Pgina 1

revisin Plasmodium falciparum

invasin de los eritrocitos: Combinando
Funcin con Immune Evasion
Gavin J. Wright 1,2 *, Julian C. Rayner 2 * 1 Laboratorio de Sealizacin de
Superficie Celular, Instituto Wellcome Trust Sanger, Wellcome Trust Genome
Campus, Hinxton, Cambridge, Reino Unido, 2 Malaria Program, Wellcome Trust
Sanger Institute, Wellcome Trust Genoma Campus, Hinxton, Cambridge, Reino
Unido
El P lasmodium falciparum Merozoito: Un Dedicado Mquina de Invasin A lo largo de
su extraordinariamente complejo ciclo de vida, Plasmodium Los parsitos deben
navegar por una amplia gama de Ambientes extracelulares en vertebrados e
invertebrados. Para lograr esto, el parsito se convierte en una serie de Formas
morfolgicas o "zoitas", cada una de las cuales est especializada Desafo
biolgico particular. Merozoitos-clulas ovoides aproximadamente 1 m de largo
que se libera de un eritrocito infectado Una vez que el desarrollo est completo-son
el eptome de un Etapa de Plasmodium. Los merozoitos no se replican fuera de su
husped: Existen puramente para encontrar e invadir los eritrocitos. Para ello, Una
serie de maniobras complejas, primero visualizadas por Estudios pioneros en
microscopa de video y microscopa electrnica Hace ms de 30 aos [1,2]. Los
contactos iniciales entre Merozoito y eritrocitos puede ocurrir en cualquier punto
del Merozoita, que son rpidamente seguidas por la reorientacin Del merozoito
polar de forma que su extremo apical adquiera directamente el Eritrocitos (ver
Figura 1). Esto permite que el parsito Despliegue una serie de orgnulos
secretores especializados situados apicalmente: Rhoptries, micronemas y grnulos
densos. Estos orgnulos entonces Descargar su contenido en un horario
reglamentado y ordenado Durante e inmediatamente despus del proceso de
invasin en el sitio de Contacto [3-5]. Los ligandos liberados de esta manera
Receptores de superficie de eritrocitos para formar un engrosamiento denso de
electrones De la membrana eritrocitaria en el nexo de eritrocito- Merozoito
contacto. La unin se hace circular alrededor del merozoito Superficie en una
estructura similar a una correa, accionada por un motor actina-miosina Que est
anclada al complejo de membrana interna del merozoito (IMC), que contribuye a la
formacin y mantenimiento de la Merozoito caracterstico forma ovoide [6, 7]. La
invasin se ha completado Como la unin mvil se cierra detrs del merozoito en
la moda Diafragma del iris, dejando el merozoito encerrado dentro de Vacuola
parasitforo. El proceso general de invasin puede ser complejo, pero tambin
Extremadamente rpido. Una serie de estudios recientes coinciden en que la
invasin Est completa, en promedio, menos de dos minutos despus de que los
merozoitos estn Liberado [8, 9]. Por qu la necesidad de velocidad? La respuesta
probablemente radica en El hecho de que el merozoito es una de las pocas etapas
del Plasmodium Ciclo de vida en el que el parsito es extracelular y por lo tanto
Directamente expuestos a un ataque inmunolgico (vase la figura 2). A
Sobrevivir, el parsito debe restringir su ventana de exposicin a Minimizar la
neutralizacin por lisis mediada por el complemento o Opsonizacin por
anticuerpos derivados del husped. Velocidad sola, sin embargo, No es suficiente,
y el merozoito tambin despliega una serie de Mecanismos para mantener el
sistema inmunolgico en la baha lo suficientemente Completar el proceso de
invasin. Entender estos mecanismos Es ms que una pregunta biolgica
interesante. Porque La invasin de eritrocitos es una parte obligada del ciclo de
vida del parsito, Bloquear la invasin debe prevenir el crecimiento del parsito,
haciendo la invasin Una vacuna atractiva. Sin embargo, los ensayos de vacunas
Han vacilado, lo ms probable es que hayan sido Contrarrestado por uno o ms de
la evasin inmune del merozoito Mecanismos. Es slo mediante la comprensin de
la inmuno- Mecanismos de proteccin que podemos esperar para identificar y
Puntos dbiles que podran ser objeto de una vacuna. Cito: Wright GJ, Rayner JC
(2014) Plasmodium falciparum Erythrocyte Invasin: combinando la funcin con
la evasin inmune. PLoS Pathog 10 (3): E1003943. Doi: 10.1371 /
journal.ppat.1003943 Publicado el 20 de marzo de 2014 Copyright: 2014
