PROCEDIMENTO PARA VERIFICAO DA

PERFORMANCE DAS PIPETAS GILSON

(OPERATION QUALIFICATION)

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 INTRODUO

Este documento descreve o mtodo para verificao da performance das pipetas Gilson
utilizando-se o mtodo gravimtrico. A utilizao dos procedimentos descritos neste
mtodo garante conformidade com as especificaes Gilson para exatido e preciso.
Embora este documento no relacione outros mtodos, que podem estar sendo utilizados
pelo usurio, o mtodo e clculos aqui descritos podem ser aplicados em outros testes, fora
do escopo deste documento.

O teste de conformidade para verificao da exatido e preciso aplicvel a qualquer

pipeta Gilson: Pipetman (P e F), Pipetman Ultra, Distriman ou Microman. Este teste, que
est de acordo com padres internacionais, analisa o sistema de pipetagem como um todo:
pipeta, ponteira e operador.

Nota: Para resultados confiveis, o operador deve ser bem treinado e qualificado.

O mtodo descrito neste documento inclui um procedimento para correo das perdas por
evaporao para pequenos volumes. Tambm, na converso para volume das massas
obtidas na balana, so feitas correes referentes temperatura e presso no momento da
execuo do teste.

O usurio deve estabelecer uma rotina para testar suas pipetas com base em: necessidades
em termos de exatido e preciso, frequncia de uso, nmero de usurios para uma mesma
pipeta, nmero de ciclos em cada utilizao da pipeta e a natureza dos lquidos pipetados.
Auxlio para se estabelecer estes procedimentos est disponvel na Analtica (representante
Exclusivo da Gilson no Brasil).

Nota 1: para a Pipetman Ultra, o teste a ser feito pelo usurio est descrito no Manual de
Operao, como parte do procedimento de recalibrao.

Nota 2: As especificaes de exatido e preciso descritas para cada modelo s so

garantidas pelo fabricante quando se utiliza ponteiras originais Gilson (ponteiras
DIAMOND ).

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 DOCUMENTOS RELACIONADOS

Documento Referncia
Manual de operao da Pipetman P LT801117
Manual de operao da Pipetman F LT801118
Manual de operao da Pipetman 8x200 LT801236
Manual de operao da Microman LT801367
Manual de operao da Distriman LT801285
Manual de operao da Pipetman Ultra LT801441
prEN ISO/ FDIS 8655 *

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 DEFINIES

Exatido (Erro Mdio ou Erro Sistemtico): diferena entre o volume dispensado e o

volume nominal ou o volume selecionado na pipeta.

Calibrao (Ajuste): conjunto de operaes que estabelecem a relao entre o volume

dispensado e o volume nominal ou selecionado correspondente na pipeta.

Volume morto de ar: nas pipetas de deslocamento de ar, o volume de ar entre a parte
inferior do pisto e a superfcie do lquido.

Taxa de evaporao: estimativa da perda de gua causada pela evaporao durante o

processo de pesagem.

Anlise gravimtrica: procedimento geral baseado na determinao da massa das

alquotas de gua dispensadas por uma pipeta. Os valores so corrigidos com relao
perda por evaporao, e ento, a massa real e o volume so calculados, com base na
densidade da gua em temperaturas especficas com correes para a presso atmosfrica
do local (fator Z).

Volume Nominal: maior volume selecionvel pelo usurio e especificado pela Gilson.

Nota: isto significa que, para uma pipeta de volume varivel com uma faixa de volume til
de 10l a 100l, o seu volume nominal 100l.

Volume selecionado: volume ajustado pelo usurio, para a dispensa do volume escolhido
dentro da faixa de volume til.

Nota: para as pipetas e volume fixo, o volume selecionado igual ao volume nominal.

Preciso (Erro Aleatrio): disperso dos volumes dispensados ao redor da mdia dos
volumes dispensados. Tambm conhecida (de acordo com o contexto) como desvio padro,
reprodutibilidade ou repetibilidade.

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Repetibilidade: a disperso entre os resultados de medidas sucessivas (realizadas em um
curto espao de tempo), onde no h alterao dos parmetros nem das condies.

