AO DEL BUEN SERVICIO AL CIUDADANO

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL
ESCUELA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL E INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS
DEPARTAMENTO DE AGROINDUSTRIAS E INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS

INFORME N02
TEMA:
INMOVILIZACIN DE CLULAS

ALUMNOS:
ALMESTAR GONZAGA FRANK REYNALDO
CHURA OJEDA VICTORIA
CHUQUIHUANCA CHUMACERO WENDY SOFIA
MENDOZA OJEDA MERYURI DANIELA
MOROCHO GARCIA JOSE ANTHONY
RAMOS TALLEDO LADY LIA MARINA
SALVADOR PINTADO ALEX BERLYN

DOCENTE:
BLGO. JORGE BERMEJO

CURSO:
BIOTECNOLOGA

2017
I.- INTRODUCCION:
Como producto del avance de la biotecnologa y su aplicacin en procesos
industriales para la obtencin de productos qumicos, farmacuticos o
alimentarios se ha recurrido al uso de enzimas. stas presentan grandes ventajas
sobre catalizadores no biolgicos, entre ellas gran actividad cataltica, a
temperatura ambiente y presin atmosfrica, y gran especificidad de sustrato.
La inestabilidad que presentan en los procesos qumicos industriales y la dificultad
de poder separarse de sustratos y productos, todos solubles en agua, hacen que las
enzimas no se puedan reutilizar.
Como alternativa se ide el mtodo de inmovilizarlas a un soporte inerte para
hacer factible que un proceso biotecnolgico sea rentable. Se denomina una
enzima inmovilizada aquella que est fsicamente localizada en una regin
definida del espacio, manteniendo su actividad cataltica y pudiendo ser usada
repetida y continuamente.
Free et al. (1957) desarrollaron el sistema que se utiliz para la medida de
concentracin de glucosa en orina. Consista en una tira de papel (celulosa) sobre
la cual se adsorba el sistema enzimtico (glucosa oxidasa, peroxidasa y un
cromgeno). El papel cambiaba de color cuando se lo embeba en una solucin con
glucosa. Posteriormente se fue perfeccionando el sistema y en la actualidad se
pueden utilizar enzimas y cromgenos apropiados impregnados en un papel de
filtro montados sobre una tira plstica para medir cuali y cuantitativamente la
presencia de glucosa en sangre y orina, as como otros compuestos, como
colesterol, cido rico, triacilglicridos, urea, creatinina. Se compara el color frente
a una escala cromtica (visualmente o a travs de un microprocesador) y se estima
la concentracin del sustrato. Son mtodos rpidos que sirven para la urgencia
clnica. Los datos exactos se los obtienen en el laboratorio. Las enzimas preparadas
en forma de reactivo en fase slida son desechables.
La aplicacin de la inmovilizacin de enzimas para los alimentos: en hidrlisis de
protenas, de hidratos de carbono, en las mejoras de las caractersticas
organolpticas de ciertos alimentos, en la obtencin de edulcorantes y aditivos
alimentarios.

OBJETIVOS:
Especificar por que el aceite es un buen formador de perlas de agar-agar
Conocer el motivo de la existencia de viabilidad de las levaduras inoculadas en
el caldo nutriente.
Identificar el factor ms importante cuando manejamos fermentaciones con
clulas inmovilizadas.
II.- MARCO TEORICO
1.1. INMOVILIZACIN DE ENZIMAS

La inmovilizacin de enzimas es un proceso en el que se confina o localiza a la

enzima en una regin definida del espacio, para dar lugar a formas insolubles que
retienen su actividad cataltica y que pueden ser reutilizadas repetidamente.
Posteriormente esta definicin se ha ampliado a aquel proceso por el cual se
restringen, completa o parcialmente, los grados de libertad de movimiento de
enzimas, orgnulos, clulas, etc. por su unin a un soporte.
Como ventajas del empleo de enzimas inmovilizadas podemos destacar:
1. El aumento de la estabilidad de la enzima
2. La posible reutilizacin del derivado, por lo que disminuyen los costes del
proceso.
3. La posibilidad de disear un reactor enzimtico de fcil manejo y control

Los principales inconvenientes del proceso de inmovilizacin son:

1. La alteracin de la conformacin de la enzima respecto de su estado nativo.
2. La gran heterogeneidad del sistema enzima-soporte donde pueden existir
distintas fracciones de protenas inmovilizadas con un diferente nmero de
uniones al soporte.
3. Siempre suele haber una prdida de actividad de la enzima durante la
movilizacin.
4. El biocatalizador es ms caro que la enzima nativa.

