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REVISIN

Clonacin y clulas madre


61.340
Ximo Soriano Felipe, Antonio Guerrero Espejo y Santiago Bonanad Boix
rea de Diagnstico Biolgico. Hospital de La Ribera. Alzira. Valencia. Espaa.

El desarrollo aplicado de las tcnicas de clonacin ha revolucionado ner inmediatamente una gran tensin informativa y una
el panorama cientfico de los ltimos tiempos. Muchas de sus aplica- considerable alarma social4-8. Debido a este impacto en la
ciones biotecnolgicas (empleo de clulas madre, tratamiento tisular, opinin pblica, numerosos gobiernos han modificado su
trasplantes, etc.) se estn desarrollando en algunos campos de la me- legislacin y creado organismos reguladores.
dicina, con perspectivas hasta ahora inimaginables. La produccin a
medida de recambios celulares y tisulares, a partir de clulas madre y
Nos encontramos probablemente frente a uno de los deba-
su posterior diferenciacin en cultivo, es un buen ejemplo de ello. Sin tes ms interesantes de la biologa aplicada en un tema de
embargo, tanto algunas cuestiones tcnicas del procedimiento como gran impacto futuro en el tratamiento de las enfermedades,
ciertos de sus posibles usos son objeto de un intenso debate, en el y concretamente la clonacin de clulas madre ha abierto
que la gran mayora de la comunidad cientfica se muestra contraria a un debate con posiciones ideolgicamente muy enfrentadas
la clonacin reproductiva y a favor de la teraputica.
Este artculo intenta resumir las principales aplicaciones y problemas en el caso del empleo de clulas de origen embrionario. En
asociados a las tcnicas de clonacin y uso de clulas madre, desde este texto abordamos sus aspectos ms interesantes desde
la perspectiva de los profesionales sanitarios. la perspectiva de los profesionales sanitarios, sin profundi-
zar en las consideraciones ticas, filosficas, antropolgicas
Palabras clave: Clonacin. Clulas madre. o en el marco jurdico de la cuestin.

Cloning and stem cells Aplicaciones de la clonacin


Applied cloning technologies have become a great scientific advan- Segn la finalidad perseguida, se distinguen 2 grupos de
ce. Many of their biotechnological applications (stem cells, trans- aplicaciones de la clonacin: la realizada con fines repro-
plants, tissue therapy) are improving medical fields to extents that
we could not imagine a few years ago. Thus, for example, we are now
ductivos y la realizada con objetivos teraputicos (fig. 1).
able to produce cellular and tisular spares via differentiating stem
cells in vitro. Yet the scientific community maintains a vibrant
debate over technical aspects and applications of cloning technolo-
gies, with most scientists positioned against reproductive cloning
while agreeing on its therapeutic use. This article summarizes the fo- Clula adulta Oocito
remost applications and problems related to cloning and stem cells enucleado
technologies, from an academic and health professionals point of
view. Transferencia
nuclear
Key words: Cloning. Stem cells.

Embrin

El proceso de la propagacin de clulas idnticas a una pri-


maria u original prescindiendo de mtodos de reproduccin
sexual se denomina clonacin y ha supuesto uno de los ma-
yores avances cientficos de los ltimos tiempos. Los trmi- Blastocito
nos trasplante nuclear, transferencia nuclear o clona-
cin nuclear se refieren a la introduccin de un ncleo de
una clula de donante adulto en un oocito enucleado, para Clonacin Clonacin
reproductiva teraputica
poder generar un embrin clonado. Este proceder ha estado
siempre acompaado de intensos debates de opinin, que
Clulas madre
alcanzaron cotas muy importantes cuando en 1997 se embrionarias
anunci pblicamente la obtencin del primer mamfero su-
Transferencia uterina
perior clonado a partir de clulas adultas1-3. En aquel mo- a una madre
mento, la oveja Dolly fue catapultada a la fama con innega- portadora
ble sensacionalismo por un proceso no tan novedoso, por
entonces, como la opinin pblica interpretaba. Diferenciacin in vitro
La posibilidad de extender la aplicacin de la clonacin a
humanos a partir del xito en la clonacin de una oveja ge-
Sujeto clonado

Correspondencia: Dra. A. Guerrero Espejo. Hemates, neuronas,


rea de Diagnstico Biolgico. Hospital de La Ribera. clulas musculares...
Ctra. de Corbera, Km 1. 46600 Alzira. Valencia.
Correo electrnico: aguerrero@Hospital-Ribera.com
Recibido el 5-9-2003; aceptado para su publicacin el 12-11-2003. Fig. 1. Clonacin reproductiva y teraputica.

