TEMA 3.

ENZIMAS COMO CATALIZADORES

BIOLGICOS. CINTICA E INHIBICIN ENZIMTICA.
REGULACIN ENZIMTICA

1. CARACTERSTICAS GENERALES DE LAS ENZIMAS

Las enzimas son protenas que desarrollarn diversas funciones en los seres vivos, con
caractersticas como:

Gran poder cataltico: en la catlisis disminuyen la energa de activacin de una

reaccin, formndose un complejo enzima-sustrato (ES), ms prximo al estado de
transicin. Los mecanismos de catlisis son, entre otros: cido-base, covalente, por
iones metlicos
Algunas necesitan cofactores, componentes no proteicos requeridos para su actividad,
como iones metlicos o compuestos orgnicos. Si el cofactor se encuentra unido
fuertemente, hablamos de grupo prosttico:
- Apoenzima: parte proteica de la enzima (no activa).
- Holoenzima: apoenzima + cofactor (activa).
No alteran el equilibrio de la reaccin, ni promueven reacciones no espontneas.
La enzima recupera su forma original al final de la reaccin.
Funcionan en condiciones suaves de pH y temperatura.
Presentan elevada especificidad y capacidad de regulacin.

2. CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS

Clasificaremos las enzimas segn la reaccin que catalizan, en 6 grupos:

1) Oxidoreductasas: transfieren electrones.

2) Transferasas: transfieren grupos qumicos.
3) Hidrolasas: llevan a cabo reacciones de hidrolizacin.
4) Liasas: adicionan grupos a dobles enlaces o forman dobles enlaces eliminando grupos.
5) Isomerasas: transfieren grupos dentro de una misma molcula para formar ismeros
de la misma.
6) Ligasas: llevan a cabo reacciones de condensacin formando enlaces C-C, C-S, C-O y C-
N.

En cuanto a la nomenclatura de las enzimas, distinguimos 3 formas, que veremos con un

ejemplo:

En la siguiente reaccin: ATP + D-Glucosa ADP + D-Glucosa-Fosfato, entra en juego una

transferasa, que nombraremos segn:

1
 Nmero clasificatorio de 4 dgitos (Enzyme Committee): E.C. 2.7.1.1.
- 2. Clase: transferasa.
- 7. Subclase: fosfotransferasa.
- 1. Sub-subclase: fosfotransferasas con OH como aceptor.
- 1. Sub-sub-subclase: D-Glucosa como aceptor del fosfato.
Nombre sistemtico: ATP : Glucosa-Fosfotransferasa.
Nombre trivial: Hexoquinasa.

3. ESPECIFICIDAD ENZIMTICA: EL CENTRO ACTIVO

Decimos, que en la realizacin de su funcin, las enzimas tienen una altsima especificidad,
es decir, reaccionando, en el caso ptimo, con una nica especie molecular. Esta
especificidad viene dada por una pequea zona de la protena denominada centro activo.

El centro activo es una regin concreta cuya topologa determina el que una molcula u otra
pueda o no reaccionar con la enzima, siendo el lugar donde se da la catlisis. La molcula que
sufrir catlisis enzimtica es llamada sustrato.

El centro activo tiene una forma de hendidura tridimensional recubierta por aminocidos
polares en un mar de aminocidos apolares. Entre ellos, distinguimos los que tendrn funcin
de unin al sustrato, y los que tendrn la funcin cataltica (los catalticos son en su mayora
polares).

En sitio de unin, se darn condiciones perfectas para la catlisis, quedando el sustrato

perfectamente orientado, a la distancia adecuada para una ptima reaccin. Los aminocidos
del centro activo reaccionarn dbilmente con grupos qumicos determinados del sustrato,
debiendo tener ambos formas complementarias.

4. CATLISIS ENZIMTICA

Muchas reacciones que se dan en el organismo pueden ser termodinmicamente

favorables, pero cinticamente, son muy lentas. Es aqu donde entran las enzimas y su
funcin cataltica, proporcionando al sustrato un ambiente especfico ptimo para la reaccin.

