manuscrito aceptado

Ttulo: Un espectrofotmetro telfono inteligente controlado por computadora de mano basado en

tonalidad a la longitud de onda de conversin para las mediciones de absorcin y emisin

molecular

Autor: Helton Jader Souza de Oliveira Pedro Lemos de Almeida Jr. B'
Arbara Ara' Ujo Sampaio Julys Pablo Atayde
Fernandes Osmundo Dantas Pessoa Neto Eduardo Ant onio de
Lima Luciano Farias de de Almeida

PII: S0925-4005 (16) 31191-1

DOI: http://dx.doi.org/doi:10.1016/j.snb.2016.07.149
Referencia: SNB 20647

Aparecer en: Sensors and Actuators B

Fecha de recepcin: 05/03/2016

Fecha revisada: 25-7-2016
Fecha de aceptacin: 26-7-2016

Por favor citar este artculo como: Helton Jader Souza de Oliveira, Pedro Lemos de Almeida, B'
Arbara Ara' Ujo Sampaio, Julys Pablo Atayde Fernandes, Osmundo Dantas Pessoa
Neto, Eduardo Ant onio de Lima, Luciano Farias de de Almeida, Una computadora de mano
espectrofotmetro telfono inteligente controlado basado en tonalidad a la longitud de onda de conversin para las
mediciones de absorcin y emisin molecular, sensores y actuadores B: Producto qumico
http://dx.doi.org/10.1016/j.snb.2016.07.149

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aplican a la revista pertenecen.
Un espectrofotmetro telfono inteligente controlado por computadora de mano basado en tonalidad a

conversin de longitud de onda de absorcin molecular y de emisin

mediciones

Helton Jader Souza de Oliveira un, Pedro Lemos de Almeida Jnior un, Brbara Arajo

Sampaio un, Julys Pablo Atayde Fernandes un, Osmundo Dantas Pessoa Neto un, Eduardo

Antnio de Lima un, Luciano Faras de Almeida un*

un Universidade Federal da Paraba, CCEN, Departamento de Qumica, PO Box 5093,

58051-970 Joo Pessoa, Brasil

* Autor correspondiente.

Tel .: +55 83 32167438; Fax: +55 83 32167438

Direccin de correo electrnico: lucalmeida@gmail.com

1
Aspectos destacados de investigacin

1 diseo optimizado de un bajo costo, espectrmetro de mano, telfono inteligente controlado;

2 Software de fcil uso por escrito para el muestreo y la cuantificacin espectral;

3 modelos norma RGB vector muy lineales y sensibles para la absorcin / emisin;

4 Precisa de calibracin de longitud de onda automtica y fcil hue-longitud de onda

conversin;

5 Especialmente diseado caso fuente de luz para proporcionar dimensiones de palma para

Spectrophone.

Resumen: un diseo mejorado para un espectrmetro a base de telfono inteligente de mano que

Se propone obras en ambos modos de absorcin y emisin. El dispositivo, llamado

Spectrophone, comprende mdulos realizados en MDF, una fuente de luz incorporado diseado

para el modo de absorcin, un DVD para la rejilla de difraccin, y un telfono inteligente para procesar las

datos de imagen adquiridos. Un software hecho en casa fcil de usar descomponer los pxeles de

tomas de imgenes espectrales en sus valores RGB y la tonalidad (H) que son procesadas por una

simple algoritmo desarrollado para convertir valores de H a sus longitudes de onda correspondientes.

seales analticos para el modo de absorcin se proporcionan por una ecuacin emprica basada

en RGB normas vector (|| vrgb ||) tomadas en blanco y despus de la absorcin de luz, mientras

|| || vrgb se utiliza directamente para adquirir seales de emisin. El Spectrophone se aplic a

determinar Fe2 + en muestras de medicamentos y Na + en solucin salina y el agua natural

muestras. No se observaron diferencias estadsticamente significativas en comparacin con

instrumentos comerciales ( = 5%). Las figuras de mrito de la Spectrophone eran muy

bueno, con lmites de cuantificacin de 70 mg L-1 para la absorcin y 60 g de emisin L-1

modos, respectivamente, y una alta linealidad (R2> 0,9995). Alta precisin, simplicidad, una por el usuario

2
aplicacin fcil y de bajo costo hacen de este dispositivo de mano una alternativa atractiva para

las mediciones de absorcin / emisin.

Palabras clave: espectrmetro de mano; telfono inteligente; absorcin molecular; emisin de llama;

modelo de color HSV

3
1. Introduccin

En los pases pobres y emergentes, incluso en el 21 st siglo, la investigacin, didctica y

laboratorios de rutina an tienen problemas debido a los limitados recursos financieros [1]. por

esta razn, existe una tendencia creciente a disear instrumentos sencilla y econmica que

proporcionar informacin qumica cualitativa y cuantitativa fiable. Algunos de estos

instrumentos son utilizados por los ecologistas para controlar los parmetros ambientales [24],

por maestros de las escuelas y universidades [1, 5], y por los mdicos para el anlisis clnico

[6-8]. espectrofotmetros porttiles han sido ampliamente desarrollado y descrito en el

literatura [2, 8-13]. Se han beneficiado de los ltimos avances en ptica, microcontrolador,

electrnica y tecnologas de la imagen, y proporcionar caractersticas tcnicas y

especificaciones comparables a las de los instrumentos comerciales actualmente en uso.

