Los efectos de Staphylococcus aureus leucotoxina en el host: lisis celular y

ms all
Resumen

El xito de Staphylococcus aureus como la causa principal de las infecciones nosocomiales y

adquiridas en la comunidad mortales se atribuye a su alto nivel de resistencia a la mayora de los
antibiticos, y la multitud de factores de virulencia que elabora. La mayora de los aislados clnicos
producen hasta cuatro toxinas formadoras de poros bi-componente capaz de lisar las clulas del
sistema inmune. Sutiles diferencias en la actividad y el destino de cada gama leucotoxina sugieren
que estas toxinas no son redundantes, sino que pueden haber funciones especializadas en atacar y
/ o evadir las defensas del husped. A su vez, el anfitrin ha desarrollado contramedidas
reconociendo niveles sublytic de leukotoxins como seales para activar las defensas inmunes
protectoras. Los efectos citotxicos e inmune-que activan opuestas de leukotoxins en clulas
husped para hacer una dinmica compleja entre S. aureus y el anfitrin.

INTRODUCCION

Staphylococcus aureus es un patgeno bacteriano de gran xito que causa infecciones adquiridas
en el hospital significativos. Su xito se atribuye en parte a su rpida adquisicin de resistencia a la
mayora de las terapias antimicrobianas disponibles. An ms alarmante, que ha comenzado
recientemente causar infecciones mortales fuera de los centros asistenciales, en individuos
relativamente sanos y jvenes. Las cepas aisladas de ambas infecciones nosocomiales y adquiridas
en la comunidad son en su mayora resistentes a la meticilina (MRSA), por lo que el xito del
tratamiento altamente desafiante. Adems de su resistencia a casi todos los antibiticos
ptimamente eficaz, la tenacidad de S. aureus como agente patgeno se puede atribuir a su
arsenal de factores de virulencia diseados para evadir las defensas del husped o ataque en cada
nivel. Un subconjunto de sus factores de virulencia incluye una coleccin de toxinas formadoras de
poros capaces de asesinato selectivo de seleccionar clulas husped mediante la creacin de
canales en la membrana plasmtica. La desregulacin osmtica, resultando a la larga conduce a la
lisis celular. Los leukotoxins formadores de poros producidos y secretados en el medio extracelular
por S. aureus son nicos en que constan de dos componentes diferentes de protenas que se
ensamblan entre s para formar poros -barril. Cepas de S. aureus asociados con infecciones
humanas producen cuatro leukotoxins con secuencia de una considerable similitud: la Panton-
Valentine leucocidina (PVL), gamma ()-hemolisina (HlgACB), Leucotoxina ED (LukED), y
Leucotoxina AB / GH (LukAB / GH ). Esta opinin se esbozan las actividades de cada leucotoxina,
as como destaca las diferencias entre ellos (Tabla 1 y Figura 1).
La formacin de poros leucotoxina
Leucotoxina formacin de poros Las dos subunidades de protenas de cada leucotoxina se
clasifican como 'S' y 'F'. Esta nomenclatura corresponde a la purificacin inicial de PVL donde la
subunidad primero eluida se denomina rpido (F), y la subunidad que eluy posteriormente se
denomin lento (S) [8]. El mecanismo por el que estas toxinas se unen y / o interactan con las
clulas husped de destino no ha sido completamente dilucidado. Los estudios iniciales con PVL
dieron lugar a un modelo mediante el cual LukS-PV sirve como el componente homing que se une
especficamente a un receptor de la clula husped, despus de lo cual LukF-PV es reclutado por
LukS-PV ya acoplado a su receptor [9]. A la inversa, el trabajo llevado a cabo con -hemolisina,
indic que HlgB (componente de la 'F' de la toxina) se une a su clula diana primero, seguido por la
unin de HlgA (componente de la 'S') [10]. Los trabajos ms recientes sugieren la posibilidad de
que los receptores celulares distintos para ambos LukS-PV y LukF-PV.

