Desarrollo in vitro

de embriones
cigticos de
mbocay
Castillo de Meier Graciela MSc.;
Romano Martin Ing. Ftal.; Noguera
Mercedes1 ; Noguera Graciela1;
Franco Silvia1; Meier Ana1 (1)
Estudiante; Vega, Mara MSc.

Argentina, Laboratorio
Biotecnologa de Plantas (BIOLAB)
biolab@unf.edu.ar
Universidad Nacional de Formosa
 La palma mbocay [Acrocomia aculeata
(Jacq.) LODD ex Mart.], es una especie tropical
con mltiples usos, tiene frutos y semillas con
alto contenido de aceite apto para la
produccin de biodiesel.
 A pesar de su
amplia distribucin
geogrfica y de su
rusticidad,

tiene una marcada

variabilidad
gentica y graves
dificultades en la
germinacin (Silva
et al., 2008).
 El cultivo in vitro de embriones cigticos es una tcnica
usada para superar la dormancia de semillas, estudiar
aspectos nutricionales y fisiolgicos del desarrollo de
embriones, recuperar hbridos incompatibles y como
fuente de explantes con tejidos de elevada totipotencia.
 La tcnica in vitro se convierte en una excelente
herramienta para su propagacin y la obtencin de
material homogneo.
 OBJETIVO
Se evalu:
Efecto de 3
tratamientos con
carbn activado
adicionado al medio
de cultivo MS
Efecto de la luz en la
incubacin en la
germinacin in vitro
de embriones
cigticos de
mbocay
Materiales y Mtodos:

Frutosmaduros fueron cosechados de cuatro

plantas adultas de poblaciones naturales existentes
en la localidad de Mojn de Fierro, provincia de
Formosa, en diciembre de 2010.
Desinfeccin: Las almendras, fueron
desinfectadas en
inmersin:
a) solucin 1% de lavandina
comercial (hipoclorito de
sodio al 5%) durante 24
horas;
b) en cabina de flujo laminar:
solucin de etanol al 70%
durante 2 minutos;
c) solucin 2% de lavandina
comercial (hipoclorito de
sodio al 5%) ms dos gotas
de Tween 20, durante 20
minutos en agitacin;
d) tres enjuagues con agua
destilada estril.
 Los embriones maduros fueron
inoculados en posicin
horizontal en tubos de ensayo
que contenan 15 ml de
medio MS (Murashige y Skoog,
1962), complementado con
100 mg L-1 de myo-inositol,
vitaminas, MS con (0,1; 3 y 5
g.L-1) de carbn activado, 3%
de sacarosa.
El pH del medio fue ajustado
a 5,8 0,1 y 7 g/l de agar
antes de esterilizacin en
autoclave a 121 C y 1 atm
durante 20 minutos.
 El experimento se realiz con
un diseo completamente
aleatorizado, en un
esquema factorial 2 x 4 (2
regmenes de incubacin de
los explantes por 4
tratamientos)
se utiliz el software
estadstico InfoStat, versin
2004.
Fueron realizadas 3
repeticiones por tratamiento
y 10 embriones por
repeticin.
Las observaciones fueron
realizadas luego de los 60
das del cultivo.
Las variables que se
contabilizaron fueron:
nmero de embriones
germinados, nmero de
embriones sin respuesta
(oxidados) y nmero de
embriones contaminados.
 Incubacin:

Los tratamientos consistieron en la combinacin de 2 regmenes de

incubacin de los explantes en sala de crecimiento, con
temperatura de 27 C 2 C, con ambiente oscuro durante 14 das
desde el inicio del cultivo y el otro, con un fotoperiodo de 16 h luz
con una irradiacin de 42 mol x m -2 s -1, con 4 tratamientos, 3 con
carbn activado (1, 3, 5 g.L-1) y MS solo. Luego de los 14 das, los
explantes mantenidos en oscuridad pasaron a las condiciones de
luz descriptas anteriormente.
Resultados: En el anlisis de los datos no
se observaron diferencias
significativas (p<= 0,05)
Figura 1. Efecto del carbn activado adicionado al medio MS entre los 3 tratamientos con
y la luz en la incubacin en el porcentaje de
embriones cigticos germinados. MS y 1, 3 o 5 g.L-1 de carbn
Resultados a los 60 das. activado, pero se
observaron diferencias
significativas al ser
comparados con MS sin la
adicin de carbn
activado, en la germinacin
de embriones cigticos.
Pasados 60 das del cultivo,
cuando los explantes eran
incubados con un
fotoperiodo de 16 h luz, en
el medio MS solo, se produjo
la germinacin de un 53,3%
de los embriones. Los
mejores porcentajes (93,3%)
se observaron en MS ms 3
g.L-1 de carbn activado
(Figura 1).
Discusin:
Los datos obtenidos en la germinacin de embriones cigticos in
vitro concuerdan parcialmente con los de Bandeira (2008), quien
evalu el rgimen de incubacin y el carbn activado adicionado
al medio de embriones cigticos de Acrocomia aculeata. Bandeira
concluy que el fotoperiodo de 16 h proporciona mayores ndices
de oxidacin si se lo compara con una oscuridad inicial de 30 das.

En el presente trabajo, no existen diferencias significativas entre las

incubaciones utilizadas: resultados con fotoperiodo de 16 h (93,3%) y
con 14 das de oscuridad (80%). Coincidimos que el medio MS ms 3
g.L-1 de carbn activado es el que ofrece mayores porcentajes de
germinacin y que a medida que se aumenta el carbn activado
en el medio disminuyen los explantes oxidados.

Los resultados en cuanto a la germinacin de embriones cigticos

son superiores a los obtenidos por Silva et al. (2008), que solo
lograron un 33% de tasa germinativa sin carbn activado y con 16 h
de fotoperiodo. En cambio, Soares et al. (2008) obtuvieron un mayor
porcentaje de germinacin (95,6%) con un fotoperiodo de 16 h y
Fogaa et al. (2009) lograron un 78% de germinacin con la adicin
al medio MS de cido 2-naftalenactico (ANA) y benciladenina (BA)
con una concentracin de 1,0 mg.L-1 y 0,5 mg.L-1.
Conclusin:
La germinacin in vitro de embriones cigticos de
mbocay es superior en el medio MS ms 3 g.L-1 de
carbn activado incubados con fotoperiodo de 16 h.
La propagacin in vitro de mbocay, a travs del
cultivo de embriones cigticos, demuestra ser eficaz
para la obtencin de plntulas.