Wright, Rayner. Este es un artculo de acceso abierto distribuido en los trminos de
la licencia Creative Commons Atribucin , que permite Uso, distribucin y
reproduccin sin restricciones en cualquier medio, siempre y cuando El autor
original y la fuente son acreditados. Financiacin: Este trabajo fue apoyado por el
Wellcome Trust (nmero de subvencin 098051) y el Consejo de Investigacin
Mdica del Reino Unido (concesin nmero MR / J002283 / 1). los Los donantes
no tenan ningn papel en el diseo del estudio, la recoleccin y anlisis de
Publicar o preparar el manuscrito. Intereses Competentes: Los autores tienen una
solicitud de patente relacionada con el Utilidad de los antgenos de merozoto de
Plasmodium falciparum como vacunas candidatas. Esta No altera nuestra adhesin
a todas las polticas PLOS sobre el intercambio de datos y materiales. * E-mail:
gw2@sanger.ac.uk (GJW); Julian.rayner@sanger.ac.uk (JCR)
Abstracto
Todos los sntomas y la patologa de la malaria son causados por Los estadios
intraeritrocitarios de la vida del parsito Plasmodium ciclo. Porque los parsitos de
Plasmodium no pueden replicar Fuera de una clula husped, su capacidad de
reconocer e invadir Eritrocitos es un paso esencial para la supervivencia del
parsito Y la patognesis de la malaria. Esto convierte la invasin en un Aliado de
la vacuna, especialmente porque es uno de los Las pocas etapas en las que el
parsito est directamente expuesto al Sistema inmune humoral del anfitrin. Esta
aparente vulnerabilidad, Sin embargo, ha sido contrarrestada por el parsito, que
Mecanismos moleculares sofisticados para evadir el Respuesta inmune del husped
para que los parsitos asintomticamente Replicar dentro de individuos inmunes.
Estos mecanismos Incluyen la expansin de los ligandos de invasin parasitaria,
En mltiples y aparentemente redundantes caminos de invasin, Protenas
polimrficas de superficie del parsito que Inmunolgicamente distintas, y las
protenas parasitarias que Poco inmunognico. Estas formidables defensas han
Intentos frustrados de desarrollar una etapa eficaz de la sangre Vacuna, lo que lleva
a muchos a preguntarse si realmente hay Explotable en las defensas de evasin
inmune del parsito. Aqu, revisar los avances recientes en el sub- De pie del
campo de invasin de eritrocitos de P. falciparum, Discutir algunos de los retos que
hasta ahora han impedido Desarrollo de vacunas en fase sangunea y concluyen
que El ligando RH5 de la invasin del parsito representa un Pinch punto que
podra ser vulnerable a la vacunacin.
PLOS Patgenos | Www.plospathogens.org 1 Marzo 2014 | Volumen 10 | Nmero
3 | E1003943

Pgina 2
Figura 1. La invasin de eritrocitos es un proceso complejo de varios pasos. Las
diferentes etapas de la invasin de eritrocitos se dibujan en forma de dibujos
animados. los Se piensa que diferentes familias de protenas discutidas en esta
revisin operan en diferentes etapas durante la invasin, con los MSPs
funcionando muy pronto PfRH y PfEBAs que funcionan durante la formacin de
un contacto estrecho entre el pex de los merozoitos y la superficie de los
eritrocitos y AMA1-RON interaccin est estrechamente asociado con la propia
unin en movimiento [4, 17]. Revisin detallada de la base molecular y
ultraestructural de Invasin estn disponibles en otras revisiones [15 - 17, 24]. Doi:
10.1371 / journal.ppat.1003943.g001 Figura 2. merozoitos d e Plasmodium se enfrentan a
una serie de retos inmunolgicos. Los merozoitos son la nica etapa extracelular
del Plasmodium Ciclo de vida y por lo tanto estn expuestos a una serie de
mecanismos de ataque inmune, como se ilustra en forma de dibujos animados. Los
antgenos de los merozoitos son conocidos por ser los Objetivo de las respuestas de
anticuerpos, que operan tanto por opsonizacin que conduce a la fagocitosis y por
simple impedimento estrico del receptor-ligando Interacciones crticas para la
invasin. La deposicin del complemento sobre la superficie del merozoito
tambin puede jugar un papel en el aclaramiento del parsito. Para evitar estos
ataques Los parsitos de Plasmodium han desarrollado una serie de respuestas de
evasin distintas. Algunos antgenos de merozoitos tales como AMA1 son
altamente Polimrfico, mientras que los miembros de la PfRH y EBA multigene
familias son en gran parte redundantes y tienen perfiles de expresin variable.
