Biomembranas

- Complejos supramoleculares de lípidos anfipáticos y proteínas

- La estructura básica es una bicapa lipídica con proteínas
- Constituyen el límite exterior de las células y delimitan los compartimentos
intracelulares (organelas)
- Aunque parece un sistema muy ordenado, es fundamentalmente estabilizada por el
componente entrópico (interacciones hidrofóbicas)
 Principales funciones de las membranas

1. Límite 4. Catálisis
2. Transporte controlado de sustancias 5. Contacto entre células
3. Recepción y transmisión de señales 6. Anclaje del citoesqueleto
Composición lipídica de membranas de células hepáticas de rata (% en peso)

Membrana Col PC PE PS PI PG CL SM
Plasmática 30 18 11 9 4 0 0 14
Golgi 8 40 15 4 6 0 0 10
RE liso 10 50 21 0 7 0 2 12
RE rugoso 6 55 16 3 8 0 0 3
Nuclear 10 55 20 3 7 0 0 3
Lisosomal 14 25 13 0 7 0 5 24
Mit. interna 3 45 24 1 6 2 18 3
Mit. externa 5 45 23 2 13 3 4 5

Col = colesterol PC = fosfatidilcolinas PE = fosfatidiletanolaminas

PS = fosfatidilserinas PI = fosfatidilinositoles PG = fosfatidilgliceroles
CL = cardiolipinas SM = esfingomielinas
La interacción hidrofóbica impulsa la
formación de agregados lipídicos
 Distintos tipos de agregados
lipídicos

La geometría molecular
determina el tipo de agregado
Bicapa lipídica en burbujas de detergentes
 FASES LIQUIDO-CRISTALINAS

Compuestos con grupos polares voluminosos en relación a la región hidrofóbica prefieren la fase H-I.
(ácidos grasos y sus sales, lisofosfolípidos, gangliósidos, otros)
Compuestos con grupos polares pequeños en relación a la región hidrofóbica prefieren la fase H-II.
(fosfatidiletanolaminas insaturadas, diacilgliceroles, otros)
Compuestos con tamaños comparables entre las regiones polares e hidrofóbicas prefieren la fase lamelar.
(fosfatidilcolinas, esfingomielinas)

Al aumentar la temperatura se favorece la separación entre las cadenas hidrocarbonadas y se inducen

transiciones: H-I Æ Lamelar Æ H-II.

Al aumentar el nivel de hidratación se favorece la separación entre los grupos polares y se inducen
transiciones: H-II Æ Lamelar Æ H-I.
La composición y asimetría de las membranas
determina su curvatura
Distribución de fosfolípidos entre la cara externa e interna
de la membrana de eritrocitos
 Transición de fase gel Æ líquido-cristalino

Al aumentar la temperatura por encima de Tt ocurre:

a) Aumento del area ocupada por molécula de lípido (0,5 a 0,7 nm2).
b) Disminución del espesor de la bicapa (5 a 4,3 nm).
c) Aumento de movilidad y disminución del ordenamiento
 MOVILIDAD DE LOS LÍPIDOS EN LA BICAPA

Todos los modos de movilidad aumentan por encima de Tt.

La difusión lateral aumenta unas 100 veces (de 10-10 a 10-8 cm2/seg).
 MOVILIDAD SEGMENTAL DE LAS CADENAS HIDROCARBONADAS

En la fase líquido-
cristalina, el interior
hidrofóbico de la bica-
pa se encuentra en un
estado similar al líqui-
do con alta movilidad
segmental (y bajo or-
denamiento) que au-
menta hacia el centro
de la bicapa. Se pro-
ducen retorcimientos
(kinks) con promedio
de vida de unos 10-9
seg.
 Inmediatamente por debajo de Tt

En el rango de la
transición de fase hay co-
existencia de dominios Fase contínua
sólidos y fluídos
separados lateralmente.

