ESCUELA SUPERIOR POLITECNICA DEL LITORAL

FACULTAD DE INGENIERIA MECANICA Y

CIENCIAS DE LA PRODUCCION
INGENIERIA EN ALIMENTOS
BIOQUIMICA

ENZIMAS

INTEGRANTES:

Dayaneth Rivera

Ivette Sornoza

Sabrina Urriola

M.Sc. Mara Fernanda Morales

Junio 30, 2014

Termino I 2014 - 2015

 INTRODUCCIN

El presente trabajo de investigacin se refiere al tema de los enzimas, que se puede

definir como sustancias proteicas que actan como catalizadores biolgicos, llevando a
cabo diferentes reacciones qumicas a un grado de especificidad elevado, siempre y
cuando la reaccin sea termodinmicamente posible. En las reacciones
termodinmicamente posibles, los enzimas van a actuar sobre los sustratos, los cuales se
convierten un complejo productivo Enzima-Sustrato, del cual va a resultar productos y el
enzima, el cual va a poder ser usado en prximas reacciones. Estas reacciones mediadas
por los enzimas, se denominan reacciones enzimticas.

Estas sustancias proteicas tienen la principal caracterstica de ser sustancias

extremadamente selectivas con los sustratos que van a reaccionar, para lo cual la
velocidad de reaccin crece; por esta caracterstica de selectividad es que existe una
enzima especfica para una reaccin especfica, es decir, no todas las enzimas van a
cumplir su papel de catalizador en cualquier reaccin.

El trabajo de los enzimas se ve afectado por diversos factores que alteran a las protenas,
entre estos tenemos, la temperatura, el pH, la fuerza inica, la concentracin del sustrato,,
la concentracin del enzima e incluso por otros factores; para lo cual los enzimas
requieren ciertas condiciones para trabajar ptimamente.

Por otro lado, tenemos los cofactores enzimticos que son sustancias no proteicas que
cumplen con la funcin de colaborar en la catlisis; stos se combinan con los enzimas
para potenciar de esta manera su accin cataltica.

La velocidad de una reaccin cualquiera est determinada por la concentracin del

reactivo y por una constante de velocidad (K); esta velocidad de reaccin varia
dependiendo del grado de la reaccin.
 PROPIEDADES GENERALES
Una enzima es una protena que acta como catalizador biolgico, llevando a cabo
reacciones bioqumicas a muy altas velocidades, no se consume durante la reaccin y en
general presenta un elevado grado de especificidad. Las enzimas as como cualquier otra
estructura presentan propiedades generales que las logran caracterizar en su totalidad.

1) Son los catalizadores de las reacciones qumicas de los sistemas biolgicos.

Los catalizadores son sustancias que modulan o influyen en la velocidad de las

reacciones sin alterar su punto de equilibrio. Los nicos catalizadores del mundo
son las enzimas, estas aceleran las reacciones qumicas de los sistemas biolgicos,
participan en una reaccin y experimentan cambios fsicos durante ella, pero
regresan a su estado original cuando la reaccin termina. Las enzimas hacen
posible la vida en la tierra; en ausencia de estas, la mayora de las
transformaciones qumicas requeridas para mantener activas las clulas tardaran
mucho tiempo en efectuarse o simplemente no procederan.

2) Las enzimas aceleran las reacciones qumicas de los sistemas biolgicos.

Las molculas en enzimas son catalizadores extraordinarios, muy eficientes para

acelerar la transformacin de sustratos en productos finales. Una sola molcula de
enzima puede efectuar el cambio de 10 000 a 1 milln de molculas de sustrato
por minuto.

3) No cambian la constante de equilibrio de las reacciones que catalizan.

La concentracin de la enzima no tiene efecto sobre la constante de equilibrio.

Dicho de otra manera, puesto que las enzimas afectan a las velocidades y no a las
constantes de velocidad, ellas no pueden afectar a Keq (constante de equilibrio),
que es una relacin de constantes de velocidad. De aqu que la Keq de una
reaccin sea la misma independientemente de que se alcance el equilibrio con
catlisis enzimtica o sin ella.

4) Poseen un elevado grado de especificidad de sustrato

La gran mayora de las enzimas tiene la capacidad de catalizar reacciones ms o

menos especficas; es decir, su intervalo de accin se limita a un determinado tipo
de compuesto que debe reunir ciertas caractersticas para que pueda ser utilizado
como sustrato. En concreto esto significa que las clulas generalmente producen
diferentes enzimas para cada compuesto que metabolizan. Adems, cada enzima
interviene en un solo paso o cambio del sustrato.

5) La mayora de las enzimas son protenas.

Todas las enzimas se presentan como protenas, tienen una estructura

tridimensional globular, estn formadas generalmente por una sola cadena
 polipeptdica, y slo logran ser activas cuando los polmeros desarrollan una
conformacin que permite establecer su centro activo. La mayora de las enzimas
estn constituidas por ms de 100 aminocidos, los cuales confieren a la molcula
una masa mayor de 10kDa y un dimetro de 25.

6) No se consumen ni se alteran durante el proceso qumico que estn

catalizando, pudiendo actuar una y otra vez.

Las enzimas no se consumen ni se alteran durante la reaccin, por lo que pueden

actuar en pequeas cantidades ya que una misma enzima puede catalizar varias
reacciones.

7) Aceleran la velocidad de la reaccin al disminuir la energa de act ivacin.

Las enzimas son molculas que estn para disminuir la energa de activacin solo
de las reacciones necesarias para la supervivencia celular.

Enzima y sustrato Unin al centro activo Formacin de productos

 FACTORES QUE INFLUYEN EN EL
TRABAJO ENZIMTICO
Debido a su naturaleza qumica, a las enzimas les afectan los mismos factores que alteran
a las protenas; por esta razn, cada una de ellas requiere de ciertas condiciones para
trabajar ptimamente como la temperatura, el pH, la fuerza inica, etctera. Otros
factores que influyen en el trabajo enzimtico son: concentracin de la enzima y
concentracin del sustrato

1. Efecto de la temperatura.

Como sucede en la mayora de las reacciones qumicas, la velocidad de las enzimas

aumenta con la temperatura, debido al incremento en la energa cintica de las
molculas reactantes (en general, por cada 10C de incremento, duplica e incluso
triplica la velocidad de reaccin), pero esto ocurre slo en el intervalo de temperatura
en el que la enzima es estable y retiene su capacidad cataltica; en casos extremos,
cuando se incremente mucho la temperatura, se favorece la desnaturalizacin y
consecuentemente esta protena pierde su capacidad catalizadora. Por esta razn,
cada enzima tiene un intervalo ptimo de temperatura en el cual se logra la mayor
actividad; la mayora tiene su temperatura ptima entre 30 oC y 40oC, y se inactiva a
ms de 55oC. La desnaturalizacin puede ser reversible o irreversible, por lo que la
enzima en ciertas condiciones, llega a recuperar su funcin despus de un
tratamiento trmico.

Habitualmente cuando el efecto de la temperatura no es muy intenso, se puede

regenerar nuevamente su actividad al adquirir otra vez su estructura tridimensional de
origen. Pero, a medida que esta es mayor, se favorece la inactivacin irreversible y el
sitio activo se pierde sin tener la oportunidad de regenerarse al enfriarse el sistema.
Habitualmente la desnaturalizacin a alta temperatura es irreversible, debido a que se
rompen las fuerzas dbiles de enlace al aumentar la vibracin trmica de los tomos
componentes, fenmeno que daa la estructura tridimensional.

Temperaturas extremadamente bajas, detienen la actividad enzimtica pero no las

destruyen. Muchas enzimas se pueden conservar metindolas a 0C o temperaturas
ms bajas, logrando recuperar su actividad despus de descongelarse, segn la
intensidad y la forma en la que se efectu el congelamiento.

Para casi todas las enzimas, las temperaturas ptimas son iguales o mayores a las de las
clulas en las que se encuentra.
2. Efecto del pH.

La actividad de las enzimas depende mucho de la concentracin de iones de

hidrgeno del medio, ya que esto afecta el grado de ionizacin de los aminocidos
del sitio activo, del sustrato, o del complejo enzima-sustrato; todo eso llega a influir en
la afinidad que tenga la enzima por el sustrato.

Las enzimas poseen grupos qumicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH;
imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminocidos. Segn el pH del medio,
estos grupos pueden tener carga elctrica positiva, negativa o neutra. Como la
conformacin de las protenas depende, en parte, de sus cargas elctricas, habr un
pH en el cual la conformacin ser las ms adecuada para la actividad cataltica.

En los casos en el que los sustratos son no ionizables (la mayora de los hidratos de
carbono y lpidos), los grupos inicos de las enzimas son los nicos afectados por el pH.