Ambos Las estrategias reducen el desarrollo de la inmunidad protectora forzando
la respuesta de anticuerpos a reconocer eficientemente mltiples objetivos con el
fin de montar Una respuesta eficaz. Por ltimo, RH5 parece ser poco
inmunognico en el contexto de las infecciones naturales, tal vez debido a los
limitados niveles de expresin Y la exposicin. Doi: 10.1371 /
journal.ppat.1003943.g002 PLOS Patgenos | Www.plospathogens.org 2 Marzo
2014 | Volumen 10 | Nmero 3 | E1003943

Pgina 3
Distraccin a travs de la diversidad Dada la complejidad del proceso de invasin,
no es sorprendente que El merozoito expresa una diversidad de invasiones
asociadas Protenas. La combinacin de secuenciacin del genoma [10], a gran
escala Gene [11, 12] y los estudios de perfiles de protenas [13, 14], junto con la
Rpida expansin en P. falciparum-tecnologas genticas experimentales [15] han
identificado ms de 50 P. falciparum protenas que son Hiptesis de alguna manera
estar involucrados en el proceso de invasin, Aunque en la gran mayora de los
casos su funcin precisa es desconocido. Los ms bien estudiados han sido
organizados en Distintas clases funcionales: MSPs (merozoite surface proteins),
que Forman un revestimiento estructuralmente complejo alrededor de la superficie
del merozoito, y Los antgenos de unin a eritrocitos P. falciparum, relacionados
con la P. vivax duffy vinculante protena) y PfRHs (P. falciparum reticulocito
Vinculante protena [RBP] homlogos, relacionados con el P. vivax RBPs
[PvRBPs]), que se almacenan en orgnulos apicales especializados, la Rhoptries y
micronemas [16, 17]. PfRHs y PfEBAs se cree que funcionan ms tarde Durante la
invasin, y al menos algunos miembros pueden ser La superficie del merozoito de
manera regulada despus de la Merozoito-eritrocitos de contacto se ha hecho [5,
18]. MSPs, por Contraste, se cree que funcionan durante las fases iniciales de
contacto De invasin y estn expuestos a anticuerpos tan pronto como el merozoito
Se libera en el torrente sanguneo. Para evitar la inmunidad del husped Respuesta,
muchos MSPs son altamente polimrficos, y los genes MSP Frecuentemente llevan
firmas de estar bajo seleccin de equilibrio Presin [19, 20], dando lugar a la
circulacin simultnea de Mltiples variantes del mismo gen dentro de una
poblacin. Muchos de Los MSP ms abundantes, tales como MSP1 y MSP2, son
diallicos, Con mltiples variantes encontradas dentro de cada clase allica. Otros
MSPs Son parte de familias multignicas, y en algunos casos, como el 6-cys
Protenas, un sistema de expresin variante clonal resulta en la Expresin de
diferentes miembros de cada familia en diferentes Parsito lneas [20]. En
conjunto, estos mecanismos Nismos pueden resultar en merozoitos
inmunolgicamente distintos dentro Persona infectada sola, especialmente si son
simultneamente Infectados con mltiples cepas genticamente distintas. En
semejante Circunstancia, incluso un sistema inmunolgico Bloquear efectivamente
la invasin de todos los merozoitos dentro de Perodo de exposicin extracelular.