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SORIANO FELIPE X, ET AL. CLONACIN Y CLULAS MADRE

Clonacin reproductiva Clonacin teraputica


Se entiende por clonacin reproductiva la que tiene como El propsito del tratamiento de trasplante nuclear es obtener
objetivo la creacin de un nuevo ser vivo, genticamente una lnea de clulas madre autlogas derivadas de un em-
idntico a su progenitor, mediante la implantacin de un brin clonado que puedan usarse para la sustitucin tisular.
embrin clonado en el tero. Estas tcnicas podran contribuir al tratamiento de enferme-
La clonacin reproductiva de mamferos empleando clulas dades tan comunes como la diabetes, las cardiopatas de-
somticas adultas es un hecho constatado en ovejas, rato- generativas, determinados tipos de cncer, trasplantes de
nes, vacas, cerdos y cabras1,10-11. Es por ello que sus princi- rganos y tejidos, y procesos degenerativos y enfermedades
pales aplicaciones se centran en la produccin ganadera, la virales4,17 gracias a la generacin de clulas diferenciadas
industria farmacutica, la generacin de nuevos conoci- funcionales a partir de las clulas madre.
mientos en experimentacin y el inters que genera su uso La combinacin del trasplante nuclear con los campos de la
como posible tcnica de reproduccin asistida en humanos. terapia gnica y celular permitira el tratamiento de enfer-
medades de base gentica.
Aplicaciones en la ganadera. En la industria ganadera la
Aplicaciones en el tratamiento gnico y celular. El trata-
clonacin reproductiva constituye una importante aplicacin
miento gnico en la lnea germinal es el proceso de manipu-
de la biotecnologa aplicada y abre un gran abanico de posi-
lacin del genoma de un embrin temprano. Actualmente,
bilidades. La clonacin de animales con mejoras1 o la ob-
su principal aplicacin sera corregir trastornos gnicos re-
tencin de poblaciones celulares antes de la formacin del
cesivos como, por ejemplo, la fibrosis qustica, reemplazan-
embrin12 proporcionara un mtodo rpido de disemina-
do el gen causante de la enfermedad por otro sano median-
cin de mejoras alternativa a la cra tradicional1,12-15.
te el uso de un vector17.
Es posible introducir o interrumpir la expresin de determina-
La clonacin teraputica se puede usar para aumentar la fa-
dos genes en la transferencia nuclear con el objetivo de con-
cilidad y eficiencia del tratamiento gnico en la lnea germi-
seguir fenotipos de inters. Esta tcnica supone ventajas res-
nal. Una de las limitaciones de esta tcnica es el pequeo
pecto a la introduccin de ADN en el ncleo de un embrin
nmero de clulas y la rpida prdida de la capacidad pluri-
temprano, pero se asocia a otros problemas, como la baja efi-
potencial de los embriones tempranos. Combinadamente
ciencia de la tcnica, la expresin gnica impredecible, la
con la clonacin teraputica, los embriones tratados podran
presencia de mosaicismos, la transmisin variable en la lnea
ser cultivados para crear una masa de clulas embrionarias
germinal y la necesidad del uso de un gran nmero de ani-
no afectadas. Uno o ms de los ncleos resultantes podra
males para la produccin de fundadores transgnicos13.
transferirse a un oocito mediante transferencia nuclear para
Por tanto, su principal utilidad reside en la creacin de ani-
originar as un gran nmero de embriones totipotentes sa-
males transgnicos y la propagacin de animales mejorados