1.2. METODOS DE INMOVILIZACION

1.2.1. POR RETENCIN FSICA

a) Atrapamiento

Consiste en la retencin fsica de la enzima en las cavidades interiores de una

matriz slida porosa constituida generalmente por prepolmeros
fotoentrucruzables o polmeros del tipo poliacrilamida, colgeno, alginato,
carraginato o resinas de poliuretano. El proceso de inmovilizacin se lleva a cabo
mediante la suspensin de la enzima en una solucin del monmero.
Seguidamente se inicia la polimerizacin por un cambio de temperatura o
mediante la adicin de un reactivo qumico. El atrapamiento puede ser en geles o
en fibras, que suelen ser ms resistentes que los geles. En el primer caso, la enzima
queda atrapada en el interior de un gel, mientras que en el segundo caso la enzima
se encuentra ocluida dentro de las microcavidades de una fibra sinttica. El
atrapamiento, de gran sencillez desde el punto de vista experimental, requiere
poca cantidad de enzima para obtener derivados activos. Como ventaja adicional,
la enzima no sufre ninguna alteracin en su estructura.
b) Inclusin en membranas: Dividida en dos tipos:
1. Microencapsulacin: En esta tcnica, las enzimas estn rodeadas de membranas
semipermeables que permiten el paso de molculas de sustrato y producto,
pero no de enzima. Estas membranas semipermeables pueden ser
permanentes (originadas por polimerizacin interfacial) o no permanentes
(generadas por surfactantes, tambin llamadas micelas reversas). Las
microcpsulas obtenidas son de forma esfrica, con tamaos comprendidos
entre 1 y 100 mm de dimetro. Mediante este mtodo se pueden encapsular
simultneamente una gran variedad de enzimas, clulas o biomolculas,
permitiendo que se lleven a cabo determinadas reacciones que suceden en
mltiples pasos.

2. Reactores de membrana: El desarrollo de reactores o sistemas que contengan

enzimas atrapadas ha despertado gran inters en la industria. Estos reactores
emplean membranas permeables al producto final, permeables o no al sustrato
inicial y obviamente impermeables a la enzima. Mediante una bomba se
establece un flujo lquido de sustrato que atraviesa el reactor. En general, en
esta metodologa, se procede inicialmente a la adsorcin de la enzima sobre la
membrana que formar el reactor. Esta adsorcin se puede realizar de dos
formas: mediante el paso de una solucin tamponada de enzima a travs de la
membrana; por contacto continuo de una solucin de enzima con la membrana.

2.2.2. POR UNIN QUMICA

a) Unin a soportes

Son los mtodos de inmovilizacin ms utilizados y de los que se dispone de una

mayor informacin. La eleccin del soporte y del tipo de enlace resultan
determinantes en el comportamiento posterior del biocatalizador. Se debe
procurar que la inmovilizacin incremente la afinidad por el sustrato, disminuya la
inhibicin, ample el intervalo de pH ptimo y reduzca las posibles
contaminaciones microbianas. Adems el soporte debe tener resistencia mecnica
adecuada a las condiciones de operacin del reactor y ser fcilmente separable del
medio lquido para que pueda ser reutilizado. Se han utilizado una gran variedad
de materiales como soportes para la inmovilizacin de numerosas enzimas. Estos
materiales difieren en tamao, densidad, porosidad y forma, aunque generalmente
nos los encontramos en forma de cilindro, hojas, fibras y ms corrientemente en
forma de esferas. Los soportes pueden clasificarse en dos grandes grupos:
1. Soportes inorgnicos. Pueden ser naturales (arcillas como la bentonita, slice,
etc.) o materiales manufacturados (xidos de metales y vidrio, gel de slice,
etc.)