Espectrofotmetros con diferentes niveles de complejidad se han reportado en

literatura. Algunos investigadores han utilizado LEDs y linternas como fuentes de radiacin [35,

9, 10, 14, 15]; [9], [DVD de 16-18], y rejillas de difraccin de CD comerciales [19] como

elementos dispersivos; conjuntos pticos, basados en el uso de la lente [19]; y detectores inusuales tales

como [20-23], webcams de LDR [24-26], o cmaras digitales. Diferentes dispositivos de control tienen

sido tambin explotado tales como PCs [15, 29], microcontroladores [9, 28] y smartphones [30-

33].

El uso de telfonos inteligentes para fines analticos ha sido ampliamente explotados por

los investigadores en los ltimos cinco aos [34]. Su amplia disponibilidad y alta definicin

cmaras CMOS les permiten actuar como detectores fotomtricos para instrumentos porttiles,

particularmente cuando se usa el tratamiento de datos, como en spectrophometers que operan en el visible

regin. espectroscpica de software en tiempo real para el procesamiento de imgenes y la informacin espectral

captura (RSpec [35], Vspec [36], ImageJ [37], etc.) ha sido desarrollado para su uso en

la astronoma, la consecucin de muestreo espectral a travs del anlisis matemtico de los archivos de imagen.

4
Sin embargo, este tipo de software, ya que no es de cdigo abierto, no puede ser integrado con

cdigos de programacin.

La informacin espectral de las imgenes digitales se puede obtener mediante el uso de software

funciones basadas en modelos matemticos de sistemas de color, tales como RGB (rojo, verde,

Azul), HSV (tonalidad, saturacin, valor), CIELab, y CIEXYZ [38]. CIE modelos se basan

en la percepcin del color por el ojo humano y completamente independiente de cualquier dispositivo, medios

de transmisin, o la reproduccin. Siendo elaborado, que son difciles de implementar en

programas. El modelo HSV, ms simple que CIE, se utiliza comnmente para el procesamiento de imgenes

ya que puede representar de manera eficiente color espectral.

Espectrmetros basados en el uso de rejillas de CD / DVD, incluso con operativa y

caractersticas espectrales comparables a los instrumentos comerciales, no han sido explotados para

anlisis cuantitativo. Un primer intento por Lema y compaeros de trabajo [39] produjo una

espectrofotmetro casera para las biociencias de enseanza. Construyeron calibracin

curvas para almidones y protenas, y que se describen todos los procedimientos de anlisis utilizados.

Sin embargo, hay un proceso de validacin de los resultados o se presentaron debido a la semi-cuantitativa

propsito del instrumento.

Nuestro dispositivo, denominado aqu como Spectrophone tiene su absorcin y emisin

modos integrados con una aplicacin de telfono inteligente para adquirir imgenes, espectros y calcular

cuantificar analitos. No requiere de instrumentos complejos o profesionales con experiencia.

La fiabilidad del Spectrophone se evalu mediante la cuantificacin de hierro en poli-vitaminas

y formulaciones farmacuticas poli-mineral (modo de absorcin), y de sodio

cuantificacin en solucin salina y el agua natural (modo de emisin). Por ltimo, comparamos nuestra

resultados con los de los instrumentos comerciales.

2. Experimental

5
2.1. Reactivos y soluciones

Todos los reactivos fueron de grado analtico y recin destilada. agua desionizada (> 18

mO cm -1) se utiliz para preparar todas las soluciones.

A 125,0 mg L -1 Fe 2+ solucin madre se prepar disolviendo primero 0,1558 g de

FeSO 4. 7H 2 O (VETEC Qumica Fina, 99,0%, PA ACS) en 2,5 ml de H 2 ASI QUE 4

(Microqumica, 98,0%, PA ACS) y luego diluyendo a 250 ml. Las soluciones de trabajo

se prepararon con diluciones adecuadas de la solucin madre. El tampn de acetato (pH = 5,5)

se prepar disolviendo 27,22 g de acetato de sodio (C 2 MARIDO 3 NaO 2. 3H 2 O, VETEC Qumica

Fina, 99,0% PA ACS) en un matraz aforado de 100,0 ml. Como reactivo cromognico, una

0,25% (w / v) de 1,10-fenantrolina (C 12 MARIDO 8 norte 2. MARIDO 2 O, VETEC Qumica Fina, 99,0%, PA)

Se prepar una solucin. A estandarizada 0,40 mol L -1 permanganato de potasio (KMnO 4,

Sigma Aldrich,> 99,0%, se utiliz) solucin PA para los ensayos de calibracin.

Las soluciones de Na + de trabajo (1.0 - 9,0 mg L- 1) se prepararon mediante diluciones adecuadas

de un 1,000 mg L -1 solucin preparada a partir de una ampolla de Titrisol (Merck). Las muestras de

multivitaminas, jarabes y sueros fisiolgicos de diferentes proveedores fueron adquiridos

de las farmacias locales y pretratada a diluciones adecuadas. muestras de agua naturales,

recogida de un ro local (tres sitios), y a partir de dos presas, se filtraron antes de la

anlisis. Como instrumentos de referencia, un espectrofotmetro UV-Vis (modelo 8453, Agilent),

y se utiliz un fotmetro de llama (modelo NK-2004, Digimed). fue operado Este ltimo

segn las recomendaciones del fabricante para la mxima sensibilidad con una

llama de aire-butano.

