1-Metilcylopropene y atmsfera controlada modulan el

metabolismo del estrs oxidativo y reducen los trastornos

relacionados con la senescencia en la fruta de pera almacenada
Las lesiones por senescencia fueron ms evidentes en las peras no tratadas con -
1-MCP mantenidas bajo aire refrigerado.
La escaldadura por senescencia y la ruptura interna se controlaron mediante 1-MCP
y bajo almacenamiento de O 2 .

Las peras europeas (Pyrus communis L.) se almacenan a bajas temperaturas para
prolongar la vida posterior a la cosecha. Desafortunadamente, la escaldadura
senescente y la descomposicin interna pueden ocurrir con una exposicin
prolongada al almacenamiento.

Ambos trastornos se reducirse por atmsfera controlada (AC) y / o el inhibidor de la

maduracin, 1-metilciclo- copeno (1-MCP).

El objetivo principal de este estudio fue investigar el efecto de 1-MCP yAC sobre la
calidad de la fruta, incluyendo trastornos fisiolgicos y metabolitos de estrs oxidativo
en las peras "Cold Snap" y "Swiss Bartlett" almacenadas.

Las peras recin cosechadas se trataron con o sin 1-MCP y luego se almacenaron a
0 C bajo aire refrigerado o CA (18 kPa o 2,5 kPa O 2 y 2 kPa CO 2 ) durante al
menos 167 d. 1-MCP y AC retrasaron y / o redujeron las tasas de produccin de
etileno en frutos almacenados de ambos tipo de peras . Ademas retrasaron el
ablandamiento de la fruta y el amarilleamiento de la cscara en las peras "Swiss
Bartlett", pero tuvieron efectos insignificantes a ligeros con "Cold Snap".

En ambos cultivares, se observaron altas incidencias de escaldaduras senescentes y

descomposicin interna en las peras no tratadas con 1-MCP durante el
almacenamiento refrigerado.

En ambos cultivares, las concentraciones de glutatin (total y reducido) y el estado

redox fluctuaron durante el almacenamiento, aunque estos niveles fueron
generalmente mayores en la fruta tratada con 1-MCP. Adems, el agotamiento del
glutatin ocurri antes del desarrollo de trastornos de senescencia en la fruta de pera
almacenada.
1 . Introduccin
La pera europea ( Pyrus communis L.) pertenece a la familia Rosaceae Un desafo importante para la
produccin de 'Bartlett' y su cepa 'Swiss Bartlett' es su susceptibilidad a la quemadura o fuego bacterial
en el huerto. Por lo tanto, se han introducido nuevos cultivares con resistencia al fuego bacterial como el
Cultivo 'Cold Snap' que se da cruzando 'Bartlett' con cultivo americano (US56112-146)

En Fin de ampliar el mercado de la pera recin cosechada, la mayora Los cultivares

europeos se almacenan a baja temperatura (-1 a 10) Incluyendo la atmsfera controlada
(CA) por perodos de 3-10 meses
Una consecuencia del almacenamiento prolongado puede ser el desarrollo de descomposicin interna y
escaldadura senescente en frutos de pera

Los sntomas de descomposicin interna (tambin conocidos como pardeamiento interno y

descomposicin del ncleo) Se produce un pardeamiento en el tejido del corazn y/o en todo el fruto. No hay
sntomas externos. Los sntomas aparecen a las 2-6 semanas de almacenaje en fro.

La principal causa del descompocion del nucleo es una excesiva concentracin de anhdrido carbnico, sobre todo
bajo condiciones de almacenamiento en atmsfera modificada y controlada. Esta situacin se agrava cuando a su
vez existe bajo nivel de oxgeno

La escaldadura senescente es un pardeamiento de la superficial .La piel de la fruta adquiere un color

marrn oscuro La pulpa se mantiene firme y aunque el ataque sea leve la fruta no alcanza la madurez de
consumo.

Este tipo de escaldadura aparece en frutas almacenadas ms all de lo que su vida til y sistema de
almacenamiento lo permite. Por Ejemplo las pera Bartlett cuando se las deja en Atmsfera Regular por un
perodo superior a los noventa das. La falta de circulacin del aire lleva a un envejecimiento prematuro,
por la concentracin de etileno en ciertas zonas.

Tanto la descomposicin interna como la escaldadura senescente coinciden con la produccin de etileno en
peras almacenadas
 ESCALDADURA SUPERFICIAL Por lo general la sintomatologa aparece luego de los tres meses
de almacenamiento refrigerado y se hace mas evidente cuando la fruta, una
vez retirada de cmara, es expuesta a condiciones ambientales. La fruta afectada desarrolla a nivel
de la piel, manchas difusas de color marrn
En pera, la primera zona afectada es el cuello.
.Causas- La fruta genera compuestos voltiles -farnesanos- los cuales experimentan una oxidacin,
ocasionando daos a nivel de la piel.
Se asocia con la acumulacin del -farneseno voltil y su posterior oxidacin.

La maduracin y senescencia de la fruta de pera se reducen eficazmente por CA, especficamente el uso de
bajo O 2 presiones parciales de 1-2,5 kPa y elevadas CO 2 presiones parciales de 0,5-5 kPa.
Desafortunadamente, AC puede promover el desglose de ncleos en peras

Una estrategia complementaria para la AC es la aplicacin previa al almacenamiento del inhibidor de la

maduracin 1-metilciclopropeno (1-MCP)

Las peras 'bartlett' tratadas con 1-MCP son menos susceptibles a la descomposicin interna y escaldan
senescente durante el almacenamiento a baja temperatura que las frutas no tratadas con 1-MCP

Estn libre de estos trastornos de senescencia cuando el tratamiento con 1-MCP se combina con AC; Un
inconveniente de estos tratamientos poscosecha es la reduccin dramtica o la inhibicin de la maduracin
mediada por etileno.

No se conocen bien los mecanismos bioqumicos asociados con el desarrollo de escaldaduras senescentes
y descomposicin interna en frutos de pera tipo 'Bartlett', y su control por 1-MCP y AC. 2015

La baja temperatura y la hipoxia causan la acumulacin de GABA(GABA o cido gamma aminobutrico)

en los frutos de manzana y pera, que coincide con trastornos fisiolgicos. Alternativamente, los niveles de
GABA se elevan rpidamente en tejidos vegetales tratados con AC y esto puede ocurrir en ausencia o antes
de la aparicin de sntomas de lesin visible

los niveles de glutatin(tripptido no protenico constituido por 3 aminocidos: glutamato, cistena y

glicina) y su balance redox tienden a fluctuar en la fruta de pera almacenada en AC y pueden contribuir a la
aparicin de trastornos fisiolgicos,

Hasta la fecha, no existe informacin sobre si los cambios en el ascorbato, el GABA y glutatin estn
vinculados al desarrollo de escaldado senescente y descomposicin interna.

Se investig el efecto de 1-MCP y AC (18 kPa o 2,5 kPa O2 en presencia de 2 kPa CO 2 ) v/s aire

refrigerado en la incidencia de escaldaduras senescentes y deterioro interno en peras de dos variedades,

Swiss Bartlett 'y' Cold Snap', en funcin del perodo de almacenamiento a 0 C

Se seleccion la presin parcial de O 2 de 18 kPa como control para el tratamiento con bajo O2 y su

correspondiente impacto en el desarrollo del trastorno y el metabolismo del estrs oxidativo.

El desarrollo temporal de los trastornos de senescencia en estos frutos de pera se compar con los cambios

en las concentraciones de GABA, AA, dehidroascorbato (DHA), GSH y disulfuro de glutatin (GSSG).

2 . materiales y mtodos

Material vegetal y tratamientos poscosecha

 Las peras "Bartlett" ( Pyrus communis L.) fueron cosechadas el 22 de agosto de un
huerto comercial.

las peras "Cold Snap" fueron cosechadas el 11 de septiembre de un huerto comercial.

Transportadas al centro de investigacin (Universidad de Guelph) dentro de las 4 h de

su cosecha.

Se distribuyeron igualmente en tres bolsas de polister separadas de 6 MIL-hermticos

separados,, y se expusieron a 300 nL L -1 1-MCP durante 24 h a la temperatura
ambiente de 23 C. La concentracin de gas 1-MCP utilizada para cada tratamiento
con bolsa de polietileno es equivalente a la velocidad de etiqueta registrada para
SmartFresh en Canad, y se calcul como se describi anteriormente ( Lum et al.,
2016a ). Una cantidad similar de cajas no expuestas a 1-MCP permaneci a 23 C
durante 24 h.

