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En 1912, Alexis Carrel, se considera padre del cultivo celular pero no tiene premio nobel por
eso si no por ser cirujano vascular, creo el baipass. Primera persona en hacer cultivo de clulas
disgregadas in vitro estas eran clulas de anfibios; rana. El medio de mantenimiento de clulas
en vez de linfa era plasma, extraa sangre de ah plasma y utilizaba esto como medio para
cultivar las clulas. El articulo (diapo 2) aparece el ttulo. Un laboratorio de cultivo celular se
parece ms a un quirfano que otras cosas, no hay esterilidad total pero las cosas son estriles
y el aire es limpio, filtradoEso le permiti su xito, utilizar esas tcnicas de cirujano en sus
cultivos. An seguimos utilizando algunos de sus mtodos. Diseo tambin un flash de cultivo y
consigui que Dupon lo fabricara. Cuando uno quiere acceder a las clulas accede desde un
lateral evitando que se contamine, gracias a la forma de esa placa permiti no haber mucha
contaminacin.
Otro hito importante, 1952 George Gey, era gineclogo que trabajaba con cncer de cuello
uterino, hacia tcnicas de disgregacin celular, y fue la persona que estableci la primera lnea
celular estable humana: Cel Hela. (Son las clulas que vamos a utilizar en prcticas y llevan
viviendo desde 1952 hasta ahora en vitro). Vienen de una mujer afroamericana con cncer
crvix uterino. Hasta 2001 su familia no saba que su madre haba sido la que dio esas clulas
sin su consentimiento: Hila y ahora hay una demanda para que consigan el dinero :D, porque
tienen sus genes.
Si uno quiere ver si el medio de cultivo est bien lo crece en Hila y si crecen es que el medio
est bien.
A mitad del siglo pasado, hay muchas investigaciones; 1955 Harry Eagle, fue el primero en
estandarizar el medio de cultivo, porque hasta entonces se utilizaba plasma del mismo
organismo de la misma especie, porque hasta ese momento no haba informacin que
nutrientes necesitaba una clula para crecer. Creo el medio mnimo esencial de Eagle: EMEM.
(Minimal Essential Medium). Como era un medio esencial no a todas las clulas le iba bien.
Por ello Dulbecco modifica el medio mnimo esencial y como era bioqumico, modificaba
medios y entonces su medio se llama, la modificacin del medio mnimo esencial: DMEM. EL
medio que utilizamos en prcticas es el DMEM, con alguna modificacin, multiplicar x4 la
glucosa para que puedan crecer las clulas, porque consumen cantidades de azcar bastante.
Tienen requerimientos x4 y se llama el medio DMEM x4 glucosa.
Siguiente dcada, otro hito importante, Leonard haba biopsias, disgregar clulas y las cultivaba
in vitro y miraba cuantas veces podan las clulas dividirse, y vio que todas las clulas a partir
de un numero de divisin las clulas moran. Ej: Una vez que se dividan 40 veces moran por
apoptosis, lo que se llama el Limite de divisin de Hayflick. Supuso durante mucho tiempo en
investigar en porque tenan un limite las divisiones, hoy en dia se sabe, los telomeros se
pierden en cada divisin hasta que va eliminando genes esenciales que traducen a protenas y
las clulas mueren.
Las clulas tumorales han perdido ese limite de divisin, por eso las celulas que cultivaron HILA
por ejemplo duraba tanto porque no se perdia informacin gentica, era inmortal. El virus del
papiloma humano que dio lugar a esas celulas tenia un gen que codificaba telomerasa, y ahora
a las celulas que queremos cultivar introducimos el gen de telomerasa o la telomerasa en si.
Sin el cultivo celular no existira la tcnica de reproduccin asistida, porque se cultivan gametos
y embriones: que no deja de ser cultivo celular. En el ao 1978 se produjo el nacimiento del
primer bebe probeta. Edward y Steptoe crearon el embrin in vitro y lo transfirieron al interior
de la madre y asi naci.
Hitos importantes
98- generacin de un tejido in vitro: aparicin ingeniera tisular; fabricacin tejido in vitro y fue
la creacin de cartlago que despus se utiliz para un trasplante de la trquea. Adems en ese
ao se produce otro hito importante la purificacin de clulas troncales embrionarias. El grupo
de Thomson consigue por 1 vez mantener en cultivo las clulas de un embrin, clulas
pluripotentes indiferenciadas, las pudieron mantener in vitro sin diferenciar. Estas clulas
puede producir cualquier todo tipo de clulas de nuestro organismo y de ah empez su
importancia en la medicina regenerativa.
2001-Finalizacion del proyecto del genoma humano, hasta entonces se saba un gen una
enzima, no saban lo de modificacin del ARNm. Y puedo coger una clula en cultivo modificar
su genoma y ver que le pasa, si es capaz de evitar una enfermedad, si se comportan mas
eficientes o no. Y desde entonces ha cambiado por completo como se trabaja hoy en dia en los
labs.
2013- Mitalipov junto con otras personas como Nuria Marti que estudio en la Ua, clonacin
humana por transferencia humana pero sin fin reproductivo sino obtener embrin y extraer cel
troncales embrionarias para obtener una lnea celular, para utilizar en medicina.
El termino correcto es clula troncal no clula madre, porque en ningn otro idioma se traduce
a madre.
Hasta 2009 no se sigui la experimentacin desde 2001 porque Bush quito el dinero a los
investigadores de las clulas troncales.