Biotecnologa Aplicada

a la Identificacin y Validacin
de Dianas Teraputicas
Informe de Vigilancia Tecnolgica
Biotecnologa Aplicada
a la Identificacin
y Validacin de Dianas
Teraputicas

Informe de Vigilancia
Tecnolgica
BIOTECNOLOGA APLICADA
A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

El presente informe de Vigilancia Tecnolgica ha sido

realizado en el marco del convenio de colaboracin
conjunta entre Genoma Espaa y la Fundacin General
de la Universidad Autnoma de Madrid (FGUAM), entidad
que gestiona el Crculo de Innovacin en Biotecnologa
(CIBT), perteneciente al Sistema de Promocin Regional
de la Innovacin MADRID+D.

Genoma Espaa y la Fundacin General de la Universidad

Autnoma de Madrid (FGUAM) agradecen la colaboracin
ofrecida a:

Dr. Miguel ngel Piris Pinilla

Centro Nacional de Investigaciones Oncolgicas (CNIO)
Dr. Arcadio Garca de Castro Andrews
PharmaMar
Dr. Luis del Peso Ovalle
Hospital Universitario de la Princesa
D. Rosario Ambite Domnguez
Crculo de Innovacin en Biotecnologa

La reproduccin parcial de este informe est autorizada bajo

la premisa de incluir referencia al mismo, indicando:
Biotecnologa aplicada a la identificacin y validacin de
dianas teraputicas. GENOMA ESPAA/CIBT-FGUAM.

Genoma Espaa no se hace responsable del uso que se

realice de la informacin contenida en esta publicacin. Las
opiniones que aparecen en este informe corresponden a los
expertos consultados y a los autores del mismo.

Copyright: Fundacin Espaola para el Desarrollo

de la Investigacin en Genmica y
Protemica/Fundacin General de la Universidad
Autnoma de Madrid.

Autores: Marta Lpez (CIBT)

Paloma Mallorqun (CIBT)
Ion Arocena (CIBT)
Jos Antonio Mesa (Genoma Espaa)
Miguel Vega (Genoma Espaa)

Edicin: Silvia Enrquez (Genoma Espaa)

Referencia: GEN-ES05009
Fecha: Abril 2005
Depsito Legal: M-51618-2005
ISBN: 84-609-8741-8
Diseo y realizacin: Spainfo, S.A.

4
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

ndice de contenido

RESUMEN EJECUTIVO 7

1. INTRODUCCIN A LA VALIDACIN DE DIANAS 8

2. TCNICAS DE IDENTIFICACIN DE DIANAS 11

2.1. Anlisis de la expresin gnica 11

2.1.1. Anlisis serial de la expresin gnica (SAGE) 12
2.1.2. Electroforesis en geles de poliacrilamida (PAGE) 13
2.1.3. Microarrays de ADN 13
2.2. Interacciones protena-protena 14
2.2.1. Microarrays de protenas 15
2.2.2. Sistema doble hbrido 16

3. TCNICAS DE VALIDACIN DE DIANAS 17

3.1. Modulacin de la expresin gnica 17

3.1.1. Oligonucletidos antisentido 17
3.1.2. ARN de interferencia 18
3.1.3. Ribozimas 20
3.1.4. Protenas de dedos de zinc 21
3.2. Inactivacin de protenas 22
3.2.1. Qumica gentica 22
3.2.2. Anticuerpos monoclonales 23
3.2.3. Aptmeros 24
3.2.4. Pptidos 24
3.2.5. Inactivacin por lser mediante cromforos y fluorforos 25
3.3. Anlisis de la expresin gnica in situ 25
3.3.1. Microarrays de tejidos 26
3.3.2. Microarrays de clulas 26
3.4. Modelos vivos de la enfermedad 27
3.4.1. Ratones knock-out y knock-in 28
3.4.2. Ratones transgnicos 29
3.4.3. Mutagnesis de ratones al azar 30
3.4.4. Levaduras como modelo de enfermedad 30
3.4.5. Otros organismos modelo 31
3.4.6. Clulas madre embrionarias 32
3.5. Tcnicas bioinformticas 34

4. ESTRATEGIAS DE VALIDACIN DE DIANAS 37

5
5. APLICACIONES DE LAS TCNICAS DE VALIDACIN DE DIANAS 40

5.1. Enfermedades que requieren nuevas dianas 40

5.1.1. Enfermedades neurodegenerativas 40
5.1.2. Enfermedades cardiovasculares 42
5.1.3. Enfermedades psiquitricas 43
5.1.4. Enfermedades metablicas 45
5.1.5. Enfermedades autoinmunes 46
5.1.6. Cncer 48
5.2. Naturaleza de las dianas teraputicas para los frmacos actuales 49

6. ENTORNO ECONMICO EN LA VALIDACIN DE DIANAS 51

6.1. Validacin de dianas en el desarrollo de frmacos 52

6.2. Estrategias de implantacin de validacin de dianas en la industria farmacutica 54
6.3. Estrategias comerciales en la validacin de dianas 55

7. EMPRESAS Y PROYECTOS EN VALIDACIN DE DIANAS 58

7.1. Empresas internacionales en validacin de dianas 58

7.2. Empresas espaolas en validacin de dianas 59
7.3. Proyectos de I+D espaoles en validacin de dianas 60

8. CONCLUSIONES 61

ANEXOS 65

ANEXO I. Proyectos de I+D espaoles en validacin de dianas 65

ANEXO II. Empresas internacionales en validacin de dianas 92
ANEXO III. Empresas espaolas en validacin de dianas 103
ANEXO IV. Principales dianas teraputicas 111

REFERENCIAS 116

GLOSARIO 119

6
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
Resumen ejecutivo
Las dianas teraputicas son molculas localizadas
en cualquier parte de la clula, capaces de
reconocer un frmaco y producir una respuesta
celular que modifique el curso de una
enfermedad. La evaluacin de dianas teraputicas
constituye un proceso que incluye las etapas de
identificacin, caracterizacin y validacin de
dianas, siendo este ltimo el paso final en la
determinacin de la implicacin de la diana en el
proceso patolgico. La secuenciacin del genoma
humano ha revelado la presencia de un gran
nmero de potenciales dianas teraputicas, sin
embargo, la mayora de estas dianas no han sido
completamente caracterizadas ni se ha
establecido su asociacin con una enfermedad
concreta. Se ha estimado que el nmero de
dianas potenciales teraputicas se encuentra en
torno a 600 y 1.500, no obstante, los frmacos
que actualmente se encuentran en el mercado
actan sobre alrededor de 500 dianas diferentes.
El reto actual consiste en seleccionar a partir del
conjunto de genes del genoma humano aquellos
genes que dan lugar a protenas que pueden
llegar a ser dianas teraputicas.
La tasa de fracaso a lo largo del proceso de
investigacin farmacutica es elevada, ms del
80% de los proyectos se abandonan durante la
fase de descubrimiento anterior a los ensayos
clnicos, de modo que slo uno de cada cinco
proyectos consigue iniciar los ensayos clnicos. Una
DE DIANAS TERAPUTICAS
correcta validacin de dianas teraputicas reduce
por tanto el tiempo y coste necesario para el
desarrollo de un frmaco eficaz, ya que se evita
continuar con los esfuerzos empleados en el
desarrollo de frmacos cuyas dianas no han sido
validadas adecuadamente. De este modo, la
industria farmacutica conseguira optimizar sus
esfuerzos de I+D orientndolos hacia los proyectos
basados en dianas validadas correctamente, con
mayores posibilidades de salir adelante.
Las tcnicas genmicas y protemicas que se
emplean en la identificacin y validacin de dianas
son de diversa naturaleza, y se emplean
generalmente en combinacin con otras tcnicas
complementarias. La identificacin de dianas se
realiza principalmente mediante tcnicas de
anlisis de la expresin gnica o bien mediante el
anlisis de interacciones protena-protena, como
los microarrays de ADN y microarrays de protenas
respectivamente. En cuando a las tecnologas
relacionadas con la validacin de dianas, la
modulacin de la expresin gnica mediante
tecnologas antisentido y el empleo de modelos
vivos de la enfermedad como los ratones knock-out
son las tcnicas ms relevantes. No obstante, otras
tecnologas complementarias como los microarrays
de clulas y tejidos, clulas madre embrionarias, y
tcnicas de inactivacin de protenas como
CALI/FALI, son alternativas cada vez ms
empleadas en las etapas de validacin de dianas.
7
1. Introduccin a la validacin de dianas
El presente informe tiene por objeto el estudio de las
tcnicas que se emplean en la actualidad en la
validacin de dianas prestando especial atencin a las
aplicaciones de las tcnicas genmicas y protemicas.
Los frmacos se componen de sustancias activas
o compuestos responsables del efecto teraputico,
los cuales ejercen su accin sobre la enfermedad
cuando el compuesto es absorbido y distribuido
por el organismo. Las molculas que reconocen
estos frmacos se denominan dianas teraputicas,
y su modulacin permite modificar el curso de un
proceso patolgico. Las dianas sobre las que
actan los frmacos pueden ser de diferente
naturaleza, pudiendo ser azcares, protenas o
cidos nucleicos (ADN o ARN), sin embargo, la
mayora de los frmacos que se encuentran en el
mercado actan sobre dianas proteicas1.

Diana teraputica

Molcula localizada en cualquier parte de la clula, capaz de reconocer a un frmaco y producir una
respuesta celular que modifique el curso de una enfermedad.

El desarrollo de nuevos frmacos constituye un largo
proceso que se puede dividir en una serie de fases,
la primera de las cuales consiste en la identificacin
de nuevas dianas teraputicas. La identificacin de
compuestos activos con actividad biolgica
relacionada con las dianas previamente descritas
conforma la segunda etapa de este proceso. El
ltimo paso consiste en el desarrollo y optimizacin
del frmaco a lo largo de las distintas fases
preclnicas y clnicas. Por tanto, una buena
caracterizacin de la actividad biolgica de las
dianas moleculares que han sido identificadas en las
primeras fases, es fundamental para la obtencin de
un mayor nmero de frmacos. No obstante, debido
a la complejidad de los procesos biolgicos que dan
lugar a distintas patologas, no siempre es posible
identificar una diana que permita desarrollar un
frmaco eficaz.

Validacin de dianas

Proceso que tiene por objeto demostrar que una determinada diana molecular est implicada en la
aparicin y progresin de una enfermedad. La validacin de una diana permite establecer una
relacin entre la alteracin de la diana y su potencial teraputico.

La validacin de dianas consiste por tanto en
determinar si una diana molecular est implicada
en una enfermedad concreta, y por tanto es
potencialmente susceptible de ser considerada
como diana teraputica a la hora de disear
nuevos frmacos. Para algunos autores la
validacin de una diana se consigue nicamente
cuando un frmaco se emplea con xito para
alterar el curso de una enfermedad. Sin embargo,
la validacin de dianas puede realizarse
igualmente tanto a nivel molecular como gentico
mediante herramientas genmicas y protemicas,
que permiten relacionar una diana con un estado
patolgico determinado. El grado de validacin de
una diana estar por tanto relacionado con la
cantidad de datos preclnicos y clnicos que se

1
Smith, M. B. (2003). Hitting the target. Nature, vol. 422, 341-347.

8
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

renan respecto al mecanismo biolgico de la
diana y su relacin con la eficacia del frmaco2.
El paso de una fase a otra del desarrollo de
frmacos depende en gran medida del grado de
validacin de la diana en cuestin y del avance en
el descubrimiento de potenciales compuestos
activos3. Sin embargo, no se debe olvidar que en
la realidad muy pocas dianas identificadas
durante las primeras fases del proceso de I+D
conducen al desarrollo de un frmaco eficaz, por
lo que el grado de incertidumbre del proceso de
desarrollo farmacolgico es muy elevado.

Descubrimiento Descubrimiento Desarrollo

de dianas de frmacos de frmacos

Optimizacin
Identificacin Validacin Seleccin de Fase Fase
de
de dianas de dianas compuestos Preclnica Clnica
compuestos

Figura 1. Fases principales del desarrollo farmacolgico.

Fuente: Whittaker, P. A. (2003). What is the relevance of bioinformatics to pharmacology? Trends In Pharmacological
Sciences, 24 (8):434-439.

La identificacin y desarrollo de frmacos ha sido Los frmacos que actualmente se encuentran en

tradicionalmente un proceso lineal que consista
en la bsqueda de compuestos qumicos mediante
ensayos sobre cultivos celulares, tejidos o
animales4. Las dianas no se validaban con las
tecnologas complejas que se emplean hoy en da,
y se desconocan los mecanismos moleculares
responsables de las enfermedades. Los avances
en genmica y protemica han permitido a la
industria farmacutica descubrir un gran nmero
de frmacos por medio del estudio de las
relaciones existentes entre los genes y las
enfermedades. Como consecuencia, la validacin
de dianas al nivel del genoma ha surgido como
una necesidad que a su vez ofrece numerosas
ventajas, ya que permite la posibilidad de conocer
de antemano algunos de los efectos biolgicos de
las protenas, que mediante las tcnicas clsicas
de validacin no era posible anticipar5.
el mercado actan sobre aproximadamente 500
dianas diferentes. Las estimaciones ms recientes
calculan que existen entre 20.000 y 25.000 genes
en el genoma humano, de los cuales en torno a
5.000 podran estar implicados en procesos
patolgicos. De estos ltimos, slo ciertos genes y
las protenas que codifican sern de inters para
el desarrollo de frmacos que modifiquen el
proceso patolgico. De este modo, el nmero de
dianas teraputicas potenciales se estima en
torno a 600 y 1.500 dianas6. La secuenciacin del
genoma humano en el ao 20017 supuso el
descubrimiento de la secuencia de un gran
nmero de dianas teraputicas potenciales. El
reto actual consiste en seleccionar a partir del
conjunto de genes del genoma humano aquellos
genes que dan lugar a protenas y que pueden
llegar a ser dianas teraputicas.

2
Epstein, D. M., et al. (2002). Target Validation with Nucleic Acid Aptamers. Mimicking small molecule therapeutics by
attacking the protein, and not the gene. Pharmaceutical Discovery and Development. PharmaVentures Ltd.
3
Whittaker, P. A. (2003). What is the relevance of bioinfomatics to phamacology? Trends In Pharmacological Sciences, 24
(8), 434-439.
4
Douglas S. A., et al. (2004). Techniques: Cardiovascular pharmacology and drug discovery in the 21st century. Trends in
Pharmacological Sciences. Vol. 25 N 4: 225-233.
5
Liu, R., et al. (2004). New approaches in identifying drugs to inactivate oncogene products. Seminars in Cancer Biology
14: 13-21.
6
Hopkins. A. L. et Groom, C. R. (2004). The druggable genome. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol. 1 727-730.
7
Lander, E. S., et al. (2001). Initial sequencing and analysis of the human genome. Nature. 409(6822), 860-921.
Venter, J. C., et al. (2001). The sequence of the human genome. Science. 291(5507). 1304-51.

9
 Genoma humano: 20.000-25.000 genes

5.000 frmacos que 5.000 Genes

actan sobre el implicados en
genoma patologas

600-1.500
dianas teraputicas

Figura 2. Estimacin del nmero de dianas teraputicas del genoma humano.

Fuente: Adaptado de Hopkins, A. L. et Groom, C. R. (2004). The druggable genome. Nature Reviews: Drug Discovery.
Vol. 1, 727-730.

Debido a que existen mltiples tcnicas tempranas como tcnicas de apoyo en la

moleculares que permiten relacionar genes y
protenas con un determinado efecto ligado a una
enfermedad, las tcnicas con una aplicacin
potencial a la validacin de dianas son muy
diversas. Por esta razn, algunas tcnicas
moleculares de identificacin de nuevas dianas
teraputicas pueden emplearse en etapas
validacin de dianas.
El presente informe realiza una descripcin de estas
ltimas tcnicas, para posteriormente describir con
ms detalle las tcnicas de validacin de dianas
relacionadas con la genmica y protemica,
clasificadas en funcin de las estrategias empleadas.

Mltiples dianas
Identificacin de dianas
candidatas

Interacciones Cribado virtual Anlisis de la

protena-protena (in silico) expresin gnica

Algunas dianas
Validacin de dianas
potenciales

Modulacin Inactivacin Modelos in vitro Modelos in vivo

de la transcripcin de protenas

Mltiples
Cribado de compuestos
compuestos
candidatos

Desarrollo clnico

Frmaco
Seguridad Dosificacin Efectividad
candidato

Frmaco final
Figura 3. Papel de la validacin de dianas en el proceso de desarrollo de nuevos frmacos.
Fuente: elaboracin propia.

10
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

2. Tcnicas de identificacin de dianas

Al buscar un gen asociado a una enfermedad
gentica, los investigadores se concentran
generalmente en genes candidatos8. Se considera
que un gen es candidato si la protena que
codifica representa una posibilidad lgica de que
est involucrado en la enfermedad, o bien si el
gen est localizado fsicamente dentro de una
regin del genoma asociada o ligada a la
enfermedad. La segunda situacin se encuentra
frecuentemente en proyectos de clonaje
posicional, donde el gen buscado se identifica de
acuerdo a su posicin dentro del genoma.
En un proyecto de clonaje posicional tpico, se
identifica primero una regin pequea del genoma
que contiene el gen que estamos buscando.
Entonces todos los genes ubicados en esa regin
se convierten inmediatamente en posibles genes
candidatos. Si se sabe o se puede deducir algo de
la protena codificada de un determinado gen
candidato o si se puede demostrar que la protena
est involucrada en la enfermedad, entonces ese
gen se puede considerar un candidato fuerte y se
intensifican los esfuerzos para encontrar
mutaciones en l9.
Las tcnicas genmicas y protemicas ms
destacadas que se emplean en la identificacin de
nuevas dianas teraputicas se pueden clasificar
en tres grupos en funcin de la estrategia que
siguen. El anlisis de la expresin gnica, el
estudio de las interacciones protena-protena, y
el cribado virtual, son las tres estrategias
principales descritas en el presente informe.
2.1. Anlisis de la expresin
gnica
El estudio del perfil de expresin de genes
engloba un conjunto de tcnicas que permiten
identificar los genes implicados en el proceso
patolgico mediante la observacin de su
fenotipo10 molecular. La expresin gnica es el
proceso por medio del cual la informacin
codificada en el ADN se transforma en las
protenas necesarias para el desarrollo y
funcionamiento de la clula. Este proceso tiene
lugar por medio de una molcula intermediaria
que transmite la informacin gentica
denominada ARN mensajero (ARNm)11.

Transcripcin Traduccin

ARNm
ADN Protena

Anlisis de la expresin
gnica al nivel de la
transcripcin

Figura 4. Anlisis de la expresin gnica en la validacin de dianas.

Fuente: elaboracin propia.

8
Gen candidato: gen localizado en una regin de un cromosoma sospechosa de estar involucrada en una enfermedad y
cuyos productos proteicos sugieren que podra ser el gen de la enfermedad en cuestin
(http://www.conocimientosweb.net/portal/term1494.html).
9
ConocimientosWeb.net (http://www.conocimientosweb.net/portal/term1494.html).
10
Fenotipo: rasgos o caractersticas visibles de un organismo, determinado por su constitucin gentica (genotipo) y por el
ambiente en el que crece y se desarrolla.
11
El ADN (cido desoxirribonucleico) es una molcula de gran tamao que se encuentra en todos los seres vivos y que es
portadora de la informacin gentica. El ARN (cido ribonucleico) es una molcula parecida al ADN en cuanto a sus
caractersticas qumicas, que tambin est relacionada con la transmisin de la informacin gentica, ya que acta como
intermediario en el proceso de traduccin o formacin de protenas.

11
Aunque todas las clulas contienen la misma
informacin gentica, los genes se expresan en
diferentes momentos dependiendo de la funcin
de la clula o tejido y de su estado fisiolgico. El
anlisis del perfil de expresin de genes consiste
en la identificacin y cuantificacin de los genes
que se expresan en una clula o tejido concreto
en un determinado momento. El estudio del perfil
de expresin de genes se puede realizar a partir
de la identificacin y cuantificacin del ARN o bien
de las protenas expresadas directamente.
Las tcnicas de anlisis de la expresin gnica
emplean el primer tipo de abordaje, de modo que
la comparacin de los genes expresados en
muestras distintas permite descubrir los genes
que se encuentran activados e inactivados en
diferentes estados metablicos y patolgicos. Por
tanto, comparando la expresin de genes de
tejidos sanos y enfermos, es posible descubrir los
genes implicados en el desarrollo y progresin de
la enfermedad, as como establecer una
asociacin entre el estado patolgico y
determinados genes que se encuentran alterados
en esa enfermedad, y por tanto validar posibles
dianas teraputicas.
Las principales tcnicas de identificacin de
dianas basadas en el anlisis de la expresin
gnica son los microarrays de ADN, el Anlisis
serial de expresin gnica (SAGE), y la
Electroforesis en geles de poliacrilamida (PAGE).
Otras tcnicas alternativas de anlisis de la
expresin gnica son variantes de la PCR como
RaSH, RDA, RSDD, DDRT-PCR12. La principal
limitacin de estas ltimas radica en que son
laboriosas y requieren la inversin de un tiempo
considerable para identificar los genes que se
expresan de modo diferencial en dos muestras
diferentes. Los resultados que se obtienen no
proporcionan informacin acerca de la cantidad de
ARNm y no se pueden comparar resultados
obtenidos en experimentos distintos13. Por este
motivo, aunque son de gran utilidad en las
primeras etapas de identificacin de dianas, no se
suelen emplear con el fin de validar dianas14.
2.1.1. Anlisis serial de la expresin
gnica (SAGETM)
El anlisis serial de la expresin gnica (SAGETM)
se basa en la presuncin por la cual un segmento
corto procedente de ARNm posee una complejidad
suficiente como para identificar un gen completo.
Esta tcnica fue desarrollada por la empresa
Genzyme como plataforma tecnolgica de
descubrimiento de nuevas dianas oncolgicas15, y
ha sido adoptada por el Instituto Nacional del
Cncer (NCI) como mtodo de anlisis de la
expresin gnica dentro del Proyecto Anatoma
del Genoma del Cncer16.
Estos segmentos cortos se obtienen mediante la
accin de enzimas de restriccin, que cortan en
lugares especficos el ADN complementario
sintetizado a partir del ARN mensajero total de la
muestra. Midiendo la cantidad de copias de cada
fragmento especfico se puede estudiar el nivel de
expresin de un gen concreto, identificar
simultneamente miles de fragmentos de este
tipo en una clula o tejido y cuantificar sus
niveles de expresin. La comparacin de dichos
perfiles en muestras sanas y enfermas permite
asociar la presencia de genes con enfermedades
concretas17.

12
Pillutla, R. C. et al. (2002). Target Validation and drug discovery using genomic and protein-protein interaction
technologies. Expert Opinion on Therapeutic Targets, 6 (4): 517-531.
13
Chanda, S. K. et Caldwell, J. S. (2003). Fulfulling the promise: drug discovery in the post-genomic era. Drug Discovery
today. Vol. 8, N 4. 168-174.
Allen, N. L. et al. (2003). Representational difference anlisis: critical appraisal and metod development for the
identification of unique DNA sequences from prokaryotes. Journal of microbiological methods. 55: 73-81.
14
Coleman, R. A. and Clark, K. L. (2003). Target validation using human tissue. Targets Vol. 2, No. 2: 58-64.
15
Serial Analysis of Gene Expression (SAGE), Genzyme
(http://www.genzyme.com/research/gzmo/discovery/discoveryplatforms2_sage_gzmo.asp).
16
SAGE Genie, Cancer Genome Anatomy Project, CGAP. (http://cgap.nci.nih.gov/SAGE).
17
Serial Analysis of Gene Expression, Sagenet web page (http://www.sagenet.org).

12
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

2.1.2. Electroforesis en geles 2.1.3. Microarrays de ADN

de poliacrilamida (PAGE)
La electroforesis en gel de poliacrilamida
es una tcnica que permite la separacin de
protenas de una muestra compleja en funcin de
su masa molecular mediante la aplicacin de
corrientes elctricas. La distribucin de las
protenas en el gel y la intensidad de los puntos
permite obtener un perfil de la expresin de
protenas as como la identificacin y
cuantificacin de las mismas. Este ltimo paso se
suele realizar mediante espectrometra de masas,
una tcnica analtica que brinda informacin
cualitativa y cuantitativa acerca de la composicin
atmica y molecular de materiales inorgnicos y
orgnicos.
La comparacin de los perfiles de expresin en un
tejido enfermo y uno sano permite analizar los
cambios en la expresin de protenas. De esta
forma, aquellas protenas implicadas en procesos
patolgicos se expresarn en cantidades
diferentes en tejidos enfermos en comparacin
con los tejidos normales, y por tanto podran
constituir dianas potenciales. La principal
limitacin de esta tcnica se debe a que el
procedimiento resulta laborioso y consiste en una
tcnica de bajo rendimiento18.
Las tcnicas de anlisis de la expresin gnica
mediante microarrays se basan en la capacidad
de los cidos nucleicos para hibridar entre s, es
decir, para unirse a otros cidos nucleicos de
forma especfica mediante un fenmeno
denominado complementariedad19.
Los microarrays de ADN son herramientas
moleculares que permiten analizar la expresin
gnica por medio de la cuantificacin del ARN
expresado en una muestra concreta20. Un
microarray de ADN consiste en un soporte sobre el
cual se inmovilizan en posiciones concretas
pequeos fragmentos de ADN de secuencia conocida
denominados sondas. El ARN procedente de la
muestra que se desea analizar se transcribe a ADN
copia mediante transcripcin inversa, ya que estas
molculas son ms estables que el ARN y es posible
aadir marcadores que permitan su deteccin.
Mediante la hibridacin del ADNc procedente de
muestras diferentes con las sondas inmovilizadas en
el soporte, es posible identificar el gen concreto que
se expresa en cada muestra. La intensidad de los
puntos del microarray indicar la cantidad de ARN
presente en ese punto. Las principales limitaciones
de los microarrays se refieren a su elevado coste por
unidad.

18
Kramer, R. et Cohen, D. (2004). Functional genomics to new drug targets. Nature Reviews. Vol. 3: 965-972.
19
El ADN est compuesto por dos cadenas enrolladas alrededor de s mismas que forman una doble hlice, cada una de
ellas formada por millones de bloques qumicos llamados bases, y denominadas por las letras A, T, G y C. Estas bases
poseen la capacidad de unirse entre s de forma especfica, de modo que las uniones entre las bases A-T y G-C son
complentarias entre s.
20
Lpez, M.; Mallorqun, P.; Vega, M. (2002). Microarrays y Biochips de ADN: Informe de Vigilancia Tecnolgica. Genoma
Espaa, Crculo de Innovacin en Biotecnologa y Fundacin General de la Universidad Autnoma de Madrid.

