Insertos de Segundo Ciclo

ALBUMIN
Albmina
Verde bromocresol. Colorimtrico
Determinacin cuantitativa de albmina CLCULOS

IVD
(A ) Muestra - ( A ) Blanco
x 5 (Conc Patrn) = g/dL de albmina en la muestra
Conservar a 2-8C (A ) Patrn - (A ) Blanco
Factor de conversin: g/dL x 144,9 = mol/L

PRINCIPIO DEL MTODO
La albmina se combina con el verde de bromocresol a pH
CONTROL DE CALIDAD
ligeramente cido, producindose un cambio de color del
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control
indicador, de amarillo verdoso a verde azulado proporcional a la valorados: SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
concentracin de albmina presente en la muestra
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia,
ensayada1,2,3,4.
revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y
SIGNIFICADO CLNICO
establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan
La albmina es una de las ms importantes protenas
con las tolerancias.
plasmticas producidas en el hgado.
Entre sus mltiples funciones se incluye nutricin, mantenimiento
VALORES DE REFERENCIA
de la presin onctica y transporte de sustancias como Ca ++,
3,5 a 5,0 g/dL 1.
bilirrubina, cidos grasos, drogas y esteroides.
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
Alteraciones en los valores de albmina indican enfermedades
establezca sus propios valores de referencia.
del hgado, desnutricin, lesiones de la piel como dermatitis,
quemaduras severas o deshidratacin 1,7,8. CARACTERSTICAS DEL MTODO
El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos Rango de medida: Desde el lmite de deteccin de 0,0349 g/dL hasta el
los datos clnicos y de laboratorio. lmite de linealidad de 6 g/dL.
Si la concentracin es superior al lmite de linealidad, diluir la muestra
REACTIVOS 1/2 con CINa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
R Verde bromocresol pH 4,2 0,12 mmol/L Precisin:
Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Media (g/dL) 5,00 3,71 4,56 3,07
ALBUMIN CAL Patrn primario acuoso de Albmina 5 g/dL
SD 0,02 0,02 0,28 0,18
CV (%) 0,47 0,55 6,20 5,90
PREPARACIN
El reactivo y patrn estn listos para su uso. Sensibilidad analtica: 1 g/dL = 0,2003 (A).
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de comerciales (x).
caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
frascos bien cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita la Coeficiente de correlacin (r) 2: 0,99169.
contaminacin durante su uso. Ecuacin de la recta de regresin: y=1,045x 0,028.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador
Indicadores de deterioro de los reactivos: utilizado.
- Presencia de partculas y turbidez.
- Absorbancia (A) del blanco a 630 nm 0,40. INTERFERENCIAS
Bilirrubina hasta 110 mg/L, hemoglobina hasta 1 g/L y lipemia hasta 10
MATERIAL ADICIONAL g/L, interfieren1,4.
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 630 nm. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. determinacin de la albumina 5,6.
- Equipamiento habitual de laboratorio.
NOTAS
1. ALBUMIN CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable
MUESTRAS
tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
Suero o plasma libre de hemlisis1: Estabilidad 1 mes a 2-8C o 1
2. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores
semana a 15-25C. sistemticos en mtodos automticos. En este caso, se recomienda
utilizar calibradores sricos.
PROCEDIMIENTO 3. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
1. Condiciones del ensayo: 4. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin
Longitud de onda:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 630 nm (600-650) de este reactivo en distintos analizadores.
Cubeta: . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .1 cm paso de luz
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 15-25C/37C BIBLIOGRAFA
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 1. Gendler S. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
3. Pipetear en una cubeta (Nota 3) : Toronto. Princeton 1984; 1268-1273 and 425.
2. Rodkey F L. Clin Chem 1965; 11: 478-487.
Blanco Patrn Muestra 3. Webster D. Clin Chem. 1974: Acta 53: 109-115.
4. Doumas BT Clin Chem. 1971: Acta 31: 87-96.
R (mL) 1,0 1,0 1,0 5. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Patrn (Nota1,2) (L) -- 5 -- 6. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
7. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Muestra (L) -- -- 5 8. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
4. Mezclar e incubar 5 min a 37C 10 min a 15-25C. PRESENTACIN

5. Leer la absorbancia (A) del Patrn y la muestra, frente al Ref: 1001020 R:2 x 250 mL , CAL : 1 x 5 mL
blanco de reactivo. El color es estable 1 hora a temperatura Ref: 1001022 Cont. R:1 x 1000 mL , CAL : 1 x 5 mL
ambiente. Ref: 1001023 R:2 x 50 mL , CAL : 1 x 2 mL
BSIS02-E 11/02/16 SPINREACT,S.A. / S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com
ALBUMIN
Albumin
Bromocresol green. Colorimetric
Quantitative determination of albumin CALCULATIONS

IVD ( A ) Sample - ( A ) Blank
x 5 (Standard conc.) = g/dL albumin in the sample
( A ) S tan dard - ( A ) Blank
Store at 2-8C
Conversion factor: g/dL x 144,9 = mol/L
PRINCIPLE OF THE METHOD
Albumin in the presence of bromocresol green at a slightly acid pH, QUALITY CONTROL
produces a colour change of the indicator from yellow-green - to Control sera are recommended to monitor the performance of assay
green-blue. The intensity of the color formed is proportionalto the procedures: SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and
albumin concentration in the sample1,2,3,4. 1002210).
If control values are found outside the defined range, check the
CLINICAL SIGNIFICANCE instrument, reagents and calibrator for problems.
One of the most important serum proteins produced in the liver is Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and
albumin. corrective actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
This molecule has an extraordinarily wide range of functions,
REFERENCE VALUES
including nutrition, maintenance of oncotic pressure and transport
3,5 to 5,0 g/dL1.
of Ca++, bilirubin, free fatty acid, drugs and steroids.
These values are for orientation purpose; each laboratory should
Variation in albumin levels indicate liver diseases, malnutrition,
establish its own reference range.
skin lesions such as dermatitis and burns or dehydration 1,7,8.
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it PERFORMANCE CHARACTERISTICS
should integrate clinical and other laboratory data. Measuring range: From detection limit of 0,0349 g/dL to linearity limit of
6 g/dL.
REAGENTS If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample
1/2 with NaCI 9 g/L and multiply the result by 2.
R Bromocresol green pH 4,2 0,12 mmol/L
Precision:
Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
ALBUMIN CAL Albumin aqueous primary standard 5 g/dL Mean (g/dL) 5,00 3,71 4,56 3,07
SD 0,02 0,02 0,28 0,18
CV (%) 0,47 0,55 6,20 5,90
PREPARATION
Reagent and standard are ready to use. Sensitivity: 1 g/dL = 0,2003 (A).
Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not
show systematic differences when compared with other commercial
STORAGE AND STABILITY
reagents (x).
All the components of the kit are stable until the expiration date on
The results obtained using 50 samples were the following:
the label when stored tightly closed at 2-8C, protected from light
Correlation coefficient (r) 2: 0,99169.
and contaminations prevented during their use.
Regression equation: y= 1,045x 0,028.
Do not use reagents over the expiration date.
The results of the performance characteristics depend on the analyzer
Signs of reagent deterioration:
used.
- Presence of particles and turbidity.
- Blank absorbance (A) at 630 nm 0,40.
INTERFERENCES
Bilirubin up to 110 mg/L, hemoglobin up to 1 g/L and lipemic sera up to
ADDITIONAL EQUIPMENT 10 g/L no interfere1,4.
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 630 nm. A list of drugs and other interfering substances with albumin
- Matched cuvettes 1,0 cm light path. determination has been reported 5,6.
- General laboratory equipment.
NOTES
SAMPLES 1. ALBUMIN CAL: Proceed carefully with this product because due
Serum or plasma, free of hemolysis 1: Stability 1 month at 2-8C or its nature it can get contaminated easily.
1 week at 15-25C. 2. Calibration with the aqueous Standard may cause a systematic error in
automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a
serum Calibrator.
PROCEDURE 3. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
1. Assay conditions: 4. SPINREACT has instruction sheets for several automatic
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . 630 nm (600-650) analyzers.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . 1 cm light path
Temperature:. . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . 15-25C/37C BIBLIOGRAPHY
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. 1. Gendler S. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Toronto. Princeton 1984; 1268-1273 and 425.
3. Pipette into a cuvette (Note 3): 2. Rodkey F L. Clin Chem 1965; 11: 478-487.
3. Webster D. Clin Chem. 1974: Acta 53: 109-115.
Blank Standard Sample 4. Doumas BT Clin Chem. 1971: Acta 31: 87-96.
6. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Standard (Note 1,2) (L) -- 5 -- 7. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Sample (L) -- -- 5 8. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
4. Mix and incubate for 5 min at 37C or 10 min at 15-25C. PACKAGING

5. Read the absorbance (A) of the samples and Standard, Ref: 1001020 R:2 x 250 mL , CAL : 1 x 5 mL
against the blank. The colour is stable 1 hour at room temperature. Ref: 1001022 Cont. R:1 x 1000 mL , CAL : 1 x 5 mL
Ref: 1001023 R:2 x 50 mL , CAL : 1 x 2 mL
BSIS02-I 11/02/16 SPINREACT,S.A. / S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
ALBUMIN
Albumine
Vert de bromocrsol. Colorimtrique
Dtermination quantitative de lalbumine CONTROLE DE QUALITE

IVD Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les
valeurs ont t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120
Conserver 2-8C et 1002210).
Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
PRINCIPE DE LA METHODE les ractifs et le calibreur.
Lalbumine se combine au vert de bromocrsol, pH lgrement acide, Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
entranant un changement de couleur de lindice, passant du jaune-vert au les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
vert-bleut, et proportionnel la concentration d'albumine prsente dans correspondraient pas aux attentes.
lchantillon test1, 2, 3,4.
VALEURS DE REFERENCE
SIGNIFICATION CLINIQUE
3,5 5,0 g/dL1.
Lalbumine est lune des protines plasmatiques les plus importantes
Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
produite par le foie.
laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
Parmi ses multiples fonctions, on retiendra la nutrition, lentretien de la
pression oncotique et le transport des substances telles que la Ca++, la
bilirubine, les acides gras, les drogues et les strodes.
Des perturbations dans les valeurs de lalbumine signalent des maladies CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
du foie, une malnutrition, des lsions de la peau telles que de la dermatite, Gamme de mesures: Depuis la lmite de dtection de 0,0349 g/dL jusqu la
des brlures importantes ou une dhydratation1, 7,8. limite de linarit de 6 g/dL.
Le diagnostic clinique doit tenir compte des donnes cliniques et des Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
donnes de laboratoire. 1/2 avec du CINa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Prcisin:
REACTIFS Intra-srie (n=20) Inter-srie (n=20)
Moyenne (g/dL) 5,00 3,71 4,56 3,07
R Vert de bromocrsol pH 4,2 0,12 mmol/L SD 0,02 0,02 0,28 0,18
CV (%) 0,47 0,55 6,20 5,90
ALBUMINE CAL talon primaire de dtection de lalbumine 5 g/dL Sensibilit analytique: 1 g/dL = 0,2003 (A).
Exactitude: Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
PREPARATION commerciaux (x).
Le ractif et le talon sont prts lemploi. Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
Coefficient de corrlation (r)2: 0,99169.
CONSERVATION ET STABILITE Equation de la Coubre de rgression: y=1,045x - 0,028.
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ.
indique sur ltiquette du flacon, et si les flacons sont maintenus
hermtiquement ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources de
contamination. Ne pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique. INTERFERENCES
Indices de dtrioration des ractifs: La bilirubine jusqu 110 mg/L, lhmoglobine jusqu 1 g/L et a lipmie jusqu
- Prsence de particules et turbidit. 10 g/L, interfrent1,4.
- Absorbation du blanc 630 nm 0,40. Diffrentes drogues ont t dcrites ainsi que dautres substances qui interfrent
dans la dtermination de lalbumine5, 6.
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE
- Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 630 nm.
- Cuvettes de 1,0 cm dclairage. REMARQUES
- Equipement classique de laboratoire. 1. ALBUMINE CAL: Etant donn la nature du produit, il est conseill de le
manipuler avec prcaution. En effet, il peut tre facilement contamin.
2. Le calibrage au moyen du patron de dtection peut donner lieu des erreurs
ECHANTILLONS systmatiques lors de mthodes automatiques. Dans de tels cas, il est
Srum ou plasma sans hemolysis1: Stabilit 1 mois 2-8C ou1 semaine conseill dutiliser des calibrages sriques
15-25C.
3. Utiliser des embouts de pipettes jetables propres pour diffuser le produit.
4. SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de
PROCEDURE ce ractif dans diffrents analyseurs.
1. Conditions de test:
Longueur dondes: .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .630 nm (600-650)
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . 1cm dclairage BIBLIOGRAPHIE
Temprature:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15-25C/37C 1. Gendler S. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
2. Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille Toronto. Princeton 1984; 1268-1273 and 425.
3. Pipetter dans une cuvette
(Remarque 3)
: 2. Rodkey F L. Clin Chem 1965; 11: 478-487.
3. Webster D. Clin Chem. 1974: Acta 53: 109-115.
Blanc talon Echantillon 4. Doumas BT Clin Chem. 1971: Acta 31: 87-96.
talon
(Remarque 1,2)
(L) -- 5 --
Echantillon (L) -- -- 5 8. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
4. Mlanger et incuber pendant 5 min. 37C ou 10 min. 15-25C.
5. Lire labsorbation (a) du patron et lchantillon, en comparaison
PRESENTATION
avec le blanc du ractif. La couleur reste stable pendant 1 heure
temprature ambiance. Ref: 1001020 R:2 x 250 mL , CAL : 1 x 5 mL
Ref: 1001022 Cont. R:1 x 1000 mL , CAL : 1 x 5 mL
Ref: 1001023 R:2 x 50 mL , CAL : 1 x 2 mL
CALCULS
(A) chantillon - (A) Blanc
x 5 (talon conc.) = g/dL d'albumine dans lchantillon
(A) talon - (A) Blanc
Facteur de conversion: g/dL x 144,9 = mol/L
BSIS02-F 11/02/16 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99 e-mail: spinreact@spinreact.com
ALBUMIN
Albumina
Verde bromocresol. Colorimtrico
Determinao quantitativa de albumina CONTROLO DE QUALIDADE

IVD conveniente calibrar e analisar juntamente com as amostras soros
Conservar a 2-8C controlo e calibradores padronizados: SPINTROL H
PRINCPIO DO METODO Calibrador, SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002011, 1002120
A albumina combina-se com o verde de bromocresol a um pH e 1002210).
ligeiramente cido, produzindo-se uma alterao da cor do Se os valores determinados estiverem fora do intervalo de tolerncia,
indicador, de amarelo esverdeado a verde azulado proporcional deve ser revisto o instrumento, os reagentes e o calibrador.
concentrao de albumina presente na amostra testada1,2,3,4. Cada laboratrio deve dispr do seu prprio Controlo de Qualidade e
estabelecer correces caso os controles no cumpram com as
SIGNIFICADO CLINICO tolerncias.
A albumina uma das protenas plasmticas mais importantes
produzidas no fgado. VALORES DE REFERNCIA
Entre as suas mltiplas funes inclui-se a nutrio, manuteno 3,5 a 5,0 g/dL1.
da presso osmtica e transporte de substncias como o Ca++, Estes valores so orientativos. recomendvel que cada laboratrio
bilirrubina, cidos gorodos, frmacos e esterides. estabelea os seus prprios valores de referncia.
Alteraes dos valores da albumina indicam patologias do fgado,
desnutrio, leses da pele como dermatite, queimaduras
severas ou desidratao1,7,8. CARACTERISTICAS DEL METODO
Intervalo de medida: Desde o limite de deteco de 0,0349 g/dL at ao
O diagnstico clnico deve realizar-se tendo em considerao
limite de linearidade de 6 g/dL.
todos os dados clnicos e laboratoriais.
Se a concentrao for superior ao limite de linearidade, diluir 1/2 com
REAGENTES NaCI 9 g/L e multiplicar o resultado final por 2.
Preciso:
R Verde bromocresol pH 4,2 0,12 mmol/L Intrasrie (n=20) Intersrie (n=20)
Mdia (g/dL) 5,00 3,71 4,56 3,07
ALBUMIN CAL Padro primario acuoso de albumina 5 g/dL SD 0,02 0,02 0,28 0,18
CV (%) 0,47 0,55 6,20 5,90
Sensibilidade analtica: 1 g/dL = 0,2003 (A).
PREPARAO Exactido: Os reagentes SPINREACT no amostram diferenas
O reagente e o padro or esto prontos para utilizao. sistemticas significativas quando se comparam com outros reagentes
CONSERVAO E ESTABILIDADE comerciais.
Todos os componentes do kit so estveis, at ao final do prazo Foram obtidos os seguintes resultados com 50 amostras:
de validade indicado no rtulo, quando os frascos so mantidos Coeficiente de correlao (r)2: 0,99169.
bem fechados, a 2-8C, protegidos da luz e se evita a sua Equao da recta de regresso: y=1,045x 0,028.
contaminao. No usar reagentes fora do prazo indicado. As caractersticas do mtodo podem variar conforme o equipamento.
Indicadores de deteriorao dos reagentes: INTERFERNCIAS

- Presena de partculas e turvao. Bilirrubina at 110 mg/dL Hemoglobina at 1 g/L, e lipmia at 10g/L,
- Absorvncias do branco a 630 nm 0,40. interferem1,4.
Esto descritas vrias drogas e outras substncias que interferem com
MATERIAL ADICIONAL a determinao da albumina5,6.
- Espectrofotmetro ou analisador para lecturas a 630 nm.
- Cubetas de 1,0 cm de passo de luz.
- Equipamento habitual de laboratrio. NOTAS
1. ALBUMIN CAL: Devido naturaza do produto, aconselhvel trat-lo
com cuidado j que se pode contaminar com muita facilidade.
AMOSTRAS 2. A calibrao com o Padro aquoso pode provocar erros sistemticos
Soro ou plasma livre de hemlise1: Estabilidade: 1 ms a 2-8C em mtodos automticos. Neste caso, recomenda-se a utilizao de
ou 1 semana a 15-25C. calibradores sricos.
3. Usar pontas de pipeta descartveis limpas para sua dispensa.
PROCEDIMENTO 4. SPINREACT dispe de instruces detalhadas para aplicao deste
1. Condies do ensaio: reagente em diferentes analisadores.
Comprimento de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . 630 nm (600-650)
Cuvete: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 1 cm passo de luz BIBLIOGRAFIA
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .. . . .15-25C/37C 1. Gendler S. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St
2. Ajustar o espectrofotmetro a zero frente a agua destilada. Louis. Toronto. Princeton 1984; 1268-1273 and 425.
(Nota 3)
3. Pipetar : 2. Rodkey F L. Clin Chem 1965; 11: 478-487.
Branco Padro Amostra 3. Webster D. Clin Chem. 1974: Acta 53: 109-115.
4. Doumas BT Clin Chem. 1971: Acta 31: 87-96.
R (mL) 1,0 1,0 1,0 5. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
Padro(Nota 1,2)(L) -- 5 -- 1995.
Amostra (L) -- -- 5 6. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
4. Misturar e incubar 5 min a 37C ou 10 min. entre 15-25C.
8. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
5. Ler a absorvncia (A) do Padro e da amostra, frente ao branco
de reagente, a cor estvel por 1 hora temperatura ambiente.
APRESENTAO
CLCULOS Ref: 1001020 R:2 x 250 mL , CAL : 1 x 5 mL
(A) Mostra - (A) Blanco Ref: 1001022 Cont. R:1 x 1000 mL , CAL : 1 x 5 mL
x 5 (Conc. Padro) = g/dL de albumina na amostra Ref: 1001023 R:2 x 50 mL , CAL : 1 x 2 mL
(A) Padro - (A) Blanco
Factor de converso: g/dL x 144,9 = mol/L
BSIS02-P 11/02/16 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
LDH -LQ
LDH-LQ
Pyruvate. Kinetic UV. DGKC. Liquid
Quantitative determination of lactate dehydrogenase Units: One international unit (IU) is the amount of enzyme that transforms 1 mol
(LDH) of substrate per minute, in standard conditions. The concentration is expressed in
units per litre of sample (U/L).
IVD
Temperature conversion factors
Store at 2-8C To correct results to other temperatures multiply by:
PRINCIPLE OF THE METHOD
Assay Conversion factor to
Lactate dehydrogenase (LDH) catalyses the reduction of pyruvate by
temperature 25C 30C 37C
NADH, according the following reaction:
25C 1,00 1,33 1,92
LDH
Pyruvate + NADH + H+ L-lactate + NAD+ 30C 0,75 1,00 1,43
The rate of decrease in concentration of NADPH, measured photometrically, 37C 0,52 0,70 1,00
is proportional to the catalytic concentration of LDH present in the sample1.
QUALITY CONTROL
CLINICAL SIGNIFICANCE Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
Lactate dehydrogenase (LDH) is an enzyme with wide tissue distribution in SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
the body. If control values are found outside the defined range, check the instrument,
The higher concentrations of LDH are found in liver, heart, kidney, skeletal reagents and technique for problems.
muscle and erythrocytes. Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
Increased levels of the enzyme are found in serum in liver disease, actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
myocardial infarction, renal disease, muscular dystrophy and anemia1,4,5.
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should REFERENCE VALUES1
integrate clinical and other laboratory data. 25C 30C 37C
120-240 U/L 160-320 U/L 230-460 U/L
REAGENTS These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its own
Reagent 1 Imidazol 65 mmol/L reference range.
Buffer Pyruvate 0,6 mmol/L
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Reagent 2 Measuring range: From detection limit of 3,42 U/L to linearity limit of 1600 U/L.
NADH 0,18 mmol/L
Substrate If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/10 with
NaCl 9 g/L and multiply the result by 10.
PREPARATION Precision:
Working reagent (WR):
Mix: 4 vol. (R1) Buffer + 1 vol. (R2) Substrate Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
Stability: 15 days at 2-8C or 5 days at 15-25C. Mean (U/L) 400 785 392 773
SD 3,15 10,97 6,23 9,93
STORAGE AND STABILITY CV (%) 0,79 1,40 1,59 1,28
All the components of the kit are stable until the expiration date on the label
when stored tightly closed at 2-8C, protected from light and contaminations Sensitivity: 1 U/L = 0,00009 A/min.
prevented during their use. Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
Do not use reagents over the expiration date. systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
Signs of reagent deterioration: The results obtained using 50 samples were the following:
- Presence of particles and turbidity. Correlation coefficient (r)2: 0,98382.
- Blank absorbance (A) at 340 nm <1,00. Regression equation: y= 0,8988x + 2,583.
The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
ADDITIONAL EQUIPMENT
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 340 nm. INTERFERENCES
- Thermostatic bath at 25C, 30C o 37C ( 0,1C)
Haemolysis interferes with the assay.
- Matched cuvettes 1,0 cm light path.
Some anticoagulants such as oxalates interfere with the reaction1.
A list of drugs and other interfering substances with LDH determination has been
SAMPLES reported by Young et. al2,3.
Serum1. Separated from cells as rapidly as possible. Do not use oxalates as
anticoagulants since they inhibit the enzyme. NOTES
Do not use haemolysed samples. Stability: 2 days at 2-8C. SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
PROCEDURE BIBLIOGRAPHY
1. Assay conditions: 1. Pesce A. Lactate dehydrogenase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co.
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1124-117, 438.
2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm light path
Constant temperature: . . . . . . . . . . . . . . 25C /30C / 37C 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water or air. 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
3. Pipette into a cuvette:
PACKAGING
25 - 30C 37C
WR (mL) 3,0 3,0 R 1: 1 x 60 mL
Ref: 41220
Sample (L) 100 50 Cont.
R 2: 1 x 15mL
R 1: 1 x 240 mL
Ref: 41222
4. Mix, incubate for 1 minute. R 2: 1 x 60 mL
5. Read initial absorbance (A) of the sample, start the stopwatch and read
absorbances at 1 minute intervals thereafter for 3 minutes.
6. Calculate the difference between absorbances and the average
absorbance differences per minute (A/min).
CALCULATIONS
25- 30C A/min x 4925 = U/L LDH
37C A/min x 9690 = U/L LDH
BEIS43-I 18/12/15 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-171716 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
LDH -LQ
LDH-LQ
Piruvato. Cintica UV. DGKC. Lquido
Determinacin cuantitativa de lactato deshidrogenasa CLCULOS