Para cada cultivar, 12 cajas que contenan peras se distribuyeron igualmente en tres bolsas de polister
separadas de 6 mil, y se expusieron a 300 nL L -1 1-MCP durante 24 h a la temperatura ambiente de 23
C. La concentracin de gas 1-MCP utilizada para cada tratamiento con bolsa de polietileno es equivalente a
la velocidad de etiqueta registrada para SmartFresh en Canad,

. Una cantidad similar de cajas no expuestas a 1-MCP permaneci a 23 C durante 24 h.

Despus de la exposicin a 1-MCP,las bolsas de polister se abrieron y se ventilaron.

Se fijaron a 4 C 4 cmaras separadas con temperatura controlada , conteniendo cada una dos cmaras AC
de laboratorio (0,5 m3 de volumen, Storage Control Systems, Sparta, MI, Estados Unidos). Cada cmara
CA contena una caja de peras 'Cold Snap' tratadas con 1-MCP (fruta 1-MCP) y una caja de fruta no-1-
MCP (fruta no-1-MCP). Adems, cada cmara CA contena una caja de fruta 'Swiss Bartlett' tratada con 1-
MCP y una caja de fruta no-1-MCP. Todas las cmaras de CA se sellaron con una tapa de plexigls y se
inund con 98 kPa N 2 hasta que el objetivo O 2 concentracin (18 kPa o 2,5 kPa O 2 ) se realiz. A
continuacin, se aadi CO { 2} hasta que se alcanz una presin parcial de 2 kPa; Esta concentracin
de CO 2 se eligi como presin parcial intermedia para el intervalo (0.5-5 kPa CO 2 ) que se utiliza
tpicamente para el almacenamiento prolongado de la fruta de la pera en otras jurisdicciones ( Kader,
2007 ). Adems, se almacen una caja de fruta de 1-MCP y una caja de fruta no-1-MCP de cada cultivar en
cada habitacin fra sin CA (aire refrigerado). Para cada cultivar y tratamiento, Frutas fueron muestreados
peridicamente durante el perodo de almacenamiento. La fruta 'Swiss Bartlett' fue muestreada a los 6, 13,
34, 55, 111 y 167 d, mientras que la fruta 'Cold Snap' fue muestreada a los 7, 21, 28, 56, 119 y 180 d. Para
cada muestreo, se seleccionaron 14 peras aleatoriamente para la evaluacin de la calidad, incluyendo
trastornos fisiolgicos (10 peras) y anlisis de metabolitos (cuatro peras) como se describe a
continuacin. Los frutos muestreados para anlisis de metabolitos se congelaron inmediatamente en N _ { 2} lquido y se almacenaron a -
80C .

2.2 . Evaluacin de la calidad de la fruta

Inmediatamente despus de la cosecha, la madurez del fruto se evalu en cada uno de los tres replicados
biolgicos (replicado represent la fruta de una de tres localizaciones distintas dentro del huerto) de 10
peras. Para cada repeticin, se transfirieron tres peras representativas a un recipiente de plstico de 9 l y se
cerraron hermticamente hermticamente durante 60 minutos. Al final del perodo de incubacin, se tom
una muestra de gas de 3 ml del espacio de cabeza del recipiente usando una jeringa estanca a los gases
insertada en un septo de caucho fijado a la tapa sellada, y se analiz la produccin de etileno usando un
Varian CP-3800 (Varian Canada Inc., Mississauga, ON) como se describi anteriormente ( DeEll y Ehsani-
Moghaddam, 2011 ). El color de la cscara se determin subjetivamente usando una escala de 1 a 4; Para la
escala de color 1 = verde, 2 = ms verde que amarillo, 3 = ms amarillo que verde y 4 = amarillo, como se
ha descrito anteriormente ( DeEll y Ehsani-Moghaddam, 2011; Villalobos-Acua et al., 2011a ). La
firmeza de la carne se determin en los lados opuestos de cada pera con un analizador de textura digital
equipado con una punta de 8 mm (GSS, Sudfrica) despus de la eliminacin de la cscara. Las
caractersticas de calidad antes mencionadas se determinaron tambin para cada replicacin de tratamiento
de almacenamiento (10 peras por repeticin) dentro de las 6 h de su eliminacin del almacenamiento. Para
todos los cultivares, los frutos no 1-MCP almacenados bajo aire refrigerado durante 167 das o ms se
encontraban gravemente deteriorados y, por lo tanto, no se evaluaron los parmetros de maduracin antes
mencionados. Y 4 = amarillo, como se ha descrito anteriormente ( DeEll y Ehsani-Moghaddam, 2011;
Villalobos-Acua et al., 2011a ). La firmeza de la carne se determin en los lados opuestos de cada pera
con un analizador de textura digital equipado con una punta de 8 mm (GSS, Sudfrica) despus de la
eliminacin de la cscara. Las caractersticas de calidad antes mencionadas se determinaron tambin para
cada replicacin de tratamiento de almacenamiento (10 peras por repeticin) dentro de las 6 h de su
eliminacin del almacenamiento. Para todos los cultivares, los frutos no 1-MCP almacenados bajo aire
refrigerado durante 167 das o ms se encontraban gravemente deteriorados y, por lo tanto, no se evaluaron
los parmetros de maduracin antes mencionados. Y 4 = amarillo, como se ha descrito anteriormente
( DeEll y Ehsani-Moghaddam, 2011; Villalobos-Acua et al., 2011a ). La firmeza de la carne se determin
en los lados opuestos de cada pera con un analizador de textura digital equipado con una punta de 8 mm
(GSS, Sudfrica) despus de la eliminacin de la cscara. Las caractersticas de calidad antes
mencionadas se determinaron tambin para cada replicacin de tratamiento de almacenamiento (10 peras
por repeticin) dentro de las 6 h de su eliminacin del almacenamiento. Para todos los cultivares, los frutos
no 1-MCP almacenados bajo aire refrigerado durante 167 das o ms se encontraban gravemente
deteriorados y, por lo tanto, no se evaluaron los parmetros de maduracin antes mencionados. La firmeza
de la carne se determin en los lados opuestos de cada pera con un analizador de textura digital equipado
con una punta de 8 mm (GSS, Sudfrica) despus de la eliminacin de la cscara. Las caractersticas de
calidad antes mencionadas se determinaron tambin para cada replicacin de tratamiento de
almacenamiento (10 peras por repeticin) dentro de las 6 h de su eliminacin del almacenamiento. Para
todos los cultivares, los frutos no 1-MCP almacenados bajo aire refrigerado durante 167 das o ms se
encontraban gravemente deteriorados y, por lo tanto, no se evaluaron los parmetros de maduracin antes
mencionados. La firmeza de la carne se determin en los lados opuestos de cada pera con un analizador de
textura digital equipado con una punta de 8 mm (GSS, Sudfrica) despus de la eliminacin de la
cscara. Las caractersticas de calidad antes mencionadas se determinaron tambin para cada replicacin de
tratamiento de almacenamiento (10 peras por repeticin) dentro de las 6 h de su eliminacin del
almacenamiento. Para todos los cultivares, los frutos no 1-MCP almacenados bajo aire refrigerado durante
167 das o ms se encontraban gravemente deteriorados y, por lo tanto, no se evaluaron los parmetros de
maduracin antes mencionados.

2.3 . Evaluacin de trastornos fisiolgicos

Las peras evaluadas para la calidad tambin fueron evaluadas para la incidencia de escalofro senescente y
descomposicin interna, que se expres como el porcentaje de fruta mostrando lesin, independientemente
de la gravedad, y promediado para las cuatro repeticiones de tratamiento.