Este enfoque de distraccin a travs de la diversidad es muy efectivo. Las
respuestas de anticuerpos del husped a MSPs son a menudo muy fuertes en
adultos Que han sido previamente infectados con P. falciparum en mltiples
Ocasiones, y las respuestas inmunes anti-merozoita que ellos Se sabe que son
capaces de reducir la efectividad de Invasin de parsitos [21]. A pesar de esto, la
inmunidad a P. falciparum es Slo parcialmente efectivo, con poblaciones de
parsitos Contina multiplicndose incluso dentro de los adultos que estn
clnicamente Inmune-sus respuestas inmunes pueden limitar los sntomas, pero son
No es suficiente para erradicar los parsitos. Este hecho revela la Desafo que
enfrenta el desarrollo de vacunas de bloqueo de invasin. Eso Tericamente ser
posible desarrollar vacunas multivalentes que Objetivo mltiples variantes
genticas de un determinado MSP, pero el resultado, En el mejor de los casos, es
probable que slo recapitule la inmunidad natural -un Bloqueo parcial que podra
ser suficiente para prevenir la enfermedad ( Pero es poco probable que sea
suficiente para prevenir la infeccin o Contribuir significativamente al objetivo de
la erradicacin del paludismo. Debera Cabe sealar que, aunque los altos niveles
de diversidad son la Los MSPs, subdominios de MSPs especficos pueden ser
altamente conservados y, Por lo tanto, tienen potencial como objetivos de la
vacuna. El C-terminal Dominio de MSP1, MSP1-19, es con mucho el ms bien
estudiado Ejemplo, y los anticuerpos que se dirigen a MSP1-19 pueden tener
Potentes efectos inhibitorios invasivos [22]. A pesar de estos atractivos , Ensayos
de fase IIb de una regin de MSP1 que incluye MSP1- 19 fueron decepcionantes,
lo que sugiere que una mayor profundidad de sub- De este objetivo es necesario
[23]. Elucidar los Mecanismos Moleculares de la Invasin Revela la redundancia
No slo son MSPs a menudo muy polimrficos, por lo que Desafiantes, tambin
suelen tener una definicin Funciones. Un enfoque ms racional sera utilizar un
mecanismo Comprensin de las molculas del parsito y del husped Invasin para
identificar objetivos para un posible bloqueo de invasin teraputico. Durante
muchos aos, la investigacin sobre la invasin se ha Papel de los PfRHs y
PfEBAs, y este trabajo ha dado lugar a importantes Avances en la comprensin
mecanicista [16, 24]. sin embargo, el Potencial de PfRHs y PfEBAs como
objetivos de intervencin ha sido Compuesto por otro mecanismo de evasin
utilizado por el parsito- Redundancia funcional. Se sabe desde hace tiempo que P.
Los merozoitos de falciparum pueden utilizar varias vas alternativas para invadir
Eritrocitos humanos. La definicin de lo que constituye exactamente una '' Camino
de invasin alternativo '' no est claro, y la zona en general Urgentemente una
revisin sistemtica y un acuerdo sobre terminologa. Una definicin simple y
pragmtica es que cuando el Repertorio de receptores de eritrocitos disponibles
est restringido in vitro Ya sea por tratamiento enzimtico (generalmente con
tripsina, quimotripsina, O neuraminidasa) o mediante el uso de eritrocitos de
humanos Donantes con grupos sanguneos definidos, puede haber una Resultados
fenotpicos dependiendo de la cepa P. falciparum. Cultura- Se sabe que las cepas
adaptadas de P. falciparum tienen Habilidades diferenciales para invadir ambos
eritrocitos tratados con enzimas [25] y eritrocitos de individuos que carecen de
expresin de Especficos receptores de superficie [26, 27]. Observaciones similares
han sido Aislamientos de campo, tanto en cepas que han sido recientemente
Adaptado a la cultura in vitro [28], y en parsitos que nunca han Fueron adaptados
pero fueron fenotpicos en su primera ronda de invasin en Vitro [29, 30]. Una
gran cantidad de datos experimentales sugiere que es Las familias de protenas
PfRH y PfEBA que son responsables de esta Redundancia funcional: cuando los
ligandos individuales en estas familias son Genticamente, un cambio en la
capacidad de los parsitos para invadir Los eritrocitos tratados con enzimas es el
ms comnmente observado Fenotipo [31 - 34]. Se pueden observar efectos
similares mediante la adicin De anticuerpos dirigidos a los RH (protena de unin
a reticulocitos Homlogos) o EBA (antgenos de unin a eritrocitos) en parsitos
Crecimiento ensayos [35 - 37]. Es casi seguro que el parsito ha evolucionado
Redundancia en ligandos de invasin para contrarrestar el husped humoral
respuesta inmune. Como se seal anteriormente, los miembros de la EBA y RH
Familia son conocidos como blancos de anticuerpos husped, y Parsito dependa
de un nico ligando para las etapas posteriores de la El husped podra adquirir
lgicamente una inmunidad protectora estril parsito. La respuesta del parsito a
esto parece haber sido Expandir estas dos familias de protenas, creando mltiples
paralogues Y presentando as el sistema inmune del husped con el Problema
complejo de bloqueo de varios ligandos. El relativo Peso funcional en cualquier
ligando EBA o RH en particular es Presuntamente gobernados por muchos
factores, incluyendo su Expresin niveles [29, 30, 33], las diferencias en las
secuencias de aminocidos Entre las cepas [38, 39], y el genotipo de acogida y
inmunolgico (Figura 3). El fondo gentico del parsito tiene ciertamente un
Impacto en la importancia de una determinada interaccin receptor-ligando. Esto
es ms evidente en el caso de PfEBA y PfRH Knockouts genticos, donde
PfEBA175 supresin resultados en un mayor De la invasin sensible a la
neuraminidasa en W2mef pero No 3D7 [40, 41]. La delecin de PfRH1 tambin
tiene efectos diferenciales Dependiendo de la cepa [41]. Esto implica una jerarqua
de PLOS Patgenos | Www.plospathogens.org 3 Marzo 2014 | Volumen 10 |
Nmero 3 | E1003943

Pgina 4
Interacciones en el PfRH y PfEBA paralogues, con la Importancia relativa de cada
interaccin es especfica de la cepa, como Ha sido elegantemente propuesta por los
trabajos anteriores [32, 34, 42]. Aunque el punto general de que la variacin en
PfRH y PfEBA ligandos Es la explicacin de la redundancia en las vas de
invasin, creemos Que se necesitan algunas notas de precaucin, especialmente
cuando se interpretan Estudios genticos in vitro. Los ligandos de PfRH y PfEBA
se discuten frecuentemente Como si fueran completamente funcionalmente
intercambiables, pero esto es Probablemente sea una simplificacin excesiva.