2. Soportes orgnicos. Se pueden clasificar en:

Polmeros naturales: polisacridos protenas fibrosas
Polmeros sintticos: Poliolefinas, Polmeros
b) Adsorcin

En la adsorcin, la enzima se une a un soporte sin funcionalizar mediante

Interacciones inicas, fuerzas de Van der Waals y por puentes de hidrgeno.
Los principales factores que influyen en la adsorcin, son:
o El pH del medio: controla el nmero y la naturaleza de las cargas que presenta
la superficie de la protena y del slido;

o La fuerza inica: al aumentar la fuerza inica se produce la desorcin de la

enzima, ya que los iones inorgnicos se unen con ms fuerza al soporte que la
protena;

o El dimetro de poro: debe ser aproximadamente dos veces el tamao del eje
mayor de la enzima;

o La presencia de iones que acten como cofactores de la enzima, ya que pueden

incrementar la carga enzimtica del derivado.

Como principales ventajas de este mtodo destacan:

Su preparacin sencilla,
Su bajo coste,
No hay cambios de especificidad enzimtica,
Los derivados son estables en medios de trabajo con bajo contenido en agua.

Los inconvenientes de la adsorcin son principalmente:

La optimizacin de las variables que controlan la adsorcin,
Los derivados obtenidos son poco estables desde el punto de vista mecnico,
La unin al soporte es dbil.

Una variante dentro de la tcnica de la adsorcin consiste en emplear resinas de

intercambio inico, las cuales contienen grupos funcionales y contraiones mviles.
Estos contraiones se pueden intercambiar reversiblemente por otros iones de la
misma carga, sin que se produzcan cambios en la matriz insoluble.

c) Unin covalente

La unin covalente de una enzima a un soporte es quiz el mtodo de

inmovilizacin ms interesante desde el punto de vista industrial. De entre los 20
aminocidos diferentes que se encuentran en la estructura de las enzimas, los ms
empleados para la formacin de enlaces con el soporte son principalmente la
lisina, la cistena, la tirosina y la histidina, y en menor medida la metionina, el
triptfano, la arginina y el cido asprtico y glutmico.
Este mtodo presenta las siguientes ventajas:
1. La manipulacin de los derivados inmovilizados es sencilla;
2. La carga de enzima permanece constante despus de la inmovilizacin;
3. Los derivados pueden utilizarse en reactores en continuo, empaquetados, de
lecho fluidizado o tanque agitado.
4. Una mayor resistencia a la desactivacin por el efecto de la temperatura, de los
disolventes orgnicos o del pH, al tener estabilizada su estructura terciaria.

En cambio la inmovilizacin por enlace covalente tambin presenta una serie de

inconvenientes:
1. Es necesario conocer la densidad de grupos activos por unidad de superficie, ya
que condiciona el nmero de uniones enzima-soporte y su geometra, que
puede ser distorsionante y conducir a derivados inactivos.
2. El proceso de inmovilizacin puede alterar la estructura del centro activo. Para
evitar esta posible alteracin, se realiza la inmovilizacin en presencia de un
inhibidor que bloquee el centro activo.
3. La inmovilizacin covalente no es aconsejable en aquellas enzimas muy
sensibles a cambios de pH, fuerza inica, etc.

d) Reticulado

Tambin denominado entrecruzamiento o cross-linking, es una tcnica que ha sido

ampliamente utilizada en la estabilizacin de muchas enzimas. El mtodo del
reticulado consiste en uso de reactivos bifuncionales que originan uniones
intermoleculares entre las molculas de enzima. Como reactivos bifuncionales se
pueden emplear dialdehdos, diiminosteres, diisocianatos, sales de bisdiazonio e,
incluso, diaminas si estn activadas con carbodiimida. El resultado del reticulado
son enzimas con enlaces intermoleculares irreversibles capaces de resistir
condiciones extremas de pH y temperatura.

