ESCUELA DE PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BIOLGICAS

Lisosomas
BIOLOGA CELULAR
BI-141

Prof. Reynn Cndor Alarcn

Lisosomas
Los lisosomas son compartimientos delimitados por membrana
rellenos de enzimas hidrolticas solubles que controlan la digestin
intracelular de macromolculas.
 Enzimas hidrolticas de los lisosomas
Los lisosomas contienen alrededor de 40 tipos de enzimas hidrolticas,
entre las que se encuentran proteasas, nucleasas, glucosidasas, lipasas,
fosfolpasas, fosfatasas y sulfatasas. Todas ellas son hidrolasas cidas.
Estas enzimas para actuar en condiciones ptimas necesitan por una parte
ser activadas mediante un corte proteoltico y por otra un medio cido,
como el que tiene el lisosoma que mantiene el pH alrededor de 4.5-5.0 en
su interior. En este sentido, el citosol est doblemente protegido contra el
ataque de su propio sistema digestivo: la membrana del lisosoma mantiene
las enzimas alejadas del citosol, pero incluso en el caso de que se produzca
alguna fuga pueden hacer poco dao en el citosol, ya que tiene unas
condiciones de pH de aproximadamente 7.2.
Membrana de los lisosomas
El lisosoma presenta una membrana envolvente con las siguientes
propiedades:
La mayora de las protenas de membrana lisosmicas estn muy
glucosiladas, lo que las protege de las proteasas lisosmicas del lumen.
Los transportadores de la membrana lisosmica transportan los productos
finales de la digestin de las macromolculas -como por ejemplo
aminocidos, azcares y nucletidos- al citosol, donde podrn ser reutilizados
o excretados.
El pH del lumen del lisosoma es cido
Una ATPasa de H+ vacuolar situada en la membrana del lisosoma utiliza la
energa de hidrlisis del ATP para bombear H+ al interior del lisosoma,
manteniendo as el lumen a un pH cido (Figura 3).
La ATPasa de H+ vacuolar bombea H+ en el orgnulo. ATPasas de tipo V
similares o idnticas son las responsables de la acidificacin de todos los
orgnulos endocticos y exocticos, incluyendo lisosomas, endosomas,
compartimientos concretos del complejo de Golgi y muchas vesculas de
transporte y de secrecin.
El bajo pH propio del medio interior es adecuado para que se produzcan las
reacciones propias del lumen del orgnulo y es una fuente de energa que
dirige el transporte de metabolitos pequeos a travs de la membrana.
Figura 3. Lisosomas.
Las hidrolasas
cidas son enzimas
hidrolticas que
estn activas en
condiciones cidas.
En la membrana,
una ATPasa de tipo
V bombea H+ hada
el interior del
lisosoma y
mantiene su lumen
a pH cido.
Los lisosomas son heterogneos

Los lisosomas son extraordinariamente diversos en cuanto a forma y

tamao, se demuestra que son miembros de una familia nica de
orgnulos.
Se identifican mediante tincin con anticuerpos especficos y con
tcnicas histoqumicas (utilizando el precipitado producido por la
accin de una hidrolasa cida sobre su sustrato, para mostrar qu
orgnulos contienen la hidrolasa).
Visualizacin histoqumica de los lisosomas. Estas electromicrografas muestran dos secciones de una clula, contrastadas
para poner de manifiesto la localizacin de la fosfatasa cida, una enzima marcadora de lisosomas. Los grandes orgnulos
envueltos de membrana, que contienen precipitados densos de fosfato de plomo, son lisosomas. Su diversa morfologa
refleja variaciones de la cantidad y de la naturaleza del material que estn digiriendo. Los precipitados se producen cuando el
tejido fijado con glutaraldehdo (para fijar las enzimas en su sitio) se incuba con un sustrato de la fosfatasa en presencia de
iones plomo. En el panel izquierdo, se Indican mediante flechas rojas dos pequeas vesculas que probablemente transportan
hidrolasas desde el complejo de Golgi.
Los lisosomas son heterogneos
La heterogeneidad de la morfologa lisosmica contrasta con la
uniformidad relativa de la mayora de los otros orgnulos celulares.
La diversidad refleja la amplia variedad de funciones digestivas
mediadas por las hidrolasas cidas, como:
la digestin de desechos intra y extracelulares,
la digestin de microorganismos fagocitados e
incluso la nutricin celular.
Endocitosis y formacin de
lisosomas
Molecules are taken up from
outside the cell in endocytic
vesicles, which fuse with
early endosomes. Membrane
components are recycled as
the early endosomes mature
into late endosomes.
Transport vesicles carrying
acid hydrolases from
the Golgi apparatus then fuse
with late endosomes, which
mature into lysosomes as
they acquire a full
complement of
lysosomal enzymes. The acid
hydrolases dissociate from
the mannose-6-phosphate
receptor when the transport
vesicles fuse with late
endosomes, and the
receptors are recycled to the
Golgi apparatus.
 Estados del ciclo de maduracin de lisosomas
La diversidad de morfologa de los lisosomas es un reflejo de la manera como
se forman:
Endosomas tardos. Contienen material procedente tanto desde la membrana
plasmtica como hidrolasas cidas de nueva sntesis.
Endolisosomas. Los endosomas tardos se fusionan con lisosomas preexistentes
formando estructuras denominadas endolisosomas, que a su vez se fusionan unos con
otros.
Lisosomas clsicos. Cuando ha sido digerido la mayor parte del material endocitado,
dentro de un endolisosoma, slo permanecen en su interior aquellos materiales de
digestin ms lenta o indigeribles, y a estos orgnulos se los denomina lisosomas. Son
relativamente densos, redondos y pequeos, pero pueden volver a entrar en el ciclo
fusionndose con endosomas tardos o con endolisosomas.
No existe una diferencia real entre endosomas tardos y lisosomas: son el mismo orgnulo
excepto que se encuentran en diferentes estados del ciclo de maduracin.
 Compartimientos de pH bajo, hidrolticamente activos