2.4 . Extraccin y anlisis de metabolitos de estrs oxidativo

A no ser que se mencione otra cosa, los reactivos qumicos se adquirieron de Sigma-Aldrich (Oakville,
ON, Canad). Para cada cultivar, se determin la concentracin de GABA por replicacin de tratamiento
despus de la extraccin de polvos pulverizados agrupados, que representan cantidades iguales de cuatro
sub-muestras de peras, como se describi anteriormente ( Lum y col., 2016a ). En pocas palabras, se
molieron 1 g del polvo congelado fino reunido en 4 ml de cido sulfosaliclico (30 mg ml -1 ) utilizando un
mortero enfriado y una maja y arena fina de slice. Se centrifug una alcuota (1,0 ml) del homogeneizado
y se neutraliz el sobrenadante con NaOH 4 N. El extracto se hizo pasar a travs de un filtro de jeringa
de 0,45 m, Seguido de derivatizacin en lnea de o -ftalaldehdo y cromatografa lquida de alta resolucin
en fase inversa. Se determinaron las concentraciones de ascorbato de fruta entera y glutatin para cada
replicacin de tratamiento despus de la extraccin con cido clorhdrico de polvo de fruta pulverizada
agrupada (100 mg en total) que representan 25 mg cada una de cuatro submuestras de fruta esencialmente
segn lo descrito por Lum et al. (2016a) . Los extractos neutralizados se utilizaron para estimar frutos AA,
DHA, GSH y GSSG con ensayos de microplacas acopladas a enzimas en un espectrofotmetro SpectraMax
Plus 384 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, EE.UU.) de acuerdo con protocolos previamente publicados
( Lum et al., 2016a; Queval y Noctor, 2007 ). Todos los extractos neutralizados se ensayaron por
duplicado. Se determinaron las concentraciones de ascorbato de fruta entera y glutatin para cada
replicacin de tratamiento despus de la extraccin con cido clorhdrico de polvo de fruta pulverizada
agrupada (100 mg en total) que representan 25 mg cada una de cuatro submuestras de fruta esencialmente
segn lo descrito por Lum et al. (2016a) . Los extractos neutralizados se utilizaron para estimar frutos AA,
DHA, GSH y GSSG con ensayos de microplacas acopladas a enzimas en un espectrofotmetro SpectraMax
Plus 384 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, EE.UU.) de acuerdo con protocolos previamente publicados
( Lum et al., 2016a; Queval y Noctor, 2007 ). Todos los extractos neutralizados se ensayaron por
duplicado. Se determinaron las concentraciones de ascorbato de fruta entera y glutatin para cada
replicacin de tratamiento despus de la extraccin con cido clorhdrico de polvo de fruta pulverizada
agrupada (100 mg en total) que representan 25 mg cada una de cuatro submuestras de fruta esencialmente
segn lo descrito por Lum et al. (2016a) . Los extractos neutralizados se utilizaron para estimar frutos AA,
DHA, GSH y GSSG con ensayos de microplacas acopladas a enzimas en un espectrofotmetro SpectraMax
Plus 384 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, EE.UU.) de acuerdo con protocolos previamente publicados
( Lum et al., 2016a; Queval y Noctor, 2007 ). Todos los extractos neutralizados se ensayaron por
duplicado. Los extractos neutralizados se utilizaron para estimar frutos AA, DHA, GSH y GSSG con
ensayos de microplacas acopladas a enzimas en un espectrofotmetro SpectraMax Plus 384 (Molecular
Devices, Sunnyvale, CA, EE.UU.) de acuerdo con protocolos previamente publicados ( Lum et al., 2016a;
Queval y Noctor, 2007 ). Todos los extractos neutralizados se ensayaron por duplicado. Los extractos
neutralizados se utilizaron para estimar frutos AA, DHA, GSH y GSSG con ensayos de microplacas
acopladas a enzimas en un espectrofotmetro SpectraMax Plus 384 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA,
EE.UU.) de acuerdo con protocolos previamente publicados ( Lum et al., 2016a; Queval y Noctor,
2007 ). Todos los extractos neutralizados se ensayaron por duplicado.

2.5 . Anlisis estadstico

2.5.1 . Anlisis de varianza (ANOVA) entre el tratamiento y los efectos del tratamiento
Para la calidad de la fruta y los datos de metabolitos, los anlisis estadsticos se realizaron utilizando SAS
9.3 (SAS Institute Inc., Cary, NC) al nivel = 0.05. Los efectos de habitacin duplicados se analizaron
usando ANOVAs (mtodo proc mix) para dividir la varianza en los efectos fijos (1-MCP, CA rgimen y
tiempo de almacenamiento) y sus interacciones, y el efecto aleatorio de las cmaras. En los casos en que las
interacciones fueron significativas (P 0,05), se compararon los medios de tratamiento dentro de cada
tiempo de muestreo (opcin de rebanada) durante el perodo de almacenamiento usando la prueba de
diferencia menos significativa protegida (LSD) de Fisher. Para los experimentos donde las interacciones
fueron significativas (P 0,05),

3 . Resultados
3.1 . Impacto de 1-MCP, CA y bajo O 2 en trastornos fisiolgicos durante el almacenamiento poscosecha
Se compar la incidencia de trastornos fisiolgicos en los frutos de ambos cultivares tratados con o sin 1-
MCP y luego almacenados a 0 C bajo aire refrigerado o CA (18 kPa O 2 , 2 kPa CO 2 , 2,5 kPa O 2 ,
2 kPa de CO $ $ ). La escaldadura de los senescentes estaba ausente o marginal ( 21%) durante los
primeros 111 a 119 d de la mayora de los tratamientos ( Figura 1 ). Posteriormente, se observ una
incidencia de aproximadamente 60-100% en frutos no 1-MCP de ambos cultivares refrigerados bajo aire
refrigerado y 18 kPa O 2 ; 'Swiss Bartlett' mostr la menor incidencia de esta lesin a 18 kPa O 2 . Con
2,5 kPa de O $ $ , La incidencia fue marginal, independientemente del cultivar. En general, la escaldadura
senescente se minimiz por 1-MCP bajo aire refrigerado y en mayor medida por CA, observndose los
niveles ms bajos a 2,5 kPa O 2 . Cabe mencionar que no se observaron sntomas de escaldadura superficial
en peras de cualquiera de los cultivares almacenados bajo ningn tratamiento.
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Fig. 1 . Efecto de 1-MCP y CA en el desarrollo de escaldado senescente en frutos de pescado "Cold Snap"
y "Swiss Bartlett" almacenados. Los frutos se trataron con o sin 1-MCP el da de la cosecha y se
almacenaron a 0 C bajo aire refrigerado o CA de 18 o 2,5 kPa de O 2 y 2 kPa de CO 2 . No 1-MCP
(cuadrados negros cerrados); 1-MCP (cuadrados grises abiertos). Los datos representan la incidencia media
de cuatro replicas de almacenamiento de 10 frutos cada una. Las letras compartidas en cada punto de
tiempo o dentro de un tratamiento no indican diferencia significativa en el nivel de P 0.05. Las letras
maysculas representan diferencias significativas sobre el tiempo de almacenamiento (dentro de cada
tratamiento), Mientras que las letras pequeas representan diferencias significativas entre las condiciones
de almacenamiento (una comparacin entre los seis tratamientos) en cada momento. Dentro de cada
parcela, las letras negras y grises corresponden al datum proximal no 1-MCP o 1-MCP, respectivamente.
Una alta incidencia de descomposicin interna fue ms evidente en las peras no-1-MCP 'Cold Snap'
durante el almacenamiento prolongado, independientemente de si se utiliz CA; Los niveles de trastorno se
redujeron en un 39 a 89% con 1-MCP, y el control ms eficaz fue con 2,5 kPa O 2 ( Fig. 2 ]. De forma
similar, el 1-MCP y el CA limitaron dramticamente el desarrollo de los sntomas de descomposicin
interna en peras "Bartlett suizas" en comparacin con peras no 1-MCP mantenidas bajo aire
refrigerado; Los niveles de trastorno se redujeron en un 52 a un 72% con CA y casi se eliminaron con 1-
MCP, independientemente del rgimen de CA utilizado.
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Fig. 2 . Efecto de la 1-MCP y la CA en el desarrollo de la descomposicin interna en la fruta almacenada

'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett'. Los frutos se trataron con o sin 1-MCP el da de la cosecha y se almacenaron
a 0 C bajo aire refrigerado o CA de 18 o 2,5 kPa de O 2 y 2 kPa de CO 2 . No 1-MCP (cuadrados negros
cerrados); 1-MCP (cuadrados grises abiertos). Los datos representan la incidencia media de cuatro replicas
de almacenamiento de 10 frutos cada una. Las letras compartidas en cada punto de tiempo o dentro de un
tratamiento no indican diferencia significativa en el nivel de P 0.05. Las letras maysculas representan
diferencias significativas sobre el tiempo de almacenamiento (dentro de cada tratamiento), Mientras que las
letras pequeas representan diferencias significativas entre las condiciones de almacenamiento (una
comparacin entre los seis tratamientos) en cada momento. Dentro de cada parcela, las letras negras y
grises corresponden al datum proximal no 1-MCP o 1-MCP, respectivamente.