Por esta razn, todas las enzimas presentan una mxima actividad cataltica a un
cierto valor ptimo de pH, en un intervalo de 5 a 8 (El pH ptimo de la mayora de los
enzimas es prximo a 7), aun cuando existen excepciones muy importantes, como
enel caso de la pepsina del estmago, que tiene un pH ptimo de 1.8, u otros como la
tripsina tienen un pH ptimo algo alcalino (pH ptimo = 7,8).

La mayora de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones de pocas
dcimas por encima o por debajo del pH ptimo pueden afectar drsticamente su actividad.
As, la pepsina gstrica tiene un pH ptimo de 2, la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene
a pH 10 (Figura de la izquierda). Como ligeros cambios del pH pueden provocar la
desnaturalizacin de la protena, los seres vivos han desarrollado sistemas ms o menos
complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores fisiolgicos.
Las enzimas adems pueden experimentar cambios de conformacin con las
variaciones del pH. Podra ser necesario un grupo cargado distal a la regin del sustrato
donde se ha fijado, para conservar una estructura activa terciaria o cuaternaria.
Conforme cambia la carga en este grupo, la protena puede desenrollarse, volverse
ms compacta o disociarse en protmeros, todo lo cual conduce a la perdida de la
actividad. Dependiendo de la gravedad de estos cambios, la actividad puede ser
restablecida o no cuando la enzima regresa a su pH ptimo.

3. Concentracin del sustrato

A mayor concentracin del sustrato, a una concentracin fija de la enzima se obtiene

la velocidad mxima. Despus de que se alcanza esta velocidad, un aumento en la
concentracin del sustrato no tiene efecto en la velocidad de la reaccin. Algunas
enzimas permanecen libres en concentraciones bajas de sustrato y no se alcanza la
mxima velocidad. Cuando el sustrato se encuentra en exceso, toda la enzima se
transforma en ES y la reaccin se realiza a su mxima velocidad.

4. Concentracin de la enzima

Siempre y cuando haya sustrato disponible, un aumento en la concentracin de la

enzima aumenta la velocidad enzimtica hacia cierto lmite.
5. Efectos de otros agentes

Las enzimas se ven afectadas tambin por otros factores como son la actividad de
agua, pues la mayora de los biopolmeros requieren de agua para desarrollar su
conformacin estable con caractersticas de agentes biolgicamente activo; sin
embargo, algunas enzimas llegan a actuar con un mnimo de agua, como ocurre con
las lipasas que contienen los aceites puros. En este caso la amplia disponibilidad del
sustrato hace que las reacciones se logren aun en condiciones de sequedad.

Por otra parte, los metales pesados, como mercurio, plata y plomo, inhiben la accin
enzimtica, mientras que el calcio, el magnesio, el sodio, el potasio, el manganeso, el
hierro y el zinc, actan como agentes activadores de muchas otras. Estos activadores
se denominan Cofactores. Este efecto activador se debe probablemente a que
forman parte del sitio activo, que se requieren para la creacin del complejo enzima-
sustrato, o que ayudan a mantener la conformacin tridimensional. Casi un tercio de
los enzimas conocidos requieren cofactores. Cuando el cofactor es una molcula
orgnica se llama coenzima.
 COFACTORES ENZIMTICOS
Existen enzimas que son protenas simples y otras que requieren para su funcin la
presencia de sustancias no proteicas que colaboran en la catlisis: los cofactores. Los
Cofactores son sustancias que se combinan con el enzima potenciando su accin
cataltica.

Minerales y su funcin como cofactores

Estos cofactores suelen ser iones metlicos como hierro (Fe++), cobre (Cu++),magnesio
(Mg++), manganeso (Mn++) y zinc (Zn++), a estos cofactores se los conoce como coenzimas
inorgnicas.
De estos cofactores enzimticos podemos resaltar los de mayor importancia:

Magnesio

o Cofactor de enzimas que transfieren grupos fosfatos desde el ATP.

o Cofactor de la enzima acetilcolinesterasa.
Cobre

o Cofactor de enzimas Cu-dependientes que intervienen en la formacin de:

hemoglobina, colgeno, lecitina, mielina.
Zinc

o Cofactor de metalo-enzimas (anhidrasa carbnica, fosfatasa alcalina,

carboxipeptidasa, ARN polimerasa, ADN polimerasa, etc.).
Hierro

o Constitucin como cofactor de enzimas oxidasas (peroxidasa, catalasas,

citocromo C, etc.)
Manganeso

o Cofactor de enzimas como la arginasa y la ribonucleotidoreductasa

Cuando el cofactor es una molcula de naturaleza orgnica se le llama coenzima.

La principal funcin de las coenzimas es actuar como intermediarios metablicos. El

metabolismo conlleva una amplia gama de reacciones qumicas, pero la mayora
corresponden a unos tipos bsicos de reacciones que implican la transferencia de grupos
funcionales. Esta qumica comn permite a las clulas utilizar un pequeo conjunto de
intermediarios metablicos para transportar grupos qumicos entre las diferentes
reacciones. Estos intermediarios en la transferencia de grupos son las coenzimas.
Cada clase de reaccin de transferencia de grupo se lleva a cabo por una coenzima
particular, que es el sustrato de un conjunto de enzimas que la producen, y un conjunto
de enzimas que la consumen. Un ejemplo de esto son las deshidrogenasas, que utilizan la
nicotinamida adenina dinucletido (NADH) como cofactor. Aqu, cientos de enzimas
diferentes eliminan los electrones de sus sustratos y reducen el NAD+ a NADH. Esta
coenzima reducida es entonces un sustrato para cualquiera de las reductasas presentes
en la clula que necesitan reducir sus sustratos.

Las coenzimas ms importantes son:

NAD (NicotinamnadennDinucletico)

NADP (NicotidamnAdennDinucletido Fosfato)

FAD (FlavnAdennDinucletido)
Vitaminas hidrosolubles y su funcin como coenzimas
El principal papel de las vitaminas es actuar como coenzimas en el organismo, aunque las
vitaminas tienen otras funciones en el cuerpo. Las coenzimas tambin se fabrican a partir
de nucletidos, como la adenosina trifosfato (que es el transportador bioqumico de los
grupos fosfato), o la coenzima A (que transporta grupos acilo). La mayora de las
coenzimas se encuentran en una enorme variedad de especies, y algunas son universales
para todas las formas de vida.

Vitaminas y sus derivados No vitaminas

 DEFINICIONES
Coenzima

Las coenzimas son cofactores orgnicos no proteicos, termoestables que unidos a

una Apoenzima constituyen la holoenzima o forma catalticamente activa de la
enzima. Las coenzimas tienen baja masa molecular y son esenciales en el
mecanismo de catlisis, ya sea aceptando o donando electrones a los grupos
funcionales que transportan de una enzima a otra. Y estas coenzimas tienen la
facilidad de modificarse durante una reaccin qumica.

Apoenzima

La apoenzima es una protena sin actividad que constituye la holoenzima o enzima

activa. Es la parte proteica de la enzima desprovista de los cofactores o grupos
prosteicos que pueden ser necesarios para que la enzima sea funcionalmente
activa. La apoenzima es catalticamente inactiva. Para que la apoenzima pueda
catalizar debe haber una coenzima que generalmente es una vitamina. Tiene en
su molcula un centro activo, en donde se relaciona con el sustrato, relacin llave-
candado.

Grupos prostticos

Un grupo prosttico es el componente no aminoacdico que forma parte de la

estructura de algunas protenas y que se halla fuertemente unido al resto de la
molcula. Las protenas con grupo prosttico reciben el nombre de
heteroprotenas (o protenas conjugadas).Hay enzimas que son protenas
conjugadas; se trata de enzimas que requieren algn cofactory ste se halla
ligado con fuerza de manera permanente en la estructura molecular. Si un
cofactor enzimtico slo se une a la enzima durante la catlisis no debe ser
considerado un grupo prosttico.
 NOMENCLATURA Y CLASIFICACIN
Desde sus inicios la nomenclatura enzimtica ha sido poco sistemtica, y carece de los
lineamientos necesarios para darles nombres adecuados. Existen muchas enzimas cuyos
nombres no ofrecen ninguna informacin sobre su actividad o sus propiedades, como es
el caso de la tripsina, la quimotripsina, la pepsina y algunas otras. Unas se han designado
con el nombre del descubridor, otras, como la papana, de acuerdo con su procedencia
(papaya), y en otros casos, como la lactasa, segn el sustrato que utilizan, que en este
caso es la lactosa.