Decamos que las enzimas no alteran el equilibrio de reaccin, pero s la aceleran. Cuando
una reaccin se estudia en funcin de la variacin de la energa libre de Gibbs del proceso,
vemos que existe un momento en que la especie se encuentra en lo que llamamos estado de
transicin, un estado molecular en el que la rotura o formacin de enlaces para dar lugar a
reactivos o productos es igual de probable. La energa de Gibbs necesaria para alcanzar este
estado de transicin es llamada energa de activacin, y ser reducida notablemente por las
enzimas, siendo as como aumentan la velocidad de la reaccin catalizada.

Aunque con la unin del sustrato a la enzima se forme el complejo enzima-sustrato, sta nunca
ser parte de la reaccin, sin verse agotada ni transformada.

2
 4.1. Modelos que explican el complejo enzima-sustrato

1) Modelo de llave-cerradura (Modelo de Fischer): en ste, el centro activo y el sustrato

tienen morfologas perfectamente complementarias.
2) Modelo de ajuste inducido (Modelo de Koshland): sostiene que la unin del sustrato
al centro activo conlleva un cambio en la conformacin de la enzima que potencia la
complementariedad.
3) Modelo de complementariedad de la enzima al estado de transicin del sustrato
(Potro): la enzima ejerce una fuerza de tensin o distorsin sobre un enlace
susceptible a ello en el sustrato, rompindolo.

5. CINTICA ENZIMTICA

sta es el estudio de la velocidad y los factores que intervienen en una reaccin

enzimtica. La velocidad puede medirse en relacin a la aparicin de productos y a la
desaparicin de sustratos con el tiempo.

[] []
= = = []

La actividad enzimtica, determinada a un tiempo de reaccin 0, se medir en trminos de

velocidad, como:

. =

donde UI, unidades de actividad enzimtica, suponen la cantidad de enzima que transforma
1,0 micromoles de sustrato por minuto a 25C. Tambin, se usa el katal (mol/s), equivalente a
6 millones de UI.

Llamamos actividad enzimtica especfica a la actividad enzimtica referida a la cantidad de

protena (UI/mg de protena).

Nmero de recambio o actividad molecular de una enzima: nmero de molculas de

sustrato transformadas por enzima o centro activo por segundo.

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7. CONTROL DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Nuestro organismo necesita un estricto control del metabolismo. Existen numerosos

mecanismos para el control de la velocidad de una ruta metablica, mecanismos
multienzimticos. Esta regulacin puede venir dada por:

3
7.1. Enzimas reguladoras

a) Modulacin alostrica (enzimas alostricas):

- Catalizan reacciones irreversibles en las condiciones intracelulares y controlan la
velocidad global de la ruta.
- Suelen ser oligmeros.
- Presentan adems del sitio cataltico, uno o ms centros reguladores donde se
unen moduladores (efectores). Estos se unen a la enzima de modo no covalente y
reversible.
- La unin del modulador cambia la conformacin de la enzima entre forma tensa
(baja actividad) y relajada (alta actividad).
- Suelen presentar cintica sigmoidea.
b) Modificacin covalente (enzimas reguladas por modificacin covalente): existen
numerosos grupos con los que modificar aminocidos de una enzima, de modo que
induzcan un cambio en su conformacin volvindola inactiva.

7.2. Activacin por protelisis: ZIMGENOS

Algunas enzimas no se sintetizan como tales, sino como protenas precursoras sin actividad
enzimtica, con un gran tamao. Se denominan proenzimas o zimgenos.

Para activarse, el zimgeno sufre un ataque proteoltico que origina la liberacin de uno o ms
pptidos. El resto de la molcula adopta la conformacin y propiedades de la enzima activa.

Esto puede ser til para que la enzima acte en un lugar requerido, y no en otro donde puede
resultar perjudicial al organismo.

7.3. Control mediante isoenzimas

Las isoenzimas son enzimas diferentes en estructura, sintetizadas por genes diferentes, pero
que tienen una funcin biolgica idntica, actuando sobre el mismo sustrato para generar el
mismo producto.

Estas diferencias estructurales dan lugar a cambios ligeros en sus propiedades, pudiendo ser
separadas por electroforesis. Suelen tener distinta cintica y localizacin, con valores de Km y
Vmax diferentes.

Podremos de esta forma observar isoenzimas en funcin del tipo de tejido, compartimento
celular donde acta o el momento de desarrollo del individuo.