(LDH) 25- 30C A/min x 4925 = U/L LDH
IVD
Conservar a 2-8C
Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que
PRINCIPIO DEL MTODO convierte 1 mol de substrato por minuto, en condiciones estndar. La
La lactato deshidrogenasa (LDH) cataliza la reduccin del piruvato por concentracin se expresa en unidades por litro (U/L).
el NADH, segn la siguiente reaccin:
LDH Factores de conversin de temperaturas
Piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+ Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
La velocidad de disminucin de la concentracin de NADH en el medio Temperatura Factor para convertir a
determinado fotometricamente, es proporcional a la concentracin de medicin 25C 30C 37C
cataltica de LDH en la muestra ensayada1.
25C 1,00 1,33 1,92
SIGNIFICADO CLNICO 30C 0,75 1,00 1,43
La lactato deshidrogenasa (LDH) es una enzima, distribuida por todo 37C 0,52 0,70 1,00
el organismo humano. Las mayores concentraciones de LDH se
CONTROL DE CALIDAD
encuentran en el hgado, corazn, rin, msculo esqueltico y
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
eritrocitos.
SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
El nivel de LDH en suero esta elevado en pacientes con enfermedades
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
del hgado, infartos de miocardio, alteraciones renales, distrofias
revisar el instrumento, los reactivos y la tcnica.
musculares y anemias1,4,5.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los
correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
datos clnicos y de laboratorio.
VALORES DE REFERENCIA1
REACTIVOS 25C 30C 37C
R1 Imidazol 65 mmol/L 120-240 U/L 160-320 U/L 230-460 U/L
Tampn Piruvato 0,6mmol/L Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
R2 establezca sus propios valores de referencia.
NADH 0,18 mmol/L
Substrato CARACTERSTICAS DEL MTODO
Rango de medida: Desde el lmite de deteccin 3,42 U/L hasta el lmite de
PREPARACIN
linealidad 1600 U/L.
Reactivo de trabajo (RT):
Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir 1/10
Mezclar: 4 vol. (R1) Tampn + 1 vol. de (R2) Sustrato.
con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.
Estabilidad: 15 das a 2-8C o 5 das a 15-25C. Precisin:
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de Media (U/L) 400 785 392 773
caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos SD 3,15 10,97 6,23 9,93
bien cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. CV (%) 0,79 1,40 1,59 1,28
No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Indicadores de deterioro de los reactivos: Sensibilidad analtica: 1 U/L = 0,00009 A/min.
- Presencia de partculas y turbidez. Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias
- Absorbancia del Blanco a 340 nm < 1,00. sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
comerciales (x).
MATERIAL ADICIONAL Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 340 nm. Coeficiente de regresin (r)2: 0,98382.
- Bao termostatizable a 25C, 30C 37C ( 0,1C) Ecuacin de la recta de regresin: y= 0,8988x + 2,583.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
INTERFERENCIAS
MUESTRAS La presencia de hemlisis interfiere con los resultados.
Suero1. Separado lo antes posible de los hemates. No usar oxalatos Algunos anticoagulantes como los oxalatos interfieren en la reaccin1.
como anticoagulantes ya que interfieren en los resultados. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
No usar muestras hemolizadas. Estabilidad: 2 das a 2-8C. determinacin de la LDH2,3.
PROCEDIMIENTO NOTAS
1. Condiciones del ensayo: SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm este reactivo en distintos analizadores.
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz
Temperatura constante: . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C BIBLIOGRAFA
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada o aire. 1. Pesce A. Lactate dehydrogenase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby
3. Pipetear en una cubeta: Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1124-117, 438.
25 - 30C 37C 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
RT (mL) 3,0 3,0 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
100 50 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Muestra (L)
4. Mezclar, incubar 1 minuto. PRESENTACIN
5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el R 1: 1 x 60 mL
cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos. Ref: 41220
Cont. R 2: 1 x 15 mL
6. Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto R 1: 1 x 240 mL
(A/min). Ref: 41222
R 2: 1 x 60 mL
BEIS43-E 18/12/15 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
LDH -LQ
LDH-LQ
Pyruvate. Cintique UV. DGKC. Liquide
Dtermination quantitative de lactate dshydrognase (LDH) CALCULS

IVD
25- 30C A/min x 4925 = U/L LDH
A conserver entre 2-8C
PRINCIPE DE LA MTHODE
La lactate dshydrognase (LDH) catalyse la rduction de la pyruvate par Units: L'unit internationale (UI) est la quantit d'enzyme qui convertit 1 molde
le NADH, selon la raction suivante : substrat par minute, en conditions standard. La concentration est exprime en
LDH
Pyruvate + NADH + H+ L-lactate + NAD+ units par litre (U/L).
La vitesse de diminution de la teneur en NADH dans le milieu dtermin par
Facteurs de conversion de tempratures
photomtrie est proportionnelle la concentration catalytique de LDH dans
Les rsultats peuvent tre transforms d'autres tempratures en multipliant par :
lchantillon test1.
Temprature Facteur de conversion
SIGNIFICATION CLINIQUE de mesure 25C 30C 37C
La lactate dshydrognase (LDH) est une enzyme prsente dans tout 25C 1,00 1,33 1,92
lorganisme humain. Les plus grandes concentrations de LDH se trouvent 30C 0,75 1,00 1,43
dans le foie, le cur, les reins, le muscle squelettique et les rythrocytes. 37C 0,52 0,70 1,00
Le niveau de LDH dans le srum est lev chez les patients avec des
maladies du foie, des infarctus du myocarde, des troubles rnaux, des CONTRLE DE QUALIT
dystrophies musculaires et des anmies1,4,5. Il convient d'analyser des srums de contrle estims en mme temps que les
Le diagnostic clinique doit tre ralis en prenant compte de toutes les chantillons: SPINTROL H normal et pathologique (rf. 1002120 et 1002210).
donnes cliniques et de laboratoire. Si les valeurs obtenues se trouvent en dehors de la plage de tolrance, il faut revoir
les instruments, les ractifs et la technique.
RACTIFS Chaque laboratoire doit disposer de son propre systme de contrle de qualit et
R1 Imidazole 65 mmol/L tablir des actions correctives si les contrles ne sont pas conformes aux
Pyruvate 0,6 mmol/L tolrances.
Tampon
R2 VALEURS DE RFRENCE1
NADH 0,18 mmol/L
Substrat 25C 30C 37C
120-240 U/L 160-320 U/L 230-460 U/L
PRPARATION Ces valeurs sont approximatives. Il est recommand que chaque laboratoire
Ractif de travail (RT) : tablisse ses propres valeurs de rfrence.
Mlanger : 4 vol. de (R1) tampon + 1 vol. de (R2) substrat.
Stabilit : 15 jours 2-8C ou 5 jours 15-25C. CARACTRISTIQUES DE LA MTHODE
Gamme de mesure: de la limite de la dtection de 3,42 U/L la limite de linarit
CONSERVATION ET STABILIT de 1600 U/L.
Toutes les composantes du kit sont stables jusqu lexpiration de la date Si les rsultats obtenus sont plus levs que la limite de linarit, il faut diluer 1/10
mentionne sur ltiquette en cas de conservation hermtique sous 2-8C avec ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat par 10.
et de protection contre la lumire et les contaminations vites lors de leur Prcision:
utilisation. Intra-essai (n= 20) Inter-essai (n= 20)
Ne pas utiliser les ractifs une fois passe la date indique. Moyenne (U/L) 400 785 392 773
Indicateurs de dtrioration des ractifs : SD 3,15 10,97 6,23 9,93
- Prsence de particules et turbidit. CV (%) 0,79 1,40 1,59 1,28
- Absorbance du tmoin 340 nm < 1,00.
Sensibilit analytique: 1 U/L = 0,00009 A/min.
QUIPEMENTS SUPPLMENTAIRES Exactitude: les rsultats obtenus en utilisant les ractifs SPINREACT nont pas
- Spectrophotomtre ou colorimtre mesurant 340 nm. prsent de diffrences systmatiques en comparaison avec dautres ractifs
- Bain thermostatable 25C, 30C ou 37 C ( 0,1C) commerciaux (x).
- Cuves apparies de 1,0 cm dclairage. Les rsultats obtenus sur 50 chantillons ont t les suivants :
- quipement dusage gnral pour laboratoire. Coefficient de rgression (r)2: 0,98382.
quation de la droite de rgression: y=0,8988x + 2,583.
CHANTILLONS Les caractristiques de la mthode peuvent varier en fonction de l'analyseur
Srum1. Spar aussi vite que possible des hmaties. Ne pas utiliser utilis.
doxalates comme anticoagulants vu quils interfrent dans les rsultats.
Ne pas utiliser dchantillons hmolyss. Stabilit: 2 jours 2-8C. INTERFRENCES
La prsence dhmolyse interfre dans les rsultats.
PROCDURE Certains anticoagulants comme les oxalates interfrent dans la raction1.
1. Conditions dessai: Plusieurs drogues et autres substances interfrant dans la dtermination de la
Longueur donde:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm LDH2,3 ont t dcrites.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm. dclairage
Temprature constante: . . . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C NOTES
2. Rgler linstrument zro dans leau distille ou air. SPINREACT dispose d'instructions dtailles pour l'application de ce ractif
3. Pipette dans une cuvette: dans diffrents analyseurs.
BIBLIOGRAPHIE
25 - 30C 37C 1. Pesce A. Lactate dehydrogenase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co.
RT (mL) 3,0 3,0 St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1124-117, 438.
chantillon (L) 100 50 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
4. Mlanger et incuber pendant 1 minute. 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
5. Lire l'absorbance (A) initiale de l'chantillon, mettre en marche le 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
chronomtre et lire l'absorbance chaque minute pendant 3 minutes.
6. Calculer la moyenne de la diffrence d'absorbance par minute (A/min). PRSENTATION
R 1: 1 x 60 mL
Rf: 41220
R 2: 1 x 15 mL
Cont.
R 1: 1 x 240 mL
Rf: 41222
R 2: 1 x 60 mL
BEIS43-F 18/12/15 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
LDH -LQ
LDH-LQ
Piruvato. Cintica UV. DGKC. Lquido
Determinao quantitativa da lactato desidrogenase (LDH) Factores de converso de temperaturas

IVD Os resultados podem transformar-se para outras temperaturas multiplicando por:
Armazenar 2-8 C. Temperatura Factor para converter para

de medio 25 C 30 C 37 C
PRINCPIO DO MTODO 25 C 1,00 1,33 1,92
A lactato desidrogenase (LDH) cataliza a reduo do piruvato pelo NADH, 30 C 0,75 1,00 1,43
de acordo com a reaco seguinte: 37 C 0,52 0,70 1,00
LDH
Piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+
CONTROLO DE QUALIDADE
A velocidade de diminuio da concentrao de NADH no meio conveniente analisar juntamente com as amostras os soros controlo avaliados:
determinado fotometricamente, proporcional concentrao cataltica de SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
LDH na amostra testada 1. Se os valores detectados se encontrarem fora do intervalo de tolerncia, deve-se
rever o instrumento, os reagente e a tcnica.
SIGNIFICADO CLNICO
Cada laboratrio deve estabelecer o seu prprio esquema de Controlo de
A lactato desidrogenase (LDH) uma enzima, distribuda por todo o Qualidade e as aes corretivas no caso de os controlos no estarem de acordo
organismo humano. As concentraes mais elevadas de LDH encontram- com as tolerncias aceitveis.
se no fgado, corao, rins, msculo esqueltico e eritrcitos.
O nvel de LDH no soro elevado em doentes com doenas hepticas, VALORES DE REFERNCIA1
enfartes do miocrdio, alteraes renais, distrofias musculares e 25 C 30 C 37 C
anemias1,4,5. 120-240 U/L 160-320 U/L 230-460 U/L
O diagnstico clnico deve ser realizado tendo em considerao todos os Estes valores so indicativos. recomendvel que cada laboratrio estabelea os
dados clnicos e laboratoriais. seus prprios valores de referncia.
REAGENTES CARACTERSTICAS DO MTODO
R1 Imidazol 65 mmol/L Intervalo de medio: Desde o limite de deteco 3,42 U/L at ao limite de
Tampo Piruvato 0,6 mmol/L linearidade de 1600U/L.
R2 NADH 0,18 mmol/L Se a concentrao da amostra for superior ao limite de linearidade, diluir na
Substrato proporo de 1:10 com ClNa 9 g/L e multiplicar o resultado final por 10.
Preciso:
PREPARAO Intra-srie (n= 20) Inter-srie (n= 20)
Reagente de trabalho (RT): Mdia (U/l) 400 785 392 773
Misturar: 4 vol. (R1) Tampo + 1 vol. de (R2) Substrato. SD 3,15 10,97 6,23 9,93
Estabilidade: 15 dias a 2-8 C ou 5 dias 15-25 C. CV (%) 0,79 1,40 1,59 1,28
CONSERVAO E ESTABILIDADE Sensibilidade analtica: 1 U/L = 0,00009 A/min.

Todos os componentes do kit so estveis at data de validade que Exactido: Os reagentes SPINREACT (y) no apresentam diferenas
consta da etiqueta quando armazenados bem fechados a 2-8 C e as sistemticas significativas quando comparados com outros reagentes comerciais
contaminaes so evitadas durante a sua utilizao. (x).
No utilizar os reagentes aps passar o prazo de validade. Os resultados obtidos com 50 amostras foram os seguintes:
Indicadores de deteriorao dos reagentes: Coeficiente de regresso (r)2: 0,98382.
- Presena de partculas e turbidez. Equao da recta de regresso: y= 0,8988x + 2,583.
- Absorvncias do Branco a 340 nm < 1,00. As caractersticas do mtodo podem variar de acordo com o analisador utilizado.
EQUIPAMENTO ADICIONAL INTERFERNCIAS

- Espectrofotmetro ou analisador para leituras a 340 nm. A presena de hemlise interfere nos resultados.
- Banho termoestvel a 25 C, 30 C ou 37 C ( 0,1 C) Alguns anticoagulantes, tal como os oxalatos interferem na reaco1.
- Cuvettes de 1,0 cm de caminho de luz. Foram descritos vrios frmacos e outras substncias que interferem na
- Equipamento de rotina de laboratrio. determinao da LDH2,3.
AMOSTRAS NOTAS
Soro1. Separado das hemcias o mais rpido possvel. No utilizar oxalatos A SPINREACT dispe de instrues detalhadas para aplicao deste
como anticoagulantes, uma vez que interferem nos resultados. reagente em diferentes analisadores.
No utilizar amostras hemolizadas. Estabilidade: 2 dias a 2-8 C.
BIBLIOGRAFA
PROCEDIMENTO 1. Pesce A. Lactate dehydrogenase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co.
1. Condies do teste: St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1124-117, 438.
Comprimento de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .340 nm 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm caminho de luz 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Temperatura constante: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 C / 30 C / 37 C 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
2. Ajustar o espectrofotmetro para zero com a gua destilada ou ar. 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
3. Pipetar numa cuvette:
25 C - 30 C 37 C APRESENTAO
RT (mL) 3,0 3,0 R 1: 1 x 60 mL
Amostra (L) 100 50 Ref: 41220
R 2: 1 x 15 mL
Cont.
R 1: 1 x 240 mL
4. Misturar, incubar durante 1 minuto. Ref: 41222
R 2: 1 x 60 mL
5. Ler a absorvncia (A) inicial da amostra, colocar o cronmetro em
funcionamento e ler a absorvncia a cada minuto durante 3 minutos.
6. Calcular a mdia da diferena de absorvncia por minuto (A/min).
CLCULOS
25 C- 30 C A/min x 4925 = U/L LDH
37 C A/min x 9690 = U/L LDH

Unidades: Uma unidade internacional (UI) a quantidade de enzima que
converte 1 mol de substrato por minuto, em condies padro. A
concentrao expressa em unidades por litro (U/L).
BEIS43-P 18/12/15 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
GOT (AST)-LQ
GOT-LQ
NADH. Cintico UV. IFCC rec. Lquido
Determinacin cuantitativa de aspartato aminotransferasa CLCULOS

GOT (AST)
A/min x 1750 = U/L de AST
IVD
Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol
Conservar a 2-8C
de substrato por minuto, en condiciones estndar. La concentracin se expresa en
PRINCIPIO DEL MTODO unidades por litro (U/L).
La aspartato aminotransferasa (AST) inicialmente llamada transaminasa Factores de conversin de temperaturas
glutamato oxaloactica (GOT) cataliza la transferencia reversible de un Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
grupo amino del aspartato al -cetoglutarato con formacin de glutamato y
oxalacetato. El oxalacetato producido es reducido a malato en presencia Temperatura Factor para convertir a
de malato deshidrogenasa (MDH) y NADH: de medicin 25C 30C 37C
AST 25C 1,00 1,37 2,08
L-Aspartato + -Cetoglutarato Glutamato + Oxalacetato 30C 0,73 1,00 1,54
MDH 37C 0,48 0,65 1,00
Oxalacetato + NADH + H +
Malato + NAD+
La velocidad de disminucin de la concentracin de NADH en el medio, CONTROL DE CALIDAD
determinada fotomtricamente, es proporcional a la concentracin Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
cataltica de AST en la muestra ensayada1. SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
SIGNIFICADO CLNICO Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
La AST es una enzima intracelular, se encuentra en niveles altos en el revisar el instrumento, los reactivos y la tcnica.
msculo del corazn, las clulas del hgado, las clulas del msculo Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
esqueltico y en menores cantidades en otros tejidos. correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
Aunque un nivel elevado de AST en suero no es especfico de
enfermedad heptica se emplea principalmente para su diagnstico y
25C 30C 37C
seguimiento, junto con otras enzimas como la ALT y ALP. Tambin se
Hombres Hasta 19 U/L 26 U/L 38 U/L
emplea en el control post-infarto, en pacientes con desrdenes del
Mujeres Hasta 16 U/L 22 U/L 31 U/L
msculo esqueltico, y en otras afecciones1,4,5.
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
establezca sus propios valores de referencia.
clnicos y de laboratorio.
REACTIVOS CARACTERSTICAS DEL MTODO
TRIS pH 7,8 80 mmol/L Rango de medida: Desde el lmite de deteccin 0 U/L hasta el lmite de
R1 Lactato deshidrogenasa (LDH) 800 U/L linealidad 467 U/L.
Malato deshidrogenasa (MDH) 600 U/L Si la concentracin de la muestra es superior al lmitede linealidad, diluir 1/10
Tampn
L-Aspartato 200 mmol/L con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.
Precisin:
R2 NADH 0,18 mmol/L
Substrato -Cetoglutarato 12 mmol/L Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Media (U/L) 48,1 159 47,4 156
PRECAUCIONES SD 0,56 0,57 1,42 4,35
R1: H290-Puede ser corrosivo para los metales. CV (%) 1,16 0,36 3,00 2,79
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto.
Sensibilidad analtica: 1 U/L = 0,00053 A/min.
PREPARACIN
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
Reactivo de trabajo (RT):
significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Mezclar: 4 vol. (R1) Tampn + 1 vol. de (R2) Substrato. Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Estabilidad: 21 das a 2-8C o 72 horas a temperatura ambiente (15-25C). Coeficiente de regresin (r): 0,99956.
Ecuacin de la recta de regresin: y= 1,042x - 0,342.
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a INTERFERENCIAS
2-8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. Los anticoagulantes de uso corriente como la heparina, EDTA oxalato o fluoruro
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. no afectan los resultados. La hemlisis interfiere con la determinacin 1.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
- Absorbancia del blanco a 340 nm < 1,00. determinacin de la AST2,3.
MATERIAL ADICIONAL NOTAS

- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 340 nm. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de este
- Bao termostatable a 25C, 30C 37C ( 0,1C) reactivo en distintos analizadores.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio. BIBLIOGRAFA
1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
MUESTRAS Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
1
Suero o plasma . Estabilidad de la muestra: 7 das a 2-8C. 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
PROCEDIMIENTO 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
1. Condiciones del ensayo: 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz PRESENTACIN
Temperatura constante: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada o aire. R1: 1 x 60 mL
Ref: 41270 R2: 1 x 15 mL
3. Pipetear en una cubeta:
R1: 1 x 240 mL
RT (mL) 1,0 Ref: 41272 Cont.
R2: 1 x 60 mL
Muestra (L) 100
Ref: 41273 R1: 1 x 480 mL
4. Mezclar, incubar 1 minuto. R2: 1 x 120 mL
5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el
cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
6. Calcular el promedio de la diferenciade absorbancia por minuto
(A/min).
BEIS46-E 26/05/15 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
GOT (AST)-LQ
GOT-LQ
NADH. Kinetic UV. IFCC rec. Liquid
Quantitative determination of aspartate aminotransferase 5. Read initial absorbance (A) of the sample, start the stopwatch and read
GOT (AST) absorbances at 1 minute intervals thereafter for 3 minutes.
6. Calculate the difference between absorbances and the average absorbance
IVD differences per minute (A/min).
Store at 2-8C
CALCULATIONS
PRINCIPLE OF THE METHOD A/min x 1750 = U/L of AST
Aspartate aminotransferase (AST) formerly called glutamate oxaloacetate
(GOT) catalyses the reversible transfer of an amino group from aspartate Units: One international unit (IU) is the amount of enzyme that transforms 1 mol
to -ketoglutarate forming glutamate and oxalacetate. The oxalacetate of substrate per minute, in standard conditions. The concentration is expressed
produced is reduced to malate by malate dehydrogenase (MDH) and in units per litre of sample (U/L).
NADH:
Temperature conversion factors
AST To correct results to other temperatures multiply by:
L-Aspartate + -Ketoglutarate Glutamate + Oxalacetate
MDH Assay Conversion factor to
Oxalacetate + NADH + H +
Malate + NAD+
The rate of decrease in concentration of NADH, measured photometrically,
25C 1,00 1,37 2,08
is proportional to the catalytic concentration of AST present in the sample1.
30C 0,73 1,00 1,54
37C 0,48 0,65 1,00
CLINICAL SIGNIFICANCE
The AST is a cellular enzyme, is found in highest concentration in heart
muscle, the cells of the liver, the cells of the skeletal muscle and in smaller QUALITY CONTROL
amounts in other tissues. Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
Although an elevated level of AST in the serum is not specific of the SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
hepatic disease, is used mainly to diagnostic and to verify the course of If control values are found outside the defined range, check the instrument,
this disease with other enzymes like ALT and ALP. reagents and technique for problems.
Also it is used to control the patients after myocardial infarction, in skeletal Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
muscle disease and other1,4,5. actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should 1
integrate clinical and other laboratory data. REFERENCE VALUES
25C 30C 37C
REAGENTS Men up to 19 U/L 26 U/L 38 U/L
TRIS pH 7,8 80 mmol/L Women up to 16 U/L 22 U/L 31 U/L
R1 Lactate dehydrogenase (LDH) 800 U/L These values are for orientation purpose; each laboratory should establish
Buffer Malate dehydrogenase (MDH) 600 U/L its own reference range.
L-Aspartate 200 mmol/L
R2 NADH 0,18 mmol/L Measuring range: From detection limit of 0 U/L to linearity limit of 467 U/L.
Substrate -Ketoglutarate 12 mmol/L If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/10 with
PRECAUTIONS Precision:
R1: H290-May be corrosive to metals. Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
Follow the precautionary statements given in MSDS and label of the product. Mean (U/L) 48,1 159 47,4 156
SD 0,56 0,57 1,42 4,35
PREPARATION CV (%) 1,16 0,36 3,00 2,79
Working reagent (WR):
Mix: 4 vol. (R1) Buffer + 1 vol. (R2) Substrate. Sensitivity: 1 U/L = 0,00053 A/min.
Stability: 21 days at 2-8C or 72 hours at room temperature (15-25C). Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
STORAGE AND STABILITY Correlation coefficient (r): 0,99956.
All the components of the kit are stable until the expiration date on the
Regression equation: y= 1,042x - 0,342.
label when stored tightly closed at 2-8C, protected from light and
contaminations prevented during their use.
Do not use reagents over the expiration date.
INTERFERENCES
Signs of reagent deterioration:
Anticoagulants currently in use like heparin, EDTA, oxalate and fluoride do not
- Blank absorbance (A) at 340 nm < 1,00. affect the results. Haemolysis interferes with the assay 1
A list of drugs and other interfering substances with AST determination has been
ADDITIONAL EQUIPMENT reported 2,3.
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 340 nm.
NOTES
SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
BIBLIOGRAPHY
SAMPLES 1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
Serum or plasma1: Stability 7 days at 2-8C. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
PROCEDURE 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
1. Assay conditions:
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm light path
PACKAGING
Constant temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C
2. Adjust the instrument to zero with distilled water or air. R1: 1 x 60 mL
Ref: 41270 R2: 1 x 15 mL
R1: 1 x 240 mL
WR (mL) 1,0 Ref: 41272 Cont.
R2: 1 x 60 mL
Sample (L) 100 R1: 1 x 480 mL
Ref: 41273
R2: 1 x 120 mL
4. Mix, incubate for 1 minute.
BEIS46-I 26/05/15 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
GOT (AST)-LQ
GOT-LQ
NADH. Cintique UV. IFCC rec. Liquide
Dtermination quantitative daspartate aminotransfrase CALCULS

