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TE AMO MARIANA HOLGUIN EMPECEMOS

DEFINICIONES

*Dispositivos de anlisis utilizados para convertir una respuesta biolgica o qumica en una seal
elctrica: Herramienta o sistema analtico compuesto por un material biolgico inmovilizado (tal
como una enzima o un anticuerpo, clula entera, orgnulo o combinaciones de los mismos), en
ntimo contacto con un sistema transductor adecuado que convierta las seales bioqumicas en
una seal elctrica cuantificable.

Es frecuente confundir el trmino "biosensor" con un dispositivo que mide molculas biolgicas,
cuando en realidad el nombre "biosensor" hace referencia a la parte receptora biolgica que lleva
incorporada en su interior ***

CARACTERSTICAS.

*Altamente fiable y especfico para el propsito de la aplicacin y que su reaccin sea


independiente de factores tales como la agitacin, la temperatura, el PH y la presin.

*Ser selectivo, sensible, estable (permanecer sin cambios) en condiciones normales de


almacenamiento y mostrar a su vez estabilidad luego de un gran nmero de pruebas

*La respuesta debe ser rpida (en lo posible en tiempo real), precisa, exacta, reproducible y lineal
en el rango de inters de anlisis.

FUNCIONAMIENTO.

El analito es reconocido por el receptor generando una seal primaria, a continuacin el


transductor la convierte en una seal secundaria elctrica, que posteriormente es amplificada,
condicionada y procesada, para ser presentada en forma de dato.
El primer material (elemento biolgico) responsable de la etapa de reconocimiento del analito
(molcula o microorganismo), es el que determinar las caractersticas de selectividad del
dispositivo. ste material podr aparecer integrado, acoplado o inmovilizado sobre un soporte.

Como consecuencia de una reaccin qumica o de una interaccin selectiva con el analito,
permitir la generacin de una seal primaria en cualquier dominio (electroqumico, ptico,
trmico, etc.) Algunos de los fenmenos asociados son:

Cambios de color
Cambios de potencia
Flujo de electrones
La produccin de calor

Por lo anterior, la informacin suministrada por la seal est directamente relacionada con la
presencia de un analito determinado.

Un segundo material se encarga de traducir sta seal primaria generada en la etapa de


reconocimiento en otra ms fcil tratable (seal secundaria), que normalmente es de dominio
elctrico. sta informacin transmitida tiene un carcter cuantitativo ya que la magnitud de esta
seal se relaciona con la actividad o concentracin de la especia reconocida en la etapa previa.

CLASIFICACIN.

Los biosensores pueden clasificarse en funcin de: el tipo de interaccin que se establece entre el
elemento de reconocimiento y el analito, el mtodo utilizado para detectar dicha interaccin, la
naturaleza del elemento de reconocimiento o el sistema de transduccin.

POR EL SISTEMA DE TRANSDUCCIN*


ptico:

Algunas de las propiedades que posee la luz, ya sea la de ser guiada a travs de ciertas estructuras
o la de sufrir fenmenos de resonancia, pueden ser aprovechadas para implementar un biosensor,
que en este caso recibe el nombre de biosensor ptico.

Las bases fsicas de ste tipo de sensores son los cambios que ocurren en absorcin,
fluorescencia, luminiscencia, dispersin o ndice de refraccin, cuando la luz se refleja en las
superficies de reconocimiento.

El sistema bsico de medida consiste en una fuente de luz, el elemento sensor (donde se
encuentran las molculas receptoras) y el detector. Se diferencian mtodos de deteccin directa,
sin necesidad de marcaje y deteccin indirecta, en la que es necesario utilizar un marcaje.

***Los efectos pticos que actualmente se proponen para el desarrollo de un biosensor son tres:
la fluorescencia, las configuraciones de campo evanescente y la absorcin. La fluorescencia
consiste en la emisin de luz por parte de los tomos cuando, tras un proceso previo de excitacin,
stos vuelven al estado fundamental. En nuestro caso, cada analito genera unos parmetros
caractersticos de excitacin-emisin, con lo que es posible determinarlo unvocamente. El
segundo efecto tiene que ver con sensores que utilizan guas de onda. En una gua de ondas, la luz
se transmite en condiciones de reflexin total interna. Sin embargo, el campo electromagntico no
queda estrictamente confinado en el interior de la misma, sino que parte de l escapa al exterior
presentando un decaimiento exponencial. Es el campo evanescente, que ser el encargado de
detectar la sustancia de inters, ya que cualquier cambio que se produzca en l influir en las
caractersticas de la luz que se propaga por el interior de la gua. Tambin puede ocurrir que la
interaccin analito-receptor lleve asociado un fenmeno de absorcin. De este modo, cuando
ambas sustancias reaccionen, la cantidad de luz que llega al detector se ver afectada
De acuerdo con la Unin Internacional de Qumica Pura y Aplicada (IUPAC, por sus siglas
en ingls), un biosensor es un dispositivo que usa reacciones bioqumicas especficas
mediadas por enzimas, anticuerpos, organelos, tejidos o clulas completas para detectar
compuestos qumicos usualmente por seales elctricas, trmicas u pticas

BIOSENSORES TERMOMETRICOS.

Los transductores termomtricos se basan en la deteccin del calor generado en las reacciones
enzimticas exotrmicas, que se puede relacionar con la concentracin de analito. Estos cambios
de temperatura normalmente se determinan por medio de termistores a la entrada y a la salida
del dispositivo en el que se encuentran inmovilizadas las enzimas. Presentan como inconveniente
que pueden existir prdidas de calor por irradiacin, conduccin o conveccin.