2.2. Los pasos de montaje para la construccin de la Spectrophone

Diseo de los mdulos Spectrophone y una fotografa del sistema se muestran

en la Figura 1. Con excepcin de los telfonos inteligentes, las otras partes se ensamblan a partir de

6
materiales simple coste y baja. El Spectrophone fue hecho de una hoja de MDF

(Fibra de madera de densidad media) con una anchura de 3 mm, un material fcilmente mecanizable

con alta resistencia mecnica y de bajo peso. Todos los mdulos se han diseado como

casos acoplables. Todas las piezas de MDF se fijaron con cola de madera.

INSERT FIGURA 1

Las dimensiones crticas son: el ngulo rebanada DVD () entre los mdulos A y B;

anchura de la ranura (Fig 1b.); y la trayectoria ptica de fuente de luz. Para ms detalles sobre la

construccin de los mdulos, consulte el material complementario. por

conveniencia, las secciones mtodo de calibracin de longitud de onda Y El funcionamiento de la

Spectrophone Tambin se describieron en el material complementario.

2.3. software de control

El espectrofotmetro es controlado por el software escrito en ActionScript 3.0 y

exportado como un Android TM cdigo de la aplicacin (fuente describe en suplementaria

materiales), desarrollado para establecer el modo de funcionamiento de Spectrophone y tratamiento de datos para

las imagenes. El software accede a las unidades internas de la cmara del smartphone a

adquirir imgenes digitales. Una regin predefinida de cada imagen se recorta y se almacena como

un archivo de formato no comprimido bmp. Esta regin se llama de aqu en adelante ROI (Regin de

Inters) y se utiliza para construir los espectros. Despus, todos los pxeles de la ROI son

escaneada (columna por columna), sus propiedades RGB se extraen y luego se almacena en un 60

x 695 matriz (C1), un total de 41.700 pxeles con 24 bits por pxel (8 bits para el color

canal). Una matriz fila de 695 elementos (L1), cuyos elementos son la media R, G y B

7
valores, se construye a partir C1. Los valores promedio de tono ( ) para todas las 695 columnas en L1

se calculan de acuerdo con la Ecuacin 1 [40]:

(( ) )
Eq. 1
( )

{ ( )

La expresin es vlida cuando coordenadas del espacio RGB estn en el intervalo [0, 1] con

el valor ms alto de R, G o B asignado a una variable llamada MAX y el mnimo

valor a una variable llamada MIN. Posteriormente, el clculo de valores correspondientes a

cada se lleva a cabo segn la ecuacin emprica 2:

[ / ] Eq. 2

Dnde es la tonalidad media del i-simo elemento en la matriz fila (L1), Max es el

mxima longitud de onda del rango visible, es la gama de longitud de onda (dada por

)y es la gama de valores de tono correspondientes a los colores espectrales. Esta

ecuacin emprica se basa en un modelo de color HSV, con sus parmetros (excepto )

obtenido por un proceso de calibracin de longitud de onda (ver material complementario). Ya que

la calibracin es exclusivo de la cmara incorporada, se recomienda que cada telfono inteligente

la calibracin se lleva a cabo al cambiar los telfonos inteligentes.

Por ltimo, una matriz ltima fila (L2), construido para almacenar los datos de longitud de onda, suministre

el eje de ordenadas de un espectro. En este trabajo, = 200 nm; = 630 nm y =

270.

8
 Para el modo de emisin, la respuesta analtica est dada por el vector medio

norma, calculado para cada columna de acuerdo con la Ecuacin 3 [41]:

Eq. 3

dnde , y son la media de la , y , Respectivamente.

Para el clculo de la absorbancia, se puede afirmar que es directamente proporcional

a la potencia radiante de luz que pasa a travs de un medio absorbente, y es

proporcional a la potencia del haz emergente de las lmparas. Por lo tanto una ecuacin, homloga a

La ley de Beer-Lambert por absorbancia se puede escribir como:

Eq. 4

Dnde es la norma vector RGB del color de la radiacin atenuada

que emerge del absorbente, y es la norma del vector de la RBG no

radiacin de color atenuada a partir de la fuente de luz. Dado que las normas de vectores se basan en la plaza

las variables de la raz (vase la Ec. 3), una relacin lineal entre basado en RGB (absorbancia )y

concentracin puede ser obtenida mediante la aplicacin de una raz cuadrada en la ecuacin. 4, obteniendo de este modo:

Eq. 5

Esta ecuacin tiene una base emprica, ya que no se sabe derivable

correlacin matemtica entre y la concentracin del analito (C).

3. Resultados y discusin

9
3.1. Las dimensiones crticas

Las distancias y los ngulos se las variables optimizadas comnmente en los sistemas pticos. En

este trabajo, estos fueron el punto de partida. Para los ensayos iniciales, un blanco ultra-brillante LED

se us como la fuente de radiacin. La longitud de la trayectoria de la luz de las lmparas a la

rebanada de DVD debe ser ni demasiado larga, debido a las prdidas significativas en la potencia radiante, ni demasiado

corta debido a la saturacin de los sensores de la cmara CMOS. Por lo tanto, una serie de pruebas dio lugar a

una longitud ptima de 19,5 cm, representado por la suma de 5,5 cm (Fig. 1a), adems de 14.0 cm

(Fig. 1c). Esta longitud no depende del telfono, y no ponen en peligro la mecnica

estabilidad de la estructura espectrofotmetro.

