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1. ASIGNATURA : MICROBIOLOGA
6. AULA : MA D6-3
Lima, 2016
Ao de la Consolidacin del Mar de Grau
MICROBIOLOGA - MA 1
UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO FITORREMEDIACIN EN SUELOS
VILLARREAL Escuela de Ingeniera Ambiental CONTAMINADOS POR HIDROCARBUROS
INDICE GENERAL
INTRODUCCION ............................................................................................................................ 4
II. OBJETIVOS ............................................................................................................................. 5
III. ANTECEDENTES ..................................................................................................................... 5
IV. JUSTIFICACIN ...................................................................................................................... 6
V. MARCO TERICO .................................................................................................................. 8
5.1. BIORREMEDIACIN ....................................................................................................... 8
5.1.1. BIORREMEDIACIN DE SUELOS............................................................................. 9
5.1.1.1. FITOREMEDIACIN ............................................................................................ 9
a) Tcnicas de Fitoremediacin:...................................................................................... 10
b) Plantas Transgnicas y Fitorremediacin: ................................................................... 13
c) Funcin de la Planta en la Fitorremediacin de Hidrocarburos totales del Petrleo: 16
c.1. Plantas captadoras de Metales Pesados: .................................................................... 17
c.1.1. Metales Pesados en Fitorremediacin del Girasol: .................................................. 17
5.2. CARACTERSTICAS GENERALES DEL GIRASOL .............................................................. 19
5.3. SUSTRATOS USADOS PARA LA FITORREMEDIACION .................................................. 20
a) Humus: ........................................................................................................................ 21
b) Perlita: ......................................................................................................................... 22
VI. MATERIALES Y MTODOS ................................................................................................... 23
VII. RESULTADOS ....................................................................................................................... 27
VIII. DISCUSIN........................................................................................................................... 32
IX. CONCLUSIONES ................................................................................................................... 33
XI. BIBLIOGRAFA ..................................................................................................................... 34
ANEXOS ....................................................................................................................................... 35
CRONOGRAMA DEL TRABAJO .................................................................................................... 37
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INDICE DE ILUSTRACIONES
INDICE DE TABLAS
INDICE DE GRFICAS
Grfica 1: Diagrama de barras representativo del tamao promedio del tallo. ...................... 28
Grfica 2: Diagrama de barras representativo del tamao promedio de hojas. ..................... 29
Grfica 3: Diagrama de barras representativo del tamao promedio del tallo. ...................... 31
Grfica 4: Diagrama de barras representativo del tamao promedio de las hojas. ................ 31
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INTRODUCCION
La contaminacin como causa del gran deterioro ambiental ocasionado por el desarrollo
de algunos procesos industriales, tales como la minera y la extraccin, refinamiento y
transporte del petrleo. Por ello es imprescindible la aplicacin de tcnicas que
disminuyan la concentracin o toxicidad de los contaminantes producidos y/o
derramados en los procesos anteriormente mencionados y que al mismo tiempo sean
econmicamente aplicables. Una de estas tcnicas es la fitorremediacin, una tcnica
eco tecnologa, basada en la capacidad de algunas plantas para tolerar, absorber,
acumular y degradar compuestos contaminantes como metales pesados presentes en
el suelo, lo cual tiene muchas ventajas con respecto a los mtodos convencionales. En
primer lugar, es una tecnologa econmica, de bajo costo; en segundo lugar, posee un
impacto regenerativo en reas donde se aplica; y por ltimo, su capacidad extractiva se
mantiene debido al crecimiento vegetal.
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II. OBJETIVOS
Objetivo general:
Objetivos especficos:
III. ANTECEDENTES
Hans et al. (2003). La contaminacion del suelo por metales pesados esta
fundamentalmente relacionada con diferentes tipos de actividades humanas. Una vez
en el suelo, estos pueden quedar retenidos en l, pero tambin pueden ser movilizados
en la solucin del suelo mediante diferentes mecanismos biolgicos y qumicos
Pagnanelli et al. (2004). Los metales pesados adicionados a los suelos se redistribuyen y
reparten lentamente entre los componentes de la fase slida. Dicha redistribucin se
caracteriza por una rpida retencin inicial y posteriores reacciones lentas, dependiendo
de las especies del metal, propiedades del suelo, nivel de introduccin y tiempo.