En la interfase entre dominios

se producen defectos de empa-
quetamiento que aumentan la Inmediatamente por encima de Tt
permeabilidad de la bicapa a
iones y compuestos polares

En sistemas mixtos formados

Fase contínua
por más de un fosfolípido, la
separación lateral de fase
puede ocurrir en un rango
muy amplio de temperatura.
 Influencia del grupo polar y de las cadenas hidrocarbonadas sobre la
temperatura de transición de fase gel Æ líquido-cristalino

Fosfolípido Tt (oC) Fosfolípido Tt (oC)

DMPC (1,2 di 14:0) 24 DMPE (1,2 di 14:0) 51
DPPC (1,2 di 16:0) 42 DPPE (1,2 di 16:0) 63
DSPC (1,2 di 18:0) 55 DSPE (1,2 di 18:0) 82
DOPC (1,2 di 18:1, 9-cis) -22 DOPE (1,2 di 18:1, 9-cis) 15
DEPC (1,2 di 18:1, 9-trans) 5 DEPE (1,2 di 18:1, 9-trans) 41

MPPC (1-14:0, 2-16:0) 35 DMPG (1,2 di 14:0) 23

PMPC (1-16:0, 2-14:0) 27 DPPG (1,2 di 16:0) 41
PSPC (1-16:0, 2-18:0) 47 DSPG (1,2 di 18:0) 54
SPPC (1-18:0, 2-16:0) 44 DPPA (1,2 di 16:0) 67
DOPA (1,2 di 18:1, 9-cis) 8
Influencia de la longitud de cadena: A > longitud aumenta la Tt.
Influencia de las dobles ligaduras: La insaturación disminuye Tt por impedir que se adquiera
la configuración “todos trans” que maximiza las interacciones de Van der Waals en el estado de
gel. El máximo efecto es producido por un doble enlace “cis” cuando se encuentra en una
posición intermedia en la cadena acílica (la movilidad segmental es relativamente restringida en
la región del doble enlace pero es aumentada en las regiones alejadas de la misma). La
presencia de más de un doble enlace en la misma cadena tiene un efecto cada vez menor sobre
la Tt y la movilidad de los lípidos de la bicapa.
Las posiciones sn-1 y sn-2 no son equivalentes. Los fosfolípidos de membranas naturales
presentan en general un ácido saturado o monoinsaturado en sn-1 y una cadena mono- o
poliinsaturada en sn-2.
Influencia del tamaño del grupo polar: A > tamaño disminuye Tt por separar las cadenas
hidrocarbonadas y desfavorecer las interacciones de Van der Waals entre ellas.
Influencia de la carga del grupo polar: La repulsión de cargas favorece la separación y el
aumento del area ocupada por molécula, y produce una disminución en Tt.
Influencia del pH y fuerza iónica: Tienen poca influencia sobre bicapas de fosfolípidos
zwiteriónicos (excepto pH extremos que afecten la ionización). En bicapas con fosfolípidos
cargados negativamente, un aumento de pH favorece la ionización de grupo polar y la repulsión
entre los mismos, aumentando el area molecular y disminuyendo Tt favoreciendo el estado
fluído. Al aumentar la fuerza iónica se tiende a neutralizar la carga de superficie y eliminar la
influencia de la carga.
Influencia de cationes divalentes: Ca++ y Mg++ se unen estequiométricamente a 2 moléculas
de fosfolípidos acídicos reduciendo su carga superficial y el area molecular favoreciendo el
estado de gel. En bicapas mixtas, estos cationes conducen a la formación de clusters y a la
separación lateral de los fosfolípidos acídicos.
INFLUENCIA DEL COLESTEROL SOBRE LA DINAMICA DE BICAPAS LIPIDICAS

En bicapas en el estado líquido-cristalino, el anillo esteroideo rígido interactúa con las cadenas
acílicas inhibiendo la formación de “kinks”. Este efecto “condensante” reduce el area molecular de
los fosfolípidos. La reducción de la movilidad segmental de las cadenas acílicas es máxima en la
región de C7 al C9, pero es poco afectada (e incluso aumentada) en la región de los –CH3 terminales.
La formación de un puente de H con los carbonilos es esencial ya que un efecto mucho menor se
observa sobre bicapas de análogos que carecen del grupo carbonilo (eter lípidos).
Contrariamente al efecto “condensante” sobre el estado fluído, el colesterol presenta un efecto
“fluidificante” sobre bicapas en el estado de gel, por impedir que las cadenas acilicas adopten la
configuración “todos trans”. En concentraciones de 50% (en mol), el colesterol anula la transición de
fase gelÆlíquido-cristalino formando un nuevo estado denominado “líquido ordenado”.
Influencia de la composición lipídica sobre el espesor de la bicapa
El colesterol tiene una inter-
acción preferencial con es-
fingomielina y otros esfin-
golípidos, lo que determina
la separación lateral de do-
minios ordenados (rafts)
donde se concentran deter-
minadas proteínas
Utilización de anticuerpos y toxina colérica fluorescentes para
determinar colocalización de proteínas y gangliósidos en membranas