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2013
ABSTRACT RESUMO
In vitro micropropagation of young papaya plants O mtodo de propagao seminfera do mamoeiro
(Carica papaya L.) apresenta uma mistura de gentipos com
The seminiferous propagation of Carica papaya L. influncia marcante nos custos de produo, qualidade e
presents a mixture of genotypes with a strong influence on fruit rendimento dos frutos, prevalecendo devido inexistncia de
production costs, quality and yield, prevailing due to the lack of protocolos eficientes de propagao vegetativa. Neste contexto,
efficient protocols for vegetative propagation. In this context, a cultura de tecidos surge como uma alternativa promissora, pois
the tissue culture emerges as a promising alternative, because it poder fornecer aos produtores mudas com sexo definido, alto
can provide, to farmers, sex determination in seedlings, with a padro de qualidade e em quantidade suficiente para atender
high quality standard and enough amounts to supply commercial demanda comercial, em qualquer poca do ano. Este trabalho
demands in all seasons. This study aimed at developing an in objetivou desenvolver um protocolo de multiplicao in vitro, a
vitro micropropagation protocol from young papaya material, partir de material juvenil de mamoeiro, em dois experimentos.
in two experiments. In the first experiment, the explants were No primeiro, os explantes foram multiplicados in vitro,
multiplied in vitro and the cytokinins BAP, 2iP and KIN were testando-se as citocininas BAP, 2iP e CIN, nas concentraes
tested at the concentrations of 0.0 mg L-1, 2.5 mg L-1, 5.0 mg L-1 de 0,0 mg L-1, 2,5 mg L-1, 5,0 mg L-1 e 10,0 mg L-1, com o
and 10.0 mg L-1, with the best results observed for 2iP, especially melhor desenvolvimento sendo observado para 2iP, sobretudo na
at the 2.5 mg L-1 concentration. In the second one, the 2iP concentrao de 2,5 mg L-1. No segundo, foi utilizada a citocinina
cytokinin was used at the concentrations of 0.0 mg L-1, 1.0 mg L-1, 2iP, nas concentraes de 0,0 mg L-1, 1,0 mg L-1, 2,0 mg L-1 e
2.0 mg L-1 and 4.0 mg L-1, with and without GA3 (0.0 mg L-1 4,0 mg L-1, com e sem GA3 (0,0 mg L-1 e 1,0 mg L-1), constatando-
and 1.0 mg L-1), with beneficial effects of GA3 observed in the se o efeito benfico do GA3 na multiplicao, especialmente
multiplication process, especially when combined with 1.0 mg L-1 quando combinado com 1,0 mg L-1 de 2iP, sendo observados os
of 2iP, with the best results for plants height, number of leaves melhores resultados para altura, nmero de folhas e brotaes
and explants sprouting. dos explantes.
KEY-WORDS: Carica papaya L.; tissue culture; growth PALAVRAS-CHAVE: Carica papaya L.; cultura de tecidos;
regulators. reguladores de crescimento.
1. Trabalho recebido em ago./2012 e aceito para publicao em mar./2013 (n registro: PAT 19611).
2. Universidade Federal do Cear (UFC), Departamento de Fitotecnia, Fortaleza, CE, Brasil. E-mails: vidal.b@bol.com.br,
dndiniz@ufc.com, fanuel@ufc.com.
Multiplicao in vitro de plantas juvenis de mamoeiro 65
e-ISSN 1983-4063 - www.agro.ufg.br/pat - Pesq. Agropec. Trop., Goinia, v. 43, n. 1, p. 64-70, jan./mar. 2013
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nmero de folhas por explante e massa seca dos O maior nmero mdio de gemas por explante
explantes (g). foi observado na presena de 2iP, sendo a concen-
trao de 5,0 mg L-1 a melhor, com mdia de 2,12
Experimento 2: Diferentes concentraes de 2iP e gemas (Figura 1b). Estes resultados concordam
GA3, na multiplicao in vitro de mamoeiro com os obtidos por Chuenboonngarm et al. (2001),
em gardnia (Gardenia jasminoides Ellis), os quais
Os explantes retirados de plantas mantidas in obtiveram o maior nmero de gemas em concentra-
vitro foram inoculados em tubos de ensaio (25,0 mm x es similares de 2iP. Almeida et al. (2010), testando
150,0 mm) contendo, aproximadamente, 10,0 mL diferentes citocininas na multiplicao de mussaenda
de meio de cultura MS, acrescido de 0,1 mg L-1 de (Mussaenda erytrophylla) cv. Rosea, tambm obti-
ANA e diferentes concentraes de 2iP (0,0 mg L-1, veram bons resultados com baixas concentraes
1,0 mg L-1, 2,0 mg L-1 e 4,0 mg L-1), com e sem GA3 de cinetina. De acordo com estudos realizados por
(0,0 mg L-1 e 1,0 mg L-1). Vieira et al. (2009), com cana-de-acar (Saccharum
O modelo experimental utilizado foi o inteira- officinarum L.), o aumento nas concentraes dos
mente casualizado, em esquema fatorial 4x2, sendo reguladores de crescimento, no meio de cultura, no
o primeiro fator correspondente a trs concentraes implica, necessariamente, no melhor desenvolvi-
da citocinina 2iP e testemunha e o segundo fator mento das brotaes, havendo um limite sutil entre
a presena e ausncia do GA3, constituindo oito a induo e a inibio, o que especfico para cada
tratamentos, com 20 explantes por tratamento (um espcie vegetal.