GOT (AST) A/min x 1750 = U/L dAST
IVD
Units: Lunit internationale (UI) correspond la quantit denzyme qui converti
Conserver 2-8C
1 mol substrats par minute, sous es conditions standards. La concentration est
PRINCIPE DE LA METHODE exprime en unit par litre (U/L).
Laspartate aminotransfrase (AST) initialement appele glutamate
oxaloactique (GOT) catalyse le transfert rversible dun groupe amin Facteurs de conversion de tempratures
daspartate vers lalpha ctoglutarate avec formation de glutamate et Les rsultats peuvent se transformer dautres tempratures, en multipliant par:
doxalactate. Loxalactate produit est rduit en malte dshydrognase
(MDH) et NADH: Temprature Facteur de conversion
AST de mesure 25C 30C 37C
L-Aspartate + -Ctoglutarate Glutamate + Oxalactate
MDH 25C 1,00 1,37 2,08
Oxalactate + NADH + H+ Malte + NAD+ 30C 0,73 1,00 1,54
La vitesse de rduction de la concentration en NADH au centre, 37C 0,48 0,65 1,00
dtermine par photomtrie, est proportionnelle la concentration
catalytique en AST de lchantillon test1. CONTROLE DE QUALITE
Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les
SIGNIFICATION CLINIQUE valeurs ont t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120
LAST est une enzyme intracellulaire, qui se trouve en grandes quantits et 1002210).
dans le muscle du cur, les cellules du foie, les cellules du muscle Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
squelettique et en moindres quantits dans les autres tissus. les ractifs et le calibreur.
Mme si un niveau lev dAST dans le srum nest pas caractristique Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
dune maladie hpatique, lAST est principalement utilise pour le les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
diagnostic et le suivi, en parallle dautres enzymes telles que lALT et correspondraient pas aux attentes.
lALP. LAST est aussi employe dans le contrle post-infarctus, chez les
patients souffrant de troubles du muscle squelettique, ainsi que dans VALEURS DE REFERENCE
1
dautres cas1, 4,5.
25C 30C 37C
Le diagnostic clinique doit tre ralis en tenant compte des donnes
Hommes Jusquau 19 U/L 26 U/L 38 U/L
cliniques et de laboratoire.
Femmes Jusquau 16 U/L 22 U/L 31 U/L
REACTIFS Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
TRIS pH 7,8 80 mmol/L laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
R1 Lactate dshydrognase (LDH) 800 U/L
Tampon Malte dshydrognase (MDH) 600 U/L CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
L-Aspartate 200 mmol/L Gamme de mesures: Depuis la limite de dtection de 0 U/L jusqu la limite de
linarit de 467 U/L.
R2 NADH 0,18 mmol/L Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
Substrats -Ctoglutarate 12 mmol/L 1/2 avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Prcision:
PRCAUTIONS Intra-srie (n=20) Inter-srie (n=20)
R1: H290-Peut tre corrosif pour les mtaux.
Moyenne (U/L) 48,1 159 47,4 156
Suivez les conseils de prudence donns en SDS et tiquette.
SD 0,56 0,57 1,42 4,35
PREPARATION CV (%) 1,16 0,36 3,00 2,79
Ractif de travail (RT):
Mlanger: 1 vol. de (R2) substrats + 4 vol. (R1) tampon. Sensibilit analytique: 1 U/L = 0,00053 A/min.
Stabilit: 21 jours 2-8C ou 72 heures temprature ambiante (15-25C). systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
commerciaux (x).
CONSERVATION ET STABILITE Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption Coefficient de corrlation (r): 0,99956.
indique sur ltiquette du flacon, et si les flacons sont maintenus Equation de la Coubre de rgression: y= 1,042x - 0,342.
hermtiquement ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources de Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ.
contamination. Ne pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique.
Indices de dtrioration des ractifs:
- Prsence de particules et turbidit. INTERFERENCES
- Absorbation du blanc 340 nm < 1,00. Les anticoagulants dutilisation courante tels que lhparine, lEDTA oxalate ou le
fluorure naffectent pas les rsultats. Lhmolyse interfre dans la dtermination1.
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE Diffrentes drogues ont t dcrites ainsi que dautres substances qui interfrent
- Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 340 nm. dans la dtermination de l AST2,3.
- Bain thermostable 25C, 30C ou 37C ( 0,1C).
- Cuvettes de 1,0 cm dclairage. REMARQUES
- Equipement classique de laboratoire. SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
ractif dans diffrents analyseurs.
ECHANTILLONS
- Srum ou plasma1: Stabilit de l'chantillon 7 jours 2-8C.
BIBLIOGRAPHIE
PROCEDURE 1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
1. Conditions de test: Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm dclairage 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Temprature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
2. Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille ou air. 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
3. Pipetter dans une cuvette:
PRESENTATION
RT (mL) 1,0
R1: 1 x 60 mL
chantillon (L) 100 Ref: 41270 R2: 1 x 15 mL
4. Mlanger et incuber pendant 1 minute. R1: 1 x 240 mL
5. Lire labsorbation (A) initiale de lchantillon, mettre en route le Ref: 41272 Cont.
R2: 1 x 60 mL
chronomtre et lire labsorbation chaque minute pendant 3 minutes.
6. Calculer la moyenne de laugmentation dabsorbation par minute Ref: 41273 R1: 1 x 480 mL
(A/min). R2: 1 x 120 mL
BEIS46-F 26/05/15 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE
GOT (AST)-LQ
GOT-LQ
NADH. Cintico UV. IFCC rec. Lquido
Determinao quantitativa da aspartato aminotransferase CLCULOS

GOT (AST) A/min x 1750 = U/L da AST
IVD Unidades: Uma unidade internacional (UI) a quantidade de enzima que
Armazenar a 2-8C. transforma 1 mol de substrato por minuto, em condies padro. A
concentrao expressa em unidades por litro de amostra (U/L).
PRINCPIO DO MTODO
O aspartato aminotransferase (AST), anteriormente denominada ou Fatores de converso de temperatura
glutamato-oxaloacetato-transaminase (GOT) catalisa a transferncia Para corrigir resultados para outras temperaturas, multiplicar por:
reversvel de um aminogrupo do aspartato para - quetoglutorato que
forma glutamato e oxaloacetato. O oxaloacetato produzido reduzido Ensaios Fator de converso para
para malato desidrogenase (MDH) e NADH: temperatura 25C 30C 37C
AST 25C 1,00 1,37 2,08
L-Aspartato + -Quetoglutarato Glutamato + Oxaloacetato
30C 0,73 1,00 1,54
MDH
Oxaloacetato + NADH + H+ Malato + NAD+ 37C 0,48 0,65 1,00
A taxa de diminuio na concentrao de NADH, medida
fotometricamente, proporcional concentrao cataltica de AST CONTROLO DE QUALIDADE
presente na amostra1. So recomendados soros de controlo para monitorizar o desempenho dos
procedimentos dos ensaios:SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002120 e
SIGNIFICADO CLNICO 1002210).
A AST uma enzima celular encontrada em concentraes mais elevadas Se os valores de controlo estiverem foram do intervalo definido, verifique o
no msculo cardaco, nas clulas do fgado, nas clulas do msculo instrumento, reagentes e tcnicas para detetar problemas.
esqueltico e em pequenas quantidades em outros tecidos. Cada laboratrio deve estabelecer o seu prprio esquema de Controlo de
Apesar de um nvel elevado de AST no soro no ser especfico de doena Qualidade e as aes corretivas no caso de os controlos no estarem de acordo
heptica, utilizado principalmente para diagnosticar e para verificar o com as tolerncias aceitveis.
decorrer desta doena com outras enzimas como a ALT ou a ALP.
Tambm utilizado para controlar os pacientes depois de um enfarte do VALORES DE REFERNCIA1
miocrdio, na doena msculo-esqueltica e noutras1,4,5. 25C 30C 37C
No devem ser feitos diagnsticos clnicos com base nas descobertas do Homens at 19 U/L 26 U/L 38 U/L
resultado de um nico teste, mas devem integrar dados clnicos e outros Mulheres at 16 U/L 22 U/L 31 U/L
dados laboratoriais. Estes valores servem apenas como referncia. Cada laboratrio deve
REAGENTES estabelecer o seu prprio intervalo de referncia.
TRIS pH 7,8 80 mmol/L CARACTERSTICAS DO MTODO
R1 Lactato desidrogenase (LDH) 800 U/L Intervalo de medio: Do limite de deteo de 0 U/L at ao limite de linearidade
Tampo Malato desidrogenase (MDH) 600 U/L de 467 U/L.
L-Aspartato 200 mmol/L Se os resultados obtidos forem superiores ao limite de linearidade, diluir a
R2 NADH 0,18 mmol/L amostra 1/10 com NaCl 9 g/L e multiplicar o resultado por 10.
Substrato -ADHtratoLodroge 12 mmol/L Preciso:
Intra-ensaios (n=20) Inter-ensaios (n=20)
PRECAUES Mdia (U/L) 48,1 159 47,4 156
R1: H290-Pode ser corrosivo para os metais. SD 0,56 0,57 1,42 4,35
Seguir os conselhos de prudncia dados em SDS e etiqueta. CV (%) 1,16 0,36 3,00 2,79
PREPARAO Sensibilidade: 1 U/L = 0,00053 A/min.
Reagente de trabalho (RT): Exactitude: Os resultados obtidos utilizando reagentes SPINREACT (y) no
Mistura: 4 vol. (R1) Tampo + 1 vol. (R2) Substrato. demonstraram diferenas sistemticas quando comparados com outros
Estabilidade: 21 dias 2-8C ou 72 horas temperatura ambiente (15-25C). reagentes comerciais (x).
Os resultados obtidos utilizando 50 amostras foram os seguintes:
CONSERVAO E ESTABILIDADE
Coeficiente de correlao (r): 0,99956.
Todos os componentes do kit so estveis at data de validade que Equao de regresso: y= 1,042x - 0,342.
consta da etiqueta quando armazenados bem fechados a 2-8C Os resultados das caractersticas de desempenho dependem do analisador
protegidos da luz e quando as contaminaes so evitadas durante a sua utilizado.
utilizao.
No utilizar os reagentes aps passar o prazo de validade.
INTERFERNCIAS
Sinais de deteriorao dos reagentes:
- Presena de partculas e turvao. Os anticoagulantes atualmente em utilizao como a heparina, EDTA, oxalato e
- Absorvncia do branco (A) a 340 nm < 1,00. o fluoreto no afetam os resultados. A hemlise interfere com o ensaio 1.
Uma lista de medicamentos e outras substncias que interagem com a
EQUIPAMENTO ADICIONAL determinao de ALT foi descrita 2,3.
- Espectrmetro ou colormetro a medir a 340 nm.
- Banho termosttico a 25C, 30C ou 37 C ( 0,1C). NOTAS
- Cuvettes equiparadas 1,0 cm passo de luz. O SPINREACT tem instrues para vrios analisadores automticos. As
- Equipamento de laboratrio geral. instrues para muitos deles esto disponveis mediante pedido.
AMOSTRAS
Soro ou plasma1: Estabilidade durante 7 dias a 2-8C. BIBLIOGRAFIA
1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
PROCEDIMENTO Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
1. Condies dos ensaios: 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Comprimento de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm passo de luz 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Temperatura constante: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
2. Ajustar o instrumento para zero com gua destilada ou ar.
3. Pipeta numa cuvette: APRESENTAO
RT (mL) 1,0 R1: 1 x 60 mL
Ref: 41270 R2: 1 x 15 mL
Amostra (L) 100
R1: 1 x 240 mL
4. Misturar e incubar durante 1 minuto. Ref: 41272 Cont.
R2: 1 x 60 mL
5. Ler a absorvncia inicial (A) da amostra, iniciar o cronmetro e ler
absorvncias em intervalos de 1 minuto e, depois, por 3 minutos. Ref: 41273 R1: 1 x 480 mL
6. Calcular a diferena entre absorvncias e as diferenas de R2: 1 x 120 mL
absorvncia mdias por minuto (A/min).
BEIS46-P 26/05/15 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
GOT (AST)
GOT (AST)
NADH. Cintico UV. IFCC rec.
Determinacin cuantitativa de aspartato aminotransferasa 5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro
GOT (AST) y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
IVD 6. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto ( A/min).
Conservar a 2-8C CLCULOS

PRINCIPIO DEL MTODO
La aspartato aminotransferasa (AST) inicialmente llamada transaminasa Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1
glutamato oxaloactica (GOT) cataliza la transferencia reversible de un mol de substrato por minuto, en condiciones estndar. La concentracin se
grupo amino del aspartato al -cetoglutarato con formacin de glutamato y expresa en unidades por litro (U/L).
oxalacetato. El oxalacetato producido es reducido a malato en presencia
Factores de conversin de temperaturas
de malato deshidrogenasa (MDH) y NADH:
Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
AST
Aspartato + - Cetoglutarato Glutamato + Oxalacetato
MDH Temperatura Factor para convertir a
Oxalacetato + NADH + H+ Malato + NAD+ de medicin 25C 30C 37C
La velocidad de disminucin de la concentracin de NADH en el medio, 25C 1,00 1,37 2,08
determinada fotometricamente, es proporcional a la concentracin 30C 0,73 1,00 1,54
cataltica de AST en la muestra ensayada1. 37C 0,48 0,65 1,00
SIGNIFICADO CLNICO CONTROL DE CALIDAD
La AST es una enzima intracelular, se encuentra en niveles altos en el Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
msculo del corazn, las clulas del hgado, las clulas del msculo SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
esqueltico y en menor cantidad en otros tejidos. Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
Aunque un nivel elevado de AST en suero no es especfico de revisar el instrumento, los reactivos y la tcnica.
enfermedad heptica se emplea principalmente para su diagnstico y Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
seguimiento, junto con otras enzimas como la ALT y ALP. Tambin se correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
utiliza en el control post-infarto, en pacientes con desordenes del msculo
esqueltico, y en otras afecciones1,4,5. VALORES DE REFERENCIA1
El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos 25C 30C 37C
clnicos y de laboratorio. Hombres Hasta 19 U/L 26 U/L 38 U/L
Mujeres Hasta 16 U/L 22 U/L 31 U/L
REACTIVOS Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
R1 TRIS pH 7,8 80 mmol/L establezca sus propios valores de referencia.
Tampn L-Aspartato 200 mmol/L
CARACTERSTICAS DEL MTODO
NADH 0,18 mmol/L
Rango de medida: Desde el lmite de deteccin 0 U/L hasta el lmite de
R2 Lactato deshidrogenasa (LDH) 800 U/L
linealidad 360 U/L.
Substrato Malato deshidrogenasa (MDH) 600 U/L
Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir 1/10
-Cetoglutarato 12 mmol/L
con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.
PREPARACIN Precisin:
Reactivo de trabajo (RT): Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Ref: 1001160 Disolver ( ) un comprimido de R2 Substrato en un vial de
Media (U/L) 55,5 165 55,0 162
R1. SD 1,30 3,44 0,92 2,52
Ref: 1001161 Disolver ( ) un comprimido de R2 Substrato en 15 mL de CV (%) 2,35 2,07 1,68 1,55
R1.
Ref: 1001162 Disolver ( ) un comprimido de R2 Substrato en 50 mL de Sensibilidad analtica: 1 U/L = 0,00051 A/min.
R1. Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Estabilidad: 21 das a 2-8C o 72 horas a temperatura ambiente Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
(15-25C). Coeficiente de regresin (r)2: 0,98277.
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a INTERFERENCIAS
2-8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. Los anticoagulantes de uso corriente como la heparina, EDTA oxalato o fluoruro
No usar las tabletas si aparecen fragmentadas. no afectan los resultados. La hemlisis interfiere con la determinacin1.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
Indicadores de deterioro de los reactivos: determinacin de la AST2,3.
- Absorbancia del Blanco a 340 nm < 1,00. NOTAS
SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de este
MATERIAL ADICIONAL
reactivo en distintos analizadores.
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 340 nm.
- Bao termostatizable a 25C, 30C 37C ( 0,1C) BIBLIOGRAFA
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
- Equipamiento habitual de laboratorio. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
MUESTRAS 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Suero o plasma1. Estabilidad de la muestra: 7 das a 2-8C. 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: PRESENTACIN
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..340 nm Ref: 1001160 R1: 20 x 2 mL , R2: 20 2 mL
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . .1 cm paso de luz Cont.
Temperatura constante: . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . ..25C / 30C / 37C Ref: 1001161 R1: 1 x 150 mL, R2: 10 15 mL
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada o aire. Ref: 1001162 R1: 10 x 50 mL, R2: 10 50 mL
RT (mL) 1,0
Muestra (L) 100
4. Mezclar, incubar 1 minuto.
GOT (AST)
GOT (AST)
NADH. Kinetic UV. IFCC rec.
Quantitative determination of aspartate aminotransferase CALCULATIONS
GOT (AST)
A/min x 1750 = U/L of AST
IVD
Store at 2-8C Units: One international unit (IU) is the amount of enzyme that transforms 1 mol
of substrate per minute, in standard conditions. The concentration is expressed
PRINCIPLE OF THE METHOD in units per litre of sample (U/L).
Aspartate aminotransferase (AST) formerly called glutamate oxaloacetate
(GOT) catalyses the reversible transfer of an amino group from aspartate Temperature conversion factors
to -ketoglutarate forming glutamate and oxalacetate. The oxalacetate To correct results to other temperatures multiply by:
produced is reduced to malate by malate dehydrogenase (MDH) and
NADH: Assay Conversion factor to
AST temperature 25C 30C 37C
Aspartate + -Ketoglutarate Glutamate + Oxalacetate
25C 1,00 1,37 2,08
MDH 30C 0,73 1,00 1,54
Oxalacetate + NADH + H+ Malate + NAD+
The rate of decrease in concentration of NADH, measured photometrically, 37C 0,48 0,65 1,00
is proportional to the catalytic concentration of AST present in the sample1. QUALITY CONTROL
CLINICAL SIGNIFICANCE Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
The AST is a cellular enzyme, is found in highest concentration in heart SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
muscle, the cells of the liver, the cells of the skeletal muscle and in smaller If control values are found outside the defined range, check the instrument,
amounts in other weaves. reagents and technique for problems.
Although an elevated level of AST in the serum is not specific of the Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
hepatic disease, is used mainly to diagnostic and to verify the course of actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
this disease with other enzymes like ALT and ALP.
Also it is used to control the patients after myocardial infarction, in skeletal REFERENCE VALUES1
muscle disease and other1,4,5. 25C 30C 37C
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should Men up to 19 U/L 26 U/L 38 U/L
integrate clinical and other laboratory data. Women up to 16 U/L 22 U/L 31 U/L
These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its
REAGENTS own reference range.
R1 TRIS pH 7,8 80 mmol/L PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Buffer L-Aspartate 200 mmol/L Measuring range: From detection limit of 0 U/L to linearity limit of 360 U/L.
NADH 0,18 mmol/L If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/10 with
R2 Lactate dehydrogenase (LDH) 800 U/L NaCl 9 g/L and multiply the result by 10.
Substrate Malate dehydrogenase (MDH) 600 U/L Precision:
-Ketoglutarate 12 mmol/L
PREPARATION Mean (U/L) 55,5 165 55,0 162
Working reagent (WR): SD 1,30 3,44 0,92 2,52
Dissolve one tablet of R.2 Substrate with one vial of R1 Buffer. CV (%) 2,35 2,07 1,68 1,55
Ref: 1001160 Dissolve ( ) one tablet of R2 Substrate in one vial of R1.
Ref: 1001161 Dissolve ( ) one tablet of R2 Substrate in 15 mL of R1. Sensitivity: 1 U/L = 0,00051 A/min.
Ref.: 1001162 Dissolve one tablet of R2 Substrate in 50 mL of R1. Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
Cap and mix gently to dissolve contents. systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
Stability: 21 days at 2-8C or 72 hours at room temperature (15-25C). The results obtained using 50 samples were the following:
Correlation coefficient (r)2: 0,98277.
STORAGE AND STABILITY Regression equation: y= 0,9259x - 5,1685.
All the components of the kit are stable until the expiration date on the The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
label when stored tightly closed at 2-8C, protected from light and
contaminations prevented during their use. INTERFERENCES
Do not use the tablets if appears broken. Anticoagulants currently in use like heparin, EDTA, oxalate and fluoride do not
Do not use reagents over the expiration date. affect the results. Haemolysis interferes with the assay1
Signs of reagent deterioration: A list of drugs and other interfering substances with AST determination has been
- Presence of particles and turbidity. reported2,3.
- Blank absorbance (A) at 340 nm < 1,00.
NOTES
ADDITIONAL EQUIPMENT SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 340 nm. Instructions for many of them are available on request.
- Matched cuvettes 1,0 cm light path. BIBLIOGRAPHY
- General laboratory equipment. 1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
SAMPLES 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
Serum or plasma1: Stability 7 days at 2-8C. 1995.
PROCEDURE 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
1. Assay conditions: 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . .340 nm
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . .. . . . . . . .1 cm. light path PACKAGING
Constant temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25C /30C / 37C
Ref: 1001160 R1: 20 x 2 mL , R2: 20 2 mL
2. Adjust the instrument to zero with distilled water or air.
Cont.
3. Pipette into a cuvette: Ref: 1001161 R1: 1 x 150 mL, R2: 10 15 mL
Ref: 1001162 R1: 10 x 50 mL, R2: 10 50 mL
WR (mL) 1,0
Sample (L) 100
4. Mix, incubate for 1 minute.

