INFORME DE PRCTICA DE BIOLOGA:

CLULA.

Mora G. Andrs E. C.I: 25.462.598

INTRODUCCION

La clula constituye la unidad funcional, estructural y gentica de todo ser vivo

(kimbal 1989, salomon, 2000). Ellas se diferencian entre s por su morfologa y las
funciones que sean capaces de realizar separndolas en microorganismos
simples y complejos. Sin embargo, aparte de la complejidad de las clulas todas
realizan funciones especficas que las caracterizan como la unidad ms pequea
que se puede considerar viva. Estas pueden ser simples como las clulas
unicelulares (bacterias o protozoarios) o complejas como las multicelulares
(hongos, plantas o animales).

Las clulas se pueden clasificar en procariotas las ms simples, presentan un

ncleo indefinido, el cual est inmerso en el citoplasma, en este se encuentran
una gran cantidad de molculas, en especial enzimas, responsables de reacciones
qumicas necesarias para la vida. Las clulas eucariotas las ms complejas, se
caracterizan por la presencia de un ncleo definido, tambin poseen dentro del
citoplasma compartimientos denominados organelas, (Proverbio F. 2007). Estos se
encargan de realizar las funciones especificas para mantener vivo al
microorganismo, dependiendo de las funciones que posean las clulas se dividen
en vegetales y animales.

Las clulas vegetales se diferencian de las animales por la presencia de pared

celular que (rodea a la membrana celular) formada por celulosa, vacuolas donde la
clula almacena la energa para momentos de escases, cloroplastos los cuales se
encargan de realizar el proceso de la fotosntesis y darles el color caractersticos a
las plantas. Las clulas animales no poseen pared celular, ni cloroplastos, ni
grandes vacuolas, (Kimball J.W. 1986).

Al momento de observar los diferentes tipos de clulas, se utilizan mtodos de

tincin para una mejor observacin e identificacin de estas, para observar las
clulas procariotas se utiliza la tincin de Gram, la cual divide a las bacterias en
dos grupos, las Gram positivas y las Gram negativas segn la capacidad de la
pared celular (formada por peptiduglucano) de retener el colorante.

El mtodo Violeta cristal se fundamenta en la tincin del ncleo de las clulas. El

mtodo conocido como la Tincin de Giemsa est formada por varios colorantes
que tien las zonas con mayor contenido de ADN, es una tcnica utilizada al
momento de observar los organismos unicelulares como clulas de hgado y
glbulos rojos.

OBJETIVOS

General: Identificar las clula encontradas en los distintos sistemas biolgicos.

Especficos: Evidenciar las diferencias entre las clulas procariotas y eucariotas,

vegetales y animales.

Utilizar mtodos de tincin para identificar diferentes estructuras celulares.

Reconocer las estructuras celulares visibles con el microscopio compuesto.

Relacionar la estructura con la funcin de cada una de las partes constituyentes

de la clula.

MATERIALES

Clulas procariotas:

Microscopio, muestra de bacterias Escherichia coli, aceite de inmersin,

portaobjetos, cubreobjetos, gotero, metanol 99%, mechero, cristal violeta al 1%,
solucin de safranina al 0,5%, azul de metileno al 1%, Lugol, alcohol-acetona.

Clulas eucariotas:

Microscopio, portaobjetos, cubreobjetos, Elodea sp (Elodea), cuentagotas, Allium

cepa (Cebolla), Lycopersicum esculemtum (Tomate), agua destilada, azul de
metileno, Metanol, alcohol, algodn, colorante Giemsa.

METODOS
Observacin de clulas procariotas:
Tincin de Gram: Se realiz un frotis de bacterias en un portaobjetos dejndolo
secar, luego se fij con metanol 99% por 1 minuto, tiendo con cristal violeta
durante 1 minuto, posteriormente se lavo con agua la muestra y se cubri con
lugol por 1 minuto, lavando de nuevo, se decolor con alcohol-acetona hasta
que no saliera mas colorante 30 segundos aproximadamente, seguidamente,
 se lavo con agua y se ti con safranina por 1 minuto, lavando de nuevo, se
dej secar para observar al microscopio con el mximo aumento.