Debido a esta falta de homogeneidad en la nomenclatura, se integr la Comisin de

enzimas de la Unin Internacional de Bioqumica (UIB), que desarroll un mtodo que
identifica cada una con cuatro dgitos separados por puntos encabezado por las letras
EC (enzyme commission), que caracteriza al tipo de reaccin segn la clase (primer
dgito), subclase (segundo dgito), sub-subclase (tercer dgito), y un cuarto dgito que es
para la enzima especfica.

El primer dgito de la nomenclatura, representa el grupo al que pertenecen:

1) Oxido-reductasas

Catalizan reacciones de oxido-reduccin, es decir, transferencia de hidrgeno

(H) o electrones (e-) de un sustrato a otro. Entre estos tenemos la succinato
deshidrogenasa o la citocromo c oxidasa.

AH2 + B A + BH2

2) Transferasas:

Catalizan la transferencia de un grupo qumico (distinto del hidrgeno) de un

sustrato a otro. Por ejemplo la glucoquinasa, que cataliza la reaccin de
transferencia de un grupo fosfrico del ATP al carbono 6 de la glucosa para
formar glucosa-6-fosfato y ADP.

glucosa + ATP ADP + glucosa-6-fosfato

 3) Hidrolasas:

Llevan a cabo la ruptura de enlaces qumicos con la introduccin de una

molcula de agua. Un ejemplo es la lactasa, que cataliza la reaccin de
rompimiento de la molcula de lactosa mediante la adicin de una molcula
de agua, para formar glucosa y galactosa.

lactosa + agua glucosa + galactosa

4) Liasas:

Catalizan reacciones de ruptura o soldadura de sustratos sin la participacin del

agua. Un ejemplo es la acetacetato descarboxilasa, que cataliza la reaccin:

cido acetactico CO2 + acetona

5) Isomerasas:

Catalizan las isomerizaciones de distintos compuestos. Entre ellas tenemos la

fosfotriosaisomerasa y la fosfoglucosaisomerasa, que catalizan las reacciones
representadas en la tabla inferior:

El segundo dgito corresponde al tipo de enlace sobre el cual acta la enzima.

En el caso de hidrolasas, se refiere al tipo de enlace que hidroliza: el 3.1 es de

enlaces ster; el 3.2 de glucosdicos; el 3.4 de peptdicos; etctera. Las reacciones
y las enzimas que las catalizan se dividen en 6 clases principales, cada una con 4 a
13 subclases

El tercer dgitorepresenta al sustrato sobre el cual acta la enzima.

Por ejemplo, si tenemos una hidrolasa de uniones ster (3.1), el tercer enlace
indicara si es un enlace ster carboxlico (3.1.1), tioster (3.1.2), monofosfato (3.1.3),
etctera.

Elcuarto dgito indica especficamente la accin de la enzima en cuestin.

 El nombre sistemtico de una enzima se compone de 2 partes: la primera
representa elnombre del sustrato u la segunda indica el tipo de reaccin
catalizada, seguida de la terminacin asa. Consta actualmente de 3 partes:

Ejemplo: Identificacin EC 5.3.1.1.

As, E.C. 2.7.1.1 denota la clase 2 (una transferasa), subclase 7 (transferencia de
fosfato), sub-clase 1 (una funcion alcohol como aceptor de fosfato). El ltimo digito
denota a la enzima hexocinasa o ATP: D-hexosa-6-fosforotransferasa, enzima que
cataliza la transferencia de fosfato desde el ATP al grupo hidroxilo de carbono 6 de
la glucosa.
 MECANISMOS DE REACCIN
Por las notables propiedades catalticas de las enzimas y el papel que juegan en el
proceso de la vida, muchos investigadores han dado preferencia a investigar sus
mecanismos de reaccin.

La activacin de la molcula de sustrato se produce debido a la gran afinidad qumica

(electrnica) del sustrato por ciertas reas de la superficie de la enzima, sitios activos. Este
sitio activo corresponde a una depresin o hendidura relativamente pequea que posee
la geometra y distribucin de cargas (positivas y negativas) para unirse especficamente y
en forma complementaria a un determinado sustrato. El sustrato se une al sitio activo de la
enzima por medio interacciones hidrofbicas y electrostticas, puentes de hidrgeno y
fuerzas de van der Waals. Los residuos de aminocidos de la enzima que participan en la
interaccin con el sustrato, se encuentran alejados unos de otros en la secuencia lineal de
aminocidos de la protena: pero como resultado del plegamiento de sta, se agrupan
para formar el sitio activo de la enzima. Algunos de estos residuos participan solamente en
la unin de sustrato y definen una regin del sitio activo que se llama sitio de fijacin o de
unin del sustrato. Otros residuos del sitio activo, los catalticos, se encargan directamente
de la transformacin del sustrato en producto y forman el sitio cataltico. Normalmente el
nmero de residuos que intervienen en la unin del sustrato es mayor que el de los residuos
catalticos. Este sitio activo es el lugar donde a travs del reconocimiento molecular
ocurren reacciones de ruptura y formacin de enlaces, formndose as un complejo
enzima-sustrato en el que las molculas de las sustancias reactantes (sustratos) quedan
muy prximas entre si, condicin indispensable para que se lleve a cabo la reaccin
qumica de ellas. Se produce una deformacin o distorsin en alguna unin de la
molcula de sustrato, se hace lbil y sufre un cambio por la enzima en particular. Las
molculas alteradas pierden su afinidad por los sitios activos y por ello son puestas en
libertad. Entonces las enzimas quedan libres e intactas para combinarse con ms sustrato
y la biosntesis de nuevos productos iguales a los anteriores.

Se debe agregar que la activacin hace que caiga o disminuya la barrera energtica
que el sustrato debe vencer antes de que se transforme en producto. As, una reaccin
catalizada por enzimas necesita baja energa de activacin para que pueda efectuarse.
Este anlisis se aplica a los sustratos que han sido degradados o tambin se han utilizado
en la biosntesis. Aunque se puede aplicar el mismo tipo de explicacin para describir la
sntesis, o la construccin de compuestos complejos, a partir de otros simples. En esta
forma, dos molculas diferentes de sustrato se pueden pegar a los sitios adyacentes en la
superficie de la enzima. Una sola activacin del sustrato por la enzima permite el
establecimiento de una unin entre las dos molculas, de tal modo que se crea un
compuesto nuevo a partir de los dos sustratos originales. Este producto tiene poca
afinidad por el sitio activo y se desprende. En realidad el sitio activo y se desprende.

En realidad, el sitio activo de la superficie de una enzima es un rea muy pequea, lo que
significa que las grandes porciones de la protena no contribuyen a la especificidad
enzimtica o a la accin de las enzimas. Por eso, solo relativamente pocos residuos de
aminocidos estn implicados directamente en el proceso cataltico quizs menos de
cinco! Se debe sealar tambin que el ajuste entre una parte de la superficie de la
enzima y el sustrato no se encuentra esttico, sino que es una interaccin dinmica en la
que el sustrato induce a cambios estructurales a la molcula de la enzima, como la mano
cambia de aspecto dentro de un guante.
 ENERGA DE ACTIVACIN
En el medio acuoso de las clulas, las diferentes molculas estn en constante
movimiento trmico "caos molecular" pero, dado que son compuestos ms o menos
estables, solamente podran reaccionar para formar productos de una manera ocasional
cuando casualmente se enfrentan sus grupos reaccionantes.
Existe, de esta manera, una barrera energtica a la reaccin de las molculas, y la
energa extra necesaria para superar esa barrera se denomina "energa de activacin".

La energa de activacin se define como la cantidad de energa en caloras, necesaria

para llevar a todas las molculas de un mol de una sustancia desde un estado dado
hasta un determinado estado activado.

Las enzimas, en lugar de aportar

energa extra, stas incrementan
enormemente las posibilidades de
reaccin de las molculas
correspondientes, por medio de su
capacidad para formar una gran
cantidad de molculas especficas
ms reactivas y, por tanto, ms
inestables-. Es decir, para formar un
compuesto intermediario con ellas,
nos referimos al complejo enzima-
sustrato.

Este intermediario inestable que representa el estado de transicin de la reaccin

qumica- rpidamente se rompe para dar lugar a productos estables, y las enzimas, sin
sufrir cambios por la reaccin, son capaces de seguir catalizando a nuevas molculas.

De dnde proviene la energa que proporciona un descenso espectacular de

las energas de activacin de reacciones especficas?