2.3. EFECTOS DE LA INMOVILIZACIN

A menudo, la inmovilizacin altera significativamente el comportamiento de las

enzimas. En primer lugar se producen cambios en su estabilidad. En segundo lugar,
la enzima inmovilizada es un sistema heterogneo en el cual todos los
componentes que intervienen en el proceso cataltico (pH, sustratos, productos,
inhibidores, cofactores, activadores, etc.) se encuentran en interfase: en el medio
de reaccin y en la fase constituida por el soporte con la enzima.
2.3.1. Efectos en la estabilidad

Generalmente se observa un incremento en la estabilidad de las enzimas despus

de su inmovilizacin, que se debe principalmente a las siguientes razones:
1. Una estabilizacin conformacional de la enzima debido a la existencia de
uniones multipuntuales enzima-soporte. La estructura terciaria de la enzima
adquiere una mayor rigidez y se hace ms resistente a la desactivacin trmica
o qumica. Este tipo de estabilizacin se obtiene nicamente en aquellos
mtodos en los que intervienen enlaces de tipo covalente, como el reticulado o
la unin a soportes activados. La inmovilizacin covalente multipuntual se
puede combinar con la adicin de reactivos bifuncionales que den mayor
rigidez a la estructura de la enzima.

2. Una proteccin frente a las proteasas en el medio. Se ha visto que la unin de

proteasas a un soporte elimina su capacidad proteoltica, y evita su autolisis.

3. Se evita la agregacin intermolecular al mantener las molculas de enzima

retenidas en una determinada regin del espacio.

4. Existe una alteracin del microentorno del enzima debida a la interaccin de la

enzima con el soporte. Por ejemplo, si una enzima sensible al oxgeno (como las
nitrogenasas, hidrogenasas, etc.) se sita en la superficie de un soporte
cargado, la fuerza inica efectiva en el microentorno de la enzima ser muy alta
y, como consecuencia, la concentracin de oxgeno disuelto ser mucho menor
en esa zona que en el medio de reaccin. En otros casos el soporte tiene un
efecto tamponador de tal manera que mantiene el pH ptimo de la enzima en
su microentorno, aunque en la disolucin se produzcan cambios importantes
de pH. Por otra parte, en aquellas reacciones catalizadas por enzimas
inmovilizadas en presencia de disolventes orgnicos, la acuofilia del soporte o
su capacidad para retener agua, regula la actividad de la enzima. Cuanto mayor
es la acuofilia del soporte, ms agua adsorbe y la enzima poseer la cantidad
necesaria de agua en su microentorno para mantener su conformacin activa.
2.3.2. Efectos en la actividad enzimtica

Tras una inmovilizacin, la actividad de la enzima puede disminuir e incluso

perderse por diversas razones. Si pierde totalmente la actividad enzimtica puede
ser debido a que:
1. La unin al soporte se produce de tal forma que el paso del sustrato al centro
activo est impedido,

2. Los grupos reactivos del soporte reaccionan con algn aminocido que forme
parte del centro activo o que sea esencial para la actividad cataltica de la
enzima,

3. La inmovilizacin puede originar un cambio conformacional que da lugar a una

forma inactiva,

4. Las condiciones experimentales del proceso causan la desnaturalizacin o

desactivacin de la enzima.

EFECTOS DE LA INMOVILIZACIN
La inmovilizacin altera el comportamiento de las enzimas. Generalmente se
incrementa la estabilidad conformacional de las mismas (mtodos de uniones de
tipo covalente y aun ms, con la adicin de grupos bifuncionales), se aumenta la
proteccin frente a proteasas y se evita la agregacin intermolecular. Se produce
una alteracin del microentorno de la enzima debido a su interaccin con el
soporte, haciendo por ejemplo que enzimas sensibles al oxgeno, como
nitrogenasas hidrogenasas, vean favorecida su actividad cuando estn
inmovilizadas, debido a que la fuerza inica que tiene el entorno disminuye la
concentracin efectiva de oxgeno en el medio.
Pueden perder total o parcialmente la actividad por interacciones con el soporte,
por impedimento del paso del sustrato al sitio activo, por interaccin con grupos
cargados del soporte o por cambios conformacionales que den formas inactivas.
Otros cambios que afectan la actividad enzimtica, aumentndola o
disminuyndola, son producidos por efectos de difusin del sustrato al sitio activo
(por insolubilidad del soporte en el medio de reaccin, por impedimentos estricos
o por efectos electrostticos entre el sustrato y el soporte) y por efectos en el
microentorno enzima-soporte.