Endosoma tardo Endolisosoma Lisosoma

Modelo de maduracin del lisosoma. La heterogeneidad de la morfologa del

lisosoma refleja, al menos en parte la naturaleza diversa de los materiales
que son transportados al orgnulo as como las diferentes etapas del cido de
maduracin que se muestran.
Varias vas aportan materiales a los lisosomas

En general, los lisosomas son puntos de encuentro en los que

convergen diferentes corrientes del trfico intracelular.
Una ruta que se dirige hacia fuera desde el ER va complejo de Golgi
entrega la mayora de las enzimas digestivas, mientras que al menos
tres vas desde diferentes orgenes introducen sustancias en los
lisosomas para su degradacin:
1. Macromolculas que son tomadas del fluido extracelular mediante
endocitosis
2. Autofagia
3. Fagocitosis
1. Macromolculas que son
tomadas del fluido extracelular
mediante endocitosis.
Las molculas endocitadas son entregadas en forma
de pequeas vesculas a orgnulos intracelulares de
formas irregulares denominados endosomas
tempranos. All los materiales endocitados se
encuentran con las hidrolasas cidas lisosmicas,
transportadas al endosoma desde el complejo de
Golgi. Algunas de las molculas endocitadas son
seleccionadas y recicladas a la membrana
plasmtica, mientras que otras se dirigen a los
endosomas tardos.
2. Autofagia
El proceso denominado autofagia es una segunda ruta que aporta
materiales a los lisosomas para su degradacin y mediante la cual pueden
ser destruidas partes obsoletas de la propia clula.
El proceso de autofagia est muy regulado, de forma que durante la
remodelacin celular se pueden seleccionar diferentes componentes
celulares y ser destinados a su destruccin (peroxisomas senescentes o
mitocondrias, RE, etc.).
En una clula heptica, una mitocondria tiene una vida media de 10 das. El proceso
de digestin del mitocondria se inicia al quedar rodeado el orgnulo por una doble
membrana de origen desconocido, generndose un autofagosoma, que se fusiona
con un lisosoma.
El ER liso que prolifera en una clula heptica, como una respuesta detoxificadora
frente a compuestos de naturaleza lipdica como el fenobarbital, es eliminado de
forma selectiva por medio de autofagia cuando se retira el compuesto.
 Autofagia
En condiciones de ayuno grandes porciones del
citosol son capturados de manera no selectiva en
autofagolisosomas. Los metabolitos derivados de
la digestin del material capturado contribuyen a
la supervivencia celular cuando la disponibilidad
de nutrientes externos es limitante.
La autofagia desempea un papel en el desarrollo
y en la salud. Ayuda a la reestructuracin de las
clulas en diferenciacin eliminando aquellas
estructuras que ya no son necesarias y participa
en los mecanismos de defensa ante la infeccin de
virus y bacterias.
Etapas de la autofagia
La autofagia se divide en cuatro etapas:
(1) nucleacin y extensin de una membrana en una estructura en
forma de U que delimita una porcin de citosol,
(2) cierre del autofagolisosoma en un compartimiento cerrado y
delimitado por una doble membrana,
(3) fusin del nuevo compartimiento con lisosomas y
(4) digestin de la membrana interna del autofagolisosoma y de su
contenido (Figura 13-41).
 citosol y orgnulos
englobados