13
 Identificacin de dianas mediante tcnicas de anlisis de la expresin gnica

Tcnicas basadas Tcnicas basadas Tcnicas basadas

en la PCR en la secuenciacin en la hibridacin

ARN

Transcripcin inversa

ADN copia

Electroforesis en geles Anlisis serial de expresin

Microarrays
de poliacrilamida (PAGE) gnica (SAGE)

Protena A Protena B Hibridacin sobre un soporte con

sondas de ADN complementarias
ARN
S-S

Desnaturalizacin Liberacin de fragmentos

especficos de cada ARN

SH
HS

Deteccin por fluorescencia

Secuenciacin

Cuantificacin

Separacin mediante
electroforesis
Fig. 5. Validacin de dianas mediante tcnicas de anlisis de la expresin gnica.
Fuente: Velculescu, V. E. et al. (2000). Analysing uncharted transcriptomes with SAGE. Trends Genet. Oct;16(10): 423-5;
University of Miami Department of Biology Homepage
(http://fig.cox.miami.edu/~cmallery/255/255hist/ecbxp4xSDS.jpg).

2.2. Interacciones genes presentes en el ADN. Dado que la mayora

protena-protena
Las tcnicas genmicas anteriormente
mencionadas determinan la expresin de los
genes en una clula o tejido, pero no permiten el
estudio de las interacciones entre protenas21. Las
protenas son las molculas responsables de
desempear las funciones controladas por los
de las dianas de frmacos son protenas, su
estudio resulta esencial en el proceso de
validacin de dianas.
La protemica permite comprender el
funcionamiento de la clula a travs del estudio
del conjunto de protenas que contiene una clula
o tejido o proteoma22. Por medio de tcnicas
protemicas es posible comparar perfiles de

21
Kramer, R. et Cohen, D. (2004). Functional genomics to new drug targets. Nature Reviews. Drug discovery. Vol. 3: 965-972.
22
Lindsay, M. A. (2003). Target discovery. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol. 2: 831-838.

14
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

expresin de protenas de tejidos y clulas sanas Los microarrays de protenas consisten en un

con los perfiles de expresin en muestras
enfermas, lo que permite asociar dianas proteicas
a determinados procesos patolgicos. Por otro
lado, existen tcnicas que permiten estudiar las
interacciones entre protenas a gran escala y
establecer redes de interacciones entre las
protenas de la clula. El conocimiento de estas
redes permite conocer las rutas implicadas en
procesos patolgicos y el conjunto de las
protenas implicadas en una determinada
enfermedad, es decir, potenciales dianas
23
teraputicas .
2.2.1 Microarrays de protenas
Los microarrays de protenas se basan en la
tecnologa desarrollada para la fabricacin de los
microarrays de ADN. En este caso, en vez de
cidos nuclicos, las molculas que se inmovilizan
sobre el soporte son de naturaleza proteica, como
anticuerpos24, enzimas o protenas de otro tipo25.
soporte slido sobre el que se inmovilizan protenas
especficas en posiciones concretas. Los microarrays
de protenas y anticuerpos permiten el anlisis a
gran escala de los perfiles de expresin de protenas
y el estudio de las interacciones entre las mismas26.
Por medio del empleo de muestras procedentes de
tejidos sanos y enfermos, los microarrays de
protenas permiten estudiar la expresin diferencial
de protenas en tejidos enfermos y relacionar las
diferencias en el perfil de expresin proteica con el
fenotipo de la enfermedad, lo que permite identificar
y validar dianas potenciales de una enfermedad.
Existen tres tipos de microarrays de protenas en
funcin de las molculas que interaccionan entre s.
De esta forma, nos encontramos con microarrays de
interacciones protena-protena, ADN-protena, y
enzima-sustrato27.
Las principales limitaciones tcnicas de los
microarrays de protenas se refieren a la dificultad
para detectar e identificar protenas de modo
especfico en comparacin con los microarrays de
cidos nuclicos, que no poseen esta limitacin28.

Interaccin Interaccin Interaccin Interaccin Interaccin

prot-prot ADN-prot prot-molcula antic-prot enzima-sustrato

Figura 6. Interacciones de protenas en validacin de dianas.

Fuente: Smith, M. G. & Snyder, M. (2005). Global analysis of protein function using protein microarrays.
Mech. Ageing Dev. 126(1):171-5.

23
Brown, D. & Superti-Furga, G. (2003). Rediscovering the sweet spot in drug discovery. Drug Discovery today. 8 (23):
1067-1077.
Pillutla, R. C., et al. (2002). Target validation and drug discovery using genomic and protein-protein interaction
technologies. Expert Opin. Ther. Targets, 6(4): 517-531
24
Los anticuerpos son protenas especializadas producidas por el sistema inmunolgico que se unen a partculas extraas
denominadas antgenos.
25
Kramer, R. et Cohen, D. (2004). Functional genomics to new drug targets. Nature Reviews. Vol. 3: 965-972.
26
Kumble, K. D. (2003). Protein microarrays: new tools for pharmaceutical development. Anal Bioanal Chem. 377: 812-819.
27
Wang, S., et al. (2004). Tools for target identification and validation. Curr. Op. in Chem. Biol. 8: 371-377.
28
Kramer, R. et Cohen, D. (2004). Functional genomics to new drug targets. Nature Reviews. Vol. 3: 965-972.

15
2.2.2. Sistema doble hbrido
El sistema doble hbrido es una herramienta
molecular que permite el estudio a gran escala de
las interacciones protena-protena a travs de las
protenas que regulan la expresin gnica,
denominadas factores de transcripcin29. Estas
protenas son las encargadas de regular la
expresin de los genes mediante su activacin o
represin. La mayora de los factores de
transcripcin presentan dos regiones o dominios,
un dominio de unin al ADN y un dominio
responsable de la activacin del gen. Ambos
dominios son esenciales para que tenga lugar la
expresin gnica, aunque no tienen porqu
formar parte de una misma protena30.
La identificacin de dianas teraputicas mediante el
sistema doble hbrido analiza las interacciones
entre dos protenas diferentes, que se unen a los
dominios de unin de ADN y activacin de un gen
que se utiliza como indicador respectivamente. La
unin de los dos dominios a travs de las protenas
fusionadas permite la activacin de la expresin del
gen indicador, por lo que su presencia pondr de
manifiesto la existencia de una interaccin entre
las dos protenas31. El sistema doble hbrido
aprovecha la maquinaria celular de la levadura S.
cerevisiae, que se utiliza como sistema de
expresin de ambas protenas de fusin. Por otro
lado, esta tcnica permite estudiar la interaccin
entre protenas y construir redes de interacciones
de todo el proteoma, proporcionando una visin
global de la maquinaria molecular32.

Dom.
Activ.
Dom.
Activ.
Protena
2
Protena Protena Protena
1 2 3

Dom. Expresin del Dom. Sin expresin del

unin gen indicador unin gen indicador
ADN ADN

Promotor Gen indicador Promotor Gen indicador

Figura 7. Funcionamiento del sistema doble hbrido.

Fuente: Elaboracin propia.

La principal limitacin de esta tcnica radica en que
no permite analizar las interacciones entre
protenas localizadas en compartimentos diferentes
de la clula, limitando por tanto su aplicacin. Por
otra parte, es habitual la presencia de falsos
positivos provocados por la activacin del gen
indicador por parte de otras protenas de la
levadura, adems de falsos negativos debido a
problemas en la unin de las dos protenas33.

29
Factor de transcripcin: protenas que regulan la expresin de determinados genes, mediante la activacin o represin de
su expresin.
30
Coates, P. J. & Hall, P. A. (2003). The yeast two-hybrid system for identifying protein-protein interactions. Journal of
Pathology 199:4-9.
31
Pillutla, R. C. et al. (2002). Target validation and drug discovery using genomic and protein-protein interaction
technologies. Target Validation and Drug Discovery. 6 (4): 517-531.
32
Parsons, A. B. et al. (2003). Yeast genomics and proteomics in drug discovery and target validation. Progress in Cell
Cycle Research. Vol 5. 159-166.
33
Coates, P. J. & Hall, P. A. (2003). The yeast two-hybrid system for identifying protein-protein interactions. Journal of
Pathology 199:4-9.

16
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
3. Tcnicas de validacin de dianas
A pesar de que las tcnicas anteriormente
mencionadas arrojan informacin relevante sobre
la funcin de las dianas, su objetivo principal
radica en la identificacin a gran escala de nuevas
dianas teraputicas y no en la validacin de las
mismas. A continuacin se describen aquellas
tcnicas empleadas en etapas posteriores del
proceso de I+D, en las cuales es necesaria la
validacin de la funcin de las dianas moleculares
ya identificadas. Las principales estrategias estn
encaminadas a la modulacin de la expresin
gnica, la inactivacin de la funcin de las dianas
proteicas, y el anlisis de la expresin gnica a
gran escala. Por ltimo, se describen las tcnicas
de desarrollo de modelos vivos de enfermedad.
3.1. Modulacin
de la expresin gnica
La tcnicas de modulacin de la expresin gnica
persiguen bloquear o activar de forma especfica la
expresin de genes mediante diferentes estrategias
a nivel del ARN mensajero, a travs del empleo de
oligonucletidos modificados34. Estas
modificaciones les permiten conseguir una serie de
propiedades entre las que se encuentran la entrada
al interior de las clulas, la resistencia a la
degradacin y el aumento en la afinidad por la
molcula de ARN. Las tecnologas antisentido se
emplean en validacin de dianas sobre cultivos de
tejidos o clulas, as como en modelos animales35.
Las tcnicas de modulacin de la expresin gnica
ms habituales consisten en el bloqueo de la
expresin gnica a nivel del ARN impidiendo que
un gen concreto se exprese y por tanto
consiguiendo que la protena no se sintetice. Esta
34
Los oligonucletidos son molculas de cido nuclico de longitud reducida que se pueden emplear para bloquear el ARN
mensajero e impedir su funcin.
35
Ilag, LL, et al. (2002). Emerging high-throughput drug target validation technologies. Drug Discovery Today 7(18
Suppl):S136-42.
36
Stone, L. S. et Vulchanova, L. (2003). The pain of antisense: in vivo application of antisense oligonucleotides for
functional genomics in pain and analgesia. Advanced Drug Delivery Reviews 55, 1081-1112.
DE DIANAS TERAPUTICAS
estrategia de validacin permite comprobar la
existencia de modificaciones en el fenotipo de
organismos o clulas en ausencia de expresin
del gen. De este modo, se consigue reproducir el
efecto que producira la ausencia o inactivacin de
la protena, lo que resulta de suma utilidad para
validar dianas al permitir relacionar el fenotipo
asociado a la enfermedad con un gen en
concreto. Otras tcnicas de validacin de dianas
basadas en la modulacin de la expresin
permiten activar la expresin de genes especficos
provocando la transcripcin de ARN a partir del
ADN.
3.1.1. Oligonucletidos antisentido
Los oligonucletidos antisentido son pequeos
fragmentos de nucletidos de unos 15 o 20 pares
de bases de ADN o ARN de cadena sencilla, que
son complementarios a un fragmento del ARN
diana. Esta complementariedad permite su unin al
ARN de forma especfica, bloqueando su expresin
e impidiendo la produccin de la protena diana.
Los oligonucletidos antisentido inhiben la
expresin proteica mediante dos mecanismos
diferentes. En algunos casos el ARN emparejado
con el oligonucletido es fragmentado por accin
de una enzima que reconoce el ARN emparejado
con ADN. Tras este corte, el ARN queda daado y
el oligonucletido antisentido en cambio no sufre
alteracin alguna de modo que puede seguir
unindose al ARN. En otros casos no se produce
un corte en el ARN, pero el emparejamiento con
el oligonucletido puede impedir procesos
esenciales para la produccin de protenas a partir
del ARN36.
17
 Ribosomas

Comienzo de la sntesis de protenas

ARNm

Oligo antisentido

Unin de un oligonucletido antisentido

Corte del ARNm por la enzima Ribonucleasa H

Inhibicin de la expresin de la protena

Figura 8. Tecnologas de oligonucletidos antisentido en validacin de dianas.

Fuente: Silencing code. Chemsoc, Royal Society of Chemistry (http://www.chemsoc.org/chembytes/ezine/1997/dna.htm).

En general, el empleo de oligonuclotidos duracin. Este problema se ha solucionado

antisentido es una herramienta de validacin de
dianas que proporciona una elevada especifidad.
Sin embargo, esta selectividad requiere como
contrapartida el diseo detallado de oligonucletidos
ya que existen numerosas variables que afectan a
la especificidad de los oligos37. Otra desventaja que
plantea el uso de los oligonucletidos antisentido es
que son muy inestables y se degradan rpidamente
en clulas y tejidos. Esta limitacin puede ser
atenuada mediante modificaciones qumicas que
mejoren su estabilidad. Asmismo, la administracin
y distribucin de oligonucletidos a los cultivos
celulares constituye un paso limitante y
habitualmente es necesario combinarlos con
compuestos que facilitan la entrada de los
oligonucletidos a las clulas, como los liposomas38.
La inhibicin de la expresin gnica mediante
oligonucletidos antisentido es un proceso que
tiene lugar de manera transitoria, lo que supone
una limitacin en el silenciamiento de la expresin
de protenas con una vida media de larga
mediante el empleo de estructuras de ADN
denominadas vectores de expresin, las cuales
contienen la informacin necesaria para dirigir la
sntesis de oligonucletidos antisentido en el
interior de la clula. Estos vectores ofrecen la
ventaja de ser ms estables que los
oligonucletidos antisentido desnudos, por lo que
se consigue una inhibicin de la expresin gnica
ms prolongada39.
3.1.2. ARN de interferencia
El ARN de interferencia (ARNi) es una tecnologa
que se basa en el empleo de molculas de ARN
de doble cadena para bloquear la expresin de
genes especficos. El mecanismo del ARNi est
presente en la naturaleza y es una respuesta
celular innata que permite combatir las
infecciones virales regulando la expresin
del ARN.

37
Hall, J. (2004). Unravelling the general properties of siRNAs: strength in numbers and lessons form the past. Nature
Reviews. Genetics 5: 552-557.
38
Lee, L. K. et Roth, C. M. (2003). Antisense technology in molecular and cellular bioengineering. Current Opinion in
Biotechnology. 14: 505-511.
39
Dykxhoorn, D. M., et al. (2003). Killing the messenger: short RNAs that silence gene expression. Nature Rev. Mol. Cell
Biol. 4, 457467.

18
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

En los ensayos de validacin de dianas, el ARNi
de doble cadena se introduce en el interior de las
clulas mediante distintos mtodos.
Posteriormente, este ARNi de doble cadena es
procesado enzimticamente dando lugar a
molculas de ARN ms pequeas denominadas
pequeos ARNs de interferencia o ARNsi (small
interfering RNAs). Estos ARNsi son de doble
cadena y estn por tanto formados por dos
hebras complementarias y emparejadas. Los
ARNsi son reconocidos por el complejo RISC
(RNA-induced silencing complex), el cual se une
a molculas de ARNm complementarias,
facilitando la degradacin de stas. Asimismo, es
posible administrar directamente el ARNsi a la
clula, en cuyo caso no sera necesaria ninguna
de las etapas anteriores. De este modo, tanto el
ARNi como el ARNsi son herramientas tiles para
la inactivacin especfica de la expresin de
genes40.

ARN de doble cadena

ARNi de
doble cadena

Activacin del complejo

RISC por ARNi de
cadena sencilla

ARNm Reconocimiento
de la diana

Rotura del ARNm

Figura 9. Tecnologas de ARNi en validacin de dianas.

Fuente: Dykxhoorn, D. M., et al. (2003). Killing the messenger: short RNAs that silence gene expression. Nature Reviews.
Molecular Cell Biology. Vol. 4,457-467.

Las principales ventajas de los ARNi radican en su
bajo coste y alta especificidad, por lo que
constituyen una herramienta molecular que est
sustituyendo a los oligonucletidos antisentido
como mtodo de modulacin de la expresin
gnica41. Por otro lado, el ARNi puede emplearse
como herramienta para el estudio de la biologa
de organismos completos a escala genmica
mediante microarrays de clulas transfectadas
con ARNi. Esta estrategia ha sido empleada con
xito en lneas celulares procedentes de modelos
animales, siendo inminente su aplicacin en
clulas humanas42.
El empleo de ARNi presenta bsicamente los
mismos problemas que las tecnologas antisentido
y se refieren principalmente a las dificultades de
administracin y distribucin en cultivos celulares
y tejidos, vindose agravada la situacin en
estudios in vivo. Estos problemas se han
solucionado en parte mediante el empleo de
vehculos de administracin como liposomas, o
vectores de expresin como plsmidos y virus43.
Por otra parte, las tcnicas de ARN interferente
pueden dar lugar a efectos inespecficos debidos a
la unin de alguna de las dos hebras del ARNsi a
molculas de ARNm distintas del ARN diana44.

40
Wang, S., et al. (2004). Tools for target identification and validation. Current Opinion in Chemical Biology. 8: 371-377.
41
Lindsay, M. A. (2003). Target discovery. Nature Reviews: Drug Discovery. 2: 831-838.
42
Gunsalus, K. C. & Piano, F. (2005). RNAi as a tool to study cell biology: building the genome-phenome bridge.
Curr. Op. in Cell Biology 17:3-8.
43
Cocks, B. G. & Theriault, T. P. (2004). Developments in effective applicaction of small inhibitory RNA (siRNA) technology
in mammalian cells. DDT: Targets. Vol. 3(4):165-171.
44
Lee, L. K. & Roth, C. M. (2003). Antisense technology in molecular and cellular bioengineering. Current Opinion in
Biotechnology. 14: 505-511.

19
Como solucin a este tipo de problemas se han diseado molculas de ARN interferente modificadas
qumicamente que evitan la aparicin de efectos no especficos45. Por otra parte, mientras que la tecnologa
de ARNi ha sido aplicada con xito in vitro en numerosas ocasiones en la validacin de dianas teraputicas,
su empleo in vivo todava no ha alcanzado el mismo grado de desarrollo.

Otro tipo de mejoras que se estn desarrollando en tecnologas de ARN interferente incluyen la
administracin directa de ARNsi de cadena sencilla en clulas, que ha demostrado ser efectivo en muchos
tipos celulares aunque de forma transitoria. Para solucionar este problema se ha recurrido a los ARNsh
(short hairpin), molculas de ARN con secuencias repetidas invertidas que forman estructuras en forma
de horquilla, y que dan lugar a una inhibicin mucho ms estable de la expresin gnica46.

Similitudes y diferencias entre Oligonucletidos antisentido y ARNsi47

Similitudes Diferencias

Fragmentos cortos de cidos nucleicos
(aprox. 20 bases).
Metodologa comn para la administracin a
cultivos celulares.
Inducen el silenciamiento de la expresin
gnica mediante su unin al ARNm.
Los ARNsi y ciertos oligos antisentido
provocan la ruptura del ARNm.
Sus propiedades pueden alterarse mediante
modificacin de las bases.
Perfiles de biodistribucin similares.
Dos hebras para el ARNsi, una hebra para
oligos antisentido.
ARN de doble hebra es ms estable que
cidos nucleicos de una sola hebra.
Las modificaciones qumicas no son tan
necesarias para su administracin en cultivos
celulares en el caso de los ARNi.
Mediacin del complejo RISC en el ARNi.
Activacin de la enzima ARNasa en oligos
antisentido.
Aplicacin ms extendida de la tcnica de ARNi.

3.1.3. Ribozimas

Las ribozimas son pequeas molculas de ARN que actan como enzimas y que pueden cortar otras
molculas de ARN en sitios especficos. La unin entre el ribozima y el ARN diana se produce por
complementariedad y apareamiento entre ambas molculas. De este modo, se pueden disear ribozimas
que reconozcan cualquier ARN diana simplemente variando la regin de reconocimiento del ribozima.

ARNm

Ribozima

Figura 10. Ribozimas en la validacin de dianas.

Fuente: Chattterton, J. E. et al. (2004). Ribozymes in gene identification, target validation and drug discovery.
DDT: Targets, Vol. 3(1):10-17.

45
Samarsk, D. & Datta, M. (2003). Expediting target identification and validation through RNAi. Expert Rev. Mol. Diagn.
4(1):11-14.
46
Walgren, J. L. & Thompson, D. C. (2004). Application of proteomic technologies in the drug development process. Toxicol
Lett. 149:377-85.
47
Paroo, Z. & Corey, D. R. (2004). Challenges for RNAi in vivo. Trends in Biotechnology. Vol. 22, No. 8: 390-394.

20
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Las principales limitaciones de los ribozimas se bloqueo o activacin de la expresin gnica en

deben a su inestabilidad y sensibilidad a la
degradacin, menor especificidad y restricciones
en el diseo. Los ribozimas pueden ser
modificados qumicamente para incrementar su
estabilidad. Por otro lado, es posible introducir en
la clula vectores que dirigen la sntesis de
ribozimas de tal modo que dicha sntesis ocurra
directamente en el interior de las mismas. En este
caso, el nivel de produccin de ribozima en la
clula ser de suma importancia para que se
produzca una reduccin significativa en el nivel de
ARN diana48.
3.1.4. Protenas de dedos de zinc
Una alternativa a las anteriores tcnicas de
modulacin de la expresin gnica es el diseo de
protenas de dedos de zinc como agentes de
cultivos celulares. Los dedos de zinc son regiones
presentes en protenas tales como los factores de
transcripcin que participan en la iniciacin de la
transcripcin, es decir, el paso de ADN a ARN
previo a la sntesis de protenas. Estos factores de
transcripcin poseen unas estructuras
caractersticas en forma de dedos unidos por un
in de zinc, los cuales reconocen secuencias
especficas del ADN. Esta particularidad es de
gran utilidad en la validacin de dianas ya que se
pueden disear protenas con dedos de zinc que
reconozcan especficamente la secuencia de ADN
que se desea bloquear o activar. La activacin o
represin de la expresin gnica se consigue
mediante la unin de dominios activadores o
represores respectivamente a las protenas de
dedos de zinc. La asociacin entre la modulacin
de la expresin gnica de la diana con el fenotipo
o estado patgico, ser la que determine
finalmente la validacin de la diana49.

Activacin de la expresin gnica

ADN

Bloqueo de la expresin gnica

Protena de 3 dedos de Zinc

ADN

Figura 11. Modulacin de la expresin gnica mediante protenas de dedos de Zinc.

Fuente: Jamieson, A.C. et al. (2003). Drug discovery with engineered zinc-finger proteins. Nature Reviews: Drug
Discovery. Vol. 2: 361-368.

48
Chatterton, J. E., et al. (2004). Ribozymes in gene identification and drug discovery. Drug Discovery Today: Targets,
vol. 3, No. 1, 10-17.
49
Jamieson, A. C., et al. (2004). Drug Discovery with Engineered Zinc-finger Proteins. Nature Reviews: Drug Discovery.
Vol. 2, 361-368.
Wang, S., et al. (2004). Tools for target identification and validation. Current Opinion in Chemical Biology. 8: 371-377.

21
La principal ventaja de esta tcnica frente al resto
de tcnicas de modulacin de la expresin gnica
consiste en que es ms estable que las
estrategias que emplean cidos nucleicos. Por
otro lado, el diseo de estas protenas requiere la
identificacin previa de las secuencias de ADN
susceptibles de ser reconocidas por los dedos de
zinc, que se corresponden con regiones del
genoma de baja condensacin. Este mapeado se
realiza mediante enzimas ADNasas, que
reconocen regiones del ADN con baja
condensacin y por tanto ms accesibles a los
factores de transcripcin50. Otra limitacin a tener
en cuenta es la dificultad en la administracin de
protenas de dedos de zinc, que afecta por igual a
todas las tecnologas de modulacin de la
expresin gnica mencionadas en el presente
informe. Este problema se puede solucionar por
medio del empleo de vehculos moleculares
llamados vectores que permitan introducir genes
en las clulas . 51
3.2. Inactivacin de protenas
Debido a que la mayora de los frmacos que
actualmente se encuentran en el mercado actan
sobre protenas, parece lgico pensar que la
validacin de dianas proteicas ha de ser una
estrategia fundamental en el proceso de
desarrollo de un frmaco52. La validacin de
dianas mediante tcnicas de modulacin de la
expresin gnica no siempre est relacionada de
forma directa con la expresin de la protena. En
numerosas ocasiones, se ponen en marcha una
serie de mecanismos moleculares que modifican
la protena hasta dar lugar a la molcula
responsable del fenotipo final, y que por tanto
seran imposibles de identificar nicamente
mediante tecnologas de modulacin de la
expresin gnica53. As mismo, algunas protenas
estn formadas por varios dominios
multifuncionales, por lo que la inhibicin de la
expresin de uno de los genes que codifica un
nico dominio no proporciona datos extrapolables
a la funcin de la protena completa. Por este
motivo, las tcnicas basadas en la inactivacin de
protenas son esenciales en la validacin de
numerosas dianas teraputicas54.
En el presente apartado se agrupan tcnicas que
permiten el bloqueo o inactivacin de protenas
especficas de modo que stas dejan de ejercer su
funcin. El efecto observado tras la inactivacin
de la protena diana permite relacionar dicha
protena con su funcin concreta, y de esta forma
resulta posible asociar un fenotipo determinado a
una protena concreta.
3.2.1. Qumica gentica
La estrategia clsica de validacin de dianas o
qumica gentica consiste en el empleo de
pequeas molculas que se unen a las dianas de
modo especfico provocando su inactivacin. De
esta forma, se consigue inactivar la funcin de
una protena especfica, lo que permite establecer
una relacin entre la actividad de la misma y los
efectos que se manifiesten en los cultivos de
clulas, tejidos o animales55. A diferencia de las
estrategias genticas, la qumica gentica permite
la alteracin del fenotipo de forma directa y
ocurre en tiempo real. Esta modificacin en la
funcin proteica no es permanente, ya que su
efecto es reversible si se eliminan los restos de
estas molculas del medio. Este enfoque resulta
muy til a la hora de validar dianas mediante el
empleo de pequeas molculas, ya que permite
asociar un fenotipo de inters con la accin de
una determinada molcula sobre una diana
concreta56.
Adems de permitir analizar la funcin celular y
validar dianas moleculares, estas pequeas
molculas pueden emplearse como base para
obtener potenciales frmacos. A partir del
conocimiento de la estructura qumica del
compuesto activo, es posible disear nuevas
molculas de cara a su potencial aplicacin

50
Liu, P-G., et al. (2001). Regulation of an endogenous locus using a panel of designed zinc finger proteins targeted to
accessible chromatin regions. Activation of vascular endothelial growth factor. J. Biol. Chem., 276:11323-11334.
51
Peet, N. P. (2003). What constitutes target validation? Targets 2 (4): 125-127.
52
Smith, M. B. (2003). Hitting the target. Nature, vol. 422, 341-347.
53
Walgren, J. L. & Thompson, D. C. (2004). Application of proteomic technologies in the drug development process.
Toxicol Lett. 149:377-85.
54
Ilag, L. L., et al. (2002). Emerging high-throughput drug target validation technologies. DDT Vol. 7. N 18 (Suppl.) S136-142.
55
Peet, N. P. (2003). What constitutes target validation? Targets. Vol. 2, No. 4: 125-127.
56
Chanda, S. K., et al. (2003). Fulfilling the promise: drug discovery in the post-genomic era. Drug Discovery Today. Vol. 8,
No. 4: 168-174.