5. Read initial absorbance (A) of the sample, start the stopwatch and
read absorbances at 1 minute intervals thereafter for 3 minutes.
6. Calculate the difference between absorbances and the average
absorbance differences per minute ( A/min).
BEIS09-I 29/12/15 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
GOT (AST)
GOT (AST)
NADH. Cintique UV. IFCC rec.
Dtermination quantitative daspartate amino transfrase 5. Lire labsorbation (A) initiale de lchantillon, mettre en route le chronomtre et
GOT (AST) lire labsorbation chaque minute pendant 3 minutes.
6. Calculer la moyenne de laugmentation dabsorbation par minute ( A/min).
IVD
CALCULS
Conserver 2-8C
PRINCIPE DE LA METHODE Units: Lunit internationale (UI) correspond la quantit denzymes qui converti
Laspartate amino transfrase (AST), initialement appele transaminase 1 mol de substrats par minute, dans des conditions standard. La concentration
glutamate oxaloactique (GOT) catalyse le transfert rversible dun groupe est exprime en unit/litre (U/L).
animique de laspartate vers lalpha-ctoglutarate formation de glutamate Facteurs de conversion de tempratures
et doxalactate. Loxalactate produit est rduit en malate en prsence de Les rsultats peuvent se transformer dautres tempratures, en multipliant par:
dshydrognes (MDH) et NADH: Temprature Facteur de conversion
AST de mesure 25C 30C 37C
Aspartate+ -Ctoglutarate Glutamate + Oxalactate
MDH 25C 1,00 1,37 2,08
Oxalactate + NADH + H Malate + NAD+
+
30C 0,73 1,00 1,54
La vitesse de rduction de la concentration en NADH au centre, dtermine 37C 0,48 0,65 1,00
photo numriquement, est proportionnelle la concentration catalytique
dAST dans lchantillon1. CONTROLE DE QUALITE
Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les valeurs
SIGNIFICATION CLINIQUE ont t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120 et
LAST est une enzyme intracellulaire, qui se trouve en grandes quantits 1002210).
dans les muscles du cur, les cellules du foie, les cellules du muscle Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
squelettique et en plus faibles quantits dans les autres tissus. les ractifs et le calibreur.
Bien quun niveau lev dAST dans le srum ne soit pas caractristique Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
dune maladie hpatique, elle semploie principalement pour les diagnostics les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
et le suivi, avec dautres enzymes telles que lALT et lALP. Elle sutilise correspondraient pas aux attentes.
galement dans le cadre du contrle post-infarctus, chez les patients
souffrant de troubles musculaires du squelette et dans certains autres cas1, VALEURS DE REFERENCE1
4,5
. 25C 30C 37C
Le diagnostic clinique doit tre ralis en prenant en compte les donnes Hommes Jusqu 19 U/L 26 U/L 38 U/L
cliniques et les donnes de laboratoire. Femmes Jusqu 16 U/L 22 U/L 31 U/L
Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque laboratoire
REACTIFS de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
R1 TRIS pH 7,8 80 mmol/L CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
Tampon L-aspartate 200 mmol/L
Gamme de mesures: Depuis la limite de dtection 0 U/L jusqu la limite de
NADH 0,18 mmol/L linarit 360 U/L.
R2 Lactate dshydrogn (LDH) 800 U/L Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit diluer 1/10
Substrats Malate dshydrognis (MDH) 600 U/L avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 10.
-ctoglutarate 12 mmol/L Prcision:
Intra-srie (n= 20) Inter-srie (n= 20)
PREPARATION
Moyenne (U/L) 55,5 165 55,0 162
Ractif de travail (RT):
Rf: 1001160 Dissoudre ( ) une tablette de substrats R2 dans une dose SD 1,30 3,44 0,92 2,52
CV (%) 2,35 2,07 1,68 1,55
(ampoule) R1.
Rf: 1001161 Dissoudre ( ) une tablette de substrats R2 dans 15 mL de Sensibilit analytique: 1 U/L = 0,00051 A/min.
R1. Exactitude: Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
Rf: 1001162 Dissoudre ( ) une tablette de substrats de R2 dans 50 mL systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
de R1. commerciaux (x).
Refermer et mlanger doucement, jusqu ce que le contenu soit Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
totalement dissout. Coefficient de corrlation (r)2: 0,98277.
Stabilit: 21 jours 2-8C ou 72 heures temprature ambiante (15-25C). Equation de la Coubre de rgression: y= 0,9259x - 5,1685.
Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ.
CONSERVATION ET STABILITE
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption INTERFERENCES
indique sur ltiquette, et si les flacons sont maintenus hermtiquement Les anticoagulants utilisation courante tels que lhparine, lEDTA oxalate ou le
ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources de contamination. fluorure nont aucune incidence sur les rsultats. Lhmolyse interfre avec les
Ne pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique. rsultats1.
Ne pas utiliser les tablettes si elles sont fragmentes. Diffrentes drogues ont t dcrites ainsi que dautres substances qui interfrent
Indices de dtrioration des ractifs:
dans la dtermination de lAST2, 3.
- Prsence de particules et turbidit.
- Absorbation du blanc 340 nm < 1,00.
REMARQUES
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce ractif
- Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 340 nm. dans diffrents analyseurs.
- Bain thermostable 25C, 30C 37C ( 0,1C)
- Cuvettes de 1,0 cm dclairage. BIBLIOGRAPHIE
- Equipement classique de laboratoire. 1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby
Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
ECHANTILLONS
Srum ou plasma1. Stabilit de lchantillon: 7 jours 2-8C. 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
PROCEDURE 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
1. Conditions de test: 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .340 nm PRESENTATION
Cuvette:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm dclairage
Temprature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .25C/30C/37C Ref: 1001160 R1: 20 x 2 mL , R2: 20 2 mL
2. Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille ou Ref: 1001161 Cont. R1: 1 x 150 mL, R2: 10 15 mL
air. Ref: 1001162 R1: 10 x 50 mL, R2: 10 50 mL
3. Pipetter dans une cuvette:
RT (mL) 1,0
Echantillon (L) 100
4. Mlanger et incuber pendant 1 minute
BEIS09-F 29/12/15 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE
GOT (AST)
GOT (AST)
NADH. Cintico UV. IFCC rec.
Determinao quantitativa de aspartato aminotransferase GOT 5. Ler a absorvncia (A) inicial da amostra, pr o cronmetro a funcionar e ler a
(AST) absorvancia a cada minuto durante 3 minutos.
IVD 6. Calcular a mdia do aumento da absorvncia por minuto ( A/min).
Conservar a 2-8C
CLCULOS
PRINCIPIO DO MTODO
A aspartato aminotransferase (AST) inicialmente chamada de A/min x 1750 = U/L de AST
transaminase glutamato oxaloactica (GOT) cataliza a transferncia
reversvel de um grupo amino do aspartato a -cetoglutarato com formao Unidades: A unidade internacional (UI) a quantidade de enzima que converte 1
de glutamato e oxalacetato. O oxalacetato produzido reduzido a malato mol de substrato por minuto, em condies standardizadas. A concentrao
na presena de malato desidrogenase (MDH) e NADH: expressa em unidades por litro (U/L).
AST
Aspartato + -Cetoglutarato Glutamato + Oxalacetato Factores de converso de temperaturas
MDH Os resultados podem ser transformados a outras temperaturas multiplicando por:
Oxalacetato + NADH + H+ Malato + NAD+
Temperatura Factor para converter a
A velocidade de diminuio da concentracin de NADH em mdia, de medio 25C 30C 37C
determinada fotomtricamente, proporcional concentrao cataltica de 25C 1,00 1,37 2,08
AST na amostra testada1. 30C 0,73 1,00 1,54
37C 0,48 0,65 1,00
SIGNIFICADO CLNICO
A AST una enzima intracelular, que se encontra em nveis elevados no CONTROLO DE QUALIDADE
msculo do corao, nas clulas do fgado, nas clulas do msculo conveniente analisar juntamente com as amostras, os soros controlo
esqueltico e em menor quantidade noutros tecidos. valorizados: SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002120 e 1002210).
Embora um nivel elevado de AST no soro no seja especfico de patologia Se os valores determinados estiverem fora do intervalo de tolerncia, verificar o
heptica, utiliza-se principalmente para seu diagnstico e seguimento, equipamento, os reagentes e o calibrador.
juntamente com outras enzimas como a ALT e ALP. Tambm se utiliza no Cada laboratrio deve dispor do seu prprio Controlo de Qualidade e estabelecer
controlo aps-enfarte, em pacientes com patologias do msculo correces caso os controles no cumpram com as tolerncias.
esqueltico, e noutras patologias1,4,5.
O diagnstico clnico deve realizar-se tendo em conta todos os dados
25C 30C 37C
clnicos elaboratoriais.
Homens At 19 U/L 26 U/L 38 U/L
REAGENTES Mulheres At 16 U/L 22 U/L 31 U/L
TRIS pH 7,8 Estes valores so orientativos. recomendvel que cada laboratrio estabelea
R1 80 mmol/L
os seus prprios valores de referncia.
Tampo L-Aspartato 200 mmol/L
NADH 0,18 mmol/L CARACTERISTICAS DO METODO
R2 Lactato desidrogenase (LDH) 800 U/L Intervalo de medida: Desde o limite de deteco 0 U/L at ao limite de linearidade
Substrato Malato desidrogenase (MDH) 600 U/L 360 U/L.
-Cetoglutarato 12 mmol/L Se a concentrao da amostra for superior do limite de linearidade, diluir 1/10
com NaCl 9 g/L e multiplicar o resultado final por 10.
PREPARAO Preciso:
Reagente de trabalho (RT): Intrasrie (n= 20) Intersrie (n= 20)
Dissolver um comprimido de R2 Substrato num frasco de R1 tampo. Mdia (U/L) 55,5 165 55,0 162
Ref: 1001160 Dissolver ( ) um comprimido de R2 Substrato num frasco DP 1,30 3,44 0,92 2,52
de R1. CV (%) 2,35 2,07 1,68 1,55
Ref: 1001161 Dissolver ( ) um comprimido de R2 Substrato em 15 mL Sensibilidade analtica: 1 U/L = 0,00051 A/min.
de R1. Exactido: Os reagentes SPINREACT (y) no amostram diferenas sistemticas
Ref: 1001162 Disolver ( ) um comprimido de R2 Substrato em 50 mL de significativas quando se comparam com outros reagentes comerciais (x).
R1. Os resultados obtidos com 50 amostras foram os seguintes:
Tapar e misturar suavemente at dissoluo do seu contedo. Coeficiente de regresso (r)2: 0,98277.
Estabilidade: 21 dias a 2-8C ou 72 horas a temperatura ambiente Equao da recta de regresso: y= 0,9259x - 5,1685.
(15-25C). As caractersticas do mtodo podem variar segundo o equipamento utilizado.
CONSERVAO E ESTABILIDADE INTERFERNCIAS

Todos os componentes do kit so estveis, at ao final do prazo de validade Os anticoagulantes de uso corrente como a heparina, EDTA, oxalato ou fluoreto
indicado no rtulo, quando mantidos nos frascos bem fechados, a 2-8C, no afectam os resultados. A hemlise interfere com a determinao1. Foram
protegidos da luz e evitando a sua contaminao. descritas vrias drogas e outras substncias que interferem na determinao da
No usar os comprimidos se eles estiverem fragmentados. AST2,3.
No usar reagentes aps a data indicada.
Indicadores de deteriorao dos reagentes: NOTAS
- Presena de partculas e turvao. SPINREACT dispe de instrues detalhadas para a aplicao deste
- Absorvncia do Branco a 340 nm < 1,00. reagente em diferentes equipamentos.
MATERIAL ADICIONAL BIBLIOGRAFIA

- Espectrofotmetro ou analisador para leituras a 340 nm. 1. Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby
- Banho termoestvel a 25C, 30C ou 37C ( 0,1C) Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1112-116.
- Cuvetes de 1,0 cm de passo de luz. 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
- Equipamento habitual de laboratorio. 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
AMOSTRAS 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Soro ou plasma1. Estabilidade da amostra: 7 dias a 2-8C.
APRESENTAO
PROCEDIMENTO Ref: 1001160 R1: 20 x 2 mL , R2: 20 2 mL
1. Condies da anlise: Cont.
Ref: 1001161 R1: 1 x 150 mL, R2: 10 15 mL
Comprimento de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .340 nm
Cuvete:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm passo de luz Ref: 1001162 R1: 10 x 50 mL, R2: 10 50 mL
Temperatura constante: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C
2. Ajustar o espectrofotmetro a zero com gua destilada ou ar.
3. Pipetar numa cuvete:
RT (mL) 1,0
Amostra (L) 100
4. Misturar, incubar 1 minuto.
ALP-LQ
ALP-LQ (Fosfatasa alcalina)

p-Nitrofenilfosfato. Cintico. Lquido. DGKC
Determinacin cuantitativa de fosfatasa alcalina (FAL) CLCULOS

IVD A/min x 3300 = U/L de FAL
Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1
Conservar a 2-8C mol de substrato por minuto, en condiciones estndar. La concentracin se
expresa en unidades por litro (U/L).
PRINCIPIO DEL MTODO
La fosfatasa alcalina (FAL) cataliza la hidrlisis del p-nitrofenilfosfato Factores de conversin de temperaturas
(pNPP) a pH 10,4 liberando p-nitrofenol y fosfato, segn la siguiente Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
reaccin:
FAL Temperatura Factor para convertir a
p-Nitrofenilfosfato + H2O p-Nitrofenol + Fosfato de medicin 25C 30C 37C
25C 1,00 1,22 1,64
La velocidad de formacin del p-Nitrofenol, determinado fotomtricamente, 30C 0,82 1,00 1,33
es proporcional a la concentracin cataltica de fosfatasa alcalina en la 37C 0,61 0,75 1,00
muestra ensayada1,2.
CONTROL DE CALIDAD
SIGNIFICADO CLNICO Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
Las fosfatasas alcalinas son enzimas que se encuentran presentes en casi SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
todos los tejidos del organismo, siendo particularmente alta su presencia en Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
huesos, hgado, placenta, intestinos y rin. revisar el instrumento, los reactivos y la tcnica.
Tiene importancia clnica tanto su aumento como su disminucin de los Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
niveles en plasma. correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
Causas ms probables de aumento del nivel de FAL:
Enfermedad sea de Paget, obstrucciones hepticas, hepatitis, VALORES DE REFERENCIA1
hepatotoxicidad por medicamentos y osteomalacia. 25C 30C 37C
Causas ms probables de disminucin del nivel de FAL: Nios (1-14 aos) < 400 U/L < 480 U/L < 645 U/L
Cretinismo y dficit de vitamina C1,5,6. Adultos 60 -170 U/L 73 - 207 U/L 98 - 279 U/L
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos Factores que pueden afectar los valores de referencia son: ejercicio, periodos de
clnicos y de laboratorio. crecimiento en nios y embarazo.
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca
REACTIVOS sus propios valores de referencia.
R1 Dietanolamina (DEA) pH 10,4 1 mmol/L
Cloruro de magnesio 0,5 mmol/L CARACTERSTICAS DEL MTODO
Tampn
Rango de medida: Desde el lmite de deteccin 0,6845 U/L hasta el lmite de
R2 linealidad de 1200 U/L.
p-Nitrofenilfosfato (pNPP) 10 mmol/L
Substrato Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir 1/10 con
ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.
PREPARACIN Precisin:
Reactivo de trabajo (RT): Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Mezclar: 4 vol. (R1) Tampn + 1 vol. de (R2) Substrato. Media (U/L) 174 443 175 434
SD 0,72 1,56 6,88 11,93
Estabilidad: 1 mes a 2-8C o 10 das a temperatura ambiente (15-25C). CV (%) 0,41 0,35 3,93 2,75
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD Sensibilidad analtica: 1 U/L = 0,0003 A/min.
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. No usar Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
reactivos fuera de la fecha indicada. Coeficiente de regresin (r)2: 0,99938.
Indicadores de deterioro de los reactivos: Ecuacin de la recta de regresin: y= 1,025x 1,105.
- Presencia de partculas y turbidez. Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
- Absorbancia del Blanco a 405 1,50.
INTERFERENCIAS
MATERIAL ADICIONAL El fluoruro, oxalato, citrato y EDTA inhiben la actividad de la fosfatasa alcalina, por
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 405 nm. lo que no deben ser utilizados como anticoagulantes.
- Bao termostatizable a 25C, 30C 37 C ( 0,1C) La hemlisis interfiere debido a la elevada concentracin de fosfatasa alcalina en
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. los hemates1,2. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren
- Equipamiento habitual de laboratorio. en la determinacin de la fosfatasa alcalina3,4.
MUESTRAS NOTAS
Suero o plasma heparinizado1. Usar suero libre de hemlisis, separado de SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de este
los hemates lo antes posible. reactivo en distintos analizadores.
Estabilidad: 3 das a 2-8C.
BIBLIOGRAFA
PROCEDIMIENTO 1. Wenger C. et al. Alkaline phosphatase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
1. Condiciones del ensayo: Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1094-1098.
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm 2. Rosalki S et al. Clin Chem 1993; 39/4: 648-652.
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm paso de luz 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Temperatura constante: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada o aire. 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
3. Pipetear en una cubeta: 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
RT (mL) 1,2
Muestra ( L) 20 PRESENTACIN
4. Mezclar, incubar 1 minuto. R1: 1 x 60 mL
Ref: 41240 R2: 1 x 15 mL
5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el
cronmetro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos. R1: 1 x 240 mL
6. Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto Ref: 41242 Cont.
R2: 1 x 60 mL
( A/min). R1: 1 x 480 mL
Ref: 41243
R2: 1 x 120 mL
ALP-LQ
ALP-LQ (Alkaline phosphatase)

p-Nitrophenylphosphate. kinetic. Liquid. DGKC
Quantitative determination of alkaline phosphatase (ALP) Temperature conversion factors

IVD To correct results to other temperatures multiply by:
Store at 2-8C Assay Conversion factor to

PRINCIPLE OF THE METHOD 25C 1,00 1,22 1,64
Alkaline phosphatase (ALP) catalyses the hydrolysis of p-nitrophenyl 30C 0,82 1,00 1,33
phosphate at pH 10,4, liberating p-nitrophenol and phosphate, according to 37C 0,61 0,75 1,00
the following reaction:
ALP QUALITY CONTROL
p-Nitrophenylphosphate + H2O p-Nitrophenol + Phosphate Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
The rate of p-nitrophenol formation, measured photometrically, is If control values are found outside the defined range, check the instrument,
proportional to the catalytic concentration of alkaline phosphatase present reagents and technique for problems.
in the sample1,2. Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
Alkaline phosphatase is an enzyme present in almost all weaves of the REFERENCE VALUES1
organism, being particularly high in bone, liver, placenta, intestine and 25C 30C 37C
kidney. Both increases and decreases of plasma ALP are of importance Children (1-14 years) < 400 U/L < 480 U/L < 645 U/L
clinically. Adults 60 - 170 U/L 73 - 207 U/L 98 - 279 U/L
Causes of increased plasma ALP: Pagets disease of bone, obstructive liver Factors affecting ALP activities in a normal population include exercise, periods of
disease, hepatitis, hepatotoxicity caused by drugs or osteomalacia. repaid growth in children and pregnancy.
Causes of decreased plasma ALP: Cretinism and vitamin C deficiency1,5,6. These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its own
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should reference range.
integrate clinical and other laboratory data.
REAGENTS Measuring range: From detection limit of 0,6845 U/L to linearity limit of 1200 U/L.
R1 Diethanolamine (DEA) pH 10,4 1 mmol/L If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/10 with
Buffer Magnesium chloride 0,5 mmol/L NaCl 9 g/L and multiply the result by 10.
Precision:
R2
p-Nitrophenylphosphate (pNPP) 10 mmol/L Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
Substrate
Mean (U/L) 174 443 175 434
PREPARATION SD 0,72 1,56 6,88 11,93
Working reagent (WR) CV (%) 0,41 0,35 3,93 2,75
Mix: 4 vol.(R1) Buffer + 1 vol. (R2) Substrate Sensitivity: 1 U/L = 0,0003 A/min.
Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
Stability: 1 month at 2-8C or 10 days at room temperature (15-25C). systematic differences when compared with other commercial reagents (x). The
results obtained using 50 samples were the following:
STORAGE AND STABILITY Correlation coefficient (r)2: 0,99938.
All the components of the kit are stable until the expiration date on the label Regression equation: y= 1,025x 1,105.
when stored tightly closed at 2-8C, protected from light and contaminations The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
prevented during their use.
Do not use reagents over the expiration date. INTERFERENCES
Signs of reagent deterioration: Fluoride, oxalate, citrate and EDTA inhibit alkaline phosphate activity and should
- Presence of particles and turbidity. therefore not be used as anticoagulants. Haemolyses interferes due to the high
- Blank absorbance (A) at 405 nm 1,50. concentration of alkaline phosphatase in red cells1,2.
A list of drugs and other interfering substances with acid phosphatase
ADDITIONAL EQUIPMENT determination has been reported by Young et. al3,4.
- Thermostatic bath at 25C, 30C o 37C ( 0,1C) NOTES
- Matched cuvettes 1,0 cm light path. SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
- General laboratory equipment. Instructions for many of them are available on request.
SAMPLES BIBLIOGRAPHY
Serum or heparinzed plasma1. Use unhemolyzed serum, separated from 1. Wenger C. et al. Alkaline phosphatase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
the clot as soon as possible. Stability: 3 days at 2-8C. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1094-1098.
2. Rosalki S et al. Clin Chem 1993; 39/4: 648-652.
PROCEDURE 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
1. Assay conditions: 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm light path 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Constant temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C
2. Adjust the instrument to zero with distilled water or air. PACKAGING
R1: 1 x 60 mL
WR (mL) 1,2 Ref: 41240 R2: 1 x 15 mL
Sample ( L) 20
4. Mix, incubate for 1 minute. Cont. R1: 1 x 240 mL
Ref: 41242
5. Read initial absorbance (A) of the sample, start the stopwatch and read R2: 1 x 60 mL
absorbances at 1 min intervals thereafter for 3 min. R1: 1 x 480 mL
6. Calculate the difference between absorbances and the average Ref: 41243
R2: 1 x 120 mL
absorbance differences per minute ( A/min).
CALCULATIONS
A/min x 3300 = U/L de ALP
Units: One international unit (IU) is the amount of enzyme that transforms
1 mol of substrate per minute, in standard conditions. The concentration is
expressed in units per litre of sample (U/L).
BEIS44-I 12/02/16 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
ALP-LQ
ALP-LQ (phosphatase alcaline)

p-nitrophnylphosphate. Cintique. Liquide. DGKC
Dtermination quantitative de phosphatase alcaline (FAL) Facteurs de conversion de tempratures

Les rsultats peuvent tre transforms d'autres tempratures en multipliant par :
IVD
A conserver entre 2-8C Temprature Facteur de conversion
de mesure 25C 30C 37C
PRINCIPE DE LA MTHODE 25C 1,00 1,22 1,64
30C 0,82 1,00 1,33
La phosphatase alcaline (FAL) catalyse l'hydrolyse du p-nitrophnylphosphate 37C 0,61 0,75 1,00
(pNPP) un pH de 10,4, en librant du p-nitrophnol et du phosphate, selon la
raction suivante : CONTRLE DE QUALIT
FAL Il convient d'analyser des srums de contrle estims en mme temps que les
p-nitrophnylphosphate + H2O p-nitrophnol + phosphate chantillons : SPINTROL H normal et pathologique (rf. 1002120 et 1002210).
Si les valeurs obtenues se trouvent en dehors de la plage de tolrance, il faut revoir
La vitesse de formation du p-nitrophnol, dtermine par photomtrie, est les instruments, les ractifs et la technique.
proportionnelle la concentration catalytique de la phosphatase alcaline dans Chaque laboratoire doit disposer de son propre systme de contrle de qualit et
l'chantillon test1,2. tablir des actions correctives si les contrles ne sont pas conformes aux tolrances.
Les phosphatases alcalines sont des enzymes, qui sont prsentes dans presque VALEURS DE RFRENCE 1
tous les tissus de l'organisme, avec une teneur particulirement leve dans les os, 25C 30C 37C
le foie, le placenta, les intestins et les reins. Enfants (1-14 ans) < 400 U/L < 480 U/L < 645 U/L
Par consquent, leur augmentation ou diminution dans le plasma est Adultes 60 -170 U/L 73 - 207 U/L 98 - 279 U/L
particulirement importante cliniquement parlant. Les facteurs qui peuvent affecter les valeurs de rfrence sont: l'exercice, les
Causes les plus probables d'augmentation du niveau de FAL : priodes de croissance chez les enfants et la grossesse.
Maladie osseuse de Paget, obstructions du foie, hpatite, hpatotoxicit cause de Ces valeurs sont approximatives. Il est recommand que chaque laboratoire
mdicaments et ostomalacie. tablisse ses propres valeurs de rfrence.
Causes les plus probables de diminution du niveau de FAL :
Crtinisme et carence en vitamine C1,5,6. CARACTRISTIQUES DE LA MTHODE
Le diagnostic clinique doit tre ralis en tenant compte de toutes les donnes Gamme de mesure: de la limite de la dtection de 0,6845 U/L la limite de linarit
cliniques et de laboratoire. de 1200 U/L.
Si les rsultats obtenus sont plus levs que la limite de linarit, il faut diluer 1/10
RACTIFS avec ClNa 9 g/l et multiplier le rsultat par 10.
R1 Dithanolamine (DEA) pH 10,4 1 mmol/L Prcision:
Tampon Chlorure de magnsium 0,5 mmol/L Intra-essai n=20) Inter-essai (n=20)
R2 Moyenne (mmol/L) 174 443 175 434
p-nitrophnylphospate (pNPP) 10 mmol/L SD 0,72 1,56 6,88 11,93
Substrat
CV (%) 0,41 0,35 3,93 2,75
PRPARATION Sensibilit analytique: 1 U/L = 0,0003 A/min.
Ractif de travail (RT) : Exactitude: les rsultats obtenus en utilisant les ractifs SPINREACT nont pas
Mlanger : 4 vol. de (R1) tampon + 1 vol. de (R2) substrat. prsent de diffrences systmatiques en comparaison avec dautres ractifs
commerciaux (x).
Stabilit : 1 mois 2-8C ou 10 jours temprature ambiante (15-25C). Les rsultats obtenus sur 50 chantillons ont t les suivants :
Coefficient de rgression (r)2: 0,99938.
CONSERVATION ET STABILIT quation de la droite de rgression : y=1,025x 1,105.
Toutes les composantes du kit sont stables jusqu lexpiration de la date mentionne Les caractristiques de la mthode peuvent varier en fonction de l'analyseur utilis.
sur ltiquette en cas de conservation hermtique sous 2-8C et de protection contre
la lumire et les contaminations vites lors de leur utilisation. INTERFRENCES
Indicateurs de dtrioration des ractifs :
Le fluorure, l'oxalate, le citrate et l'EDTA inhibent l'activit de la phosphatase alcaline,
- Prsence de particules et turbidit.
- Absorbances du tmoin 405 nm 1,50. ils ne doivent donc pas tre utiliss comme anticoagulants.
L'hmolyse interfre en raison de la forte teneur en phosphatase alcaline des
QUIPEMENTS SUPPLMENTAIRES hmaties1,2. Plusieurs drogues et autres substances, interfrant dans la
- Spectrophotomtre ou colorimtre mesurant 405 nm. dtermination de la phosphatase alcaline3,4 ont t dcrites.
- Bain thermostable 25C, 30C ou 37 C ( 0,1C)
- Cuves apparies de 1,0 cm dclairage. NOTES
- quipement dusage gnral pour laboratoire.
SPINREACT dispose d'instructions dtailles pour l'application de ce ractif
CHANTILLONS dans diffrents analyseurs.
Srum ou plasma hparinis1. Utiliser du srum exempt d'hmolyse, spar des
hmaties le plus tt possible. BIBLIOGRAPHIE
Stabilit : 3 jours 2-8C. 1. Wenger C. et al. Alkaline phosphatase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1094-1098.
PROCDURE 2. Rosalki S et al. Clin Chem 1993; 39/4: 648-652.
1. Conditions dessai: 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Longueur donde: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm. dclairage 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Temprature constante: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25C / 30C / 37C 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
2. Rgler linstrument zro dans leau distille ou air.
3. Pipette dans une cuvette:
PRSENTATION
RT (mL) 1,2
R1: 1 x 60 ml
chantillon ( L) 20 Rf : 41240 R2: 1 x 15 ml
4. Mlanger et incuber pendant 1 minute.
5. Lire l'absorbance (A) initiale de l'chantillon, mettre en marche le chronomtre R1: 1 x 240 ml
Rf : 41242 Cont.
et lire l'absorbance chaque minute pendant 3 minutes. R2: 1 x 60 ml
6. Calculer la moyenne de la diffrence d'absorbance par minute ( A/min). R1: 1 x 480 ml
Rf : 41243
R2: 1 x 120 ml
CALCULS
A/min x 3300 = U/L de FAL
Units : L'unit internationale (UI) est la quantit d'enzyme qui convertit 1 mol de
substrat par minute, en conditions standard. La concentration est exprime en units
par litre (U/l).
BEIS44-F 12/02/16 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE
ALP-LQ
ALP-LQ (Fosfatasa alcalina)

p-Nitrofenilfosfato. Cintico. Lquido. DGKC
Determinao quantitativa de fosfatase alcalina (FAL) Factores de converso de temperaturas

IVD Os resultados podem transformar-se para outras temperaturas multiplicando por:
Temperatura Factor para converter para