3.2 . Impacto de 1-MCP y CA en la capacidad de maduracin

Frutos almacenados muestreados para trastornos fisiolgicos tambin se analizaron para los cambios en los
ndices fisiolgicos relacionados con la maduracin. Vale la pena mencionar que los ndices de maduracin
no se midieron en frutos no-1-MCP 'Swiss Bartlett' y 'Cold Snap' muestreados despus de 167 y 180 d de
almacenamiento de aire refrigerado, respectivamente. Esto se debi a la alta incidencia de trastornos
relacionados con la senescencia en estos frutos (vanse las Figuras 1 y 2 ). En general, las tasas de
produccin de etileno a partir de frutos recin cosechados fueron insignificantes y no se vieron afectadas en
las frutas "Swiss Bartlett" y "Cold Snap" almacenadas hasta 13 y 28 d, respectivamente ( Figura 3 ). A
partir de entonces, las tasas de produccin de etileno aumentaron en frutos no 1-MCP mantenidos bajo aire
refrigerado, con tasas mximas detectadas entre 55 y 56 d; en la mayor parte, Los aumentos no fueron tan
dramticos para la fruta almacenada en CA y se retrasaron entre 8 y 16 semanas. En general, las tasas de
produccin de etileno en frutos no-1-MCP de 'Swiss Bartlett' fueron dos o tres veces mayores que con
'Cold Snap'. Para ambos cultivares, 1-MCP retras e inhibi la capacidad de la fruta para producir
etileno; Este efecto fue ms dramtico en la fruta almacenada en CA "Swiss Bartlett".
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Fig. 3 . Efecto de la 1-MCP y la CA en los parmetros de calidad de la fruta en frutillas 'Cold Snap' y
'Swiss Bartlett'. Los frutos se trataron con o sin 1-MCP el da de la cosecha y se almacenaron a 0 C bajo
aire refrigerado o CA de 18 o 2,5 kPa de O 2 y 2 kPa de CO 2 . No 1-MCP (cuadrados negros cerrados); 1-
MCP (cuadrados grises abiertos). Las tasas de produccin de etileno, los niveles de firmeza y el color de la
piel de la superficie se evaluaron en la cosecha y en la eliminacin de la fruta del almacenamiento y la
transferencia a 22 C durante un mximo de 6 h. El color de la cscara se midi subjetivamente en la
siguiente escala: 1 = verde, 2 = ms verde que amarillo, 3 = ms amarillo que verde, 4 = amarillo. Para
cada parmetro de calidad, los datos representan la media de cuatro repeticiones de almacenamiento de 10
frutos cada uno. Las letras compartidas en cada punto de tiempo o dentro de un tratamiento no indican
diferencia significativa en el nivel de P 0.05. Las letras maysculas representan diferencias significativas
sobre el tiempo de almacenamiento (dentro de cada tratamiento), mientras que las letras pequeas
representan diferencias significativas entre las condiciones de almacenamiento (una comparacin entre los
seis tratamientos) en cada momento. Dentro de cada parcela, las letras negras y grises corresponden al
datum proximal no 1-MCP o 1-MCP, respectivamente. Las letras maysculas representan diferencias
significativas sobre el tiempo de almacenamiento (dentro de cada tratamiento), mientras que las letras
pequeas representan diferencias significativas entre las condiciones de almacenamiento (una comparacin
entre los seis tratamientos) en cada momento. Dentro de cada parcela, las letras negras y grises
corresponden al datum proximal no 1-MCP o 1-MCP, respectivamente. Las letras maysculas representan
diferencias significativas sobre el tiempo de almacenamiento (dentro de cada tratamiento), mientras que las
letras pequeas representan diferencias significativas entre las condiciones de almacenamiento (una
comparacin entre los seis tratamientos) en cada momento. Dentro de cada parcela, las letras negras y
grises corresponden al datum proximal no 1-MCP o 1-MCP, respectivamente.
Aunque fruta 'Cold Snap' se cosecharon a una firmeza ligeramente inferior 'Swiss Bartlett' (representante
de sus respectivos vencimientos cosecha comercial), firmeza cambi muy poco (prdida 15%) con el
almacenamiento ( Fig. 3 ). Adems, la tasa de ablandamiento fue similar en todos los tratamientos con 1-
MCP, independientemente del rgimen de AC. Por el contrario, la tasa de ablandamiento fue mayor en la
fruta no-1-MCP del cultivar "Swiss Bartlett" en relacin con las prdidas mnimas ( 10%) observadas en
todos los frutos de 1-MCP. El color de la superficie de la piel de la fruta 'Cold Snap' fue en su mayora
amarillo despus de 119 d de almacenamiento de aire refrigerado, independientemente del tratamiento con
1-MCP. Este fenmeno se retras cuando la fruta 1-MCP se mantuvo bajo CA, con el menos
amarillamiento aparente despus de 180 d a 2,5 kPa O 2 ( Fig. 3 ). A diferencia de, Hubo un efecto
dramtico de 1-MCP y CA en el amarillamiento de la cscara en la fruta "Swiss Bartlett"; Especficamente,
este cambio de color fue retrasado por 8 semanas en 1-MCP fruta almacenada bajo aire refrigerado, y por
16 semanas bajo CA. La coloracin por pelado de la fruta 1-MCP de 'Swiss Bartlett' almacenada en 2,5 kPa
O 2 cambi muy poco con la duracin del almacenamiento.

3.3 . Impacto de 1-MCP, CA y bajo O 2 en las concentraciones de GABA

Los cambios en la concentracin de GABA de fruta entera en funcin del perodo de almacenamiento
variaron con el cultivar, 1-MCP y la atmsfera de almacenamiento ( Fig. 4 ). La concentracin de GABA
en la fruta 'Swiss Bartlett' en la cosecha fue 2,8 veces mayor que la de la fruta 'Cold Snap', y en ambos
casos no hubo cambio despus del tratamiento de 1-MCP pre-almacenamiento. Adems, las
concentraciones de GABA en la fruta 'Cold Snap' se incrementaron 2,5 a 4 veces en 1 semana desde la
transferencia a 0 C, mientras que las concentraciones en la fruta 'Swiss Bartlett' disminuyeron 22-
61%. Posteriormente, las concentraciones de GABA se mantuvieron estables durante las siguientes 16
semanas en todos los frutos "Cold Snap" almacenados bajo aire refrigerado y en el rgimen de 18 kPa de
O 2 CA, mientras que las fluctuaciones fueron evidentes con 2,5 kPa de O 2 . Por 180 d, Las
concentraciones de GABA aumentaron entre 1,4 y 2,8 veces en todos los frutos "Cold Snap" almacenados
bajo aire refrigerado o en frutos no 1-MCP almacenados a 2,5 kPa O 2 ; Muy poco cambio fue evidente
para todos los tratamientos restantes. Por el contrario, 1-MCP aument las concentraciones de GABA en la
fruta 'Swiss Bartlett' en un 36-190% despus de 34 d, en comparacin con la fruta no-1-MCP; Las
concentraciones en 1-MCP fruta se mantuvo sin cambios durante las siguientes 11 semanas, pero
disminuy a partir de entonces. Despus de 167 d, la fruta no-1-MCP de 'Swiss Bartlett' mantenida bajo
aire refrigerado mostr un aumento de 15 veces en la concentracin de GABA. No se observaron aumentos
de este tipo para ningn otro tratamiento. Muy poco cambio fue evidente para todos los tratamientos
restantes. Por el contrario, 1-MCP aument las concentraciones de GABA en la fruta 'Swiss Bartlett' en un
36-190% despus de 34 d, en comparacin con la fruta no-1-MCP; Las concentraciones en 1-MCP fruta se
mantuvo sin cambios durante las siguientes 11 semanas, pero disminuy a partir de entonces. Despus de
167 d, la fruta no-1-MCP de 'Swiss Bartlett' mantenida bajo aire refrigerado mostr un aumento de 15
veces en la concentracin de GABA. No se observaron aumentos de este tipo para ningn otro
tratamiento. Muy poco cambio fue evidente para todos los tratamientos restantes. Por el contrario, 1-MCP
aument las concentraciones de GABA en la fruta 'Swiss Bartlett' en un 36-190% despus de 34 d, en
comparacin con la fruta no-1-MCP; Las concentraciones en 1-MCP fruta se mantuvo sin cambios durante
las siguientes 11 semanas, pero disminuy a partir de entonces. Despus de 167 d, la fruta no-1-MCP de
'Swiss Bartlett' mantenida bajo aire refrigerado mostr un aumento de 15 veces en la concentracin de
GABA. No se observaron aumentos de este tipo para ningn otro tratamiento. La fruta no-1-MCP de 'Swiss
Bartlett' mantenida bajo aire refrigerado mostr un aumento de 15 veces en la concentracin de GABA. No
se observaron aumentos de este tipo para ningn otro tratamiento. La fruta no-1-MCP de 'Swiss Bartlett'
mantenida bajo aire refrigerado mostr un aumento de 15 veces en la concentracin de GABA. No se
observaron aumentos de este tipo para ningn otro tratamiento.
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Fig. 4 . Efecto de 1-MCP y CA en la concentracin de GABA en la fruta almacenada 'Cold Snap' y 'Swiss
Bartlett'. Los frutos se trataron con o sin 1-MCP el da de la cosecha y se almacenaron a 0 C bajo aire
refrigerado o CA de 18 o 2,5 kPa de O 2 y 2 kPa de CO 2 . No 1-MCP (cuadrados negros cerrados); 1-MCP
(cuadrados grises abiertos). Los datos representan la concentracin media de GABA (en mol kg -1 ) de
cuatro repeticiones de almacenamiento de cuatro frutos cada una. El datum inicial en 0 menos 24 hy 0
representa el fruto en la cosecha y despus del tratamiento con 1-MCP, respectivamente. Las letras
compartidas en cada punto de tiempo o dentro de un tratamiento no indican diferencia significativa en el
nivel de P 0.05. Las letras maysculas representan diferencias significativas sobre el tiempo de
almacenamiento (dentro de cada tratamiento), mientras que las letras pequeas representan diferencias
significativas entre las condiciones de almacenamiento (una comparacin entre los seis tratamientos) en
cada momento. Dentro de cada parcela, las letras negras y grises corresponden al datum proximal no 1-
MCP o 1-MCP, respectivamente.