La respuesta a estas preguntas tiene dos partes distintas pero relacionadas. La primera se
basa en las reordenaciones de los enlaces covalentes durante la reaccin catalizada por
la enzima. Entre sustratos y grupos funcionales de las enzimas (cadenas laterales
especficas de aminocidos, iones metlicos y coenzimas) tienen lugar reacciones
qumicas de muchos tipos. Los grupos funcionales catalticos de las enzimas pueden
formar enlaces covalentes transitorios con una sustrato, activndolo para la reaccin, o
bien puede transferirse transitoriamente un grupo funcional del sustrato a la enzima. En
muchos casos, estas reordenaciones solo tiene lugar en el sitio activo de la enzima. Las
interacciones covalentes entre enzimas y sustrato reducen la energa de activacin
(acelerando, por tanto, la reaccin), proporcionando una va de reaccin alternativa y
de menor energa.
La segunda parte de la explicacin se basa en las interacciones no covalentes entre la
enzima y el sustrato. Gran parte de la energa requerida para disminuir la energa de
activacin proviene generalmente de interacciones dbiles no covalentes entre el
sustrato y la enzima. El factor que diferencia realmente a las enzimas de la mayora de
catalizadores no enzimticos es la formacin de un complejo ES especfico. La interaccin
entre enzima y sustrato en este complejo esta canalizada por las mismas fuerzas que
estabilizan la estructura proteica, incluyendo puentes de hidrgeno e interacciones
inicas e hidrofbicas. El establecimiento de cada interaccin dbil en el complejo ES
viene acompaado por la liberacin de una pequea cantidad de energa libre que
proporciona un cierto grado de estabilidad a la interaccin. La energa proveniente de la
interaccin enzima-sustrato se denomina energa de fijacin, GB. Su significado se
extiende ms all del de una simple estabilizacin de la interaccin enzima-sustrato- la
energa de fijacin es la principal fuente de energa libre utilizada por las enzimas para
disminuir la energa de activacin de las reacciones.
Cmo utiliza una enzima la energa de fijacin para disminuir la energa de
activacin de la reaccin?

La nocin moderna de la catlisis enzimtica propuesta por primera vez por Michael
Polanyi (1921) y por Haldane en 1930 y despus elaborada por Linus Pauling en 1946 dice
que para que una enzima catalice una reaccin ha de ser complementario al estado de
transicin de la reaccin. Ello significa que las interacciones ptimas entre sustrato y
enzima solo pueden tener lugar en el estado de transicin. Esto lo podemos analizar con el
siguiente ejemplo ilustrativo: la vara de metal se fija en la varasa, pero solo se utilizan unas
cuantas interacciones para formar el complejo ES. El sustrato ligado aun ha de
experimentar el aumento de energa libre necesario para alcanzar el estado de transicin.
Ahora, sin embargo, el incremento de energa libre requerido para llevar la vara una
conformacin curva y parcialmente partida queda nivelado por las interacciones
magnticas (ENERGA DE FIJACIN) que se forman entre la enzima y el sustrato en el
estado de transicin. Muchas de estas interacciones se dan en partes de la vara distantes
del punto de rotura; as, las interacciones entre el enzima y partes no reactivas del sustrato
proporcionan una cierta cantidad de la energa necesaria para catalizar su rotura. Esta
fractura energtica se traduce en una energa de activacin neta inferior y una mayor
velocidad de reaccin.

En el complejo ES se forman algunas interacciones dbiles, pero el complemento total de

las interacciones dbiles posibles entre sustrato y enzima solo se forma cuando el sustrato
alcanza el estado de transicin. La energa de fijacin liberada por la formacin de esas
interacciones equilibra parcialmente la energa requerida para llegar a la cima de la
colina energtica. La suma de la energa de activacin desfavorable (+) y la energa de
fijacin favorable (-) da como resultado la energa de activacin neta menor. El estado
de transicin tampoco es estable en la enzima, sino que representa un tiempo breve en el
que pasa un sustrato en la cima energtica. Pero la reaccin catalizada por la enzima es
mucho ms rpida que el proceso sin catalizar, porque la colina es mucho mas baja
ahora.

Las interacciones de fijacin dbiles entre el enzima y el sustrato proporcionan la fuerza

impulsora principal de la catlisis enzimtica.
 CINTICA ENZIMTICA

ECUACIN DE VELOCIDAD Y CONSTANTE DE VELOCIDAD

La velocidad de una reaccin cualquiera viene determinada por la concentracin de
reactivo o reactivos y por una constante de velocidad usualmente representada por el
smbolo K. para una reaccin unimolcular S P, la velocidad de la reaccin, V, que
representa la cantidad de sustrato S que ha reaccionado por unidad de tiempo, viene
expresada por una ecuacin de la velocidad:

En esta reaccin la velocidad solo depende de la concentracin de S. Es lo que de

denomina una reaccin de primer orden.

El factor K es una constante de proporcionalidad que refleja la probabilidad de reaccin

bajo un conjunto de condiciones (pH, temperatura, etc.). Aqu, K es una constante de
velocidad de primer orden y sus unidades son tiempos inversos, como por ejemplo S-1.

Si la velocidad de la reaccin depende de la concentracin de dos compuestos

diferentes, o si reaccionan dos molculas del mismo compuesto, la reaccin es de
segundo orden (con unidades M-1 S-1). La ecuacin de velocidad tiene entonces la forma:

VELOCIDAD INICIAL
Antes de comenzar con el estudio de la cintica enzimtica es conveniente aclarar el
significado de velocidad inicial en una reaccin. La figura llamada curva de avance de la
reaccin, muestra la aparicin del producto (P) en funcin del tiempo (t). En los primeros
minutos, la formacin del producto es una funcin lineal del tiempo. Es en esta regin en
donde se obtiene la velocidad inicial de la reaccin, la cual corresponde, desde un punto
de vista matemtico, a la pendiente de la recta. Generalmente esta relacin lineal se
mantiene cuando el consumo de sustrato no va ms all del 5% de la concentracin
inicial. Sin embargo, a tiempos ms largos, el sistema se desva de este comportamiento
lineal. Esto se puede deber a que la concentracin del sustrato se va consumiendo
(disminuye) de forma apreciable, a que la enzima se inhibe con el producto o a la
inactivacin de la misma enzima conforme pasa el tiempo. Por tanto, cuando se realiza
un estudio de cintica enzimtica, es fundamental que las velocidades que se obtengan
sean las inciales.

De esta forma, la medida de V0 se realiza antes de que se consuma el 5% del total del
sustrato, de forma que pueda considerarse la [S] como esencialmente constante a lo
largo del experimento. Adems, en estas condiciones no es necesario considerar la
reaccin inversa, ya que la cantidad de producto formada es tan pequea que la
reaccin inversa apenas ocurre. De esta forma se simplifican enormemente las
ecuaciones de velocidad.

ORDEN DE LA REACCIN
La velocidad inicial en una reaccin qumica en la que participan 2 reactantes depende
de la concentracin de cada uno de ellos y de su tendencia inherente a reaccionar. Si se
mantienen constantes las condiciones de la reaccin, pero se duplica la concentracin
de uno de los reactantes, se registra una duplicacin de la velocidad de la reaccin.
Ocurre lo mismo en la velocidad de la reaccin si se duplica la concentracin del otro
reactante. Se trata de un caso en el que la velocidad de una reaccin es proporcional a
la concentracin de dos reactantes. A una reaccin as, se le llama de segundo orden.

Si la velocidad de la reaccin es proporcional a la concentracin de solamente uno de

los reactantes y a su tendencia inherente a reaccionar, se tendr una reaccin de primer
orden. Es el caso por ejemplo en que un reactante se descompone en dos productos; o
bien, una reaccin en la que uno de los dos reactantes es el agua y el otro reactante esta
disuelto en el agua. La adicin de mas reactante disuelto en el agua aumentar
proporcionalmente la velocidad de la reaccin.

Las reacciones de orden cero, se refieren a aqullas en las que la velocidad de la

reaccin es independiente de la concentracin de reactantes.

Para una reaccin catalizada por una enzima, se tiene diferentes rdenes de reaccin,
dependiendo de la concentracin del sustrato. En el ejemplo de la grfica se tiene una
concentracin fija y constante de enzima que no vara a lo largo del experimento. Lo
nico que cambia es la concentracin del sustrato. A bajas concentraciones de sustrato,
la velocidad de la reaccin depende de la tendencia inherente a reaccionar en la
superficie de la enzima y de la concentracin del sustrato, por lo que la velocidad
aumenta al aumentar la concentracin del sustrato. En esta parte de la curva se tiene
una tpica reaccin de primer orden. En el extremo derecho de la grafica, a
concentraciones muy grandes de sustrato, la velocidad de la reaccin no aumenta al
incrementarse la concentracin del sustrato, por lo que en tales circunstancias se trata de
una reaccin de orden cero.
 MODELOS EN CINTICA ENZIMTICA
Si se ensayan diferentes concentraciones de sustrato, y para cada una de ella se calcula
la velocidad inicial, se obtiene, para un gran nmero de enzimas, una grfica semejante a
la de la figura anterior; en ella la dependencia de la velocidad inicial con respecto a la
concentracin de sustrato es una funcin hiperblica. Sin embargo, estos resultado no
tienen ms significado que el de describir, fenomenolgicamente, el comportamiento de
una enzima particular en condiciones experimentales muy especficas. Es de esperarse
que, si se cambian algunas de estas variables, por ejemplo la concentracin de la enzima,
el pH o la temperatura, se van a obtener diferentes hiprbolas rectangulares, cada una
de ellas sin aparente conexin con las otras.

