TRABAJO DE HISTOLOGIA

HISTORIA DE LA HISTOLOGIA

A finales del siglo XVI, en Holanda, los hermanos Han y Zacharias Janssen
construyeron el primer microscopio compuesto. Galileo Galilei (1564-1642), clebre
por sus estudios en Astronoma, fue uno de los primeros investigadores que utiliz el
microscopio para fines cientficos. Los microscopios, perfeccionados, se utilizaban cada
vez ms por los cientficos de diversas pocas.

A finales del primer perodo, mediados del siglo XVII, el bilogo y fsico ingls R.Hooke
(1665) perfeccion an mas el microscopio, permiti observar la estructura fina de los
tejidos. A Hooke se le atribuye el primer trabajo publicado sobre microscopia con el
ttulo de "Micrografa de algunas descripciones fisiolgicas de cuerpos diminutos
realizado por lentes de ampliacin", editado en Londres por la Sociedad Royal. Sus
descripciones sirvieron de impulso para la aparicin de las investigaciones sistemticas
acerca de la estructura de las plantas y los animales.

En este perodo, segn la expresin de Malpighi la picazn del conocimiento y el deseo

de comprender los hechos del creador incitaban a muchos investigadores a las
investigaciones microscpicas. As fue como el anatomista Malpighi (1671), el botnico
Grez (1671) y el ptico aficionado Leenwenhoek, describieron la estructura de la piel,
bazo, sangre, msculos y el lquido espermtico. El carcter casual de estos
descubrimientos, la imperfeccin de los microscopios y la concepcin metafsica del
mundo no permitieron durante 100 aos (desde la mitad del siglo XVII hasta la mitad
del siglo XVIII) dar pasos esenciales hacia delante con respecto al conocimiento de las
regularidades de la estructura de los organismos vivos.

A fines del siglo XVIII y principios del XIX aparecen las teoras generales de la
estructura de los organismos y de su desarrollo. Estas teoras se basaban en
descripciones no autenticas o tenan un carcter especulativo o apriorstico, entre estas
se encuentran:

- Teora de la estructura fibrosa y granular de los organismos.

-Teora de la preformacin, el desarrollo representaba por su esencia el

desenvolvimiento en el espacio de las partes formadas del organismo esbozada
durante la creacin de la vida.

- Teora de la epignesis, defenda la neofomacin de los rganos, rechazando por

completo la predeterminacin o la preformacin.

En los aos 60 del siglo XVIII se agudizo la lucha contra estas teoras, cuando Wolf
present su tesis teora del engendramiento, fue el primero en observar en los
embriones de los animales la formacin de los rganos a expensas de las hojas
embrionarias, descubri el desarrollo del corazn en el pollo, el desarrollo del rin.

A finales del siglo XVIII y principios del siglo XIX, con ayuda de los trabajos de muchos
cientficos y maestros petersburguenses y holandeses, fueron creados los microscopios
acromticos, los cuales hicieron ms autenticas las observaciones microscpicas e
hicieron posible el paso al estudio sistemtico de los tejidos animales y vegetales ms
diversos y constituyendo una nueva etapa en le desarrollo de las investigaciones
cientficas de la histologa.

As, Bauer (1862), dio la primera imagen de los ncleos de las clulas vegetales y
Purkinje descubri el ncleo en las clulas de distintos tejidos en los animales,
introduciendo el concepto de protoplasma (citoplasma) de las clulas, caracteriz la
forma de las clulas nerviosas y la estructura de las glndulas. De tal manera comenz
acumularse el material sobre la organizacin microscpica de los animales y plantas y
de la estructura de las clulas (cellulae).

La culminacin de este periodo consiste en las investigaciones de T.Schwann que

generaliz todas las investigaciones anteriores y formul:

v Teora celular (1838-1839) considera que los seres vivos estn constituidos por
clulas y productos celulares.

La creacin de la teora celular constituye un acontecimiento importantsimo en la

Biologa y una de las demostraciones definitivas de la unidad de toda la naturaleza
viva. Influy sobre el desarrollo de la Biologa y la Medicina y sirvi de fundamento
principal para el desarrollo de la Embriologa, Histologa y Fisiologa. Aument las
bases para la comprensin materialista de la vida, la aclaracin de la correlacin
evolutiva de los organismos y la comprensin del desarrollo individual. Como
consideraba F.Engels6 el descubrimientote la clula fue el hecho principal que
revoluciono la filosofa y que hizo posible la fisiologa comparada. Engels comparaba el
descubrimiento de la clula con otros grandes descubrimientos: la ley de la
conservacin de la energa y el de la evolucin orgnica de Darwin.