3.4 . Impacto de 1-MCP, CA y bajo O 2 sobre el metabolismo antioxidante

Ascorbato y glutatin fueron detectados como formas reducidas y oxidadas ( Figuras 5 y 6 , Figuras
Suplementarias S1 y S2). Para ambos cultivares, la composicin del ascorbato total en la recoleccin fue
predominantemente AA y disminuy gradualmente con la duracin del almacenamiento. En fruta 'Cold
Snap', los niveles totales de ascorbato se redujo en 64-76% despus de 28 d de almacenamiento, con el ms
pequeo cambio observado en 1-MCP fruta en 2,5 kPa O 2 ( Fig. 5 ). Una prdida adicional del 60% fue
evidente al final del perodo de almacenamiento; Los niveles finales de ascorbato fueron similares en todos
los tratamientos. Estas prdidas coincidieron con cambios comparables en las concentraciones de AA en
funcin del perodo de almacenamiento (Fig. S1 suplementaria). A diferencia de, La concentracin de
DHA y la relacin AA / DHA para todos los tratamientos fluctu dentro de los primeros 56 das ( Fig.
5 ). Slo la fruta de 1-MCP mantenida bajo aire refrigerado mostr un segundo pico transitorio en esta
proporcin a 119 d. En comparacin, 1-MCP 'Cold Snap' fruta mostr fluctuaciones menores en AA / DHA
a 2,5 kPa O 2 en relacin con todos los otros tratamientos.
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Fig. 5 . Efecto de 1-MCP y CA en las concentraciones de ascorbato total y la proporcin de AA / DHA en

la fruta almacenada 'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett'. Los frutos se trataron con o sin 1-MCP el da de la
cosecha y se almacenaron a 0 C bajo aire refrigerado o CA con 18 o 2,5 kPa O 2 y 2 kPa CO 2 . No 1-
MCP (cuadrados negros cerrados); 1-MCP (cuadrados grises abiertos). Los datos representan la
concentracin media de ascorbato (en mol kg -1 ) o la proporcin de cuatro repeticiones de
almacenamiento de cuatro frutos cada uno. El datum inicial en 0 menos 24 hy 0 representa el fruto en la
cosecha y despus del tratamiento con 1-MCP, respectivamente. Las letras compartidas en cada punto de
tiempo o dentro de un tratamiento no indican diferencia significativa en el P 0. 05. Las letras maysculas
representan diferencias significativas sobre el tiempo de almacenamiento (dentro de cada tratamiento),
mientras que las letras pequeas representan diferencias significativas entre las condiciones de
almacenamiento (una comparacin entre los seis tratamientos) en cada momento. Dentro de cada parcela,
las letras negras y grises corresponden al datum proximal no 1-MCP o 1-MCP, respectivamente.
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Fig. 6 . Efecto de 1-MCP y CA en las concentraciones de glutatin total y relacin de GSH / GSSG
almacenados en 'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett' pera. Los frutos se trataron con o sin 1-MCP el da de la
cosecha y se almacenaron a 0 C bajo aire refrigerado o CA con 18 o 2,5 kPa O 2 y 2 kPa CO 2 . No 1-
MCP (cuadrados negros cerrados); 1-MCP (cuadrados grises abiertos). Los datos representan la
concentracin media de glutatin (en mol kg -1 ) o la relacin de cuatro repeticiones de almacenamiento
de cuatro frutos cada uno. El datum inicial en 0 menos 24 hy 0 representa el fruto en la cosecha y despus
del tratamiento con 1-MCP, respectivamente. Las letras compartidas en cada punto de tiempo o dentro de
un tratamiento no indican diferencia significativa en el nivel de P 0.05. Las letras maysculas representan
diferencias significativas sobre el tiempo de almacenamiento (dentro de cada tratamiento), mientras que las
letras pequeas representan diferencias significativas entre las condiciones de almacenamiento (una
comparacin entre los seis tratamientos) en cada momento. Dentro de cada parcela, las letras negras y
grises corresponden al datum proximal no-1-MCP o1-MCP, respectivamente.
La fruta 'Swiss Bartlett' mostr una rpida disminucin del ascorbato total y la forma predominante, AA,
durante los primeros 34 das, independientemente del tratamiento ( Fig. 5 ). Curiosamente, estas
concentraciones se mantuvieron ms all de 34 d en todos los frutos de 1-MCP en relacin con la fruta no-
1-MCP. Las fluctuaciones en la concentracin de DHA y el estado redox AA / DHA fueron evidentes en
todos los tratamientos a lo largo del perodo de almacenamiento ( Fig. 5 , Fig. S1 suplementaria). Con
almacenamiento prolongado, los niveles de DHA tendieron a ser ms altos con 1-MCP que sin 1-
MCP. Curiosamente, la relacin AA / DHA se recuper a los niveles de pre-almacenamiento a 167 d en 1-
MCP fruta mantenida bajo aire refrigerado y toda la fruta mantenida a 2,5 kPa O 2 .

Para ambos cultivares, las fluctuaciones en los niveles de glutatin de frutas y GSH / GSSG fueron
evidentes con el perodo de almacenamiento. Con todos los tratamientos, las concentraciones totales de
glutatin disminuyeron en la fruta 'Cold Snap' durante los 7 d iniciales de almacenamiento, aunque
posteriormente se observaron picos menores ( Fig. 6 ). Todos los frutos almacenados bajo aire refrigerado
mostraron la mayor cada en los niveles totales de glutatin despus de 180 d de almacenamiento. En
comparacin, se observaron disminuciones ligeramente inferiores en la concentracin total de glutatin
para todos los frutos sometidos a CA. Se encontraron cambios simultneos y similares en las
concentraciones de GSH en todos los tratamientos en funcin del perodo de almacenamiento (Fig. S2
suplementaria). Por el contrario, un rpido y 100% de aumento en los niveles de GSSG se produjo por 7 d
de almacenamiento, Pero fluctan a partir de entonces sin importar el 1-MCP y el rgimen de
almacenamiento (Fig. S2 suplementario). Al final del experimento, la fruta de 1-MCP mantenida bajo CA
contena las concentraciones ms altas de GSSG. Para todos los tratamientos, una disminucin rpida y
transitoria (es decir, 80%) en GSH / GSSG ocurri tras la transferencia a baja temperatura ( Fig. 6 ). Una
recuperacin temporal de esta relacin fue evidente despus de 28 d en los frutos almacenados bajo aire
refrigerado y en frutos no 1-MCP a 2,5 kPa O 2 ; Las relaciones ms pequeas eran evidentes para los
tratamientos restantes. Despus de 180 das de almacenamiento, la relacin final de GSH / GSSG estaba en
el intervalo de 0,21 a 1,86, con este ltimo aparente de 1-MCP fruta almacenada bajo 18 kPa O 2 ; En
conjunto esta relacin fue notablemente inferior a los niveles anteriores al almacenamiento. Al final del
experimento, la fruta de 1-MCP mantenida bajo CA contena las concentraciones ms altas de GSSG. Para
todos los tratamientos, una disminucin rpida y transitoria (es decir, 80%) en GSH / GSSG ocurri tras la
transferencia a baja temperatura ( Fig. 6 ). Una recuperacin temporal de esta relacin fue evidente despus
de 28 d en los frutos almacenados bajo aire refrigerado y en frutos no 1-MCP a 2,5 kPa O 2 ; Las relaciones
ms pequeas eran evidentes para los tratamientos restantes. Despus de 180 das de almacenamiento, la
relacin final de GSH / GSSG estaba en el intervalo de 0,21 a 1,86, con este ltimo aparente de 1-MCP
fruta almacenada bajo 18 kPa O 2 ; En conjunto esta relacin fue notablemente inferior a los niveles
anteriores al almacenamiento. Al final del experimento, la fruta de 1-MCP mantenida bajo CA contena las
concentraciones ms altas de GSSG. Para todos los tratamientos, una disminucin rpida y transitoria (es
decir, 80%) en GSH / GSSG ocurri tras la transferencia a baja temperatura ( Fig. 6 ). Una recuperacin
temporal de esta relacin fue evidente despus de 28 d en los frutos almacenados bajo aire refrigerado y en
frutos no 1-MCP a 2,5 kPa O 2 ; Las relaciones ms pequeas eran evidentes para los tratamientos
restantes. Despus de 180 das de almacenamiento, la relacin final de GSH / GSSG estaba en el intervalo
de 0,21 a 1,86, con este ltimo aparente de 1-MCP fruta almacenada bajo 18 kPa O 2 ; En conjunto esta
relacin fue notablemente inferior a los niveles anteriores al almacenamiento. Una disminucin rpida y
transitoria (es decir, 80%) en GSH / GSSG ocurri tras la transferencia a baja temperatura ( Fig. 6 ). Una
recuperacin temporal de esta relacin fue evidente despus de 28 d en los frutos almacenados bajo aire
refrigerado y en frutos no 1-MCP a 2,5 kPa O 2 ; Las relaciones ms pequeas eran evidentes para los
tratamientos restantes. Despus de 180 das de almacenamiento, la relacin final de GSH / GSSG estaba en
el intervalo de 0,21 a 1,86, con este ltimo aparente de 1-MCP fruta almacenada bajo 18 kPa O 2 ; En
conjunto esta relacin fue notablemente inferior a los niveles anteriores al almacenamiento. Una
disminucin rpida y transitoria (es decir, 80%) en GSH / GSSG ocurri tras la transferencia a baja
temperatura ( Fig. 6 ). Una recuperacin temporal de esta relacin fue evidente despus de 28 d en los
frutos almacenados bajo aire refrigerado y en frutos no 1-MCP a 2,5 kPa O 2 ; Las relaciones ms pequeas
eran evidentes para los tratamientos restantes. Despus de 180 das de almacenamiento, la relacin final de
GSH / GSSG estaba en el intervalo de 0,21 a 1,86, con este ltimo aparente de 1-MCP fruta almacenada
bajo 18 kPa O 2 ; En conjunto esta relacin fue notablemente inferior a los niveles anteriores al
almacenamiento. 5 kPa de O $ $ ; Las relaciones ms pequeas eran evidentes para los tratamientos
restantes. Despus de 180 das de almacenamiento, la relacin final de GSH / GSSG estaba en el intervalo
de 0,21 a 1,86, con este ltimo aparente de 1-MCP fruta almacenada bajo 18 kPa O 2 ; En conjunto esta
relacin fue notablemente inferior a los niveles anteriores al almacenamiento. 5 kPa de O $ $ ; Las
relaciones ms pequeas eran evidentes para los tratamientos restantes. Despus de 180 das de
almacenamiento, la relacin final de GSH / GSSG estaba en el intervalo de 0,21 a 1,86, con este ltimo
aparente de 1-MCP fruta almacenada bajo 18 kPa O 2 ; En conjunto esta relacin fue notablemente inferior
a los niveles anteriores al almacenamiento.