Reprodutibilidade: a disperso entre os resultados de medidas realizadas em condies

diferentes (local ou operador diferente), mantendo todos os parmetros constantes.

Especificaes Volumtricas (Erros Mximos Admissveis): so os extremos permitidos

(superior e inferior) para o desvio entre o volume dispensado e o volume nominal ou o
volume selecionado.

Faixa de volume til: parte do volume nominal que pode ser dispensado, dentro do erro
mximo especificado na Norma Internacional ISO/ DIS 8655. O valor superior da faixa de
volume til sempre o volume nominal. O valor inferior 10% do volume nominal, se no
estiver especificado de forma diferente pelo fabricante.

Recalibrao (ajuste feito pelo operador): um procedimento, definido pela Gilson e que
pode ser executado pelo usurio final, para garantir que a pipeta opere conforme as
especificaes publicadas.

Pesagem: pesar significa determinar a massa de uma alquota.

Fator Z: fator de converso (L/mg) considerando-se a densidade da gua em contato com

o ar, em funo da temperatura e da presso.

Ex: Designao (abreviatura) de um instrumento projetado para dispensar volumes.

In: Designao (abreviatura) de um instrumento projetado para aspirar volumes.

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 CONDIES AMBIENTAIS

A sala de teste (laboratrio) deve ter controle de temperatura e umidade para que as
condies ambientais do local onde ser feita a verificao e a temperatura dos
equipamentos utilizados sejam estveis e homogneas antes e durante todo o procedimento.

A temperatura da pipeta e da gua destilada utilizada no teste gravimtrico deve estar

estabilizada antes do incio do procedimento (coloque-as na sala 12 horas antes do incio do
procedimento). Idealmente, a verificao deve ser feita nas seguintes condies:

1) Temperatura estvel (gua,pipeta e ambiente) em 21.5 1.5C

Se por alguma razo a pipeta for verificada em uma temperatura fora da especificada, a
correo feita utilizando-se um fator Z diferente para a converso da massa em volume
(l/mg).

2) Umidade Relativa de 45% a 75%

Para minimizar a taxa de evaporao, esta faixa de umidade relativa deve ser mantida
durante todo o procedimento de verificao.

3) Presso baromtrica de 1013 25 hPa

Se o local do teste possuir uma presso atmosfrica diferente, a correo feita utilizando-
se um fator Z diferente na converso de massa para volume (l/mg).

OPERADOR

Operao da pipeta

Um procedimento adequado de pipetagem contribui significantemente para a

reprodutibilidade dos resultados no teste de verificao. Operadores sem experincia
podem ter variaes importantes nos resultados. Para resultados confiveis, o operador
deve ser bem treinado e qualificado.

Se deve ter cuidado em manter um ritmo constante na aspirao e na dispensa das

alquotas: pressionar/ liberar o boto de operao suavemente e com velocidade constante.,

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Observar a profundidade de imerso da ponteira (veja esta informao no manual de
operao da pipeta que est sendo testada).

Treinamento

O teste de conformidade deve ser feito por um operador qualificado. Se necessrio, contate
a Analtica para maiores informaes sobre treinamento.

PONTEIRAS

A pipeta que ser testada deve ser operada segundo as instrues fornecidas pelo manual de
operao. Novamente, com base no manual de operao que acompanha a pipeta que ser
testada, tenha certeza, antes de comear o teste, que ela est limpa, montada corretamente e
de estar utilizando genunas ponteiras Gilson.

Como a qualidade das ponteiras utilizadas no teste um fator importante para se assegurar
que a performance da pipeta esteja de acordo com a especificao, a escolha da ponteira
um passo fundamental no processo de calibrao. Por exemplo, todos os modelos da
Pipetman possuem calibrao de fbrica, realizada com ponteiras Gilson Diamond, de
tima qualidade. Ento, para a Pipetman, voc deve usar exclusivamente as ponteiras
Gilson Diamond para realizar o teste gravimtrico.

EQUIPAMENTOS UTILIZADOS NO TESTE

Para garantir a integridade do procedimento de verificao, todos os equipamentos

utilizados durante o procedimento devem ser verificados regularmente.