Una vez localizada en la superficie celular, las subunidades se ensamblan en un prepore octameric
con cuatro de cada alternancia de componentes F y S. La formacin de poros culmina cuando los
dominios madre de las subunidades ensambladas se despliegan y se insertan en la membrana
celular para formar poros -barril (Figura 2, los pasos en la formacin de poros expuestos en gris).

Las clulas diana de leucotoxinas S. aureus

Como sus nombres sugieren, estas leucotoxinas pueden lisar las clulas del linaje de leucocitos; Sin
embargo, las diferencias sutiles en la susceptibilidad de diversas clulas husped pueden explicar
por qu S. aureus produce mltiples molculas altamente relacionados que aparentemente
realizan la misma funcin. Por ejemplo, los cuatro leucotoxinas se han demostrado para matar a
los neutrfilos humanos, pero slo -hemolisina, y, en menor medida, LukED, exhiben actividad
ltica contra las clulas rojas de la sangre. Ms detalles de dianas celulares de cada leucotoxina se
ampliarn en el siguiente apartado.

Sensibilidad a leucotoxinas tambin difiere entre las especies. Por ejemplo, los neutrfilos
humanos son altamente susceptibles a PVL y LukAB / GH, mientras que los neutrfilos de ratones
son en gran medida resistentes a la lisis por ambas toxinas. Susceptibilidad de las clulas a partir
de cualquier especie tambin vara dependiendo de la toxina, como en el caso de los neutrfilos
de mono, que son altamente resistentes a la destruccin por PVL pero susceptible a LukAB / GH.
Adems, LukED parece ser la nica leucotoxina que puede matar a los neutrfilos de ratn de
manera eficiente.

Participacin de leucotoxina en S. aureus patognesis

-hemolisina (HlgAB / HlgCB)

Dos combinaciones de subunidades de protenas comprenden -hemolisina, ambos
comparten la misma subunidad F (HlgB), pero que difieren en composicin de la
subunidad S (HlgA o HlgC). Dado que -hemolisina es la nica leucotoxina dentro de esta
familia que pueden lisar los glbulos rojos de alta eficiencia, no fue sorprendente
encontrar que los genes HLG estn altamente regulados por incremento en la sangre
humana. A su vez, -hemolisina promueve la supervivencia de S. aureus en la sangre. De
acuerdo con estos hallazgos ex vivo, -hemolisina confiri una ventaja a S. aureus en
modelos de ratn de infecciones del torrente sanguneo, incluyendo bacteriemia y artritis
sptica. La presencia de genes GAN en prcticamente todas las cepas de S. aureus (99%),
no slo en los aislados de infecciones transmitidas por la sangre, sugerira que -
hemolisina tambin podra ser un factor importante en mltiples modos de infeccin.

LukED

A pesar del informe inicial de esta toxina hace ms de una dcada, la investigacin sobre
LukED ha permanecido mnimo. Como se ha mencionado en la seccin anterior, adems
de su toxicidad hacia los neutrfilos humanos y de conejo glbulos rojos, LukED es nica
en ser altamente eficaz en matar los fagocitos de ratn. Por consiguiente, se encontr
LukED para contribuir a la letalidad observada en un modelo de ratn de bacteriemia por
S. aureus. Lo hizo al atacar y matar a los fagocitos, permitiendo as LukED + S. aureus a
proliferar. Los genes lukED se han encontrado en 87% de las cepas clnicas, incluyendo
muchas cepas de MRSA responsables de las pandemias actuales, lo que sugiere una
contribucin potencialmente significativa de este leucotoxina a la patognesis de S.
aureus.