Observacin de clulas eucariotas:

Elodea: Se coloc una hoja de Elodea en un portaobjetos, extendindola sobre
una gota de agua teniendo cuidado que no se doble, montar el cubreobjetos
sobre la muestra evitando la formacin de burbujas. Seguidamente, se
observ al microscopio, hasta localizar las clulas, utilizando los objetivos de
menor a mayor aument, posteriormente se identificaron las estructuras
celulares visibles.
Epidermis de cebolla: Se separ una de las hojas internas de la cebolla y se
arranc la tenue membrana que esta adherida a su cara inferior cncava, y se
puso el fragmento en un portaobjetos con unas gotas de agua, colocando el
portaobjetos sobre la cubeta de tincin para que caiga en ella el agua y los
colorantes, seguidamente, se aadieron unas gotas de azul de metileno sobre
la membrana y se dej actuar durante 5 minutos, evitando que se seque, con
el cuentagotas, se lav la epidermis con agua abundante hasta que no suelte
colorante, se coloc sobre la preparacin un cubreobjetos, evitando que se
formen burbujas, observando al microscopio utilizando el aumento de mayor a
menor.
Fruto del tomate: Se tom pulpa de tomate, se coloc sobre el cubreobjetos con
gotas de agua, presionando el cubreobjetos con cuidado evitando de no dejar
huellas hasta obtener una lamina fina de la muestra, luego se observ a
distintos aumentos comenzando con el ms bajo.
Observacin de muestras montadas, previamente teidas con colorante de
Giemsa de glbulos rojos e hgado

RESULTADOS
Celulas procariotas
La tincin de Gram en las bacterias Gram negativas que se observan en forma de
bacilos, no tieron debidamente, motivado a que el colorante estaba muy
diluido (Fig.1).
La muestra de bacterias Gram negativas en forma de bacilos (Fig.2), fue
previamente teida con un colorante violeta cristal ms concentrado que el de
la muestra anterior, aqu se distinguen las Gram negativas estas se colorearon
de un color rojizo.
 Fig.1: Frotis de bacterias Escherichia coli a 400x con tincin de Gram.

Fig.2: Frotis de bacterias Escherichia coli a 400x con tincin de Gram.

Clulas eucariotas
En la hoja de Elodea se muestra la presencia de clulas eucariotas, all se
reconocen los cloroplastos como unas organelas que en la figura 3 parecen
puntos de color verde, y la pared celular que limita el espacio de cada clula .
Al observar la epidermis de cebolla al microscopio, es posible observar la pared
celular que divide a cada clula, y el ncleo que se localiza en el interior de
estas como esferas teidas con violeta cristal (Fig.4).
 Fig.3: Muestra de hoja de Elodea a 100x.

Fig.4: Muestra de epidermis de cebolla a 400x.

En una segunda muestra de epidermis de cebolla puede observarse con mayor

facilidad la pared celular mostrada como una lnea paralela a la membrana
plasmtica, gracias a la utilizacin de una solucin de cloruro de sodio (Fig.5).
En la figura 6 donde se muestran las clulas que componen el tejido de la pulpa
de tomate se le identifican los cromoplastos, como las organelas responsables
de su color rojo.
En la preparacin de clulas de hgado previamente montado con tincin de
Giemsa, se pueden identificar el citoplasma de color rosado y dentro de este el
ncleo de las clulas que tie de color rosado oscuro, adems de depsitos
infecciosos como manchas de color oscuro (Fig.7).

En la figura 8 se observan una muestra ya montada de sangre de mamfero con

tincin de Giemsa, se pueden observar los nucleos de linfocitos de color
violeta y los globulos rojos con un color rosado claro.

Fig.5 Observacin de la Pared celular en clulas de cebolla a 100x.

 -
Fig.6: Muestras de cromoplastos de clulas de tomate 100x.

Fig.7: Se observan clulas de hgado infectado 100x con tincin de Giemsa.

 Fig.8: Sangre de mamfero 400x con tensin de Giemsa.

DISCUSIN
La celula es la unidad fundamental de todos los seres vivos, dependiendo a que
organismo constituya, presenta una estructura y funciones especificas.
Las clulas procariotas presentan nucleo indefinido y una membrana plasmtica a
la cual se le atribuye la morfologa de estas, pueden ser: De forma mas o
menos esfricas (cocos), en forma de baston (bacilos), en espiral o hlice
(bacilos) y en forma de coma (vibrio).