Las pistas de grabacin en la rebanada de DVD deben estar alineados con cuidado (paralelo) con

la direccin de la hendidura, produciendo una imagen espectral de modo que cada columna de pxeles de la

ROI slo tienen un valor de tono, y en consecuencia slo una longitud de onda correspondiente.

Esta es una condicin fundamental para el clculo de precisa.

La rejilla se coloc en un ngulo exacto de modo que el primer orden difractado vigas

salido perpendicular a la rodaja de DVD. Con theta = 45 la distribucin del color en el

imgenes espectrales es homognea, muy cerca de que en un modelo HSV cnica, e incluso en

un diagrama de cromaticidad. clculos de longitud de onda en base a los valores de tono pueden ser tanto

realizado con alta precisin. la difraccin de primer orden asegura una alta sensibilidad y

rango dinmico para anlisis cuantitativos en ambos modos de emisin / absorcin, ya

ms altas intensidades de color mayor rendimiento valores.

La anchura de la hendidura debe ser lo suficientemente ancho para proporcionar una sensibilidad adecuada; para

mediciones de emisiones donde emisin desde el fotmetro de llama tiene una baja radiante

poder. Para hendiduras <0,5 mm, los valores de LOD y LOQ aumentar significativamente (6 veces) como

hace el rango dinmico <3,0 mg L- 1. resolucin espectral y cuantitativa satisfactoria

datos con caractersticas adecuadas se alcanzaron usando una anchura de rendija de 0,8 mm.

10
3.2. Estudio de la Fuente REM para el modo de absorcin

En el Mdulo C (Fig. 1c), utilizado para mediciones de absorcin molecular, la

fuente de radiacin muestra un papel clave en la estabilidad, de alta intensidad, y continuo

espectro de la seal emitida. Adems, con el fin de asegurar la portabilidad la fuente

debe tener el consumo de energa muy bajo. De esta manera se llev a cabo una investigacin de

Fuentes de radiacin adecuadas para cumplir con estos requisitos. En las siguientes figuras la

curvas de estabilidad (2f a 2h) se muestran junto con las imgenes espectrales de LEDs blancos y

lmparas incandescentes (2a a 2e).

INSERT FIGURA 2

En la Figura 2a, utilizando un solo LED, observamos supresin del color y la frontera

curvaturas en la imagen difractada, principalmente en el cian y regiones verde y rojo. Amarillo

y naranja se suprime completamente, as, y sus longitudes de onda correspondientes

que faltaban en el espectro. Estos problemas causan prdidas en la precisin y dinmica

gama afectando el anlisis cuantitativo en ciertas regiones del espectro (cian y

amarillo).

Un LED es una fuente puntual de luz cuya haces emitidos no son colimada, es decir, el

vigas golpean las pistas de DVD en ngulos de incidencia diferente de la normal del DVD

avin. Como consecuencia, las interacciones destructiva entre haces no paralelas afectan a la

patrn de interferencia, y por lo tanto la distribucin del color en la imagen espectral. Evitar

este problema, hemos probado una fuente de radiacin array LED blanco. Su imagen espectral se muestra

en la Figura 2b. De hecho, la imagen espectral presenta el comportamiento esperado de un continuo

fuente de luz, con haces paralelos sorprendentes la cuadrcula. Espectro de emisin desde el blanco

11
matriz de LED, sin embargo, muestra muy baja eficiencia luminosa (cerca de 480 - 510 nm)

que afecta fuertemente la gama dinmica en esta regin.

Tambin se investig el uso de lmparas incandescentes, ya que estas lmparas tienen

Los espectros de radiacin uniforme en el rango visible. Sin embargo, estas lmparas tienen mala energa

la eficiencia, ya que gran parte de la energa consumida se disipa en forma de calor. An as, con slo una

9,0 V lmpara (Fig. 2c) del espectro present mayor intensidad de la seal en comparacin con el

array LED blanco. Sin embargo, la salida de la lmpara era de slo 2-3 horas cuando se suministra a 9,0 V,

haciendo su uso inviable. Adems, las regiones de color secundaria (amarillo y cian)

dado muy baja valores, la disminucin de la relacin seal a ruido (S / N) en estos

regiones, y causando la prdida de LOL. Dos lmparas en un circuito en serie accionados a 9,0 V (Fig. 2D)

producido una potencia de radiacin ms intensa de una lmpara. Los mejores resultados, sin embargo, eran

obtenido con dos lmparas en un circuito en paralelo, con un suministro de 5.5V (Fig. 2e).

En cuanto a la estabilidad ambos LED y lmparas incandescentes son buenos candidatos para

utilizar como fuentes de radiacin. El uso de LEDs se descart por las razones discutidas

encima. Figuras 2f a 2h curvas de estabilidad espectculo seal (a 500 nm) para LEDs (Fig. 2F) y

(Para los fines de comparacin) Lmparas (Figs. 2g y 2h). Como era de esperar, los LED rindieron

seales altamente estables en contraste con la seal de ruido de la utilizacin de una lmpara alimentada por energa

con 9,0 V (Fig. 2h), que tambin tena significativa deriva negativa. El de dos lmparas en paralelo

configuracin (Fig. 2 g) result ser la mejor opcin para la estabilidad a pesar de una ligeramente inferior

magnitud que con LEDs.