EL MODELO CINTICO DE MICHAELIS-MENTEN

El planteamiento del modelo se inicia con la suposicin de que las reacciones catalizadas
por una enzima proceden en dos pasos. En la primera etapa, la enzima se una al sustrato
para dar el complejo enzima-sustrato [ES] en donde K1 es la constantes de velocidad de
segundo orden que describe la interaccin de la enzima con el sustrato; k2 es la
constante de velocidad de primer orden para la disociacin del complejo ES y Ks la
constante de equilibrio para la disociacin del complejo ES.

Ks
E S
ES
Donde:

[E]: es la concentracin de enzima libre

[S]: es la concentracin de sustrato libre

En la segunda etapa, el complejo ES forma el producto (P) y lo libera con una constante
de velocidad de primer orden que se llama constante cataltica (K3), debido a que est
asociada al proceso cataltico de la transformacin del sustrato en producto. En los
primeros momentos de la reaccin la concentracin del producto P es despreciable y se
hace la suposicin simplificadora de que puede ignorarse la reaccin inversa P S.
Al juntar las dos etapas resulta el siguiente esquema:

En este esquema, k1, k2 y k3 son las constantes cinticas individuales de cada proceso y
tambin reciben el nombre de constantes microscpicas de velocidad. Segn esto,
podemos afirmar que:
v1 = k1 [E] [S]
v2 = k2 [ES]
v3 = k3 [ES]

Vo se determina por la descomposicin de ES para dar producto, la que viene fijada por
[ES]:

Vo=V3= k3 [ES]

Dado que ES no se puede medir experimentalmente con facilidad, hemos de empezar

por encontrar una expresin alternativa para este trmino. En primer lugar introduciremos
el trmino [ET] que representa la concentracin total de enzimas (la suma de enzima libre
y enzima unido al sustrato). La enzima libre o no fijado, se puede representar por tanto:

[ET] = [E] + [ES]

Adems, debido a que [S] es normalmente mucho mayor que [ET], la cantidad de sustrato
fijada por la enzima en cualquier momento de la reaccin es despreciable comparada
con la [S] total. Con estas consideraciones, los pasos siguientes nos conducirn a una
expresin de Vo en funcin de parmetros que se miden fcilmente.

Paso 1:

Las velocidades de formacin y descomposicin de ES vienen determinadas por las

constantes de velocidad k1 (formacin), k2 yk3 (descomposicin), segn las expresiones
siguientes:

Como [E] = [ET] - [ES], resulta que:

Velocidad de formacin de ES= k1[S] [ET] - k1 [S] [ES]

Velocidad de descomposicin de ES= k2[ES] + k3[ES]

Paso 2:
Este modelo cintico adopta la hiptesis del estado estacionario, segn la cual la
velocidad inicial se reaccin refleja un estado estacionario en el que la concentracin del
complejo enzima-sustrato es pequea y constante a lo largo de la reaccin (Figura). Por
tanto, la velocidad de formacin del complejo enzima-sustrato (v1) es igual a la de su
disociacin (v2+ v3): = v2 + v3

Con ello podremos entender el comportamiento de nuestro organismo. No ha sido muy

fcil la bsqueda de la informacin y ms an la terminologa usada en la disertacin de
tan importe proceso bioqumico.
 INHIBICIN DE LA ACTIVIDAD
ENZIMTICA

La actividad de una enzima se puede inhibir de diferentes maneras con agentes qumicos.
Si a un sistema enzimtico se aaden sustancias que impidan la realizacin de la
actividad propia de la enzima, se dice que el sistema ha sido inhibido, y la sustancia
usada con estos fines se denomina inhibidor.

De acuerdo con esto, es posible clasificar los fenmenos de inhibicin enzimtica en

diversos grupos: inhibicin reversible e inhibicin irreversible.

Inhibicin reversible

En la inhibicin reversible las regiones funcionales de la molcula de la enzima no

cambian y la enzima y el inhibidor se equilibran rpidamente. La inhibicin
reversible puede ser efectuada por alguno de los tres tipos generales de
inhibidores: competitivo, no competitivo o mixto.

Inhibicin competitiva:
En este caso el inhibidor no permite la formacin del complejo enzima
sustrato normal, ya que el inhibidor es una molcula que tiene una similitud
estructural con el sustrato, por lo que compite con el sustrato por el mismo
sitio activo de la enzima, formndose un complejo enzima-inhibidor. Una
vez que el inhibidor ocupa el lugar en el sitio activo de la enzima, el
complejo enzima inhibidor, no se separa, en vista de que la enzima es
especfica para su sustrato, por lo que no tiene accin sobre el inhibidor y,
por lo tanto, queda bloqueada la parte activa de la enzima. El sustrato no
puede entrar al lugar activo, que est ocupado por el inhibidor y, de esta
manera, se impide la accin enzimtica.

Al aadir el inhibidor, la actividad enzimtica disminuye sin embargo, si se

aaden cantidades mayores del sustrato natural de la enzima nuevamente
empieza a aparecer actividad enzimtica, y cuando las cantidades de
sustrato natural aadido sobrepasan considerablemente a las presentes del
inhibidor, la actividad enzimtica se restablece por completo.
 Figura: El inhibidor competitivo calza en el sitio activo de la enzima de la
misma manera o, a veces, mejor que el sustrato(S).

Inhibicin no competitiva:
El inhibidor y el substrato se pueden unir en forma simultnea a la molcula
de la enzima, lo que significa que los dos deben ocupar sitios de unin
diferentes sobre la superficie enzimtica. Un inhibidor no competitivo
disminuye el nmero de recambio de una enzima, en tanto que un inhibidor
competitivo reduce la proporcin de las molculas de la enzima que han
unido el sustrato. La inhibicin no competitiva es una forma de inhibicin
donde la unin del inhibidor con la enzima reduce su actividad pero no
afecta la unin con el sustrato. Como resultado, el grado de inhibicin
depende solamente de la concentracin de inhibidor, por lo que no se
puede revertir mediante el incremento de la concentracin del sustrato. El
inhibidor no competitivo solo se une al complejo ES.
Un inhibidor competitivo aumenta el valor de Km pero no se altera el de
Vmax. Por otra parte, un inhibidor no competitivo reduce Vmax, pero no
tiene efecto sobre Km. De este modo puede predecirse que la inhibicin
competitiva se puede superar en una concentracin de substrato lo
suficientemente alta, mientras que la inhibicin no competitiva no puede
ser invertida al incrementar la concentracin del substrato.
 Inhibidor mixto:
Al igual que la inhibicin no competitiva, el inhibidor tambin se fija a un sitio
distinto al del sustrato, pero se fija tanto a la enzima como al complejo enzima-
sustrato (ES).

Inhibicin irreversible
Los inhibidores reversibles son los que se combinan con o destruyen un grupo de la
enzima que es esencial para su actividad, o aquellos que forman una asociacin
covalente muy estable entre el inhibidor y la enzima.
En la inhibicin irreversible, ocurren modificaciones en los grupos funcionales de la
molcula de la enzima. Adems, el inhibidor est unido tan estrechamente a la
enzima que las dos molculas se disocian con mucha lentitud. Los inhibidores
irreversibles son generalmente especficos para un tipo de enzima y no inactivan a
todas las protenas. No funcionan destruyendo la estructura protenica, sino
alterando especficamente la estructura tridimensional del sitio activo
inhabilitndolo.
En estas circunstancias la actividad enzimtica se reduce notablemente o incluso
se pierde. Varias sustancias txicas para el sistema nervioso, incluyendo los agentes
activos de varios insecticidas, actan como inhibidores irreversibles de la actividad
enzimtica. Incluso despus de que se ha eliminado el inhibidor, la actividad
enzimtica no puede ser restaurada ya que ha habido una modificacin
sustancial o crucial de la molcula de la enzima.
MECANISMOS DE REGULACIN DE
LA ACTIVIDAD ENZIMTICA
En las clulas vivas existen cientos de enzimas diferentes, cada una de las cuales es un
catalizador muy efectivo para una o ms reacciones qumicas; pero todas actan en
conjunto de manera coordinada para que todas las actividades qumicas en las clulas
vivas se integren unas a las otras. Consecuencia obvia de esto es que la clula viva no
sintetiza ni cataboliza ms material que el necesario para desarrollar su metabolismo y
crecimiento normal, actividad que requiere un control preciso, aunque ciertamente todos
los procesos metablicos principales son capaces de autorregularse.