nos17. Esta tcnica puede usarse tanto en clonacin tera-
genticamente.
putica (para la obtencin de clulas madre) como repro-
ductiva (desarrollo del embrin a un individuo sano).
Aplicaciones en la industria farmacutica. La transgnesis
hace posible la produccin de un gran nmero de protenas
Problemas asociados a la clonacin
tiles mediante animales manipulados7, entre ellas, por
ejemplo, la produccin de protenas con valor farmacutico Las cuestiones que realmente estn determinando gran par-
en la leche13 u otras sustancias con aplicacin biotecnolgi- te del inters meditico por las tcnicas relacionadas con
ca (pptidos hormonales y otros)15. los procedimientos de clonacin derivan de que algunas de
las aplicaciones de sta y de las tcnicas asociadas a ella
Aplicaciones en la generacin de nuevos conocimientos. El (el tratamiento gnico, por ejemplo) presentan una serie de
empleo de tcnicas de transferencia nuclear facilita medios inconvenientes de carcter tcnico y tico-moral. Acadmi-
acadmicos para entender los efectos de la diferenciacin camente, los argumentos del debate tico y moral en contra
celular en genomas2. Tambin ofrece la posibilidad de estu- de la clonacin se pueden dividir en los supuestos daos
diar la persistencia y el impacto de las modificaciones epi- que podra causar a un nico individuo y en los perjuicios
genticas, como la impronta y el acortamiento de los tel- que podra suponer para la sociedad en su conjunto (la es-
meros producidos durante el desarrollo y el envejecimiento, pecie humana).
respectivamente1,16, as como el proceso de inactivacin del
cromosoma X en hembras7. El xito en la clonacin de rato- Problemas individuales
nes proporciona un modelo a partir del cual evaluar estos
La mayor parte de los argumentos en contra de la clonacin
fenmenos9, al tiempo que facilita la preservacin de cepas
clasificables dentro del apartado de daos a los individuos
importantes para la experimentacin7.
hacen referencia a la clonacin reproductiva, concretamen-
te, a los perjuicios a la salud fsica y mental del nuevo ser
Aplicaciones en reproduccin asistida en humanos. La clo- clonado.
nacin reproductiva permitira tericamente en la especie Muchas de las frecuentes anomalas detectadas en los ani-
humana la reproduccin asexual y la generacin de clones males clonados parecen secundarias a defectos de repro-
hijos genticamente idnticos al padre o la madre. Esta tc- gramacin epigentica de los ncleos trasplantados, es de-
nica podra tener aplicacin en la obtencin de descenden- cir, el fallo de un ncleo somtico donado para regresar al
cia biolgica en casos con formas graves de esterilidad, en programa de expresin gentica correspondiente a un pa-
parejas homosexuales o en casos de parejas con antece- trn de expresin embrionario. Los fallos en la reprograma-
dentes de alteraciones mdicas o genticas que desaconse- cin de los clones son un impedimento potencial de sus
jan firmemente la descendencia. Dadas las enormes reper- aplicaciones teraputicas.
cusiones que suscita este punto en los rdenes tico, La clonacin es una tecnologa relativamente nueva que no
filosfico, antropolgico y jurdico, el tema es merecedor de ha sido probada en seres humanos y cuyos efectos sobre
su tratamiento en textos especficos de la materia. El debate stos se desconocen. La experimentacin en animales ha
est servido. revelado la existencia de problemas asociados a la clona-