explante por tubo). O nmero mdio de folhas foi maior na pre-
Aos 35 dias aps a inoculao, foram avaliadas sena de 2iP (Figura 1c), havendo diferena entre
as seguintes variveis: altura mdia dos explantes as concentraes testadas, com uma tendncia de
(cm), nmero de brotaes emitidas por explante, reduo, quando a concentrao foi aumentada
nmero de folhas, massa seca dos explantes (g) e para 10,0 mg L-1. Quando utilizou-se BAP e CIN,
tamanho do calo formado, sendo medido o dimetro verificou-se tendncia de reduo no nmero de
da base dos calos e atribudas as seguintes notas: folhas, com o aumento da concentrao. Resultado
0 (sem calo); 1 (calo iniciando); 2 (calo medindo, semelhante foi constatado por Lima et al. (2007),
aproximadamente, 0,5 cm, na sua base); 3 (calo trabalhando com hortel verde (Menta viridis L.),
medindo, aproximadamente, 1,0 cm, na sua base); para o qual no verificaram aumentos significativos
e 4 (calo medindo, aproximadamente, 1,5 cm, na no nmero de folhas, aumentando-se a concentrao
sua base). de BAP.
Os dados foram submetidos anlise de O efeito positivo da citocinina 2iP sobre a
varincia e de regresso. As mdias dos fatores qua- massa seca est ilustrado na Figura 1d, com maior
litativos foram comparadas utilizando-se o teste de valor (0,95 g) na concentrao de 5,0 mg L-1, ao
Scott-Knott, a 5%. Para os fatores quantitativos, os passo que CIN e BAP apresentaram maior massa
modelos de regresso foram escolhidos com base na seca na concentrao de 2,5 mg L-1 (0,39 g e 0,48 g,
significncia dos coeficientes de regresso. respectivamente), diminuindo com o acrscimo dos
reguladores. Em mandacaru, Oliveira et al. (2008)
RESULTADOS E DISCUSSO tambm verificaram maior massa seca na presena
de 2iP, comparativamente ao BAP.
No primeiro experimento, verificou-se que, No segundo experimento, observou-se maior
com o 2iP, os explantes apresentaram melhor desen- altura mdia dos explantes no tratamento com
volvimento, comparativamente aos reguladores BAP 1,0 mg L-1 de 2iP, na presena de 1,0 mg L-1 de GA3
e CIN, com a maior altura mdia (3,2 cm) sendo ob- (Figura 2a). Na ausncia de 2iP, quando se acrescen-
servada no tratamento com 2,5 mg L-1 de 2iP, havendo tou GA3, houve aumento significativo (de 1,3 cm para
uma reduo, a partir desta concentrao (Figura 1a). 3,0 cm) no tamanho dos explantes. Estes resultados
Schuch et al. (2008), em mirtileiro (Vaccinium esto de acordo com os obtidos por Figueiredo et al.
ashei Reade) cv. Climax, observaram a maior altura (2001), os quais, trabalhando com birib (Rollinia
das plntulas (cerca de 1,8 cm) aos 60 dias, com mucosa Jacq. Baill), verificaram a importncia do
2,5 mg L-1 e 5,0 mg L-1 de 2iP, em relao zeatina. GA3 para o alongamento das brotaes. Frguas et
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(a) (c)
(b) (d)
Figura 1. Altura mdia (a), nmero mdio de gemas (b), nmero mdio de folhas (c) e massa seca (d) dos explantes de mamoeiro
(Carica papaya cv. Tainung 01), aos 38 dias de cultivo in vitro em meio MS com 0,5 mg L-1 de ANA e diferentes
concentraes das citocininas BAP, 2iP e CIN (Fortaleza, CE, 2009). Dados originais transformados por Y = X + 1,0,
para as variveis nmero de gemas e nmero de folhas.
al. (2004), em experimento com figueira (F. carica), centrao de 2iP (4,0 mg L-1). Desta forma, deve-se
atriburam o maior tamanho dos explantes, na pre- utilizar o GA3 para reduzir a formao de calos que
sena de GA3, ao estiolamento. dificultam o processo de multiplicao in vitro, de-
O maior nmero mdio de brotaes emitidas vido interferncia na conexo entre a parte area e
por explante (1,84) foi observado no tratamento com o sistema radicular da planta.