El control del metabolismo celular implica esencialmente la regulacin de la actividad

enzimtica. La regulacin de la actividad enzimtica contribuye en gran parte a
preservar la homeostasia que, mantiene un entorno intracelular e intra-orgnico
relativamente constante en presencia de fluctuaciones amplias en al medio ambiente
externo, como cambios de temperatura, presencia o ausencia de agua o tipos
especficos de alimentos.

OBJETIVOS DE LA REGULACIN:

1. Producir los metabolismos necesarios y en la cantidad adecuada cuando son

requeridos. (mx. economa).
2. Aprovechar la energa disponible en forma eficiente.
3. Mantener un control de las fuentes energticas.
4. Mantener un nivel adecuado de ATP.

Tipos de regulacin de la actividad enzimtica

Si aumenta la concentracin de sustrato o de la enzima, la velocidad de la reaccin

tambin crece; en otras palabras, a mayor cantidad de sustrato o enzima, mas grande es
la elaboracin de producto, en un tiempo dado. En algunas ocasiones ciertas clulas
pueden disponer abundantemente de un sustrato definido, y no poseer la cantidad
adecuada de la enzima especfica para ese sustrato. La enzima, en tal caso, constituye
un factor limitante del metabolismo celular en aquellas clulas.

La actividad enzimtica puede ser modulada por cambios de pH y temperatura, como ya

ha quedado expuesto.Por otra parte, la presencia de los productos finales de una
reaccin enzimtica puede hacer que esta sea ms lenta, o incluso invertir su sentido.
Tambin existen molculas que actan sobre las enzimas inhibiendo su accin cataltica,
bien por ocupar temporalmente el centro activo (inhibidores competitivos) o por alterar la
conformacin espacial de la enzima (inhibidores no competitivos)

Hay enzimas, llamados enzimas alostricos que pueden adoptar dos conformaciones
interconvertibles, llamadas R (relajada) y T (tensa). Se denomina R a la ms activa.

Autorregulacin.-

Es la forma ms simple de regulacin de un proceso enzimtico dada por uno de los

metabolitos producidos durante el funcionamiento de una va metablica. El compuesto
B es sintetizado en varias etapas a partir de un precursor A. Al no existir una inhibicin de la
enzima que degrada A, la cantidad de B y de todos los componentes de la va
alcanzarn una concentracin dependiente de la relacin entre sntesis y degradacin.
La sntesis ininterrumpida de B sera innecesaria, y aun perjudicial, ya que se podra
alcanzar concentraciones tan altas de B que llegaran a ser txicas para el organismo. En
contraste, si B es un inhibidor de la primera enzima, al incrementar su concentracin, el
grado de la inhibicin aumenta y disminuye la conversin de A en B; esto produce un
incremento de la concentracin de A. Habitualmente el compuesto A puede ser utilizado
en otras vas metablicas. El principio de este mecanismo de denomina inhibicin por
retroalimentacin, donde el producto final (B) de la secuencia de una reaccin de varios
pasos inhibe una enzima que cataliza una reaccin anterior en la secuencia, por lo
general la primera enzima de la serie que gobierna cada paso (A).

La enzima inhibida se llama enzima reguladora y el metabolito inhibidor se denomina

modulador. El substrato de enzima reguladora es diferente en estructura del inhibidor, de
modo que el trmino alosterismo (que significa estructura diferente) se utiliza para
describir la modificacin que produce en una reaccin enzimtica un compuesto con
forma diferente a la del verdadero substrato. Los moduladores alostricos deben unirse a
la enzima en cualquier parte que no sea el sitio activo, ya que existe una estricta
especificidad de ajuste entre la molcula del substrato y el centro activo de la enzima.
Una vez que un modulador alostrico se une a la enzima, induce un cambio en la
conformacin o forma de la enzima.
Los moduladores participan en la regulacin de la actividad de las enzimas por medio de
cambios en la conformacin durante su unin con la enzima, pero de otra manera estn
an disponibles en la clula para el metabolismo. Una vez liberado el modulador del
complejo con la enzima, regresa al pool metablico celular.

El alosterismo es una de las principales formas de regulacin en la clula debido a que

puede producir cambios rpidos y fcilmente reversibles en la actividad de las enzimas (y,
por lo tanto, en el metabolismo) sin depender de que el regulador tenga una estructura
similar al sustrato de la enzima (lo que puede ayudar a conectar vas metablicas).

PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS

REGULADORAS
No todas las enzimas son reguladoras, solo aquellas que hacen posible el control e
integracin de la actividad de los sistemas multienzimticos. Las enzimas reguladoras
usualmente son mucho ms grandes, complejas y difciles de purificar que las no
reguladoras. Todas tienen ms de una cadena de polipptidos, e incluso algunas tienen
muchas cadenas. Todas poseen las subunidades necesarias para su funcin reguladora.

Modulador.-

Las enzimas reguladoras estn sujetas a la accin de un metabolito regulador llamado

efector, modificador o modulador. El modulador modifica primordialmente la afinidad de
las enzimas por sus substratos y frecuentemente tambin por otros componentes de la
reaccin.

Modulador Positivo:

La presencia de un efector positivo (activador) permite el incremento de la

afinidad de la enzima por el substrato.

Modulador Negativo:

La presencia de un inhibidor o efector negativo hace que se disminuya la afinidad

de la enzima por los sustratos; es decir, necesita mayor concentracin del sustrato
en presencia del efector negativo o modulador negativo para obtener la misma
velocidad de reaccin que si hubiera o estuvieran estos moduladores.
Enzimas reguladoras homotrpicas

En las enzimas reguladoras homotrpicas, la molcula del sustrato no solamente es

sustrato sino tambin modulador. Estas enzimas poseen dos o ms sitios de unin para el
substrato y al menos uno de estos es cataltico.

Enzimas reguladoras heterotrpicas

Las enzimas reguladores heterotrpicas son modificadas por el sustrato y uno o ms

moduladores que no son substrato. Estas enzimas no solo tienen uniones o sitios catalticos
para el substrato sino tambin sitios de unin para el modulador que est separado
fsicamente del sitio cataltico.
Enzimas alostricos

Una enzima alostrica es una enzima cuya actividad est regulada mediante un centro
alostrico, que es un sitio, distinto del centro activo de la enzima, al que se une un
regulador (llamado regulador alostrico) de manera reversible y no covalente. La unin
de este regulador modifica la estructura tridimensional de la enzima y llega a afectar la
configuracin del sitio activo, por lo que aumenta o disminuye su actividad, segn el caso.

Regulador Alostrico

El regulador alostrico puede ser un

activador o un inhibidor. Es decir, puede
ser regulador positivo o negativo. Al unirse
el inhibidor y la enzima, se alteran las
uniones dbiles de la protena (enzima).
Esto provoca un cambio en la
conformacin de la protena y altera su
funcin. Cambia la conformacin y por lo
tanto baja su afinidad por el sustrato. Por lo
tanto baja la cantidad de producto.

Activador Alostrico

Si en lugar de inhibidor es un activador,

entonces favorece la afinidad de la enzima
porque mejora el sitio activo para el sustrato.
 PROENZIMAS
Zimgenos o proenzimas son precursores inactivos de las enzimas. Observe que este
concepto es diferente a decir que son enzimas inactivas. Una enzima inactiva es una
enzima que ha perdido su actividad debido a diferentes factores, como factores fsicos,
qumicos o aun metablicos.

Una proenzima es un precursor enzimtico inactivo, es decir, no cataliza ninguna reaccin

como hacen los enzimas. Para activarse, necesita de un cambio bioqumico en su
estructura que le lleve a conformar un centro activo donde poder realizar la catlisis.

Un zimgeno es una molcula que necesita ser activada para convertirse en una enzima
activa, por lo que es ms exacto decir que los zimgenos son precursores de enzimas, que
decir que son enzimas inactivas. Las enzimas digestivas, algunos factores de la coagulacin
y otras protenas son sintetizados como zimgenos.

La sntesis de enzimas en forma de zimgenos es uno de los mecanismos de seguridad

con que cuenta el organismo para su supervivencia. Por ejemplo, la sntesis de enzimas
digestivas en forma inactiva es un mecanismo de seguridad para las clulas que sintetizan
esas enzimas, ya que las enzimas proteolticas sintetizadas como zimgenos no son
activadas hasta que no abandonan la clula.