22
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

farmacutica. Una de las principales limitaciones 3.2.2. Anticuerpos monoclonales

de esta estrategia consiste en que requiere la
disposicin de pequeas molculas que sean
capaces de interaccionar de modo selectivo con
protenas, lo que no es posible en todas las
ocasiones57.
Las estrategias de qumica gentica son de gran
utilidad en aquellos casos en los cuales los genes
de inters son esenciales para la supervivencia
del organismo, y su alteracin es inviable para el
funcionamiento de la clula. La principal limitacin
de esta tcnica consiste en que no siempre se
dispone de pequeas molculas que acten de
modo especfico sobre la protena celular de
inters.
Los anticuerpos son protenas desarrolladas por el
organismo con el fin de combatir infecciones
mediante el bloqueo de agentes infecciosos de forma
especfica. Esta seleccin y accin inhibitoria es de
gran utilidad en la validacin de dianas proteicas, por
lo que se han desarrollado diferentes tcnicas de
fabricacin de anticuerpos monoclonales58 a gran
escala como el phage-display y el doble hbrido59.
En el caso de que las dianas se encuentren en el
interior de la clula, es necesaria la administracin de
anticuerpos mediante microinyeccin, o bien la
expresin de los mismos en el interior de la clula
mediante vectores de expresin, denominndose en
este caso intracuerpos.

Anticuerpo intracelular

Protena diana Interaccin de la Protena diana

y el anticuerpo monocional

Figura 12. Inactivacin de protenas mediante anticuerpos, aplicacin en la validacin de dianas.

Fuente: Iclectus Ltd. (http://www.iclectus.com/technology/intrabodies.htm#figure1).

Una de las limitaciones de los anticuerpos es su
inestabilidad en el interior de las clulas, por lo
que las estrategias que se estn desarrollando en
la actualidad van encaminadas al diseo de
anticuerpos ms estables y eficientes.
El principal problema que presentan los
anticuerpos como agentes de validacin de dianas
es el bajo nmero de estas molculas que dan
lugar a una inactivacin efectiva de sus dianas
proteicas60.

57
Williams, M. (2003). Target validation. Curr Opin Pharmacol. 3(5): 571-7.
58
Los anticuerpos monoclonales son anticuerpos especficos que pueden ser producidos en grandes cantidades por clulas
que se originan a partir de una lnea celular (hibridoma). Todos los anticuerpos monoclonales producidos por una clula
hbrida son idnticos.
59
Pillutla, R. C., et al. (2002). Target Validation and drug discovery using genomic and protein-protein interaction
technologies. Expert Opinion on Therapeutic Targets, 6 (4): 517.531.
60
Ilag, L. L., et al. (2002). Emerging high throughput drug target validation technologies. Drug Discovery Today 7 (18):
136-142.

23
3.2.3. Aptmeros

Los aptmeros son nucletidos artificiales capaces de reconocer y unirse a molculas especficas debido a
su particular estructura terciaria. Es posible disear y construir aptmeros que unan e inhiban
prcticamente cualquier protena diana.

Aptmero

Protena diana Interaccin de la Protena

diana y aptmero

Figura 13. Inactivacin de protenas mediante Aptmeros, aplicacin en la validacin de dianas.

Fuente: Archemix Corp. (http://www.archemix.com/tech_aptapp.html).

Los aptmeros presentan problemas de aptmeros se consigue mediante la construccin

inestabilidad que se han solucionado mediante
modificaciones qumicas que incrementan su
estabilidad. Al igual que en el caso de los
anticuerpos, una solucin al problema de
administracin consiste en el empleo de vectores
de expresin que permiten la sntesis de
aptmeros en el interior de la clula61. Otra de
sus principales limitaciones reside en la
preferencia de unin de los aptmeros hacia
formas determinadas de la superficie de las
protenas, lo que implica una limitacin a la hora
de validar dianas proteicas. Por otro lado, la
naturaleza negativa de las molculas de cidos
nucleicos que conforman los aptmeros supone
un impedimento a la hora de bloquear protenas
con dominios cargados negativamente62.
Los aptmeros tambin pueden ser inmovilizados
sobre microarrays de manera similar a los
microarrays de ADN, con el objeto de ser
empleados en la validacin de dianas proteicas.
Las ventajas de esta tcnica radican en su alta
especificidad y sensibilidad. La deteccin de los
de aptozimas, aptmeros conjugados con
dominios de ribozimas, o bien pares de
aptmeros que reconocen simultneamente a la
protena diana. En el primer caso, la unin de la
aptozima a la diana provoca un cambio
conformacional que altera la actividad de la
ribozima. En el segundo caso, la unin de
aptmeros adyacentes a la diana crea un puente
de oligonucletidos que provoca el ligamiento del
nucletido conector, que posteriormente es
amplificado y detectado por PCR. Esta ltima
estrategia ofrece una sensibilidad potencialmente
superior al ELISA hasta 1.000 veces63.
3.2.4. Pptidos
Los pptidos son fragmentos de protenas que
pueden ser diseados como agentes de unin a
dianas proteicas bloqueando su funcin o bien
inhibendo su interaccin con protenas
intracelulares64.

61
Epstein, D. M., et al. (2002). Target Validation with Nucleic Acid Aptamers. Mimicking small molecule therapeutics by
attacking the protein, and not the gene. Pharmaceutical Discovery and Development. PharmaVentures Ltd.
62
Ilag, L. L., et al. (2002). Emerging high throughput drug target validation technologies. Drug Discovery Today 7 (18):
136-142.
63
Walgren, J. L. & Thomson, D. C. (2004). Application of proteomic technologies in the drug development process.
Toxicology Letters 149: 377-385.
64
Ilag, L. L., et al. (2002). Emerging high throughput drug target validation technologies. Drug Discovery Today 7 (18):
136-142.

24
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Los pptidos presentan ciertas ventajas
como agentes de validacin de dianas
principalmente debido a su fcil produccin. Por
otro lado, existen diversos sistemas que permiten
identificar los pptidos que inhiben dianas
concretas, entre las que cabe destacar la tcnica
del doble hbrido y el phage display . 65
La principal limitacin de los pptidos consiste en
que presentan problemas de afinidad y
selectividad, por lo que no es una tcnica que por
s sola permita la validacin de una diana
teraputica66.
3.2.5. Inactivacin por lser
mediante cromforos
y fluorforos
La tcnica CALI67 o inactivacin por lser
mediante cromforos, consiste en el empleo de
cromforos, molculas que absorben la luz de una
determinada longitud de onda, unidos a un
anticuerpo, pptido o aptmero.
Al exponer estas molculas a luz lser, se inducen
daos fotoqumicos en la protena diana de modo
irreversible en las zonas de unin al anticuerpo,
pptido o aptmero, inactivando la protena de
modo especfico68. Esta tcnica de validacin de
dianas ha demostrado ser eficaz en el caso de su
empleo con anticuerpos, ya que se aprovecha de
la selectividad de los anticuerpos y mejora
sensiblemente su poder de inhibicin de la funcin
de la protena diana69.
Una alternativa a esta tcnica consiste en la
utilizacin de fluorforos que reaccionan ante luz
difusa y que por tanto no requieren fuentes de luz
especiales. Esta tcnica se denomina FALI70 o
inactivacin por lser mediante fluorforos71. La
principal ventaja de esta tnica radica en que
permite modificar un rea ms amplia de la
protena, asegurando una inactivacin ms
efectiva de la protena diana. Tras la inactivacin
de la diana es necesario purificar el complejo
formado por el anticuerpo unido al cromforo o
fluorocromo junto con la protena diana, y
posteriormente identificar esta ltima72.

Protena Unin protena-ligando Emisin Inactivacin del dominio

diana (anticuerpo, pptido de luz lser funcional de la protena
o aptmero) diana

Figura 14. Inactivacin por lser mediante cromforos y fluorforos aplicado a la validacin de dianas.
Fuente: Hanash, S. (2003) Disease proteomics. Nature 422, 226-232.

3.3. Anlisis de la expresin gnica in situ

Las tcnicas de anlisis de la expresin gnica como los microarrays de ADN permiten la identificacin de
genes implicados en procesos patolgicos. Sin embargo, la mayora de los patrones de expresin obtenidos
requieren de pasos posteriores de validacin que posibiliten realizar una asociacin entre la expresin de
un gen y su fenotipo. Las tcnicas de anlisis de la expresin gnica mediante microarrays de tejidos y
clulas son dos tcnicas empleadas en la validacin clnica y funcional de dianas respectivamente.

65
Caponigro, G., et al. (2003). Functional analisis of expressed peptides that bind yeast STE proteins. Journal of
Biotechnology 103: 213-225.
66
Henning, S. W. & Beste, G. (2002). Loss-of-function strategies in drug target validation. Current Drug Discovery May. 17-21.
67
CALI: Chromophore assisted lasser inactivation.
68
Peet, N.P. (2003). What constitutes target validation? Targets. Vol. 2, No. 4: 125-127.
69
Henning, S. W. & Beste, G. (2002). Loss-of-function strategies in drug target validation. Current Drug Discovery May. 17-21.
70
FALI: Fluorophore assisted lasser inactivation.
71
Beck, S., et al. (2202). Fluorophore-assisted light inactivation: A high-throughput tool for direct target validation of
proteins. Proteomics 2: 247-255.
72
Ilag, LL. (2003). Direct methods for modulating protein function. Current Opinion in Drug Discovery & Development 6(2):
262-268.

25
3.3.1. Microarrays de tejidos
Los microarrays de tejidos (TMAs, Tisssue
Microarrays) consisten en colecciones
miniaturizadas de hasta 1.000 muestras de
tejidos inmovilizadas sobre un soporte, que
permiten el anlisis in situ de dianas moleculares
simultneamente (ADN, ARN o protenas).
Prcticamente la mayora de los artculos
publicados sobre microarrays de tejidos estn
relacionados con el anlisis de tumores, aunque
se ha demostrado su valor en otro tipo de
patologas relacionadas en el sistema nervioso73.
Las principales ventajas que ofrecen los
microarrays de tejidos frente a otras tcnicas de
validacin se basan en la naturaleza in vivo del
ensayo, que posibilita observar cambios
fenotpicos que no son obvios mediante tcnicas
moleculares. En la actualidad, los principales
desarrollos encaminados a mejorar esta tcnica
se centran en la mejora de la instrumentacin
dedicada a la inmovilizacin de los tejidos en el
array, automatizacin de la obtencin de
imgenes digitalizadas, as como almacenamiento,
anlisis y estandarizacin de la informacin
obtenida74.

Caractersticas de los Microarrays de Tejidos en la validacin de dianas:

Determinacin de la distribucin celular y subcelular de las dianas.

Integracin de la informacin procedente del anlisis de las dianas a nivel del ADN, ARN y protenas.

Confirmacin de los resultados obtenidos mediante tcnicas de validacin in vivo basadas en

modelos animales y microarrays de ADNc.

Anlisis de la prevalencia de dianas en diferentes etapas de progresin de la patologa

(ej.: progresin tumoral).

Correlacin de los datos moleculares con los datos clnicos.

3.3.2. Microarrays de clulas introducen en las clulas, que posteriormente

Hasta la fecha, el anlisis in vivo de la expresin
gnica se realizaba nicamente gen a gen, por
medio de la introduccin de un gen en una clula, y
la posterior observacin de su efecto fisiolgico o
fenotipo. Los microarrays de clulas permiten el
anlisis de la expresin gnica in vivo a gran escala
en clulas humanas, y por tanto son una
herramienta valiosa a la hora de validar dianas
75
teraputicas . La estrategia empleada para su
diseo consiste en el cultivo de clulas sobre
fragmentos de ADN inmovilizados en un microarray.
Estos fragmentos de ADN se transfectan o
expresan las protenas codificadas por su secuencia.
Los cambios fenotpicos que se observen en las
clulas sern empleados para valorar la implicacin
de las dianas teraputicas de inters76.
Una estrategia alternativa consiste en transfectar
las clulas inmovilizadas en el array con ARN
interferente, de modo que en vez de activarse la
expresin de un gen, se produzca el
silenciamiento del mismo. Este bloqueo de la
expresin gnica define un conjunto de puntos en
el array que se correspondern con la expresin
del fenotipo esperado77.

73
Sauter, G., et al. (2003).Tissue microarrays in drug discovery. Nature Review: Drug discovery 2: 962-972.
74
Mousses, S., et al. (2001). Clinical and functional target validation using tissue and cell microarrays. Curr. Op. in Chem.
Biology, 6: 97-101.
75
Wang, S., et al. (2004). Tools for target identification and validation. Curr. Op. in Chem. Biol. 8: 371-377.
76
Mousses, S., et al. (2001). Clinical and functional target validation using tissue and cell microarrays. Curr. Op. in Chem.
Biology, 6: 97-101.
Ziauddin, J. & Sabatini, D. M. (2001). Microarrays of cells expressing defined cDNAs. Nature 411:107-110.
77
Silva, J. M., et al. (2004). RNA interference microarrays: High-throughput loss-of-function genetics in mammalian cells.
PNAS 101, n 17: 548-6552.

26
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Microarrays de Tejidos Microarrays de Clulas

b c

a a b

Inmovilizacin de Transfeccin de las

d clulas en un clulas con mltiples
Microarray de ADNc genes de inters
c

Inmovilizacin de secciones
de tejidos en un array

Visualizacin de la expresin de los

genes en las clulas in vivo

Figura 15. Esquema de funcionamiento de un microarray de tejidos aplicado a la validacin de dianas.

Fuente: Sauter, G., et al. (2003). Tissue microarrays in drug discovery. Nature Reviews. Drug discovery 2: 962-972;
Ziauddin, J. & Sabatini, D. M. (2001). Microarrays of cells expressing defined cDNAs. Nature 411: 107-110.

3.4. Modelos vivos de la enfermedad

El avance en el conocimiento del genoma de diferentes organismos que se ha producido a lo largo de los
ltimos aos ha puesto de manifiesto la existencia de un alto grado de conservacin de la secuencia del
ADN y protenas, as como una similitud en la funcin de los genes y rutas de sealizacin en diferentes
organismos. Este elevado grado de conservacin permite el empleo de otros organismos diferentes del ser
humano como sistemas modelo en el proceso de desarrollo de frmacos. De hecho, se ha descubierto que
existe un elevado grado de similitud con las rutas moleculares implicadas en enfermedades humanas, lo
que hace que el valor de los organismos modelo en la validacin de dianas sea mayor78.

Vertebrados

Ratn Pez cebra Mosca de la fruta

Invertebrados C. elegans

Unicelulares Levadura

Figura 16. Principales sistemas modelo en validacin de dianas.

Fuente: Lindsay, M. A. (2003). Target discovery. Nature Reviews: Drug Discovery. 2: 831-838.

78
Doan, T. N. (2004). High-throughput target validation in model organisms. Drug Discovery Today: Targets. Vol. 3,
N 5: 191-197.

27
En lo concerniente a la validacin de dianas, la
obtencin de un modelo animal que reproduzca la
enfermedad humana constituye de por s un
proceso de validacin de la diana. Al tratarse de un
organismo completo, se puede as demostrar la
implicacin de la diana en la enfermedad in vivo, y
proporciona un grado elevado de evidencia de que
un gen en concreto est implicado en el proceso de
inters. Por otro lado, el modelo animal obtenido
es de gran valor para estudios posteriores
necesarios para el desarrollo del frmaco, como
son los estudios farmacolgicos y toxicolgicos79.

Caractersticas de un modelo animal ideal80

Facilidad de cra en cautividad.

Tiempos de reproduccin cortos.

Descendencia numerosa.

Disponibilidad de mtodos de manipulacin gentica y experimental.

Elevado nmero de genes conservados respecto al ser humano.

3.4.1. Ratones knock-out y knock-in
Los ratones knock-out son ratones a los que se
les ha inactivado uno o varios genes mediante
81
tcnicas de ingeniera gentica , por lo que
carecen de una determinada funcin gnica. Los
ratones knock-out permiten estudiar la funcin
fisiolgica de genes de mamferos y son sistemas
modelo valiosos sobre los que estudiar la eficacia
de los frmacos. Se ha demostrado que el
fenotipo de los ratones knock-out para una
determinada diana se corresponde con los efectos
de los frmacos que actan sobre la diana y la
bloquean82. Los ratones knock-in, en cambio, son
ratones que sobreexpresan el gen de inters
mediante la introduccin de varias copias del gen
durante el desarrollo embrionario del ratn.
Una estrategia alternativa consiste en el
desarrollo de ratones knock-out y knock-in
especficos de tejido o inducibles. Los primeros
consisten en ratones en los que la expresin de
un gen determinado se encuentra inhibida en un
tejido concreto. Los knock-out inducibles permiten
interrumpir la expresin de inters en el momento
deseado administrando una sustancia
determinada. En este caso, el gen se expresa con
normalidad hasta que se administra el compuesto
concreto83.
Los ratones knock-out suelen presentar problemas
de letalidad de los embriones para determinados
genes. En ocasiones se ponen en marcha
mecanismos de compensacin en el embrin que
hacen que la ausencia del gen no de lugar a los
efectos esperables ya que otros genes compensan
al gen inactivado. Los knock-out inducibles
permiten inactivar el gen cuando el ratn ya se ha
desarrollado y por tanto evitan que se den estos
mecanismos de compensacin y letalidad
embrionaria.
La principal limitacin de los ratones knock-out y
knock-in se refiere al tiempo y coste que requiere la
manipulacin gentica de estos organismos, lo que
dificulta la manipulacin de ratones a gran escala84.

79/80
Kramer, R. & Cohen, D. (2004). Functional Genomics to new Drug Targets. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol. 3: 965-972.
Abuin, A., et al. (2002). Full-speed mammalian genetics: in vivo target validation in the drug discovery process. Trends in
Biotechnology. Vol. 20, N 1: 36-42.
81
La ingeniera gentica es una tecnologa que permite introducir cambios en el genotipo de un organismo.
82
Zambrowicz, B. P., et al. (2003). Predicting drug efficacy: knockouts model pipeline drugs of the pharmaceutical industry.
Current Opinion in Pharmacology. 3: 563-570.
83
Trnell, J. & Snaith, M. (2002). Transgenic systems in drug discovery: from target identification to humanized mice. Drug
Discovery Today. Vol. 7 No. 8: 461-470.
Hardy, L. W. & Peet, N. P. (2004). The multiple orthogonal tools approach to define molecular causation in the validation
of druggable targets. Drug Discovery Today. 9(3): 117-26.
84
Baumeister, R. (2002). The worm in us - Caenorhabditis elegans as a model of human disease. Trends in Biotechnology.
Vol. 20, N 4: 147-148.

28
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

3.4.2. Ratones transgnicos funcin de protenas humanas en ratones

Los ratones transgnicos son ratones a los que se
les ha introducido un gen procedente de otro
organismo diferente durante el desarrollo
embrionario. De este modo, se puede introducir
en el animal transgnico un gen que codifique
para la diana teraputica que se desee validar,
sobreexpresando dicha diana en el modelo
animal.
transgnicos. De este modo se obtienen ratones
humanizados que expresan dianas humanas que
permiten estudiar los efectos debidos a la
expresin de la diana humana en el modelo
animal. La principal limitacin de los ratones
transgnicos se refiere al tiempo y coste que
requiere la manipulacin gentica de los ratones,
haciendo imposible el empleo de esta tcnica a
gran escala.

Los ratones transgnicos ms fciles de obtener El clonaje de expresin en cultivos celulares es

son aquellos en los que el transgn se expresa de
modo continuo en todos los tejidos del organismo,
aunque tambin es posible obtener ratones que
expresen el transgn en un tejido determinado al
igual que ocurre con los ratones knock-out y
knock-in. Asimismo, se pueden emplear ratones
transgnicos inducibles, y en este caso el
transgn slo se expresa al inducir la expresin
mediante la administracin de un compuesto
concreto85. Las tecnologas de transgnesis
permiten introducir genes humanos en ratones
transgnicos de modo que se puede estudiar la
una alternativa al empleo de modelos animales
transgnicos. Esta tcnica se basa en introducir
genes en clulas con objeto de que los genes se
expresen en su interior y den lugar a las
protenas. Posteriormente se estudian las
alteraciones en el fenotipo de las clulas de modo
que se puede asociar una alteracin concreta a la
expresin de un gen determinado. Sin embargo,
esta tcnica no ofrece las ventajas de los modelos
animales transgnicos, los cuales proporcionan
informacin sobre la funcin desempeada por un
gen in vivo86.

Tecnologa knock-out/transgnica vs. Tecnologa Antisentido87

Bloqueo total de la expresin del gen. Modulacin de la expresin del gen.

Limitado a un nmero de especies.
Efectos generalmente irreversibles.
Elevado precio.
Proceso lento.
Instalaciones adecuadas para animales.
Requiere el control de efectos
compensatorios y de desarrollo.
Laborioso si se desea modificar varias dianas.
Fenotipos letales para algunos genes.
Es posible generar modelos animales que
sobreexpresen el gen.
Aplicable a numerosas especies incluyendo a
humanos.
Efectos reversibles.
Precio moderado.
Proceso rpido.
No requiere instalaciones especiales.
Requiere el control de efectos debidos a la
inespecifidad del ADN.
Posibilidad de modificar mltiples dianas.
Toxicidad de altas dosis de oligos antisentido.
No es posible sobreexpresar el gen.

85
Trnell, J. & Snaith, M. (2002). Transgenic systems in drug discovery: from target identification to humanized mice. Drug
Discovery Today. Vol. 7 No. 8: 461-470.
Hardy, L. W. & Peet, N. P. (2004). The multiple orthogonal tools approach to define molecular causation in the validation
of druggable targets.Drug Discov Today. 9(3): 117-26.
86
Chanda, S. K., et al. (2003). Fulfilling the promise: drug discovery in the post-genomic era. Drug Discovery Today. Vol. 8,
No. 4: 168-174.
87
Stone, L. S. & Vulchanova, L. (2003). The pain of antisense: in vivo application of antisense oligonucleotides for
functional genomics in pain and analgesia. Advances Drug Delivery Reviews 55: 1081-1112.

29
3.4.3. Mutagnesis de ratones
al azar
Las mutaciones consisten en cambios en la
secuencia del ADN debidas a la sustitucin de
una base nucleotdica o unidad estructural por
otra. Mediante agentes mutagnicos qumicos es
posible crear mutaciones al azar. La lnea
germinal masculina que dar lugar a
espermatozoides puede ser sometida a
mutagnesis y los ratones macho que producen
espermatozoides mutados se cruzan con
hembras dando lugar a una generacin de
ratones mutada. A partir de esta descendencia
se pueden seleccionar los ratones que presentan
el fenotipo de inters, es decir una
sintomatologa similar a la de la enfermedad de
inters. Mediante el estudio de las mutaciones
ocurridas en estos ratones, se pueden identificar
los genes mutados, que por tanto estarn
asociados a la aparicin de la enfermedad.
Existen otras tcnicas capaces de obtener
ratones mutados al azar sin necesidad de
emplear agentes qumicos. La captura de genes
o Gene trapping es un mtodo que permite la
mutacin al azar mediante insercin de un
elemento de ADN en el gen que interrumpe la
transcripcin del mismo.
Sin embargo, estas tcnicas no permiten crear
mutaciones precisas ya que stas ocurren al azar.
Las mutaciones no siempre dan lugar a la
inactivacin del gen, y por tanto pueden no
detectarse mutaciones en genes de inters. En el
caso de la mutagnesis qumica, la identificacin
del gen mutado resulta muy difcil ya que requiere
la bsqueda de cambios a lo largo de toda la
secuencia del genoma debido a que no existe
informacin previa acerca del gen que se ha
mutado. La captura de genes, en cambio, facilita la
localizacin del gen mutado a partir del fragmento
88
Abuin, A., et al. (2002). Full-speed mammalian genetics: in vivo target validation in the drug discovery process. Trends in
Biotechnology 20 ( 1): 36-42.
89
Saccharomyces Genome Database (http://www.yeastgenome.org).
90
Parsons, A. B., et al. (2003). Yeast genomics and proteomics in drug discovery and target validation. Progress in Cell
Cycle Research Vol. 5, 159-166.
Carroll, P. M. & Fitzgerald, K. (2003). Model Organisms in Drug Discovery. Edited by John Wiley & Sons, Ltd.
30
de ADN que se inserta en el genoma ya que ste
es de secuencia conocida y puede ser localizado88.
3.4.4. Levaduras como modelo
de enfermedad
La levadura Saccharomyces cerevisiae89 es un
organismo ampliamente estudiado y de fcil
crecimiento en condiciones de laboratorio. A pesar
de la distancia evolutiva que separa al ser
humano de las levaduras, stas poseen miles de
protenas de secuencia similar a las protenas
humanas. De hecho, muchas de las mutaciones
que se observan en tumores humanos pueden ser
modelizadas en levaduras, y los frmacos que
actan sobre protenas humanas ejercen una
accin similar en sus equivalentes en las
levaduras.
Es posible obtener mutantes de S. cerevisiae a los
que se les haya eliminado un gen concreto, lo que
permite crear un modelo del efecto biolgico
debido a la inactivacin del gen. De este modo, se
puede reproducir el efecto de un frmaco que
acte inhibiendo esa diana en concreto. Por otro
lado, tambin es posible sobreexpresar genes
concretos y observar su efecto en el fenotipo
celular, lo que resulta de utilidad a la hora de
establecer relaciones entre genes y
enfermedades.
La principal desventaja de la levadura como
modelo se debe a que se trata de organismos
simples formados por una sola clula, por lo que
no permiten el estudio de procesos ms
complejos caractersticos de mamferos como el
ser humano. Resulta imposible por tanto el
estudio de fenotipos complejos, limitando su
utilizacin a la validacin de dianas de
determinados tipos de enfermedades siendo una
de las principales el cncer90.
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

3.4.5. Otros organismos modelo
Existen otros organismos modelo de origen
animal diferentes del ratn que se pueden
emplear en validacin de dianas. Los ms
importantes son la mosca de la fruta o Drosophila
melanogaster, el nemtodo Caenorhabditis
elegans y el pez cebra o Danio rerio.
La mosca de la fruta (D. melanogaster), es una
mosca de pequeo tamao que se ha empleado
durante el ltimo siglo en investigacin gentica y
genmica, debido a que se han descrito un gran
nmero de mutantes que permiten estudiar la
herencia de los genes y las caractersticas
controladas por los mismos. Mediante la
introduccin de genes procedentes de otros
organismos es posible conseguir que la expresin
de los genes introducidos vare en funcin de los
tejidos o estados del desarrollo. Por tanto, la
mosca de la fruta se puede emplear para
identificar nuevos componentes de rutas
asociadas a enfermedades concretas.
La validacin de dianas en la mosca de la fruta
puede realizarse empleando tecnologas
antisentido como el ARNi y el ARNsi, por medio
de modificaciones que permiten introducir un
transgen que codifique para el ARN de
interferencia. De este modo se consigue silenciar
la expresin de un gen en un organismo completo
de modo estable, sin necesidad de aadir ARN de
interferencia de manera constante.
La mosca de la fruta se ha empleado para validar
dianas implicadas en la diabetes y en la
enfermedad de Alzheimer mediante la bsqueda
de modificadores genticos. Esta estrategia
consiste en crear fenotipos de enfermedad ya
conocidos mutando dianas ya descritas y
estudiadas, para posteriormente buscar
mutaciones que modifiquen el fenotipo. Las
mutaciones pueden ser creadas por mutagnesis
qumica al azar o empleando mutaciones ya
conocidas. De este modo, se pueden identificar
rutas nuevas que estn relacionadas con
enfermedades conocidas, lo que permite
relacionar nuevas dianas y rutas con
enfermedades91.
El nematodo intestinal (C. elegans) fue el
primer organismo multicelular cuyo genoma fue
secuenciado92 y consiste en un buen modelo para
estudiar la funcin de genes asociados a la
enfermedad, y por tanto para validar dianas. Esto
se debe a que existe una elevada similitud entre
su secuencia y los genes humanos (65%), y sus
protenas son responsables de funciones y rutas
metablicas similares93.
El ARN de interferencia fue descubierto en este
organismo como un mecanismo regulador de la
transcripcin, responsable del silenciamiento de
genes de forma especfica de secuencia. El
silenciamiento de genes concretos mediante
tecnologas de ARN de interferencia da lugar a
cambios fenotpicos que permiten asociar rutas y
dianas a enfermedades concretas94. Por otro lado,
las tcnicas de transgnesis descritas para otros
sistemas modelo tambin pueden ser empleadas
en C. elegans como mtodo de validacin de
dianas.
Como modelo animal, C. elegans ha sido
empleado con frecuencia para el estudio de
enfermedades humanas como el cncer, la
depresin, la enfermedad de Alzheimer y la
muerte celular95. La ruta que controla la apoptosis
o muerte celular fue dilucidada en C. elegans y
esta ruta tiene implicaciones importantes para el
estudio del cncer. En el caso del Alzheimer,
C. elegans posee equivalentes a los genes
humanos implicados en esta patologa, lo que
permite estudiar su funcin en este modelo96.