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Burt et al. (2003). La movilidad relativa de los elementos traza en suelos es de suma
importancia en cuanto a su disponibilidad y su potencial para lixiviarse de los perfiles del
suelo al agua subterrnea y difiere de si su origen es natural o antrpico y, dentro de
este ltimo, al tipo de fuente antrpica. Los factores que influyen en la movilizacin de
metales pesados en el suelo son:pH, potencial redox, composicin inica de la solucin
del suelo, capacidad de cambio, presencia de carbonatos, materia orgnica, textura;
naturaleza de la contaminacin.
Guitart (2005). Algunos de los compuestos insolubles son Pb (OH)2, PbCO3, PbS, PbSO4.
La velocidad de oxidacin depende de factores como la humedad, la temperatura, el pH,
el potencial redox, la cantidad de materia orgnica o la roturacin de los suelos.
IV. JUSTIFICACIN
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V. MARCO TERICO
5.1. BIORREMEDIACIN
1
Biorremediacion de suelos- Burland y Edwards, 1998
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Los mecanismos que rigen la evolucin de los plaguicidas en el suelo son diversos.
Descomposicin qumica, que tiene lugar por procesos de oxidacin, reduccin,
hidroxilacin, dealquilacin, rotura de anillos, hidrlisis e hidratacin. Descomposicin
fotoqumica, que se produce por efecto del espectro de luz ultravioleta de la luz solar.
Las fuentes de luz y su intensidad regulan el grado de descomposicin de un compuesto.
Descomposicin microbiana, la accin de los microorganismos del suelo sobre los
plaguicidas es probablemente el mecanismo de descomposicin ms importante.
Los microorganismos del suelo, bacterias, algas y hongos, obtienen alimento y energa
para su crecimiento por descomposicin de estos compuestos orgnicos sobre todo
cuando carecen de otras fuentes. Descomposicin por las plantas y organismos, como
consecuencia de los procesos metablicos que tienen lugar en las plantas.2
5.1.1.1. FITOREMEDIACIN
2
Biorremediacion de suelos Prince et al., 1999- Burland y Edwards, 1998
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Esta definicin afecta a todas las plantas que, con procesos qumicos, biolgicos y fsicos
ayudan a la biorrecuperacin de sustratos contaminados. Se pueden distinguir dos tipos
diferentes de fitorremediacion: in planta y ex planta, segn se realice la
degradacin del contaminante dentro de la propia planta o fuera de ella. En el primer
caso (in planta), la planta absorbe el contaminante y lo incluye dentro de ella, mientras
que cuando es ex planta, dicha degradacion se realiza en la zona de la rizosfera, debido
a los exudados radicales y a la mayor actividad que existe en la zona.4
a) Tcnicas de Fitoremediacin:
Las plantas y sus organismos de la rizosfera pueden ser usados para fitorremediacin en
diferentes maneras, como se ve en la figura 1, donde se muestran las tecnologas usadas
para la remediacin de agua, suelos o aire contaminados. Estos pueden ser utilizados
como filtros en humedales construidos o en una instalacin hidropnica, esta ltima
llamada Rizo filtracin.
Los arboles pueden ser usados como barrera hidrulica para crear un flujo de agua hacia
arriba en la zona de la raz, previniendo que la contaminacin se filtre hacia abajo o para
evitar que una columna de agua subterrnea contaminada se extienda horizontalmente.
3
Fitorremediacion- Urzelai, 2001, Alkorta, 2000
4
Ministerio Espaol de medio ambiente, 2004 2007
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5
Biorremediacion-(Pilon-Smits, E., 2005)
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Biorremediacion-(Pilon-Smits, E., 2005)
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Uso de plantas y
microorganismos asociados
Fitodegradacin Orgnicos
para degradar
contaminantes
Uso de races para
Rizofiltracin absorber y absorber Orgnicos e inorgnicos
contaminantes del agua
FUENTE:(Ghosh y Singh, 2005)
7
Hannink et al., 2001; Chaudhry et al., 2002; Denys et al., 2006; Zhang et al., 2007
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Una prueba de ello son las plantas comestibles utilizadas como vehculos de reparto de
medicamentos en lugares donde los frmacos son demasiados costosos o no estn
disponibles. Por ejemplo, las papas con vacuna antidiarreica o los pltanos y alfalfa con
vacuna del clera.