3.3. tratamiento de imgenes espectrales

El primer tratamiento aplicado a las imgenes espectrales fue la seleccin del retorno de la inversin a

recortar desde cada imagen capturada. El ROI generada era una de dos dimensiones

matriz de pxeles cuyas coordenadas fueron los mismos para todos los fotogramas capturados, ya que este

12
regin se define slo una vez. El principal criterio para la seleccin del retorno de la inversin se basa en

inspeccin visual de la uniformidad de distribucin de color sobre la imagen espectral, un atributo

generalmente conocido en la regin central de la imagen (Fig. 3a). Las aletas de difusin en el interior

Mdulo C juegan un papel importante para la mejora de la uniformidad de distribucin color, por

la ampliacin de la zona de color de las imgenes espectrales. Con el uso de estas aletas que

logrado columnas con 60 pixeles (Fig. 3a), lo suficiente como para lograr una con varios

grados de libertad, lo que aumenta la precisin de la tonalidad a la conversin . Sin el

aletas de difusin, el muestreo espectral fue fuertemente afectada por pixel heterognea

distribucin en la ROI (Fig. 3b), y el promedio de los valores RGB fue ms susceptible

a los pxeles no esenciales (picos debido nicamente a fluctuaciones estadsticas en los sensores de imagen)

desde la cmara CMOS.

INSERT FIGURA 3

La luz emitida por las lmparas se difundi en el Mdulo C, pasado a travs de las ranuras

de las aletas, y los procesos de interferencia se sometieron, haciendo que el haz paralelo resultante como

se golpe la rebanada de DVD. Como consecuencia, la fuente de radiacin punto actu como

fuente continua, probablemente debido al principio de Huygens-Fresnel. Este principio establece

que cada punto de un frente de onda puede considerarse como una nueva fuente de adelante-dirigida

ondas esfricas [42].

Los filtros pticos estn presentes en los telfonos inteligentes y cmaras digitales para la imagen

mejoras, y algunos de estos filtros bloquean la radiacin ultravioleta e infrarroja, como

se ilustra en la Figura 4b (en lnea recta). El espectro de transmitancia para un filtro de una

webcam de alta definicin (Multilaser 16MP, modelo Wc044), se muestra en la Figura 4b (lnea discontinua). los

filtro es similar a la utilizada en la cmara del smartphone utilizado por nuestro equipo. los

13
gama transmitancia alcanzado para el filtro era 390 a 630 nm, que caracteriza como una

filtro de paso de banda para longitudes de onda correspondientes a la regin visible. El DVD rejilla

tambin tiene una absorcin significativa en la regin de 500 a 650 nm, debido a que el colorante de grabacin

(Fig. 4b). Esta absorcin caus una ligera disminucin de la valores, predominantemente en

la regin amarilla a naranja. Es posible verificar la prdida de seal (cerca de 580 nm) con

el perfil presentado en la Figura 4a (lnea discontinua). Es el resultado de la combinacin de

histogramas para la R, G y canales B (lneas rectas).

INSERT FIGURA 4

A partir de los histogramas (Fig. 4a) que tenga en cuenta una limitacin para la resolucin de longitudes de onda en

los mrgenes, 400-420 nm y 650-670 nm. Los bajos niveles de iluminacin por debajo de 420 nm y

por encima de 660 nm aumentar la poblacin de pxeles oscuros y por consiguiente bajo rendimiento

valores, como puede verse en la imagen espectral por debajo de los histogramas en la Figura 4a en.

pxeles oscuros producen valores RGB bajos y por consiguiente baja valores. Adems de

esto, los pxeles estn distribuidos al azar, puesto que el dispositivo CMOS no es capaz de bien

distinguir sus propiedades de color. Como resultado, la conversin de longitud de onda y el clculo de

v || RGB || valores bajos rendimientos exactitud o imprecisin, lo que limita el rango espectral. los

longitud de onda del rango dinmico se estim como [430 nm a 630 nm], lo que confirma la

ceguera relativa de la cmara a longitudes de onda inferiores a 400 nm y mayor que 640

nm, como se muestra en la Figura 4b. Esta gama de longitud de onda, aunque estrecho para absorbancia

mediciones, es bien aplicable para varios tipos de anlisis. Spectrophone es

esencialmente una prueba de concepto; un rango dinmico ms amplio podra lograrse

desactivar el filtro UV, o mediante el uso de un modelo diferente de telfono o una cmara.

14
 Todos los datos de los espectros analizados hasta el momento apoyan la eleccin de para el

variable cuantitativa, tal como se propone por primera vez por Lyra y compaeros de trabajo [41]. Debido a

su naturaleza tri-estmulo, proporciona respuesta de alta magnitud sobre la dinmica

gama de longitud de onda y result ser menos susceptible al ruido de imagen [43].

3.2. conversin de longitud de onda / calibracin

El rendimiento del mtodo de calibracin de longitud de onda se evalu para los espectros

obtenido en los modos de emisin y absorcin a travs de ensayos cualitativos utilizando 5,0 mg L- 1

mg de sodio y 23.0 L- 1 soluciones de permanganato de potasio (Fig. 5). el Spectrophone

fue capaz de resolver las lneas D caracterstica de sodio (589,0 y 589,6 nm) como se muestra en

La Figura 5a. el D 2 lnea fue encontrado en 589,2 0,2 nm (n = 5), y la D 1 lnea como una

hombro a 589,7 0,2 (n = 5) con anchura total a la mitad del mximo (FWHM) de los picos

de 0,9 0,2 nm (n = 5).