91
Kramer, R. & Cohen, D. (2004). Functional genomics to new drug targets. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol 3: 965-972.
92
WormBase (http://www.wormbase.org).
93
Baumeister, R. (2002). The worm in us - Caenorhabditis elegans as a model of human disease. Trends in Biotechnology.
Vol. 20, N 4: 147-148.
94
Jain, K. K. (2004). RNAi and siRNA in target validation. Drug Discovery Today. 9 (7): 307-309.
95
Carroll, P. M. & Fitzgerald, K. (2003). Model Organisms in Drug Discovery. Edited by John Wiley & Sons, Ltd.
96
Baumeister, R. (2002). The worm in us - Caenorhabditis elegans as a model of human disease. Trends in Biotechnology.
Vol. 20, N 4: 147-148.

31
El pez cebra (Danio rerio) es un organismo modelo
que se ha comenzado a usar recientemente en
validacin de dianas. Sin embargo, este organismo
es un modelo ampliamente conocido debido a que
sus embriones son transparentes y permiten
estudiar el desarrollo embrionario con facilidad, son
fciles de criar, tienen un ciclo de vida corto y su
desarrollo es rpido. Debido a que el pez cebra es
un organismo vertebrado, posee numerosas
similitudes con los mamferos, lo que ha permitido
desarrollar modelos representativos de
enfermedades humanas97.
En este sentido, han sido desarrolladas varias
tcnicas que permiten modular la expresin
Tecnologa
Naturaleza
antisentido
cido nucleico
Oligonucletidos sinttico con un
tipo morfolino esqueleto de
morfolino
cido nuclico con
Peptidos nucleicos un esqueleto
(PNAs) peptdico de carga
negativa.
Tabla 1. Comparativa de las dos principales tecnologas antisentido empleadas para validar dianas en pez cebra.
Fuente: Doan, T. N. (2004). High-throughput target validation in model organisms. Drug Discovery Today: Targets.
Vol. 3(5): 191-197.
Actualmente, el pez cebra se emplea como
modelo para enfermedades humanas y procesos
biolgicos de inters como la angiognesis o
creacin de vasos sanguneos, procesos
inflamatorios, metabolismo de lpidos, regulacin
de la insulina y mecanismos implicados en la
adiccin a las drogas99.
3.4.6. Clulas madre embrionarias
Las clulas madre de origen embrionario no
constituyen una tcnica de validacin por s
mismo sino que son un sistema sobre el que
aplicar las diferentes tcnicas de validacin que se
han tratado en apartados anteriores. Debido a su
97
Doan, T. N. (2004). High-throughput target validation in model organisms. Drug Discovery Today: Targets. Vol. 3, N 5:
191-197.
98
PNA: Peptide Nucleic Acid.
99
Walgren, J. L. & Thompson, D. C. (2004). Aplication of proteomic technologies in the drug development process.
Toxicology Letters 149: 277-385.
Kramer, R. & Cohen, D. (2004). Functional genomics to new drug targets. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol 3: 965-972.
32
gnica en el pez cebra por medio de mutaciones,
la sobreexpresin de genes del pez cebra, y la
introduccin de genes procedentes de otros
organismos. Por otra parte, existen tecnologas
basadas en el empleo de oligonucletidos
antisentido sintticos especialmente adecuados
para su empleo en pez cebra, siendo las ms
empleadas los oligonucletidos tipo morfolino y
los pptidos nucleicos o PNAs98. Los oligos tipo
morfolino son oligonucletidos antisentido
modificados que presentan un esqueleto con una
estructura qumica determinada que se denomina
morfolino, mientras que los PNAs son
oligonucletidos antisentido modificados con un
esqueleto peptdico de carga negativa.
Funcionamiento Ventajas
Unin al ARNm especfico y
bloqueo de la sntesis de la Mayor estabilidad
protena
Unin de alta afinidad al Mayor especificidad
ARNm de la protena Menor toxicidad
inters creciente se ha considerado necesario
dedicarles un apartado en el que se expone su
aplicacin en la validacin de dianas, junto con
sus ventajas respecto a la validacin mediante
otros cultivos celulares.
Las clulas madre embrionarias son clulas
procedentes del embrin en su fase temprana que
conservan la capacidad de convertirse en toda
clase de clulas del organismo. Al cultivarlas en
laboratorio, estas clulas pueden ser mantenidas
en un estado no diferenciado o pueden
diferenciarse a algn tipo celular en condiciones
adecuadas. En la validacin de dianas se emplean
tanto clulas madre no diferenciadas, como
clulas diferenciadas procedentes de ratn debido
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

a los problemas legales que hay en torno a las
clulas embrionarias humanas. Recientemente, la
Comisin de Donacin y Utilizacin de Clulas y
Tejidos Humanos ha autorizado los cuatro
primeros proyectos de investigacin con clulas
madre embrionarias en Espaa a partir de
embriones sobrantes de los procesos de
fertilizacin100.
Las clulas madre no diferenciadas pueden ser
manipuladas para eliminar la expresin de un gen
con el objeto de evaluar la funcin del mismo en la
clula dando lugar a clulas madre knock-out, o
bien a clulas madre knock-in que sobreexpresen
el gen de inters. Por otro lado, se pueden disear
clulas madre transgnicas modificadas
genticamente mediante la introduccin del gen
que codifique para la diana potencial que se desea
validar, de modo que sta se exprese en la clula.
Entre las ltimas aplicaciones de las clulas madre
para la validacin de dianas se encuentra la
tranfeccin de RNA interferente a cultivos de estas
clulas, provocando el silenciamiento de la
expresin gnica101.
Las clulas madre pueden diferenciarse
posteriormente mediante su cultivo en condiciones
controladas, dando lugar a clulas adultas con una
fisiologa similar a las clulas diferenciadas del
organismo. De este modo se pueden diferenciar
clulas madre a las que se les ha eliminado la
expresin de un gen concreto y obtener clulas de
un tipo celular determinado en las que estudiar la
funcin de los genes concretos.
Otro tipo de estrategia de validacin de dianas
consiste en la implantacin de clulas madre no
diferenciadas en ratones, que dan lugar a
teratomas o tumores formados por clulas de
origen embrionario. Estos teratomas son de
utilidad para evaluar el papel de genes concretos
en la proliferacin celular y la diferenciacin, de
modo que pueden resultar de inters como dianas
teraputicas frente al cncer.

Estabilidad Variabilidad Manipulacin

Tipo celular Crecimiento Disponibilidad
gentica celular gentica

Cambian a lo
Tumoral o Alteraciones
Anormal Ilimitada largo del Muy limitada
transformada cromosmicas
cultivo

Clulas Dependiente
Normal No proliferan Limitada No
primarias del donante

Clulas
madre Normal Normal Ilimitada Uniforme Si
embrionarias

Tabla 2. Caractersticas de tipos celulares empleados habitualmente en validacin de dianas.

Fuente: McNeish, J. (2004). Embriogenic stem cells in drug discovery. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol 3: 70-80.

Las clulas madre embrionarias presentan ciertas
ventajas en comparacin con los dems tipos de
cultivos celulares que se emplean en validacin de
dianas. Las clulas madre embrionarias son
genticamente estables, uniformes en cultivo
celular, y presentan un crecimiento normal
aunque se dividen sin lmite, lo que permite
mantenerlas en cultivo indefinidamente y disponer
de ellas en cantidades ilimitadas. Por otra parte,
estas clulas son las nicas que pueden ser
manipuladas genticamente con facilidad debido a
su habilidad para sufrir recombinacin homloga
con una frecuencia mayor que el resto de tipos
celulares. Todas estas caractersticas confieren
ventajas a las clulas madre embrionarias sobre
las clulas primarias o las lneas celulares
procedentes de tumores, ya que combinan las
caractersticas deseadas de ambos102.

100
La Comisin de Donacin y Utilizacin de Clulas y Tejidos Humanos da luz verde a los primeros proyectos de
investigacin con clulas madre embrionarias en nuestro pas. Nota de prensa: 23 de febrero 2005, Ministerio de
Sanidad y Consumo (http://www.msc.es/gabinetePrensa/notaPrensa/desarrolloNotaPrensa.jsp?id=268).
101
Cocks, B. G. & Theriault, T. P. (2004). Developments in effective applicaction of small inhibitory RNA (siRNA) technology
in mammalian cells. DDT: Targets. Vol. 3(4): 165-171.
102
McNeish, J. (2004). Embriogenic stem cells in drug discovery. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol 3: 70-80.

33
3.5. Tcnicas bioinformticas
La bioinformtica consiste en el uso de las
matemticas y de las tcnicas informticas para
resolver problemas biolgicos por medio de
El primero es de utilidad a la hora de asociar
frmacos potenciales a las dianas, ya que
permiten la prediccin de la estructura de las
protenas a partir de su secuencia. El
conocimiento de la estructura tridimensional de

programas informticos y modelos matemticos.
Las herramientas bioinformticas ms relevantes
son las bases de datos, las cuales permiten el
almacenamiento y manejo de la informacin
biolgica, y los algoritmos, que permiten elaborar
relaciones de asociacin entre datos contenidos
en las bases de datos. La bioinformtica permite
por tanto el estudio de una elevada complejidad
de datos mediante el uso de herramientas con
gran capacidad de almacenamiento y poder de
clculo.
Los principales objetivos de la bioinformtica
durante las fases iniciales de desarrollo de un
frmaco se centran en desentraar la informacin
contenida en las secuencias de ADN, ARN y
protenas. Las tcnicas bioinformticas presentan
tres aplicaciones fundamentales para la validacin
de dianas, la identificacin de genes
103
homlogos , el anlisis de mapas de protenas y
el anlisis a gran escala de perfiles de expresin.
las protenas sirve para comprender mejor sus
funciones e identificar compuestos de bajo peso
molecular que inhiban la protena de modo
selectivo. La identificacin de genes homlogos en
otras especies puede resultar de utilidad a la hora
de asignar nuevas funciones a genes humanos, o
bien confirmar la utilidad de modelos animales
para experimentos in vivo. Asimismo, la
identificacin de genes homlogos con funciones
divergentes en el genoma humano puede ser til
para valorar problemas de especificidad de
dianas. Por otro lado, la identificacin de
protenas con funciones similares mediante la
construccin de mapas de interacciones de
protenas es posible mediante herramientas
bioinformticas de anlisis. Respecto al anlisis de
perfiles de expresin, existe una amplia variedad
de software que permite almacenar y analizar los
diferentes patrones derivados de experimentos
por medio de microarrays de ADN
fundamentalmente104.

La bioinformtica en la identificacin y validacin de dianas

Mtodos comparativos basados en homologa (identificacin de genes homlogos que poseen

similitud entre s en la misma especie o en distintas especies):

La comparacin de la diana a nivel de secuencia de ADN o estructura de la protena con familias

de protenas humanas u otros organismos arroja informacin relevante sobre la funcin de la
diana.

La identificacin de genes homlogos con funciones divergentes en el genoma humano puede

ser til para valorar problemas de especificidad de dianas.

El anlisis de mapas de protenas se emplea para asignar funciones a protenas.

El anlisis de los perfiles gnicos obtenidos con microarrays puede servir para asignar funcin
biolgica a determinados genes.

103
Genes homlogos: genes que poseen similitud entre s, tanto en la misma especie como entre distintas especies. Esta
similitud puede derivarse de una ascendencia comn (genes ortlogos) asumindose que tienen la misma funcin, o
bien surgir a partir de la duplicacin de un gen dentro de un mismo genoma (genes parlogos), que en este caso
tendran diferente funcin o especializacin.
104
Whittaker, P. A. (2003). What is the relevance of bioinfomatics to phamacology? Trends In Pharmacological Sciences,
24 (8), 434-439.

34
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS
Tcnica Ventajas
Anlisis simultneo de niveles
Anlisis Serial de la
de expresin.
Expresin Gnica
expresin gnica No requiere conocer la
(SAGE).
Anlisis de la
secuencia del ARNm.
Electroforesis en Geles
Bajo coste.
de Poliacrilamida (PAGE).
Multiplexado.
Microarrays de ADN.
Alto rendimiento.
Requieren cantidades
protena-protena
reducidas de muestra.
Interacciones
Microarrays de protenas.
Automatizable.
Alto rendimiento.
Detecta interacciones entre
protenas a gran escala.
Sistema doble hbrido.
Permite construir mapas de
interaccin de protenas.
Facilidad de obtencin.
Resistentes a las nucleasas.
Oligos antisentido.
Actan en el ncleo de la
clula.
Tcnicas de validacin de dianas
Modulacin de la expresin
Facilidad de obtencin.
Requiere bajas concentraciones.
Mayor estabilidad.
ARN de interferencia.
Baja toxicidad.
Puede expresarse
intracelularmente.
Facilidad de obtencin.
Requiere bajas
Ribozimas concentraciones.
Evita el bloqueo no especfico de
la sntesis proteica.
Mayor estabilidad.
Protenas de dedos de
Permiten activar o reprimir
zinc.
genes.
Las molculas pueden
emplearse como base para
Genmica qumica. obtener potenciales frmacos.
No requieren la alteracin
gentica de la clula.
Inactivacin de protenas
Anticuerpos Elevada especificidad.
Posibilidad de diseo frente a
cualquier diana.
Aptmeros
Se unen a los sitios activos de
las protenas.
Pptidos Facilidad de produccin.
Alto poder de inhibicin y
CALI/FALI especificidad en conjuncin con
anticuerpos monoclonales.
Desventajas
Elevado coste.
Un segmento corto no
siempre se corresponde con
un nico gen, y viceversa.
Requiere cantidades
elevadas de muestra.
Bajo rendimiento.
Coste elevado.
Baja especificidad en la
unin de protenas.
Elevado coste.
Falsos positivos y negativos.
No permite analizar
protenas de membrana y
factores de transcripcin.
Problemas de administracin.
Toxicidad.
Inestabilidad.
No puede expresarse
intracelularmente.
Problemas de
administracin.
Efectos no especficos.
No acta en el ncleo de la
clula.
Inestabilidad in vivo.
Problemas de
administracin.
Inestabilidad.
Especificidad.
Falta de experiencia in vivo.
Problemas de administracin.
Incapacidad de reconocer
sitios no activos del
genoma.
Uniones no especficas.
Requiere disponer de
molculas de inhibicin.
Baja eficacia de bloqueo de
la protena.
Inestabilidad.
Inestabilidad.
Problemas de administracin.
Baja afinidad por protenas
cargadas negativamente.
Baja afinidad.
Baja selectividad.
La inactivacin depende de
la distancia entre el sitio
activo y el sitio de unin.
(Contina en pgina siguiente)
35
 Tcnica Ventajas Desventajas

expresin in vivo Ensayos in vivo.

Requieren de la
Correlacin de los datos
Anlisis de

Microarrays de tejidos. disponibilidad de muestras

moleculares con los datos
de tejidos.
clnicos.

Requiere la transfeccin
Microarrays de clulas. Ensayos in vivo.
de ADN a las clulas.

Visualizacin in vivo de los

Laborioso y costoso.
Ratones knock-out y cambios fenotpicos.
Letalidad de embriones.
knock-in Modelos animales similares
Bajo rendimiento.
al ser humano.

Visualizacin in vivo de los

cambios fenotpicos. Laborioso y costoso.
Ratones transgnicos.
Modelos animales similares Bajo rendimiento.
al ser humano.

No requiere conocer la
Mutaciones no dirigidas.
Mutagnesis de ratones funcin de genes
Dificultad de identificar
al azar. modificados.
genes mutados.
Tcnicas de validacin de dianas

Alto rendimiento.

Organismo simple que no

permite el estudio de
Genoma secuenciado.
Levaduras. procesos complejos.
Sistemas modelo

Facilidad de crecimiento.
Su uso se limita a ciertas
enfermedades.

Numerosos mutantes
Mosca de la fruta. Modelo invertebrado.
desarrollados.

Genoma secuenciado.
Validacin de dianas
C. elegans. Modelo invertebrado.
mediante tecnologas
antisentido.

Modelo vertebrado con un

ciclo de vida corto.
Pez cebra. Validacin de dianas No existen knock-outs.
mediante tecnologas
antisentido.

Estabilidad gentica,
disponibilidad ilimitada y
facilidad de manipulacin
Clulas madre Disponibilidad de clulas
gentica. Permiten estudiar
embrionarias. madre.
genes que causan
mortalidad en fetos de
ratones knock-out.
Bioinformtica

Gran capacidad de Requiere de datos

Herramientas
almacenamiento y poder de experimentales o bases de
bioinformticas.
clculo. datos.

Tabla 3. Comparacin de las principales tcnicas empleadas en validacin de dianas.

Fuente: elaboracin propia.

36
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

4. Estrategias de validacin de dianas

El objetivo de la validacin de dianas consiste en
demostrar la implicacin de una determinada
diana en un proceso patolgico. En funcin de las
tcnicas empleadas para validar una diana, el
grado de validacin alcanzado ser diferente. El
nivel ms alto de validacin de dianas se consigue
mediante la demostracin de que la modificacin
de una diana revierte la sintomatologa asociada a
la patologa en cuestin, lo que slo ocurre
cuando el frmaco ya se encuentra en el
mercado. Por este motivo, se ha desarrollado un
amplio abanico de tcnicas de validacin de
dianas, fundamentales para la obtencin de
frmacos eficaces en el menor tiempo posible105.
Existen varias estrategias que se pueden emplear
a la hora de desarrollar nuevos frmacos frente a
enfermedades. El optar por una u otra estrategia
depender del conocimiento previo que se posea
acerca de las potenciales dianas, de la
disponibilidad de muestras biolgicas procedentes
de individuos tanto enfermos como sanos, y del
dominio y disponibilidad de las tcnicas de
validacin de dianas.

Estrategia inversa Estrategia directa

Gen ARN

Genes ARNs

Protena

Protenas

Modificacin dirigida Modificacin al azar

Fenotipo alterado Fenotipo alterado

Bsqueda de la
diana de inters

Asociacin de una diana con el fenotipo

Figura 17. Estrategias de validacin de dianas.

Fuente: Doan T. N., et al. (2004). High-throughput target validation in model organisms. Drug Discovery Today: Targets. 3 (5):
191-197.

105
Drews, J. (2000). Drug Discovery: A Historical Perspective. Science, 287: 1960-1964 .

37
 En aquellas ocasiones en las que existe
informacin previa acerca de las dianas
potencialmente implicadas en una enfermedad
concreta, es posible proponer su implicacin en
el proceso patolgico. En estas ocasiones, se
opta por una estrategia inversa o dirigida de
validacin de dianas, en la cual se altera la
expresin de un gen o protena conocida para
demostrar su implicacin en el desarrollo de la
enfermedad. Por tanto, para esta estrategia son
de utilidad aquellas tcnicas que permiten
alterar selectivamente la funcin de una diana
concreta y observar los cambios debidos a estas
alteraciones. Las tcnicas de modulacin de la
expresin gnica como la tecnologa antisentido
y las tcnicas de inactivacin de protenas como
los anticuerpos monoclonales, permiten
establecer la relacion entre el fenotipo y una
diana concreta.
En los casos en los que no se dispone de
informacin acerca de las dianas implicadas en
la enfermedad de inters, o bien se desea
descubrir dianas novedosas para una
enfermedad concreta, la estrategia ha de ser
necesariamente diferente y se puede optar por
el empleo de estrategias al azar tambin
denominadas estrategias directas. Estas
estrategias consisten en el estudio de los
cambios en el fenotipo debidos a la modificacin
de genes o protenas que se realiza al azar, de
modo que se desconoce la funcin del gen o
protena sobre la que se est actuando y se
pretende validar. Como resultado, se obtienen
clulas u organismos con alteraciones que dan
lugar a fenotipos diversos, entre los que alguno
puede estar relacionado con enfermedades
interesantes. Una vez detectado el fenotipo de
inters y dado que la modificacin que ha dado
lugar al mismo es desconocida, se ha de buscar
el gen o la protena diana, es decir el gen
responsable del fenotipo de inters. De este
modo se establece la relacin entre la diana y el
fenotipo relacionado con la enfermedad. Existe
una gran diversidad de tcnicas que permiten
modificar genes o protenas al azar, siendo
habitual el empleo de tcnicas como las
tecnologas antisentido, las tcnicas de bloqueo
de protenas y la mutagnesis al azar en
organismos modelo. La principal desventaja de
las estrategias directas o al azar consiste en que
106
Doan, T. N. (2004). High-throughput target validation in model organisms. Drug Discovery Today: Targets. Vol. 3, N 5:
191-197.
38
en ocasiones resulta difcil identificar la diana
sobre la que se ha actuado106.
Las tcnicas moleculares que se emplean para
validar dianas son muy diversas en cuanto a su
naturaleza. De hecho, cualquier tcnica que permita
asociar una protena o un gen a una caracterstica o
a un fenotipo, es susceptible de ser aplicada en la
validacin de dianas. Por otra parte, las tcnicas que
se emplean en la validacin de dianas pueden ser de
utilidad en otras etapas de la investigacin
farmacolgica, como los ensayos preclnicos
mediante cultivos celulares y modelos vivos de la
enfermedad, los cuales se emplean prcticamente a
lo largo de todo el proceso de investigacin
farmacutica previo a los ensayos clnicos en
humanos. Las diferentes tcnicas descritas en el
presente informe se pueden aplicar en diversos
momentos de los programas de I+D en funcin de
los recursos de los que se disponga y del grado de
validacin que se desee alcanzar.
El desarrollo de nuevos frmacos por parte de la
industria farmacutica se aborda habitualmente
mediante una primera identificacin de un
elevado nmero de dianas potencialmente
asociadas a la enfermedad. Las tcnicas de
validacin que se suelen aplicar en primer lugar
han de ser rpidas, de alto rendimiento, coste
reducido y capaces de eliminar las dianas no
vlidas, en las cuales no merece la pena invertir
mayores esfuerzos. Las tecnologas de anlisis de
la expresin gnica, interacciones protena-
protena y el cribado virtual son las tcnicas que
se realizan en las etapas iniciales ya que a pesar
de que no permiten establecer una asociacin
robusta entre la enfermedad y la diana, permiten
identificar y descartar parte de las dianas con
rapidez. Posteriormente, se aplican otras tcnicas
que si bien requieren ms tiempo y presentan un
rendimiento inferior, permiten establecer una
asociacin ms concluyente entre la diana y la
enfermedad. ste es el caso de las tcnicas de
modulacin de la expresin y bloqueo de
protenas diana, que se suelen aplicar sobre
cultivos celulares o modelos animales. Los
modelos vivos de la enfermedad constituyen el
nivel superior de validacin de dianas y aunque
su coste es muy elevado, se emplean tanto en
validacin de dianas como en la investigacin
preclnica previa a los ensayos en humanos.
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Identificacin
Identificacin Validacin Investigacin Ensayos
y optimizacin
de dianas de dianas preclnica clnicos
del compuesto

Anlisis de la expresin

Interaccin protena-protena
Ensayos en animales Ensayos en humanos
Fase I
Fase II
Cribado virtual Fase III
Fase IV

Modulacin de la expresin

Inactivacin de protenas

Modelos vivos de enfermedad

Fig. 18. Aplicacin de las tcnicas de validacin de dianas a lo largo de la investigacin farmacutica.
Fuente: Whittaker, P. A. (2003). What is the relevance of bioinformatics to pharmacology? Trends in Pharmacological
Sciences. Vol. 24. N8: 434-439.