Remocin de la contaminacin. Las plantas GM diseadas para este fin, son capaces de
metabolizar compuestos orgnicos (Tabla 4) o bien de acumular mayor cantidad de
contaminantes inorgnicos Generalmente, la fitorremediacin es una funcin conjunta
entre la planta y los microorganismos de la rizsfera. Algunas especies de bacterias
degradan, de manera selectiva, ciertos compuestos que son txicos para las plantas. Los
productos metablicos del proceso microbiano son asimilados y convertidos, por las
especies vegetales, en compuestos menos txicos. Por lo tanto, las modificaciones
genticas de los microorganismos presentes en la rizsfera representan una posibilidad
en el mejoramiento de las tcnicas fitocorrectivas, adems, la introduccin de
microorganismos GM asegura que los cambios se limiten a los consorcios bacterianos
presentes en la raz y que estos no se encuentren en el suelo circundante
8
Plantas transgnicas (Montagu, 2005, Vain, 2006)
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9
Rugh et al., 1998; Kramer y Chardonnens, 2001
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Diversos estudios han demostrado que la degradacin de los HTP y sus componentes
(hidrocarburos alifticos, policclicos, fenlicos y otros) es ms rpida en suelos donde
existe vegetacin creciendo activamente, que en suelos donde slo existen
microorganismos o suelos estriles adems, se ha observado que la toxicidad
remanente de los suelos recuperados por fitorremediacin es menor que la de aqullos
recuperados por otros tratamientos.10
Este sinergismo puede explicarse si se considera que la planta posee un papel activo en
la transformacin de las fracciones que componen a los HTP, as como en el fomento de
los microorganismos que los degradan. Diversos autores han propuesto algunas
hiptesis que podran explicar por qu la presencia de la planta aumenta la degradacin
de HTP en el suelo por ejemplo:
10
Fitorremediacionen hidrocarburos.Joner et al., 2001
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Uno de los problemas ms sealados por la sociedad a nivel mundial y que ocupa un
lugar prominente en los programas sociales y polticos es destacar la progresiva
degradacin de los recursos naturales causada por la diversidad de contaminantes
txicos orgnicos e inorgnicos, en la atmsfera, agua, suelo y subsuelo, procedentes de
diversas actividades naturales y antropognicas, generando un irremediable deterioro
en el ambiente.
11
Fitorremediacion en hidrocarburos.Joner et al., 2001
12
Plantas transgenicas Raskin, 1996; Saleh-Lakha y Glick, 2005
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El girasol es reportado por su capacidad de acumular metales y responder con una alta
biomasa radicular no obstante una baja tolerancia al cromo comparado con otras
plantas acumuladoras. Se relaciona al plomo con la actividad de la proteasa en
cotiledones de girasol, concluyendo como un agente txico que inhibe la actividad de
stos. El girasol tiene la capacidad de acumular altas concentraciones de uranio y cadmio
en sus tejidos (principalmente tallo y raz) con una razonable tolerancia, es por esta
13
Plantas transgenicas Raskin, 1996; Saleh-Lakha y Glick, 2005
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El girasol es una planta muy popular en nuestra cultura de cultivo. Adems de este
nombre que hemos elegido para referirnos a l en este artculo, tambin cuenta con
otros muchos que no vamos a tener en cuenta ahora pero que es bueno conocer por si
en alguno de los casos (por ejemplo que vayas a una tienda a por semillas) te la nombran
y no sabes de qu te estn hablando o cmo hacer para identificarla.
Como en cualquier otro artculo que hayamos redactado aqu sobre plantas, es
interesante que empecemos por saber cules son las caractersticas principales que
definen al girasol y que hacen que lo conozcamos tal y como le vemos hoy en da. En
primer lugar debemos decir que el girasol es una planta herbcea que pertenece a la
familia de las asterceas y que podemos encontrarla hoy en da, en muchas partes del
mundo.
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El girasol es una planta original de Amrica del Norte y que despus fue llevada a
terrenos como el de Mxico y Per. El inters que ha despertado en muchas ocasiones
el girasol es debido al fruto de su pipa que se ha exportado a muchas partes del mundo
con la idea de dar a conocer qu era lo comestible de esta planta.
No obstante, la buena distribucin ha hecho que sus semillas puedan ser plantadas en
distintas partes del mundo y hoy en da podemos encontrar plantaciones de girasol por
muchas partes que en un principio, ni siquiera hubisemos pensado que iban a poder
llegar hasta aqu.
Las propiedades fsicas del suelo se ven muy afectadas por la contaminacin con
hidrocarburos; la aglutinacin de partculas del suelo genera estructuras ms gruesas
que cubren la superficie de las partculas y el espacio poroso afectando su aireacin,
adicionalmente la pelcula que cubre las partculas es hidrfoba y disminuye la retencin
de agua. Por otro lado el contenido de materia orgnica del suelo se incrementa
notablemente, as como la acidificacin y la saturacin de bases y la capacidad de
intercambio catinico. Todos estos factores acarrean una disminucin de la fertilidad
del suelo14.