Armazenar 2-8C.
de medio 25 C 30 C 37 C
PRINCPIO DO MTODO 25 C 1,00 1,22 1,64
A fosfatase alcalina (FAL) cataliza a hidrlise do p-nitrofenilfosfato (pNPP) 30 C 0,82 1,00 1,33
a pH 10,4 libertando p-nitrofenol e fosfato, de acordo com a reaco 37 C 0,61 0,75 1,00
seguinte:
FAL
p-Nitrofenilfosfato + H2O p-Nitrofenol + Fosfato conveniente analisar juntamente com as amostras os soros controlo avaliados:
SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
A velocidade de formao do p-Nitrofenol, determinado fotometricamente, Se os valores detectados se encontrarem fora do intervalo de tolerncia, deve-
proporcional concentrao cataltica de fosfatase alcalina na amostra se rever o instrumento, os reagente e a tcnica.
testada1,2. Cada laboratrio deve estabelecer o seu prprio esquema de Controlo de
Qualidade e as aes corretivas no caso de os controlos no estarem de acordo
SIGNIFICADO CLNICO com as tolerncias aceitveis.
As fosfatases alcalinas so enzimas que se encontram presentes em
quase todos os tecidos do organismo, sendo a sua presena VALORES DE REFERNCIA1
particularmente elevada nos ossos, fgado, placenta, intestinos e rim. 25 C 30 C 37 C
Tanto o aumento como a diminuio dos seus nveis no plasma tm Crianas (1-14 anos) < 400 U/L < 480 U/L < 645 U/L
relevncia clnica. Adultos 60 -170 U/L 73 - 207 U/L 98 - 279 U/L
Causas mais provveis do aumento do nvel de FAL: Factores que podem afectar os valores de referncia so: exerccio, perodos
Doena ssea de Paget, obstrues hepticas, hepatite, hepatotoxicidade de crescimento em crianas e gravidez.
por medicamentos e osteomalacia. Estes valores so indicativos. recomendvel que cada laboratrio estabelea
Causas mais provveis da diminuio do nvel de FAL: os seus prprios valores de referncia.
Cretinismo e dfice de vitamina C1,5,6.
O diagnstico clnico deve realizar-se tendo em considerao todos os CARACTERSTICAS DO MTODO
dados clnicos e laboratoriais. Intervalo de medio: Desde o limite de deteco 0,6845 U/L at ao limite de
linearidade de 1200 U/L.
REAGENTES Se a concentrao da amostra for superior ao limite de linearidade, diluir na
R1 Dietanolamina (DEA) pH 10,4 1 mmol/L proporo de 1:10 com ClNa 9 g/L e multiplicar o resultado final por 10.
Tampo Cloreto de magnsio 0,5 mmol/L Preciso:
R2 Intra-srie (n= 20) Inter-srie (n= 20)
p-Nitrofenilfosfato (pNPP) 10 mmol/L Mdia (U/L) 174 443 175 434
Substrato
SD 0,72 1,56 6,88 11,93
PREPARAO CV (%) 0,41 0,35 3,93 2,75
Reagente de trabalho (RT): Sensibilidade analtica: 1 U/L = 0,0003 A/min.
Misturar: 4 vol. (R1) Tampo + 1 vol. de (R2) Substrato. Exactido: Os reagentes SPINREACT (y) no apresentam diferenas
sistemticas significativas quando comparados com outros reagentes comerciais
Estabilidade: 1 ms a 2-8 C ou 10 dias temperatura ambiente (15-
(x).
25C).
Os resultados obtidos com 50 amostras foram os seguintes:
CONSERVAO E ESTABILIDADE Coeficiente de regresso (r)2: 0,99938.
Todos os componentes do kit so estveis at data de validade que Equao da recta de regresso: y= 1,025x 1,105.
consta da etiqueta quando armazenados bem fechados a 2-8C e as As caractersticas do mtodo podem variar de acordo com o analisador utilizado.
contaminaes so evitadas durante a sua utilizao. No utilizar os
INTERFERNCIAS
reagentes aps passar o prazo de validade.
Indicadores de deteriorao dos reagentes: O fluoreto, oxalato, citrato e EDTA inibem a actividade da fosfatase alcalina, pelo
- Presena de partculas e turbidez. que no devem ser utilizados como anticoagulantes.
- Absorvncia do Branco a 405 nm 1,50. A hemlise interfere devido elevada concentrao de fosfatase alcalina nos
eritrcitos1,2. Foram descritas vrias drogas e outras substncias que interferem
EQUIPAMENTO ADICIONAL com a determinao da fosfatase alcalina3,4.
- Espectrofotmetro ou analisador para leituras a 405 nm.
- Banho termoestvel a 25 C, 30 C ou 37 C ( 0,1 C) NOTAS
- Cuvettes de 1,0 cm de passo de luz. A SPINREACT dispe de instrues detalhadas para aplicao deste
- Equipamento de rotina de laboratrio. reagente em diferentes analisadores.
AMOSTRAS BIBLIOGRAFIA
Soro ou plasma heparinizado1. Utilizar soro livre de hemlise, separado o 1. Wenger C. et al. Alkaline phosphatase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
mais rapidamente possvel dos eritrcitos Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1094-1098.
Estabilidade: 3 dias a 2-8 C. 2. Rosalki S et al. Clin Chem 1993; 39/4: 648-652.
PROCEDIMENTO 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
1. Condies do teste: 1995.
Comprimento de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 405 nm 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm passo de luz 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Temperatura constante: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 C / 30 C / 37 C 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
2. Ajustar o espectrofotmetro para zero com a gua destilada ou ar.
3. Pipetar numa cuvette: APRESENTAO
RT (mL) 1,2 R1: 1 x 60 mL
Amostra ( L) 20 Ref: 41240 R2: 1 x 15 mL
4. Misturar, incubar durante 1 minuto. R1: 1 x 240 mL
Ref: 41242 Cont.
5. Ler a absorvncia (A) inicial da amostra, colocar o cronmetro em R2: 1 x 60 mL
funcionamento e ler a absorvncia a cada minuto durante 3 minutos.
R1: 1 x 480 mL
6. Calcular a mdia da diferena de absorvncia por minuto ( A/min). Ref: 41243
R2: 1 x 120 mL
CLCULOS
A/min x 3300 = U/L de FAL
Unidades: A unidade internacional (UI) a quantidade de enzima que
converte 1 mol de substrato por minuto, em condies padro. A
concentrao expressa em unidades por litro (U/L).
TOTAL PROTEIN
Protenas Totales
Biuret. Colorimtrico
Determinacin cuantitativa de protenas totales 4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37C o 10 minutos a T ambiente.
IVD 5. Leer la absorbancia (A) del Patrn y la muestra, frente al Blanco de
reactivo. El color es estable como mnimo 30 minutos.
Conservar a 2-8C
CLCULOS
PRINCIPIO DEL MTODO
En medio alcalino, las protenas dan un intenso color violeta azulado (A) Muestra - (A) Blanco
x 7 (Conc. Patrn) = g/dL de protenas totales
en presencia de sales de cobre; contiene yoduro como antioxidante. (A) Patrn - (A) Blanco
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de
1,4
protena total en la muestra ensayada . CONTROL DE CALIDAD
SIGNIFICADO CLNICO SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar
ampliamente distribuidos en el organismo. Actan como elementos el instrumento, los reactivos y el calibrador.
estructurales y de transporte. Se dividen en dos fracciones, albmina Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
y globulinas. correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las
Su determinacin es til en la deteccin de: tolerancias.
- Hiperproteinemia producida por hemoconcentracin, deshidra-
tacin o aumento en la concentracin de protenas especificas. VALORES DE REFERENCIA1
-Hipoproteinemia por hemodilucin debida a un defecto en la sntesis Adultos: 6,6 8,3 g/dL
proteica, perdidas excesivas (hemorragias) o catabolismo proteico
4,5 Recin nacidos: 5,2 9,1 g/dL
excesivo .
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los establezca sus propios valores de referencia.
datos clnicos y de laboratorio.
REACTIVOS CARACTERSTICAS DEL MTODO

Rango de medida: Desde el lmite de deteccin de 0,007 g/dL hasta el
Potasio sodio tartrato 15 mmol/L lmite de linealidad de 14 g/dL.
R Yoduro sdico 100 mmol/L Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir
Yoduro de potasio 5 mmol/L 1/2 con CINa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
Biuret
Sulfato de cobre (II) 5 mmol/L Precisin:
Hidrxido de sodio 1000 mmol/L Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
T PROTEIN CAL Patrn primario de Albmina Bovina 7 g/dL Media (g/dL) 6,53 4,89 6,77 5,08
SD 0,01 0,01 0,07 0,05
CV (%) 0,21 0,24 1,05 0,94
PRECAUCIN
R: H314-Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares Sensibilidad analtica: 1 g/dL = 0,0825 A.
graves. H412-Nocivo para los organismos acuticos, con efectos Exactitud: Los reactivos de SPINREACT (y) no muestran diferencias
nocivos duraderos. sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del comerciales (x).
producto. Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Coeficiente de correlacin (r)2: 0,97002
PREPARACIN Ecuacin de la recta de regresin: y= 0,954x +0,511.
Los reactivos estn listos para su uso. Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD INTERFERENCIAS

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de Hemoglobina y lipemia .
1,4
caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
bien cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su 2,3
determinacin de las proteinas .
contaminacin.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. NOTAS
Indicadores de deterioro de los reactivos: 1. T PROTEIN CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable
- Presencia de partculas y turbidez. tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
- Absorbancia (A) del blanco a 540 nm 0,22. 2. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores
sistemticos en mtodos automticos. En este caso, se recomienda
MATERIAL ADICIONAL utilizar calibradores sricos.
- Espectrofotmetro analizador para lecturas a 540 nm. 3. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 4. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin
- Equipamiento habitual de laboratorio. de este reactivo en distintos analizadores.
MUESTRAS BIBLIOGRAFA
1
Suero o plasma heparinizado . 1. Koller A. Total serum protein. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
Estabilidad de la muestra: 1 mes en nevera a (2-8C). Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1316-1324 and 418.
2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
PROCEDIMIENTO 1995.
1. Condiciones del ensayo: 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 540 (530-550) nm 2001.
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada.
3. Pipetear en una cubeta (Nota 3): PRESENTACIN
Blanco Patrn Muestra Ref: 1001290 R: 2 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
R (mL) 1,0 1,0 1,0 Ref: 1001291 Cont. R: 2 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
Patrn (Nota 1, 2) (L) -- 25 -- Ref: 1001292 R: 1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
Muestra (L) -- -- 25
BSIS30-E 24/02/16 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
TOTAL PROTEIN
Total protein
Biuret. Colorimetric
Quantitative determination of total protein 4. Mix and incubate 5 min at 37C or 10 min at room temperature.
IVD 5. Read the absorbance (A) of the samples and Standard, against the
Blank. The colour is stable for at least 30 minutes.
Store at 2-8C
CALCULATIONS
PRINCIPLE OF THE METHOD (A) Sample - (A) Blank
x 7 (Standard conc.) = g/dL of total protein in the sample
Proteins give an intensive violet-blue complex with copper salts in an (A) Standard - (A) Blank
alkaline medium. Iodide is included as an antioxidant.
The intensity of the color formed is proportional to the total protein QUALITY CONTROL
1,4
concentration in the sample . Control sera are recommended to monitor the performance of assay
procedures: SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and
CLINICAL SIGNIFICANCE 1002210).
The proteins are macromolecular organic compounds, widely If control values are found outside the defined range, check the instrument,
distributed in the organism. They act like structural and transport reagents and calibrator for problems.
elements. The proteins of the serum are divide in two fractions, Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and
albumin and globulins corrective actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
The determination of total proteins is useful in the detection of:
- High protein levels caused by hemoconcentration like in the REFERENCE VALUES1
dehydrations or increase in the concentration of specific proteins. Adults: 6,6 8,3 g/dL
- Low protein level caused by hemodilution by an impared synthesis Newborn: 5,2 9,1 g/dL
4,5
or loss (as by hemorrhage) or excessive protein catabolism . These values are for orientation purpose; each laboratory should establish
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should its own reference range.
integrate clinical and other laboratory data.
REAGENTS
Measuring range: From detection limit of 0,007 g/dL to linearity limit of 14
Sodium potassium tartrate 15 mmol/L g/dL.
R Sodium iodide 100 mmol/L If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/2
Potassium iodide 5 mmol/L with NaCI 9 g/L and multiply the reslut by 2.
Biuret Precision:
Copper (II) sulphate 5 mmol/L
Sodium hydroxide 1000 mmol/L Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
Mean (g/dL) 6,53 4,89 6,77 5,08
T PROTEIN CAL Bovine albumin primary standard 7 g/dL SD 0,01 0,01 0,07 0,05
CV (%) 0,21 0,24 1,05 0,94
PRECAUTIONS Sensitivity: 1 g/dL = 0,0825 A.
R: H314-Causes severe skin burns and eye damage. H412-Harmful to Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
aquatic life with long lasting effects. systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
Follow the precautionary statements given in MSDS and label of the The results obtained using 50 samples were the following:
product. 2
Correlation coefficient (r) : 0,97002
Regression equation y= 0,954x +0,511.
PREPARATION The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
The reagents are ready to use.
INTERFERENCES
1,4
STORAGE AND STABILITY Hemoglobin and lipemia .
All the components of the kit are stable until the expiration date on the A list of drugs and other interfering substances with total protein
2,3
label when stored tightly closed at 2-8C protected from light and determination has been reported .
contaminations prevented during their use.
Do not use reagents over the expiration date. NOTES
Signs of reagent deterioration: 1. T PROTEIN CAL: Proceed carefully with this product because due its
- Presence of particles and turbidity. nature it can get contamined easily.
- Blank absorbance (A) at 540 nm 0,22. 2. Calibration with the aqueous standard may cause a systematic error in
automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a
ADDITIONAL EQUIPMENT serum Calibrator.
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 540 nm. 3. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
- Matched cuvettes 1,0 cm light path. 4. SPINREACT has instruction sheets for several automatic
- General laboratory equipment. analyzers. Instructions for many of them are available on request.
SAMPLES BIBLIOGRAPHY
Serum or heparinized plasma :
1
1. Koller A. Total serum protein. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
Stability of the sample: 1 month at refrigerator (2-8C). Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1316-1324 and 418.
PROCEDURE 1995.
1. Assay conditions: 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 540 (530-550) nm 2001.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm. light path 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water.
3. Pipette into a cuvette (Note 3): PACKAGING
Blank Standard Sample Ref: 1001290 R: 2 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
Ref: 1001291 Cont. R: 2 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
R (mL) 1,0 1,0 1,0
Ref: 1001292 R: 1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
Standard (Note 1, 2) (L) -- 25 --
Sample (L) -- -- 25
BSIS30-I 24/02/16 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
TOTAL PROTEIN
Protines totales
Biuret. Colorimtrique
Dtermination quantitative de protines totales 5. Lire labsorbation (A) du patron et lchantillon, en comparaison avec le
IVD blanc du ractif. La couleur reste stable pendant au moins 30 minutes.
Conserver 2-8C CALCULS

PRINCIPE DE LA METHODE (A) chantillon - (A) Blanc
x 7 (talon conc.) = g/dL de protines totales
En milieu alcalin, les protines donnent une couleur violette/bleue en (A) talon - (A) Blanc
prsence de sels de cuivre; ces sels contiennent du iodure qui agit comme
un antioxydant. CONTROLE DE QUALITE
Lintensit de la couleur forme est proportionnelle la concentration de Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les
protines totales dans lchantillon test1, 4. valeurs ont t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120
et 1002210).
SIGNIFICATION CLINIQUE Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument,
Les protines sont des composs organiques macromolculaires, rpartis les ractifs et le calibreur.
largement dans lorganisme. Elles fonctionnent comme des lments Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer
structurels et de transport. Elles sont divises en deux fractions, albumines les mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
et globulines. correspondraient pas aux attentes.
Leur dtermination est utile pour dtecter:
1
- lhyper protinmie produite par hmoconcentration, dshydratation ou VALEURS DE REFERENCE
augmentation de la concentration des protines spcifiques. Adultes: 6,6 8,3 g/dL
-Lhypo protinmie par hmodilution due une dfaillance dans la Nouveau-nes: 5,2 9,1 g/dL
synthse protique, des pertes excessives (hmorragies) ou un Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
catabolisme protique excessif 4, 5. laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
Le diagnostique clinique doit tenir compte des donnes cliniques et de
laboratoire. CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
Gamme de mesures: Depuis la limite de dtection de 0,007 g/dL jusqu la limite
REACTIFS de linarit de 14 g/dL.
Tartrate de potassium de sodium 15 mmol/L Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
R Iodure de sodium 100 mmol/L 1/2 avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Iodure de potassium 5 mmol/L Prcision:
Biuret Intra-srie (n=20) Inter-srie (n=20)
Sulfate de cuivre (II) 5 mmol/L
Hydroxyde de sodium 1000 mmol/L Moyenne (g/dL) 6,53 4,89 6,77 5,08
T PROTEIN CAL Patron primaire dalbumine bovine 7 g/dL SD 0,01 0,01 0,07 0,05
CV (%) 0,21 0,24 1,05 0,94
PRECAUTION Sensibilit analytique: 1 g/dL = 0,0825 A.