Por tanto, la validacin de una diana teraputica
es un proceso en el cual estn implicadas ms de
una nica tcnica, permitiendo establecer con la
suficiente robustez la asociacin de la diana con
una enfermedad concreta. Una adecuada
validacin de dianas requerir entonces la
combinacin de varias tcnicas entre s, de modo
que se pueda asociar con un grado de
certidumbre suficiente una diana y su
enfermedad, y de este modo validar o descartar
las potenciales dianas teraputicas identificadas.
La eleccin de las tecnologas ms adecuadas
vendr determinada por distintos factores. En el
caso de que hubiese que adoptar tan solo dos
tcnicas, sera recomendable emplear tecnologas
que acten a nivel gnico y a nivel de protena
respectivamente, ya que ofrecera una visin de
conjunto ms completa acerca de la funcin de la
diana. No obstante, las tcnicas elegidas vendrn
determinadas en gran medida por el coste
previsto del ensayo, el tiempo disponible, y los
resultados obtenidos a partir de los ensayos de
validacin previos107.
La aproximacin que hemos tenido en cuenta hasta
el momento se basa en la presuncin de que un
frmaco ejerce su accin nicamente sobre una
diana, lo cual es bastante improbable debido a la
complejidad biolgica de los procesos patolgicos. Un
escenario ms parecido a la realidad sera aquel en el
cual un frmaco interaccionara con mltiples
dianas que estuvieran implicadas directamente en
ciertas patologas. El frmaco ideal consistira en un
compuesto dirigido frente a mltiples dianas, todas
ellas relacionadas con el proceso patolgico de
inters, de forma que el efecto teraputico se viera
potenciado. El ejemplo ms caracterstico es el
imanitib, comercializado por Novartis con el nombre
Glivec como frmaco frente a la Leucemia Mieloide
Crnica y tumores de ciertas clulas del estroma
gastrointestinal. Este medicamento es capaz de
frenar la expresin de determinadas protenas
anormales caractersticas de estas patologas, pero
tambin posee la capacidad de bloquear otras vas
aberrantes de sealizacin celular relacionadas con la
aparicin de tumores, confirindole al producto un
extraordinario valor aadido108.

107
Hardy, L. W. & Peet, N. P. (2004). The multiple orthogonal tools approach to define molecular causation in the validation
of druggable targets. Drug Discovery Today. 9(3): 117-26.
108
Glivec (imatinib mesylate, USA Gleevec), Novartis Pharmaceuticals Corp.
(http://www.glivec.com/espanol/content/site_disclaimer.jsp)

39
5. Aplicaciones de las tcnicas
de validacin de dianas

El presente apartado pretende incidir en aquellas enfermedades para las cuales es esencial la identificacin
de nuevas dianas teraputicas, as como la validacin de algunas dianas ya conocidas que forman parte de
procesos biolgicos implicados en las patologas de inters. Por otra parte, se ha realizado una revisin de
los principales tipos de dianas teraputicas descritas, junto con las estrategias tecnolgicas empleadas en
su validacin.

5.1. Enfermedades que requieren nuevas dianas

Numerosas enfermedades de alta incidencia en la poblacin conllevan necesidades mdicas que no han
sido resueltas por la medicina actual. Algunas enfermedades no poseen tratamientos eficaces para el
paciente, mientras que para otras patologas tan slo existen tratamientos paliativos que poseen una
eficacia limitada o bien dan lugar a efectos secundarios que limitan su uso generalizado. Gran parte de
estos problemas se solucionaran mediante la identificacin y validacin de las dianas teraputicas
implicadas en estas enfermedades. Por este motivo, la identificacin y validacin de nuevas dianas
teraputicas es una necesidad a la hora de desarrollar nuevos y mejores frmacos.

Enfermedades para las que es necesario identificar y validar nuevas dianas109

Enfermedades neurodegenerativas: alzheimer, esclerosis mltiple, parkinson, esclerosis lateral

amiotrfica.

Enfermedades cardiovasculares.

Cncer.

Enfermedades psiquitricas: ansiedad, depresin, esquizofrenia.

Enfermedades metablicas: obesidad, diabetes tipo II.

Enfermedades autoinmunes: artrosis, diabetes de tipo I, psoriasis, enfermedad de Crohn y colitis

ulcerosa.

5.1.1. Enfermedades La enfermedad de Alzheimer es una enfermedad

neurodegenerativas
Las enfermedades neurodegenerativas son un
conjunto de enfermedades diversas que afectan al
sistema nervioso central, caracterizndose por la
prdida de tejido nervioso o neuronas en zonas
concretas del cerebro. La mayora de las
enfermedades neurodegenerativas se manifiestan
en la vejez, y debido al incremento de la
esperanza de vida, su incidencia se encuentra en
ascenso.
neurodegenerativa que causa demencia y afecta a
800.000 habitantes en Espaa110. Su incidencia se
encuentra en crecimiento debido al envejecimiento
de la poblacin y los tratamientos actuales son
meramente paliativos y simplemente retrasan la
aparicin de la enfermedad. La terapia habitual
frente a la enfermedad de Alzheimer est dirigida
a incrementar la transmisin nerviosa mediada por
el neurotransmisor acetilcolina y a inhibir la
toxicidad nerviosa del neurotransmisor glutamato.
En la actualidad se estn investigando nuevas

109
Kaplan, W. & Laing, R. (2004). Priority Medicines for Europe and the World. World Health Organization. Department of
Essential Drugs and Medicines Policy.
110
AFAL, Asociacin de Enfermos de Alzheimer de Madrid. (www.afal.es).

40
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

dianas implicadas en la toxicidad del glutamato y La enfermedad de Parkinson es la enfermedad

existen varias rutas novedosas sobre las que se
podra actuar para combatir el Alzheimer, evitando
la acumulacin de las placas de `-amiloide y la
formacin de fibras de proteina tau.
La esclerosis mltiple es el desorden
neurolgico ms habitual en adultos jvenes. Los
tratamientos actuales van dirigidos a reducir la
respuesta autoinmune que se produce en esta
enfermedad mediante la administracin de
sustancias que modulan el sistema inmune. Sin
embargo, el tratamiento inmunosupresor es
paliativo y retrasa la aparicin de la
sintomatologa de la enfermedad. Recientemente
la agencia estadounidense del medicamento ha
autorizado un anticuerpo monoclonal, el
natalizumab (Tysabri ) TM 111
, que acta inhibiendo
una molcula de adhesin de la superficie de
linfocitos y monocitos denominada receptor de la
integrina 4. El natalizumab en principio no impide
la progresin de la esclerosis mltiple, pero
reduce a un tercio el nmero de recadas. Las
nuevas dianas teraputicas propuestas se centran
en impedir la respuesta inmune daina que se
produce a nivel del sistema nervioso central por
medio de la modulacin en la presentacin de
antgenos, inhibiendo la activacin de las clulas
T, o bien impidiendo la migracin de las clulas
inflamatorias al sistema nervioso.
neurodegenerativa ms frecuente tras el Alzheimer,
y da lugar a problemas de movilidad debido a la
muerte de neuronas en un rea determinada del
cerebro. Los tratamientos actuales consisten en
estimular la actividad de las neuronas del sistema
de la dopamina, mejorando de esta forma la
sintomatologa. Sin embargo, estos tratamientos
no evitan la muerte de neuronas, por lo que es
necesario estudiar diferentes dianas que impidan la
muerte neuronal, la inhibicin de la apoptosis, la
produccin de NO en las clulas glia y el control de
rutas proteolticas.
La Esclerosis Lateral Amiotrfica se debe a la
muerte de neuronas motoras responsables del
control del movimiento. Los tratamientos actuales
son paliativos y simplemente consiguen una
mejora sintomtica limitada actuando sobre la
ruta del glutamato e impidiendo su accin txica
sobre las neuronas motoras. Se han propuesto
varias dianas nuevas en el sistema del glutamato
que se cree que podran impedir estas lesiones,
actuando sobre enzimas implicadas en la
detoxificacion de compuestos dainos y evitando
la acumulacin de protenas que dan lugar a la
muerte neuronal112.

111
TysabriTM (Natalizumab). Biogen Idec, Elan. (www.tysabri.com).
112
Mathisen, P. M. (2003). Gene Discovery and validation for neurodegenerative diseases. Drug Discovery Today. 8 (1): 39-46.

41
 Enfermedad Tratamiento actual Rutas/Dianas potenciales

Evitar la acumulacin de `-amiloide

(Disminucin de la formacin,
Inhibidores de la fomento de la degradacin del
acetilcolinesterasa. precursor).
Enfermedad de
Alzheimer. Inhibicin de la toxicidad mediada Sistemas de transduccin de seales
por el glutamato (Inhibidores del del precursor del `-amiloide (APP).
receptor del NMDA).
Agregacin de la protena tau.
Toxicidad del glutamato.

Modulacin del sistema inmune Inhibir la activacin de clulas-T.

Esclerosis mltiple.
(inmunosupresores, interfern `).
Anticuerpos monoclonales frente al
receptor de la integrina _4
(TysabriTM).
Presentacin de antgenos.
Migracin de clulas inflamatorias
al sistema nervioso central.

Inhibir la muerte neuronal.

Fomento del sistema de la
Enfermedad de
dopamina (Agonistas Produccin de NO por clulas gla.
Parkinson.
dopaminrgicos, levodopa).
Rutas proteolticas.

Enzima detoxificadora del

superxido.
Esclerosis lateral Protenas filamentosas neuronales
Agentes bloqueantes del glutamato.
amiotrfica. implicadas en la supervivencia
neuronal.
Toxicidad por glutamato.

Figura 19. Principales dianas teraputicas en enfermedades neurodegenerativas.

Fuente: Maticen, P. M. (2003). Gene Discovery and validation for neurodegenerative diseases. Drug Discovery Today.
8(1): 39-46.

5.1.2. Enfermedades En la actualidad existen tratamientos de eficacia

cardiovasculares
Las enfermedades cardiovasculares son la
principal causa de muerte en Europa y en los
limitada para el tratamiento de la hipertensin
como los diurticos, que favorecen la eliminacin
de lquidos y sales del organismo, los
betabloqueantes que bloquean la estimulacin del

pases del primer mundo. El tabaco, la
hipertensin arterial, los altos niveles de
colesterol y grasas en sangre, la diabetes y la
obesidad son los principales factores de riesgo de
las enfermedades cardiovasculares. En la
actualidad existen tratamientos para el
tratamiento de la hipertensin y para los niveles
elevados de grasas en sangre pero su eficacia es
limitada y vara entre diferentes pacientes113. No
obstante, se han propuesto nuevas dianas que
permitirn en un futuro desarrollar frmacos ms
eficaces y con menores efectos indeseables.
corazn, y los vasodilatadores que disminuyen la
tendencia de las arterias a estrecharse. Las
nuevas dianas propuestas se centran en fomentar
la vasodilatacin actuando sobre nuevas dianas
del sistema renina-angiotensina y el metabolismo
del cido araquidnico.
Los tratamientos actuales para combatir los
niveles elevados de grasas y colesterol en sangre
consisten principalmente en la administracin de
frmacos que reducen la sntesis y absorcin del
colesterol, y reductores de los triglicridos.

113
Kaplan, W. & Laing, R. (2004). Priority Medicines for Europe and the World. World Health Organization. Department of
Essential Drugs and Medicines Policy.

42
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Existen dianas novedosas implicadas en la sntesis del colesterol y en la regulacin de la homeostasis de

los lpidos que han sido propuestas para el desarrollo de tratamientos ms eficaces y seguros114.

Enfermedad Tratamiento actual Rutas/Dianas potenciales

Betabloqueantes.
Diurticos. Sistema de la renina-angiotensina.
Hipertensin. Vasodilatadores (Inhibidores del Metabolismo del cido
enzima convertidor de la araquidnico.
angiotensina y bloqueantes del
receptor de la angiotensina).

Inhibicin de la sntesis del colesterol

(estatinas y cido nicotnico).
Inhibicin de la absorcin del Homeostasis de los lpidos.
Niveles elevados de
colesterol (secuestrantes de cidos
grasa/colesterol. Sntesis del colesterol.
biliares).
Reductores de triglicridos (cido
fbrico).

Figura 20. Principales dianas teraputicas en enfermedades cardiovasculares.

Fuente: Brown, D. et Superti-Furga, G. (2003). Rediscovering the sweet spot in drug discovery. Drug Discovery Today.
Vol. 8 (23): 1067-1077.

5.1.3. Enfermedades psiquitricas sistema neurotransmisor del GABA del sistema

Las principales enfermedades psiquitricas son los
desrdenes de ansiedad, los trastornos
depresivos y la esquizofrenia. Si bien las causas
subyacentes pueden ser de diversa naturaleza, las
enfermedades psiquitricas se caracterizan por la
alteracin de la transmisin nerviosa a nivel del
sistema nervioso central. La incidencia de los
trastornos relacionados con el estrs tales como
la ansiedad y la depresin se halla en constante
crecimiento en la sociedad actual. Ambas
enfermedades se encuentran muy relacionadas
entre s, y los frmacos que se emplean en su
tratamiento son habitualmente los mismos.
Los desrdenes de ansiedad afectan a
aproximadamente el 10% de la poblacin y los
ansiolticos son el segundo grupo de frmacos
ms consumidos115. Las terapias farmacolgicas
actuales contra la ansiedad son las
benzodiacepinas, las cuales actan sobre el
nervioso central y presentan efectos adversos
tales como la sedacin excesiva y la dependencia,
por lo que es necesario desarrollar nuevos
frmacos para el tratamiento de la ansiedad. Se
sabe que en los trastornos de ansiedad y en la
depresin las rutas de transmisin nerviosa de
neuropptidos estn alteradas, y por este motivo
se ha propuesto actuar sobre las mismas para
desarrollar tratamientos ms eficaces y con
menores efectos indeseables116.
La depresin afecta en torno al 5% de la
poblacin y sobre todo a las mujeres. La
estrategia actual ms habitual para el tratamiento
de la depresin consiste en incrementar la
concentracin de neurotransmisores de la familia
de las monoaminas mediante inhibidores de la
monoaminooxidasa e inhibidores de la recaptura
de monoaminas, que tambin son empleados
como tratamiento frente a la ansiedad. Por otro
lado, existen frmacos alternativos que actan

114
Brown, D. & Superti-Furga, G. (2003). Rediscovering the sweet spot in drug discovery. Drug Discovery Today.
Vol. 8 (23): 1067-1077.
115
Gallen, C. C. (2004). Strategic Challenges in Neurotherapeutic Pharmaceutical Development. The American Society for
Experimental NeuroTherapeutics. Vol. 1: 165-180.
116
Holmes, A., et al. (2003). Neuropeptide systems as novel therapeutic targets for depresin and anxiety disorders.
Trends in Pharmacological Sciences. Vol. 24. N 11: 580-588.

43
sobre otras dianas como son los antidepresivos
tricclicos y heterocclicos117. Estos frmacos
poseen numerosos efectos secundarios y no todos
los pacientes responden adecuadamente al
tratamiento, por lo que resulta necesario
desarrollar nuevos medicamentos antidepresivos.
En el caso de la depresin, tambin se aboga por
actuar sobre los componentes de las rutas de
neuropptidos para desarrollar nuevos
frmacos118.
La esquizofrenia es una enfermedad psiquitrica
que se caracteriza por la aparicin de
alucinaciones, delirios y comportamientos que
conllevan la prdida de capacidad de trabajo,
relacin social, afectividad y capacidad intelectual.
La mayora de los tratamientos antipsicticos
actuales actan sobre varias dianas a la vez
siendo los ms comunes los receptores de
dopamina, cuyo mecanismo de accin se asocia a
efectos no deseados. Por otro lado, los
tratamientos actuales no son efectivos
totalmente y, debido a los efectos secundarios
que provocan, gran parte de los pacientes
abandonan el tratamiento, por lo que existe una
necesidad de identificar y validar nuevas dianas
teraputicas que acten por vas diferentes119.
Existen varios receptores y rutas neuronales de
sealizacin sobre las que se investiga para
desarrollar nuevos frmacos ms eficaces y con
menores efectos secundarios, como por ejemplo
un subtipo especfico de receptores de la
serotonina y del glutamato. Por otro lado, se
estudia la posibilidad de fomentar el efecto
protector de los estrgenos sobre la
esquizofrenia, y la posibilidad de actuar sobre el
dao que se observa en las membranas
neuronales mediante cidos grasos omega-3120.

Enfermedad Tratamientos actuales Rutas/Dianas potenciales

Activacin de receptores GABA

Ansiedad. Sistemas de neuropptidos.
(ansiolticos).

Incremento de la concentracin de
monoaminas (inhibidores de la
recaptura de monoaminas e
Depresin. inhibidores de la Sistemas de neuropptidos.
monoaminooxidasa).
Antidepresivos triclicos y
heterocclicos.

Receptor de serotonina 5HT2.

Bloqueo de receptores de dopamina
Esquizofrenia.
(antipsicticos tpicos y atpicos).
Receptor del glutamato NMDA.
Correccin de las membranas
daadas (cidos grasos omega-3).
Fomentar el efecto protector de los
estrgenos.

Figura 21. Principales dianas teraputicas en enfermedades psiquitricas.

Fuente: Weiden, P. J., et al. (2003). New Developments in Antipsychotic Therapy. J. Clin. Psichiatry (64)11: 1379-1381;
Kuperberg, G., et al. (2002). Developments in the pharmacological treatment of schizophrenia. Expert Opin. Investig.
Drugs. 11(10): 1-7; Hckfelt, T., et al. (2003). Neuropeptides: Oportunities for drug discovery. The Lancet Neurology.
Vol. 2: 463-472. Holmes, et al. (2003). Neuropeptide systems as novel therapeutic targets for depresin and anxiety
disorders. Trends in Pharmacological Sciences. Vol. 24. N 11: 580-588.

117
Garca, J. T. &. Rosete, E. M. (2002). Tratamiento farmacolgico de la depresin mayor. Rev Cubana Med Gen
Integr 3/2002 (http://www.bvs.sld.cu/revistas/mgi/vol18_3_02/mgi09302.htm).
118
Hckfelt, T., et al. (2003). Neuropeptides: Oportunities for drug discovery. The Lancet Neurology. Vol. 2: 463-472.
119
Kuperberg, G., et al. (2002). Developments in the pharmacological treatment of schizophrenia. Expert Opin. Investig.
Drugs. 11 (10) 1-7.
120
Weiden, P. J., et al. (2003). New Developments in Antipsychotic Therapy. J. Clin. Psichiatry (64)11: 1379-1381.

44
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

5.1.4. Enfermedades metablicas en sangre122. Los tratamientos actuales se dirigen a

Las enfermedades metablicas afectan al
equilibrio metablico del organismo y suponen
problemas sanitarios de primer orden, ya que
constituyen factores de riesgo para otras
enfermedades de gran importancia como son las
patologas cardiovasculares. Las enfermedades
metablicas ms habituales son la obesidad y la
diabetes, y los frmacos de los que se dispone
actualmente estn dirigidos al control a largo
plazo del peso corporal y del nivel de glucosa en
sangre, aunque tan slo alivian los sntomas de
manera transitoria y dan lugar a efectos
secundarios importantes. Por tanto, resulta
necesario identificar mecanismos y nuevas dianas
que den lugar al desarrollo de nuevos frmacos
para tratar e incluso prevenir las enfermedades
metablicas121.
La diabetes tipo II es una enfermedad
metablica caracterizada por un elevado nivel de
glucosa en sangre. El 90% de los diabticos sufre
diabetes tipo II, consistente en la produccin
insuficiente de insulina, o bien en la generacin de
resistencia a su accin. La diabetes de tipo II se
acompaa a menudo de obesidad y colesterol alto
impedir la produccin de glucosa a nivel del
hgado, fomentar la cantidad de insulina en sangre
y combatir la resistencia a su accin. Existen varios
procesos sobre los que se podra actuar para
desarrollar nuevos frmacos, principalmente
activando la funcin del pncreas, inhibiendo la
sntesis de glucosa, incrementando la respuesta a
la glucosa a nivel de diferentes tejidos y actuando
a nivel de la funcin del tejido graso.
La obesidad es la enfermedad metablica ms
frecuente en la poblacin del primer mundo, e
incrementa el riesgo de enfermedad y muerte por
diabetes, apopleja y enfermedades coronarias. La
incidencia de la obesidad se encuentra en ascenso
y supone un serio problema en los pases
industrializados, por lo que se est investigando
activamente en el desarrollo de frmacos para
combatirla123. Los tratamientos actuales consisten
en ciruga, control de la dieta, ejercicio y la
administracin de frmacos que incrementan la
sensibilidad de los adipocitos a la insulina. Las
estrategias propuestas actuaran a nivel de la
funcin del tejido graso y sobre la disipacin de la
energa para desarrollar nuevos tratamientos
frente a la obesidad124.

Enfermedad Tratamientos actuales Rutas/Dianas potenciales

Incremento de la sensibilidad de los

adipocitos a la insulina (activacin Regulacin de la adipognesis y
del PPAR-a). funcin de adipocitos.

Inhibicin de la produccin de Respuesta del msculo esqueltico

glucosa a nivel del hgado a insulina.
Diabetes tipo II.
(Metformina GlucophageTM). Inhibicin de la sntesis de glucosa
Activacin de la sntesis y liberacin a nivel del hgado.
a nivel de pncreas (secretagogos, Activacin de la funcin del
anlogos del GLP-1, inhibidores de pncreas.
la DPP-IV).

Incremento de la sensibilidad de los

adipocitos a la insulina (activacin
del PPAR-a).
Obesidad.
Control diettico y ejercicio.
Ciruga reductora del estmago.
Regulacin de la adipognesis y la
funcin de adipocitos.
Activacin de la disipacin de la
energa en el tejido graso (UCPs).

Figura 22. Principales dianas teraputicas implicadas en diabetes tipo II y obesidad.

Fuente: Dormn, C. E. (2004). Target discovery in metabolic disease. Drug Discovery Today. 9 (18): 785-794.

121
Dohrmann, C. E. (2004). Target discovery in metabolic disease. Drug Discovery Today. 9(18): 785-794.
122
Diabetes mellitus no insulinodependiente (DMNID). Enciclopedia mdica en espaol. Medline Plus. Instituto Nacional de
Salud de los Estados Unidos (http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000313.htm).
123
Obesidad. Enciclopedia mdica en espaol. Medline Plus. Instituto Nacional de Salud de los Estados Unidos.
(http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003101.htm).
124
Dohrmann, C. E. (2004). Target discovery in metabolic disease. Drug Discovery Today. 9 (18): 785-794.

45
5.1.5. Enfermedades autoinmunes
Las enfermedades autoinmunes son un conjunto de
patologas producidas por el reconocimiento de los
propios tejidos como agentes extraos por parte del
sistema inmune, provocando una respuesta de
defensa que puede afectar a diversos rganos y
tejidos. Las principales enfermedades autoinmunes
son la artritis reumatoide, la diabetes de tipo I,
lupus, miastenia gravis, enfermedad de Crohn y
psoriasis. Los tratamientos tradicionales consisten en
el empleo de frmacos que producen alivio de la
sintomatologa como pueden ser analgsicos,
antiinflamatorios e inmunosupresores. Adems de su
reducida eficacia, estos frmacos reducen la
capacidad inmunolgica de los pacientes y favorecen
la aparicin de infecciones.
La artritis reumatoide se desarrolla cuando el
sistema inmune ataca el tejido que cubre las
articulaciones dando lugar a dolor, inflamacin, y
prdida de movilidad. Los tratamientos habituales
tienen por objeto reducir el dolor y la inflamacin de
las articulaciones por lo que se suelen administrar
analgsicos y antiinflamatorios. Por otro lado, los
inmunosupresores pueden aliviar la sintomatologa y
ralentizan la progresin de la enfermedad.
Recientemente han sido autorizados varios
anticuerpos monoclonales e inhibidores biolgicos
frente a dianas implicadas en la inflamacin para el
tratamiento de la artritis reumatoide125. Existen
varios niveles sobre los que se ha propuesto actuar
para el desarrollo de nuevos frmacos, regulando la
funcin de las clulas T, mastocitos y el sistema
hormonal esteroideo.
La diabetes de tipo I es una enfermedad en la que
el sistema inmune ataca a las clulas del pncreas
productoras de insulina. Debido a ello el organismo
no es capaz de producir insulina, el nivel de glucosa
en sangre deja de estar bajo control y se altera el
metabolismo de los hidratos de carbono, lpidos y
protenas. El tratamiento actual consiste en controlar
la dieta, seguir hbitos de vida adecuados y el
suministro diario de insulina mediante inyecciones.
Las inyecciones de insulina han de administrarse de
por vida y a pesar de ello los enfermos de diabetes
suelen sufrir problemas de salud debido a la
dificultad que supone la regulacin de los niveles de
glucosa en sangre126. Las futuras terapias irn
dirigidas a evitar la destruccin de las clulas beta o
bien a la recuperacin de su funcin actuando sobre
las distintas rutas implicadas en la respuesta inmune
daina, ya que de este modo se conseguira mejorar
ostensiblemente la calidad de vida de los pacientes.
La psoriasis es una enfermedad crnica de la piel
caracterizada por una invasin de la misma por
parte de clulas inflamatorias y en consecuencia
una proliferacin excesiva de las clulas de la piel.
Los tratamientos actuales se centran en el control de
los sntomas y en impedir infecciones secundarias
mediante tratamientos tpicos, fototerapia, y en
casos severos frmacos inmunosupresores o
retinoides127. Recientemente se han autorizado
nuevos tratamientos basados en la administracin
de anticuerpos monoclonales o derivados de los
mismos que actan sobre dianas implicadas en la
respuesta inflamatoria, que de este modo modulan
la respuesta inmune excesiva128. Existen mltiples
rutas y dianas que han sido propuestas como dianas
potenciales de futuras terapias frente a la psoriasis,
entre las que cabe destacar las molculas de
adhesin celular, receptores de factores de
crecimiento y molculas inflamatorias129.
La enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa se
producen debido al ataque del sistema inmune sobre
el intestino que origina un proceso inflamatorio.
Ambas enfermedades son muy similares aunque
existen diferencias en cuanto a la afectacin del
intestino y profundidad de las lesiones. El
tratamiento actual consiste en la administracin de
frmacos que suprimen la respuesta inflamatoria
como antiinflamatorios, inmunosupresores y
corticosteroides, lo que permite controlar los
sntomas y reducir los brotes de la enfermedad.
Recientemente se ha autorizado el uso de un
anticuerpo frente a una diana implicada en la
respuesta inmune para el tratamiento de la
enfermedad de Crohn130. Existen varias dianas sobre
las que se podra actuar para tratar estas patologas,
principalmente a nivel de la funcin de clulas T, los
sistemas de reparacin y defensa del intestino,
molculas inflamatorias y procesos relacionados con
la apoptosis131.

125
Instituto Nacional de la Artritis y enfermedades musculoesquelticas y de piel. Instituto Nacional de la Salud de Estados
Unidos de Amrica. (http://www.niams.nih.gov/hi/topics/arthritis/rahandout.htm).
126
Diabetesjuvenil.com (http://www.diabetesjuvenil.com/documentos_html/dj_investigacion.asp).
127
Psoriasis. Medline Plus. Instituto Nacional de Salud de los Estados Unidos.
(http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/psoriasis.html).
128
Fundacin Nacional de la Psoriasis de los Estados Unidos de Amrica. (http://www.psoriasis.org).
129
Igney, H. G., et al. (2004). Techniques: Species finest blend-humanized mouse models in inflammatory skin disease
research. Trends Pharmacol Sci. 25 (10): 543-549.
130
Enfermedad de Crohn. Medline Plus. Instituto Nacional de Salud de los Estados Unidos.
(http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/crohnsdisease.html#tratamiento).
131
Fundacin Americana de la Enfermedad de Crohn y Colitis. CCFA. (http://www.ccfa.org/).