Balana

Balanas apropriadas, conforme a OIML R 76-1 (OIML - International Organization of

Legal Metrology), devem ser selecionadas para realizao do teste de performance da
pipeta, conforme tabela abaixo.

As balanas devem ser calibradas e certificadas por pessoal qualificado usando pesos
rastreveis a autoridades reconhecidas nacionalmente (Empresas/ Instituies pertencentes
Rede Brasileira de Calibrao - RBC).
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A legibilidade da balana deve ser escolhida de acordo com o nvel de exatido requerido,
que deve ser um dcimo do desvio a ser conseguido. Para a Pipetman e Microman, escolha
a balana de acordo com o volume nominal da pipeta - volume mximo - (veja tabela). Para
a Distriman, os volumes que sero testados so especficos para cada modelo de Distritip,
de acordo com a alquota de volume especfica (escolha a legibilidade de acordo com o
volume da alquota).

VOLUME NOMINAL DISPLAY (mg) LEGIBILIDADE DA BALANA (g)

-6
< 100L 0,001 10
5
100L a 1000L 0,01 10-
4
> 1000L 0,1 10-

Termmetro

Use um termmetro calibrado para medir a temperatura da gua no comeo e no final de

cada srie de teste. Use um termmetro com uma incerteza de medio de at 0.1C.

Recipientes
Recipientes que sero utilizados durante o procedimento:

- Recipiente de origem
o recipiente que contm a gua que ser utilizada para a realizao das medidas (o
volume deste recipiente deve ser suficiente para a execuo de TODAS as medidas).

- Recipiente de pesagem
o recipiente que ser utilizado para a realizao da medida ( o que ser colocado
no prato de pesagem da balana).

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 - Recipiente de descarte
um terceiro recipiente que recolher as alquotas que no sero pesadas.

Containers especiais so utilizados como recipiente para a dispensa da gua durante a

pesagem. O controle da evaporao durante o teste gravimtrico essencial. Para
minimizar a evaporao, a Gilson utiliza recipientes cilndricos e com tampa, feitos de
plstico no poroso.

A Gilson fornece um kit para pesagem (ref. F144700) que contm 4 recipientes para
pesagem de tamanhos diferentes (tipos A, B, C e D), 3 recipientes de origem (recipiente
que contm a gua que ser utilizada para a realizao das medidas, e que deve ser
suficiente para a execuo de todas as medidas), filtros para limpeza/ secagem dos
recipientes e uma pina. Componentes individuais do kit tambm esto disponveis como
peas de reposio.

Quando os volumes a serem testados so menores do que 200L, a Gilson utiliza

recipientes para pesagem com tampas (tipo A e B, mostrados na pgina seguinte).

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 recipiente tipo A e sua tampa (ambos tm que ser manipulados com a pina) deve ser
utilizado para volumes de at 20 L (requer balana de 6 casas).

recipiente tipo B e sua tampa devem ser utilizados para volumes entre 21 a 200L
(requer balana de 5 casas). Este recipiente possui orings da Pipetman P5000
acoplados para evitar aquecimento devido a manipulao (evitando-se contato direto da
mo do operador com o recipiente evita-se aquecimento da gua).

recipiente tipo C (50 mm x 35 mm) deve ser utilizado com volumes entre 201 a 5000L
(requer balana de 4 casas).

recipiente tipo D (70 mm x 50 mm) deve ser utilizado para volumes acima de 5000L
(requer balana de 4 casas).

Tipo A

Tipo B

Tipo C

Tipo D

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gua

No teste, utiliza-se gua destilada ou deionizada e degaseificada, conforme a Norma ISO

3696, temperatura ambiente. Para evitar flutuaes na temperatura da gua, use um
recipiente de origem grande (por exemplo, o recipiente tipo D, mostrado anteriormente). O
recipiente de origem deve conter gua suficiente para a realizao de todas as medidas.

VERIFICAO DA PERFORMANCE
A verificao da performance analisa tanto a exatido (erro sistemtico) como a preciso
(erro aleatrio). Condies, procedimentos e qualificaes previamente descritas neste
documento devem ser implantados para garantir a validade dos resultados dos testes.

