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Otro reactivo revelador bastante utilizado es el cido sulfrico, que reacciona con
los componentes orgnicos produciendo manchas negras. Sin embargo debe
tenerse en cuenta que el tamao de las manchas no est relacionado con la
cantidad de componente separado.
Procedimiento
Una placa de CCF es una lmina de vidrio, metal o plstico recubierta con una
capa delgada de un slido adsorbente (gel de slice o almina). Se deposita una
pequea cantidad de la muestra problema en disolucin en un punto en la parte
inferior de la placa. Entonces la placa se introduce en una cubeta cromatogrfica,
de forma que slo la parte inferior de la placa queda sumergida en el lquido.
Este lquido o eluyente es la fase mvil y asciende por la placa de CCF por
capilaridad.
A medida que el eluyente pasa por el lugar donde est la mancha de la mezcla
problema se establece un equilibrio entre las molculas de cada uno de los
componentes en la mezcla que son adsorbidas y las que se encuentran en
disolucin.
En principio, los componentes se diferenciarn en solubilidad y en la fuerza de
su adsorcin, de forma que unos componentes se desplazarn ms que otros.
Cuando el eluyente llega a la parte superior de la placa, esta se saca de la
cubeta, se seca, y los componentes separados de la mezcla se visualizan.
Cuando son visibles, se puede determinar para cada una de las manchas el valor
de Rf (factor de retencin), o la distancia que cada compuesto se desplaza en la
placa. Cada compuesto tiene un Rf caracterstico que depende del disolvente
empleado y del tipo de placa de CCF utilizada, pero es independiente del
recorrido del disolvente. De esta manera se puede ayudar a identificar un
compuesto en una mezcla al comparar su Rf con el de un compuesto conocido
(preferiblemente cuando se hacen eluir en la misma placa de CCF).