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UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE AGRONOMA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE SANIDAD VEGETAL

CURSO: SV372 FITOPATOLOGA GENERAL

TEMA:
VIRUS FITOPATGENOS

Ing. Mara Julia Jaramillo Carrin


Qu es un virus?
Un virus es un agente:
- no celular infeccioso,
- submicroscpico,
- que se multiplica unicamente en clulas vivas,
- y es capaz de causar enfermedad.

Todos los virus son parsitos de clulas y producen una multitud


de enfermedades a todas las formas vivientes.

Se conocen alrededor de 3000 virus de los cuales aproximadamente


619 atacan y producen enfermedad en plantas.
Caractersticas principales de los virus de
plantas
Tamao: submicroscpicos
medida en nanmetros (nm) o Angstroms
(, 0.1 nm). 1 nm = 10-6 mm

Forma: alargados flexuosos o abastonados


esfricos, isomtricos,
baciliformes,
bigeminados.

Composicin: cpside proteica y


cido nuclico: ARN o ADN,
hebra doble (ds)
hebra simple (ss)
polaridad + -
Estructuras bsicas de los
virus

Isomtricos y esfricos Alargados rgidos y flexuosos


Forma y tamao

APLV
PLRV

BGMV

Esfricos/polidricos: 17 - 60 nm
..Forma y tamao
Alargados

TMV

Rgidos
PVX

12-20 nm x 130-300 nm
Flexuosos

10-13 nm x 480-2000 nm
LNYV

Baciliformes: 75 nm x 380 nm

Bi- o trigeminados
BSMV
Objetivos:

Que el estudiante sea capaz de:


Reconocer la importancia econmica que tienen los
virus al causar enfermedades en plantas.
Considerar a los virus como entidades
biolgicamente infecciosas capaces de producir
sntomas en las plantas.
Conocer las principales formas de transmisin que
tienen los virus.
Conocer los mtodos que se utiliza para su
identificacin.
Importancia Econmica
Las enfermedades producidas por virus daan todos los
rganos de las plantas.

Producen prdidas econmicas ya que disminuyen


productividad y calidad de los productos agrcolas. Estas
pueden ser catastrficas, moderadas o insignificantes.

La severidad de las enfermedades virales particulares vara:


- con la localidad.
- la variedad del cultivo.
- de una estacin a otra.
En resumen es importante por que:

- Ocasionan reduccin en los rendimientos.

- Tienen amplia distribucin.

- Tienen rpida diseminacin.

- Son difciles de controlar.


Efecto de PLRV en el follaje
Efecto de PLRV en
el rendimiento
Citrus tristeza virus (CTV)
Efecto de PRSV
en rendimiento y
calidad
Sntomas inducidos por virus

1. Por su localizacin en el hospedante, pueden ser:


Locales.
Sistmicos.
Luego de la infeccin, no hay desarrollo de sntomas
(latente).
Sin desarrollo de sntomas por condiciones ambientales
(enmascarados).
2. Segn las alteraciones que provoca en el hospedante,
pueden ser:
Lesiones localizadas.
Alteraciones en la pigmentacin de la hoja.
Alteraciones morfogenticas.
Presencia de estructuras inducidas por los virus en las
clulas vegetales.
Lesiones localizadas
Las necrosis, con tonalidades rojizas a negras:
- txinas oxidativas.
- peroxidasas y polifenoloxidasas.
- produccin y liberacin de etileno.

Alteraciones en la pigmentacin de las hojas


Las clorosis, los amarillamientos y los mosaicos. Debido a:
- Prdida local o general de clorofila.
- Interferencia en la sntesis y desarrollo de cloroplastos.
Alteraciones Morfogenticas
La reduccin del crecimiento, modificaciones de color, hipo o
hiperplasia, malformaciones de rganos o de la planta
completa, formacin de tumores, esterilidad del poln o la
cada prematura de hojas. Puede deberse:
- al incremento del etileno y del cido abscsico.
- disminucin de citoquininas.
Estos sntomas reflejan alteraciones del crecimiento y
desarrollo (controladas hormonalmente). Moduladas por dos
factores:
- interaccin entre el hospedante y el virus.
- el ambiente.
Presencia de estructuras inducidas por los virus
en las clulas vegetales
Estructuras especficas por acumulacin de productos virales.
De gran utilidad al momento de identificar y clasificar
enfermedades virales.
Se denominan inclusiones citoplasmticas.
3. Segn su distribucin en los rganos afectados, pueden ser:
Sntomas sobre las flores: variegados florales, necrosis
y deformaciones.
Sntomas sobre las hojas: mosaicos foliares, necrosis
foliares y deformaciones.
Sntomas sobre los bulbos: necrosis en las capas
internas del bulbo.
Alteraciones del crecimiento: disminucin en el vigor
de la planta y retraso en su desarrollo: enanismo.
Sntomas internos: inclusiones citoplasmticas y
modificacin en la estructura de las clulas infectadas.
Tulip breaking virus
Sntomas tpicos de PLRV