A base de la teora celular se estudia la composicin de los distintos rganos y tejidos y

su histogenesis, lo que permiti crear los rasgos principales de la anatoma
microscpica y precisar la clasificacin de los tejidos teniendo en cuenta su estructura
microscpica. Se introducen los xitos en las tcnicas histolgicas y los mtodos de
investigacin microscpica. Se perfeccionan los objetivos de inmersin en agua y
aceite, se inventa el micrtomo y se utilizan nuevos fijadores como formalina, cido
smico y cido crmico.

En los ltimos 25 aos del siglo XIX fueron descritos el centro celular (centrosoma), el
complejo laminoso, aparato reticular intracelular, las miofibrillas, tonofibrillas, etc.
Todos estos xitos en el estudio de la estructura fina de la clula cimentaron las bases
de la Citologa.

A pesar de los grandes adelantos en la ciencia, la microscopia de los tejidos muertos

era insuficiente, puesto que no permita hablar sobre los procesos de la actividad vital
en los mismos. En 1884, el mdico ruso I. Skvartsov propuso el mtodo de cultivo de
clulas de la sangre fuera del organismo, ms tarde otros elaboraron detalladamente
este mtodo para cultivar otros tejidos. Ms eso no signific que la investigacin de los
tejidos muertos en los preparados perdiese su sentido e importancia.

Los mtodos de coloracin vital, introduccin de cuerpos extraos en el organismo

permitieron comenzar el estudio de la fisiologa de las estructuras histolgicas. En
1900, el cientfico N. Gaidukov propuso el mtodo de la microscopia de los objetos
vivos en el campo visual oscuro. Al mismo tiempo se inventa el micromanipulador, con
cuya ayuda pueden realizarse operaciones en las clulas aisladas: extraccin de
ncleos, cortes de clulas, con la finalidad de aclarar su funcin e importancia vital.

En los primeros decenios del siglo XX el esfuerzo de las investigaciones estuvieron

dirigidas al estudio de la Citofisiologa, especialmente el papel de las mitocondrias y el
aparato reticular intracelular en los procesos de secrecin y al estudio del ncleo y de
su importancia en la transmisin de la herencia.

El desarrollo de la histologa y sus aportes a la sociedad tienen lugar en contacto

estrecho con el desarrollo de los mtodos ms nuevos de las investigaciones
histolgicas y, ante todo de los mtodos microscpicos electrnicos: microscopia
electrnica de transmisin y exploracin as como histoqumica electrnica.

Marcello Malpighi

Naci en 1628 en Crevalcore, cerca de Boloa y muri en 1694, en Roma. Pas la

mayor parte de su vida en Boloa, donde fue profesor hasta 1691, ao en que pas a
ser mdico de la corte papal por un llamado de Inocencio XII. Se doctor en Boloa en
1651 y pronto su prestigio lleg a otras ciudades italianas. Por invitacin del Gran
Duque de Toscana, que quera hacer de la Universidad de Pisa la mejor de Italia, se
fue a esa Universidad donde fue profesor durante tres aos. All conoci a Giovanni
Borelli, un iatrofsico, profesor de matemticas y de quien Malpighi se hizo muy amigo
y aprendi matemticas. Borelli hizo contribuciones en el estudio del aparato
locomotor y de la fisiologa respiratorio desde el punto de vista fsico.

Al volver a Boloa ocup una ctedra de medicina prctica, pero su inters estaba en
otro campo: la anatoma microscpica a la que se dedicaba desde la edad de 30 aos,
y lo hizo en forma sistemtica. Si Vesalio fue el fundador de la anatoma macroscpica,
Malphigi lo fue de la microscpica. Su campo no se limit al reino animal, abarc
tambin el de las plantas. A su regreso a Boloa recibi una carta del Secretario de la
Royal Society invitndolo a entablar una correspondencia, de ah que muchos de sus
trabajos vieran la luz en las Philosophical Transactions.