APLICACIONES DE LAS ENZIMAS INMOVILIZADAS -Biosensores:

son de gran utilidad en el campo del diagnstico clnico. Se determinan niveles
sanguneos de glucosa (electrodo de D-glucosa. Ver ms adelante), lactato, urea,
colesterol, creatinina y cido rico. Hay biosensores para control de calidad en la
industria alimentaria, para la determinacin de contaminacin microbiana o
deteccin de polucin ambiental, presencia de residuos txicos, pesticidas,
herbicidas o microorganismos.
USO DE ENZIMAS INMOVILIZADAS PARA MEDIR CONCENTRACIN DE SUSTRATO.
a. Tubos reactores Normalmente se utilizan tubos de nylon de 1 mm de dimetro
impregnados internamente con la enzima que se halla unida a stos de forma
covalente. Este reactor est adaptado a sistema de flujo continuo en analizadores
clnicos que dosan la concentracin de sustrato por colorimetra.
b. Sondas bioanalticas (bioensores, vistos anteriormente)
c. Reactivos en fase slida Free et al. (1957) desarrollaron el sistema que se utiliz
para la medida de concentracin de glucosa en orina. Consista en una tira de papel
(celulosa) sobre la cual se adsorba el sistema enzimtico (glucosa oxidasa,
peroxidasa y un cromgeno).
El papel cambiaba de color cuando se lo embeba en una solucin con glucosa.
Posteriormente se fue perfeccionando el sistema y en la actualidad se pueden
utilizar enzimas y cromgenos apropiados impregnados en un papel de filtro
montados sobre una tira plstica para medir cuali y cuantitativamente la presencia
de glucosa en sangre y orina, as como otros compuestos, como colesterol, cido
rico, triacilglicridos, urea, creatinina. Se compara el color frente a una escala
cromtica (visualmente o a travs de un microprocesador) y se estima la
concentracin del sustrato. Son mtodos rpidos que sirven para la urgencia
clnica. Los datos exactos se los obtienen en el laboratorio. Las enzimas preparados
en forma de reactivo en fase slida son desechables.

ANLISIS INMUNOENZIMTICO
Se utiliza para el dosaje de protenas del suero sanguneo, factores de coagulacin
de la sangre, inmunoglobulinas, anticuerpos contra hormonas y un amplio rango
de drogas, virus, bacterias y parsitos. El fundamento del mtodo original usando
radioistopos (Radioinmunoensayo- RIA) es el siguiente: Anticuerpo (Ac) +
Antgeno (Ag) + Antgeno marcado (Ag*) AcAg + AcAg* Las molculas de Ag
(marcado y no marcado) libres compiten por un nmero fijo y limitado de puntos
de unin especficos en las molculas de anticuerpo. Despus de un tiempo de
incubacin el antgeno libre y el ligado se separan y se los mide frente a una curva
patrn. El mtodo tiene muchas desventajas de manipuleo, de vida til de reactivos
y de costo, por lo que se ide un mtodo alternativo usando marcadores
enzimticos.
Las enzimas marcadoras se unen covalentemente a antgenos o anticuerpos y a
haptenos (molculas pequeas (drogas o esteroides) que no son usualmente
inmunognicas, pero que pueden serlo si son acopladas a una protena
transportadora ms grande), mediante diversas reacciones qumicas. (Mtodos del
glutaraldehdo, del periodato, de la maleimida, del anhdrido, de la carbodiimida,
del imidato bifuncional, etc). Siguiendo el ejemplo anterior, a la enzima unida al
antgeno (que reaccion con el anticuerpo) se le mide la actividad y se estima la
concentracin del anticuerpo presente.
Estos marcadores enzimticos tienen la ventaja del no uso de radiacin, son
baratos, el producto marcado tiene una vida til muy larga y tiene la posibilidad de
automatizacin. Tienen la desventaja que constituyentes del plasma pueden influir
en el dosaje de la actividad enzimtica. En la prctica se utilizan soportes en fase
slida, fabricados con distintos plsticos (polivinilos, poliestirenos) que tienen la
particularidad de adsorber capas monomoleculares de protenas sobre su
superficie.
Si bien algunas molculas adsorbidas pueden perder algunas determinantes
antignicas, otras quedan inalteradas y son las que van a reaccionar con su
respectivo anticuerpo. La presencia del anticuerpo unido al antgeno adsorbido, es
detectada por inmunoglobulinas anti-anticuerpo, unidas a enzimas.
III.- MATERIALES Y MTODOS