R: H314-Provoque des brlures de la peau et des lsions oculaires graves.
systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
H412-Nocif pour les organismes aquatiques, entrane des effets nfastes
long terme. commerciaux (x).
Suivez les conseils de prudence donns en SDS et tiquette. Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
Coefficient de corrlation (r)2: 0,97002.
Equation de la Coubre de rgression: y= 0,954x +0,511.
PREPARATION Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ.
Tous les ractifs sont prts lemploi.
INTERFERENCES
CONSERVATION ET STABILITE Hmoglobine et lipmie1, 4.
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption Diffrentes drogues ont t dcrites, ainsi que dautres substances pouvant
indique sur ltiquette, et si les flacons sont maintenus hermtiquement interfrer dans la dtermination de protines 2, 3.
ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources de contamination. Ne
pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique. REMARQUES
Indices de dtrioration des ractifs: 1. T PROTEIN CAL: Etant donn la nature du produit, il est conseill de le
- Prsence de particules et turbidit. manipuler avec une grande prcaution. En effet, il peut tre contamin avec
- Absorbation (A) du blanc 540 nm 0,22. facilit.
2. Le calibrage au moyen du patron de dtection peut donner lieu des
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE erreurs systmatiques lors de mthodes automatiques. Dans de tels cas, il
- Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 540 nm. est conseill dutiliser des calibrages sriques
- Cuvettes de 1,0 cm dclairage. 3. Utiliser des embouts de pipettes jetables propres pour diffuser le produit.
- Equipement classique de laboratoire. 4. SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
ractif dans diffrents analyseurs.
ECHANTILLONS
Srum ou plasma hparinis1. BIBLIOGRAPHIE
Stabilit de lchantillon: 1 mois au rfrigrateur (2-8C). 1. Koller A. Total serum protein. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby
Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1316-1324 and 418.
PROCEDURE 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
1995.
1. Conditions de test:
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 540 nm (530-550)
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm dclairage
Temprature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C
2. Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille
3. Pipetter dans une cuvette (Remarque 3): PRESENTATION
Blanc talon Echantillon
Ref: 1001290 R: 2 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
Ref: 1001291 Cont. R: 2 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
R (mL) 1,0 1,0 1,0
Ref: 1001292 R: 1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
talon (Remarque 1, 2) (L) -- 25 --
Echantillon (L) -- -- 25
4. Mlanger et incuber 5 minutes 37C ou 10 minutes temprature
ambiante.
BSIS30-F 24/02/16 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE
TOTAL PROTEIN
Protenas Totais
Biuret. Colorimtrico
Determinao quantitativa de protenas totais 5. Ler a absorvncia (A) do Padro e da amostra, frente ao Branco de
IVD reagente. A colorao estvel como mnimo 30 minutos.
Conservar a 2-8C
CLCULOS
PRINCPIO DO MTODO (A) Amostra - (A) Branco
x 7 (Conc. Padro) = g/dL de protenas totais
Em meio alcalino, as protenas do uma colorao violeta azulada (A) Padro - (A) Branco
intensa, na presena de sais de cobre; contm iodeto como
antioxidante. CONTROLO DE QUALIDADE
A intensidade da colorao formada proporcional da conveniente analisar juntamente com as amostras, os soros controlo
1,4
concentrao de protena total na amostra testada . valorizados: SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002120 e 1002210).
Se os valores determinados estiverem fora do intervalo de tolerncia,
SIGNIFICADO CLNICO
verificar o equipamento, os reagentes e o calibrador.
As protenas so compostos orgnicos macromoleculares,
Cada laboratrio deve dispor do seu prprio Controlo de Qualidade e
amplamente distribudos no organismo. Actuam como elementos
estabelecer correces caso os controles no cumpram com as tolerncias.
estruturais e de transporte. Dividem-se em duas fraces, albumina e
globulinas. 1
A sua determinao til na deteco de: VALORES DE REFERNCIA
- Hiperproteinmia produzida por hemoconcentrao, desidratao ou Adultos: 6,6 8,3 g/dL
aumento na concentrao de protenas especificas. Recm- nascidos: 5,2 9,1 g/dL
-Hipoproteinmia por hemodiluio devida a um defeito na sntese Estes valores so orientativos. recomendvel que cada laboratrio
proteica, perdas excessivas (hemorragias) ou catabolismo proteico estabelea os seus prprios valores de referncia.
4,5
excessivo .
O diagnstico clnico deve realizar-se tendo em conta todos os dados CARACTERISTICAS DO METODO
clnicos e de laboratrio. Intervalo de medida: Desde o limite de deteco de 0,007 g/dL at ao limite
de linearidade de 14 g/dL.
REAGENTES Se a concentrao for superior ao limite de linearidade, diluir a amostra 1/2
Potassio sdio tartarato 15 mmol/L com CINa 9 g/L e multiplicar o resultado final por 2.
R Iodeto sdico 100 mmol/L Preciso:
Biuret Iodeto de potssio 5 mmol/L Intrasrie (n=20) Intersrie (n=20)
Sulfato de cobre (II) 5 mmol/L Mdia (g/dL) 6,53 4,89 6,77 5,08
Hidrxido de sdio 1000 mmol/L SD 0,01 0,01 0,07 0,05
T PROTEIN CAL Padro primrio de Albumina Bovina 7 g/dL CV (%) 0,21 0,24 1,05 0,94
Sensibilidade analitica: 1 g/dL = 0,0825 A.
PRECAUO Exactitude: Os reagentes SPINREACT (Y) no mostram diferenas
R: H314-Provoca queimaduras na pele e leses oculares graves. sistematicas significativas quando comparados com outros reagentes
H412-Nocivo para os organismos aquticos, com efeitos duradouros. comerciais (x).
Seguir os conselhos de prudncia dados em SDS e etiqueta. Os resultados obtidos com 50 amostras foram os seguintes:
Coeficiente de correlao (r)2: 0,97002.
PREPARAO Equao da recta de regresso: y=0,954x+0,511.
Os reagentes esto prontos a ser utilizados. As caracteristicas do metodo podem variar segundo o equipamento
utilizado.
CONSERVAO E ESTABILIDADE
Todos os componentes do kit so estveis, at ao final do prazo de INTERFERNCIAS:
1,4
validade indicado no rtulo, quando mantidos nos frascos bem Hemoglobina e lipmia .
fechados, a 2-8C, protegidos da luz e evitando a sua contaminao. Uma listagem de vrios frmacos e outras substncias que interferem com
2,3
No usar reagentes fora de prazo. a determinao das proteinas encontra-se descrita .
Indicadores de deteriorao dos reagentes:
- Presena de partculas e turvao. NOTAS
- Absorvncia (A) do branco a 540 nm 0,22. 1. T PROTEIN CAL: Devido naturaza do produto, aconselhvel manuse-lo
com extremo cuidado j que se pode contaminar com muita facilidade.
MATERIAL ADICIONAL 2. A calibrao com o Padro aquoso pode dar lugar a erros sistemticos
- Espectrofotmetro ou equipamento para leituras a 540 nm. em mtodos automticos. Neste caso, recomenda-se a utilizao de
- Cuvetes de 1,0 cm de passo de luz. calibradores sricos.
- Equipamento habitual de laboratrio. 3. Usar pontas de pipetas descartveis e limpas para a sua dispensao.
4. SPINREACT dispe de instrues detalhadas para a aplicao deste
AMOSTRAS reagente em diferentes equipamentos.
1
Soro ou plasma heparinizado .
Estabilidade da amostra: 1 ms no frigorfico (2-8C).
BIBLIOGRAFIA
PROCEDIMENTO 1. Koller A. Total serum protein. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby
Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1316-1324 and 418.
1. Condies do ensaio:
Comprimento de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 540 (530-550) nm
1995.
Cuvete: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm passo de luz 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
2. Ajustar o espectrofotmetro a zero frente a agua destilada. 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
3. Pipetar para uma cuvete (Nota 3):
Branco Padro Amostra APRESENTAO
R (mL) 1,0 1,0 1,0 Ref: 1001290 R: 2 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
Padro (Nota 1, 2) (L) -- 25 -- Ref: 1001291 Cont. R: 2 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
Amostra (L) -- -- 25 Ref: 1001292 R: 1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Agitar e incubar 5 minutos a 37C ou 10 minutos temperatura
ambiente.
BSIS30-P 24/02/16 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
CREATININE TRINDER
Creatinine-TR
Enzymatic
Quantitative determination of creatinine 8. Read the absorbance (A2) of the standard and the samples, at 545nm
IVD against the blank.
Store at 2-8C
CALCULATIONS
PRINCIPLE OF THE METHOD A Sample x k - ABlank x k
Creatinine= xC = mg/dL of Creatinine in the sample
In the first reaction, creatinase and sarcosine oxidase were used in the A Standard x k - ABlank x k
enzymatic hydrolysis of endogenous creatine to produce hydrogen K= 0,754= 460 L/610 L
peroxide, that is eliminated by catalase. In the second reaction, the catalase C= Concentration of the standard
is inhibitred by sodium azide, and creatinase and 4- aminoantipyrine (4-AA) A= A2 - A1
were added, and only the creatine generated from creatinine by creatininase
was hydrolyzed sequentially by creatinase and sarcosine oxidase to QUALITY CONTROL
produce hydrogen peroxide. This newly-formed hydrogen peroxide was Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
measured in a coupled reaction catalyzed by peroxidase, with N-ethyl-n- SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 y 1002210).
sulphopropyl-mtoluidine (TOPS)/4-AA as a chromogen. If control values are found outside the defined range, check the instrument,
reagents and calibrator for problems.
CLINICAL SIGNIFICANCE Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
Creatinine is the result of the degradation of the creatine, component of actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
muscles, it can be transformed into ATP, that is a source of high energy for
the cells. The creatinine production depends on the modification of the REFERENCE VALUES1
muscular mass, and it varies little and the levels usually are very stable. Serum or plasma:
Is excreted by the kidneys. With progressive renal insufficiency there is Men 0,9 - 1,3 mg/dL
retention in blood of urea, creatinine and uric acid. Women 0,6 - 1,1 mg/dL
Elevate creatinine level may be indicative of renal insufficiency2. Urine:
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should Men 14 - 26 mg/Kg/24 h
integrate clinical and other laboratory data. Women 11 -20 mg/Kg/24 h
These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its own
REAGENTS reference range.
R1 MOPS 25 mmol/L, TOPS 0,5 mmol/L, Creatinase
10 KU/L, Sarcosine Oxidase 5 KU/L Catalase 3 PERFORMANCE CHARACTERISTICS
KU/L, EDTA 1mmol/L, pH 7,5. Measuring range: From detection limit of 0,00 mg/dL to linearity limit of 180
mg/dL.
R2 MOPS 90 mmol/L, Creatininase 30 KU/L, If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/2 with
peroxidase KU/L, pH 7,5. Azida sdica 0,5 g/L. NaCl 9 g/L and multiply the result by 2.
Precision:
CREATININE CAL Creatinine aqueous primary standard 2 mg/dL.
Mean (mg/dL) 0,87 3,82 0,87 3,75
PRECAUTIONS SD 0,01 0,06 0,02 0,06
CAL: H290-May be corrosive to metals. CV (%) 1,63 1,44 2,31 1,72
Follow the precautionary statements given in MSDS and label of the
Sensitivity: 1 mg/dL = 0,0226 (A)
product.
Accuracy: Results obtained using SPINREACT these reagents did not show
PREPARATION systematic differences when compared with other commercial reagents or with
HPLC method.
R1 and R2 are ready to use.
Correlation coefficient (r)2: 0,9730
STORAGE AND STABILITY
Regression equation: y= 1,066x - 0,020.
All the components of the kit are stable until the expiration date on the label
when stored tightly closed at 2-8C, protected from light and contaminations
prevented during their use.
INTERFERENCES
R1 and R2 are stable 8 weeks after opening bottle.
No interferences were observed with haemoglobin until 5 g/dL, bilirubin 40 mg/dL.
ADDITIONAL EQUIPMENT Other drugs and substances may interfere3,4.
- Spectrophotometer o photometer measuring at 54520 nm
- Cell holder thermostable at 37C NOTES
- General laboratory equipment. 1. CREATININE CAL: Proceed carefully with this product because due its
nature it can get contamined easily.
SAMPLES 2. Calibration with the aqueous Standard may cause a systematic error in
- Serum or plasma1. automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a serum
- Urine (24 h)1: Dilute fresh urine 1/50 with disitlled water. Calibrator.
Multiply the result by 50 (sample dilution factor). 3. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
Creatinine is stable 1 day at 2-8C. 4. SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
PROCEDURE BIBLIOGRAPHY
1. Assay conditions: 1. Fossati et al. Clin Chem 1983;29:1494-1496.
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 545 nm (525-565) 2. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd edition. Burtis CA, Ashwood ER.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm light path WB Saunders Co.,1999.
Temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C (0,1C) 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
3. Pipette into a cuvette (Note 3):
Blank Standard (Note 1,2) Sample PACKAGING
R1 (L) 450 450 450 Ref.: 1001115 R1: 1 x 30 mL, R2:1 x 10 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
Sample (L) 10 10 10 Ref.: 1001117 R1: 1 x 240 mL, R2:1 x 80 mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Mix and incubate 5 minutes.
5. Read the absorbance (A1) of the standard and the samples, at
545nm against the blank.
6. Add:
Blank Standard Sample
R2 (L) 150 150 150
7. Mix and incubate 5 minutes.
BSIS77-I 13/05/16 SPINREACT, S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
CREATININE TRINDER
Creatinina-TR
Enzimtico
Determinacin cuantitativa de creatinina 8. Leer la absorbancia (A2) a 545nm, del patrn y de las muestras frente al
IVD blanco.
Conservar a 2-8C CLCULOS
A Muestra x k - ABlancox k
PRINCIPIO DEL MTODO Creatinina= xC = mg/dL de Creatinina en la muestra
En la primera reaccin, se usa creatinasa y sarcosina oxidasa en la A Patrn x k - ABlancox k
hidrlisis enzimtica de la creatina endgena para producir perxido de K= 0,754= 460 L/610 L
hidrgeno, el cual es eliminado por catalasa. En la segunda reaccin, la C= Concentracin del patrn
catalasa es inhibida por la azida sdica, se aaden creatininasa y 4- A= A2 - A1
aminoantipirina (4-AA), y nicamente la creatina generada a partir de la CONTROL DE CALIDAD
creatinina por la creatininasa se hidroliza secuencialmente por la creatinasa Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
y sarcosina oxidasa, para producir perxido de hidrgeno. Este nuevo SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
perxido de hidrgeno formado se mide en una reaccin acoplada Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el
catalizada por la peroxidasa, con N-etil-n-sulfopropil-mtoluidina (TOPS)/4- instrumento, los reactivos y el calibrador.
AA como cromgeno. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
SIGNIFICADO CLNICO correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
La creatinina es el resultado de la degradacin de la creatina, componente VALORES DE REFERENCIA1
de los msculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energa para Suero o plasma:
las clulas. Hombres 0,9 - 1,3 mg/dL
La produccin de creatinina depende de la modificacin de la masa Mujeres 0,6 - 1,1 mg/dL
muscular. Vara poco y los niveles suelen ser muy estables. Orina:
Se elimina a travs del rin. En una insuficiencia renal progresiva hay una Hombres 14 - 26 mg/Kg/24 h
retencin en sangre de urea, creatinina y cido rico. Mujeres 11 -20 mg/Kg/24 h
Niveles altos de creatinina son indicativos de patologa renal2. Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos sus propios valores de referencia.
clnicos y de laboratorio.
CARACTERSTICAS DEL MTODO
REACTIVOS Rango de medida: Desde el lmite de deteccin de 0,00 mg/dL hasta el lmite de
R1 MOPS 25 mmol/L, TOPS 0,5 mmol/L, linealidad de 180 mg/dL.
Creatinasa 10 KU/L, Sarcosina Oxidasa 5 KU/L Si la concentracin es superior al lmite de linealidad, diluir la muestra 1/2 con
Catalasa 3 KU/L, EDTA 1mmol/L, pH 7,5. ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
R2 MOPS 90 mmol/L, Creatinasa 30 KU/L, Precisin:
peroxidasa KU/L, pH 7,5. Azida sdica 0,5 g/L. Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Media (mg/dL) 0,87 3,82 0,87 3,75
CREATININE CAL Patrn primario acuoso de Creatinina 2 mg/dL. SD 0,01 0,06 0,02 0,06
CV (%) 1,63 1,44 2,31 1,72
PRECAUCIONES
CAL: H290-Puede ser corrosivo para los metales. Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,0226 (A)
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del Exactitud: Los reactivos de SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
producto. significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x) o con el
mtodo HPLC.
PREPARACIN Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
R1 y R2 estn listos para su uso. Coeficiente de correlacin (r)2: 0,9730.
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2- INTERFERENCIAS
8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. No usar reactivos No se observan interferencias con Hemoglobina hasta 5g/L, bilirrubina 40 mg/dL.
fuera de la fecha indicada. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
R1 y R2 son estables durante 8 semanas despus de la apertura del bote. determinacin de la creatinina3,4.
MATERIAL ADICIONAL NOTAS
- Espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 54520 nm 1. CREATININE CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable
- Cubeta termostatizada a 37C tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
- Equipamiento habitual de laboratorio. 2. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores sistemticos en
MUESTRAS mtodos automticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores
- Suero o plasma heparinizado1. sricos.
- Orina (24 h) 1: Diluir la muestra al 1/50 con agua destilada. Multiplicar el 3. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
resultado por 50 (factor de dilucin de la muestra). 4. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de
Estabilidad de la creatinina: al menos 24 horas a 2-8C. este reactivo en distintos analizadores.
PROCEDIMIENTO BIBLIOGRAFA
1. Condiciones del ensayo: 1. Fossati et al. Clin Chem 1983;29:1494-1496.
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 545 nm (525-565) 2. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd edition. Burtis CA, Ashwood ER.
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm paso de luz WB Saunders Co.,1999.
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C (0,1C) 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
3. Pipetear en una cubeta (Nota 3):
Blanco Patrn (Nota 1,2) Muestra
PRESENTACIN
R1 (L) 450 450 450
Ref.: 1001115 R1: 1 x 30 mL, R2:1 x 10 mL, CAL: 1 x 5 mL
Muestra (L) 10 10 10 Cont.
Ref.: 1001117 R1: 1 x 240 mL, R2:1 x 80 mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Mezclar e incubar durante 5 minutos.
5. Leer la absorbancia (A1) a 545nm, del patrn y de las muestras
frente al blanco.
6. Aadir:
Blanco Patrn Muestra
R2 (L) 150 150 150
7. Mezclar e incubar durante 5 minutos.
BSIS77-E 13/05/16 SPINREACT, S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
CREATININE TRINDER
Cratinine-TR
Enzymatique
Dtermination quantitative de cratinine 8. Lire labsorption (A2) 545nm, du patron et des chantillons par rapport au
IVD blanc.
Conserver 2 - 8C. CALCULS
A Muestra x k - ABlanco x k
PRINCIPE DE LA MTHODE xC
A Patrn x k - ABlanco x k
Dans la premire raction, nous utilisons de la cratinase oxydase dans Cratinine= = mg/dL de Cratinine dans lchantillon
l'hydrolyse enzymatique de la cratine endogne pour produire du peroxyde K= 0,754= 460L/610L
dhydrogne, qui est limin par catalase. Dans la seconde raction, la C = Concentration du patron
catalase est inhibe par lazoture de sodium, on ajoute de la cratinase et A= A2 - A1
4-aminoantipyrine (4-AA), et seulement la cratine gnre partir de la
CONTRLE DE QUALIT
cratinine par la cratinase on hydrolyse squentiellement par la cratinase
Il convient danalyser avec les chantillons de srums de contrle valus :
y sarcosine oxydase, pour produire du peroxyde dhydrogne. Ce nouveau
SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120 et 1002210).
peroxyde dhydrogne form est mesur dans une raction accouple
Si les valeurs trouves sont en dehors de la gamme de tolrance, il faut vrifier
catalyse par la peroxydase, avec N-thyle-n-sulfopropyle-m-toluidine
linstrument, les ractifs et le calibreur.
(TOPS)/4-AA comme chromogne.
Chaque laboratoire doit disposer de son propre Contrle de qualit et tablir des
SIGNIFICATION CLINIQUE corrections dans le cas o les contrles ne sont pas conformes aux tolrances
La cratinine est le rsultat de la dgradation de la cratine, composant des exiges.
muscles et elle peut tre transforme en ATP source dnergie pour les
VALEURS DE RFRENCE1
cellules.
Srum ou plasma :
La production de cratinine dpend de la modification de la masse
Hommes 0,9 - 1,3 mg/dL
musculaire. Elle varie peu et les niveaux sont gnralement trs stables.
Femmes 0,6 - 1,1 mg/dL
Elle slimine par les reins. Dans une insuffisance rnale progressive il y a
Urine :
une rtention dure, de cratinine et dacide urique dans le sang.
Hommes 14 - 26 mg/Kg/24 h
Des niveaux levs de cratinine sont indicatifs de pathologie rnale2.
Femmes 11 -20 mg/Kg/24 h
Le diagnostic clinique doit tre ralis en prenant en compte toutes les
Ces valeurs sont indicatives. Il est conseill que chaque laboratoire tablisse ses
donnes cliniques et de laboratoire.
propres valeurs de rfrence.
RACTIFS
CARACTRISTIQUES DE LA MTHODE
R1 MOPS 25 mmol/L, TOPS 0,5 mmol/L, Gamme de mesure : depuis la limite de dtection de 0,00mg/dL jusqu la limite
Cratinase 10 KU/L, Sarcosine Oxydase 5 KU/L de linarit de 180 mg/dL.
Catalase 3 KU/L, EDTA 1mmol/L, pH7,5. Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer
R2 MOPS 90 mmol/L, Cratinase 30 KU/L, lchantillon 1/2 avec ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Peroxydase KU/L, pH 7,5. Azoture de sodium 0,5 Prcision :
g/L. Intra-srie (n= 20) Inter-srie (n= 20)
CRATININE CAL Patron primaire aqueux de Cratinine 2 mg/dL. Moyenne (mgl/L) 0,87 3,82 0,87 3,75
SD 0,01 0,06 0,02 0,06
PRCAUTIONS CV (%) 1,63 1,44 2,31 1,72
CAL : H290-Peut tre corrosif pour les mtaux.
Suivre les conseils de prudence indiqus sur la FDS et sur ltiquette du Sensibilit analytique : 1 mg/dL = 0,0226 (A)
produit. Prcision : Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
systmatiques significatives quand ils sont compars dautres ractifs
PRPARATION commerciaux (x) ou avec la mthode HPLC.
R1 et R2 sont prts tre utiliss. Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants :
Coefficient de corrlation (r)2 : 0,9730.
CONSERVATION ET STABILIT quation de la droite de rgression : y = 1,066x 0,020
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date dexpiration indique Les caractristiques de la mthode peuvent varier selon lanalyseur utilis.
sur ltiquette, quand les flacons sont gards bien ferms 2-8C, labri
de la lumire et que leur contamination est vite. Ne pas utiliser des INTERFERENCES
ractifs au-del de la date indique. Aucune interfrence nest observe avec lhmoglobine jusqu 5g/L, bilirubine 40
R1 et R2 sont stables pendant 8 semaines aprs louverture du flacon. mg/dL.
MATRIEL SUPPLMENTAIRE Plusieurs mdicaments ont t dcrits ainsi que dautres substances qui
- Spectrophotomtre ou photomtre pour lectures 54520 nm interfrent dans la dtermination de la cratinine3,4.
- Cuve thermostatise 37C REMARQUES
- quipement habituel de laboratoire. 1. CRATININE CAL : En raison de la nature du produit, il est conseill de le
CHANTILLONS traiter avec beaucoup de prcaution car il peut tre facilement contamin.
- Srum ou plasma hparin1. 2. Ltalonnage avec le patron aqueux peut entraner des erreurs systmatiques
- Urine (24 h) 1: Diluer lchantillon 1/50 avec de leau distille. Multiplier dans des mthodes automatiques. Dans ce cas, il est conseill dutiliser des
le rsultat par 50 (facteur de dilution de lchantillon). calibreurs sriques.
Stabilit de la cratinine : au moins 24 heures 2-8C 3. Utiliser des embouts de pipette jetables propres pour leur diffusion.
4. SPINREACT dispose dinstructions dtailles pour lapplication de ce
PROCDURE ractif dans diffrents analyseurs.
1. Conditions de lessai :
Longueur donde : . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .545nm (525-565) BIBLIOGRAPHIE
Cuve : . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm passage de lumire 1. Fossati et al. Clin Chem 1983;29:1494-1496.
Temprature : . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 37C(0,1C) 2. Tietz Text book of Clinical Chemistry, 3rd edition. Burtis CA, Ashwood ER.
2. Rgler le spectrophotomtre zro par rapport leau distille. WB Saunders Co.,1999.
3. Introduire la pipette dans une cuve(Note 3): 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Blanc Patron (Note 1,2) chantillon 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
R1 (L) 450 450 450
PRSENTATION
chantillon (L) 10 10 10
4. Mlanger et incuber pendant 5 minutes. Rf : 1001115 Cont. R1 : 1 x30 mL, R2:1 x 10 mL, CAL : 1 x 5 mL
5. Lire labsorption (A1) 545nm, du patron et des chantillons par Rf : 1001117 R1 : 1 x240 mL, R2:1 x 80 mL, CAL : 1 x 5 mL
rapport au blanc.
6. Ajouter :
Blanc Patron chantillon
R2 (L) 150 150 150
7. Mlanger et incuber pendant 5 minutes.
BSIS77-F 26/04/17 SPINREACT, S.A./S.A.U Ctra. Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. E-mail : spinreact@spinreact.com
CREATININE TRINDER
Creatinina-TR
Enzimtico
Determinao quantitativa de creatinina 7. Misturar e incubar durante 5 minutos.

IVD 8. Ler a absorvncia (A2) do padro e das amostras, frente ao branco a 545
Conservar entre 2-8 C nm.
CLCULOS
PRINCPIO DO MTODO
Na reao inicial, utiliza-se creatina quinase e sarcosina oxidase na A Amostra x k - A Branco x k
Creatinina= xC = mg/ dl de Creatinina na amostra
hidrlise enzimtica da creatina endgena para produzir perxido de
A Pado x k - A Branco x k
hidrognio, o qual eliminado pela catalase. Na segunda reao, a
catalase inibida pela azida de sdio, adiciona-se creatina quinase e 4- K= 0,754 = 460 l/ 610 l
aminoantipirina (4-AA), e apenas a creatina produzida a partir da C= Concentrao do padro
creatinina pela ao da creatinina quinase hidrolisada sequencialmente A= A2 A1.
pela creatina quinase e sarcosina oxidase, para produzir perxido de
hidrognio. Este perxido de hidrognio formado de novo medido numa
conveniente analisar juntamente com as amostras de soro de controlo
reao acoplada catalisada pela peroxidase, com n-etil-n-sulfopropil-m-
avaliados:
toluidina (TOPS)/ 4-AA como cromognio.
SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002120 e 1002210).
SIGNIFICADO CLNICO Se os valores determinados se encontrarem fora do intervalo de tolerncia,
A creatinina resulta da degradao da creatina, componente dos deve-se verificar o aparelho, os reagentes e a calibrao.
msculos e pode ser transformada em ATP, a fonte de energia para as Cada laboratrio deve dispor do seu prprio Controlo de Qualidade e
clulas. estabelecer procedimentos de correo no caso de os controlos no cumprirem
A produo de creatinina depende da modificao da massa muscular. as tolerncias.
Varia pouco e os nveis costumam ser muito estveis.
eliminada atravs dos rins. Numa insuficincia renal progressiva existe VALORES DE REFERNCIA1
uma reteno de ureia, creatinina e cido rico no sangue. Soro ou plasma:
Nveis elevados de creatinina so indicativos de patologia renal2. Homens 0,9 - 1,3 mg/dl
O diagnstico clnico deve realizar-se tendo em considerao todos os Mulheres 0,6 - 1,1 mg/dl
dados clnicos e laboratoriais. Urina:
Homens 14 - 26 mg/kg/24 h
REAGENTES Mulheres 11 - 20 mg/kg/24 h
MOPS 25 mmol/l, TOPS 0,5 mmol/l, Estes valores so orientativos. Recomenda-se que cada laboratrio estabelea
R1
Creatina quinase 10 kU/l, Sarcosina oxidase 5 os seus prprios valores de referncia.
KU/l Catalase 3 kU/l, EDTA 1mmol/l, pH 7,5.
CARACTERSTICAS DO MTODO
R2 MOPS 90 mmol/l, Creatina quinase 30 kU/l, Intervalo de medio: Desde o limite de deteo de 0,00 mg/dl at ao limite de
peroxidase kU/L, pH 7,5. Azida de sdio 0,5 g/l. linearidade de 180 mg/dl.
Se a concentrao for superior ao limite de linearidade, diluir 1/2 da amostra
CREATININA CAL Padro primrio aquoso de Creatinina 2 mg/ dl. com NaCl 9 g/l e multiplicar o resultado final por 2.
Preciso:
PRECAUES Intra-srie (n=20) Inter-srie (n=20)
CAL: H290 - Pode ser corrosivo para os metais. Mdia (mg/dl) 0,87 3,82 0,87 3,75
Seguir os conselhos de prudncia indicados na FDS e na etiqueta do SD 0,01 0,06 0,02 0,06
produto.
CV (%) 1,63 1,44 2,31 1,72
PREPARAO Sensibilidade analtica: 1 mg/dl = 0,0226 (A)
R1 e R2 esto prontos a ser utilizados. Exatido: Os reagentes SPINREACT (y) no apresentam diferenas
CONSERVAO E ESTABILIDADE sistemticas significativas quando comparados com outros reagentes comerciais
Todos os componentes do kit so estveis at ao prazo de validade (x) ou com o mtodo por HPLC.
indicado na etiqueta, quando os frascos so mantidos bem fechados, a Os resultados obtidos com 50 amostras foram os seguintes:
uma temperatura entre 2-8 C, protegidos da luz e se evita a sua Coeficiente de correlao (r)2: 0,9730.
contaminao. No utilizar reagentes que tenham ultrapassado o prazo Equao da reta de regresso: y = 1,066x - 0,020.
indicado. As caractersticas do mtodo podem variar em funo do analisador utilizado.
R1 e R2 so estveis durante 8 semanas ps a abertura dos frascos. INTERFERNCIAS
EQUIPAMENTO ADICIONAL No se observaram interferncias com hemoglobina at 5 g/l e bilirrubina 40
- Espectrofotmetro ou fotmetro para leituras a 545 20 nm. mg/dl.
- Banho termostatizvel a 37 C Foram descritos vrios frmacos e outras substncias que interferem na
- Equipamento habitual de laboratrio. determinao da creatinina3,4.
AMOSTRAS NOTAS
- Soro ou plasma heparinizado1. 1. CREATININA CAL: Devido natureza do produto, aconselhvel manuse-
- Urina (24 h)1: Diluir a amostra na proporo 1/50 com gua destilada. lo com extremo cuidado uma vez que se pode contaminar com facilidade.
Multiplicar o resultado obtido por 50 (fator de diluio da amostra). 2. A calibrao com o Padro aquoso pode originar erros sistemticos em
Estabilidade da creatinina: Pelo menos 24 horas a uma temperatura mtodos automticos. Neste caso, recomenda-se a utilizao de
entre 2-8 C. calibradores sricos.
PROCEDIMENTO 3. Utilizar pontas de pipeta descartveis limpas para a sua dispensao.
4. A SPINREACT dispe de instrues detalhadas para a aplicao deste
1. Condies do ensaio:
reagente em diferentes analisadores.
Comprimento de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 545 nm (525-565)
Cuvete: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm de passo de luz BIBLIOGRAFIA
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37 C ( 0,1 C) 1. Fossati et al. Clin Chem 1983;29:1494-1496.
2. Ajustar o espectrofotmetro a zero com gua destilada. 2. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd edition. Burtis CA, Ashwood ER.
3. Pipetar numa cuvete(Nota 3): WB Saunders Co.,1999.
Branco Padro(Nota 1,2) Amostra 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
R1 (l) 450 450 450 1995.
Amostra (l) 10 10 10 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
4. Misturar e incubar durante 5 minutos.
APRESENTAO
5. Ler a absorvncia (A1) do padro e das amostras, frente ao branco
a 545 nm. Ref.: 1001115 R1: 1 x30 ml, R2: 1 x 10 ml, CAL: 1 x 5 ml
Cont.
6. Adicionar: Ref.: 1001117 R1: 1 x 240 ml, R2: 1 x 80 ml, CAL: 1 x 5 ml
Branco Padro Amostra
R2 (l) 150 150 150
BSIS77-P 26/04/17 SPINREACT, S.A./S.A.U Ctra. Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
BILIRUBIN T- DPD
Total Bilirubin
DPD. Colorimetric
Quantitative determination of total bilirubin CALCULATIONS:

IVD
With calibrator:
Store at 2-8C
( A ) Sample x Calibrator conc. = mg/dL of bilirubin in the sample
PRINCIPLE OF THE METHOD ( A ) Calibrator
Bilirubin (both conjugated and unconjugated) couples with the diazo reagent in
the presence of a surfactant to form azobilirubin. The intensity of color formed is With Factor: (A) Sample x Factor* = mg/dL bilirubin in the sample
proportional to the bilirubin concentration in the sample tested. The increase of
absorbance at 546 nm is directly proportional to the total bilirubin concentration. *Factor: Calibrator concentrat ion
CLINICAL SIGNIFICANCE ( A ) Calibrator
Bilirubin is caused by the degradation of hemoglobin and exists in two forms.
Unconjugated bilirubin is transported to the liver bound by albumin where it Conversion factor: mg/dL x 17,1 = mol/L.
becomes conjugated (direct) with glucuronic acid and excreted.
Hyperbilirubinemia is the result of an increase of bilirubin in plasma. Possible QUALITY CONTROL
causes: Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
Total bilirubin: Increase hemolysis, genetic alteration, neonatal anemia, SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210). If control values
erythropoiesis alterations and presence of drugs. are found outside the defined range, check the instrument, reagents and calibrator for
Direct Bilirubin: cholestasis liver, liver abnormalities and genetic. problems.
Clinical diagnosis should not be made based on a single test result; it should Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective actions
integrate clinical and other laboratory data. if controls do not meet the acceptable tolerances..
REAGENTS REFERENCE VALUES

Total bilirubin 0,2-1,2 mg/dL ( 3,4 20,5 mol/L )
Surfactants
R1 These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its own
Hydrochloric acid (HCl) 160 mM
reference range.
2,4-DPD 2 mM
R2
Hydrochloric acid (HCl) 120 mM PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Surfactant Measuring range: From quantification limit of 0,1 mg/dL to linearity limit of 30 mg/dL.
Optional BILIRUBIN CAL If the results obtained were greater than the linearity limit, dilute the sample 1/2 with
Ref:1002013
Precision:
PRECAUTIONS Inter assay (n= 40) Intra assay (n= 80)
R1/ R2: H290- Corrosive to metals. H314 - Irritation or skin corrosion. Mean (mg/dL) 1,169 5,0485 1,1682 5,0485
R1: contains HCl and Triton X-114. R2: contains HCl and 2,4-DPD. SD 0,0285 0,0594 0,012 0,046
Follow the safety advice given in MSDS and product label. CV (%) 2,4 1,2 1,0 0,9
PREPARATION Sensitivity: 1 mg/dL = 0,033 Abs. units.
The reagents are provided in a ready to use format. Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show systematic
differences when compared with other commercial reagents (x) on a Spintech 240
STORAGE AND STABILITY analyzer. The results obtained using 61 samples ranging from 0,42 a 19,36 mg/dL
The reagents are stable until the expiry date stated on the label when stored at (7,18 to 331,056 mol/L) were:
2-8C, protected from light and contaminations are prevented during their use. Correlation coefficient (r): 0,996
Do not use reagents over the expiration date. Regression equation: y= 0,9836x+0,1644
Signs of reagent deterioration: The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
INTERFERENCES
ADDITIONAL EQUIPMENT Interferences from hemolysis, lipemia and a. ascorbic were evaluated for this total
- Spectrophotometer or analyzer capable of measuring absorbance at 546 nm. bilirubin method on a Spintech 240 analyzer. Two concentrations of total bilirubin were
- Cuvettes 1.0 cm light path. evaluated. No interferences were observed for lipemia (Intralipid) up to 1800 mg/dL,
- General laboratory equipment. hemoglobin up to 2000 mg/dL and ascorbic acid up to 40 mg/L.
A list of drugs and other interfering substances with bilirubin has been reported by
SAMPLES Young et. al 4,5 .
Serum or plasma, free of hemolysis. Protect samples from light.
Stability of the sample: 4 days at 2-8C or 2 month at 20C. NOTES
PROCEDURE 1. SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
1. Assay conditions: Instructions for many of them are available on request.
Wavelength:..... 546 nm (530-580)
Cuvette.1 cm light path BIBLIOGRAPHY
Temperature: ......................................37C 1. David G Levitt and Michael D Levitt. Quantitative assessment of the multiple
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. processes responsible for bilirubin homeostasis in health and disease . Clin Exp
3. Pipette into a cuvette: Gastroenterol. 2014; 7: 307328.
Calibrator blank Sample blank 2. Malloy H T. et al. The determination of bilirubin with the photoelectric colorimeter.
R 1 (L) 800 800 J. Biol Chem 1937; 112, 2; 481-491.
Calibrator (L) 40 - 3. Martinek R. Improved micro-method for determination of serum bilirubin. Clin
Chim 1966: Acta 13: 61-170.
Sample (L) - 40 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
4. Mix and incubate for 5 minutes at 37C. 6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
5. Read the absorbance (A1) of the sample and calibrator. 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
6. Add:
Calibrator Sample
R 2 (L) 200 200
PACKAGING
7. Mix and incubate for 5 minutes at 37C.
8. Read the absorbance (A2) of the sample and calibrator against the blank. Ref: 1001046 R 1: 1 x 240 mL
Cont.
9. Calculate the increase of the absorbance: A= A2A1. R 2: 1 x 60 mL
BSIS92-I 24/02/17 SPINREACT,S.A./S.AU. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
BILIRUBIN T- DPD
Bilirrubina Total
DPD. Colorimtrico
Determinacin cuantitativa de bilirrubina total

IVD
CLCULOS
Conservar a 2-8C Con Calibrador:
( A )Muestra x Conc. Calibrador = mg/dL de bilirrubina en la muestra
PRINCIPIO DEL MTODO ( A ) Calibrador
La bilirrubina total (tanto conjugada como no conjugada) se une con el agente
diazo en presencia de un surfactante para formar azobilirrubina. La intensidad
- Con Factor: (A) Muestra x Factor* = mg/dL bilirrubina en la muestra
del color formado es proporcional a la concentracin de bilirrubina presente en
la muestra ensayada. El aumento de la absorbancia a 546 nm es directamente
*Factor: Concentrac in del Calibrador
proporcional a la concentracin de bilirrubina total.
( A ) Calibrador
SIGNIFICADO CLNICO Factor de conversin: mg/dL x 17,1 = mol/L.
La bilirrubina se origina por la degradacin de la hemoglobina y existe en dos
formas. La bilirrubina no conjugada se transporta al hgado, unida por la CONTROL DE CALIDAD
albmina, donde se convierte en conjugada (directa) con el cido glucurnico y Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
se excreta. La hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
bilirrubina en plasma. Causas ms probables de la hiperbilirrubinemia: Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el
Bilirrubina Total: Aumento de la hemlisis, alteraciones genticas, anemia instrumento, los reactivos y el calibrador.
neonatal, alteraciones eritropoyeticas, presencia de drogas. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
Bilirrubina Directa: Colestasis heptica, alteraciones genticas y alteraciones correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
hepticas.
El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos VALORES DE REFERENCIA
clnicos y de laboratorio. Bilirrubina Total 0,2-1,2 mg/dL ( 3,4-20,5 mol/L )
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus
REACTIVOS propios valores de referencia.
Surfactantes
R1 CARACTERSTICAS DEL MTODO
cido clorhdrico (HCl) 160 mM
Rango de medida: Desde el lmite de cuantificacin de 0,1 mg/dL hasta el lmite de
2,4-DPD 2 mM
R2 linealidad de 30 mg/dL.
cido clorhdrico (HCl) 120 mM
Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir 1/2 con NaCl
Surfactante
9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
Opcional BILIRRUBIN CAL Ref:1002013 Precisin:
Interserie (n= 40) Intraserie (n= 80)
Media (mg/dL) 1,169 5,0485 1,1682 5,0485
PRECAUCIONES
SD 0,0285 0,0594 0,012 0,046
R1/ R2: H290- Corrosivo para los metales. H314-Irritacin o corrosin cutnea.
R1: contiene HCl y Triton X-114. R2: contiene HCl y 2,4-DPD. CV (%) 2,4 1,2 1,0 0,9
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto.
Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,033 Abs.
PREPARACIN Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
Todos los reactivos estn listos para su uso. significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x) con el
analizador de Spinreact, Spintech 240.
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD Los resultados obtenidos con 61 muestras con valores de entre 0,42 a 19,36 mg/dL
Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, (7,18 a 331,056 mol/L) fueron los siguientes:
cuando se mantienen bien cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita la Coeficiente de correlacin (r): 0,996
contaminacin durante su uso. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Ecuacin de la recta de regresin: y= 0,9836x+0,1644
Indicadores de deterioro de los reactivos: Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
INTERFERENCIAS
Las interferencias debidas a la hemlisis, lipemia y a. ascrbico se evaluaron para
MATERIAL ADICIONAL
este mtodo de bilirrubina total en un analizador Spintech 240. Se evaluaron dos
- Espectrofotmetro o analizador capaz de medir la absorbancia a 546 nm.
concentraciones de la bilirrubina total. No se observaron interferencias para la lipemia
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
(Intralipid) hasta 1800 mg/dL, hemoglobina hasta 2000 mg/dL y el cido ascrbico
hasta 40 mg/L.
Una lista de medicamentos y otras sustancias que interfieren en la bilirrubina ha sido
MUESTRAS
reportado por Young et. al 4,5.
Suero o plasma libre de hemlisis. Proteger de la luz.
Estabilidad de la muestra: 4 das a 2-8C o 2 meses a 20C.
NOTAS
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo:
1. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de este
Longitud de onda: ... 546 nm (530-580)
reactivo en distintos analizadores.
Cubeta:1cm paso de luz
Temperatura: ...........................37C
BIBLIOGRAFA
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada.
1. David G Levitt and Michael D Levitt. Quantitative assessment of the multiple
processes responsible for bilirubin homeostasis in health and disease . Clin Exp
Blanco Calibrador Blanco Muestra
Gastroenterol. 2014; 7: 307328.
R 1 (L) 800 800 2. Malloy H T. et al. The determination of bilirubin with the photoelectric colorimeter.
Calibrador (L) 40 - J. Biol Chem 1937; 112, 2; 481-491.
- 3. Martinek R. Improved micro-method for determination of serum bilirubin. Clin
Muestra (L) 40
Chim 1966: Acta 13: 61-170.
4. Mezclar e incubar exactamente 5 minutos a 37C. 5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
5. Leer la absorbancia (A1) del calibrador y la muestra. 6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Aadir: 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Calibrador Muestra
R 2 (L) 200 200
PRESENTACIN
7. Mezclar e incubar exactamente 5 minutos a 37C.
8. Leer la absorbancia (A2) del calibrador y la muestra frente al blanco de
Ref: 1001046 Cont. R 1: 1 x 240 mL
reactivo.
R 2: 1 x 60 mL
9. Calcular el incremento de absorbancia: A= A2A1.
BSIS92-E 24/02/17 SPINREACT,S.A./S.AU. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
BILIRUBINE T- DPD
Bilirubine totale
DPD. Colorimtrique
Dtermination quantitative de bilirubine totale 8. Lire l'absorption (A2) du calibreur et lchantillon par rapport au blanc de
IVD ractif.
9. Calculer l'augmentation d'absorption : A= A2A1
Conserver 2 - 8C. CALCULS
PRINCIPE DE LA MTHODE Avec calibreur :
La bilirubine totale (tant conjugue que non conjugue sunit avec lagent ( A )Muestra
diazo en prsence dun surfactant pour former lazobilirubine. Lintensit de ( A ) Calibrador x Conc. Calibreur =mg/dL de bilirubine dans lchantillon
la couleur forme est proportionnelle la concentration de bilirubine
prsente dans lchantillon test. Laugmentation de labsorption 546 nm
- Avec Facteur :(A) chantillon x Facteur* = mg/dL bilirubine dans lchantillon
est directement proportionnelle la concentration de bilirubine totale.
Concentrac in del Calibrador
La bilirubine est cre par la dgradation de lhmoglobine et existe sous *Facteur : ( A ) Calibrador
deux formes. La bilirubine non conjugue est transporte vers le foie, unie Facteur de conversion : mg/dL x 17,1 = mol/L.
par lalbumine, o elle se transforme en conjugue (directe) avec lacide
glucoronique et elle est excrte. Lhyperbilirubinmie est le rsultat dune CONTRLE DE QUALIT
augmentation de la bilirubine dans le plasma. Les causes les plus probables Il est recommand d'utiliser des srums de contrle valus:
de lhyperbilirubinmie : SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120 et 1002210).
Bilirubine totale : Augmentation de lhmolyse, altrations gntiques, Si les valeurs trouves sont en dehors de la gamme de tolrance, il faut vrifier
anmie nonatale, altrations rythropotiques, prsence de linstrument, les ractifs et le calibreur.
mdicaments. Chaque laboratoire doit tablir de son propre Contrle de qualit et des corrections
Bilirubine directe : Cholestase hpatique, altrations gntiques et en cas de non-conformit des contrles en termes de tolrances exiges.
altrations hpatiques. VALEURS DE RFRENCE
Le diagnostic clinique doit tre ralis en tenant compte de toutes les
Bilirubine totale 0,2-1,2 mg/dL (3,4-20,5mol/L)
donnes cliniques et de laboratoire.
Ces valeurs sont indicatives. Il est conseill que chaque laboratoire tablisse ses
propres valeurs de rfrence.
RACTIFS
Surfactants CARACTRISTIQUES DE LA MTHODE
R1
Acide chlorhydrique (HCI) 160mM Gamme de mesure :Depuis la limite de quantification de 0,1 mg/dL jusqu la
2,4-DPD 2mM limite de linarit de 30mg/dL.
R2 Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer 1/2
Acide chlorhydrique (HCI) 120 mM
Surfactant avec ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Prcision :
En option BILIRUBINE CAL Rf :1002013 Inter-srie (n= 40) Intra-srie (n= 80)
Moyenne (mgl/L) 1,169 5,0485 1,1682 5,0485
PRCAUTIONS SD 0,0285 0,0594 0,012 0,046
R1/ R2 : H290- Corrosif pour les mtaux.. H314-Irritation ou corrosion CV (%) 2,4 1,2 1,0 0,9
cutane.
Sensibilit analytique : 1 mg/dL = 0,033Abs.
R1 : contient HCl et Triton X-114. R2 : contient HCly 2,4-DPD.
Exactitude : Les rsultats obtenus en utilisant les ractifs SPINREACT (y) ne
Suivre les conseils de prudence indiqus sur la FDS et sur ltiquette du
montrent pas de diffrences systmatiques significatives quand ils sont compars
produit.
dautres ractifs commerciaux (x).avec lanalyseur de Spinreact, Spintech 240.
PRPARATION Les rsultats obtenus avec 61 chantillons avec des valeurs entre 0,42 19,36
Tous les ractifs sont prts tre utiliss. mg/dL (7,18 a 331,056 mol/L) furent les suivants :
Coefficient de corrlation (r) : 0,996
CONSERVATION ET STABILIT Equation de la droite de rgression : y = 0,9836x +0,1644
Les ractifs sont stables jusqu la date dexpiration indique sur ltiquette, Les caractristiques de la mthode peuvent varier selon lanalyseur utilis.
quand ils sont conservs bien ferms 2-8C, labri de la lumire et que
leur contamination est vite pendant lutilisation. Ne pas utiliser des ractifs INTERFERENCES
au-del de la date indique. Les interfrences dues lhmolyse, lipmie et a. ascorbique ont t values
Indicateurs de dtrioration des ractifs : pour cette mthode de bilirubine totale sur un analyseur Spintech 240. Deux
- La prsence de particules et de turbidit. concentrations de la bilirubine totale ont t values. Aucune interfrence na
t observe pour la lipmie (Intralipid) jusqu 1800 mg/dL, hmoglobine 2000
MATRIEL SUPPLMENTAIRE mg/dL et lacide ascorbique jusqu 40 mg/L.
- Spectrophotomtre ou analyseur capable de mesurer labsorption 546 Une liste de mdicaments et dautres substances qui interfrent dans la bilirubine
nm. a t rapporte par Young et. al4,5.
- Cuvettes de 1.0 cm de passage de lumire. REMARQUES
- quipement habituel de laboratoire. 1. SPINREACT dispose dinstructions dtailles pour lapplication de ce
CHANTILLONS ractif dans diffrents analyseurs.
Srum ou plasma sans hmolyse. Protger de la lumire. BIBLIOGRAPHIE
Stabilit de lchantillon : 4 jours 2-8C ou 2 mois -20C. 1. David G Levitt and Michael D Levitt. Quantitative assessment of the multiple
PROCDURE processes responsible for bilirubin homeostasis in health and disease .Clin Exp
Gastroenterol. 2014; 7: 307-328.
1. Conditions de lessai :
2. Malloy H T. et al. The determination of bilirubin with the photoelectric colorimeter.
Longueur donde : ..546 nm (530-580).
J. Biol Chem 1937; 112, 2; 481-491.
Cuvette :.1cm passage de lumire 3. Martinek R. Improved micro-method for determination of serum bilirubin. Clin Chim
Temprature .........................37C 1966: Acta 13: 61-170.
2. Rgler le spectrophotomtre zro par rapport leau distille. 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
3. Introduire la pipette dans une cuvette : 5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Blanc calibreur Blanc chantillon 6. Burtis A et al. Tietz Text book of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
R 1 (L) 800 800 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Calibreur (L) 40 - PRSENTATION
chantillon (L) - 40
4. Mlanger et incuber 5 minutes exactement 37C Rf : 1001046 Cont. R 1 : 1 x 240 mL
5. Lire l'absorption (A1) du calibreur et lchantillon. R 2 : 1 x 60 mL
6. Ajouter :
Calibreur chantillon
R 2 (L) 200 200
7. Mlanger et incuber 5 minutes exactement 37C
BSIS92-F 26/04/17 SPINREACT,S.A./S.AU. Ctra .Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. E-mail : spinreact@spinreact.com
BILIRUBIN T- DPD
Bilirrubina Total
DPD. Colorimtrico
Determinao quantitativa de bilirrubina total 9. Calcular o aumento da absorvncia: A= A2A1.