Aps rinsar a ponteira, faa 10 pesagens individuais para cada volume selecionado. Para as
pipetas de volume varivel trs volumes diferentes devem ser selecionados de acordo com a
faixa de volume do modelo que est sendo avaliado (veja a prxima tabela). Estes volumes
devem ser o volume nominal (mximo), 50% do volume nominal (volume intermedirio) e
o volume mnimo da faixa de volume do modelo. Para as pipetas de volume fixo (Pipetman
F) utiliza-se apenas o volume nominal.

1. Ajuste na pipeta o volume do teste (este deve ser mantido durante todo o
procedimento).

2. Estime a taxa de evaporao (para volumes pequenos, menores do que 20l).

3. Faa o teste de verificao: registre as massas no Relatrio de Verificao de

Performance.

4. Faa os clculos: registre os resultados no Relatrio de Verificao de Performance.

5. Compare os resultados com as especificaes de exatido e preciso que esto

relacionadas no manual de operao da pipeta.

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 Volume Mnimo (L) Volume Intermedirio (L) Volume Mximo (L)

PIPETMAN
P2, U2 0,5 1 2
P10, U10 1 5 10
P20, U20 2 10 20
P100, U100 20 50 100
P200, U200 50 100 200
P8x200 20 100 200
P1000, U1000 200 500 1000
P5000, U5000 1000 2500 5000
P10 ml, U10ml 1000 5000 10000

MICROMAN
M10 1 5 10
M25 3 12,5 25
M50 20 - 50
M100 10 50 100
M250 50 125 250
M1000 200 500 1000

DISTRIMAN
125L 2 5 10
1250 L 20 50 100
12,5 ml 200 500 1000

Estimando a taxa de evaporao (massa mdia evaporada por ciclo de pesagem)

Para volumes abaixo de 200 L, a pesagem requer o uso de tampas nos recipientes para
pesagens. Para volumes abaixo de 20l, alm da tampa, necessrio o uso de pina. O
objetivo minimizar, controlar e quantificar a perda por evaporao durante o ciclo de
pesagem.

A evaporao pode ser estimada, realizando-se uma srie de quatro simulaes de

pesagens, onde se repete o ciclo de pesagem sem que haja dispensa de gua no recipiente

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de pesagem. A diferena total atribuda evaporao calculada e dividida por 4, para se
obter uma mdia. A faixa expressa em mg/ciclo (ou se for um nico ciclo, deve ser
expresso em mg).

As taxas de evaporao geralmente esto entre 0,010mg e 0,025 mg por ciclo de pesagem.
Recalcule a taxa de evaporao a cada 4 horas ou sempre que as condies ambientais
forem alteradas (temperatura, presso e umidade).

1. Adicione gua ao recipiente para pesagem at que este esteja com 1/3 do seu volume
cheio.

2. Utilize a pina para colocar a tampa no recipiente e coloc-lo no prato da balana.

3. Com a pipeta, aspire a alquota do recipiente de origem.

4. Tare a balana e remova o recipiente para pesagem do prato da balana.

5. Use a pina para remov-lo.

6. Dispense a alquota no recipiente de descarte ou retorne-a para o recipiente de origem.

No a dispense no recipiente para pesagem.

7. Utilize pinas para colocar a tampa no recipiente e coloc-lo no prato da balana.

8. Registre o resultado e1.

9. Repita as etapas de 3 a 8, trs vezes para obter e2, e3 e e4.

10. Calcule a perda/ ciclo: e = (e1 + e2 + e3 + e4)/4 (mg).

11. A evaporao por ciclo e (mg) deve ser adicionada ao peso mdio antes do clculo do
volume mdio.

Teste Gravimtrico

As tcnicas de aspirao e dispensa esto descritas no manual de operao da pipeta que

est sendo testada. Embora vrios mtodos alternativos de pipetagem sejam possveis,
sempre utilize o modo normal (modo direto, no utilizar o modo reverso). Para todas as
pipetas, evite segurar ou esquentar o porta-cone com a mo durante o teste.

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Para pipetas multi-canal, encaixe as ponteiras em todos os canais, mas teste um canal por
vez. E registre os resultados para cada canal.