INSERT FIGURA 5

En el espectro de la solucin de permanganato (Fig. 5b), el mximo de absorcin

longitud de onda era de 524,8 0,6 nm en comparacin con 525,0 0,5 nm obtienen cuando se utiliza el

UV-Vis. Los picos restantes son concordantes con los de la

instrumento de referencia, con notable similitud espectral.

Todos los resultados mostraron que la estrategia de calibracin adoptada fue capaz de corregir ligera

distorsiones en H a lambda conversin para el clculo de longitud de onda, ya que los errores relativos para

estimaciones de longitud de onda eran siempre cerca de 0.1%.

3.3. Evaluacin de la Spectrophone

15
 El rendimiento analtico de la Spectrophone se evalu mediante la cuantificacin

de Fe 2+ en polivitamnicas y formulaciones farmacuticas polimineral (modo de absorcin

muestras), y de sodio en solucin salina y el agua natural (muestras modo de emisin). Todos los resultados

se compararon con los obtenidos de los instrumentos comerciales. todas las cuantificaciones

se llevaron a cabo utilizando la tcnica de curva de calibracin. El Spectrophone fue utilizado solamente

para la cuantificacin (en el modo de emisin) de Na +, porque la emisin de Ca + y K + principal

lneas son a 422.7 nm y 766.5 y 769.9 nm (K doblete), en las regiones de la cmara ceguera,

y no tienen seales analticas apreciables.

Para determinar de hierro en muestras de medicamentos utilizando el Spectrophone (en la absorcin

modo), la ecuacin de regresin era = 0,02125 + 0,2028 ( a 515 nm), donde es

la respuesta analtica y es la Fe 2+ concentracin (mg L -1). La correlacin lineal

coeficiente (r) era 0,9995 (n = 5) en el intervalo de entre 0,5 y 6,0 g L -1 ( 0.5, 1.0, 2.0,

4,0 y 6,0 g L- 1). Por la misma determinacin, tambin a 515 nm, utilizando el comercial

instrumento, la ecuacin de regresin era = - 0,0008 + 0,1848 . El lineal al cuadrado

coeficiente de correlacin era 0,9998 (n = 5) en el mismo rango.

Para determinar de sodio en muestras salinas utilizando el Spectrophone (en emisin

modo), la ecuacin de regresin era = 0,0083 + 0,0823 , dnde es el

respuesta analtica y es la concentracin de Na + (g L -1). La correlacin lineal

coeficiente (r) era 0,9994 (n = 5) en el intervalo entre 0,5 a 4,0 g L -1 ( 0.5, 1.0, 1.5,

3,0 y 4,0 g L- 1). Por la misma determinacin de utilizar el instrumento comercial, el

ecuacin de regresin era = 0.1148 + 0.2198 y el coeficiente de correlacin fue

0,9994 (n = 5) en el mismo rango. Todas las curvas de anlisis fueron estadsticamente validados por

anlisis de varianza (ANOVA), sin mostrar falta significativa de ajuste para el propuesto

modelos en un nivel de confianza del 95%.

diecisis
 Los lmites de deteccin (LOD), de cuantificacin (LOQ) y la linealidad (LOL) para

tanto se estimaron los instrumentos Spectrophone y comerciales sobre la base de los criterios

establecido por la Unin Internacional de Qumica Pura y Aplicada (IUPAC) [44].

LOD se evalu como 3 veces la desviacin estndar de la medicin en blanco, LOQ

como 10 veces la desviacin estndar de la medida en blanco y el de la LOL

curvas verificadas por la falta de prueba de ajuste. estudios LOL se llevaron a cabo en los intervalos

entre 0,5 a 15 mg L- 1 para el Fe 2 + ( 0,5, 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, 6,0, 8,0, 10,0, 12,0 y 15,0 g

L- 1), y de 0,5 a 10 mg L- 1 para Na + (0,5, 1,0, 1,5, 3,0, 4,0, 6,0, 8,0 y 10,0 g L- 1). Mesa

1 presenta los valores de LOD, LOQ y LOL.

INSERTAR TABLA 1

Comparando el Spectrophone y el instrumento comercial, el LD y LC

valores no fueron significativamente diferentes para la determinacin de Fe 2+. Esto se debe a la

alta estabilidad de las fuentes de luz en ambos instrumentos, que proporciona desviaciones bajas en

seales en blanco. Las diferencias en LOL para mediciones de absorcin estn directamente relacionados

a las caractersticas del detector intrnsecas, el procesamiento de datos, y principalmente a la potencia radiante

de la fuente de luz. En el caso de la Spectrophone, su fuente de luz emite mucho menos

energa radiante que el 8453 espectrofotmetro fuente de lmpara halgena de HP; la disminucin de la

gama de colores de las imgenes espectrales captadas por la cmara CMOS. alta luz

absorcin a una longitud de onda dada promueve un cambio de color para bajar los valores RGB, y

aumenta la cantidad de pxeles espurias, haciendo que el RGB valores ms grandes de lo que deberan

ser, afectando directamente el vector de norma RGB, y disminuyendo de este modo el rango dinmico de

la Spectrophone. En cuanto a las mediciones de emisiones, la LOD, LOQ, y LOL eran

claramente diferente para el Spectrophone y fotmetro de llama, que es fcil de explicar.