LukAB/GH

LukAB / GH es la leucotoxina ms recientemente identificado, y es tambin el ms

divergentes entre las producidas por S. aureus. Identidades de secuencia con otras leucotoxinas
estafiloccicas estn por debajo de 40% (Figura 1). A pesar de este bajo nivel de identidad de
secuencia, LukAB / GH puede matar de manera eficiente los neutrfilos humanos, monocitos,
macrfagos, y clulas dendrticas. Su toxicidad es an mayor por la sinergia con PVL [25 ].
Curiosamente, LukAB / GH es la nica leucotoxina informado a asociarse con la superficie celular
de S. aureus, adems de ser secretada como los otros leucotoxinas. El mecanismo de la asociacin
LukAB / GH con la superficie bacteriana an no se ha investigado. Tambin es actualmente claro si
surfaceassociated LukAB / GH puede funcionar como una toxina activa. Hasta ahora LukAB / GH es
la nica leucotoxina bicomponente conocido para mejorar la supervivencia de S. aureus a la
fagocitosis por los neutrfilos humanos, lo que implica que, adems de la lisis celular
"convencional" desde fuera del neutrfilo, esta toxina tambin puede facilitar el escape de S.
aureus desde el fagosoma. Toxicidad de LukAB / GH hacia neutrfilos es el mecanismo probable
por el cual la toxina promueve la supervivencia de S. aureus en la sangre entera, ya que no tiene
actividad hemoltica detectable. La contribucin de LukAB / GH a la virulencia se demostr
recientemente usando un modelo de infeccin sistmica baja dosis infecciosa, donde la presencia
de la toxina se asoci con mayor carga bacteriana en riones infectados. Mientras que los anlisis
exhaustivos identificar la presencia de genes lukAB / GH en cepas clnicas de S. aureus no estn
actualmente disponibles, todas las cepas de S. aureus secuenciado y todos los aislados clnicos
examinados en nuestro laboratorio son positivos para lukAB / GH, an ms lo que sugiere que esta
toxina es tambin un factor de virulencia muy relevante producida por S. aureus.

PVL

PVL est presente en un porcentaje pequeo (~ 5%) de las cepas de S. aureus clnicos generales, a
pesar de que est fuertemente asociado con cepas de MRSA adquiridas en la comunidad (~ 85%),
en particular las que causan la neumona, y la piel y las infecciones de los tejidos blandos [2,26]. A
pesar de su aparente vinculacin con cepas virulentas capaces de causar infecciones mortales en
las personas sanas, su contribucin a la virulencia no se ha demostrado de manera concluyente.
Varios estudios multinacionales han concluido que los resultados de infeccin por S. aureus no
estn vinculadas a la produccin de PVL, mientras que en algunos otros casos, las infecciones con
PVL + cepas se asocian incluso con un mejor resultado. Como tal, mientras PVL es la leucotoxina
estafiloccica ms estudiado, tambin es sin duda el ms polmico. Debido a la resistencia de las
clulas de ratn a la lisis por LPV, modelos murinos de infeccin que examinan la contribucin de
la capacidad de formacin de poros de PVL produjeron conclusiones inconsistentes por diversos
grupos de investigacin. En lugar de ello, el uso de modelos de infeccin de conejo se consider
ms apropiado, teniendo en cuenta que los neutrfilos de conejo son muy sensibles a la
leucomalacia periventricular. Sin embargo, los datos recopilados de varios modelos de conejo
siempre poco una nueva visin. Un estudio mostr que PVL confiri una modesta ventaja
transitoria a S. aureus en las primeras etapas de bacteriemia y en un modelo de neumona, pero
slo a muy alta inculos (> 5 x 109 CFU). El uso de modelos de infeccin de la piel del conejo,
conclusiones divergentes fueron alcanzados por dos grupos independientes, a pesar de que ambos
utilizan la misma cepa MRSA. Lipinska et al. mostr la cepa PVL + para causar necrosis ms
significativa de la piel en comparacin con el isognica pvl strain.On el contrario, Kobayashi et al.
informaron que los abscesos ms grandes fueron causadas por la cepa pvl.

Cabe sealar sin embargo, que haba variaciones sutiles en el diseo experimental, incluyendo las
especies de conejo utilizados, ligeras diferencias en inculos y el sitio de la inyeccin. Haba
tambin un estudio en primates no humanos (macacos cynomolgus) que compararon una cepa
isognica WT y pvl MRSA en la causa de la enfermedad del tracto respiratorio inferior.