MATERIALES
Medio nutriente
Glucosa 10 gr
KH2PO4 0.5 gr
Levadura 0.5 gr
Agua destilada 100 ml
Recipiente
Aceite 100 ml
Agua helada
Refractmetro
Caldo

PROCEDIMIENTO
1. En un tubo de ensayo mezclamos suspensin de levadura, agar, agua 15%.

2. Colocamos 60ml de aceite en un vaso precipitado.

3. Colocamos el vaso con aceite dentro en un piln con agua helada.

4. Con una jeringa colocamos gotas de la solucin que tenemos en el tubo de

ensayo. Se deja caer cuantas gotas sean necesarias, no hay lmite.

5. Nos damos cuenta que se han formado pequeos cristales esferas.

separamos las esferas formadas del aceite.
6. Las esferas las colocamos en un botella de vidrio que contiene caldo
nutriente (glucosa 10 gr, extr. De levadura 0.5 gr, KH2PO4 0.5 gr, agua
destilada 100ml.)

7. Medimos los grados Brix con un espectrofotmetro (a diario, a partir de ese

da).
IV.- RESULTADOS

Tiempo Consumo de azcar

reductores (brix)
Da 1 9.8

Da 2 8.6

Da 3 6.2

Da 4 6

Tiempo
10

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5

Despus de observar por cuatro das el caldo de levaduras y medir su concentracin de

alcohol se obtuvo un resultado constante de 6 Brix cuyo objetivo final es inmovilizar
las levaduras en su estructura, las cuales se utilizan para controlar el pardeamiento de
bebidas que se produce con el paso del tiempo.
 V.-DISCUSIN
Se han realizado trabajos en laboratorio en la universidad de california utilizando
nanotubos de carbono, clulas de Saccharomyces cerevisiae han sido inmovilizadas
exitosamente por el mtodo de floculacin. Aunque esta tcnica aporta buenos
resultados con respecto a la inmovilizacin, la sntesis selectiva de nanotubos de
carbono sigue siendo costosa. No obstante, es importante plasmar una visin sobre
las expectativas y potencialidades que tienen estos materiales en el proceso de
fermentacin alcohlica. Por lo tanto, surge la motivacin para realizar investigacin
profunda y novedosa fundamentada en el hecho de que los recientes avances en la
sntesis de micro y nano materiales porosos an no se han permeado al campo de la
catlisis con levaduras. Por lo cual, se abren nuevos horizontes en el rea de
investigacin y aplicacin de estos mtodos de inmovilizacin de clulas. (Baron, G.
y Willaert, R.2004).

Una revista brasilian journal of food technology publico un artculo de los

autores Giuliano DRAGONE,Solange Ins MUSSATTO J,oo Batista de ALMEIDA e
SILVA Faculdade de Engenharia Qumica de Lorena, Departamento de
Biotecnologia Rodovia, donde realizan estudios de Levaduras Inmovilizadas en
Soporte Lignocelulsico para la Produccin Continua De Cerveza donde se toma
durante las primeras 26 h, el experimento fue realizado en rgimen discontinuo y
usando medio sinttico con la misma composicin a la utilizada durante la
preparacin del inculo. En ese intervalo de tiempo, la levadura alcanz su fase de
crecimiento exponencial, caracterizado por un acentuado aumento de biomasa,
que pas de 1,25 g/L para 3,39 g/L. Posteriormente, el reactor fue alimentado
continuamente con -1 una tasa de dilucin (D) igual a 0,2 h. De acuerdo con
BRNYIK -1 et al. (2004a), valores de D inferiores a 0,2 h demoran
significativamente el proceso de inmovilizacin.