Enrollamiento Enanismo
de las hojas amarillo en
inferiores en cultivares de S.
cultivares de andigena
S. tuberosum y otras especies
silvestres

Necrosis en red en tubrculos de algunos


cultivares de S. tuberosum ssp. tuberosum
Sntomas tpicos de PVYN
Mosaico
Sntomas tpicos de PVYO
Rugosidad, detencin del
crecimiento, necrosis de las
nervaduras.
Sntomas tpicos
de PVYC
Necrosis del tallo y hojas.
Defoliacin
Anillos necrticos
con PVYNTN de los
Andes
CTV
APMoV. Moteado tpico de las hojas
PRSV
TYLCV
PYVV
PMTV

Transmisin natural: Hongo Spongospora subterranea


TMV en tabaco
TSWV en pimiento
TSWV en tomate
Anillos en frutos de tomate provocados por el
Virus de la Peste Negra.
Manchas clorticas en bandas en una planta de cebada BSMV
Mosaicos y deformacin de frutos
Tumores, quebraduras y
hundimientos

Clorosis de nervaduras
Infecciones locales: puntos necrticos y clorticos
TRANSMISIN DE LOS VIRUS

TRANSMISIN DE VIRUS

PROPAGACIN VEGETATIVA VECTORES

MECNICAMENTE
INSECTOS
SEMILLAS
CAROS
POLEN
NEMATODOS

HONGOS

FANERGAMAS PARSITAS
Transmisin por propagacin vegetativa
Los virus pueden estar infectando una planta madre a partir
de la cual se obtienen tubrculos, bulbos, rizomas, esquejes,
brotes de madera.
Cuando estas porciones de tejido son tomados con fines de
propagacin casi siempre son transmitidos a la
descendencia de esta planta madre.
La incidencia del virus se incrementa a travs de varios
ciclos de propagacin vegetativa.
En la transmisin por injerto el virus puede pasar del patrn
al injerto y del injerto al patrn.
Un meristemo puede estar libre de virus y ser la fuente de
plantas libres de virus a travs del cultivo de meristemos.
Transmisin mecnica

Esta se produce cuando un extracto de tejido infectado o una


solucin de virus purificado se frota suavemente en la
superficie de la hoja del hospedante adecuado.
Muchos virus producen sntomas en las hojas inoculadas
entre una a tres semanas.
La transmisin mecnica de virus de plantas en la naturaleza
no es tan importante. Excepciones: PVX, ToMV, TMV
(transfiere accidentalmente a travs de herramientas, manos,
ropa o maquinaria) .
Muchos virus que no se transmiten por contacto en la
naturaleza pueden ser transmitidos en forma artificial con
ayuda de un abrasivo.
Transmisin por semilla y polen

Cuando un virus es transmitido por polen, este puede infectar a la


semilla y consecuentemente la plntula que crecer de esa semilla.
Tambin puede infectar a la planta a travs de la polinizacin de la flor.
Los Ilarvirus son normalmente transmitidos por polen.
Se sabe que casi un centenar de enfermedades de virus importantes
son transmitidos a travs de la semilla.
La semilla puede portar al virus en el tegumento (TMV) o el embrin
(BCMV).
Como regla general, de 1 al 30% de semillas de plantas infectadas por
un virus lo transmiten.
Este tipo de transmisin resulta en la posible infeccin temprana de la
plntula o de la llegada del polen de una planta enferma.
Transmisin por vectores
Vector: si lleva al virus de una planta a otra y su transmisin resulta de la
alimentacin del organismo en la planta.