1. Preparao

1.1 Coloque gua do recipiente de origem no recipiente para pesagem a uma

profundidade de, no mnimo, 3 mm.

1.2 Mea e registre a temperatura da gua do recipiente de origem (t1), a presso do ar e

a umidade relativa da sala. Se o recipiente para pesagem possui tampa, coloque-a (usando
uma pina).

1.3 Encaixe uma nova ponteira.

1.4 Selecione e ajuste o volume que ser testado (este no dever ser alterado durante o
teste).

1.5 Pr-rinse a ponteira, aspirando a alquota do recipiente de origem e dispensando no

recipiente de descarte 5 vezes, para equilibrar a umidade do ar dentro da atmosfera da
pipeta.

1.6 Coloque o recipiente para pesagem com gua no prato da balana e tare-a (m0= 0).

2. Ciclo do teste

Cada ciclo do teste deve demorar menos de 1 minuto. Entretanto, um ritmo constante
durante a operao de pesagem deve ser mantido (o ritmo do ciclo e entre os ciclos).

2.1 Encaixe uma nova ponteira na pipeta.

2.2 Pr-rinse a ponteira aspirando e dispensando no recipiente de descarte uma vez.

2.3 Aspire, como especificado no manual de operao da pipeta, o volume a ser testado
(consulte tabela pgina 12).

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2.4 Se o recipiente para pesagem possuir tampa, remova-a usando a pina.

2.5 Dispense o volume testado no recipiente para pesagem e recoloque a tampa com o
auxlio da pina.

2.6 Registre a massa m1 do volume testado.

2.7 Tare a balana.

3. Repita o teste descrito acima (do item 2.1 ao 2.7) at completar 10 medidas (m1 a
m10).

4. Aps a ltima medida, verifique e registre a temperatura da gua do recipiente de

origem (t2), a presso atmosfrica e a umidade relativa da sala.

CLCULOS
Frmulas (Parte 1 de 2)

1. Clculo da temperatura mdia

Calcule a temperatura mdia (t) da gua

t = (t1 + t2)/ 2
destilada (prximo a 21,5 1,5C)

2. Clculo da presso mdia

Use a presso baromtrica mdia (B) e a

temperatura mdia (t) para determinar o
B = (B1 + B2)/ 2
Fator-Z correspondente na tabela.

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3. Clculo do volume a partir da massa

Multiplique as massas (mg), depois das

correes das perdas por evaporao (para
Vi= Z (mi + e )
volumes abaixo de 200 L) pelo fator Z para
obter os volumes (L).

Vi = volumes individuais (L)

mi= massas individuais (mg)
e = taxa de evaporao (mg)
Z= fator Z (L/ mg)

4. Clculo do volume mdio

Aps calcular o volume individual das

pesagens, calcule o volume mdio (resultado n
expresso em L). V = 1
n Vi
i =1

Vi= Volumes individuais

V = volume mdio
n= nmero de pesagens

Frmulas (Parte 2 de 2)

5. Exatido (Erro Sistemtico)

Diferena entre o volume mdio do teste e o es = V - Vs

volume ajustado na pipeta. Para pipetas de
es = erro mdio
volume fixo, substitua Vs por Vo = volume
nominal. A exatido pode ser expressa em L V = volume mdio
ou...
Vs = volume ajustado

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...como porcentagem: es = 100% (V - Vs)/Vs

6. Preciso (Erro aleatrio)

Disperso dos volumes dispensados ao
redor da mdia dos volumes dispensados.
Tambm conhecida (de acordo com o
contexto) como desvio padro, Vi = volumes individuais
reprodutibilidade ou repetibilidade. V = volume mdio (calculado como no item
anterior)
n = nmero de medidas
DP = desvio padro

Como porcentagem, tambm conhecido como CV = (DP/ V)x 100%

coeficiente de variao (CV).

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Clculos: fator Z
Z = fator de converso (L/ mg), t (C) = mdia da temperatura* , B = presso atmosfrica
(hPa)

* esta mdia obtida a partir do valor da temperatura da gua do recipiente de origem

medida no incio do teste (t1)e da temperatura da gua do recipiente de origem medida ao
final do teste (t2). Consulte pgina 15 item "Clculo da temperatura mdia".