14
Hidrocarburos- Clemens y col. 2002
15
Sangabriel et al., 2006-Prez et al., 2002
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a) Humus:
El humus tiene diferentes beneficios uno es que ayuda tanto a la retencin de agua
como a la filtracin de la misma, segn las necesidades del suelo y da una acertada
consistencia a los suelos segn su tipo. En suelos arenosos compacta, mientras que en
arcillosos tiene un efecto de dispersin, Facilita la toma de nutrientes por la rizsfera,
Regula la nutricin vegetal, Aporta productos nitrogenados al suelo degradado, Hace la
tierra ms frtil y Mejora la asimilacin de abonos minerales.
Ilustracin 4: HUMUS
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b) Perlita:
La Perlita es una roca volcnica, este vidrio volcnico o perlita se forma cuando la lava
se enfra rpidamente y debido a este rpido enfriamiento el agua se queda atrapada
dentro de la roca y la lava se transforma en una estructura vidriosa. La Perlita contiene
entre un 2% y un 5% de agua y es una roca de silicato, lo cual implica que contiene un
alto porcentaje de silicio. Tiene un proceso algo ms complicado pero no es el sitio para
explicarlo, solo comentaros un poco el origen.
Ilustracin 5: PERLITA
Es ligera, fcil de manejar y se mezcla bien con otros ingredientes, como, la turba, la
fibra de coco, el humus de lombriz y la vermiculita, para semilleros y cultivo en
macetas.16
16
Hidrocarburos- Clemens y col. 2002
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MATERIALES:
1. 12 maceteros
2. 6 kilos de tierra preparada
3. 400 g de Humus de lombriz
4. 400 g de Perlita
5. Semillas de girasol
6. Balanza
METODOLOGA:
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Concentraciones N de
Tipos de Sustratos Cantidades (g)
(g/kg) muestras
Tierra sola 1000g 2
Tierra con humus de 900g(Tierra) + 100g
2
5g/kg lombriz (Humus)
900g(Tierra) + 100g
Tierra con perlita 2
(Perlita)
Tierra sola 1000g 2
Tierra con humus de 900g(Tierra) + 100g
2
10g/kg lombriz (Humus)
900g(Tierra) + 100g
Tierra con perlita 2
(Perlita)
Total de muestras 12
Fuente: Elaboracin propia.
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Sembro de las plantas: Se procedi a sembrar las plantas de girasol (Helianthus annuus)
ya con las muestras preparadas a las concentraciones de 5 y 10 (g/kg) y con las
diferentes mezclas de sustratos.
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Germinacin
Concentracin
de petrleo
5g/kg 10g/kg
Anlisis
Anlisis Anlisis
cualitativo cuantitativo
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VII. RESULTADOS
A continuacion se presenta Los resultados obtenidos con concentracion de 5g/kg de
petroleo (tabla 4).
TABLA 4: PRIMER CONTROL DEL CRECIMIENTO DE LAS PLANTAS
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Tamao
Nmero de Numero de Tamao de
Muestras promedio del
tallos hojas hojas
tallo
tierra con petrleo 2 13 8 hojas 2,8
tierra con petrleo
3 9,7 10 hojas 2,5
mas humus
Tierra con petrleo
3 7,3 3 hojas 1,7
mas perlita
Fuente: Elaboracion propia
En la tabla 5 se aprecia que el tratamiento de tierra con petrleo obtuvo una mayor
altura de planta (13cm) en comparacin con los dems tratamientos, tal como se
muestra en el grafico 1. Con un promedio de tamao de hojas de 2,8 cm, siendo el de
mayor promedio como se muestra en el grafico 2.