El fruto de 'Swiss Bartlett' expuesto a CA mostr una disminucin del 28% en los niveles totales de
glutatin durante los primeros 6 d de almacenamiento, independientemente del tratamiento con 1-MCP
( Figura 6 ). Esta disminucin se retras una semana en toda la fruta mantenida bajo aire
refrigerado. Posteriormente, los aumentos transitorios en glutatin total fueron evidentes en 1-MCP fruta
almacenada a 18 kPa O 2 y todos los frutos mantenidos bajo aire refrigerado. Los cambios marginales
fueron evidentes con respecto a los niveles previos al almacenamiento para el fruto de 1-MCP almacenado
bajo 2,5 kPa de O 2. Curiosamente, a 167 d los niveles totales de glutatin en 1-MCP fruta aproximado pre-
almacenamiento concentraciones, independientemente de las condiciones atmosfricas; En contraste, las
concentraciones totales de glutatin en frutos no 1-MCP fueron del 20 al 33% de los detectados en la
cosecha. Cambios similares fueron evidentes para la concentracin de GSH en funcin del perodo de
almacenamiento (Fig. S2 suplementaria). Por el contrario, los niveles de GSSG se enriquecieron entre 1 y 2
veces dentro de los 13 das de almacenamiento y disminuyeron despus. Una disminucin del 76% en la
relacin GSH / GSSG fue aparente despus de slo 13 d de almacenamiento, independientemente de los
regmenes de CA, y las fluctuaciones en esta relacin fueron evidentes a partir de entonces ( Figura 6 ). En
general, las concentraciones de las relaciones GSSG y GSH / GSSG tendieron a ser mayores en la fruta 1-
MCP que en la fruta no-1-MCP. Despus de 167 d de almacenamiento, la proporcin final GSH / GSSG en
1-MCP fruta a 18 kPa O 2 coincide con la proporcin de pre-almacenamiento. En este momento, se
encontraron relaciones algo ms bajas en la fruta 1-MCP bajo los regmenes de almacenamiento
restantes.

4 . Discusin
4.1 . 1-MCP y CA inhibieron el desarrollo de escaldaduras senescentes y descomposicin interna
En este estudio, la descomposicin interna y la escaldadura senescente estuvieron ausentes durante los
primeros 111 a 119 das de almacenamiento en los frutos de "Swiss Bartlett" y "Cold Snap",
respectivamente ( Figuras 1 y 2 ). Las lesiones fisiolgicas se desarrollaron a partir de entonces en ambos
cultivares, y stos fueron ms evidentes bajo almacenamiento de aire refrigerado cuando no se aplic 1-
MCP antes del almacenamiento. Estos trastornos se saben que se producen en peras de otros cultivares
durante el almacenamiento prolongado (es decir, ms all de tres meses) ( Franck et al., 2007; Kupferman,
2003 ). En la ltima dcada, varios estudios de peras europeas han indicado que CA controla eficazmente
estos trastornos, extendiendo as su vida til ( Drake y Chen, 2000, Drake y Elfving, 2004, Lum et al.,
2016b ). Alternativamente, 1-MCP minimiza estos trastornos en la fruta 'Bartlett' ( DeEll y Ehsani-
Moghaddam, 2011; Ekman et al., 2004; Villalobos-Acua et al., 2011a; Wang y Sugar, 2015 ). En nuestro
estudio, las incidencias de escaldadura senescente y descomposicin interna se correlacionaron con la
presin parcial de O 2 en la atmsfera de almacenamiento (es decir, trastornos en aire refrigerado> 18 kPa
O 2 > 2.5 kPa O 2 , Figuras 1 y 2 ); Adems, una mayor inhibicin fue evidente con una combinacin de
CA y 1-MCP. El tratamiento ms eficaz para el control de escaldado senescente y descomposicin interna
en 'Cold Snap' y fruta 'Swiss Bartlett' era 2,5 kPa O 2 /2 kPa CO 2 .