REF: LT802292B NOV/ 2001 Pag 18 / 26

 RELATRIO DO PROCEDIMENTO DE VERIFICAO

Identificao da pipeta
Modelo Nmero de srie Ponteiras utilizadas no teste

Identificao do tcnico
Empresa Nome Tel/Email

Tcnico Nome Tel/Email

Condies
Data/ Hora do teste Localizao

Temperatura (C) Umidade (%) Presso (hPa)

Balana
Modelo Nmero de srie Sensitividade

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Resultados do teste
De acordo com o documento "Procedimento para Verificao da Performance das Pipetas
Gilson".

mi (mg) Vi (L) mi (mg) Vi (L) mi (mg) Vi (L)

Pesagem 1
Pesagem 2
Pesagem 3
Pesagem 4
Pesagem 5
Pesagem 6
Pesagem 7
Pesagem 8
Pesagem 9
Pesagem 10
Volume mdio (V, L)
Exatido (V - Vo)
Exatido (%)
Preciso (DP)
Preciso (CV, %)

COMPARADO COM AS ESPECIFICAES: APROVADA

REPROVADA

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 TABELAS DE ESPECIFICAES GILSON
Pipetman Ultra

U2

U10

U20

U100

U200

U1000

U5000

U10 ml

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Pipetman F

Microman

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Distriman

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 Laboratrio de Servios de Pipetas (LSP)

Um dos nossos laboratrios (sob orientao e superviso da Gilson) dedicado

exclusivamente s manutenes e calibraes das pipetas Gilson. Peas originais e pessoal
treinado na Frana garantem servios de qualidade internacional. Cada pipeta recebida
passa por um processo de descontaminao, desmontagem, limpeza, troca de peas
danificadas, montagem e calibrao. Todo o trabalho feito de acordo com as Normas
Internacionais Gilson, em ambiente controlado e com instrumentos de medidas (balanas,
pesos padro, termmetros, etc) calibrados e com certificados rastreavis Rede Brasileira
de Calibrao (RBC). O Certificado de Conformidade, que emitido ao final dos servios,
garante que sua pipeta est operando dentro das rgidas especificaes Gilson. Peas
originais (porta-cone, selo, oring, boto, etc) so disponveis para que o usurio possa, ele
mesmo, realizar os procedimentos bsicos de manuteno.

O envio das suas pipetas muito fcil!!

Importante: Descontamine suas pipetas antes de envia-las

Se voc est na CIDADE DE SO PAULO ou GRANDE SO PAULO, solicite a

retirada das suas pipetas via fax ou via e-mail:
Fax: (11) 2162-8081
E-mail: LSP@novanalitica.com.br, aos cuidados do Laboratrio de Servios de
Pipetas.

Se voc preferir, envie-nos sua pipeta via Sedex (lembre-se de reforar a embalagem,
evitando danos durante o transporte), ao seguinte endereo:
Nova Analtica Ltda
Rua Assungui, 432 - Sade
04131-000 - So Paulo - SP
Aos cuidados do Laboratrio de Servios de Pipetas

REF: LT802292B NOV/ 2001 Pag 25 / 26

 Em outras localidades, envie-nos sua pipeta via Sedex para o mesmo endereo
mencionado acima ou contate um de nossos representantes, espalhados pelo Brasil.
Consulte-nos para maiores detalhes.

Oramento Prvio
Assim que a pipeta recebida em nosso laboratrio, ela inspecionada e um oramento
prvio enviado via fax ou e-mail ao cliente. Nenhuma pipeta ser reparada ou
calibrada sem aprovao prvia do responsvel. O oramento gratuito. Caso voc no
aprove os servios, no haver outras despesas exceto o transporte de ida e volta

Rua da Tranquilidade, 38
Rua Assugui, 432 21221-270 - Rio de Janeiro -RJ
04131-000 - So Paulo - SP Fone (0XX21) 3351 - 6895
Fone (0XX11) 2162 - 8080 Fax (0XX21) 3351 - 4653
Fax (0XX11) 2162 - 8081 E-mail: analiticario@novanalitica.com.br
Email: analitica@novanalitica.com.br

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