Como consecuencia de la interaccin entre el elemento de reconocimiento y el analito se produce


una reaccin exotrmica que es proporcional a la concentracin de analito.

**Un sensor enzimtico trmico, o entalpimtrico, mide la concentracin de un sustrato


usando la variacin de entalpa de una reaccin enzimtica. Existen distintos mtodos para
medir temperatura (pticos, mecnicos, elctricos) pero los elctricos son los ms usados
para la construccin de biosensores trmicos debido a que la seal elctrica puede
obtenerse directamente de la variacin de la temperatura. Pueden usarse termistores o
termocuplas para la medicin de temperatura. Las termocuplas simples no son lo
suficientemente sensibles para detectar las variaciones de entalpa de las reacciones
enzimticas. Los termistores y termopilas s pueden detectar pequeas variaciones de
temperatura. Los termistores son mezclas de xidos metlicos con semiconductores
cristalinos. La alta resistividad de estos materiales les confiere una rpida respuesta
temporal gracias a su pequeo tamao y capacidad calorfica reducida. La resistencia de
un termistor es funcin de la temperatura, lo cual se ocupa como principio para la
transduccin. Las termopilas se construyen alternando uniones termoelctricas y se usan
para construir biosensores. Generan seales pasivas lo que las hace particularmente aptas
para mediciones en soluciones fluidas. Se emplean dos termistores, uno de los cuales est
a una temperatura de referencia. La enzima inmovilizada se coloca directamente sobre el
termistor de trabajo. La enzima transforma el sustrato y libera o consume caloras que
pueden medirse in situ por los termistores (o termocupla). En una determinacin se
colocan dos termistores, uno mide las variaciones de la temperatura del medio, y el otro
las variaciones de temperatura por la reaccin enzimtica ms las del medio. La diferencia
de las dos temperatura es la variacin por la actividad enzimtica

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El principio termomtrico tambin se utiliza para mediciones en algunos electrodos de enzima
debido a que las reacciones enzimticas siempre producen calor en un rango de 20 a 100 kJ mol -4
. La cantidad de sustancia puede estimarse del calor producido. Inyectando una muestra
estabilizada a una temperatura en una pequea columna con enzimas inmovilizadas con una
velocidad de flujo constante, puede medirse el calor producido como la diferencia entre las
terminales de entrada y salida de la columna. Las sustancias tpicas que se analizan por principios
termomtricos son etanol, glucosa, lactato, cido oxlico, penicilina, sucrosa, y urea. Un termistor
recubierto con una enzima inmovilizada puede ser un biosensor simple y se llama termistor unido
a enzima.

****Transductores termomtricos Dado que la mayor parte de las reacciones bioqumicas son de
naturaleza exotrmica en mayor o menor grado, la calorimetra ofrece un sistema de deteccin
para numerosos analitos, especialmente en aquellos en que media una catlisis enzimtica. Estas
reacciones estn asociadas con cambios relativamente elevados en la entalpa molar, en un
intervalo entre 20 y 100 KJ mol-1 (catalasa-perxido de hidrgeno H =100 KJ mol-1, glucosa
oxidasa-glucosa H =80 KJ mol-1). Presentan la ventaja 57 de que las medidas se pueden llevar a
cabo slo sobre la base de la catlisis enzimtica y sin la necesidad del concurso de otras
reacciones, como la adicin de un segundo reactivo. En la actualidad existen calormetros sencillos
y de bajo coste que permiten su utilizacin rutinaria, especialmente en clnica.

La aproximacin ms sencilla, para su empleo como biosensores, utiliza enzimas directamente


inmovilizadas sobre el transductor trmico (TEP: Termal Enzime Probes) o atrapadas en el interior
de membranas. Se utilizan tambin sensores Peltier que permiten una considerable reduccin del
tamao del dispositivo. No obstante, otros mtodos mucho ms eficaces para detectar la
liberacin del calor producido, consisten en el empleo de una pequea columna con la enzima
inmovilizada sobre un soporte adecuado, constituyendo lo que se denomina el termistor
enzimtico y el analizador entalpimtrico de flujo, que detectan cambios de temperatura de
0,01C, con salidas de registro de 100 mV. Este tipo de biosensores ha evidenciado su utilidad en
la determinacin de metales pesados como el mercurio(II), basado en la inhibicin que este metal
provoca sobre la enzima invertasa, consiguindose lmites de deteccin de 5 ppbs y sensibilidades
equivalentes a los transductores amperomtricos.

****Se basan en la deteccin del calor generado en las reacciones enzimticas exotrmicas, el
cual se puede relacionar con la concentracin de analito. Estos cambios de temperatura suelen
determinarse por medio de termistores situados a la entrada y a la salida del dispositivo en el que
se encuentra inmovilizadas las enzimas.
Biosensores Termomtricos

1) Poco xito comercial

2) Ventaja: se puede acoplar fcilmente varias reacciones en un nico reactor

3) Ejemplo: 1) Detector de Lactato Lactato + O2 ------(lactato -oxidasa)---> piruvato + H2O Piruvato


+ NADH+ H+ --(lactato deshidrogenasa)--> lactato + NAD+

4) Puede utilizarse clulas viables

5) Puede acoplarse a un inmunoensayo enzimtico: ELISA termomtrico o TELISA

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