VECTORES

INVERTEBRADOS HONGOS FANERGAMAS PARSITAS

ARTRPODOS NO ARTRPODOS Olpidium Cscuta


Synchitrium
Polymyxa
Spongospora

INSECTOS CAROS NEMATODOS

Hompteros Erifidos Xiphinema


Colepteros, Ortpteros Tetranquidos Longidorus
Tisanpteros Trichodorus
Heterpteros Paratrichodorus
Transmisin por nemtodos

Xiphinema spp. son nemtodos largos y delgados. Estos


son vectores de virus del grupo Nepovirus de forma
polidrica: virus de la hoja de abanico de la uva, el virus
del anillado del tabaco, el virus del anillado del tomate, y
el virus del enrrollamiento de los cerezos.
Longidorus spp. son nemtodos tambin largos y delgados
y son vectores de Nepovirus de forma polidrica tal como
el virus del anillado de la fambruesa y el virus del anillado
del tomate.
Trichodorus son nemtodos cortos y gruesos y son
vectores de Tobravirus los cuales son de forma tubular tal
como el virus del cascabel del tabaco
Transmisin por hongos

Algunas enfermedades virales son transmitidas por


hongos con origen en el suelo.
El hongo Polymyxa graminis, es el vector de varios virus
econmicamente importantes de trigo: el virus del
mosaico del trigo.
Olpidium sp. transmite por lo menos cuatro tipos de
virus: necrosis del tabaco, necrosis del pepino, nervadura
gigante de la lechuga y del achaparramiento del tabaco.
Spongospora subterranea transmite el PMTV.
Transmisin por fanergamas parsitas

Varias especies de cscuta, Cuscuta sp. transmiten virus.


Estan planta parastica con un tallo rastrero forma
haustorios que penetran al hospedante.
La cscuta actua como una manguera que conecta el
citoplasma de una planta enferma con el de la planta sana y
as el virus es llevado de planta a planta.
La transmisin de virus por cscuta en la naturaleza no es
de importancia econmica.
TIPOS DE TRANSMISIN DE INSECTOS VECTORES

* PERIODO DE ADQUISICIN
* PERIODO DE LATENCIA
* PERIODO DE RETENCIN

VIRUS NO CIRCULATIVOS:
NO PERSISTENTES
SEMIPERSISTENTES
VIRUS CIRCULATIVOS:
PROPAGATIVOS
NO PROPAGATIVOS
Los insectos son las vas ms comunes y por lo tanto econmicamente
importantes en la diseminacin de virus en el campo.
Los fidos son los vectores ms importantes de virus de plantas.
Estos transmiten alrededor de 242 virus, es decir el 66% de los virus
que tienen como vectores a los invertebrados. Estos tienen aparato
bucal picador-chupador y llevan los virus de plantas ya sea en su
estilete o los acumulan dentro de sus cuerpos.
Durante el ciclo de vida de un fido se desarrollan dos formas de
fidos: con alas o sin alas.
Los saltahojas son tambin miembros del orden Homptera y se sabe
que transmiten aproximadamente 16 virus importantes de plantas. Los
virus estn restringidos al floema de la planta y se mantienen dentro
del cuerpo del insecto para ser transmitidos a travs de la saliva.
Las mosca blancas transmite aproximadamente 70 agentes de enfermedades
virosas.Muchas de estas moscas no han sido an caracterizadas.
El vector ms estudiado es Bemisia tabaci, el que se alimenta del floema. El
grupo ms importante de virus transmitidos son los geminivirus.

Los trips son son importantes como vectores principalmente por su habilidad
en transmitir el virus de la marchitez del tomate (TSWV) el cual tiene uno de
los rangos de hospedantes mas amplios entre los virus de plantas.

Los escarabajos son vectores de cuatro grupos de virus isomtricos, adquieren


el virus rpidamente masticando el tejido infectado de la hoja.
El virus puede ser transmitido con la primera mordida. La transmisin ocurre
cuando los escarabajos regurguitan la savia y al virus en las heridas de
alimentacin.
La mosca blanca y fidos transmiten la mayor cantidad de virus
1. Transmisin no persistente y semipersistente: relacin no
circulativa con el vector:
- Gnero Cucumovirus: CMV (fidos).
- Gnero Potyvirus: PVX (fidos).
- Gnero Caulimovirus: CaMV (fidos).
- Gnero Wiakavirus: MCDV (cicadlidos).
- Gnero Closterovirus: CTV (fidos).
2. Transmisin circulativa no-propagativa:
- Gnero Luteovirus: PLRV (fidos).
- Gnero Enamovirus: PEMV (fidos).
- Genero Begomovirus: BGMV (mosca blanca).
- Gneros Comovirus, Tymovirus, Bromovirus y
Sobemovirus: lo transmiten 74 especies de 4 familias
de Colepteros: Chrysomelidae, Coccinelidae,
Curculonidae y Meloidae.