Sus primeras contribuciones se refieren al desarrollo del huevo del pollo. Su lema
eraomne animal, omne vivum ex ovo, aplicable a animales y a plantas. La descripcin
que hace del embrin de pollo, de los somitos, del esbozo cardaco, del encfalo con
sus vesculas primitivas, es admirable. En 1661, en su trabajo De pulmonibus
observationes anatomicae, comunic en las Philosophical Transactions un doble
descubrimiento: la estructura alveolar del pulmn y los capilares pulmonares, lo que
despert mucho inters entre los mdicos ingleses. Haba llenado la laguna que dej
Harvey.

Describi por primera vez en la piel el estrato celular que lleva su nombre, las papilas
linguales, los corpsculos gustativos, los folculos esplnicos, los corpsculos renales.
Descubrir este nuevo mundo era mucho ms difcil de los que hoy uno se imagina.
Desde luego no se conocan los mtodos de tincin de tejidos.

Malpighi era un hombre de naturaleza alegre, modesto, moderado y amable. Pero su

vida no fue fcil. La enseanza an se hallaba en manos principalmente de galenistas,
que menospreciaban los estudios de Malphigi y envidiaban los honores que ste reciba
fuera del pas, particulamente en Inglaterra. La Royal Society haba tomado contacto
con l a raz del descubrimiento de los capilares y desde entonces patrocinaba la
publicacin de sus investigaciones. Malphigi fue perseguido; su casa, desvalijada, sus
instrumentos y manuscritos fueron destruidos y l mismo fue amenazado de muerte.
Por fin lleg el llamado papal a Roma, donde pas sus ltimos aos en calma y con
mejor disposicin de nimo.

Membrana basal

Membrana basal

1. Clula epitelial; 2. Membrana basal;

3.Endotelio; 4. Tejido conjuntivo ; 5. Fibroblasto.

La membrana basal es una capa de matriz extracelular de sostn y de espesor

variable, que se encuentra en la base de los tejidos epiteliales.

Es compleja de ver a microscopio ptico (MO) si se tie con Hematoxilina-eosina (HE)

ya que se tie de la misma forma que el tejido conjuntivo subyacente. Sin embargo,
con la tincin del cido perydico de Schiff o (PAS) podemos diferenciarla
perfectamente ya que uno de sus componentes son lospolisacridos que, con esta
tincin adquieren un caracterstico color fucsia. Las impregnaciones argnticas tambin
la muestran bien.
Al microscopio electrnico (ME) se pueden apreciar varias capas:

Lmina basal, una matriz electrodensa de entre 50 y 100 nm compuesta a su

vez por lmina lcida y lmina densa.

La lmina lcida es menos electrodensa y es la primera capa en contacto

con la membrana plasmtica del tejido epitelial suprayacente.

La lmina densa, ms electrodensa, presenta unos delgados y pequeos

filamentos de colgeno tipo IV. Es ms gruesa que la anterior.

Lmina reticular, con fibras ms densas y reticulares, colgenos tipo IV, III y
VII y una gran cantidad deprotenas (como la laminina, glucoprotena de unin
tambin presente en las integrinas que adhiere los distintos componentes) y
polisacridos.

Los adipocitos, las clulas musculares y las nerviosas aparecen a menudo recubiertas
de lmina basal y en ocasiones tambin de lmina reticular. sta estructura pasa a
llamarse lmina externa.

Funciones

Algunas de las funciones de la membrana basal son:

Filtracin molecular pasiva: deja pasar determinadas molculas, lo que adquiere

especial importancia en los riones y en el intestino.

Compartimentalizacin de tejidos y filtro celular: Los linfocitos s pueden

atravesar la basal, pero en tumores es capaz de ralentizar la metstasis.

Regeneracin, migracin y cicatrizacin.

Diferenciacin de las clulas y su organizacin: Si cultivamos el epitelio en

Placas de Petri, su tendencia es a formar clulas planas, a las que aadiendo
membrana basal en el sustrato, se les induce la diferenciacin.

Unin celular

Las uniones celulares, o uniones intercelulares como tambin se les denomina, son
puntos de contacto entre las membranas plasmticas de las clulas o entre clula
y matriz extracelular. La mayora de las clulas epiteliales y algunas clulas musculares
y nerviosas estn estrechamente asociadas en unidades funcionales.

Clasificacin

Las uniones celulares se han dividido clasicamente en los siguientes tres tipos, que son
especializaciones por lo general de la membrana lateral de una determinada clula.