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SORIANO FELIPE X, ET AL. CLONACIN Y CLULAS MADRE

cin que causan muerte prenatal y perinatal de embriones, de proteger la integridad de la especie humana, as como la
fetos y animales en desarrollo. Se estn investigando las integridad y diversidad de su acervo gnico17.
causas de esta mortalidad, pero se especula acerca de su Para algunas personas el embrin humano merece mayor
relacin con el proceso de reprogramacin al estado cigti- respeto que el otorgado a otros tejidos del cuerpo, debido a
co, el salto de procesos naturales como la meiosis y la fertili- su potencial de crear vida humana6,17. stas suelen pensar
zacin, la manipulacin de las clulas durante el proceso que, aunque estas tecnologas fueran seguras, los seres hu-
experimental y el uso de ADN de clulas adultas (que pre- manos no deberan intervenir en la creacin o alteracin de
sumiblemente contienen mutaciones)10,11,18. la vida17.
Los clones adultos tampoco estn exentos de problemas. Otro argumento en contra de la clonacin es la posibilidad
Estudios recientes demuestran que el tamao de los frag- de crear nuevos movimientos eugnicos. Preocupa que se
mentos de restriccin de los telmeros de Dolly y otras generen nios por encargo, con ciertas caractersticas f-
ovejas clonadas son concordantes con la edad del donante, sicas o intelectuales, lo que podra dar pie a un movimiento
debido a lo cual estos animales envejecen prematu- social para crear una raza humana superior, mediante la
ramente10,16. La muerte temprana de la oveja Dolly ha su- eliminacin de ciertos caracteres no deseados, y a que la
puesto un reforzamiento de estos ltimos argumentos. produccin de clones humanos se empleara como banco
La clonacin presenta una serie de problemas por el hecho de rganos de repuesto o lneas celulares de reserva17.
de ser una forma de reproduccin asexual. La reproduccin En opinin de algunos, la esencia de la humanidad radica
sexual presenta la ventaja evolutiva sobre la anterior de pre- en la unicidad de cada uno de sus miembros y en la impre-
venir el paso de mutaciones somticas dainas acumuladas dicibilidad de su desarrollo5. El empleo de tcnicas de clo-
por los parentales. El efecto de dichas mutaciones sobre el nacin representara en este caso la imposicin de una pre-
clon es incierto, se conjetura que ste podra tener menor determinacin biolgica por terceras personas, por lo que
capacidad de adaptacin y ser fsicamente ms dbil que estas prcticas no seran lcitas.
los individuos generados por reproduccin sexual17. Finalmente, preocupa que la clonacin y el tratamiento g-
Todo esto hace que el nivel global de xito de la clonacin nico pudieran tener efectos nocivos sobre la seleccin natu-
reproductiva (nmero de nacimientos comparado con el n- ral y limitaran la capacidad de adaptacin de la especie hu-
mero de embriones manipulados) sea muy bajo14. Este ndi- mana a un futuro incierto17.
ce depende del animal usado y del tipo celular de partida7.
As, por ejemplo, para la obtencin de la oveja Dolly a partir
Trasplante y clulas madre
de clulas mamarias hicieron falta 277 oocitos1, mientras
que para la clonacin de ratones se consigui un ndice de La ingeniera tisular aplica los principios de la ingeniera y
xito superior, en torno al 2-3%9. El uso de los mtodos ha- de las ciencias de la vida a la obtencin de sustitutos biol-
bituales de diagnstico prenatal no permite examinar el con- gicos para restaurar, mantener o mejorar la funcin tisular.
junto global del estado epigentico de un genoma11, el cual Las clulas pluripotentes de origen embrionario son totipo-