3. Transmisin circulativa propagativa:


- Gnero Tospovirus: TSWV (trips).
- Gnero Marafivirus: MRFV (cicadlidos).
- Gnero Tenuivirus: HBV (delfcidos).
Mtodos de identificacin viral
El fenotipo de la enfermedad viral puede proveer solamente
informacin limitada.
Los mtodos de identificacin viral ms especficos y
confiables se basan en diferentes propiedades de los virus:
- Patogenicidad.
- Transmisibilidad.
- Arquitectura de las partculas virales.
- Presencia de estructuras especificas del virus en
clulas infectadas.
- Propiedades de la cubierta proteica.
- Propiedades de los cidos nucleicos virales.
Patogenicidad

Bioensayos que usan plantas indicadoras.


Algunos gneros vegetales, tales como Nicotiana (tabaco) y
Chenopodium (quinoa) se usan comunmente como plantas
indicadoras.
Los dos tipos principales de respuesta son lesiones localizadas
y las infecciones sistmicas.
Muchos de los virus vegetales son transmisibles a plantas
indicadoras por medio de transmisin mecnica o por injertos.
Lesiones localizadas en hojas Inoculacin mecnica
inoculadas
Transmisibilidad
Ensayos de transmisin por vectores.
Debido a la especificidad del vector, la identificacin del
organismo que transmite al virus provee informacin
importante para la identificacin del virus.

Complejo viral: RTSV y RTBV Su vector Nephotettix virescens


ocasionan el Tungro del Arroz (cicadlido)
Arquitectura de las partculas virales

Microscopa electrnica.
La forma y tamao de los viriones diferencia partculas en
forma de barra, filamentosas, icosadricas o partculas
grandes con envoltorios.
Por el contrario, es difcil distinguir a los virus que tienen la
misma forma y tamao. Por ejemplo, es difcil distinguir
entre pequeos virus esfricos, y entre estos y los ribosomas
vegetales.
Presencia de estructuras especificas del virus en clulas
infectadas

Microscopa electrnica.
Debido a su ntima asociacin con los componentes celulares,
frecuentemente los virus producen, como resultado de la infeccin,
estructuras inusuales dentro de las clulas vegetales.
Por ejemplo, los virus de la familia Potyviridae producen
inclusiones en forma de rueda de molino caractersticas de los
virus de esa familia.
Las inclusiones especficas de los virus han sido caracterizadas en
un gran nmero de familias y gneros de virus.
La deteccin de estas inclusiones indica la presencia de un virus
perteneciente a dicho grupo.
Inclusiones citoplasmticas rueda de molino ocasionadas por
Potyvirus
Propiedades de la cubierta proteica

Tcnicas inmunolgicas.
Estos experimentos se basan en la identificacin de un virus (el
antgeno) a travs de la reaccin con sus anticuerpos especficos.
Los anticuerpos especficos son producidos por un animal cuando
protenas forneas son introducidas en ste (preparacin purificada
del virus vegetal).
Varias semanas despus de la inyeccin, se colecta la sangre del
animal y los anticuerpos se separan de ella.

Uno de los mtodos ms utilizados para el diagnstico de virus


vegetales est basado en el uso de anticuerpos. Este mtodo es el
ensayo de inmunoabsorcin de enzima ligada, o ELISA
Esquema general de una prueba de ELISA
DAS - ELISA
Sensibilizacin de placas, procesamiento y aplicacin de muestras:

Lavado de placas, adicin de conjugado y revelado:


Resultado DAS-ELISA
Propiedades de los cidos nucleicos virales

Amplificacin por PCR. Es una tcnica muy sensible y


especfica para la deteccin de virus.
Est basada en la presencia de secuencias nicas en el cido
nucleico del genoma de cada virus.
En la prueba de PCR, pedazos cortos de ADN (cebadores, o
primers) complementarios a porciones especficas del
cido nucleico viral se hibridan (adhieren) al cido nucleico
viral.
Una enzima polimerasa termoestable es usada para
sintetizar mltiples copias de una hebra de ADN (cADN).
Durante la reaccin de PCR, el nmero de molculas de la
secuencia de inters se duplica con cada ciclo, y despus de 30
ciclos el resultado es ms de 10 billones de copias de dicha
secuencia.

El producto de la PCR puede detectarse usando electroforesis en


gel, proceso en el cual una corriente elctrica se utiliza para separar
en un gel a las molculas de diferente tamao.
Luego de la separacin, los fragmentos de ADN en el gel se tien
con un pigmento especfico para cidos nucleicos, y la presencia de
una banda del tamao apropiado indica la presencia del virus para
el cual los cebadores de ADN fueron diseados.
Para los virus de ARN, la hebra de ARN es retro-transcripta a su
ADN complementario, seguido de una amplificacin del ADN
resultante usando la tcnica de PCR.
Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)

Electroforsis en gel de agarosa 1%,


teido con Bromuro de Etidio

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