IVD CLCULOS
Com Calibrador:
Conservar entre 2-8 C
( A) Amostra x Conc. Calibrador = mg/dl de bilirrubina na amostra
PRINCPIO DO MTODO ( A) Calibrador
A bilirrubina total (tanto conjugada como no conjugada) liga-se ao agente
diazo na presena de um surfactante para formar azobilirrubina. A - Com Fator:(A) Amostra x Fator* = mg/dl de bilirrubina na amostra
intensidade da cor formada proporcional concentrao de bilirrubina
presente na amostra testada. O aumento da absorvncia a 546 nm *Fator: Concentra o do Calibrador
diretamente proporcional concentrao de bilirrubina total.
(A) Calibrador
SIGNIFICADO CLNICO Fator de converso: mg/dl x 17,1 = mol/l.
A bilirrubina resulta da degradao da hemoglobina e existe em duas
formas. A bilirrubina no conjugada transportada para o fgado ligada CONTROLO DE QUALIDADE
albumina, onde se converte na forma conjugada (direta) com o cido conveniente analisar juntamente com as amostras de soro de controlo
glicurnico e excretada. A hiperbilirrubinemia o resultado de um avaliados:
aumento da bilirrubina no plasma. Causas mais provveis da : SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002120 e 1002210).
Bilirrubina Total: Aumento da hemlise, alteraes genticas, anemia Se os valores determinados se encontrarem fora do intervalo de tolerncia,
neonatal, alteraes eritropoiticas, presena de frmacos. devem deve-se verificar o aparelho, os reagentes e a calibrao.
Bilirrubina direta: Colestase heptica, alteraes genticas e alteraes Cada laboratrio deve dispor do seu prprio Controlo de Qualidade e
hepticas. estabelecer procedimentos de correo no caso de os controlos no cumprirem
O diagnstico clnico deve realizar-se tendo em considerao todos os as tolerncias.
dados clnicos e laboratoriais.
VALORES DE REFERNCIA
REAGENTES Bilirrubina Total 0,2 - 1,2 mg/dl (3,4 - 20,5 mol/l)
Surfactantes Estes valores so orientativos. Recomenda-se que cada laboratrio estabelea
R1 os seus prprios valores de referncia.
cido clordrico (HCl) 160 mM
2,4-DPD 2mM CARACTERSTICAS DO MTODO
R2
cido clordrico (HCl) 120 mM Intervalo de medio: Desde o limite de deteo de 0,1 mg/dl at ao limite de
Surfactante linearidade de 30 mg/dl.
Opcional BILIRRUBINA CAL Se a concentrao da amostra for superior ao limite de linearidade, diluir 1/2
Ref:1002013
com NaCl 9 g/l e multiplicar o resultado final por 2.
Preciso:
PRECAUES Inter-srie (n=40) Intra-srie (n=80)
R1/ R2: H290 - Pode ser corrosivo para os metais. H314- Provoca Mdia (mg/dl) 1,169 5,0485 1,1682 5,0485
irritao ou corroso cutnea. SD 0,0285 0,0594 0,012 0,046
R1: contm HCl e Triton X-114. R2: contm HCl e 2,4-DPD.
CV (%) 2,4 1,2 1,0 0,9
Seguir os conselhos de prudncia indicados na FDS e na etiqueta do
Sensibilidade analtica: 1 mg/dl = 0,033Abs.
produto.
Exatido: Os reagentes SPINREACT (y) no apresentam diferenas
PREPARAO sistemticas significativas quando comparados com outros reagentes comerciais
Todos os reagentes esto prontos a ser utilizados. (x) com o analisador da Spinreact, Spintech 240.
Os resultados obtidos com 61 amostras com valores entre 0,42 a 19,36 mg/dl
CONSERVAO E ESTABILIDADE (7,18 a 331,056 mol/l) foram os seguintes:
Os reagentes so estveis at ao prazo de validade indicado na etiqueta, Coeficiente de correlao (r): 0,996
quando os frascos so mantidos bem fechados, a uma temperatura entre Equao da reta de regresso: y = 0,9836x + 0,1644
2-8 C, protegidos da luz e se evita a sua contaminao No utilizar As caractersticas do mtodo podem variar em funo do analisador utilizado.
reagentes que tenham ultrapassado o prazo indicado.
Indicadores de degradao dos regentes: INTERFERNCIAS
- Presena de partculas e turvao. As interferncias devidas a hemlise, lipmia e cido ascrbico foram avaliadas
neste mtodo de bilirrubina total num analisador Spintech 240. Foram avaliadas
EQUIPAMENTO ADICIONAL duas concentraes de bilirrubina total. No foram observadas interferncias da
- Espectrofotmetro ou analisador capaz de medir a absorvncia a 546 lipmia (Intralipid) at 1800 mg/dl, da hemoglobina at 2000 mg/dl e do cido
nm. ascrbico at 40 mg/l. Uma lista de medicamentos e outras substncias que
- Cuvetes de 1,0 cm de passo de luz. interferem com a bilirrubina foi reportada por Young et. al4,5.
- Equipamento habitual de laboratrio.
NOTAS
AMOSTRAS 1. A SPINREACT dispe de instrues detalhadas para a aplicao deste
Soro ou plasma livre de hemlise. Proteger da luz. reagente em diferentes analisadores.
Estabilidade da amostra: durante 4 dias a 2-8 C ou durante 2 meses a -
BIBLIOGRAFIA
20 C.
1. David G Levitt and Michael D Levitt. Quantitative assessment of the
PROCEDIMENTO multiple processes responsible for bilirubin homeostasis in health and
1. Condies do ensaio: disease .Clin Exp Gastroenterol. 2014; 7: 307328.
Comprimento de onda: . .546 nm (530-580) 2. Malloy H T. et al. The determination of bilirubin with the photoelectric
Cuvete:1,0 cm de passo de luz colorimeter. J. Biol Chem 1937; 112, 2; 481-491.
Temperatura:..........................37 C 3. Martinek R. Improved micro-method for determination of serum bilirubin.
2. Ajustar o espectrofotmetro a zero com gua destilada. Clin Chim 1966: Acta 13: 61-170.
3. Pipetar numa cuvete: 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
Branco calibrador Branco Amostra 1995.
R 1 (l) 800 800
Calibrador (l) 40 -
Amostra (l) - 40
4. Misturar e incubar durante exactamente 5 minutos a 37 C. APRESENTAO
5. Ler a absorvncia (A1) do calibrador e da amostra.
6. Adicionar: Ref: 1001046 Cont. R 1: 1 x 240 ml
Calibrador Amostra R 2: 1 x 60 ml
R 2 (l) 200 200
7. Misturar e incubar durante exatamente 5 minutos a 37 C.
8. Ler a absorvncia (A2) do calibrador e da amostra, frente ao branco
do reagente.
BSIS92-P 26/04/17 SPINREACT,S.A./S.AU. Ctra. Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
NH3
AMMONIA
Enzymatic-UV
Quantitative determination of Ammonia WR Blank Standard Sample
IVD Sample ---- ---- 0,1 mL
Distilled water 0,1 mL ---- ----
Store at 2-8C Standard ---- 0,1 mL ----
Reagent (R1) 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
INTENDED USE
4. Mix, and allow to stand for 5 min. Read initial absorbance of sample and
For the quantitative in vitro determination of Ammonia in plasma.
blank (A1).
5. Then add:
PRINCIPLE OF THE METHOD(1, 4, 5)
GLDH (R2) 0,01 mL 0,01 mL 0,01 mL
Ammonia combines with -ketoglutarate and NADPH in the presence of
glutamate dehydrogenase (GLDH) to yield glutamate and NADP+. The 6. Mix, and incubate for 5 min. Read final absorbance of sample and blank (A2).
corresponding decrease in absorbance at 340 nm is proportional to the
plasma ammonia concentration. CALCULATIONS
Ablank = Blank A1 - Blank A2
GLDH
-ketoglutarate + NH3+NADPH glutamate+ NADP+
Asample = Sample A1 - Sample A2
The major source of circulating ammonia is the GI tract. Under normal Asample - Ablank
conditions, ammonia is metabolized to urea by liver enzymes. Several Conc. of = x Standard conc
diseases, both inherited and acquired, cause elevated ammonia Ammonia Astandard - Ablank
(hyperammonemia). The inherited deficiencies of urea cycle enzymes are
the major cause of hyperammonemia in infants. The acquired QUALITY CONTROL
hyperammonemia diseases are caused by liver disease, renal failure, and Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
Reyes syndrome. Elevated ammonia is toxic to the central nervous system. Ammonia Control 4x2 mL ref. 1002240.Control should be assayed at least once a
day. Values obtained should fall within the specified range.
REAGENTS If control values are found outside the defined range, check the instrument,
R 1a NADPH 0,26 mmol/L reagents and technique for problems.
-ketoglutarate 3,88 mmol/L Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
Reagent
R1b 0,15 mol/L
Triethanolamine pH 8,6 REFERENCE VALUES(2)
Buffer
Plasma ammonia: 10 - 47 mol/L
R2 GLDH 1200 U/mL
0.17 - 80 g/dL
0.017 - 0,080 mg/dL
The concentration of Ammonia CAL is stating on These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its own
CAL
the vial label. reference range.
OPTIONAL Ammonia Control 4x2 mL ref. 1002240
PRECAUTIONS Linearity: The method is linear to 1180 mol/L (20 g/mL, 2 mg/dL).
R1b (Sodium hydroxide): Xi, Irritant. R36/38 Irritating to eyes and skin. S26 If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/2 with
In case of contact with eyes, rinse immediately with plenty of water and seek NaCl 9 g/L and multiply the result by 2.
medical advice. S37/39 Wear suitable gloves and eye/face protection. S45 Sensitivity: The minimum detectable concentration with an acceptable level of
In case of accident or if you feel unwell seek medical advice immediately precision was determined as 23,4 mol/L (0.39 g/mL).
R2, CAL (Sodium azide): Xn, Harmful. R22 Harmful if swallowed. R32: Precision:
Contact with acids liberates very toxic gas. S28: After contact with skin wash Intra-assay (n=43) Inter-assay (n=43)
immediately with plenty of water. S45: In case of accident or if you feel Mean (mol/L) 66,86 162,23 403,26 66,86 162,23 403,26
unwell, seek medical advice immediately (show label where possible). SD 2,86 3,16 4,10 4,72 10,49 11,69
PREPARATION CV (%) 4,3 1,9 1,0 7,1 6,5 2,9
- R1a R1b Reconstitute the contents of one vial R1a with 5 mL Buffer R1b. Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
- R2 CAL Ready to use. systematic differences when compared with other commercial reagent (x).
- 20 mL of R1b will be used to dilute R2 in case of using the reagent in The results obtained using 56 samples spanning the range 16.57 to 881 mol/L
automatic analyzers. were the following:
Correlation coefficient (r)2: 1,0.
STORAGE AND STABILITY Regression equation y= 1,02x 7,33.
R1 (reagent reconstituted with buffer) is stable 5 days at 15-25 C or 3 weeks The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
at 2-8 C,stored in the absence of bacterial contamination. The other
components of the kit are stable until the expiration date on the label when INTERFERENCES(3)
stored tightly closed at 2-8C, protected from light and contaminations Haemolysis interferes with the assay.
prevented during their use. Do not use reagents over the expiration date.
ADDITIONAL EQUIPMENT NOTES
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 340 nm. 1. In order to avoid contamination it is recommended to use disposable material.
2. SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
- Thermostatic bath at 37 C ( 0,1C)
Instructions for many of them are available on request.
- General laboratory equipment (Note 1).
BIBLIOGRAPHY
SAMPLES (2) 1. Dewan, J.G., Biochem J., 1938; 32: 1378.
Heparinized plasma or EDTA plasma. 2. Mondzac, A., Ehrlich, G.E., Seegmiller, J.E., J Lab Clin. Med., 1965; 66: 526.
Blood is collected from a stasis-free vein and stored in an ice bath. The 3. Howanowitz, J.H., Howanowitz, P.J., Skrodzki, C.A., Iwanski, J.A: Clin.
plasma is then separated within 30 min. Ammonia assay should be carried Chem., 1984; 30:906.
out immediately. The plasma may be stored for 2 hours at 2-8 C. 4. Neely, W.E., Phillipson, J., Clin Chem, 1988; 34:1868.
5. Pesh-Iman, M., Kumar, S., Willis, C.E., Clin. Chem., 1978; 24:2044.
PROCEDURE
1. Assay conditions: PACKAGING
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340nm Ref: 1001410 R1a: 8 5 mL,, R1b: 1 x 60 mL, R2: 1 x 1 mL, CAL:
*Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm light path Cont.
Constant temperature . . . . . . . . . . . . . . . . . 25/30/37C 1 x 5.5 mL
* Please try not to use flow cell. Exchangeable cuvettes are suggested
to avoid cargover in manual photometers.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water.
BSIS81-I 15/09/15 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
NH3
AMONIACO
Enzimtico-UV
Determinacin cuantitativa de Amoniaco 2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada.
IVD 3. Pipetear en la cubeta:
Blanco RT Estndar Muestra
Conservar a 2-8C Muestra ---- ---- 0,1 mL
Agua destilada 0,1 mL ---- ----
USO PREVISTO
Para determinacin cuantitativa in vitro de Amoniaco en plasma. Estndar ---- 0,1 mL ----
Reactivo (R1) 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
PRINCIPIO DEL METODO(1, 4, 5) 4. Mezclar, y dejar reposar durante 5 min. Leer la absorbancia inicial de la
El amoniaco se combina con -cetoglutarato y NADPH en presencia de muestra y del blanco (A1).
glutamato deshidrogenasa (GLDH) para producir glutamato y NADP+. El 5. Aadir entonces:
correspondiente descenso de absorbancia a 340 nm es porporcional a la GLDH (R2) 0,01 mL 0,01 mL 0,01 mL
concentracin de amoniaco en plasma. 6. Mezclar e incubar durante 5 min. Leer la absorbancia final de la muestra y
GLDH blanco (A2).
-cetoglutarato + NH3+NADPH glutamato+ NADP+
CALCULOS
SIGNIFICADO CLINICO Ablanco = Blanco A1 - Blanco A2
La principal fuente de difusin de amonaco es el tracto gastrointestinal. En Amuestra = Muestra A1 - Muestra A2
condiciones normales, el amoniaco es metabolizado a urea por las enzimas
del hgado. Varias enfermedades, tanto congnitas como adquiridas, Amuestra - Ablanco
causan incrementos de amonaco (hiperamonemia). La causa principal de Conc. de = x Conc. estndar
hiperamonemia en los bebs es la deficiencia hereditaria Amoniaco Aestandar - Ablanco
de enzimas del ciclo de la urea. Las enfermedades de hiperamonemia
adquiridas son causadas por enfermedad heptica, insuficiencia renal, y CONTROL DE CALIDAD
sndorme de Reye. Un nivel alto de amonaco es txico para el sistema Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
nervioso central. Control de Amoniaco 4x2 mL ref.1002240. Se debe ensayar el control al menos
una vez al da. Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia,
REACTIVOS
se debe revisar el instrumento, los reactivos y la tcnica.
NADPH 0,26 mmol/L Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
R 1a
-cetoglutarato 3,88 mmol/L correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
Reactivo
R1b 0,15 mol/L VALORES DE REFERENCIA(2)
Trietanolamina pH 8,6
Tampn Amoniaco en plasma: 10 - 47 mol/L
R2 GLDH 1200 U/mL 0.17 - 80 g/dL
0.017 - 0.080 mg/dL
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca
La concentracin del estndar de amoniaco es la
CAL sus propios valores de referencia.
que viene indicada en la etiqueta del vial.
OPCIONAL Control de Amoniaco 4x2 mL ref.1002240 CARACTERISTICAS DEL METODO
Linealidad: El mtodo es lineal hasta 1180 mol/L (20 g/mL, 2 mg/dL).
PRECAUCIONES
Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir 1/2 con
R1b (Hidrxido de sodio) Xi, Irritante. R36/38: Irrita los ojos y la piel. S26:
ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
En caso de contacto con los ojos lvense inmediata y abundantemente
Sensibilidad: La mnima concentracin detectable con un nivel de precisin
con agua y acdase a un mdico. S37/39: sense guantes adecuados y
aceptable, se determin como 23,4 mol/L (0,39 g/mL).
proteccin para los ojos/la cara. S45: En caso de accidente o malestar,
Precisin:
acdase inmediatamente al mdico.
R2, CAL (Azida sdica) Xn,Nocivo. R22: Nocivo por ingestin. R32: En Intraserie (n=43) Interserie (n=43)
contacto con cidos libera gases muy txicos. S28: En caso de contacto Media (mol/L) 66,86 162,23 403,26 66,86 162,23 403,26
con la piel, lvese inmediata y abundantemente con agua.S45: En caso de SD 2,86 3,16 4,10 4,72 10,49 11,69
accidente o malestar, acdase inmediatamente al mdico. CV (%) 4,3 1,9 1,0 7,1 6,5 2,9
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
PREPARACION significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
- R1a R1b Reconstituir el contenido de un vial de R1a con 5 mL de R1b Los resultados obtenidos con 56 muestras de pacientes con concentraciones de
tampn. 16,57 hasta 881 mol/L fueron los siguientes:
- R2 CAL Listos para su uso. Coeficiente de regresin (r)2: 1,0.
- Para la utilizacin de este reactivo en analizadores automticos, se debe Ecuacin de la recta de regresin: y= 1,02x 7,33.
diluir R2 con 20 mL de R1b. Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
CONSERVACION Y ESTABILIDAD
INTERFERENCIAS(3)
R1 (reactivo reconstituido con el tampn) es estable 5 das a 15-25 C o 3
semanas a 2-8 C, conservado en ausencia de contaminacin bacteriana. La hemlisis interfiere en el ensayo.
El resto de componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los frascos bien NOTAS
cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. No usar 1. A fin de evitar contaminaciones se recomienda utilizar material de plstico
reactivos fuera de la fecha indicada. de un solo uso.
2. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de
MATERIAL ADICIONAL este reactivo en distintos analizadores.
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 340 nm.
- Bao termostatable a 37C ( 0,1C) BIBLIOGRAFIA
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 1. Dewan, J.G., Biochem J., 1938; 32: 1378.
- Equipamiento habitual de laboratorio (Nota 1). 2. Mondzac, A., Ehrlich, G.E., Seegmiller, J.E., J Lab Clin. Med., 1965; 66: 526.
3. Howanowitz, J.H., Howanowitz, P.J., Skrodzki, C.A., Iwanski, J.A: Clin.
MUESTRAS (2) Chem., 1984; 30:906.
Plasma heparinizado o EDTA plasma. 4. Neely, W.E., Phillipson, J., Clin Chem, 1988; 34:1868.
Extraer sangre sin hemlisis y almacenar en bao de hielo. Separar el 5. Pesh-Iman, M., Kumar, S., Willis, C.E., Clin. Chem., 1978; 24:2044.
plasma o suero de los eritrocitos dentro de los 30 minutos despus de la
extraccin. El ensayo de amoniaco se debe realizar inmediatamente. El PRESENTACION
plasma se puede conservar 2 horas a 2-8 C.
Ref: 1001410 R1a: 8 5 mL, R1b: 1 x 60 mL, R2: 1 x 1 mL, CAL:
Cont.
PROCEDIMIENTO 1 x 5.5 mL
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm
*Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm paso de luz
Temperatura constante: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25/30/37C
*Se sugiere usar cubetas desechables en lugar de cubetas de flujo, para
evitar posibles contaminaciones en analizadores manuales.
BSIS81-E 15/09/15 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
UREA -37
Urea 37
o-Phthalaldehyde 37C. Colorimetric
Quantitative determination of urea Blank Standard Sample

IVD R 1 (mL) 1,0 1,0 1,0
Standard(Note 1,3,4) (L) -- 25 --
Store at 2-8C Sample (L) -- -- 25
PRINCIPLE OF THE METHOD 2. Mix, and add:
Urea in the sample reacts with o-fhthalaldehyde in acid medium forming a R 2 (mL) 1,0 1,0 1,0
coloured complex that can be measured by spectrophotometry: 3. Mix and incubate 15 min at 37C.
4. Read the absorbance (A) against the Blank.
H
Urea + o-fhthalaldehyde Isoindoline
Calculations
The intensity of the color formed is proportional to the urea concentration in ( A) Sample ( A) Blank
the sample1. x 50 (Std. conc.)= mg/dL urea in the sample
( A) S tan dard ( A) Blank
CLINICAL SIGNIFICANCE 10 mg/L urea BUN divided by 0,466 = 21 mg/L urea = 0,36 mmol/L urea1.
Urea is the final result of the metabolism of proteins; it is formed in the liver
from their destruction. Conversion factor: mg/dL x 0,1665 = mmol/L.
It can appear the urea elevated in blood (uremia) in: diets with excess of QUALITY CONTROL
proteins, renal diseases, heart failure, gastrointestinal hemorrhage, Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
dehydration or renal obstruction1,4,5. SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should If control values are found outside the defined range, check the instrument,
integrate clinical and other laboratory data. reagents and calibrator for problems.
REAGENTS Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
R1 o-Phthalaldehyde 4,8 mmol/L
REFERENCE VALUES1
Borate solution 87 mmol/L
R2 Serum : 15- 45 mg/dL (2,49-7,49 mmol/L)
Sulphuric acid 3 mol/L Urine : 20 - 35 gr/24 h.
UREA CAL Urea aqueous primary standard 50 mg/dL These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its own
reference range.
PRECAUTION
R2: H314-Causes severe skin burns and eye damage.
Measuring range: From detection limit of 0,70 mg/dL to linearity limit of 200
Follow the precautionary statements given in MSDS and label of the
mg/dL.
product.
If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/2 with
PREPARATION
Precision:
All the reagents are ready to use.
STORAGE AND STABILITY Mean (mg/dL) 43,2 145 41,9 147
All the components of the kit are stable until the expiration date on the label SD 1,51 1,10 0,80 2,83
when stored tightly closed at 2-8C, protected from light and contaminations CV (%) 3,49 0,76 1,92 1,91
prevented during their use. Sensitivity: 1 mg/dL = 0,00459 A.
Do not use reagents over the expiration date. Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
Signs of reagent deterioration: systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
- Presence of particles and turbidity. The results obtained using 50 samples were the following:
- Blank absorbance (A) at 510 nm > 0,20. Correlation coefficient (r): 0,9884
Regression equation: y=0,975x + 0,6
ADDITIONAL EQUIPMENT The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
- Matched cuvettes 1,0 cm light path. INTERFERENCES
- General laboratory equipment(Note 2) It is recommended to use heparin as anticoagulant. Do not use ammonium salts
or fluoride1.
SAMPLES A list of drugs and other interfering substances with urea determination has been
- Serum or heparinized plasma1: Do not use ammonium salts or fluoride as reported by Young et. al2,3.
anticoagulants.
- Urine1: Dilute sample 1/50 in distilled water. Mix. Multiply the results by 50 NOTES
(dilution factor). Preserve urine samples at pH < 4. 1. UREA CAL: Proceed carefully with this product because due its nature it can
Urea is stable at 2-8C for 5 days; get contamined easily.
2. Glassware and distilled water must be free of ammonia and ammonium
PROCEDURE AND CALCULATIONS salts1.
1. Assay conditions: 3. Calibration with the aqueous standard may cause a systematic error in
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . 510 (500-550) nm automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a serum
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm. light path Calibrator.
Temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C 4. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. 5. SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
A) Kinetic method Instructions for many of them are available on request.
BIBLIOGRAPHY
Blank Standard Sample 1. Kaplan A. Urea. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
R 1 (mL) 1,0 1,0 1,0 Toronto. Princeton 1984; 1257-1260 and 437 and 418.
Standard(Note 1,3,4) (L) -- 50 -- 2. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Sample (L) -- -- 50 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
2. Mix, wait 1 minute and add: 4. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
R 2 (mL) 1,0 1,0 1,0 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
3. Mix, incubate at 37C and read the absorbance after 1 minute (A1) and PACKAGING
after 2 minutes (A2).
4. Calculate the increase of the absorbance A= A2 A1 . Ref. 1001323 R1: 1 x 50 mL, R2: 1 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL.
Calculations Ref: 1001325 Cont. R1: 1 x 250 mL, R2: 1 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
( A2 A1 ) Sample ( A2 A1 )Blank x 50 (Std. conc.)= mg/dL urea in the Ref. 1001326 R1: 1 x 100 mL, R2: 1 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
( A2 A1 ) S tan dard ( A2 A1 )Blank
sample
B) End point
BSIS35-I 01/12/15 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
UREA -37
Urea 37
o-Ftalaldehdo 37C. Colorimtrico
Determinacin cuantitativa de urea Clculos

IVD ( A2 A1 ) Muestra ( A2 A1 ) Blanco x 50(Conc. Patrn) = mg/dL de urea en la muestra
( A2 A1 ) Patrn ( A2 A1 ) Blanco
Conservar a 2-8C
B) Punto final
PRINCIPIO DEL MTODO 1. Pipetear en una cubeta:
La urea presente en la muestra reacciona con el o-ftalaldehdo en medio Blanco Muestra
Patrn
cido originando un complejo coloreado que puede cuantificarse
espectrofotomtricamente: R 1 (mL) 1,0 1,0 1,0
Patrn (Nota1,3,4) (L) -- 25 --
H
Urea + o-ftalaldehdo Isoindolina Muestra (L) -- -- 25
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de urea
en la muestra ensayada1. 2. Mezclar y aadir:
R 2 (mL) 1,0 1,0 1,0
SIGNIFICADO CLNICO
La urea es el resultado final del metabolismo de las protenas; se forma en 3. Mezclar e incubar 15 minutos a 37C.
el hgado a partir de su destruccin. 4. Leer la (A) del calibrador y la muestra, frente al Blanco de reactivo.
Puede aparecer la urea elevada en sangre (uremia) en dietas con exceso Clculos
de protenas, enfermedades renales, insuficiencia cardaca, hemorragias ( A) Muestra ( A) Blanco
x 50(Conc. Patrn) = mg/dL de urea en la muestra
gstricas, hipovolemia y obstrucciones renales 1,4,5. ( A) Patrn ( A) Blanco
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
clnicos y de laboratorio. 10 mg/L urea BUN dividido por 0,466 = 21 mg/L de urea = 0,36 mmol/L urea1.
REACTIVOS Factor de conversin: mg/dL x 0,1665 = mmol/L.
R1 o-Ftalaldehdo 4,8 mmol/L CONTROL DE CALIDAD
Solucin borato 87 mmol/L SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
R2
cido sulfrico 3 mol/L Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el
UREA CAL Patrn primario acuoso de Urea 50 mg/dL instrumento, los reactivos y el calibrador.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
PRECAUCIONES correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
R2: H314-Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares VALORES DE REFERENCIA 1
graves. Suero: de 15 a 45 mg/dL (2,49-7,49 mmol/L)
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del Orina: de 20 a 35 gr/24 horas
producto. Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca
sus propios valores de referencia.
PREPARACIN
Todos los reactivos estn listos para su uso. CARACTERSTICAS DEL MTODO
Rango de medida: Desde el lmite de deteccin de 0,70 mg/dL hasta el lmite de
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD linealidad de 200 mg/dL.
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad Si la concentracin es superior al lmite de linealidad, diluir la muestra 1/2 con
indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su contaminacin. No usar Precisin:
reactivos fuera de la fecha indicada. Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Indicadores de deterioro de los reactivos: Media (mg/dL) 43,2 145 41,9 147
- Presencia de partculas y turbidez. SD 1,51 1,10 0,80 2,83
- Absorbancia (A) del Blanco a 510 nm > 0,20. CV (%) 3,49 0,76 1,92 1,91
MATERIAL ADICIONAL Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,00459 A.
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 510 nm. Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
- Equipamiento habitual de laboratorio(Nota 2). Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Coeficiente de correlacin (r): 0,9884
MUESTRAS Ecuacin de la recta de regresin: y=0,975x + 0,6
- Suero o plasma heparinizado1: No usar sales de amonio o fluoruro como Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
anticoagulantes. INTERFERENCIAS
- Orina1: Diluir la muestra al 1/50 en agua destilada. Mezclar. Multiplicar el Como anticoagulante se recomienda la heparina. En ningn caso deben utilizarse
resultado obtenido por 50 (factor de dilucin). Evitar el crecimiento sales de amonio o fluoruro1.
bacteriano, manteniendo el pH < 4. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
La urea es estable 5 das a 2-8C. determinacin de la urea2,3
PROCEDIMIENTO Y CLCULOS NOTAS
1. Condiciones del ensayo: 1. UREA CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable tratarlo con sumo
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . 510 nm (500-550) cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz 2. El material empleado as como el agua destilada que se utilice deben estar libres de
amoniaco y/o sus sales1.
Temperatura : . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C 3. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores sistemticos en mtodos
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. automticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores sricos.
4. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
A) Cintica
5. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de este
1. Pipetear en tubos de ensayo: reactivo en distintos analizadores.
Blanco Patrn Muestra
BIBLIOGRAFA
R 1 (mL) 1,0 1,0 1,0 1. Kaplan A. Urea. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton
Patrn (Nota1,3,4) (L) -- 50 -- 1984; 1257-1260 and 437 and 418.
Muestra (L) -- -- 50 3. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
2. Mezclar e incubar 1 minuto y aadir: 5. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
R 2 (mL) 1,0 1,0 1,0 PRESENTACIN
3. Mezclar, incubar a 37C y leer las absorbancias a 1 minuto (A1) y a
los 2 minutos (A2). Ref. 1001323 R1: 1 x 50 mL, R2: 1 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL.
Cont.
4. Calcular el incremento de la absorbancia A= A2 A1 . Ref: 1001325 R1: 1 x 250 mL, R2: 1 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
Ref. 1001326 R1: 1 x 100 mL, R2: 1 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
BSIS35-E 01/12/15 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN

Insertos de Segundo Ciclo

Transféré par

Informations du document

Titre original

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Insertos de Segundo Ciclo

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

ALBUMIN

Determinacin cuantitativa de albmina CLCULOS

Factor de conversin: g/dL x 144,9 = mol/L

4. Mezclar e incubar 5 min a 37C 10 min a 15-25C. PRESENTACIN

Quantitative determination of albumin CALCULATIONS

4. Mix and incubate for 5 min at 37C or 10 min at 15-25C. PACKAGING

Dtermination quantitative de lalbumine CONTROLE DE QUALITE

Facteur de conversion: g/dL x 144,9 = mol/L

Determinao quantitativa de albumina CONTROLO DE QUALIDADE

Indicadores de deteriorao dos reagentes: INTERFERNCIAS

Factor de converso: g/dL x 144,9 = mol/L

37C A/min x 9690 = U/L LDH

Determinacin cuantitativa de lactato deshidrogenasa CLCULOS

Dtermination quantitative de lactate dshydrognase (LDH) CALCULS

Determinao quantitativa da lactato desidrogenase (LDH) Factores de converso de temperaturas

Armazenar 2-8 C. Temperatura Factor para converter para

CONSERVAO E ESTABILIDADE Sensibilidade analtica: 1 U/L = 0,00009 A/min.

EQUIPAMENTO ADICIONAL INTERFERNCIAS

37 C A/min x 9690 = U/L LDH

Determinacin cuantitativa de aspartato aminotransferasa CLCULOS

MATERIAL ADICIONAL NOTAS

Dtermination quantitative daspartate aminotransfrase CALCULS

Determinao quantitativa da aspartato aminotransferase CLCULOS

Conservar a 2-8C CLCULOS

4. Mix, incubate for 1 minute.

CONSERVAO E ESTABILIDADE INTERFERNCIAS

MATERIAL ADICIONAL BIBLIOGRAFIA

ALP-LQ (Fosfatasa alcalina)

Determinacin cuantitativa de fosfatasa alcalina (FAL) CLCULOS

ALP-LQ (Alkaline phosphatase)

Quantitative determination of alkaline phosphatase (ALP) Temperature conversion factors

Store at 2-8C Assay Conversion factor to

ALP-LQ (phosphatase alcaline)

Dtermination quantitative de phosphatase alcaline (FAL) Facteurs de conversion de tempratures

ALP-LQ (Fosfatasa alcalina)

Determinao quantitativa de fosfatase alcalina (FAL) Factores de converso de temperaturas

Temperatura Factor para converter para

REACTIVOS CARACTERSTICAS DEL MTODO

CONSERVACIN Y ESTABILIDAD INTERFERENCIAS

Conserver 2-8C CALCULS

PRECAUTION Sensibilit analytique: 1 g/dL = 0,0825 A.

Determinao quantitativa de creatinina 7. Misturar e incubar durante 5 minutos.

Quantitative determination of total bilirubin CALCULATIONS:

REAGENTS REFERENCE VALUES

Determinacin cuantitativa de bilirrubina total

Determinao quantitativa de bilirrubina total 9. Calcular o aumento da absorvncia: A= A2A1.

Quantitative determination of urea Blank Standard Sample

Determinacin cuantitativa de urea Clculos

Vous aimerez peut-être aussi