46
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

El lupus es una enfermedad autoinmune efectos secundarios en tratamientos a largo

sistmica que afecta al tejido conectivo daando
mltiples rganos como los riones y el corazn.
Los tratamientos actuales se basan en el empleo
de frmacos analgsicos, inmunosupresores,
antiinflamatorios y anticoagulantes que controlan
la sintomatologa pero que presentan serios
plazo132. Se han propuesto varias dianas para
desarrollar frmacos ms eficaces que acten a
nivel de protenas de adhesin, molculas
implicadas en procesos inflamatorios, antgenos,
factores de crecimiento, necrosis y la activacin
de las clulas B133.

Enfermedad Tratamientos actuales Rutas/Dianas potenciales

Analgsicos.
Antiinflamatorios (no esteroideos y
corticosteroides).
Funcin de la clulas T.
Frmacos inmunosupresores
Funcin de los mastocitos.
Artritis reumatoide. modificadores de la enfermedad:
metotrexato. Regulacin del sistema hormonal
esteroideo.
Anticuerpos inhibidores del TNF-_:
(etanercept, Infliximab, Adalimumab).
Inhibidor de la interleuquina (Anakinra).

Funcin de clulas beta (Interleuquinas,

Control diettico y ejercicio.
Diabetes tipo I. rutas del interfern, TNF-_, interaccin
Administracin de insulina inyectada.
entre Fas y Fas-L).

Inmunosupresores (ciclosporina, esteroides).

Vitamina D3. Proteasoma.
Retinoides. Regular la adhesin celular (selectina).
Anticuerpo monoclonal frente a TNF-_ Receptor del PAR_.
Psoriasis.
(etanercept). Receptor del factor de crecimiento NGF.
Anticuerpo monoclonal frente a CD11a Regular rutas inflamatorias (leucotrieno,
(efalizumab). Inteleuquina-15).
Anticuerpo de fusin anti-CD2 (alefacept).

Enfermedad de Crohn y
colitis ulcerosa.
Antiinflamatorios como los aminosalicilatos
y corticosteroides
Anticuerpo quimrico frente a TNF-_
(Infliximab).
Funcin de la clulas T.
Regular rutas inflamatorias (interleuquinas
10 y 14).
Factor de necrosis tumoral (TNF`).
Sistemas de defensa del epitelio intestinal.
Mecanismos de dao y reparacin del
intestino.
Regulacin de la apoptosis (card15/NOD2).

Molculas inflamatorias: interfern-1,

Interleuquina-10, MIF.
Antiinflamatorios (no esteroideos y
Estimulacin de clulas B: BLyS.
corticosteroides).
Proteasas TIMP-3 y TIMP-4.
Lupus. Analgsicos.
Molculas de adhesin: caderinas P y R
Frmacos inmunosupresores.
Factores de crecimiento y necrosis (TNF,
Anticoagulantes.
CSF-1 CSF-1).
Antgenos CD20 y CD154.

Figura 23. Principales dianas teraputicas en enfermedades autoinmunes.

Fuente: elaboracin propia.

132
Fundacin Americana del Lupus (http://www.lupus.org/) .
133
Rus, V., et al. (2004). Gene expression profiling in peripheral blood mononuclear cells from lupus patients with active
and inactive disease. Clinical Immunology. 112: 231 234.

47
5.1.6. Cncer
El cncer consiste en un conjunto de ms de 100
patologas en las que se produce una proliferacin
anormal de las clulas que da lugar a tumores que
pueden invadir otros tejidos dando lugar a
metstasis. Dado que diferentes tumores
morfolgicamente idnticos pueden ser consecuencia
de alteraciones en un gran nmero de rutas, las
dianas sobre las que actuar sern de distinta
134
naturaleza en funcin de cada tipo de tumor
Los tratamientos actuales ms habituales son la
ciruga, quimioterapia y radioterapia, aunque no
son eficaces en todos los casos, por lo que la
tendencia actual va dirigida hacia una estrategia
de terapia combinada frente a mltiples dianas
implicadas en el proceso canceroso. Por otra
parte, la mayora de los frmacos disponibles
actualmente para el tratamiento del cncer
presentan problemas de toxicidad, por lo que
resulta una prioridad la bsqueda de nuevas
. dianas teraputicas relacionadas con el cncer.

Enfermedad Tratamientos actuales Rutas/Dianas potenciales

Ciruga. Muerte celular de las clulas

Radioterapia. tumorales.
Quimioterapia. Inhibicin del crecimiento del tumor
Anticuerpos monoclonales frente al (inhibicin de la angiognesis,
receptor del factor de crecimiento regulacin del ciclo y
Cncer. epidrmico humano (Transtuzumab). envejecimiento celular).
cido retinico. Inhibicin de la migracin y la
Inhibidor de la tirosina quinasa metstasis.
Bcr-Abl. (Imatinib). Regulacin de la respuesta inmune
Inhibidor del proteosoma (rutas antiinflamatorias, ruta del
(Bortezomib). interfern).

Figura 24. Tratamientos actuales frente al cncer y rutas de inters para el desarrollo de nuevos frmacos con actividad
antitumoral.
Fuente: Brown, D. & Superti-Furga, G. (2003). Rediscovering the sweet spot in drug discovery. Drug Discovery Today.
Vol. 8 (23): 1067-1077.

En los ltimos aos se han lanzado al mercado
varios frmacos anticancergenos que actan
sobre dianas teraputicas que han sido
identificadas y validadas estudiando rutas
moleculares que juegan un papel crucial en el
cncer. El primero de ellos es un frmaco
autorizado para el tratamiento del cncer de
mama, Trastuzumab (Herceptina)135, que acta
sobre el receptor del factor de crecimiento
humano inhibiendo su funcin. El cido retinoico
activa el receptor de cido retinico y ha sido
establecido para el tratamiento de un tipo de
leucemia. Por otro lado, el Imatinib (Glivec)136
inhibe la tirosina quinasa Bcr-Abl y se emplea en
el tratamiento de tumores intestinales y un tipo
de leucemia137. En ltimo lugar, cabe destacar el
bortezomib (Velcade)138, frmaco que inhibe el
proteosoma y que ha sido autorizado para el
tratamiento del mieloma mltiple.
Existen varias rutas y procesos sobre los que se
podra actuar para el desarrollo de nuevos
frmacos frente al cncer, ya sea impidiendo el
crecimiento tumoral mediante la inhibicin de la
irrigacin sangunea al tumor o mediante la
regulacin del ciclo celular, promoviendo la

134
Sauter, G., et al. (2003). Tissue Microarrays in Drug Discovery. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol. 2, 962-972.
135
Genentech, Inc. HerceptinTM (http://www.herceptin.com/herceptin).
136
Novartis. GlivecTM (http://www.glivec.com/content/home.jsp).
137
Serrano, R. Investigacin y clnica oncolgica deben disear frmacos selectivos. Diario Mdico. 23 de mayo de 2002
(http://www.diariomedico.com/edicion/noticia/0,2458,148513,00.html).
138
Millenium Pharmaceuticals y Johnson & Johnson Pharmaceutical Research & Development. VelcadeTM.
(http://www.mlnm.com/products/velcade/index.asp).

48
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

muerte de las clulas cancerosas, impidiendo la
migracin o metstasis, o bien favoreciendo la
respuesta de defensa del organismo frente al
tumor. Debido a que el cncer es un conjunto de
enfermedades diferentes debidas a alteraciones
diversas, los tumores que presentan una misma
morfologa no tienen porqu presentar las mismas
alteraciones ni las mismas dianas, por lo que hay
que considerar que frmacos desarrollados frente
a una diana pueden no ser eficaces en estos
casos 139
. como las zinc peptidasas y las sern proteasas.
5.2. Naturaleza de las dianas
teraputicas para los
frmacos actuales
Los avances en genmica y protemica que se han
producido en los ltimos aos han permitido
estimar en 600-1.500 el nmero de dianas
teraputicas sobre las que se podra actuar
mediante frmacos. Por otro lado, se conoce que
los frmacos de los que se dispone en la actualidad
actan sobre menos de 500 dianas diferentes, de
modo que cabe decir que un nmero ostensible de
dianas an no han sido explotadas.
Las 500 dianas teraputicas conocidas pueden
clasificarse en base a su estructura y su funcin
en 130 familias de protenas, de las cuales los
receptores acoplados a protenas G son las ms
importantes en nmero, seguidas de las enzimas
sern-treonin y tirosn quinasas. Cabe destacar la
importancia en nmero de otros tipos de enzimas
Asimismo, los receptores nucleares de hormonas
como los esteroides son una familia de dianas
relevante en la farmacoterapia actual.
Al comparar las dianas actuales con las dianas
potenciales, se observa que existen diferencias en la
distribucin de las dianas en familias de protenas.
Cabe destacar que existen grandes familias de
dianas potenciales para las que se dispone de
relativamente pocos frmacos y, por tanto, se puede
considerar que estas familias de dianas no han sido
suficientemente explotadas. Entre estas familias se
encuentran las sern treonn y tirosn quinasas que
adems constituyen las familias de dianas
potenciales ms numerosas140.

139
Sauter, G., et al. (2003). Tissue Microarrays in Drug Discovery. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol. 2, 962-972.
140
Hopkins, A. L. & Groom, C. R. (2002). The druggable genome. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol 1: 727-730.

49
 A)
GPCRs 25%

119 familias diferentes

y dianas nicas
44%
Ser-Thr/Tyr
kinasas 10%

Zn peptidasas 4%

NHRs 3%
Cys proteasas 2%
Ser proteasas 3%
Canales inicos 2%
Fosfodiesterasas 3%
Enzimas C. P450 2%
Canales catinicos 2%

B)
Ser-Thr / Tyr kinasas 22%

114 familias diferentes

y dianas nicas
40%
GPCRs 15%

Deshidrogenasas/ Canales catinicos 5%

reductasas 2% Ser proteasas 4%
a-carboxilasas 2% Protein fosfatasas 4%
NHRs 3%
Enzimas C. P450 2%
Zn peptidasas 2%

Figura 25. Familias de dianas teraputicas actuales (A) y potenciales (B).

Fuente: Hopkins, A. L. et Groom, C. R. (2002). The druggable genome. Nature Reviews: Drug Discovery. Vol 1: 727-730.
Acrnimos: GPRCs: Receptores acoplados a la proteina G, Ser: Serina, Thr: Treonina, Tyr: Tirosina, Cys: Cisteina,
Zn: Zinc, NHR: Receptores Nucleares de Hormonas, C. P459: Citocromo P450.

El Anexo IV del presente informe contiene una
revisin de diversos enfoques que se han
empleado con xito en la validacin de dianas.
Gran parte de dichas dianas han dado lugar al
desarrollo de nuevos frmacos que ya han sido
lanzados al mercado o que se encuentran en
diferentes etapas de los ensayos clnicos.
En la actualidad, los ratones knock-out siguen
siendo los sistemas preferidos a la hora de validar
dianas y han dado lugar al descubrimiento de un
gran nmero frmacos. Por otro lado, las
tecnologas antisentido estn cobrando fuerza en
los ltimos aos y estn siendo ampliamente
usadas para validar dianas teraputicas. No
obstante, se ha de destacar que las tcnicas que
figuran en la tabla anterior no son las nicas que
se han empleado para validar cada una de las
dianas descritas, sino que suelen ser varias las
tcnicas empleadas de forma combinada.

50
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

6. Entorno econmico en la validacin

de dianas
La investigacin en la industria farmacutica se
caracteriza por ser una investigacin de larga
duracin, altamente arriesgada, muy costosa, y
sometida a gran competencia. La duracin media
de la investigacin previa al lanzamiento de un
compuesto es de 10-12 aos141 y se estima que el
coste medio de la investigacin y desarrollo de un
nuevo frmaco ronda en torno a los 800 millones
de dlares, de los cuales el 40% se debe a las
fases preclnicas mientras que el 60% restante se
corresponde con las fases de investigacin
clnica142. La tasa de fracaso a lo largo del proceso
de investigacin farmacutica es elevada y ms
del 80% de los proyectos fracasan durante la fase
de descubrimiento anterior a los ensayos clnicos,
de modo que slo uno de cada cinco proyectos
llega a iniciar los ensayos clnicos. Durante la fase
de desarrollo, ms del 90% de los proyectos se
abandonan, de modo que en total tan slo uno de
cada 50 proyectos comenzados llega a lanzar un
frmaco al mercado. Por otro lado, debido a la
fuerte competencia en el sector, se estima que
tan slo tres de cada diez medicamentos
comercializados producen beneficios que superan
los costes de I+D143.
Al analizar los proyectos de I+D que fracasan se
observa que el abandono de estos proyectos tiene
lugar principalmente en tres momentos clave del
proceso de desarrollo de un frmaco. En algunos
casos, dianas que no han sido suficientemente
validadas fracasan en etapas tempranas del
proceso de descubrimiento de frmacos o durante
las fases clnicas de desarrollo. En ambos casos,
el fracaso est estrechamente ligado a una
incorrecta validacin de las dianas teraputicas.
Por otro lado, los errores en la identificacin y
optimizacin de compuestos teraputicos, as
como la aparicin de efectos txicos de los
compuestos seleccionados son los otros dos
factores que explican la mayora de los fracasos
que se producen144.

Factores responsables del elevado ndice de fracaso en el lanzamiento de nuevos

frmacos:

Dianas insuficientemente validadas en las primeras fases de identificacin de dianas y durante las
fases clnicas.

Errores en la identificacin y optimizacin de compuestos.

Toxicidad y efectos indeseados de los frmacos candidatos.

141
Jackson, L. K. & Phillips, M. A. (2002). Target Validation for Drug Discovery in Parasitic Organisms. Current Topics in
Medicinal Chemistry, 2, 425-438.
142
DiMasi, J. A. (2003). The price of innovation: new estimates of drug development costs. Journal of Health Economics,
22: 151-185.
143
Esteve, A. Biotecnologa y Salud. I curso de formacin e informacin cientfica en biomedicina y biotecnologa para
especialistas en comunicacin. 16 de diciembre de 2003. Fundacin Genoma Espaa
(http://www.gen-es.org/06_news/docs7/aesteve161203.pdf).
144
Brown, D. & Superti-Furga, G. (2003). Rediscovering the sweet spot in drug Discovery. Drug Discovery today. Vol. 8
No. 23. 1067-1077.

51
En los ltimos aos, el nmero de lanzamientos de un ritmo superior al 5% anual. Por otro lado, se ha
nuevos frmacos no se ha incrementado a pesar de producido un incremento de fracasos en frmacos
los avances que se han producido en el rea de la que alcanzan fases tardas en los proyectos de
biologa molecular. En el grfico que figura a investigacin farmacutica, principalmente en la
continuacin se puede apreciar que el nmero de fase II de los ensayos clnicos a pesar del
nuevos compuestos que se lanzan al mercado no incremento de frmacos que entran en fase I145.
ha dejado de reducirse desde el ao 1999, mientras Algunos autores sealan que esta tendencia se
que los costes en I+D no dejan de incrementarse a mantendr al menos hasta el ao 2008146.

60 60
N de molculas que llegan al mercado

Inversin en I+D en billones de dlares

50 50

40 40

30 30

20 20

10 10

0 0
1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003
Ao

Nuevos compuestos Inversin en I+D

Figura 26. Evolucin del lanzamiento de nuevos frmacos y de los costes de I+D en el mercado mundial durante el
periodo 1992-2003.
Fuente: CMR International, http://www.cmr.org.

6.1. Validacin de dianas en que la duracin media de la fase de validacin de

dianas en un proyecto de I+D para el desarrollo
el desarrollo de frmacos de un nuevo frmaco ronda los dos aos y que su
coste asciende a 205 millones de dlares147.
El proceso de validacin de dianas supone gran Por tanto, la validacin de dianas supone
parte de la inversin que realiza la industria en torno a un quinto de la inversin econmica
farmacutica en investigacin y desarrollo tanto de los proyectos de I+D en la industria
en tiempo como en coste econmico. Se estima farmacutica.

145
Walker, M. J. A., et al. (2004). Functional pharmacology: the drug discovery bottleneck? Drug Discovery Today. Vol. 3,
N 5: 208-215.
146
Brown, D. & Superti-Furga, G. (2003). Rediscovering the sweet spot in drug Discovery. Drug Discovery today. Vol. 8 No.
23: 1067-1077.
147
Altshuler, J., et al. (2001). A Revolution in R&D: How Genomics and Genetics are transforming the Biopharmaceutical
Industry. The Boston Consulting Group.

52
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

7
7

6
Duracin (aos)

3 2,7

2
2 1,6
1
1
0,4

0
Identificacin Validacin Identificacin Optimizacin Desarrollo Desarrollo
de dianas de dianas del compuesto del compuesto preclnico clnico

300

260
250

205
Coste (millones de )

200
165

150
120

100 90

50 40

0
Identificacin Validacin Identificacin Optimizacin Desarrollo Desarrollo
de dianas de dianas del compuesto del compuesto preclnico clnico

Figura 27. Coste y duracin del proceso de validacin de dianas y del resto de fases de desarrollo de un frmaco.
Fuente: Altshuler, J., et al. (2001). A Revolution in R&D: How Genomics and Genetics are transforming the
Biopharmaceutical Industry. The Boston Consulting Group.

Debido a que la inversin necesaria para el queda patente al observar que la industria
desarrollo de un frmaco se ha incrementado farmacutica y biotecnolgica ha lanzado al
considerablemente durante los ltimos aos, la mercado una media de 2-3 frmacos por ao que
industria farmacutica ha tenido que idear actan sobre nuevas dianas, mientras que se
estrategias para contener sus gastos. Por un lado, aprueban entre 25-30 medicamentos que actan
la industria farmacutica centra sus esfuerzos de sobre dianas para las que ya existen frmacos en
I+D en dianas teraputicas para las que ya
el mercado.
existen frmacos en el mercado. Esto se debe en
gran medida al riesgo que supone trabajar con
No obstante, existen motivos tanto sociales como
dianas que an no han sido validadas debido al
elevado porcentaje de fracasos que ocurren. Las econmicos para investigar en nuevas dianas. A lo

dianas para las que existen frmacos en humanos largo del presente informe se han expuesto
no suelen presentar estos problemas, lo que diversas patologas que dan lugar a problemas
reduce considerablemente el tiempo e inversin sanitarios de primer orden para las cuales la
necesario para el desarrollo de nuevos frmacos sociedad demanda nuevos frmacos eficaces y
que acten sobre las mismas. Esta tendencia seguros, y que por tanto acten sobre dianas

53
especficas para estas patologas. Algunas de
estas enfermedades generan costes elevados que
repercuten negativamente en el creciente gasto
sanitario de los Sistemas Nacionales de Salud. Por
otro lado, la disminucin que se ha producido en
el lanzamiento de nuevos frmacos difcilmente
podr ser superada si no se identifican y validan
nuevas dianas teraputicas. Algunas de las
enfermedades para las que no existen
tratamientos eficaces afectan a amplios sectores
de la poblacin, por lo que el descubrimiento de
nuevas terapias permitira dirigirse a un pblico
numeroso aportando nuevas oportunidades de
mercado para las empresas farmacuticas148.
Identificacin Validacin
de dianas de dianas
Diana A
Diana B
Diana C
Diana D
Figura 28. Beneficios de la validacin de dianas sobre el desarrollo de proyectos de I+D en la industria farmacutica.
Fuente: Elaboracin propia.
De este modo, el abandono de proyectos en fases
tempranas evitar el invertir recursos y tiempo en el
desarrollo de compuestos activos que posteriormente
demostrarn no ser eficaces. De esta forma, se
liberaran recursos que podran ser empleados para
finalizar proyectos con mayores posibilidades de
conducir al lanzamiento de frmacos de exito y
acortar por tanto la duracin de los mismos.
6.2. Estrategias de
implantacin de
validacin de dianas en
la industria farmacutica
El coste derivado del lanzamiento de un nuevo
frmaco al mercado es elevado debido
principalmente a los ensayos clnicos y, por tanto,
tan slo las grandes compaas son capaces de
realizar el proceso completo de desarrollo de nuevos
frmacos. Sin embargo, las nuevas compaas
148
Zambrowicz, B. P., et al. (2003). Predicting drug efficacy: knockouts model pipeline drugs of the pharmaceutical
industry. Current Opinion in Pharmacology. 3: 563-570.
54
Cuanto ms se avance en el proyecto de
investigacin y desarrollo, mayores son los costes
acumulados a lo largo del proceso. Por tanto,
cuanto ms tarde se produzca el abandono de los
proyectos que van a fracasar, mayores sern los
costes acumulados para la empresa farmacutica.
Existe por tanto una necesidad de discriminar los
proyectos que no van a conducir a un frmaco
exitoso en fases tempranas de la investigacin. La
validacin de dianas constituye un proceso clave
que puede permitir rechazar proyectos abocados
al fracaso en fases tempranas.
Desarrollo Desarrollo Desarrollo
del compuesto preclnico clnico
Comercializacin
biotecnolgicas muestran gran dinamismo a pesar
de su reducido tamao y recursos gracias a la
especializacin tecnolgica y el dominio de reas
tecnolgicas punteras que hace que su nivel de
ingresos, ventas e inversin avance a ritmo slido a
escala mundial. En consecuencia, el punto fuerte de
las empresas biotecnolgicas consiste en el
desarrollo de tecnologas innovadoras propias que
las farmacuticas necesitan para validar dianas.
Por este motivo, las compaas farmacuticas
tradicionales buscan frmulas de colaboracin con
las empresas biotecnolgicas con el fin de
garantizarse el acceso a las nuevas tecnologas
desarrolladas por estas ltimas.
La incorporacin de tecnologas de validacin de
dianas a la industria farmacutica puede
producirse por medio de diferentes estrategias.
Un gran nmero de empresas optan por la
adquisicin de tecnologa de validacin de dianas
desarrollada por empresas biotecnolgicas,
mientras que en otros casos estas ltimas ofrecen
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

las dianas ya validadas en su cartera de productos. En otras ocaciones, las empresas farmacuticas
recurren a alianzas estratgicas en busca de socios con tecnologa propia de validacin de dianas, o bien a
la adquisicin de estas compaas biotecnolgicas especializadas.

Estrategias de implantacin de nuevas tcnicas de validacin de dianas en la industria

farmacutica:

Adquisicin de tecnologa desarrollada por empresas biotecnolgicas especializadas en validacin

de dianas.

Compra de potenciales dianas validadas por empresas biotecnolgicas.

Alianzas estratgicas entre empresas biotecnolgicas y farmacuticas.

Adquisicin de empresas biotecnolgicas especializadas en validacin de dianas.

6.3. Estrategias comerciales en la validacin de dianas

Las principales empresas farmacuticas multinacionales han optado por establecer colaboraciones con
empresas biotecnolgicas para hacer frente a su dficit de innovacin y reforzar sus lneas de I+D. A
continuacin detallamos algunos de los principales acuerdos que han establecido las grandes
multinacionales farmacuticas con las empresas biotecnolgicas ms relevantes.

Empresa
Empresa biotecnolgica Contribucin
farmacutica

ISIS Pharmaceuticals Inc. Tecnologas antisentido.

Pfizer Lexicon Genetics Inc. Tecnologa knock-out.

Deltagen Tecnologa knock-out.

CuraGen Servicios de validacin.

ISIS Pharmaceuticals Inc. Tecnologas antisentido.

Deltagen Tecnologa knock-out.

GlaxoSmithKline
Cytokinetics Dianas teraputicas validadas.

Galpagos Genomics Tecnologas de ARNsi y de dianas validadas.

Beyond Genomics Servicios de validacin.

Johnson
Lexicon Genetics Tecnologa knock-out.
& Johnson

Lexicon Genetics Tecnologa knock-out.

Tecnologa para validar dianas del sistema

BioVex
nervioso.

Aventis Xerion Pharmaceuticals Tecnologa CALI.

Servicios de validacin. Desarrollo de un

Zygogen
modelo de trombosis en pez zebra.

Atugen Tecnologa antisentido.

(Contina en pgina siguiente)

55
 Empresa
Empresa biotecnolgica Contribucin
farmacutica

Tecnologa. Plataforma de diseo y sntesis de

Compugen Ltd.
ARNi.

Beyond Genomics Servicios de validacin.

Novartis
Immusol Dianas teraputicas validadas.

Xerion Tecnologa CALI.

DeCode Servicios de validacin. Bases de datos.

Roche Curagen Servicios de validacin.

Lexicon genetics Tecnologa knock-out. Acceso a su base de datos.

Servicios de validacin. Validar dianas

Atugen
concretas con antisentidos.

Oxford Biomedica Tecnologa. Vectores para transferir genes.

Astrazeneca
Pharmagene Servicios de validacin.

ISIS Pharmaceuticals Inc. Tecnologas antisentido.

BioVex Tecnologa.

Lexicon Genetics Tecnologa knock-out.

ISIS Pharmaceuticals Inc. Tecnologa antisentido.

Merck & co. Biovex Tecnologa.

Deltagen Tecnologa knock-out.

Cellomics Inc. Tecnologas relacionadas con microarrays.

Tecnologa y servicios de validacin. Bases de

Pharmagene
datos, validacin de dianas con tecnologa propia.
Bristol Myers
Sequitur Tecnologa de ARNi.
Squibb
Tecnologa. Base de datos de fenotipos de
Lexicon Genetics
knock-outs.

Lexicon Genetics Tecnologa knock-out.

Eli Lilly
Pangea Sistems Tecnologa. Software.

Tecnologa. Software para plataforma de

Lion Bioscience
validacin.
Schering Plough
Atugen Tecnologa. Ribozimas.

Servicios de validacin basados en tecnologas

Galapagos
antisentido.

Lexicon Genetics Tecnologa knock-out.

Bayer
Atugen Tecnologas antisentido.

Curagen Dianas teraputicas validadas.

Tabla 5. Principales acuerdos de colaboracin entre empresas farmacuticas y empresas biotecnolgicas relacionadas con
la validacin de dianas.
Fuente: BioCentury Publications, Inc; http://www.biocentury.com.