Para la observacin de la muestra de bacterias Escherichia coli (fig.1, fig.2), se

utilizo el mtodo de tincin de Gram, este separa a las bateras (dependiendo
de la concentracin que tengan de lipolpolisacaridos en su pared celular), en
dos tipos las bacterias Gram positivas que se visualizan de color morado,
motivado a la ausencia de lipopolisacaridos en su pared celular, y las Gram
negativas que se visualizan teidas de un color rojizo, debido a que la
membrana externa de su pared celular esta formada mayoritariamente de
lipopolisacaridos, creando alrededor de estas una capa hidrofilica. En la figura
1 debido a que la tincin se realizo con un colorante muy diluido afecto el
resultado esperado y se muestra la presencia de bacterias Gram positivas.
Para la figura 2 se utilizo un colorante con mayor concentracin, mostrando las
Gram negativas teidas de color rojizo.
El organismo procariotico Escherichia coli, presente en forma de bacilo, reacciona
negativamente a la tincin de Gram (Gram negativo), y debe su movilidad a
flagelos que rodean su cuerpo.
Las clulas eucariotas poseen un ncleo definido por la membrana nuclear,
adems de caracterizarse por realizar todas sus funciones en organelas
especificas, dependiendo de las necesidades del organismo a las formase
parte.
Las clulas vegetales se caracterizan principalmente por la presencia de una
pared celular (compuesta por celulosa) y cloroplasto. La pared celular es una
capa a la cual se le atribuye la rigidez de las plantas, se localiza al exterior de
la membrana plasmtica. Los cloroplastos son organelas fotosintticas, y en
su interior podemos encontrar los tilacoides, los que se encargan de darle el
color caracterstico a las plantas.
Para la observacin de las clulas vegetales de la planta de Elodea no se necesito
ningn tipo de tincin previa, debido a que estas plantas poseen un color
verde brillante mediante el cual se puede observar con detalle su morfologa a
travs de un microscopio.
Al momento de observar la epidermis de cebolla, se realizo una coloracin de su
ncleo y la pared celular con violeta cristal, seguidamente, en otra muestra de
epidermis se aplico una solucin de cloruro de sodio, esta tcnica hace que el
interior de la clula se deshidrate y se pueda apreciar mejor la pared celular.

En la muestra de la pulpa de tomate se observaron los cromoplastos (Fig.6), estos

son un tipo de plastos que aportan el color naranja y rojo a las plantas, florez y
frutos. De acuerdo con su estructura pueden ser: Globulosos, (los pigmentos
se acumulan en gotas junto con lpidos: Ctricos, Tulipanes), Fibrilares o
tubulosos, (los pigmentos se asocian con fibrillas proteicas: Rosas, Chiles)
Cristalosos, (los pigmentos se depositan como cristaloides asociados con las
membranas tilacoides: tomate, zanahoria) Membranosos (membranas
arrolladas helicoidalmente: Narcissus).

La tincin de Giemsa es una tcnica utilizada para la observacion de frotis

sanguneos, cortes de tejido y otro tipo de muestras biolgicas.

En la observacin de la sangre de mamfero se pudo notar la presencia de los

linfocitos, ellos son un conjunto sanguneo encargado de las respuestas
inmunitarias del organismo mediante la produccin de anticuerpos, estos
pueden ser:

Linfocitos B: son los responsables de la produccin de anticuerpos, protenas

que se adhieren a un antgeno especfico.

Linfocitos T: Detectan antgenos proteicos asociados a molculas del complejo

mayor de histocompatibilidad (MHC 0 CMH).
 CONCLUSIONE
En las clulas eucariotas a diferencia de las procariotas se observaron las
organelas (cloroplastos, ncleo, pared celular).
El uso de mtodos de tincin tales como: Gram, permite clasificar las clulas
procariotas en negativas y positivas de acuerdo al peptidoglucano encontrado
en la pared celular.

La tincin de Giemsa y violeta cristal permiten reconocer partes de las clulas,

observndolas al microscopio.
El mtodo de la tincin de Gram colorea la pared celular de los Gram positivo de
violeta .
En las clulas eucariotas vegetales se encuentran presentes los cloroplastos, que
son organelas q se encargan de los procesos fotosintticos, y la pared celular
que es la responsable de la rigidez de las plantas.
En clulas de tomate se observan organelas denominados cromoplastos,
responsables del color rojizo o anaranjado de las plantas.

BIBLIOGRAFIA
KIMBALL J.W. (1986) Biologa. (Cuarta edicin). Addison-Wesley Iberoamericana,
S.A. pp 60 85.
ALBERTS, B, BRAY, D, LEWYS, J, RAFF, M, ROBERTS, K. Y WATSON, J.D.
(1994). Biologa molecular de la clula (Segunda edicin). Medica
panamericana. pp 5 25.
PROVERBIO F. Y MARIN R. (2007).Biologa. Per: Santillana S.A. pp 32 33.
VILLE, C.A, SOLOMON, E.P, MARTIN, D.W. Y BERG L.R. (1992) Biologia.
Mexico: McGraw-Hill Interamericana. pp 77 78.
Disponible: http://es.wikipedia.org/wiki/Cromoplastos [Consulta: 2012,
noviembre].
Disponible: http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Giemsa [Consulta:
2012, noviembre].