Prctica de Laboratorio N 13

OBJETIVO

Reconocer los valores normales de bicarbonato en plasma para

reconocer patologas relacionadas a su disminucin o aumento.
Identificar las sustancias que deben o no aparecer en el anlisis de una
muestra de orina.

DETERMINACIN DE BICARBONATO

MARCO TERICO

El sistema cido Carbnico- Bicarbonato es el buffer ms importante de

nuestro organismo. Existen mltiples caractersticas que hacen de este
sistema un regulador de pH el ms eficaz en el hombre. En primer lugar se
trata de un sistema que est presente en todos los medios tanto
intracelulares como extracelulares. A primera vista su pKa parecera
corresponder a un buffer poco til para nuestro organismo ya que su valor es
de 6,10. Sin embargo este hecho se ve compensado por la posibilidad de
regular independientemente las concentraciones tanto de la especie aceptora
de protones como la dadora de protones.

El H2CO3 est en equilibrio con el CO2. De este modo la concentracin de la

especie aceptora de protones (H2CO3) va a estar regulada por un sistema de
intercambio de solutos a nivel renal y la concentracin de la especie dadora
de protones (CO2) ser regulada por un sistema de intercambio de gases a
nivel pulmonar.

Si tomamos los valores de concentracin para el CO 2 y el H2CO3 y calculamos

el valor del pH utilizando la ecuacin de Henderson-Hasselbach obtendremos
7,40 como resultado, lo que implica que este buffer es ideal para mantener la
homeostasis de nuestro pH.

Es importante tener en cuenta que todos los sistemas buffer estn

interrelacionados y que se amortiguan unos a otros, de modo que todos los
amortiguadores de un mismo compartimento van a variar conjuntamente
ante un cambio en el pH. Esto nos va a permitir conocer los cambios de cada
sistema si conocemos los que ha experimentado uno de ellos.

FUNDAMENTO

Mtodo Volumtrico por retroceso (Mtodo Segal)

Consiste en agregar cido en exceso al plasma liberando el bicarbonato como

CO2, separndose una cantidad equivalente de hidrogeniones. Los
hidrogeniones son titulados con NaOH usando un indicador rojo de fenol.
MATERIALES

Erlenmeyer
Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados
Colorante rojo de fenol
Solucin de HCl 0,005 N
Solucin de NaO 0,01 N
Agua destilada

PROCEDIMIENTOS

En un Erlenmeyer de 25 ml se realizan los siguientes pasos:

Coloque 1 ml de muestra (suero).

Agregue 2 ml de agua destilada.
Adicione 3 gotas de rojo de fenol. Observe el color.
Agregue exactamente 1 ml de HCl 0,05 N. Observe el cambio de color.
Titule con NaOH 0,01 N hasta que aparezca el color observado en el
paso 3.
Enseguida, anote el volumen de NaOH utilizado.

CLCULOS

Luego se procede a encontrar la concentracin de bicarbonato aplicando la

siguiente frmula:

BICARBONATO (mEq/L) = 1000 [ (ml de cido x N HCl) (ml de NaOH x N

NaOH) ]

RESULTADOS

BICARBONATO (mEq/L) = 1000 [ (1ml de HCl x 0,05N) (2,84 ml de NaOH x

0,01N) ]

BICARBONATO (mEq/L) = 1000 [ (0,05) (0,0284) ]

BICARBONATO (mEq/L) = 1000 [ 0,0216 ]

BICARBONATO (mEq/L) = 21,6

Valor Referencial: 23 27 mEq/L

En nuestra muestra el nivel de bicarbonato se encuentra por debajo de lo

normal.
ANLISIS DE LOS RESULTADOS

Para los resultados anormales, corresponde lo siguiente:

Los niveles superiores al nivel normal pueden ser indicio de:

Acidosis respiratoria

Los niveles inferiores al nivel normal pueden ser indicio de:

Alcalosis respiratoria

EXAMEN COMPLETO DE ORINA

MARCO TERICO

La orina es formada a nivel renal de los mamferos como va principal de

eliminacin del exceso de agua, de los productos finales del metabolismo
nitrogenado, de minerales, de vitaminas y otros compuestos de los cuales se
deshace el organismo.

La composicin de la orina vara cotidianamente, reflejando la cantidad y la

calidad de la alimentacin ingerida, as como la anormalidad del metabolismo
del organismo.

En la composicin normal de la orina encontramos agua, urea, asido rico,

creatinina. Amoniaco, sodio, potasio, calcio magnesio, etc. Adems de los
compuestos mencionados la orina tambin contiene hormonas, vitaminas,
pigmentos, purinas, derivados del cido glucornico, fluoruros y otros iones
minerales.

El color amarillo de la orina se debe a la presencia del pigmento denominado

urocromo. Normalmente transparente puede verse cuando existe exceso de
fosfatos. El olor se torna desagradable cuando han actuado las bacterias.

MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

Muestra de orina
Tirilla reactiva
 Con la tirilla reactiva nos ser posible determinar diversos tipos de
alteraciones que encontramos en la orina.