Los zimgenos son utilizados en muchas reacciones biolgicas, como en la digestin o en la

coagulacin sangunea. Son un brillante ejemplo de regulacin endgena de los enzimas,
de como controlar la funcin de stos. Las modificaciones que sufren los zimgenos son
irreversibles, por lo que para poder detener las reacciones que llevan a cabo es necesario
un inhibidor del enzima al que dan lugar. (Ejemplo: el tripsingeno (zimgeno) da lugar a la
tripsina (enzima), que a su vez activa otros zimgenos. Para poder detener la activacin de
los zimgenos, la tripsina no se puede volver a convertir en tripsingeno, sino que debe
excretarse un inhibidor de tripsina para detener su tarea).

Un buen ejemplo de lo que ocurre cuando algunos zimgenos son activados antes de
tiempo, en el interior de las clulas, se ve en la pancreatitis aguda, en la cual la activacin
prematura de algunas de las enzimas pancreticas como tripsina, fosfolipasa A2 y elastasa,
producen la auto-digestin del tejido pancretico.
 CONCLUSIONES
Las enzimas son catalizadores biolgicos de naturaleza proteica presentes en todos
los procesos bioqumicos, catalizan reacciones gracias a las interacciones covalentes y
no covalentes que forman con el sustrato teniendo en cuenta las condiciones externas
como la temperatura y el pH que deben de ser las apropiadas para llevar a cabo su
funcin de acelerar la velocidad de las reacciones qumicas que tiene lugar en los
seres vivos dando as un factor de10 a 10 respecto a las reacciones no catalizadas,
por lo que la actividad molar de las enzimas son altas.

Los aminocidos se unen al centro activo para establecer los enlaces dbiles con el
sustrato por lo que la especificidad de la enzima radica ah, Sin olvidar que las enzimas
poseen varios grados de especificidad como la especificad de grupo en donde la
enzima es especifica a un enlace qumico adyacente al grupo determinado , la baja
especificidad donde la enzima no discrimina entre sustratos ms bien especifica
solamente al enlace a atacar, otro es la especificidad estereoqumica donde la
enzima presenta una estereo-especificidad en la catlisis y as diferenciar entre
ismeros geomtricos y pticos teniendo en cuenta que son asimtricos o quirales
formado por L-aminocidos, y por ltimos la especificidad absoluta en donde la enzima
ataca solamente a un sustrato y por lo consiguiente cataliza solamente a una
reaccin.

Las enzimas pueden ser simples (estructura proteica) o conjugadas (holoenzima)

donde se forma por una parte proteica y otra no proteica. La parte proteica conocida
como apoenzima es termolbil y no puede desarrollar su accin cataltica en ausencia
de los cofactores que pueden ser iones inorgnicos como el Fe, Mg, Mn, Zn u
orgnicos como la coenzima compuesto que por medio de su unin covalente con la
enzima se conoce como grupo prosttico. Es decir la parte no proteica (o cofactor) es
un compuesto de bajo peso molecular, estable al calor es decir termoestable, se
divide en orgnico (coenzima y grupo prosteico) e inorgnico (iones metlicos).

La enzima se une al sustrato en el centro activo por medio de mltiples interacciones

dbiles como son los puentes de hidrgenos. En el caso de las interacciones
covalentes forman un estado transitorio que lo activa de manera que lo prepara para
que reaccione frente a una coenzima o un grupo y por otro lado cada interaccin dbil
que se forma entre la enzima y el sustrato libera una pequea cantidad de energa
llamada energa de fijacin (favorable) la cual es capaz de compensar en parte la
energa de activacin (desfavorable).

Como todo catalizador, las enzimas se encargan de disminuir la energa de activacin

(G) de una reaccin, causando la aceleracin de la tasa de reaccin. Teniendo en
cuenta que no alteran el balance energtico, ni modifican el equilibrio de la
reaccin en la que interviene tan solo acelera el proceso ms veces. Por lo tanto la
reaccin que se da por el control de una enzima o catalizador obtiene el equilibrio
ms rpido que la reaccin no catalizada.
En las reacciones enzimticas influyen los factores como el cambio de pH donde la
actividad optima de las enzimas se da a pH de 5 y 9, el cambio en la temperatura
debido a que la enzima poseen un rango optimo de 30-40C y por encima
de 45C comienza a desnaturalizarse, la desnaturalizacin provoca la rotura de los
puentes de hidrgeno que mantienen las estructuras secundaria y terciaria, la
presencia de cofactores, las concentraciones del sustrato y de los productos finales.
Los agentes que desnaturalizan a las protenas provocan tambin la destruccin o
inactivacin de las enzimas, ya sea los cidos fuertes, los metales pesados o el calor.

La especificidad de reaccin corresponde a las apoenzimas, mientras que las

coenzimas son las encargadas de pasar por las transformaciones qumicas
necesarias para la catlisis enzimtica evitando que la enzima sufra degeneracin
de tal manera que la enzima permanece intacta para llevar a cabo otro ciclo de
reacciones simplemente cambiando la coenzima. Las coenzimas participan en las
diferentes reacciones de acuerdo a la apoenzima a la que se encuentre unido;
mientras que la apoenzima es catalticamente inactiva hasta el momento en que se
une al cofactor adecuado para as dirigir la reaccin bioqumica en un sentido
determinado.

Las coenzimas pueden ser receptores o donadores de grupos qumicos; cono son
los de transferencia: ATP (transporte de grupos fosfatos) y los de oxidacin y reduccin:
transporte de H+. La asociacin entre el grupo prosttico y la apoenzima
correspondiente es permanente y se da en etapas donde la coenzima modifica su
estructura para despus volver a su estado inicial. Cuando el grupo prosttico regresa
a su estado inicial se da sin la disociacin de su apoenzima.

La designacin de las enzimas se ha dado de diversas maneras, como agregando el

sufijo asa al nombre de molcula sobre la cual ejerce su actividad cataltica; otra
manera fue designando el nombre en funcin del tipo de reaccin que catalizan; Por
lo cual se cre tres formas de nombrar a una enzima: nombres particulares, nombre
sistemtico y cdigo de la comisin enzimtica. Antiguamente las enzimas reciban
nombres particulares fijados por quienes eran descubiertas, pero a medida que iban
aumentando las enzimas se requiri una nomenclatura sistemtica donde se indicaba
sobre la accin especfica de cada enzima y los sustratos sobre los que actuaba; y por
ltimo el cdigo de la comisin enzimtica donde se propuso la asignacin de un
nmero con cuatro componentes donde el primer nmero indica a cul de las seis
clases pertenece la enzima; el segundo nmero indica las diferentes subclases que
se encuentran dentro de las clases; el tercer y cuarto nmero se refiere a los grupos
qumicos especficos que participan en la reaccin.

Podemos clasificar las enzimas de acuerdo al tipo de reaccin que catalizan teniendo as
las oxido-reductasas, transferasas, hidrolasas, liasas, isomerasas y ligasas. Las Oxido-
reductasas se encargan de catalizar reacciones de oxido-reduccin; las Transferasas
catalizan reacciones de transferencia de grupos funcionales donde pueden requerir
la presencia de coenzimas; las Hidrolasas catalizan reacciones de hidrlisis; las Liasas
catalizan la lisis del sustrato al crear dobles enlaces; las Isomerasas o reacciones de
isomerizacin catalizan cambios de la estructura de la molcula y las Ligasas
catalizan la unin de dos sustratos requiriendo la participacin de ATP.

La activacin de un sustrato se da cuando existe una gran afinidad qumica entre el

sustrato y el sitio activo del enzima, el cual es una pequea hendidura que posee la
enzima con una determinada forma geomtrica y una distribucin de cargas, para que el
sustrato pueda encajar perfectamente en el enzima. Este sustrato se une al sitio activo del
enzima gracias a las interacciones dbiles, enlaces de hidrgeno, interacciones
hidrofbicas e interacciones inicas; que se da entre ellos, preferentemente en el estado
de transicin de la reaccin; stas interacciones existentes entre el enzima y el sustrato,
liberan una pequea cantidad de energa, denominada energa de fijacin, la cual
compensa una parte de la energa de activacin, para con ello poder llevar a cabo una
reaccin determinada en menor tiempo. sta energa de fijacin disminuye la energa de
activacin por medio de la reduccin de entropa, la desolvatacin, La disminucin de los
estados de distorsin y el acople inducido, los cuales son algunos de los mecanismos que
permiten esta disminucin de energa, los mismos que se dan gracias a los enlaces dbiles
entre el sustrato y el enzima.

La velocidad de una reaccin est determinada por la concentracin del sustrato [S] y
por una constante de velocidad (K), esta velocidad vara dependiendo del orden de
reaccin; si la reaccin es de orden cero, la velocidad de reaccin no aumenta y es
totalmente independiente de la concentracin del sustrato; si la reaccin es de primer
orden, la velocidad de reaccin se ve afectada nicamente por la concentracin de un
sustrato, lo que sucede aqu es que al unirse un sustrato con el enzima vamos a tener dos
productos; y si la reaccin es de segundo orden, la velocidad de reaccin se ve afectada
por la concentracin de ambos sustratos. Una vez explicado aqu el orden de la reaccin,
podemos decir que a medida que aumente la concentracin, tambin aumentar la
velocidad de reaccin, a excepcin de la reaccin de orden cero, la cual permanece
constante.