Las uniones de oclusin u oclusivas: Llamadas tambin estrechas o

apretadas, sellan las clulas epiteliales vecinas de tal manera que evitan el
trnsito libre de molculas pequeas de una capa a otra.

Las uniones de anclaje u adherentes: Sujetan mecnicamente a las clulas

y sus citoesqueletos con las clulas vecinas, suelen llamarse znula adherens.
En este tipo, tambin, se encuentran las desmosomas; las desmosomas son un
tipo de unin especializado formados por placas de unin.

Las uniones comunicantes: Permiten el intercambio de seales qumicas y

elctricas entre clulas adyacentes. En las clulas de las plantas se denominan
plasmosdesmos.

Adems de las mencionadas anteriormente, investigaciones han demostrado la

existencia de otras uniones entre las clulas y la matriz extracelular. Este tipo de
uniones, generalmente entre el dominio basal de la clula y la lmina basal adyacente
se conocen como hemidesmosomas que estn integradas por integrinas. En estudios
ulteriores el descubrimiento de novsimas uniones llamadas uniones focales entre
clulas y sustrato ha despertado el inters por esta materia.

Tipos

Uniones estrechas (Occludens)

Son una especie de red de protenas transmembranales que forman puntos de
adhesin entre clula y clula, cruciales en mantener la diferencia de concentraciones
de molculas hidrfobas pequeas a lo largo de las capas delepitelio. Esta funcin la
realizan de dos maneras. Primero, sellan las membranas plasmticas de las clulas
adyacentes para crear una barrera impermeable o semipermeable entre las capas.
Segundo, actan como barrera dentro de la misma bicapa lipdica, pues restringe la
difusin libre tanto de lpidos como de protenas de membrana. Esto aporta cierta
polaridad a la clula epitelial, porque la parte apical es diferente a la parte basal en los
componentes de la membrana.1

Uniones de adherencia

Tambin llamadas intermedias, se unen con la membrana plasmtica adyacente.

Contienen una placa formada por una densa capa de glucoprotenas transmembrana
(cadherina) y microfilamentos (o filamentos de actina) del citoesqueleto formando
zonas extensas denominadas cinturones de adhesin. Este tipo de unin ayuda a las
superficies epiteliales a resistir la separacin durante actividades contrctiles como
cuando los alimentos progresan a lo largo del intestino.

Desmosomas

Son una clase de uniones focales (como puntos de soldadura). Al igual que las uniones
de adherencia, contiene una placa y glucoprotenas transmembrana (cadherina) que se
extienden hacia el espacio intercelular. Esta placa se une, por encima, a filamentos
intermedios de queratina. Contribuye a la estabilidad cuando estn bajo presin y
cuando se separan en la contraccin de clulas y tejidos, como en la epidermis o
clulas del miocardio.2

Las clulas epiteliales y algunos otros tipos celulares, como las del msculo liso,
tambin estn fuertemente unidas por los desmosomas, puntos de contacto similares a
botones denominados a veces desmosomas puntuales.

Hemidesmosomas

Los hemidesmosomas son uniones focales que unen clulas epiteliales a la matriz
extracelular que conforma la lmina basal. No obstante, tienen morfologa similar a los
desmosomas. La unin ocurre gracias a la familia de protenas llamadas integrinas. Las
integrinas unen mediante su dominio extracelular a protenas de la lmina basal con
filamentos intermedios de queratina con ayuda de su regin intracelular. Estas
estructuras se encuentran distribuidas en el tejido epitelial y ayuda a distribuir la
resistencia y la fuerza ejercidas sobre l.1

Uniones de hendidura (gap) o uniones comunicantes

Las uniones tipo gap o uniones comunicantes funcionan como poros que permiten el
transporte de iones y molculas pequeas de alrededor de 1000 Da entre clulas
vecinas. Se componen de 6 protenas transmembrana (conexinas) que se unen para
formar complejos llamados conexones. Las conexinas forman delicados tneles llenos
de lquido, que permite a las clulas de un tejido comunicarse entre s. El intercambio
de molculas e iones permite un acoplamiento qumico y elctrico entre las clulas. Las
uniones comunicantes son importantes en la coordinacin de las clulas que se activan
por impulsos elctricos y en su influencia sobre otras clulas.1 En estas uniones la
membrana plasmtica no est fusionada, sino que se hallan separadas por espacios
intermoleculares estrechos. Se puede encontrar en tejido avascular como el cristalino y
la cornea del ojo, como tambin en el pie.