56
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
En cuanto a las tecnologas que son objeto de
colaboracin entre las principales empresas
farmacuticas y las biotecnolgicas ms
importantes, destacan las tecnologas antisentido
y los modelos vivos, especialmente los ratones
knock-out. De hecho, la totalidad de las
farmacuticas ms importantes han establecido
acuerdos que implican alguna de las dos
tecnologas mencionadas para garantizarse el
acceso a las mismas. Entre las empresas que
desarrollan animales modelo cabe destacar los
casos de Lexicon Genetics, que desarrolla ratones
knock-out y transgnicos y presta servicios de
validacin de dianas, y Deltagen, que desarrolla
ratones knock-out y dispone de bases de datos de
genes de inters clnico obtenidos a partir de los
mismos. Ambas empresas ofrecen sus modelos y
sus servicios a la mayora de las multinacionales
farmacuticas ms importantes. Por otro lado,
Atugen e ISIS Pharmaceuticals son las empresas
especializadas en tecnologas antisentido que han
establecido mayor cantidad de colaboraciones con
las grandes farmacuticas. Atugen oferta
productos y servicios de validacin de dianas
DE DIANAS TERAPUTICAS
basados en oligonucletidos antisentido propios y
ARNsi, e ISIS Pharmaceuticals presta servicios de
validacin de dianas basados en tecnologas
antisentido. Ambas empresas estn investigando
activamente en el desarrollo de terapias basadas
en tecnologas antisentido con el objeto de poder
desarrollar frmacos antisentido.
En los ltimos aos, gran parte de las empresas
especialistas en tecnologas de validacin de
dianas han aprovechado su conocimiento en
tecnologas punteras para realizar otras fases de
la I+D y lanzarse al desarrollo de frmacos.
Debido a su falta de experiencia en la totalidad
del proceso de desarrollo, algunas compaas
biotecnolgicas han optado por colaborar con
compaas farmacuticas para desarrollar
conjuntamente nuevos tratamientos, lo que les ha
permitido adquirir el conocimiento necesario para
lanzarse al desarrollo en solitario de nuevos
frmacos. De este modo las biotecnolgicas
consiguen obtener mayores ingresos, lo que
les permite rentabilizar al mximo sus
esfuerzos en I+D.
57
7. Empresas y proyectos en validacin
de dianas
En el presente apartado se comentan las
principales empresas que ofrecen productos y
servicios relacionados con la validacin de dianas
que operan a nivel internacional y aquellas otras
empresas de carcter nacional relacionadas con la
validacin de dianas. Se mencionarn las
actividades principales de estas empresas que
prestan servicios o productos de validacin de
dianas, as como la evolucin que han sufrido las
mismas en los ltimos aos.
Por otro lado, se estudian los proyectos de I+D
espaoles en validacin de dianas que emplean
las tecnologas y tcnicas expuestas a lo largo del
presente informe, as como las tecnologas
empleadas y las patologas en las que se centra la
I+D nacional.
7.1. Empresas internacionales
en validacin de dianas
En el anexo II del presente informe figuran las
principales empresas internacionales en validacin
de dianas con los productos y servicios que
ofrecen y las colaboraciones que han establecido
con otras compaas del sector. En cuanto a la
actividad principal y la misin de las empresas
detalladas, gran parte de ellas desarrollan
tecnologas aplicables a la validacin de dianas en
general, mientras que otras validan dianas con
objeto de descubrir nuevas dianas frente a
determinadas enfermedades.
La mayora de las empresas se han especializado
en tecnologas concretas de desarrollo propio que
comercializan como herramientas de validacin de
dianas. Las empresas especializadas en
tecnologas antisentido son las ms numerosas,
entre las que destacan ISIS Pharmaceuticals y
Atugen debido a su amplia experiencia en
oligonucletidos antisentido y ARN de
interferencia respectivamente. Otras empresas
destacadas en el campo de las tecnologas
antisentido son Alnylam Pharmaceuticals que
investiga activamente en nuevos tratamientos
basados en el ARN de interferencia, Cenix
Bioscience que presta servicios basados en la
aplicacin del ARN de interferencia a clulas
humanas y modelos animales, y Sequitur
(perteneciente a Invitrogen) fabricante de kits y
58
reactivos para el uso de la tecnologas antisentido
en investigacin. Algunas de estas empresas han
desarrollado tecnologas y plataformas con
marcas propias diferenciadas de la competencia,
como es el caso de los oligonucletidos de baja
toxicidad resistentes a endonucleasa Geneblock
de Atugen y la plataforma de alto rendimiento de
ARN interferencia HT-RNA de Cenix.
En segundo lugar en nmero se encuentran las
empresas especializadas en modelos vivos de la
enfermedad, siendo los ratones y el pez cebra los
modelos ms empleados en validacin de dianas.
En este caso, las empresas ms importantes son
Exelixis, compaa que emplea modelos animales
diversos en su I+D de dianas para cncer,
Deltagen que comercializa bases de datos de la
funcin de genes elaborados a partir de ratones
knock-out, Ingenium Pharmaceuticals a travs del
desarrollo de una plataforma basada en la
estrategia directa de validacin en ratones y
Lexicon Genetics, cuya estrategia de validacin de
dianas a escala genmica emplea ratones knock-
out para 5.000 genes. Cabe destacar el elevado
nmero de colaboraciones y acuerdos que han
establecido dichas empresas con compaas
farmacuticas, lo que es sntoma del inters que
despiertan las tecnologas y plataformas
desarrolladas por las mismas.
En cuanto a las empresas cuyo negocio consiste
en validar dianas para enfermedades o reas
teraputicas concretas, stas han desarrollado
metodologas de validacin de dianas que son
capaces de integrar la informacin obtenida
mediante diferentes tcnicas de validacin.
Debido a ello, estas compaas han desarrollado
plataformas de validacin de dianas que combinan
varias tcnicas como el anlisis de la expresin
gnica, las tecnologas antisentido, las tcnicas de
bloqueo de protenas, los animales modelo y la
bioinformtica que aplican de acuerdo a una
metodologa propia. ste es el caso de la empresa
Devgen, que ofrece bases de datos de fenotipos
de mutantes y knock-outs y servicios de
validacin con tecnologas de ARN interferencia en
modelos vivos como C. elegans. En el caso de
Pharmagene, dispone de la base de datos
TargetEvaluatorTM de expresin de genes en
tejidos normales y patolgicos que puede ser
empleada para validar y priorizar dianas, adems
de ofrecer servicios de genmica qumica y
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
screening. Por otro lado, Xenogen est
especializado en ratones y ratas transgnicas y
knock-out que permiten visualizar la expresin de
genes mediante emisin de luz gracias a su
tecnologa LPTA. El caso de Xerion, la compaa
es propietaria de la tcnica CALI, lo que le
permite validar dianas y comercializar las mismas
as como introducirse en el desarrollo de
anticuerpos teraputicos.
En los ltimos aos existe una tendencia clara en las
empresas que han desarrollado y puesto a punto
plataformas de validacin de dianas a dejar de ser
meras proveedoras de servicios de validacin o de
dianas validadas, para convertirse en empresas que
desarrollan y comercializan frmacos. Es decir,
existen compaas con plataformas de validacin de
dianas que estn evolucionando hacia un modelo
ms parecido al de las empresas farmacuticas y
tienen en marcha proyectos de desarrollo de
frmacos novedosos frente a enfermedades de
inters. ste es el caso de Celera Genomics,
Curagen y Deltagen, que emplean sus plataformas
basadas en la integracin de tcnicas diversas para
identificar y validar sus propias dianas, las cuales en
su mayora estn relacionadas con el cncer. Por
otro lado, Exelixis y Lexicon Genetics se han
especializado en el desarrollo de modelos animales
que emplean para validar dianas de sus reas
teraputicas de inters y estn desarrollando
compuestos frente a las mismas. Otro ejemplo claro
lo constituyen Millennium Pharmaceuticals, Incyte
Genomics y Myriad Genetics, que emplean
plataformas basadas en la integracin mediante
herramientas bioinformticas propias de la
informacin obtenida a partir del anlisis de la
expresin de genes y protenas149.
Por otro lado, cabe resear el gran nmero de
acuerdos relacionados con la validacin de dianas
que se establecen entre empresas, tal y como se
puede observar en el anexo II. Las colaboraciones
pueden darse entre dos empresas biotecnolgicas o
entre una empresa biotecnolgica y una
farmacutica. De hecho, la mayora de empresas
biotecnolgicas han establecido acuerdos con varias
farmacuticas y biotecnolgicas en los ltimos aos,
lo que refleja el dinamismo del sector y la
importancia dada por las multinacionales
farmacuticas a la validacin de dianas.
149
Gray, L. (2003). Genomics-based Approaches to Drug Target Validation. Business Communications Company, Inc.
150
Progenika Biopharma, S. A. (www.progenika.com).
151
Proteomika, S. L. (www.proteomika.com).
152
Advancell, Advanced in Vitro Cell Technologies, S. L. (www.advancell.net).
153
Dominion Pharmakine, S. L. (www.pharmakine.com).
154
Oryzon Genomics S.A. (www.oryzon.com).
155
Owl Genomics, S. L. (www.owlgenoics.com).
156
Neuropharma, S. A. (www.neuropharma.es).
157
Necodex (www.neocodex.es), Sistemas Genmicos (www.sistemasgenomicos.com), Biomedal (www.biomedal.es).
DE DIANAS TERAPUTICAS
7.2. Empresas espaolas
en validacin de dianas
En cuanto a la situacin de las empresas de
validacin de dianas a nivel nacional, cabe
destacar el reducido nmero de empresas que
realizan actividades relacionadas con la validacin
de dianas. En el anexo III figuran las empresas
espaolas que ofrecen la validacin de dianas en
su cartera de servicios o que desarrollan
tecnologas y herramientas dirigidas a la
validacin de dianas.
Las compaas biotecnolgicas Progenika
Biopharma150, antes conocida como Medplant
Genetics, y su filial Proteomika151 poseen proyectos
de identificacin y validacin de dianas mediante
tecnologas diversas como los microarrays de ADN y
tejidos, anticuerpos bloqueantes, tecnologas
antisentido, ratones transgnicos y knock-out.
Ambas empresas se han especializado en
enfermedades psiquitricas y cncer, y en el caso de
Progenika tambin trabaja en esclerosis mltiple.
Por otro lado, la empresa biotecnolgica
Advancell152, valida dianas mediante anlisis de la
expresin, tecnologas antisentido y tcnicas
bioinformticas aplicadas al diseo y sntesis de
frmacos. Dominion Pharmakine153 posee proyectos
de validacin de dianas teraputicas mediante el
empleo de microarrays de ADN, ARN de
interferencia y ensayos sobre clulas tumorales. En
este caso, la empresa dispone de colecciones de
tejidos humanos y animales, as como arrays de
tejidos y clulas que comercializa para diferentes
aplicaciones entre las que se encuentra la validacin
de dianas. La compaa Oryzon Genomics154 ofrece
servicios de I+D mediante el uso de herramientas
genmicas y protemicas, como microarrays de ADN
y bioinformtica. La empresa Owl Genomics155 se
centra en la identificacin de marcadores
moleculares y agentes teraputicos para el
diagnstico temprano y tratamiento de
enfermedades hepticas, mientras que
Neuropharma156 tiene por objetivo la identificacin y
validacin de dianas teraputicas relacionadas con
enfermedades neurodegenerativas. Otras compaas
espaolas relacionadas con la identificacin y
validacin de dianas son Necodex, Sistemas
Genmicos y Biomedal157.
59
En cuanto a las empresas espaolas que han
desarrollado herramientas bioinformticas
aplicadas a los microarrays, Bioalma, Ebiointel,
Integromics o NorayBio158 son algunos de los
ejemplos ms destacados.
En la mayora de los casos, las empresas
espaolas que ofrecen servicios o productos de
validacin de dianas establecen colaboraciones
principalmente con instituciones pblicas
espaolas como hospitales del Sistema Nacional
de Seguridad Social, Universidades Pblicas,
centros dependientes del CSIC159 o el CNIO160. No
obstante, existen notables excepciones que han
establecido acuerdos con numerosas empresas
privadas tanto nacionales como multinacionales lo
que les permite acceder a financiacin privada.
Cabe destacar la existencia de dos organismos
vinculados a instituciones pblicas que realizan
actividades relacionadas con la validacin de
dianas. El primero de ellos es el Instituto de
Farmacia Industrial161, dependiente de la
Universidad de Santiago de Compostela, que
ofrece servicios de validacin de dianas,
identificacin de compuestos qumicos y
optimizacin de los mismos. En segundo lugar, la
determinadas enfermedades como medio para
identificar y validar dianas teraputicas
novedosas. Los proyectos de investigacin se
centran en aquellas enfermedades que en el
presente informe se han identificado como
prioritarias para el desarrollo de nuevos frmacos,
principalmente cncer, enfermedades
neurodegenerativas como el Alzheimer y el
Parkinson y enfermedades cardiovasculares.
Respecto a las tcnicas genmicas y protemicas
que se emplean en los proyectos de I+D recogidas
en el anexo I, se observa que la mayora de los
mismos, en torno al 40% del total de los proyectos
estudiados, emplean modelos animales para validar
dianas, siendo los ratones transgnicos y knock-out
los principales modelos utilizados. Cabe destacar la
existencia de proyectos dirigidos especificamente al
desarrollo de nuevos modelos animales para el
estudio de enfermedades concretas como el cncer,
la enfermedad de Alzheimer y Parkinson. Asimismo,
el uso de tecnologas de anlisis de la expresin
gnica est ampliamente extendido y en torno al
15% de los proyectos espaoles en validacin de
dianas se basan en su utilizacin. La tcnica de
anlisis de la expresin ms habitual la constituyen

Unidad Mixta Almirall Prodesfarma-PCB 162

consiste
en una iniciativa conjunta del Parque Cientfico de
Barcelona y la empresa farmacutica Almirall-
Prodesfarma, que tiene como objetivo la
identificacin y validacin de dianas para el
desarrollo de nuevos frmacos frente a
enfermedades relacionadas con procesos
inflamatorios.
7.3. Proyectos de I+D
espaoles en validacin
de dianas
En lo concerniente a los proyectos de I+D
espaoles en validacin de dianas, cabe destacar
que gran parte de los mismos se centran en el
estudio de los mecanismos que conducen a
los microarrays de ADN, existiendo proyectos
especficos dirigidos al desarrollo de nuevas
tecnologas relacionadas con los mismos. Por otro
lado, se ha observado un nmero reducido de
proyectos que no llegan a suponer un 5% del total,
y que emplean tecnologas de modulacin de la
expresin en validacin de dianas.
Finalmente, cabe subrayar el nivel bsico de la
investigacin en validacin de dianas que se
realiza en Espaa ya que la mayor parte de los
proyectos van dirigidos al estudio de los
mecanismos de la enfermedad, y se encuentran
lejanos a su aplicacin prctica en la validacin de
dianas. No obstante, la investigacin bsica
existente se dirige hacia reas teraputicas de
inters y puede constituir una slida base sobre la
que realizar una investigacin aplicada de calidad
en validacin de dianas.

158
Bioalma, Alma Bioinformtica S.L. (www.almabioinfo.com); Ebiointel, S.L. (www.ebiointel.com); Integromics, S.L.
(www.integromics.com); Noray Bioinformatics, S.L. (www.noraybio.com).
159
Consejo Superior de Investigaciones Cientficas - CSIC (www.csic.es).
160
Centro Nacional de Investigaciones Oncolgicas - CNIO (www.cnio.es).
161
Instituto de Farmacia Industrial (www.usc.es/farmind).
162
Unidad Mixta Almirall Prodesfarma-PCB (www.pcb.ub.es/homePCB/live/es/p516.asp).

60
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
8. Conclusiones
La secuenciacin del genoma humano marc un
antes y un despus en la investigacin
farmacutica, logrndose la identificacin de
decenas de miles de genes y protenas que
pueden constituir dianas potenciales de frmacos.
Debido a ello, el descubrimiento de frmacos ha
dejado de ser el cuello de botella del proceso de
I+D y la validacin de dianas se ha constituido en
el principal cuello de botella del proceso. Por
tanto, si la industria quiere ser capaz de
desarrollar frmacos a partir de los conocimientos
en genmica, ser necesario utilizar tcnicas de
validacin de alto rendimiento que permitan
seleccionar aquellas dianas en las que invertir
mayores esfuerzos.
La validacin de dianas se ha revelado como una
etapa crtica a la hora de condicionar el xito o
fracaso de los proyectos de I+D en el proceso de
desarrollo de frmacos. El principal reto de la
validacin de dianas consiste en asignar funciones
a dianas concretas y abandonar aquellas dianas
que no sean adecuadas a la hora de disear
frmacos eficientes. Hay que tener en cuenta que
un nmero elevado de dianas pueden estar
asociadas a una enfermedad contribuyendo en
cierto grado al fenotipo patolgico, y por lo tanto
resulta necesario validar aquellas dianas que son
cruciales para el desarrollo y mantenimiento de la
enfermedad.
La identificacin de dianas a gran escala
permite a su vez conseguir un cierto grado de
validacin, por lo que muchas de las tcnicas de
anlisis de la expresin gnica como los
microarrays de ADN y tcnicas de interacciones
de protenas, como el sistema doble-hbrido, son
de gran valor a la hora de asignar funciones a
dianas hasta entonces desconocidas.
Las tcnicas de validacin de dianas
propiamente dichas se han clasificado en
funcin de su estrategia molecular. Por un lado,
las tcnicas de modulacin de la expresin
se basan en la alteracin de la expresin de
genes bien actuando sobre el ADN o el ARN, de
modo que se activen o inactiven genes
concretos. De este modo, al poner de manifiesto
que la expresin alterada de un gen da lugar al
estado patolgico, se puede establecer una
asociacin entre una diana y una determinada
enfermedad.
DE DIANAS TERAPUTICAS
En la actualidad se dispone de varias tcnicas
que permiten modular la expresin de genes
especficos bien bloqueando o activando los
mismos. Los oligonucletidos antisentido son
conocidos desde hace tiempo pero su uso se
haba visto restringido debido a los problemas
tcnicos asociados a su aplicacin. El
descubrimiento de la tecnologa del ARN de
interferencia y de las diferentes estrategias para
su aplicacin, abri todo un abanico de
posibilidades que permitan el silenciamiento
especfico de genes concretos. La rapidez del
diseo y produccin de ARNs de interferencia
especficos de genes concretos y su reducido
coste, hacen de la misma una de las tecnologas
ms prometedoras en la validacin de dianas.
Tanto el ARN de interferencia como los
oligonucletidos antisentido permiten cribar
genes candidatos en corto espacio de tiempo y
obtener informacin acerca de su funcin con
rapidez. Sin embargo, los problemas de
administracin de los ARN de interferencia a
clulas u organismos completos no han sido
resueltos completamente. En el caso de los
cultivos celulares de clulas de mamferos este
problema ha sido resuelto con xito mediante el
empleo de tcnicas disponibles para la
introduccin de cidos nucleicos a las clulas.
Sin embargo, la administracin in vivo sigue
siendo una asignatura pendiente sobre todo en
el caso de modelos de mamferos y la mayora
de los estudios en este sentido se han realizado
en dianas presentes en el hgado debido a la
mayor accesibilidad de este rgano a la
administracin de cidos nucleicos.
Las estrategias actualmente disponibles para
facilitar la administracin del ARN de interferencia
consisten en el empleo de reactivos lipdicos,
modificaciones qumicas de los cidos nucleicos y
su inyeccin intravenosa o intraperitoneal. A pesar
del progreso realizado, an no est claro si el ARN
de interferencia presenta ventajas respecto a los
oligonucletidos antisentido para su aplicacin in
vivo, y resulta indispensable abordar cuestiones de
diseo qumico y farmacolgico que posibiliten la
aplicacin del ARN de interferencia in vivo.
El descubrimiento y optimizacin del ARN de
interferencia ha promovido que tecnologas
como los ribozimas hayan sido relegadas a un
segundo plano ante las aparentes desventajas
de los mismos. No obstante, los avances
61
 tecnolgicos que recientemente se han producido
en el diseo, eficiencia y administracin,
posibilitan el empleo de ribozimas en la
validacin de dianas de modo mucho ms
efectivo, lo que permite afirmar que junto con el
ARN de interferencia sigue siendo una tcnica
con un futuro prometedor por delante. Las
protenas de dedos de zinc permiten tanto
silenciar la expresin de un gen concreto como
incrementar la expresin del mismo. El
incremento de la expresin no puede ser
alcanzado por ninguno de los anteriores mtodos
de modulacin de la expresin, mientras que las
protenas de dedos de zinc han sido empleadas
con xito en la validacin de dianas.
Sin embargo, la relacin entre la expresin gnica
y la funcin de la protena diana no tiene por qu
ser causal, es decir, la diferencia de expresin de
un gen concreto puede no ser la causa de la
enfermedad. Por otra parte, las protenas sufren a
menudo modificaciones que no vienen
determinadas en los genes que las codifican, por
lo que las tcnicas de modulacin de la expresin
no siempre ofrecen informacin completa acerca
de la funcin de las dianas. Por este motivo, las
tcnicas basadas en la inactivacin de
protenas consistentes en el bloqueo de la
funcin de las protenas, son necesarias en
numerosas ocasiones.
Los anticuerpos monoclonales constituyen las
primeras estrategias de validacin de dianas que
fueron diseadas para interferir directamente
con las protenas, y siguen siendo ampliamente
empleados debido a su elevada especificidad y
fcil produccin. De hecho, en los ltimos aos
ha tenido lugar un resurgir de los anticuerpos
monoclonales debido al desarrollo de frmacos
basados en su empleo como terapia
principalmente en cncer y enfermedades
autoinmunes. En estos casos la validacin de
dianas mediante anticuerpos monoclonales
puede constituir la primera etapa del desarrollo
de un potencial frmaco basado en anticuerpos
teraputicos o sus derivados. El conocimiento de
los anticuerpos monoclonales ha permitido el
desarrollo de la tcnica CALI/FALI que permite
una inactivacin funcional irreversible de la
protena diana. Esta tcnica slo puede ser
empleada en cultivos celulares y su elevado
rendimiento hace que permitan validar dianas
proteicas a gran escala, lo que facilita la
industrializacin del proceso y su aplicacin en
la empresa. Por otro lado, los aptmeros
presentan problemas de administracin que
siguen siendo limitantes a la hora de alcanzar
62
las dianas intracelulares tanto en cultivo celular
como sobre todo en organismos modelo, por lo
que el desarrollo de reactivos y mtodos de
administracin sigue siendo una asignatura
pendiente.
Otras estrategias alternativas que se han
descrito con detalle en el presente informe se
corresponden con tecnologas de alto
rendimiento basadas en el empleo de
microarrays. Los arrays de tejidos ofrecen la
posibilidad de analizar in situ los cambios
fenotpicos en tejidos patolgicos por medio de
su comparacin con tejidos sanos. La gran
ventaja de esta estrategia radica en la
visualizacin clnica de los cambios fenotpicos
de los tejidos implicados en el proceso
patolgico, por lo que aaden una informacin
extra a la validacin de dianas que ninguna de
las tcnicas actuales permite. Asimismo, los
microarrays de clulas ofrecen la posibilidad de
analizar la expresin gnica a gran escala sobre
clulas vivas.
Los modelos vivos de enfermedades
constituyen sistemas sobre los que es posible
aplicar las tcnicas mencionadas anteriormente,
por lo que su desarrollo es primordial a la hora de
validar dianas mediante un conjunto de tcnicas
complementarias. El diseo de sistemas modelo
adecuados para cada patologa es un proceso
muy laborioso que no siempre es viable. El
empleo de tcnicas genmicas para su desarrollo
y la bsqueda de nuevos modelos ms sencillos
constituyen las principales estrategias actuales.
Los modelos animales permiten el estudio de la
funcin de dianas teraputicas en organismos
completos, lo que posibilita validar dianas en su
contexto natural. La validacin de dianas
mediante modelos animales proporciona el mayor
grado de evidencia de la relacin existente entre
una determinada diana y un estado patolgico. No
obstante, la administracin de agentes
moduladores de la expresin o inhibidores de
protenas, sigue siendo uno de los grandes
problemas de la validacin en modelos animales.
Se han desarrollado enfoques que pretenden
sortear estas limitaciones, bien mediante el
empleo de nuevos reactivos, mtodos que
faciliten la entrada en el organismo y en las
clulas del mismo, o mediante tcnicas dirigidas a
la sntesis de los mismos en el interior de la
clula. Por otra parte, debido al elevado coste de
los modelos animales, los esfuerzos actuales
estn dirigidos al desarrollo de tcnicas de
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
validacin de alto rendimiento en modelos
animales y a la bsqueda de nuevos modelos
animales ms sencillos. Otro factor que hasta la
fecha no se tena en cuenta es la existencia de
mltiples dianas para cada frmaco, por lo que es
necesario el diseo de modelos animales
adecuados que permitan el estudio completo de
las bases moleculares de la enfermedad y los
posibles efectos secundarios del frmaco.
En la actualidad, los ratones siguen siendo el
principal modelo animal en experimentacin
farmacutica, debido a su similitud con el ser
humano y facilidad de cra. Sin embargo, el coste
temporal y econmico de obtener ratones
knock-out/knock-in y transgnicos resulta
muy elevado lo que imposibilita su empleo a gran
escala. Existen tcnicas de alto rendimiento
mediante la obtencin de ratones mutados al
azar, que sin embargo no son tiles para la
mayora de las estrategias de validacin, en las
cuales se pretende validar una nica diana.
La dificultad de emplear el ratn como modelo
animal en la validacin de dianas con un
elevado rendimiento, ha provocado que otros
modelos animales hayan cobrado fuerza como
herramientas de validacin de dianas. Cabe
destacar el nemtodo C. elegans, modelo
animal de fcil crecimiento en laboratorio, a
partir del cual se pueden obtener knock-outs,
puede ser sometido a transgnesis, o a ARN
interferencia.
La necesidad de desarrollar un nuevo modelo
animal vertebrado ha sido cubierta por el pez
cebra, de fcil cra y susceptible de ser
manipulado de modo automatizado, a la vez que
presenta la mayora de los rganos y sistemas
presentes en humanos. En la actualidad an no
es posible desarrollar knock-outs para pez
cebra, aunque se han desarrollado mutantes de
pez cebra y transgnicos. Existen tecnologas
antisentido que han sido puestas a punto para
su empleo en pez cebra como son los morfolinos
y PNAs que permiten silenciar genes de modo
especfico y eficaz por medio de su
administracin en el medio. Por tanto, cabe
afirmar que una vez puesto a punto el pez
cebra, ste se consolidar como uno de los
modelos animales ms relevantes en la
validacin de dianas teraputicas.
Por ltimo, las clulas madre embrionarias
presentan ventajas respecto a otros tipos de
sistemas celulares de validacin de dianas. En la
DE DIANAS TERAPUTICAS
actualidad, debido a la rigidez legislativa que
impide el uso de clulas madre humanas, se
emplean clulas madre procedentes de
embriones de ratn. Recientemente se han
producido cambios en la legislacin espaola
que pretenden posibilitar la investigacin
mediante el empleo de embriones sobrantes de
fecundaciones in vitro, lo que presagia un futuro
prometedor a su empleo en investigacin
farmacutica.
Las tcnicas de validacin mediante ratones
knock-out/knock-in y las tecnologas
antisentido en general, son las principales
estrategias que sigue la industria farmacutica a la
hora de validar sus dianas candidatas. En el caso de
los primeros, suponen una tecnologa consolidada
que permite no slo su uso como herramienta de
validacin, sino que es de gran valor como sistema
modelo durante los ensayos preclnicos. Debido al
alto coste y laboriosidad de los ratones knock-out y
knock-in, las tecnologas antisentido como el ARN de
interferencia estn cobrando fuerza en los ltimos
aos. Debido a que sta es una tcnica barata,
rpida y relativamente sencilla, ha sido adoptada en
poco tiempo. No obstante, las tcnicas de ARNi
todava se enfrentan a ciertos retos especialmente
relacionados con la validacin in vivo en modelos
animales de mamferos. La validacin de dianas in
vivo sigue siendo el principal reto a superar, ya que
hasta el momento no es posible realizarla a gran
escala.
A pesar del alto potencial de estas tcnicas y del
valor predictivo de los modelos animales, el
confiar excesivamente en un nica tecnologa en
ocasiones puede conllevar dar por buenas dianas
que fracasen en fases posteriores, o bien
descartar dianas que podran dar lugar a
proyectos exitosos. Por lo tanto, un punto crtico
en la validacin de dianas consiste en decidir
cundo se considera que una diana est
suficientemente validada. En la actualidad, se
aboga por combinar varias tcnicas para de
esta forma poder establecer con mayor grado de
certidumbre la asociacin entre una diana
concreta y su importancia en la gnesis y
desarrollo de una enfermedad. Sin embargo,
cuanto mayor sea el nmero de tcnicas que se
empleen para validar una diana teraputica,
mayor ser el coste econmico asociado y el
tiempo invertido. Por tanto, se tiende a combinar
tcnicas que acten a diferente nivel, es decir, a
nivel de modulacin de la expresin gnica e
inhibicin de protenas, aplicadas ambas en
modelos animales, de modo que la asociacin que
se establezca entre una diana y una enfermedad
63
sea ms robusta. En la prctica, las empresas
farmacuticas se enfrentarn a tres factores clave
a la hora de definir sus estrategias de validacin:
Competitividad (lanzamiento de nuevos
productos en respuesta a la competencia).
Bajo coste (disminucin del coste de desarrollo
de nuevos productos).
Seguridad (frmacos ms seguros y efectivos).
Cabe destacar el esfuerzo que las empresas
farmacuticas estn empleando en la descripcin
de nuevas rutas de sealizacin implicadas en las
enfermedades ms destacadas, como son el
cncer, enfermedades autoinmunes, metablicas,
mentales, neurodegenerativas y cardiovasculares.
Para muchas de estas enfermedades como la
depresin y la ansiedad, el conocimiento de su
biologa es muy escaso, por lo que la
identificacin y validacin de nuevas dianas ir
emparejada con un mejor conocimiento de estas
rutas. Para otras enfermedades como la diabetes,
el mecanismo patolgico es de sobra conocido,
por lo que los esfuerzos actuales van
encaminados a la validacin de dianas ya
descritas pero para las que no existen frmacos
actuales disponibles.
El continuo descubrimiento de nuevas dianas
moleculares complica a su vez el proceso de
desarrollo de nuevos frmacos, ya que el nivel de
complejidad de los sistemas biolgicos y
patolgicos impide obtener una visin de
conjunto. Por este motivo en los ltimos aos se
empieza a hablar de la necesidad de emplear
estrategias analticas que engloben todos los
64
elementos de un sistema biolgico, las cuales
definan redes biolgicas que a su vez no slo
transmitan informacin acerca de la genmica y
protemica de un proceso, sino tambin de su
perfil metablico. Esta novedosa aproximacin se
ha denominado Biologa de sistemas, y requiere
la integracin de varias displinas como la biologa,
ingeniera y la informtica.
El elevado inters que despierta la validacin de
dianas para la industria farmacutica no slo
reside en la relevancia de estos nuevos
tratamientos, ya que es fundamentalmente una
herramienta esencial para disminuir el elevado
ndice de fracasos ligado al desarrollo de nuevos
frmacos. Aunque existen varias razones que
podran provocar la cada de un frmaco
candidato durante su desarrollo, la ausencia de
una validacin adecuada de las dianas
implicadas en el proceso patolgico es uno de los
principales motivos de fracaso.
La inversin necesaria para sacar adelante un
frmaco de xito al mercado se ha incrementado
de forma paulatina en los ltimos aos, siendo el
proceso de identificacin de dianas similar al
desarrollo clnico en cuanto a coste, y al
desarrollo preclnico respecto al tiempo necesario
para su consecucin. No obstante, se ha
demostrado que la validacin de dianas
teraputicas involucradas en los procesos
biolgicos que desencadenan una terapia efectiva,
acortan el tiempo y coste necesario para el
lanzamiento de un frmaco eficaz, ya que se
evita continuar con los esfuerzos empleados en el
desarrollo de frmacos cuyas dianas no han sido
validadas correctamente.
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Anexos
Anexo I: Proyectos de I+D espaoles en validacin de dianas
Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Gentica, patognesis y organismos inferiores