4.2 . El control de la maduracin mediada por el etileno fue ms dramtico en frutas de 'Swiss Bartlett' que
'Cold Snap'
1-MCP frutas de ambos cultivares mostraron tasas ms bajas de produccin de etileno despus de su
eliminacin del almacenamiento de los frutos de control ( Fig. 3 ]. Adems, CA actu sinrgicamente con
1-MCP para reducir an ms la produccin de etileno en frascos 'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett' al retirarlos
del almacenamiento. Esto no es sin precedente como 'Delicious', 'Empire' y manzanas 'Ley de Roma
expuestos a 1-MCP y se sometieron a CA de almacenamiento (0 C, 2,5 kPa O 2 , 2,5 kPa CO 2 ) para
hasta 32 semanas producen Mucho menos etileno que el fruto que no es 1-MCP ( DeEll et al., 2007,
Watkins et al., 2000 ). El control de los trastornos fisiolgicos relacionados con el almacenamiento por el
1-MCP en el fruto de "Bartlett" tiende a coincidir con la emisin retardada y / o baja de etileno y la
reduccin del ablandamiento de la fruta ( Deell y Ehman-Moghaddam, Acua et al., 2011a, 2011b ). En
nuestro estudio, las tasas mximas de produccin de etileno en frutas no-1-MCP almacenadas bajo aire
refrigerado tendieron a ocurrir varias semanas antes de los trastornos en ambos cultivares. En contraste,
tasas similares de produccin de etileno ocurrieron en frutos no-1-MCP de 'Swiss Bartlett' almacenados a
2,5 kPa O 2 , pero estos frutos carecan de trastornos. Por lo tanto, no hay pruebas concluyentes de que la
capacidad para producir etileno predispone a estos frutos a trastornos relacionados con el
almacenamiento. Ekman et al., 2004; Villalobos-Acua et al., 2011a, 2011b ). En nuestro estudio, las tasas
mximas de produccin de etileno en frutas no-1-MCP almacenadas bajo aire refrigerado tendieron a
ocurrir varias semanas antes de los trastornos en ambos cultivares. En contraste, tasas similares de
produccin de etileno ocurrieron en frutos no-1-MCP de 'Swiss Bartlett' almacenados a 2,5 kPa O 2 , pero
estos frutos carecan de trastornos. Por lo tanto, no hay pruebas concluyentes de que la capacidad para
producir etileno predispone a estos frutos a trastornos relacionados con el almacenamiento. Ekman et al.,
2004; Villalobos-Acua et al., 2011a, 2011b ). En nuestro estudio, las tasas mximas de produccin de
etileno en frutas no-1-MCP almacenadas bajo aire refrigerado tendieron a ocurrir varias semanas antes de
los trastornos en ambos cultivares. En contraste, tasas similares de produccin de etileno ocurrieron en
frutos no-1-MCP de 'Swiss Bartlett' almacenados a 2,5 kPa O 2 , pero estos frutos carecan de
trastornos. Por lo tanto, no hay pruebas concluyentes de que la capacidad para producir etileno predispone
a estos frutos a trastornos relacionados con el almacenamiento. Tasas similares de produccin de etileno
ocurrieron en frutos no-1-MCP de 'Swiss Bartlett' almacenados a 2,5 kPa O 2 , pero estos frutos estaban
desprovistos de trastornos. Por lo tanto, no hay pruebas concluyentes de que la capacidad para producir
etileno predispone a estos frutos a trastornos relacionados con el almacenamiento. Tasas similares de
produccin de etileno ocurrieron en frutos no-1-MCP de 'Swiss Bartlett' almacenados a 2,5 kPa O 2 , pero
estos frutos estaban desprovistos de trastornos. Por lo tanto, no hay pruebas concluyentes de que la
capacidad para producir etileno predispone a estos frutos a trastornos relacionados con el
almacenamiento.

La transicin del color de la cscara del verde al amarillo en las peras europeas se produce con la
maduracin, incluso en respuesta a un enfriamiento de corto plazo (es decir, cuatro meses), DeEll y
Ehsani-Moghaddam, 2011; Villalobos-Acua y Mitcham, 2008 ). En nuestro estudio, el amarilleamiento de
la cscara fue evidente durante el almacenamiento a baja temperatura, aunque hubo diferencias especficas
de los cultivares con respecto al efecto de CA y 1-MCP ( Figura 3 ). A diferencia de la fruta 'Swiss
Bartlett', hubo muy poca inhibicin del amarilleamiento de la piel en la fruta 'Cold Snap' por 1-MCP y CA,
lo que podra estar asociado con sus tasas relativamente ms bajas de produccin de etileno. El control del
amarilleamiento de la piel por 1-MCP en la fruta 'Swiss Bartlett' es consistente con su efecto beneficioso en
la fruta 'Bartlett' almacenada a baja temperatura ( DeEll y Ehsani-Moghaddam, 2011; Ekman et al.,
2004; Villalobos-Acua et al., 2011a ). Adems, 1-MCP era ms eficaz en el retraso de esta transicin de
color en la fruta 'Swiss Bartlett' bajo el 2,5 kPa O 2 /2 kPa CO 2 rgimen. Esto es consistente con las
investigaciones anteriores que demuestran que el bajo O 2 en combinacin con el CO 2 elevado limita
efectivamente el amarilleamiento de la cscara en las peras 'Anjou' ( Drake, 1994 ).

En general, el ablandamiento de la fruta en la pera depende de la biosntesis de etileno ( Hiwasa et al.,

2003 ). De hecho, en nuestro estudio el ablandamiento fue evidente en los frutos no-1-MCP de 'Swiss
Bartlett', que demostraron ser capaces de producir etileno; Se observ un pequeo ablandamiento en toda la
fruta de 1-MCP, que coincidi con una baja capacidad para producir etileno ( Figura 3 ). Sin embargo, las
prdidas en la firmeza de la fruta 'Cold Snap' fueron slo de 9 a 15% durante el perodo de
almacenamiento, y lo ms importante no fueron influenciadas por 1-MCP y CA. Estos hallazgos son
consistentes con niveles estables de firmeza que se encuentran en la maduracin de las peras china y
japonesa y asociadas con una actividad limitada de la enzima modificadora de la pared celular endo-
poligalacturonasa ( Hiwasa et al., 2004 ).

4.3 . La acumulacin de GABA se asoci moderadamente con descomposicin interna y escaldadura

senescente
En el presente estudio, la hiptesis de que el desarrollo de trastornos relacionados con la senescencia en
'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett' fruta est asociada con la acumulacin de metabolitos de estrs oxidativo
durante el almacenamiento. GABA acumulado en la fruta almacenada, aunque estos aumentos no se
asociaron exclusivamente con la aparicin de escaldaduras senescentes y descomposicin interna,
independientemente del cultivar de pera ( Figuras 1, 2 y 4 ). Las investigaciones anteriores mostraron que
la descomposicin empapada y la lesin relacionada con CA en la fruta de la manzana 'Honeycrisp'
coinciden con los niveles de GABA mejorados ( Leisso et al., 2015; Lum et al., 2016a ). Adems, El
GABA es relativamente ms abundante en el tejido cortical marrn que el tejido no afectado de las peras
'Conference' durante el almacenamiento prolongado bajo 10 kPa CO 2y 1 kPa O 2 ( Franck et al., 2007;
Pedreschi et al., 2009 ). En general, la ausencia de una relacin distinta entre el GABA y los trastornos
relacionados con la senescencia en los frutos de "Cold Snap" y "Swiss Bartlett" podra explicarse por la
elevacin de los niveles de GABA, aunque en distintos grados, tanto en las frutas desordenadas como
asintomticas ( Figura 4 ). En el meln, hay un creciente gradiente de GABA hacia el centro de la
fruta; Las concentraciones ms bajas se encuentran en el epicarpio de la fruta y mesocarpio verde ( Biais et
al., 2010 ). No se sabe si existe un gradiente de GABA en la fruta de pera almacenada; En nuestro estudio
se realiz anlisis de metabolitos en polvo de fruta entera, ya que el metabolismo de GABA puede alterarse
por manipulacin mecnica ( Shelp et al., 2012a ).

A nivel bioqumico, la acumulacin de GABA en frutos desordenados de 'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett' es
muy probablemente debido a la estimulacin mediada por la acidificacin citoslica de la actividad de
glutamato decarboxilasa, que se postula que ocurre con descomposicin celular ( Lum et al.,
2016b ). Tambin es posible que el dao de la produccin de ROS da lugar a la desintegracin de la
membrana mitocondrial, permitiendo la liberacin de Ca 2 + de las mitocondrias y posteriormente
aumentando la produccin de GABA a travs de la activacin de Ca2 + / calmodulina de glutamato
descarboxilasa ( Shelp et al., 2012a, 2012b ) . De hecho, existe evidencia tanto de glutamato descarboxilasa
dependiente de calmodulina como dependiente de la manzana "Empire" ( Trobacher et al., 2013 ). Hasta la
fecha, No se sabe si procesos similares de regulacin bioqumica operan dentro de la fruta de pera,
incluyendo los investigados en este estudio. Adems, los niveles de GABA en las frutas almacenadas 'Cold
Snap' y 'Swiss Bartlett' podran ser debidos en parte a los procesos catablicos. Los niveles de GABA
disminuyeron en la fruta de 1-MCP de 'Swiss Bartlett' con almacenamiento prolongado de AC, lo que
implica una mayor tasa de degradacin de GABA que la tasa de produccin de GABA ( Figura 4 ). Se
acepta ampliamente que el catabolismo de GABA se desva, al menos hasta cierto punto, de la produccin
de succinato a -hidroxibutirato cuando la relacin NADPH / NADP + se altera ( Lum et al., 2016b, Shelp
et al., 2012a ) . Los niveles de GABA en frutas almacenadas 'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett' podran ser
debidos en parte a procesos catablicos. Los niveles de GABA disminuyeron en la fruta de 1-MCP de
'Swiss Bartlett' con almacenamiento prolongado de AC, lo que implica una mayor tasa de degradacin de
GABA que la tasa de produccin de GABA ( Figura 4 ). Se acepta ampliamente que el catabolismo de
GABA se desva, al menos hasta cierto punto, de la produccin de succinato a -hidroxibutirato cuando la
relacin NADPH / NADP + se altera ( Lum et al., 2016b, Shelp et al., 2012a ) . Los niveles de GABA en
frutas almacenadas 'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett' podran ser debidos en parte a procesos catablicos. Los
niveles de GABA disminuyeron en la fruta de 1-MCP de 'Swiss Bartlett' con almacenamiento prolongado
de AC, lo que implica una mayor tasa de degradacin de GABA que la tasa de produccin de GABA (
Figura 4 ). Se acepta ampliamente que el catabolismo de GABA se desva, al menos hasta cierto punto, de
la produccin de succinato a -hidroxibutirato cuando la relacin NADPH / NADP + se altera ( Lum et al.,
2016b, Shelp et al., 2012a ) .