Ambas familias de genes estn profundamente Phylogenetically arraigado y todos
los genomas de Plasmodium secuenciado a Contienen al menos un miembro de
cada familia. Si fueran Precisamente funcionalmente equivalente, se esperara que
Familia se habra perdido en al menos una especie de Plasmodium, pero En su
lugar la mayora de los genomas realmente tienen una expansin de uno o ambos
Familias, con mltiples paralogues presentes. Sus funciones pueden Por lo tanto
ser sutilmente distinto; Por ejemplo, se propone que el Funcin primaria de los
PfRHs es propagar una seal que desencadena La posterior liberacin de la
PfEBAs [24]. Sin embargo, mientras que PfRH Y PfEBA ligandos pueden no ser
estrictas alternativas funcionales, algunos Ciertamente los miembros pueden
compensarse mutuamente Contextos particulares, al menos in vitro, como la
regulacin RH4 transcripcin en EBA175 knockout lneas [33]. La expansin de
las familias EBA y RH en P. falciparum y La consiguiente redundancia y
complejidad que crea significa Que varios de estos ligandos tendran que ser
simultneamente Dirigidos a reducir o bloquear efectivamente toda invasin. Esto
hace que El desarrollo de una vacuna de este tipo es tcnicamente Los ensayos
iniciales con las combinaciones de PfRH y PfEBA muestran Promesa [32, 43, 44].
Sin embargo, aunque tales combinaciones pueden ser Vacunas viables, el grado de
diversidad natural en la expresin Y las secuencias de PfRH y PfEBA significa que
tendrn que ser Una amplia gama de aislamientos naturales antes de su
Potencialmente puede ser verdaderamente evaluado, y estos ensayos no han
Realizado. Tambin queda por ver si los donantes de los ensayos clnicos Para
cubrir el mayor costo de fabricacin de un Vacuna multivalente. Por otra parte,
cabe sealar que la Diseo de algunos ensayos de vacunas de Fase IIa en los que
Experimentalmente infectados pueden establecer una barra muy alta para la
eficacia [45]. En estos ensayos, el tratamiento farmacolgico curativo debe Tan
pronto como los parsitos son detectados por PCR en la sangre, Razones
comprensibles de salud y ticas. Esto significa que el ensayo Prueba la tasa de
multiplicacin del parsito, en lugar de Sntomas que seran los resultados ms
probables de EBA / RH vacunas. Por lo tanto, las vacunas podran Un ensayo de
Fase IIa, pero siguen proporcionando importantes Proteccin en una infeccin
natural. Por lo tanto, es probable que O bien tienen que abandonar estos complejos
objetivos, o cambiar el diseo De los ensayos de vacunas para permitirnos detectar
mejor sus efectos, por ejemplo, Mediante la inclusin de estudios de escalado de
dosis para permitir la deteccin de efectos Que pueden ser visibles slo en las
parasitemias de bajo inicio. Identificar los puentes crticos durante la invasin
Hay otros ligandos de invasin que podran ser atacados Evitar el problema de
PfRH y EBA redundancia? Hasta ahora, hay Dos ligandos parsitos que pueden ser
atacados por anticuerpos para inducir un Potente bloqueo en la invasin y tambin
parecen ser No redundantes, ya que los intentos de eliminarlos genticamente han
fracasado. Ambos tienen receptores conocidos: PfRH5 y su receptor de eritrocitos,
Basigina y AMA1 (antgeno de membrana apical) y su parsito- Receptor
codificado, RON2 (protena del cuello del rin) (vase la figura 3). AMA1-RON2
AMA1 es indudablemente un importante ligando de invasin de parsitos. Los
ortlogos AMA1 fcilmente identificables existen en todo el gnero Apicomplexa,
y los experimentos de delecin gentica han mostrado en gran medida Que son
esenciales [46, 47], aunque el reciente informe AMA1 no es absolutamente
necesario para la invasin por P. berghei Los merozoitos requerirn un
seguimiento detallado utilizando Sistemas en otras especies de Plasmodium [48].