podra ayudar a determinar su estado de reprogramacin. tentes por definicin y constituyen el material fundamental
Los efectos de la clonacin se han investigado en animales para la generacin de cualquier lnea celular diferenciada.
mediante estudios comparativos entre poblaciones de rato- Con ella se construyen clulas y tejidos que pueden utilizar-
nes clonados y ratones control. La poblacin de ratones clo- se en tratamientos sustitutivos. Esto es una realidad en al-
nados puede presentar una disminucin de la tasa de su- gunos casos, como la piel artificial, o una promesa alcanza-
pervivencia debida a disfunciones hepticas y pulmonares ble en el caso del tratamiento de la diabetes15.
(neumona grave, necrosis y tumores). Se ha evidenciado El trasplante de rganos es el tratamiento de eleccin para
una disminucin de la respuesta inmunitaria (se experimen- muchos pacientes en el ltimo estadio de la enfermedad
t con la capacidad de produccin de anticuerpos y la acti- de un rgano. El reducido nmero de donantes adecuados
vidad fagoctica). Se han realizado estas mismas observa- fuerza la investigacin del empleo de rganos de animales
ciones en animales bovinos y caprinos19. para reemplazar el rgano no funcionante (xenotrasplan-
Algunos datos apuntan a un efecto de la clonacin sobre la te). Las investigaciones actuales se centran, a pesar de
embriogenia. Sin embargo, algunos aspectos del diseo ex- que la controversia no permite la realizacin de ensayos
perimental no permiten aportar datos concluyentes, a pesar clnicos, en la creacin de cerdos con genes humanos
de que algunos autores no han encontrado efectos adversos para una eventual produccin en serie, mediante clona-
serios debidos a la clonacin10. cin, de rganos de recambio para trasplantar20. Desde el
Las tecnologas de reproduccin asistida sobrepasan muchos punto de vista tcnico, podra realizarse el xenotrasplante
de los procesos biolgicos naturales (p. ej., la fertilizacin); sin en sujetos seleccionados, aunque una preocupacin de
embargo, muchos investigadores mantienen que no producen salud pblica (especialmente con respecto a los retrovi-
efectos graves no deseados en la descendencia, y stos no su- rus) no permite dar luz verde a los programas de xenotras-
peran el nivel de incidencia en la poblacin general10. plante. Algunos expertos en xenotrasplante opinan que
En cuanto al tratamiento gnico en la lnea germinal, las in- sus ventajas superan a sus riesgos, pero en el momento
vestigaciones actuales se centran en la produccin de vec- actual, en palabras de sir Roy Calne el xenotrasplante cl-
tores especficos que permitan el reemplazo de genes cau- nico est a la vuelta de la esquina, pero la esquina puede
santes de enfermedad. El principal problema radica en que estar muy lejana.
la insercin de constructos en sitios equivocados podra lle- Los alotrasplantes y xenotrasplantes presentan problemas
var a la interrupcin de genes y secuencias reguladoras, lo importantes: escasez de material, dificultades tcnicas, ele-
cual podra acarrear efectos muy graves para la salud como, vado coste, riesgo de infeccin por parte de retrovirus en-
por ejemplo, incrementar el riesgo de cncer17. dgenos y, en cualquier caso, rechazo inmunolgico21. La
obtencin de clulas madre propias, y su posterior diferen-
ciacin en cultivo, podra producir recambios celulares y ti-
Problemas poblacionales
sulares a medida y en cantidad suficiente sin los problemas
Los detractores de la clonacin centran parte de sus argu- de rechazo asociados a trasplantes entre la misma o dife-
mentos en los perjuicios a la sociedad en la responsabilidad rentes especies7.

