CDIGO: SGC.DI.

505
GUIA PARA LAS PRCTICAS DE VERSIN: 2.0
FECHA ULTIMA REVISIN:
LABORATORIO, TALLER O CAMPO. 12/04/2017

Departamento de Ciencias de
DEPARTAMENTO: CARRERA: Ingeniera en Biotecnologa
la Vida y la Agricultura
PERODO
ASIGNATURA: Cultivo de Tejidos Vegetales Abril Agosto 2017 NIVEL: 6to
LECTIVO:
DOCENTE: Ing. Cristian Pea M.Sc. NRC: 2592 - 2605 PRCTICA N: 8

LABORATORIO DONDE SE DESARROLLAR LA PRCTICA Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales

TEMA DE LA
Aclimatacin de violetas y orqudeas
PRCTICA:
INTRODUCCIN:
Las plantas que han sido cultivadas in vitro por tcnicas de micropropagacin, requieren de un proceso de aclimatacin en el que es
fundamental la cantidad de sustancias de reservas que las plantas hayan sido capaces de almacenar. La supervivencia durante la
aclimatacin depende de que las plantas puedan pasar de condiciones heterotrficas o mixotrficas al autrotrofismo. Las plantas
deben aclimatarse a condiciones ambientales externas diferentes a las del cultivo in vitro por ejemplo, la intensidad de luz supera las
intensidades presentes en el cultivo in vitro y la humedad relativa es menor. Estas diferencias pueden provocar la desecacin y
muerte de las plantas. La ausencia de sacarosa en los medios de cultivo es otro factor importante, pues en las condiciones
ambientales externas, las plantas cuentan slo con agua y sales minerales de los sustratos utilizados. En la aclimatacin, las plantas
transforman, a expensas de sustancias de reserva como el almidn, las estructuras de sus hojas y su metabolismo con el fin de
adaptarse a las condiciones externas (Bioversity International, 2006).
OBJETIVOS:
Obtener plantas adaptadas al medio externo mediante un proceso de aclimatacin.
Aclimatar plantas obtenidas en cultivo in vitro.
MATERIALES:
INSUMOS:
1 vaso desechable de espuma flex por persona (para
bebida caliente)
1 Funda Ziploc grande por persona
REACTIVOS:
1 frasco de fungicida (presentacin pequea) por los dos
Agua destilada
cursos (Thicarb)
Tierra abonada suficiente para el curso (2.5 Kg)
Cascarilla de arroz o filtro para macetas (piedra pmez
granulada) suficiente para el curso (1 Kg)
EQUIPOS:
MUESTRA:
Una planta in vitro de violeta/orqudea (con races) por persona (dependiendo disponibilidad en la sala de incubacin del
laboratorio)
INSTRUCCIONES:
Utilice ropa de proteccin: mandil, cabello recogido, zapato cerrado, uas cortas y sin pintar.
Verifique la disponibilidad de los materiales, equipos y reactivos a usar en la prctica
ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:
1. Elegir un frasco con violetas enraizadas para su respectiva aclimatacin.
2. El sustrato que se utilizar es una relacin 3:1 de tierra abonada y cascarilla de arroz (o piedra pmez), ms solucin de
0.5% de fungicida comprobando la humedad del sustrato adecuada.
3. Con cuidado y con la ayuda de una pinza, se extrae la violeta del frasco asegurndose que los brotes se encuentren intactos.
Se lava las races con agua destilada para retirar el medio de cultivo slido.
4. Se realizan 3 orificios en la base del vaso y se llenan las partes del mismo con sustrato. Finalmente se coloca la planta a
1 o 2 cm de la superficie.
5. Se debe realizar riegos peridicos (cada 2 das durante 1 semana) con medio MS autoclavado a pH 5,6 5,8 (sin azcar
ni agar) aproximadamente 10-20 mL, el medio debe estar a temperatura ambiente y se debe regar por el borde del vaso, no
encima de las hojas ni del tallo. Una semana despus se puede regar con agua corriente cada 3 - 4 das.
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6. Para mantener la humedad en la planta, se debe colocar el vaso dentro de una funda ziploc y realizar un orificio diariamente
en la funda para que vaya aumentando la cantidad de oxgeno y reduciendo la humedad relativa, y puedan funcionar los
estomas.
7. No mantener la planta en un lugar de exposicin directa del sol, tampoco en oscuridad completa. Puede darle la luz tras un
vidrio (ventana) o artificialmente con una lmpara no muy cerca de la planta, ya que la luz muy fuerte puede llegar a quemar
sus hojas.

RESULTADOS OBTENIDOS:
Elaboracin de un ensayo sobre los fundamentos tericos y posibles tcnicas para aplicar los mecanismos de
aclimatacin.
CONCLUSIONES:
El estudiante es capaz de realizar la prctica y de obtener plantas aclimatadas capaces de sobrevivir en un medio ex vitro.
El estudiante conoce el principio o fundamento terico sobre aclimatacin y lo aplica en la ejecucin de esta prctica.
RECOMENDACIONES:

Es importante proveerse de los materiales y reactivos necesarios para cada una de las prcticas de laboratorio
FIRMAS

F: . F: . F:

Nombre: Cristian Pea Nombre: Nombre:

COORDINADOR DE REA DE COORDINADOR/JEFE DE LABORATORIO
DOCENTE CONOCIMIENTO

REFERENCIA DE MATERIALES A UTILIZAR

1 vaso desechable de espuma flex por persona (para bebida caliente)

1 Funda Ziploc grande por persona

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1 frasco de fungicida (presentacin pequea) por los dos cursos (Thicarb). Pueden encontrar en
tiendas de productos agrcolas.

Tierra abonada suficiente para el curso (2.5 Kg). Pueden encontrar en Ferrisariato o Kywi

Cascarilla de arroz o filtro para macetas (piedra pmez granulada) suficiente para el curso (1
Kg). Pueden encontrar en Kywi.