AMA1 es un micronema Protena transmembrana de tipo I que transloca a la
superficie de Zotas invasivos, incluyendo el merozoito de P. falciparum [49], y es
Localizados en la unin mvil durante la invasin. Su precisin Durante la
invasin de los eritrocitos no est del todo clara y Ha sido propuesto para
desempear un papel en la reorientacin de los merozoitos [50], Eritrocitos
vinculante [51, 52], la invasin de eficiencia [53], rhoptry Figura 3. Una
comprensin molecular de la invasin conduce a la identificacin de puntos
crticos. Los eventos de invasin controlados por Se piensa que los paralogues
dentro de las familias EBA y RH son redundantes con la importancia relativa de
genes individuales que difieren entre son. Esto conduce a un modelo de invasin
donde hay una serie de "rutas alternativas de invasin paralelas", como se indica
por mltiples rutas en el Diagrama para dos tensiones nominales (X e Y). Las
dependencias diferenciales de los paralogues EBA y RH son indicadas por la
ponderacin del Lnea, con la lnea ininterrumpida que representa una dependencia
importante y las lneas discontinuas y punteadas lneas no preferidas para esa cepa.
Por el contrario, Las interacciones nonredundantes de RH5-basigina y
AMA1-RON2 estn representadas por puentes crticos. La protena inmunognica
AMA1 es altamente Variable entre las cepas y por lo tanto est representado por
diferentes colores: los anticuerpos husped neutralizantes obtenidos por una
variante AMA1 no Protegen contra una cepa que contiene una variante AMA1
diferente. En infecciones naturales, RH5 no es inmunognico, lo que sugiere que el
parsito ha protegido Esta etapa crtica por un mecanismo inmunomodulador. Doi:
10.1371 / journal.ppat.1003943.g003 PLOS Patgenos | Www.plospathogens.org 4
Marzo 2014 | Volumen 10 | Nmero 3 | E1003943

Pgina 5
Secrecin [54, 55], y la formacin de la unin mvil [4, 56, 57]. Copurificacin
experimentos [57, 58] y posterior estructural Estudios [59, 60] han dado lugar a un
modelo en el que el parsito inserta su Propio complejo receptor AMA1 en la
membrana celular diana. los Complejo RON (RON2, 4, 5 y 8) se secretan a partir
del Rhoptries, y la protena RON2 presenta un bucle expuesto a la superficie Que
se inserta en una ranura hidrofbica en el AMA1 Ectodominio, proporcionando as
un par receptor-ligando para la invasin. Este modelo est respaldado por datos
funcionales que demuestran que Ya sea anticuerpos contra AMA1 [61, 62] o corto,
pptidos solubles Que se unen en o cerca de la invasin bloque groove [60, 63].
Dado su importante papel en la invasin de parsitos, AMA1 ha sido un Vacuna de
alta prioridad en la etapa de la sangre durante muchos aos [62, 64], pero la
conclusin general de mltiples ensayos ha sido Que las respuestas de anticuerpos
bloqueadores de la invasin inducidas por la vacuna AMA1 son especficos de la
cepa y por lo tanto proporcionan la proteccin solamente A las cepas de parsitos
homlogos de la vacuna [65, 66]; Es decir, slo Cepas que codifican una variante
AMA1 inmunolgicamente similar o Idntica a la variante de la secuencia de la
protena AMA1 utilizada en la Vacuna son inhibidas. Curiosamente, esto significa
que el AMA1 Tiene la notable propiedad de conservar su funcin funcional
Durante la invasin mientras se toleran muchas variantes de secuencias que son
Inmunolgicamente distintos. Por lo tanto, parece que el parsito AMA1 mediante
la evolucin de un espectro de variantes para crear un Que es difcil de vacunar
contra, similar a Los MSP. Esto hace que el complejo AMA1-RON sea un desafo
Objetivo de la vacuna, aunque sea potencialmente solu- Inclusin de mltiples
AMA1 variantes [67] o por la orientacin de la RON Complejo, en lugar de AMA1
en s. RH5-basigin Recientemente, otra interaccin merozoito-eritrocitos fue
identificada Que tambin parece funcionar como un punto esencial en la La va de
invasin: que entre el ligando de parsito RH5 y El antgeno del grupo sanguneo
Ok, basigina. Originalmente identificado por Analizando el P. falciparum
secuencia del genoma [68], RH5 fue Agrupados en la familia RH de los ligandos
parsitos por la presencia de Algunos-aunque la homologa de secuencia limitada
[69]. RH5 difiere de Miembros de la familia PfRH porque es mucho ms pequeo
y Predijo ser secretado en lugar de anclado al parsito Membrana, y se sabe que
interactuar con otro secretado Parsito de protenas, RIPR [70]. Al igual que
AMA1, RH5 tambin se localiza en La unin mvil durante la invasin [71] e
intenta Genticamente eliminar RH5 en varias cepas no tuvieron xito [68, 71], lo
que sugiere que desempe un papel importante en la etapa de sangre crecimiento.