Para poder explicar el modelo cintico de Michaelis-Menten nos basamos en la suposicin

de que stas reacciones que va a ser catalizadas, se van a dar en dos fases: en la
primera, en donde la enzima se une al sustrato para obtener as el complejo ES, en donde
la constante de velocidad de segundo orden (K1) nos muestra la interaccin existente
entre la enzima y el sustrato; considerada esta formacin como un proceso de equilibrio
rpido; mientras que la constante de velocidad de primer orden (k2) nos describe la
disociacin del complejo ES. De aqu parte la segunda fase, en donde el complejo ES,
gracias a la constante de velocidad de primer orden (k3), constante cataltica, va a
liberar los productos, considerada esta formacin como un proceso lento.

La cintica enzimtica conlleva distintas etapas para lo cual la velocidad cambia con el
orden de reaccin, pero con la ayuda de los postulados de Michaelis-Menten, que nos
explican claramente que primero se da la formacin del complejo productivo enzima-
sustrato (ES), que luego da lugar a la formacin de productos, liberando el enzima, debido
a que el sustrato ya modificado pierde su afinidad por el sitio activo del enzima, para que
pueda catalizar a futuras reacciones determinadas; la ecuacin de Michaelis-Menten nos
permite trabajar con la concentracin del sustrato, la velocidad mxima de reaccin, y
una constante propia de esta ecuacin, la constante de Michaelis-Menten (Km).

A los inhibidores se les clasifica segn su sitio de accin en la enzima, si modifican o no

qumicamente a la enzima o de acuerdo con los parmetros cinticos sobre los que
tienen efectos. Se distinguen dos clases de inhibidores segn si al elevar la concentracin
de sustrato se supera la inhibicin o no. La accin de inhibidor competitivo es disminuir el
nmero de molculas de enzima libre disponibles para enlazarse con el sustrato, es decir,
para forma ES y, por tanto, formar un producto.

Hay otros inhibidores que actan en forma irreversible al modificar qumicamente a la

enzima. Estas modificaciones tienen que ver, por lo general, con formar o romper enlaces
covalentes con residuos de aminocidos esenciales para la fijacin del sustrato, la catlisis
o el mantenimiento de la conformacin funcional de la enzima. Estos cambios covalentes
son relativamente estables, una enzima que fue envenenada por un inhibidor irreversible
permanece en su estado de inhibicin incluso despus de eliminar el inhibidor remanente
del entorno.

La capacidad cataltica de la reaccin que limita la velocidad en una va metablica es

el producto de la concentracin de las molculas de enzima y su eficacia cataltica
intrnseca. Por lo tanto se deduce que la capacidad cataltica puede ser afecta tanto por
la cambiar la cantidad de enzima presente como por alterar su eficacia cataltica
intrnseca.

La regulacin de la actividad enzimtica mediante la fosforilacin - desfosforilacin tiene

semejanza con la regulacin a travs de la inhibicin por retroalimentacin. Ambas
proporcionan una regulacin a corto plazo y fcilmente reversible del flujo metabolitos.
Las dos actan sin alterar la expresin de los genes. Ambas actan en las primeras
enzimas de una larga secuencia metablica y con frecuencia biosinttica, y en sitios
alostricos ms catalticos.

Hay distintos tipos de catlisis mediados por las enzimas entre los ms importantes
encontramos la catlisis acido-base, covalente e ion metlico. Estas reacciones permiten
formar o romper enlaces del sustrato de manera que este se transforme a un producto
diferente bien sea por la formacin de enlaces covalentes transitorios o por transferencia
de un grupo funcional desde la enzima hacia el sustrato.

Las enzimas reguladoras estn sujetas a la accin de un metabolito regulador llamado

efector o modulador. Este metabolito se encarga de modificar la afinidad de las enzimas
por sus substratos y otros componentes de la reaccin. En el caso de existir la presencia de
un efector positivo o tambin llamado activador, permite generar un incremento de la
afinidad de la enzima por el substrato.

La actividad de las enzimas alostricas est regulada por medio del centro alostrico, el
cual es distinto del centro activo de la enzima. Este centro se le une de manera covalente
y reversible, logrando por medio de su enlace modificacin de la estructura de la enzima
como tal y afectando la configuracin del sitio activo, donde la cataltica aumentara o
disminuir dependiendo si es un regulador positivo o negativo, es decir, un activador o un
inhibidor enzimtico.

Las proenzimas son sintetizadas a manera de precursores inactivos, que carecen de una
funcin cataltica alguna; las proenzimas pueden activarse mostrando as su funcin
cataltica, mediante una modificacin bioqumica de su estructura en el lisosoma, por
medio de la eliminacin de un pptido que conforma su molcula; tomando en cuenta
que estas modificaciones son irreversibles, la extraccin del pptido de la estructura del
zimgeno llevar a conformar un sitio activo, donde se podr llevar a cabo la catlisis
enzimtica, la cual solo podr detener su actividad mediante la presencia de un inhibidor
enzimtico.
 CONCLUSIONES DEL PAPER

El aprovechamiento del suero de leche, que es comnmente considerado como

producto de rechazo en la industria, sera beneficioso tanto para el estudio de galacto-
oligosacaridos como para el medio ambiente, ya que el suero de leche es considerado
como una sustancia con una gran demanda biolgica de oxigeno.

Estos galactooligosacaridos son de importancia dentro de la alimentacin humana ya

que son considerados prebiticos, es decir son sustancias que favorecen el desarrollo
selectivo de ciertas cepas de microorganismos presentes en nuestro colon. Para poder
producir estos GOS se aplican ciertas levaduras y hongos filamentosos sobre el suero de
leche (que contiene un alto porcentaje de lactosa) los cuales secretaran enzimas que
mediante una actividad cinetica controlada y ph y temperaturas optimas se lograra la
transgalactosilacin de la lactosa.

Para la sntesis enzimtica de los GOS deben llevarse a cabo controles cinticos, ya que
tendr mayor afinidad por el grupo hidroxilo de un azcar no protegido como la lactosa
que se unir al complejo galactosil-enzima en una reaccin de quimioselectividad.
Mientras que con un control termodinmico se deber recurrir al uso de solventes
apolares para cambiar la direccin de la reaccin hacia la sntesis, por esto es ms
exitoso controlarlo cinticamente. Algunos factores exgenos como la temperatura y el
pH, ademas de la concentracin de la enzima no influyen en la cantidad de GOS que se
produzca, pero si en la velocidad de esta reaccin de transgalatosilacion.
 BIBLIOGRAFA

Nelson, David; y Michael, Cox. Leningher: Principios de Bioqumica. Cuarta Edicin.

Impreso en la Universidad de Wisconsin. Wisconsin, Estados Unidos. 2001. Captulo 6.

Badui, Salvador. Qumica de los Alimentos. Tercera Edicin. Worth Publishers Inc. New
York; USA, 1993. Captulo 5.

Murray, Robert; Peter, Mayes; Daryl, Granner; y Victor, Rodwell. Bioqumica de Harper.
Dcimacuarta edicin espaol. Editorial Manual Moderno, Mxico D.F., Mxico. 2006.
Captulo: 8-11.

Horton, Robert; Laurence, Moran; Gray, Scrimgeour; Marc, Perry; y David, Rawn. Principios
de Bioqumica. Dcima cuarta edicin. Editorial Prentice Hall . Washington, Estados Unidos.
2006. Captulo 5 -7.

Fennema, Owen. Qumica de los Alimentos. Segunda Edicin. Editorial Acribia. Zaragosa,
Espaa, 1993. Captulo 6.

Nomenclatura y clasificacin de enzimas

http://www.practiciencia.com.ar/cbiologicas/biologia/bioquimica/proteinas/enzimas/clas
ific a/index.html. 20-junio-14.

Coenzima http://www.medmol.es/glosario/81/. 20-junio-14.

Apoenzimahttp://sebbm.es/BioROM/contenido/UIB/Jmoldesarrollo/Vitaminasjmol/vitamte
xt.htm. 20-junio-14.

Transglicosilacin enzimtica. Rita, Mara.

http://editorial.unsa.edu.ar/tesis/martearena_rita/ejemplartesis.pdf. Junio 5, 2014

Transglicosilacin .Brtz, Heike. http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1432-

1033.1997.t01-1-00193.x/full. Junio 5,2014

Transgalactosilacin. Sauerbrei, Bernd.

http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/004040399288050F. Junio 5, 2014