GA3 e 1,0 mg L-1 de 2iP, havendo uma reduo, quan- Castillo (1991) relata que um calo basal de
do a concentrao foi aumentada (Figura 2b). Este tamanho excessivo indesejvel, por ser potencial
aumento no nmero de brotaes emitidas, quando se promotor de modificaes genticas e exaurir os
adicionou 1,0 mg L-1 de 2iP, tambm foi observado nutrientes do meio de cultura, em detrimento da
por Furtado et al. (2007), em amendoinzeiro (Arachis formao de folhas e razes.
hipogaea L.), para o qual os autores relatam que a Segundo Nogueira et al. (2007), o efeito
adio de citocininas ao meio de cultura quebra a conjunto da citocinina exgena presente no meio
dominncia apical e promove o controle de um pro- nutritivo e a endgena do explante proporciona-
grama complexo da expresso do gene na cultura do ram uma elevada concentrao deste regulador,
tecido, resultando na formao de brotaes. ocasionando diminuio na formao de calos em
O menor tamanho dos calos foi verificado na murici-pequeno (Byrsonima intermedia A. Juss). No
ausncia dos reguladores de crescimento (Figura 2c). entanto, Grattapaglia & Machado (1998) indicaram
No tratamento sem 2iP, quando o GA3 foi acrescen- que o aumento excessivo da concentrao de regu-
tado ao meio, verificou-se aumento significativo no ladores de crescimento leva formao de maior
tamanho dos calos formados. Porm, na presena quantidade de calos.
de 2iP, o GA3 influenciou na reduo do tamanho A maior massa seca de explantes foi verifi-
dos calos, apresentando diferena para a maior con- cada na concentrao de 2,0 mg L-1 de 2iP, com e
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(a) (c)
(b) (d)
Figura 2. Altura mdia (a), nmero de brotos por explante (b), tamanho dos calos (c) e massa seca (d) dos explantes de mamoeiro
(Carica papaya cv. Tainung 01), aos 38 dias de cultivo in vitro em meio MS com 0,5 mg L-1 de ANA e diferentes
concentraes de 2iP (0,0 mg L-1, 1,0 mg L-1, 2,0 mg L-1 e 4,0 mg L-1 ) e de GA3 ( 0,0 mg L-1 e 1,0 mg L-1 ) (Fortaleza,
CE, 2009).
sem GA3 (Figura 2d). Quando se acrescentou o 2iP, de 2,0 mg L-1, com e sem GA3, havendo uma re-
houve aumento na massa seca, at a concentrao duo, quando a concentrao foi aumentada para
4,0 mg L-1. Provavelmente, esta reduo na massa
seca seja devida quantidade excessiva de 2iP no
GA3 (mg L-1) meio de cultivo, e os resultados esto de acordo com
3,5 Santos (2008), que, trabalhando com abacaxizeiro
3,0 ornamental (Ananas comousus) var. bracteatus,
2,5 verificou que a concentrao de 1,8 mg L-1 de 2iP
2,0
promoveu o maior acmulo de massa. Os dados
tambm concordam com Diniz et al. (2003), os quais
1,5
reportaram que no s a presena, mas o aumento nas
1,0
concentraes de GA3, tambm resultava no aumen-
0,5
to de massa seca em explantes de macela (Egletes
0,0 viscosa L. Less), cultivados in vitro.
Altura (cm) TC NB NF
O GA3 influenciou, de forma significativa, no
desenvolvimento dos explantes, apresentando maior
Figura 3. Altura mdia dos explantes, tamanho do calo (TC),
nmero de brotaes (NB) e nmero de folhas (NF) crescimento em altura, nmero de brotaes e nmero
em explantes de mamoeiro (Carica papaya cv. Tainung de folhas (Figura 3). O GA3, associado ao 2iP, con-
01), aos 35 dias de cultivo in vitro em meio MS com tribuiu para a reduo no tamanho dos calos, o que
0,1 mg L-1 de ANA, com e sem GA3 (Fortaleza, CE, desejvel, uma vez que o objetivo tentar diminuir
2009). Letras distintas, no topo das colunas, em cada
sua produo, para facilitar as etapas posteriores do
varivel, indicam que as mdias diferem entre si, pelo
teste de Scott-Knott (p 0,05). processo de multiplicao in vitro.
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