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SORIANO FELIPE X, ET AL. CLONACIN Y CLULAS MADRE

Clulas madre embrionarias El cartlago adulto tiene una capacidad mnima para repa-
rarse a s mismo; las clulas madre mesenquimales son un
Las clulas madre son aquellas que tienen las capacidades
candidato atractivo de clulas progenitoras para la repara-
de clonarse y autopropagarse, as como la de diferenciarse
cin cartilaginosa debido a su potencial osteognico y con-
en mltiples lneas celulares. Las clulas madre embriona-
drognico, as como a su facilidad de cultivo y de desarrollo.
rias derivan de los embriones de mamferos a partir del es-
Nos encontramos tambin en una nueva era de la repara-
tadio de blastocito y tienen la capacidad de generar cual-
cin cerebral gracias a las clulas madre. La informacin
quier clula diferenciada en el cuerpo.
nueva ofrece tremendas esperanzas para el desarrollo de
Cuando, por ejemplo, una lesin miocrdica llega a ser lo
nuevos tratamientos celulares para enfermedades neurode-
suficientemente grave como para comprometer la vida en
generativas como las enfermedades de Parkinson, Hunting-
un corto perodo sin que existan de alternativas mdicas, se
ton, Alzheimer y los traumatismos neurales23.
dispone del trasplante de corazn. Se han propuesto dife-
A pesar de que hay que superar muchos obstculos para su
rentes tcnicas de trasplante celular como alternativa al
uso teraputico, las clulas madre son capaces de reparar
trasplante de rganos. Los miocardiocitos son virtualmente
tejidos no linfohematopoyticos22.
incapaces de replicarse y reparar la lesin miocrdica. El
tratamiento celular destinado a regenerar los miocardiocitos
perdidos es novedoso y prometedor para dichos pacientes. Conclusiones
Entre los usos clnicos potenciales ms inmediatos de los cul-
El debate en torno a la clonacin humana viene marcado
tivos de clulas madre se encuentran, no slo la generacin
desde sus inicios por la aparicin de multitud de aplicacio-
de miocardiocitos para la miocardioplastia celular, sino la ge-
nes potencialmente beneficiosas dentro de un marco legal
neracin de condrocitos para el tratamiento de reparacin de
vaco y por la influencia de una presin social desinforma-
lesiones cartilaginosas y el tratamiento con osteocitos/osteo-
da. Por otra parte, la informacin desempea un papel prin-
blastos en ciruga traumatolgica. Dos preocupaciones con el
cipal dentro de este debate, dado que determina la opinin
uso teraputico de las clulas madre embrionarias son su ca-
pblica, la cual, en ltimo trmino, a travs de los polticos,
pacidad para formar teratomas in vivo y de sufrir rechazo.
ha de definir los lmites legales (y por tanto ticos y morales)
de las tcnicas de clonacin. En consecuencia, se precisa
Clulas madre adultas como alternativa a la clonacin
informacin veraz del estado de cada una de las aplicacio-
teraputica
nes.
Adems de la obtencin de clulas madre propiamente em- Las tcnicas de clonacin y el uso de clulas madre presen-
brionarias, existe la posibilidad de obtener clulas troncales tan muchas aplicaciones, cada una con sus riesgos y bene-
a partir de tejidos fetales o adultos. Las clulas madre adul- ficios potenciales, que plantean problemas morales y ticos
tas son parte de las clulas especficas de tejidos del orga- particulares24. Por lo tanto, una visin simplista en torno a
nismo posnatal con capacidad de diferenciarse. La principal estas tcnicas, a favor o en contra de todas sus aplicacio-
objecin, y tema de intenso debate, es la opinin de algu- nes, carece de sentido. As, no podemos incluir dentro del
nos grupos sobre que las clulas fetales o adultas posean mismo saco a la genoterapia, la bioingeniera tisular y la re-
una menor capacidad de diferenciacin que la clula em- produccin asistida mediante clonacin. En concreto, el
brionaria y que ello, en consecuencia, pudiera dificultar su empleo de clulas madre procedentes de tejido adulto
transformacin en otros tejidos. A diferencia de las clulas (como las clulas mesenquimales procedentes de la mdu-
madre embrionarias, las clulas madre adultas pueden ob- la sea) carece de muchos de los inconvenientes atribuibles
tenerse de la propia mdula sea y as puede evitarse el re- a las tcnicas de clonacin22.
chazo que resulta de la expresin de las protenas del siste- Actualmente, la gran mayora de la comunidad cientfica es
ma mayor de histocompatibilidad de las clulas madre contraria a la clonacin reproductiva pero se muestra a fa-
embrionarias22. vor de la teraputica. De hecho, desde el ao 1997 existe
Las clulas madre hematopoyticas son las clulas madre un amplio consenso entre naciones (Cumbre de los Ocho
adultas mejor caracterizadas en el ser humano. Las clulas en Denver, Unesco y Asamblea Mundial de la Salud) para
madre mesenquimales derivadas de la mdula sea de no autorizar la clonacin para la reproduccin humana (La
adulto ofrecen una alternativa potencial al uso de las clulas clonacin con miras a la reproduccin de seres humanos:
embrionarias o fetales para el tratamiento celular y gentico cuestiones ticas, disponible en: http://www.unesco.org/
de enfermedades neurodegenerativas, miocardioplastia o bpi/esp/bio98).
reparacin cartilaginosa. La mdula sea contiene no slo Es necesario un debate acerca de los lmites de la investiga-
las clulas hematopoyticas, sino tambin progenitores de cin cientfica en torno a las tcnicas de clonacin nuclear y
tejidos que se pueden considerar como mesenquimales. el uso de las clulas madre. ste debe desarrollarse en un
Esos progenitores se denominan comnmente clulas ma- contexto de informacin y educacin social para corregir la
dre mesenquimales y pueden ser expandidas e inducidas, llamada miopa legislativa25, regular el uso de la clonacin
in vitro o in vivo, a diferenciarse en osteoblastos, condroci- y permitir explorar las aplicaciones de inters.
tos, adipocitos, miotubos, clulas neurales y estromas de
soporte hematopoytico. El potencial mltiple de las clulas
madre mesenquimales, su fcil aislamiento y cultivo, as
como su potencial de expansin, las convierten en una he-
rramienta teraputica atractiva, capaz de cumplir un papel REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
significativo en diversas aplicaciones clnicas22. 1. Wilmut I, Schnieke AE, McWhir J, Kind AJ, Campbell KH. Viable offs-
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