Su esencialidad en el proceso de invasin fue reforzada por La identificacin de su
receptor, basigina [72], utilizando una protena Mtodo de deteccin de
interacciones denominado AVEXIS ( Extracelular interaccin pantalla) [73]. Es
importante destacar que los anticuerpos monoclonales Anticuerpos contra el
receptor de basigina fueron capaces de Bloquear toda la invasin detectable a
travs de un panel de diferentes laboratorios- Adaptado parsito cepas y recientes
campo aislados [72]. diferente a AMA1, orthologues identificables de PfRH5 slo
han sido Identificados en una especie estrechamente relacionada, P. reichenowi
[74], y No en las otras principales especies de malaria humana como P. vivax. RH5
Tambin difiere de AMA1 en que su polimorfismo es muy limitado Poblaciones de
P. falciparum, lo que sugiere que no est Significativa presin de seleccin inmune
[75, 76]. En consonancia con esto, Anticuerpos policlonales o monoclonales contra
RH5, ya sea Utilizando un sistema de administracin viral [77] o utilizando un
recombinante RH5 Protena expresada usando expresin eucaritica o procaritica
Sistemas [76, 78, 79], son capaces de prevenir el crecimiento del parsito in vitro.
Es importante destacar, y en contraste con AMA1, este efecto de bloqueo es Eficaz
a travs de mltiples cepas de parsitos, incluidos los Cepas que contienen los
polimorfismos ms frecuentemente observados En RH5 globalmente [76]. Esto
plantea una aparente paradoja. Inmunidad adquirida naturalmente Al paludismo no
suele ser estril, pero los anticuerpos contra RH5 pueden Potentemente bloquear la
invasin a travs de mltiples cepas; Es decir, deberan Ser capaz de proporcionar
proteccin estril. Por lo tanto, Lgicamente inferir que los adultos clnicamente
inmunes no deben tener Ttulos de anticuerpos anti-RH5, porque si lo hacan,
seran Estrilmente protegidos y carecen de parasitemia detectable. A pesar de que
Los estudios de las respuestas anti-RH5 son limitados, las respuestas anti-RH5
Eran bajos en adultos kenianos y no mostraban evidencia de edad- Adquisicin
dependiente [77]; Slo el 15% de las muestras de suero de Senegal eran
seropositivos para las respuestas anti-RH5 [80], mientras que en un Gran estudio
comparativo en Papua Nueva Guinea, RH5 tuvo una Las tasas de seropositividad
ms bajas de las 91 protenas merozotas probadas [81]. A pesar de su prevalencia
relativamente baja, los anticuerpos anti-RH5 Purificado a partir de suero inmune
humano tuvo una fuerte invasin Inhibitorios efectos [80], y en un momento de la
reinfeccin estudio en Mal, La presencia de anticuerpos anti-RH5 se asoci
fuertemente con Proteccin contra los episodios de malaria [82]. Mientras que
mucho ms trabajo es Claramente necesario, los niveles ms bajos de respuesta
anti-RH5 observados Fecha sugiere que el parsito ha desarrollado un tercer
mecanismo para Evadir las respuestas inmunes del husped a un punto crtico en la
invasin Distinta de la redundancia y el polimorfismo que Proteger otras protenas
de invasin: la capacidad de producir una protena Que no es-al menos en el
contexto de una infeccin natural-inmungena. El mecanismo mediante el cual la
protena RH5 es capaz de evadir la La respuesta inmune humoral humana no se
conoce actualmente, pero Puede deberse a niveles limitados de expresin y
exposicin o A travs de un mecanismo inmunomodulador activo que Interaccin
directa con protenas hospedantes adicionales. Importante para el Uso de RH5
como vacuna, esta capacidad para evadir el anticuerpo husped Respuestas parece
ser especfica del contexto ya que los antisueros de alto ttulo Puede elevarse a una
mezcla de protena RH5 / adyuvante recombinante en Conejos [76] y ratones [77].