CIERRE FUSION DIGESTIN

membrana autofagosoma
dadora
nucleacin y
extensin
hidrolasas cidas

lisosomas

Figura 13-41 Un modelo de autofagia. Despus del proceso de nucleacin en el

citoplasma, se forma una estructura de membrana en forma de U por la fusin de
vesculas de origen desconocido. Posteriormente, el autofagosoma se cierra
mediante fusin de la membrana y rodea una porcin del citoplasma de la clula
mediante una doble membrana. A continuacin, el autofagosoma se fusiona con
lsosomas que contienen hidrolasas acidas, digiriendo su contenido.
3. Fagocitosis
La tercera ruta que proporciona materiales
a los lisosomas slo tiene lugar en clulas
que estn especializadas en la fagocitosis
de grandes partculas y de
microorganismos. Estas clulas
(macrfagos y neutrfilos en los
vertebrados) pueden ingerir grandes
objetos y formar un fagosoma. Parece que
el fagosoma se transforma en lisosoma de
la misma forma como para el caso del
autofagosoma.
 FLUIDO EXTRACELULAR Tres rutas para la
degradacin en los
CITOSOL lisosomas. (A) Cada ruta
conduce a la digestin
intracelular de materiales
bacteria fagosoma
procedentes de diferentes
fagocitosis orgenes. Ntese que el
membrana
autofagosoma tiene una
plasmtica doble membrana.
endosoma temprano (B) Electromicrografa de
un autofagosoma que
contiene una mitocondria y
un peroxisoma.
endocitosis
ENDOSOMA LISOSOMA mitocondria peroxisoma
TARDO
mitocondria

autofagosoma

autofagia
 Peroxisomas
Estos orgnulos estn rodeados por una sola membrana y no presentan ni
DNA ni ribosomas. Dado que no tienen genoma, todas sus protenas estn
codificadas en el ncleo. Los peroxisomas adquieren la mayor parte de sus
protenas mediante importacin selectiva desde el citosol aunque algunas
de ellas entran a la membrana del peroxisoma a travs del ER.
Como en el caso de las mitocondrias, los peroxisomas son los principales
lugares de utilizacin de oxgeno.
Todas las clulas eucariotas tienen peroxisomas. Contienen enzimas
oxidativas, como la catalasa y la urato oxidasa a concentraciones tan altas
que en algunas clulas los peroxisomas se reconocen en
electromicrografas por la presencia de un nucleoide cristalino (Figura 12-
30).
 Figura 12-30
Electromicrografa de tres
peroxisomas en una clula
de hgado de rata. Las
inclusiones paracristalinas
electrodensas estn
formadas por la enzima
urato oxidasa. (Por cortesa
de Daniel S. Frlend.)
Peroxisomas
Los peroxisomas posiblemente sean un vestigio de un orgnulo antiguo, que en
los antecesores primitivos de las clulas eucariotas realizaba todo el metabolismo
del oxgeno. Cuando el oxgeno producido por las bacterias fotosintticas se
acumul en la atmsfera, podra haber resultado altamente txico para la
mayora de las clulas. Los peroxisomas pudieron haber contribuido a disminuir la
concentracin de oxgeno en estas clulas, a la vez que permitan utilizar su
reactividad qumica para llevar a cabo reacciones tiles de oxidacin.
De acuerdo con este punto de vista, el desarrollo posterior de las mitocondrias
hizo que los peroxisomas se volvieran obsoletos, dado que muchas de las
reacciones bioqumicas que antes se realizaban en los peroxisomas sin
producir energa fueron acopladas a la formacin de ATP por medio de la
fosforilacin oxidativa. Por lo tanto, las reacciones de oxidacin que realizan en la
actualidad los peroxisomas podran ser aquellas cuyas funciones no fueron
asumidas por las mitocondrias.
Los peroxisomas utilizan el oxgeno molecular y el
perxido de hidrgeno para realizar reacciones de
oxidacin
Los peroxisomas se denominan as porque generalmente contienen
una o ms enzimas que utilizan oxgeno molecular para eliminar
tomos de hidrgeno de sustratos orgnicos especficos (designados
como R) a travs de una reaccin de oxidacin que produce perxido
de hidrgeno (H2O2).
RH2 + O2 --> R + H2O2
 La catalasa utiliza el H2O2 generado por otras enzimas del orgnulo
para oxidar diversas sustancias como fenoles, cido frmico,
formaldehdo y alcohol mediante una reaccin de peroxidacin:
H2O2 + RH R' + 2H2O.
Este tipo de oxidacin es particularmente importante en el hgado y
en las clulas de rin, donde los peroxisomas destoxifican una gran
variedad de molculas txicas que entran en la circulacin. Alrededor
del 25% del etanol que bebemos es oxidado a acetaldehdo de esta
manera. Adems, cuando se acumula un exceso de H2O2 en la clula,
la catalasa lo transforma en H2O mediante la reaccin:
2H2O2 2H20 + O2
Diversidad de los peroxisomas
Los peroxisomas son orgnulos muy diversos: distintas clulas de un
mismo organismo pueden contener incluso distintos conjuntos de
enzimas. Tambin se adaptan de manera destacable a condiciones
cambiantes.
Por ejemplo, las clulas de levadura que crecen con azcar tienen
peroxisomas pequeos, pero cuando crecen en metanol desarrollan
peroxisomas grandes que oxidan metanol; y cuando crecen con cidos grasos,
desarrollan grandes peroxisomas capaces de degradar cidos grasos hasta
acetil CoA por medio de la oxidacin.
Peroxisomas vegetales
Se han reportado peroxisomas que estn presentes en las hojas,
donde participa en la fotorrespiracin (Figura 12-32A).
Otro tipo de peroxisomas se halla presente en las semillas en
germinacin, donde transforma los cidos grasos almacenados en los
lpidos de las semillas en azcares necesarios para el crecimiento de
la planta joven. Dado que esta conversin de grasas en azcares se
realiza a travs de una serie de reacciones conocidas como el ciclo del
glioxilato, estos peroxisomas tambin son denominados glioxisomas
(Figura 12-32B).
Figura 12-32 Elertromicrografa de dos tipos de peroxisomas encontrados en clulas vegetales.
(A) Peroxisoma con un ncleo paracristallno de una clula del mesfilo de una hoja de tabaco. Se cree que la
estrecha asociacin entre el peroxisoma y el cloroplasto facilita el intercambio de materiales entre estos
orgnulos durante la fotorrespiracin.
(8) Peroxisomas de una clula almacenadora de lpidos en un cotiledn de una semilla de tomate, 4 das
despus de germinar. En este caso, los peroxisomas (gliaxisomas) estn asociados con gotitas de lpidos en
los que se almacena grasa, lo cual refleja el papel central de estos glloxisomas en la movilizacin de los
lpidos y en su utilizacin para la gluconeognesis durante la germinacin de la semilla.
Una corta secuencia seal dirige la importacin de
protenas hacia los peroxisomas
Una secuencia especfica de tres aminocidos (Ser-Lys-Leu), localizada
en el extremo C de muchas protenas peroxisomales, acta como seal
de importacin. Otras protenas peroxisomales tienen una secuencia
seal cerca del extremo N. Si cualquiera de estas secuencias se une
experimentalmente a una protena citoslica, la protena es importada
a los peroxisomas. El proceso de importacin es an bastante
desconocido, aunque se sabe que estn implicadas protenas
receptoras solubles en el citosol que reconocen las secuencias de
direccionamiento y protenas de anclaje en la superficie citoslica del
peroxisoma.
Biogensis de peroxisomas
Se ha planteado que los nuevos peroxisomas aparecen a partir de
peroxisomas preexistentes por crecimiento y fisin del orgnulo, y derivan
como un compartimiento especializado del retculo endoplasmtico (ER)
precursores de peroxisomas.