Incluso en las condiciones operativas muy controladas del instrumento comercial,

17
debido a su naturaleza, la llama proporciona un entorno ruidoso. Este ruido se amplifica de forma conjunta

con la seal de emisin y, en consecuencia resulta en variaciones significativas en el

lnea de base y en tanto el LD y LC. En el modo de emisin, la misma llama se utiliz para

tanto el fotmetro de llama y el Spectrophone, pero para el Spectrophone, la llama de

ruido no afecta en gran medida la capacidad de repeticin de la valores. cada emisin

la medicin se realiza usando una imagen espectral generada a partir de una toma de fotos de la

llama de tal manera que RGB los valores de los pxeles son fijos. El valor LOL para la propuesta

instrumento fue menor que la obtenida a partir del fotmetro comercial porque el

potencia radiante de alcanzar el fotmetro detector de llama fue mayor en comparacin con el

cantidad de luz detectada por el CMOS de la cmara. La otra fuente de prdida de luz es

relacionados con la absorcin por la rebanada DVD en la regin entre 500 - 600 nm (ver Fig. 4).

Esto afecta en gran medida la gama de valores. Adems, para las concentraciones de Na +

superior a 5,0 mg L- 1, Se observ la saturacin de color amarillo, haciendo que la valores

variar de forma no lineal con las concentraciones.

La Tabla 2 presenta los resultados de ambos el Spectrophone y la referencia

instrumento de Fe 2+ determinaciones en polivitamnicas y farmacutica polimineral

formulaciones. No se observaron diferencias estadsticamente significativas entre los resultados

para la mayora de las muestras a un nivel de confianza de 95% cuando se aplica el emparejado t- prueba. los

desviacin tpica relativa global (RSD) fue de menos de 0,30 para el Spectrophone y

0,34%, para el instrumento comercial, a partir de cinco repeticiones.

INSERTAR TABLA 2

La precisin global observa al comparar los resultados entre el

de referencia y el instrumento propuesto revelaron la conformidad con la Ley de Beer al utilizar

18
la ecuacin propuesta por absorbancia. La Figura 6 muestra un conjunto de espectros de emisin obtenidos

de diferentes concentraciones de sodio utilizando Spectrophone en el modo de emisin.

FIGURA INSERT 6

La Tabla 3 muestra los resultados para el Spectrophone y de la referencia

instrumento para la determinacin de Na + en soluciones salinas y las muestras de agua natural.

INSERTAR TABLA 3

Cuando se aplica el emparejado t- prueba, no hay diferencias estadsticamente significativas fueron

observado en los resultados para la mayora de las muestras a un nivel de confianza de 95%. El general

desviacin estndar relativa (RSD) fue de menos de 3,4 y 2,6%, para el Spectrophone y

el instrumento comercial, respectivamente, utilizando cinco repeticiones de la prueba.

4. Conclusiones

Un simple y porttil espectrofotmetro de modo dual diseado para utilizar un DVD

rebanada como la rejilla de difraccin, las lmparas incandescentes de mini y un telfono inteligente fue desarrollado

y probado. Las principales ventajas de la espectrofotmetro son su facilidad de construccin,

bajo costo (<US $ 20.00, para ms detalles ver material complementario), automtica

de calibracin para el muestreo espectral, la portabilidad, la facilidad de mantenimiento, y de alta

reproducibilidad de las mediciones de absorbancia y de emisin de llama. En cuanto a las desventajas,

el modo de emisin slo funciona con el sodio, y el modo de absorcin tiene una baja energa

autonoma, a unos 105 minutos. Observamos que el modo de emisin no depende de la

uso de bateras, siendo limitado slo por la carga del telfono inteligente, y la emisin

19
mediciones se llevan a cabo slo parcialmente, ya que el Spectrophone no tiene una

/ Sistema de quemador nebulizador acoplado. En teora, cualquier fotmetro de llama comercial o incluso una

quemador Bunsen [45] se podra utilizar para mediciones de emisiones.

El uso de la norma del vector RGB es un parmetro basado en el color cuantitativa fiable

en ambos modos de funcionamiento. Adems, el modelo propuesto absorbancia basa en

( ) presenta una alta correlacin lineal con la concentracin de analito como se ha demostrado

a travs de anlisis emprico. Tanto el mtodo de calibracin de longitud de onda automtico basado en

valores de tono y la ecuacin de conversin de H a lambda acuerdo satisfactorio amueblado

entre formas de los picos de la Spectrophone y el instrumento comercial probado. Alguna

usuario inexperto puede operar fcilmente Spectrophone, ya que su aplicacin es el usuario

amistoso.

Los resultados aqu reportados demuestran que la Spectrophone siempre fiable

resultados comparables a los obtenidos de los instrumentos comerciales que son miles

de veces ms caro. El diseo Spectrophone propuesto es un instrumento adecuado

alternativa para muchas medidas espectrofotomtricas.

Expresiones de gratitud

Los autores agradecen las becas de los organismos de financiacin brasileas

CAPES y CNPq (Proceso 448246 / 2014-7). La versin en Ingls de este texto ha sido

revisado por Sidney Pratt, Canad, MAT (The Johns Hopkins University), RSAdip

(TEFL, Universidad de Cambridge).

20
vitae

Helton Jader Souza de Oliveira, de postgrado de la Universidad Federal de Paraba, Joo

Pessoa, Brasil. Sus intereses actuales son instrumentos analticos y tecnologa de la imagen.

Pedro Lemos de Almeida Jnior, de postgrado de la Universidad Federal de Paraba,

Joo Pessoa, Brasil. Su tema de tesis doctoral se centra en la microfludica y de imagen

tecnologa.