Sin embargo, la aparentemente baja Inmunogenicidad de RH5 nativo puede
prevenir niveles significativos de Despus de la vacunacin, lo que podra afectar a
la Induccin o longevidad de cualquier respuesta inducida por la vacuna RH5. No
obstante, la dependencia de la dependencia de la interaccin de RH5 Con basigina
para la invasin y su susceptibilidad a anticuerpos provocados Hacen de RH5 un
objetivo altamente prometedor para una vacuna en fase sangunea, Ya sea solo o en
combinacin con otros objetivos sinrgicos [83], Y otros ensayos estn claramente
justificados. Conclusiones y direcciones futuras Dado que es esencial para la
supervivencia de los parsitos en sangre, La invasin de eritrocitos ha sido
considerada desde hace tiempo como un punto en la vida Que podra ser
racionalmente orientado en el desarrollo de un Antipaldica. Aunque las
prioridades de desarrollo de vacunas Se han centrado recientemente en el bloqueo
de la transmisin Y etapas pre-eritrocticas, el desarrollo de la RTS, la vacuna S
Refuerza el hecho de que las vacunas dirigidas a un solo objetivo Nunca es
probable que sea 100% efectiva. Adems, una Por definicin, afectar la
transmisin de Reduciendo el grupo de parsitos de la etapa del anillo capaces de
gametocito diferenciacin. Es nuestra firme opinin que los objetivos de invasin
deben Ser considerados como componentes cruciales de cualquier Vacuna contra
el paludismo de varios estadios. Sin embargo, una de las caractersticas Invasin
que la convierten en un objetivo de vacuna atractivo: su La respuesta inmune
mediada por anticuerpos-tambin hace que sea un Porque la "carrera de
armamentos" del parsito husped ha obligado a Parsito para desarrollar
sofisticados mecanismos inmunoprotectores Escudo s mismo. En particular, el
parsito ha protegido los MSP y PLOS Patgenos | Www.plospathogens.org 5
Marzo 2014 | Volumen 10 | Nmero 3 | E1003943

Pgina 6
RH / EBA mediante la generacin de diversidad de secuencias y Redundancia,
resultando en parsitos que utilizan experimentalmente Definibles rutas de
invasin alternativas que son difciles de dirigir. Una manera posible de sortear
este problema sera generar Una vacuna multicomponente que intenta neutralizar
todos los Ligandos alternativos, pero es probable que sea costoso de fabricar Y, en
el mejor de los casos, puede simplemente recapitular la Encontrados en adultos
clnicamente inmunes. Interacciones no redundantes Esencial para la invasin
(AMA1-RON2 y RH5-basigin) hacen Conceptualmente ms atractivos, pero
quizs no sorprende, El parsito ha desarrollado mecanismos para proteger estos
crticos Invasin. Intrigante, sin embargo, el parsito protege AMA1 y RH5 de la
respuesta inmune del husped por diferentes Mecanismos: protege AMA1
mediante la creacin de una serie de inmuno- Variantes lgicamente distintas,
mientras que RH5 nativo aparece immunopro- Protegidos. Crticamente, RH5 no
parece ser intrnsecamente No inmunognicos, ya que los altos ttulos de
anticuerpos frente a RH5 obtenido en modelos experimentales, y puede inhibir
potentemente invasin in vitro [76,77]. Esto plantea la posibilidad de que el
inmunoprotectores mecanismos de parsitos podran ser eludidas mediante la
obtencin de la inmunidad natural con una vacuna basada en RH5. Uno de los
principales retos en el desarrollo de vacunas RH5 voluntad claramente ser la
identificacin de adyuvantes que aumentan los ttulos de anticuerpos
suficientemente altas en ausencia de estmulo inmunolgico. Sin embargo, dada la
falta de xito hasta la fecha en eludir la evasin inmune del merozoito
mecanismos, el desarrollo de una respuesta inmune anti-RH5 potente y la
identificacin de otros objetivos que funcionalmente sinergia con tales respuestas
representa la mejor esperanza actual de una invasin-bloqueo vacuna. Expresiones
de gratitud Estamos muy agradecidos a Ccile Crosiner y Leyla Bustamante para
tiles Comentarios sobre el manuscrito