Estudios anteriores (BRNYIK et al. 2002) tambin demostraron que la velocidad

de unin de las levaduras en el bagazo de malta durante la alimentacin continua
con medio sinttico resulta superior a la obtenida durante la alimentacin
continua con mosto cervecero. Ese fenmeno puede ser explicado por la alta
competicin entre las clulas y las protenas del mosto por los sitios de adhesin
en la superficie del soporte. Las protenas del mosto adsorbidas forman una
camada hidroflica en los sitios de interaccin de las clulas que debilitan la
adhesin de las levaduras. Por ese motivo, entre las 26 y 74 h de fermentacin, la
alimentacin continua del reactor fue realizada con medio sinttico.
VI.- CONCLUSIONES

EL aceite comn utilizado fue un buen formador de perlas de agar-agar,

debido a su propiedad hidrofbica.

Existe viabilidad de las levaduras inoculadas en el caldo nutriente, ya que

hubo una considerable reduccin de azcares.

El Agar-Agar 15% result ser un eficaz inmovilizador celular.

El tiempo es un factor importante cuando se maneja fermentaciones con

clulas inmovilizadas.

La concentracin celular de cada perla fue adecuada para la cantidad de

caldo nutriente empleado.

Se logr conocer el mtodo de inmovilizacin de clulas y la importancia

que tienen en la industria en general.

La inmovilizacin de clulas permite una mejora significativa de su

estabilidad, lo que hace posible su empleo en la produccin industrial de
productos alimenticios; en el tratamiento de residuos, etc. Una aplicacin
muy importante sera en la produccin de bebidas alcohlicas en las que se
requiere un menor tiempo de fermentacin.

Para obtener biocatalizadores inmovilizados que retengan actividad y sean

estables es necesario aplicar un mtodo de inmovilizacin adecuado, que
depender del tipo de actividad cataltica de inters.

Las clulas inmovilizadas presentan una estabilidad mayor, y por lo tanto la

inmovilizacin es un requisito necesario para poder reutilizar las clulas.

El Agar result ser un eficaz inmovilizador celular. Se pueden reutilizar las

levaduras inmovilizadas en el agar-agar, siempre y cuando se le suministre
una fuente carbonada que les permita estar viables para una
prxima fermentacin.
VII.- RECOMENDACIONES
La inmovilizacin de una enzima en partculas insolubles en agua aumenta
su estabilidad considerablemente.

Debido a que las enzimas son solubles en agua, son difciles de separar en
sus sustratos y productos, por lo que su reutilizacin es difcil. Sin embargo
la capacidad para separar con facilidad la enzima de los productos y
sustratos permite su reutilizacin, o bien, el establecimiento de un proceso
continuo con el que se logra mejorar la economa.

Muchas de las enzimas son lbiles bajo las condiciones normales de

operacin y por ello tienen una vida muy limitada.
VIII.- BIBLIOGRAFIA

BRNYIK, T., VICENTE, A.A., CRUZ, J.M.M., TEIXEIRA, J.A. Un nuevo soporte
para la inmovilizacin de la levadura cervecera.Biotechnology Letters, v.23,
p.1073-1078, 2001.

KIein, J. and Wagner, F. (1983). Mtodos de inmovilizacin en clulas y

enzimas Appl. Biochem. Bioeng. 4, 11-51. e Poulsen, P.B. (1984) Current
applications of immobilized enzymes for manufacturing purposes. Biotech.
Gen. Eng. Rev. 1, 121-138. Woodward, J. (1988) Methods of immobilization
of microbial cells. J. Microbiol. Meth. 8, 91-102.

http://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/5983/mod_resource
/content/0/INMOVILIZACION_DE_ENZIMAS.pdf