4.4 . La descomposicin interna y la escaldadura senescente se asociaron con una disminucin de los
niveles de glutatin
En este estudio, las concentraciones totales de ascorbato y AA disminuyeron con el almacenamiento en
frutos de ambos cultivares ( Figura 5 ). Los niveles presentes en la cosecha y en los frutos almacenados se
aproximaron a los detectados en otros cultivares de pera europeos cuando se expresaron en una base de
masa fresca de mol kg -1 ( Cascia et al., 2013 ). Con 'Swiss Bartlett', el ascorbato total y los niveles de AA
se mantuvieron mejor en fruta 1-MCP que sus homlogos no-1-MCP. Un beneficio similar de 1-MCP se
produce en las peras 'Conference' y 'Passe Crassane' durante el almacenamiento a baja temperatura
( Chiriboga et al., 2013; Cocetta et al., 2016 ). El nivel ms bajo de ascorbato en la fruta no-1-MCP de
'Swiss Bartlett' podra estar algo relacionado con su estado maduro avanzado y mayor capacidad para
producir etileno.

En los tejidos de plantas estresados, una porcin de la piscina de AA puede ser interconvertida a DHA
( Foyer y Noctor, 2011 ). Tanto la fruta 'Cold Snap' como la fruta 'Swiss Bartlett' mostraron aumentos
transitorios en los niveles de DHA durante el almacenamiento (Fig. S1 suplementaria). Estos cambios en
los niveles de DHA, junto con el mantenimiento limitado de las reservas de AA en la fruta almacenada
'Cold Snap' y no 1-MCP de 'Swiss Bartlett' ( Fig. 5 ), podran ser indicativos de una va de reciclaje AA-
GSH disfuncional. Por ejemplo, un aumento en los niveles de DHA en peras 'Williams Bon Chretien'
durante esta inicial de 3 d de almacenamiento de CA parece estar asociado con una disminucin de la
expresin gnica para las enzimas de reciclado de ascorbato DHA reductasa y monodehidroascorbato
reductasa ( Cascia et al., 2013 ). Adems, La acumulacin transitoria en la concentracin de DHA se ha
relacionado con el tostado de la carne en peras 'Williams Bon Chretien', pero no en peras 'Beurre Bosc' y
'Doyenne du Comice'. Nuestro estudio demostr que los cambios en las concentraciones de DHA y AA
ocurrieron con antelacin a la aparicin de trastornos relacionados con la senescencia en frutos de pescado
'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett' ( Figuras 1 y 2 y Fig. Otras investigaciones han demostrado que la lesin
relacionada con la AC en la manzana 'Honeycrisp' est bien asociada con la disminucin de los niveles de
glutatin y el estado redox del glutatin, pero no con el agotamiento del ascorbato ( Lum et al.,
2016a ). Nuestro estudio demostr que los cambios en las concentraciones de DHA y AA ocurrieron con
antelacin a la aparicin de trastornos relacionados con la senescencia en frutos de pescado 'Cold Snap' y
'Swiss Bartlett' ( Figuras 1 y 2 y Fig. Otras investigaciones han demostrado que la lesin relacionada con la
AC en la manzana 'Honeycrisp' est bien asociada con la disminucin de los niveles de glutatin y el
estado redox del glutatin, pero no con el agotamiento del ascorbato ( Lum et al., 2016a ). Nuestro estudio
demostr que los cambios en las concentraciones de DHA y AA ocurrieron con antelacin a la aparicin de
trastornos relacionados con la senescencia en frutos de pescado 'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett' ( Figuras 1 y
2 y Fig. Otras investigaciones han demostrado que la lesin relacionada con la AC en la manzana
'Honeycrisp' est bien asociada con la disminucin de los niveles de glutatin y el estado redox del
glutatin, pero no con el agotamiento del ascorbato ( Lum et al., 2016a ).

En su mayor parte, los frutos de 1-MCP de ambos cultivares mostraron mayores niveles totales de glutatin
que el fruto no-1-MCP durante el almacenamiento, aunque esta diferencia fue ms evidente con el "Swiss
Bartlett" ( Figura 6 ). Hasta donde sabemos, este es el primer estudio que demuestra un efecto de 1-MCP
sobre las concentraciones de glutatin en pera almacenada. Adems, las altas concentraciones totales de
glutatin y GSH en la fruta 1-MCP de 'Swiss Bartlett' coincidieron con una conservacin relativamente
ms de ascorbato y sntomas desordenados insignificantes durante el almacenamiento prolongado que la
fruta no tratada. No obstante, en ambos cultivares, la ruptura interna y el desarrollo de escaldado
senescente fueron precedidos por una disminucin de los niveles de glutatin total y GSH ( Figuras 1, 2 y
6 ) Lo que implica que una disminucin de estos niveles hacen que estos frutos sean susceptibles a estos
trastornos. Los hallazgos aqu reportados son inconsistentes con la acumulacin de glutatin total en el
tejido de ncleo pardo de las peras 'Blanquilla' ( Pint et al., 2001 ). Esta discrepancia podra deberse a la
utilizacin de concentraciones de glutatin de fruta entera en funcin del perodo de almacenamiento, en
lugar de los tejidos disecados de la fruta muestreada al final del experimento de almacenamiento como se
hizo anteriormente. De lejos, la prdida ms rpida de glutatin total fue en peras no 1-MCP mantenidas
bajo aire refrigerado, una combinacin de tratamiento que culmin con la mayor capacidad para producir
etileno y la mayor incidencia de trastornos relacionados con la senescencia. Juntos, Estos hallazgos
sugieren que existe una posible relacin entre la produccin de glutatin y etileno en las frutas almacenadas
'Cold Snap' y 'Swiss Bartlett'. En tejidos vegetativos de Arabidopsis, GSH regula la biosntesis de etileno y
el papel de esta fitohormona en la resistencia al estrs salino ( Datta et al., 2015 ). Adems, la accin del
etileno es necesaria para el control mediado por el glutatin del estrs oxidativo relacionado con el ozono
en Arabidopsis ( Yoshida et al., 2009 ). Hasta la fecha, se desconoce si existe alguna interferencia entre el
metabolismo del etileno y el glutatin en la fruta de pera almacenada. Adems, la accin del etileno es
necesaria para el control mediado por el glutatin del estrs oxidativo relacionado con el ozono en
Arabidopsis ( Yoshida et al., 2009 ). Hasta la fecha, se desconoce si existe alguna interferencia entre el
metabolismo del etileno y el glutatin en la fruta de pera almacenada. Adems, la accin del etileno es
necesaria para el control mediado por el glutatin del estrs oxidativo relacionado con el ozono en
Arabidopsis ( Yoshida et al., 2009 ). Hasta la fecha, se desconoce si existe alguna interferencia entre el
metabolismo del etileno y el glutatin en la fruta de pera almacenada.

5 . Observaciones finales
Antes de este estudio, haba poca informacin sobre el impacto de CA y 1-MCP sobre la calidad y la
senescencia de la fruta de pera "Swiss Bartlett" y "Cold Snap" durante el almacenamiento a baja
temperatura. Escaloz senescente y descomposicin interna ocurrieron simultneamente durante el
almacenamiento a baja temperatura de ambos cultivares considerados, y los sntomas fueron ms
prominentes con una combinacin de no-1-MCP y aire refrigerado. El 1-MCP en combinacin con un
elevado almacenamiento de CO 2 control eficazmente estos trastornos en las peras 'Cold Snap' y 'Swiss
Bartlett'. Un anlisis de los perfiles de metabolito de estrs oxidativo revel que los niveles de GABA se
mejoraron con el almacenamiento, aunque no hubo un efecto consistente de 1-MCP y CA. Se observaron
diferencias especficas de cultivares con respecto a los cambios en los niveles de ascorbato; El 1-MCP
tendi a preservar las concentraciones totales y reducidas de ascorbato en la fruta 'Swiss Bartlett' en todas
las atmsferas de almacenamiento. En los frutos de ambos cultivares, los niveles totales y reducidos de
glutatin disminuyeron y la relacin GSH / GSSG fluctu con el almacenamiento. En general, estos niveles
se mantuvieron mejor en la fruta de 1-MCP. En general, parece que el 1-MCP en combinacin con un O 2 bajo limita los
trastornos de la senescencia durante el almacenamiento prolongado a baja temperatura.