Brbara Arajo Sampaio tiene una licenciatura en ingeniera qumica en

Universidad Federal de Paraba, Joo Pessoa, Brasil, en 2014. Sus intereses actuales son

automatizacin y control de procesos.

Julys Pablo Atayde Fernandes de postgrado de la Universidad Federal de Paraba, Joo

Pessoa, Brasil. Su tema de tesis doctoral se centra en los instrumentos porttiles y

La tecnologa de imagen.

Osmundo Dantas Pessoa Neto sostiene su doctorado de la Universidad Federal de

Paraba, Joo Pessoa, Brasil (2013). Sus intereses actuales son la seguridad alimentaria, la fluorescencia

y microsistemas de anlisis.

Eduardo Antonio de Lima en los estudios de postgrado en la Universidad Federal de Paraba,

Joo Pessoa, Brasil. Sus intereses actuales son microsistemas analticos y de imagen

tecnologa.

Luciano Faras de Almeida ha ocupado un puesto como profesor asociado en la

Universidad Federal de Paraba, Joo Pessoa, Brasil, desde 2010. Sus intereses actuales son

instrumentos porttiles, microsistemas de anlisis y de anlisis espectrofotomtrico.

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27
Los pies de figura

Figura 1. Vista superior y dimensiones (expresado en cm) de los casos acoplables y

mdulos ensamblados para el modo de emisin (d), el modo de absorcin (e) y una foto de la

Spectrophone (f). a) Mdulo A comprende un soporte hueco MDF fijado a una

caso del smartphone comercial; b) Mdulo B incluye la rodaja de DVD (con 45 entre

el telfono inteligente y mdulos), el receptculo para la cubeta y la ranura; c) Mdulo C

incluye las aletas de difusin (centro), el posicionamiento de las lmparas (a la derecha), y de la batera.

Figura 2. Disparos de las regiones recortadas de las imgenes espectrales obtenidos a partir de: a) Blanco

LED; b) array LED blanco; c) de la lmpara incandescente 1 (9,0 V); d) 2 lmparas incandescentes en

serie (9,0 V); e) 2 lmparas incandescentes en paralelo (5,5 V). estabilidad de la seal de ms de 60

minutos; f) array LED blanco; g) 2 lmparas incandescentes en paralelo (5.5V); y h) 1

lmpara incandescente (9,0 V).

Figura 3. ROIs de imgenes espectrales obtenidos con a) uso de aletas de difusin con 2

lmparas incandescentes en paralelo (5,5 V); y b) imagen obtenida a partir LED blanco sin

uso de aletas de difusin.

Figura 4. a) Los histogramas de los valores R (lnea roja), G (lnea verde), B (lnea azul) y

resultante espectro (lnea discontinua). b) espectro de transmitancia de paso de banda UV

filtro, por la cmara digital (lnea fija), y una rebanada de DVD (lnea discontinua).

28
Figura 5. resultados de la calibracin de longitud de onda. a) espectro de emisin de 5,0 mg de sodio L- 1;

y b) espectro de absorbancia de 23,0 mg L- 1 permanganato de potasio obtiene a partir de HP

espectrofotmetro (lnea fija), y Spectrophone (lnea discontinua).

La Figura 6. espectros de emisin de un conjunto de cinco soluciones de prueba de sodio en un intervalo de 0,5

a 4,0 mg L- 1. imgenes espectrales de la seal de sodio se muestran debajo de cada

pico correspondiente.

29
Mesas

Tabla 1. Los valores de LOD, LOQ y LOL obtenida de Spectrophone en su absorcin

y los modos de emisin y de los instrumentos comerciales.

LOD LOQ LOL

analito Modo Instrumento
(10- 2 mg L- 1) (10- 2 mg L- 1) (Mg L- 1)

Fe (II) HP absorcin 2 8 10.0

Spectrophone 2 7 7.0

4 14 8.0
Sodio Emisin Digimed
Spectrophone 2 6 5.0

30
Tabla 2. Resultados para Fe + 2 determinacin en Polivitamnico y polimineral

formulaciones farmacuticas utilizando el Spectrophone y HP 8453 comercial

espectrofotmetro. Las incertidumbres se estimaron en nivel de confianza del 95% (n = 5).

Las muestras * Los valores estimados (mg L -1)

HP Spectrophone

01 3,60 0,01 3,59 0,01

02 4,76 0,01 4,80 0,02

03 4,08 0,02 4,09 0,01

04 3,49 0,01 3,49 0,01

05 2,93 0,03 2,97 0,02

06 4,07 0,01 4,10 0,01

07 3,63 0,02 3,66 0,01

RSD 0,30% 0,34%

* Los nmeros representan diferentes fuentes de muestras.

31
Tabla 3. Resultados para las determinaciones de Na + en las muestras de solucin salina y el agua natural utilizando

Spectrophone y Digimed espectrmetro comercial. Las incertidumbres se estimaron en

nivel de confianza del 95% (n = 5).

Los valores estimados (mg L -1)

Las muestras *
Digimed Spectrophone

solucin

salina 01 3,16 0,12 3.17 0.10

02 3,03 0,10 3,03 0,05
Agua natural
01 1,32 0,17 1,30 0,07
02 0,78 0,03 0,74 0,03
03 1,38 0,03 1,32 0,02
04 2,01 0,07 1,95 0,04
05 1,52 0,03 1,52 0,13
RSD 3.4 2.6

* Los nmeros representan diferentes fuentes de muestras.

32
Figura 4