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TAMAO DE HOJAS
3
2.5
1.5
1 tamao de hojas
0.5
0
tierra con tierra con Tierra con
petrleo petrleo mas petrleo mas
humus perlita
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8 cm 5 cm 2 Tallos
1,5 cm
3,3 cm 3 hojas (1)
HOJAS 2 cm
3 cm 2 hojas (2)
1,5 cm
Fuente: Elaboracion propia
Tamao
Nmero de Numero de Tamao de
Muestras promedio del
tallos hojas hojas
tallo
tierra con petrleo 3 13.5 16 hojas 2.5
tierra con petrleo
2 6 11 hojas 2.6
mas humus
Tierra con petrleo
2 6.5 5 hojas 2.41
mas perlita
Fuente: Elaboracion propia
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4
2
0
Tierra con petrleoTierra con petrleo Tierra con petrleo
mas humus mas perlita
TAMAO DE HOJAS
2.65
2.6
2.55
2.5
2.45 tamao de hojas
2.4
2.35
2.3
Tierra con petrleo Tierra con petrleo Tierra con petrleo
mas humus mas perlita
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VIII. DISCUSIN
En nuestros resultados determinamos que la capacidad fitorremediadora y el
desarrollo vegetal de la planta de girasol (Helianthus annuus) en suelos contaminados
con hidrocarburos tuvo mejores resultados en el sustrato de tierra sola con petrleo en
una concentracin de 10 g/kg de petrleo con una altura promedio de (13.5 cm), sin
embargo, el crecimiento del girasol en tierra con petrleo mas humus tuvo mejores
resultados con una concentracin de 5g/kg de petrleo con una altura promedio de (9.7
cm). Estos datos nos indican que los sustratos de tierra con petrleo y tierra con petrleo
mas humus son los ms adecuados para el crecimiento de la planta de girasol en el
proceso de fitorremediacin de esta. Comparando los resultados con l con el trabajo
de investigacin FITORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS POR
HIDROCARBUROS DE PETRLEO (Buenda Ros H., Cruz Reyes F.)17 Las plantas que
tuvieron un mejor crecimiento fueron las que se desarrollaron en un sustrato de tierra
contaminada con petrleo ms aserrn de bolania y humus como se puede observar en
tabla N 8.
17
Buenda Ros H., Cruz Reyes F. Fitorremediacin de suelos contaminados por hidrocarburos de
petrleo. UNALM Lima 2014.
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IX. CONCLUSIONES
En lo referente a la altura de la planta de girasol Helianthus annuus, el tratamiento de
tierra con petrleo fue el que obtuvo mayor altura en comparacin con los dems
tratamientos, para ambas concentraciones de petrleo.
X. RECOMENDACIONES
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XI. BIBLIOGRAFA
1. Buenda Ros H., Cruz Reyes F. Fitorremediacin de suelos contaminados por
hidrocarburos de petrleo. UNALM Lima 2014.
2. BURST et.al ,2003. Molecular Plant Microbe interactions. UK.
3. ESPINOZA, 1999. Boletin N 04.Refinera la Pampilla. Callao. Peru.
4. GUERRERO, J. 2001. El Compost un abono orgnico compuesto para mejorar y
dar vida a nuestros suelos. Taller de conservacin de suelos y agricultura
sostenible. UNALM. Lima.
5. GUITART 2005. Factors influencing hydrocarbons degradation in three
freshwater lakes. Microbial Ecology, 11: 127-237.
6. HANS et.al D. 2003. The Physiology and Biochemistry of Prokaryotes. Oxford
University Press, Oxford, 10
7. Hannink et al., 2001; Chaudhry et al., 2002; Fitorremediacin de plantas
transgnicas que expresan una nitrorreductasa bacteriana. Naturaleza
Biotecnologa.
8. Hidrocarburos- Clemens y col. 2002
9. INSTITUTO NACIONAL DE ECOLOGIA, 2003. Ambiente y Desarrollo. Lima, Per.
10. Kramer, U., Chardonnens, A. 2001.El uso de plantas transgnicas en la
biorremediacin de suelos contaminados con hidrocarburos.Appl.
11. MANI et.a (2007). Leguminosae Helianthus annuus,. In Estructure of economic
plants. MacMillan, New York, USA, pp. 309-338.
12. Ministerio del Ambiente (MINAM), 2012. Decreto Supremo N 001-2012-
MINAM. Lima, Per.
13. Ministerio Espaol de medio ambiente, 2004 2007
14. Montagu, M.V. 2005.Hitos tecnolgicos de la ciencia de las plantas a la
biotecnologa agrcola. Tendencias Plant Sci.
15. Pilon-Smith, E. A., Piln, M. 2002.Fitorremediacin de metales utilizando plantas
transgnicas.Crticas en Ciencias de las Plantas.
16. Sangabriel et al., 2006-Prez et al., 2002
17. Vias, M. 2005.Biorremediacin de suelos contaminados con hidrocarburos:
caracterizacin, microbiologa, qumica y ecotoxicolgica. Facultad de biologa.
Universidad de Barcelona.
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ANEXOS
TIERRA CON PETRLEO (1) TIERRA CON PETRLEO (2) TIERRA CON HUMUS (1)
TIERRA CON HUMUS (2) TIERRA CON PERLITA(1) TIERRA CON PERLITA(2)
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DAS
DAS
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Germinacin
Preparacin de sustrato
Plantacin
Primer control
Segundo control
Anlisis de laboratorio
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