin de amoniaco que alcaliniza el medio y por presencia de un indicador
de ph este vira a un color rojo. Este es un resultado positivo.

ACTIVIDADES BIOQUMICAS DE LOS MICROORGANISMO. METABOLISMO GENERAL

PRCTICAS DE MICROBIOLOGA GENERAL Esta tcnica se puede realizar en tubos con
medios inclinados o no inclinados y suele usarse para determinar la movilidad de los
microorganismos. Se hace regularmente con el asa de siembra en punta. Siembra por estra
en superficie masiva: Realizada mayormente en tubos inclinados con pico de flauta
 extendiendo a los microorganismos sobre toda la superficie para ver su efecto de
degradacin sobre el sustrato utilizado. 4. Describa el fundamento de cada uno de los
resultados obtenidos en cada uno de los procedimientos por medio de un cuadro sinptico
o mapa conceptual HIDRLISIS DEL ALMIDN Los polisacridos, como el almidn son
demasiado largos para ser transportados al interior de la clula. Los microorganismos
excretan amilasas que hidrolizan esos polmeros hasta oligosacridos o monosacridos que
pueden usarse como sustratos para crecer.

VI. CONCLUSIONES
Se demostr la degradacin de la glucosa en forma aerbica, anaerbica y por
fermentacin.
Se determino la hidrolisis de almidn, gelatina, urea y lecitina. Por
microorganismos.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

http://www.slideshare.net/breid/pruebas-bioqumicas-y-medios-de-cultivo-en-bacterias
http://www.monografias.com/trabajos15/microorganismos/microorganismos.shtml
http://www.monografias.com/trabajos14/bacterias/bacterias.shtml.
http://edicion-micro.usal.es/web/identificacion/AyudaPruebas.html.
VIII. PREGUNTAS Y/O TAREAS

1. Cuantos ATP obtendra un microbio que degrada tributirina? Sera el mismo

nmero si usa glicerina?
2. Qu relacin existe entre una prueba de catalasa y la utilizacin del oxgeno
atmosfrico?
La catalasa es una enzima lo posee la mayora de las bacterias aerbicas, la prueba y la
prueba de la descompone el perxido de hidrgeno en agua del oxgeno y el oxgeno
atmosfrico es compuesto por un 78% de nitrgeno y un 21% de oxgeno y un 1%5 que
ocupa otros gases nobles y sin la enzima catalasa es responsable del oxgeno
atmosfrico.
3. Mencione dos gneros de bacterias y dos fngicos que poseen alfa amilasa y beta
amilasa.
En el genero bacteriano tenemos a: B.stearothermophilus y B. subtilis . Entre los fngicos
tenemos a: Aspergillus niger y Aspergillus orizae

4. Describa el proceso bioqumico por el cual el almidn, casena y tributirina son

hidrolizados hasta sus monmeros.
5. Cmo explicaras el crecimiento (si se llegara a observarse) de E. coli en las
placas de agar almidn? Su fuente carbonada lo obtiene del almidn?
6. Qu ventajas metablicas obtienen los microorganismos que crecen; tanto en
aerobiosis, como en anaerobiosis?