Leu 120 S: Leucocitos mg/dl (umol/L)

Nit 60 S: Nitritos
Uro 60 S: Urobilingeno mg/dl (g/L)
Pro 60 S: Protenas
Ph 60 S
Blo 60 S: Sangre
SG 45 S: Densidad
KET 40 S: Cetonas mg/dl (mmol/L)
Bil 30 S: Bilirrubina mg/dl (umol/L)
Glu 30 S: Glucosa mg/dl (mmol/L)
ASC 30 S: c. Ascrbico mg/dl (mmol/L)

RESULTADOS

Leucocitos (LEU) = 125 +++ mg/dl (umol/L)

Nitrito (NIT) = No detect
Urobilingeno (URO) = 4 (70) mg/dl (g/L)
Protenas (PRO) = 0
pH = 6.0
Sangre (BLO) = 0
Densidad (SG) = 1.020
Cetona (KT) = 0
Bilirrubina (BIL) = 1 (17) + mg/dl (umol/L)
Glucosa (GLU) = No detect
cido Ascrbico (ASC) = No detect

ANALISIS DE LOS RESULTADOS

Color: la orina normal es de color amarillo claro, debido a la presencia

de algunos pigmentos (urocromo, urobilingeno, y coproporfirina)
pudiendo ser mas o menos intenso segn la concentracin de la misma
orina.

Densidad: oscila entre 1.012 y 1.024. Generalmente, aumentan

durante una dieta seca y disminuyen como consecuencia de la ingestin
de lquidos.

pH: en condiciones normales, y bajo una dieta normal, el pH de la orina

es ligeramente cido. Valores ligeramente superiores (por ejemplo, pH=
75) pueden depender de una alimentacin vegetariana o de la
administracin de algunos frmacos que alcalinizan la orina. Un pH
alcalino se presenta en las afecciones de las vas urinarias (cistitis,
pielonefritis). Por el contrario, se observa una reaccin cida en los
estados de hiponutricin, en la acidosis diabtica, etc.

Sedimento: en los sujetos normales, el sedimento es escaso y est

formado por sales con algunas clulas epiteliales de la uretra. En la
mujer, pueden presentarse adems, algunas clulas vaginales.
 o Clulas epiteliales: normalmente aparecen unas pocas clulas
epiteliales procedentes de la vejiga o de la uretra. En las
infecciones del tracto urinario, dichas clulas son ms
frecuentes.

o Microorganismos (bacterias, trichomonas, hongos): la orina

normal es estril. En algunos casos, las bacterias pueden
penetrar en el tracto urinario provocando una infeccin.

o Cilindros: su presencia puede ser debido a acmulo de

protenas o de clulas. Los cilindros hialinos son protenas
acumuladas y suelen acompaarse a proteinuria. La presencia
de cilindros celulares granulosos son acumulaciones de
partculas celulares de desecho de glbulos blancos y clulas
epiteliales, pueden aparecer tras el ejercicio intenso y en
diversas enfermedades renales.

o Cristales: la orina normal contiene cristales y componentes

amorfos que precipitan al enfriarse la orina. Segn el pH de la
orina pueden precipitar:

Orina alcalina: cristales de urato amnico, trifosfatos,

fosfato clcico, fosfatos amorfos y carbonato clcico

Orina cida: cristales de cido rico, cristales de oxalato

clcico, cristales de urato sdico y uratos amorfos

Albmina: en condiciones normales no es posible demostrar su

presencia en la orina; sin embargo, es la primera protena que aparece
en varias enfermedades del aparato urinario (pielonefritis). La excrecin
de albmina en la orina no sobrepasa los 30 mg/24 horas.

Proteinuria: Principalmente es un indicador de problemas renales.

Como la prdida de protenas disminuye la presin onctica se suele
acompaar de edemas intersticiales, lo que se llama sndrome nefrtico.

Glucosa: esta sustancia es totalmente reabsorbida. Sin embargo, en

algunas enfermedades (diabetes mellitus) el aumento de glucosa
contenida en la sangre hace que lleguen al tbulo renal grandes
cantidades de este azcar, parte del cual no puede ser reabsorbido,
siendo por tanto, eliminado.

Acetona: aparece igualmente en la orina solo en condiciones

patolgicas. Se observa en la acidosis (diabetes mellitus), en los estados
de inanicin y en la hipoglucemia.

Sangre: Puede ser debida a afecciones de los urteres, de la vejiga, del

rin.

Pigmentos y sales biliares: cuando se encuentran en la orina, son

expresin de enfermedades que comprometen las funciones del hgado y
de los conductos biliares.
CONCLUSIONES

El bicarbonato capta hidrogeniones transformndose en cido carbnico.

Este es un cido inestable que se descompone rpidamente en CO2 y
H2O, eliminndose este ltimo por el pulmn.

En la acidosis respiratoria se produce como mecanismo compensador

(frente a la retencin de CO2) un aumento de iones bicarbonato. En la
alcalosis respiratoria sucede lo contrario (frente a la mayor eliminacin
de CO2 por la respiracin), una disminucin del ion bicarbonato.

La determinacin de este bicarbonato nos permite evaluar por lo tanto,

la capacidad amortiguadora de la sangre.

La orina normal tiene un Ph que oscila entre 5,5 y 6,5 como valores
referenciales.

En condiciones normales en la orina no deben existir: albmina, glucosa,

eritrocitos, leucocitos, cuerpos cetnicos, biirrubina o pus.

Tanto los tbulos renales como los pulmones juegan un papel importante
en el mantenimiento de la concentracin de hidrogeniones.

BIBLIOGRAFA:

ROBERT K. MURRAY Et all. BIOQUMICA DE HARPER

VILLAVICENCIO NUEZ MARINO BIOQUMICA

GUA DE PRCTICAS DE BIOQUMICA DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL

FEDERICO VILLARREAL ao 2006.

GUYTON AND HALL TRATADO DE FISIOLOGIA MDICA