En realidad, de algn modo son ciertos algunos aspectos de ambos puntos

de vista. La mayora de las protenas de membrana de los peroxisomas se
sintetizan en el citosol y se insertan en la membrana de peroxisomas
preexistentes, mientras que otras se integran primero en la membrana del
ER desde donde viajan como vesculas especializadas precursoras de los
peroxisomas. Estas vesculas precursoras pueden fusionarse unas con otras y
empezar a importar protenas peroxisomales adicionales utilizando su propia
maquinaria de importacin de protenas para crecer y forma un peroxisoma
maduro, el cual puede entrar en el ciclo de crecimiento y fisin.
 Protenas especificas que catalizan
la importacin de protenas

FISIN

Vescula peroxisoma
precursora del
peroxisoma

Peroxisomas
CRECIMIENTO POR INCORPORACIN DE hijos
PROTENAS PEROXISOMALES
Retculo ESPECFICAS DESDE EL CITOSOL
endoplasmtico

Figura 12-33 Modelo que explica cmo proliferar los peroxisomas y cmo pueden generarse nuevos peroxisomas. Se cree que las vesculas
precursoras de los peroxisomas aparecen por gemacin del ER. No se conoce el mecanismo que impulsa el inicio de esta reaccin ni cmo se
seleccionan tpicamente las protenas peroxisomales para poder empaquetarlas en esas vesculas -y no protenas del ER o protenas destinados a
otros lugares en la clula, las vesculas precursoras de los peroxisomas pueden fundirse con otras o con peroxisomas ya formados. La membrana de
los peroxisomas contiene protenas receptoras de importacin. Los ribosomas citoslicos sintetizan protenas peroxisomales, incluyendo nuevas
copias del receptor de importacin, que despus sern importadas al orgnulo. Probablemente tambin son importados (os lpipidos necesarios para
el crecimiento de la membrana de las vesculas precursoras de los peroxisomas, aunque algunos de ellos pueden provenir de forma directa del RE.