modelo de la ataxia de Friedreich.
Subproyecto 1: Gentica, biologa y fisiopatologa 2000-2003 CICYT
Instituto de celular, y modelo en C. elegans de la ataxia de
Biomedicina de Friedreich.
Valencia
(IBV-CSIC) Aproximacin gentica al estudio de las
Unidad de Gentica y enfermedades neurolgicas: genes, modelos 2001-2003 FIS
Medicina Molecular animales y epidemiologa gentica.

Biologa, clnica y terapia de las ataxias cerebelosas:

2003 FIS
gentica y genmica funcional y comparada.

Instituto de Caracterizacin funcional de epitempina, el gen

2002-2005 MCyT
Biomedicina de responsable de la epilepsia lateral temporal.
Valencia
(IBV-CSIC)
Unidad de Gentica Identificacin de dianas teraputicas relacionadas Fundacin
2002-2005
Molecular con la enfermedad de Parkinson. Ramn Areces

Anlisis de genes implicados en la diferenciacin

celular en clulas de neuroblastoma humano 2001 GV
Instituto de mediante la tecnologa de los microchips de DNA.
Biomedicina de
Valencia
(IBV-CSIC) Estudio funcional mediante modelos animales del
Unidad de Biologa de receptor de glucocorticoides (GR), su relacin con el
la Accin Hormonal complejo quinasa IkB (IBB) en inflamacin y 2002-2005 MCyT
tumorignesis de epidermis. Implicacin de estos
factores en el sndrome de displasia ectodrmica (ED)

Caracterizacin molecular y funcional de la

interaccin entre el protooncogen c-fos y la protena
2002-2003 GV
estructural lamin A: implicaciones en la patologa
cardiovascular.
Instituto de
Biomedicina de Factores de riesgo, evolucin y tratamiento de las
Valencia enfermedades cardiovasculares y sus mecanismos
(IBV-CSIC) moleculares y celulares (Ayudas para el desarrollo 2003-2005 FIS
Unidad de Biologa de Redes Temticas de Investigacin Cooperativa,
Vascular Red de Enfermedades Cardiovasculares).

Patologa cardiovascular y proto-oncogen c-fos:

papel de las interacciones con protenas 2001-2003 FIS
estructurales de la matriz nuclear.

The cellular fuel gauge AMP-activated protein kinase:

a key player in type 2 diabetes, cardiovascular 2001-2004 UE
Instituto de disease and the metabolic syndrome?
Biomedicina de
Valencia Las levaduras como sistema modelo para estudiar
(IBV-CSIC) las bases moleculares del proceso de sealizacin 2002-2005 MCyT
Unidad de por glucosa en clulas pancreticas de tipo beta.
Sealizacin por
Nutrientes Determinantes moleculares del metabolismo y la
nutricin. Biocomunicacin hormonal. Nuevas 2003-2006 FIS
estrategias teraputicas.

65
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Papel de SREB-1C en estados de resistencia a

Instituto de 2003-2006 MCyT
insulina.
Biomedicina de
Valencia
(IBV-CSIC) Estudio funcional mediante modelos animales del
Unidad de Patologa receptor de glucocorticoides (GR), su relacin con el
Metablica complejo quinasa IkB (IBB) en inflamacin y 2002-2005 MCYT
Experimental. tumorignesis de epidermis. Implicacin de estos
factores en el sndrome de displasia ectodrmica (ED).

Caracterizacin estructural de la glucoquinasa y su

protena reguladora como posibles dianas 2001-2003 FIS
teraputicas para el tratamiento de la diabetes.

Oligonucletidos modificados con 8-aminopurinas:

Instituto de Biologa
sntesis y estudio de sus propiedades formadoras 2003-2004 MCyT
Molecular de
de hlices triples.
Barcelona
(IBMB-CSIC)
Mecanismos moleculares de accin de las
protenas UEV1-Ubc13 y PTOV1. Estudio de su
papel durante el desarrollo embrionario y en 2001-2004 MCyT
procesos neoplsicos, con especial nfasis en
carcinoma de prstata.

Utilizacin de la tcnica de arrays para determinar

Instituto de Biologa perfiles de expresin relativa de molculas efectoras 2004-2005 ACM
y Gentica Molecular de la lesin intestinal en la enfermedad celaca.
(IBGM-CSIC)
Facultad de Medicina. Definicin de dianas teraputicas para el tratamiento
Universidad de de la enfermedad de Alzheimer a partir de los
Valladolid 1999-2001 CICYT
mecanismos de sealizacin bioqumica operativos en
clulas de astrocitoma humano.

Resistencia tumoral a mltiples frmacos y

apoptosis celular. Mecanismos de modulacin y 2001-2003 FIS
nuevas estrategias teraputicas.

Validacin de una terapia contra la demencia de

2002 MTAS
alzheimer.
Instituto de Biologa
Molecular y Celular
(IBMC-CSIC) Diferenciacin celular y quimiorresistencia en cncer
de colon. Identificacin de dianas moleculares y 1999-2001 CICYT
diseo de estrategias farmacolgicas.

Interacciones lpido-protena y protena-protena

en sistemas modelo de inters neurobiolgico: 1999-2001 DGESIC
relevancia funcional y consecuencias estructurales.

Caracterizacin molecular del centro de unin del

1999-2002 MCyT
activador de la protena desacoplante UCP2.

Nuevas dianas de antibacterianos. Estudio de los

Centro de sistemas de dos componentes de Streptococcus 2001-2002 CAM
Investigaciones pneumoniae.
Biolgicas
(CIB-CSIC)
Mecanismos moleculares de dao vascular: abordaje
Dpto. de Estructura y 2003 MCyT
protemico y desarrollo de modelos animales.
Funcin de Protenas

Caracterizacin de nuevas modificaciones lipdicas

Fundacin
implicadas en la activacin de las protenas Ras. 2004
La Caixa
Evaluacin como potenciales dianas farmacolgicas.

66
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Anlisis genmico en modelos animales y tumores

Centro de
humanos de la funcin del sistema de regulacin 2001-2004 MCyT
Investigaciones
transcripcional polycomb.
Biolgicas
(CIB-CSIC)
Dpto. de Biologa Silenciamiento gnico por RNA de interferencia en
Celular y Desarrollo 2003 MCyT
epitelio seminfero de ratn.

Centro de
Investigaciones Efectos de neurotrofinas y ligandos de receptores
Biolgicas nucleares en el proceso de mielinizacin:
2003 MCyT
(CIB-CSIC) implicaciones teraputicas en mielinopatas
Unidad Regulacin de perifricas.
la Expresin Gnica

Caracterizacin de la familia glucn sintasas de

Schyzosaccharomyces pombe. Dianas tiles para 2001-2003
Instituto de el diseo de nuevos antifngicos.
Microbiologa
Bioqumica Estudio de subunidades catalticas responsables de
(IMB-CSIC) la sntesis de (1-3) beta-d-glucano de la pared
2000-2003 CICYT
celular fngica. Dianas tiles para el diseo de
nuevos antifngicos.

Implicacin de P13k en la migracin celular de

linfocitos T en inflamacin y metstasis. P13k
2001-2003 CAM
como diana en procesos inflamatorios y
linfoproliferativos.

PI3K como diana teraputica y factor de riesgo de

2001-2004 MCyT
procesos tumorales.

Estudio sobre la regulacin de la expresin de la

1997-2000 MCyT
tirosinasa mediante ratones transgnicos.

Papel de la telomerasa en la estabilidad genmica,

tumorignesis y envejecimiento: estudio de un 1998-2001 CICYT
ratn knock-out para la telomerasa.

Obtencin de ratones transgnicos con expresin

Centro Nacional de constitutiva de actividad telomerasa en tejidos
Biotecnologa adultos: implicaciones para terapia gnica de 2001-2003 MCyT
(CNB-CSIC) enfermedades asociadas al envejecimiento y
terapia del cncer.

Identificacin de dianas y mediadores de la

senescencia y apoptosis dependiente de los 2002-2005 MCyT
telmeros.

Anlisis de genomas in silico: desarrollo de un

paquete software para la identificacin de genes y 1998-2000 MCyT
prediccin de su funcin.

Estrategias para desarrollar mutaciones inducibles

1999-2001 MCyT
en el ratn utilizando el sistema CRE/LoxP.

Anlisis de las interacciones protena-protena y

los genes diana que median los efectos 2001-2004 CICYT
transcripcionales de DREAM.

67
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Los genes MEIS en desarrollo y enfermedad:

anlisis en modelos de modificacin gentica 2003 MCyT
Centro Nacional de dirigida en el ratn y clulas madre embrionarias.
Biotecnologa
(CNB-CSIC) Regulacin por mutantes del represor dream de la
Fundacin
neurodegeneracin inducida por excitotoxinas del 2004
La Caixa
procesamiento de la APP.

Caracterizacin molecular de p62 como nueva

2000-2003 CICYT
diana teraputica en la activacin de NF-kB

Estudio de la estructura y funcin de la

presenilina-1 y de la influencia de mutaciones 1997-2000
asociadas a la enfermedad de Alzheimer.

Nuevas dianas teraputicas en la cascada PKC-MEK5. 2001-2003 CAM

Anlisis bioinformtico de microarrays para la

deteccin de rutas determinantes de la malignidad
2001-2003 MCyT
asociada a mutaciones del receptor de andrgenos
en cncer de prstata.

Selectividad molecular en diseo de frmacos

basado en la estructura del receptor: desarrollo de 2002-2005 FIS
nuevas dianas computacionales.

Estudio del mecanismo patognico y de posibles

nuevas estrategias teraputicas en un modelo
2003 MCyT
transgnico condicional de la enfermedad de
Huntington.

Centro de Biologa Desarrollo y validacin de nuevas tecnologas de

2003 MCyT
Molecular Severo protemica de segunda generacin.
Ochoa
(CBM-SO-CSIC) P62-ZPKC: nuevas dianas teraputicas en el
2003 MCyT
tratamiento de metstasis seas.

Contribucin de la sealizacin cooperativa por Notch

y pre-TCR (pTa /TCR b) en la patognesis de las Fundacin
2003
leucemias linfoides T: identificacin de marcadores La Caixa
moleculares y posibles dianas teraputicas.

Control gentico de la morfognesis y proliferacin

1999-2002 CICYT
celular en Drosophila.

Un modelo animal de la EA: ratones triples

Fundacin
transgnicos con sobreexpresin de la protena tau 2004
La Caixa
y la enzima GSK-3 de forma condicional.

Modelos transgnicos de la enfermedad de Alzheimer.

2001-2003 MCyT
Implicaciones patognicas de tau y GSK-3beta.

Estudios bioinformticos de clasificacin estructural y

2001-2004 MCyT
relaciones secuencia-estructura en protenas.

Activacin endotelial y angiognesis mediadas por

VEGF y PGE2: implicaciones de la ruta 2003 MCyT
calcineurina/NFAT y ciclooxigenasa-2

68
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Estudio del perfil de expresin gnica mltiple en

tumores de Ewing como base para la bsqueda de 2000-2003 MCyT
nuevos marcadores y dianas teraputicas.

Desarrollo de un microarray especfico para la

identificacin de alteraciones genticas con valor 2003-2003 MCyT
diagnstico y pronstico en tumores slidos infantiles

Diseo de un microchip de cDNA para la deteccin

de resistencia a la quimioterapia en pacientes con 2001-2003 MCyT
cncer de pulmn.

Estudio de los factores moleculares predictivos de

Instituto de respuesta al tratamiento de cncer no microctico
2002-2004 FIS
Investigaciones de pulmn mediante anlisis del transcriptoma a
Biomdicas travs de microarrays.
Alberto Sols
(IIB-CSIC) Diseo de compuestos con actividad antitumoral
Lab. de Biologa que interfieran con el sistema de transmisin de 1998-2001 CICYT
Molecular y Celular seales inducida por oncogenes.
del Cncer
Identification of Novel Targets for Cancer Roche
2000-2003
Treatment. Diagnostics

Regulacin de la colino quinasa y su participacin

2001-2003 MCyT
en procesos de carcinognesis humana.

Importancia de las protenas Rho en rutas de

sealizacin y su funcin en la regulacin de la 2002-2005 MCyT
transformacin celular y la apoptosis.

Regulacin de la expresin y actividad funcional de

las cadherinas E y P durante la progresin tumoral 1995-1998 CICYT
en la carcinognesis de piel de ratn.

Implementacin y aplicacin de una tcnica de

cDNA microarrays para el estudio simultneo de 2000-2002 MCyT
Instituto de la expresin de miles de genes.
Investigaciones
Biomdicas Papel de la hormona tiroidea y sus receptores en
Alberto Sols el desarrollo del encfalo: una aproximacin
(IIB-CSIC) basada en el uso de animales modificados 2002-2005 MCyT
Lab. de genticamente y en anlogos hormonales con
Endocrinologa potencial terapetico.
Molecular
Nuevos mtodos de screening para el
1996-1997 PN
descubrimiento de agentes antitumorales.

Anticuerpos monoclonales PC2.27 y PA2.26

Instituto de asociados a tumores. Estudio de su utilidad en 1997-1999 PN
Investigaciones cncer humano.
Biomdicas
Alberto Sols
(IIB-CSIC) Anlisis de los defectos de mielinizacin en ratones
Lab. de Sealizacin transgnicos sin receptores para hormona tiroidea,
2001-2004 MCyT
Celular posible modelo de la enfermedades neurolgicas
humanas.

69
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Estudio de genes humanos de funcin desconocida

usando como sistema modelo el eucariota simple 2003 MCyT
Dictyostelium discoideum.

Aplicacin de la tecnologa de los microarrays de

cDNA para analizar la expresin diferencial de
2001-2003 CAM
genes entre mujeres afectadas de sndrome de
ovario poliqustico y normales.

Estudio genmico y protemico para analizar la

Instituto de expresin diferencial de genes y protenas en
2002-2005 FIS
Investigaciones pacientes con sndrome de ovario poliqustico y
Biomdicas obesidad.
Alberto Sols
(IIB-CSIC) Estudio genmico mediante arrays de
Lab. de Regulacin oligonucletidos de un modelo humano de
de la Expresin 2003-2004 CAM
resistencia insulnica: Sndrome de ovario
Gnica poliqustico y obesidad.

Dficit de glicosilacin del alfa-distroglicano.

Implicacin en patologas musculares y
2003-2006 FIS
neuromusculares, y utilizacin de animales modelo
para su estudio.

Defectos en la migracin neuronal causados por

mutaciones en el gen POMT1. Estudios funcionales
2003-2004 CAM
y generacin del ratn knock-out para estudiar
futuras terapias.

Instituto de
Investigaciones Caracterizacin en modelos celulares y animales
Biomdicas de de protenas de inters teraputico para la 2001-2004 MCyT
Barcelona enfermedad de Alzheimer.
(IIBB-CSIC)

Centro Nacional de
Microelectrnica
Prototipo de un nanobiodispositivo para la
(CNM-CSIC)
deteccin de alteraciones en genes humanos 2001-2004 MCyT
Dpto. de Dispositivos,
(NANOBIOGEN).
Sensores y
Biosensores

Integrated Opto-Nanomechanical biosensor for

2002-2005 UE
functional genomic anlisis (OPTONANOGEN).

Centro Nacional de Microsistema Biosensor Opto-nanomecnico para

2003-2006 MCyT
Microelectrnica anlisis en genmica funcional.
(CNM-CSIC)
The application of functional genomic and
proteomic technologies to the study of 2002-2005 MCyT
development and dissease.

Instituto de Catalisis
Desarrollo de una plataforma tecnolgica de
y Petroleoqumica
farmacogenmica funcional basada en DNA 2001-2001 MCyT
(ICP-CSIC)
microarrays.
Dpto. de Biocatlisis.

70
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Un modelo de enfermedad de Alzheimer por

administracin de beta-amiloide 25-35: efectos 1999-2002 CICYT
comportamentales y neuroqumicos.
Instituto de
Neurobiologa Ramn
Looking for new targets for antiepileptic therapy:
y Cajal 2002-2004 CICYT
focus on presinaptic glutamate receptors complexes.
(INRC-CSIC)

Anlisis molecular de genes implicados en la

2003 MCyT
modulacin sinptica normal y patolgica.

Ensayo y caracterizacin de distintas estrategias

de diseo de RNAs inhibidores, Ribozimas y RNAs 2000-2003 MCyT
Antisense, para su uso como supresores gnicos.

RNAs Catalticos una Nueva Herramienta para la

Investigacin sobre VIH. Identificacin de Nuevas 2002-2005 FIPSE
Dianas en el Genoma del Virus.

Explotation of key enzymes in the isoprenoid

2001-2004 UE
biosynthetic pathway as drug targets in Leishmania.
Instituto de
Parasitologa y Deoxyuridine triphosphate nucleotidohydrolase as
Biomedicina 2001-2005 UE
a drug target for the control of infectious diseases.
Lpez-Neyra
(IPBLN-CSIC)
Dpto. de Bioqumica Inactivacin especfica de molculas de RNA
1994-1997 PN
y Farmacologa mediada por ribozimas.
Molecular
Ribozimas hairpin y RNAs antisentido como base
para el desarrollo de inactivadores gnicos: diseo 1997-2000 CICYT
y caracterizacin in vitro de agentes antivirales.

Ensayo y caracterizacin de distintas estrategias

de diseo de RNAs inhibidores, ribozimas y RNAs 200-2003 CICYT
antisense, para su uso como supresores gnicos.

Inactivacin Gnica Mediada por RNAs Catalticos:

2003-2006 MCyT
Caracterizacin de Ribozimas de Segunda Generacin.

Identificacin por tcnicas de protemica de los

complejos sealizadores utilizados por los linfocitos T 2002-2005 MCyT
reguladores en las enfermedades autoinmunes.

Determinacin de la expresin gnica global en

2002-2005 FIS
Instituto de clulas T implicadas en esclerosis mltiple.
Parasitologa y
Biomedicina Serono
Study of the cellular and molecular mechanisms of
Lpez-Neyra 2002-2003 Internacional
AS602868 in a collagen induced arthritis model.
(IPBLN-CSIC) S.A.
Dpto. de Biologa
Celular e Inmunologa Efecto teraputico de VIP en un modelo de esclerosis Fundacin
2004-2006
mltiple. Mecanismos celulares y moleculares. La Caixa

Efecto teraputico de VIP en esclerosis mltiple.

Estudio en el modelo de la encefalomielitis 2004-2007 FIS
autoinmune experimental (EAE).

71
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Mecanismos moleculares que gobiernan la gnesis

y mantenimiento del cncer mesenquimal: funcin
in vivo de protenas creadas por alteraciones 2003 MCyT
cromosmicas, modelos de ratn, gentica del
cncer y terapia gnica.

Identificacin de las dianas moleculares en

2001-2004 Pharmamar
levaduras de compuestos antitumorales.

Anlisis de alteraciones moleculares de los

activadores de Ras en tumores usando la
2001 MCyT
tecnologa convencional de RT-PCR y ampliada con
la tecnologa de los chips microarrays.

Obtencin de ratones mutantes deficientes en

activadores de Ras (Sos2 y Grf2) mediante 2001 MCyT
tcnicas de Gene Targeting.
Centro de
Investigacin del
Caracterizacin molecular de alteraciones del gen
Cncer de Salamanca
Ikaros en leucemias agudas linfoblsticas B.
(CIC-CSIC) 1999-2001 CICYT
Desarrollo de modelos animales portadores de
anomalas del gen Ikaros.

Clonacin y caracterizacin molecular del gen

Aiolos humano. Estudio de su posible implicacin 2001-2003 FIS
en enfermedades.

Lnea de investigacin: desarrollo in vitro e in vivo

de nuevos modelos para evaluar la actividad de
frmacos antitumorales.

Lnea de investigacin: empleo de microarrays de

cDNA en el estudio de la progresin tumoral y
farmacologa molecular.

Valor Patogentico de la expresin de C-KIT en el

2000-2005 FIS
tumor de Ewing. Una posible diana terapetica.

Instituto de
Neurociencias de
Alteracin en la glicosilacin de acetilcolinesterasa
Alicante Fundacin
en la enfermedad de Alzheimer y su implicacin en 2003
(CSIC) La Caixa
patognesis, diagnstico y tratamiento.
Unidad de
Neurobiologa Celular

Instituto de
Neurociencias de Identificacin y caracterizacin de nuevos genes
Alicante de crecimiento y proliferacin en el desarrollo
2003-2006 MCyT
(CSIC) temprano del ojo en Drosophila. Implicaciones en
Unidad Neurobiologa la etiologa de aniridia y en cncer.
del Desarrollo

Anlisis de la regulacin de la quimiocina SDF-1 en

clulas dendrticas y su impacto en la infeccin por 2003 FIPSE
el VIH-1.

Centro Nacional de
Caracterizacin de nuevas modificaciones lipdicas
Microbiologa Fundacin
implicadas en la activacin de las protenas Ras. 2004
(CNM-ISCIII) La Caixa
Evaluacin como potenciales dianas farmacolgicas.

Antiguas y nuevas dianas para antimicrobianos en

2002 MCyT
Streptococcus pneumoniae.

72
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Una nueva diana de antimicrobianos en

Streptococcus pneumoniae: la ATPasa de protones IM
de membrana.

Centro Nacional de
Uso de Saccharomyces cerevisiae para la
Microbiologa 2002 FIPSE
bsqueda de nuevas dianas teraputicas de VIH
(CNM-ISCIII)

Inhibicin de Fosfodiesterasa 7 como terapia

antiinflamatoria. Utilidad en un modelo animal de 2004-2006 Fundacin MMA
esclerosis mltiple.

Validacin de dianas genmicas en cncer

colorrectal y preparacin de anticuerpos humanos
2003-2006 MCyT
de inters diagnstico y teraputico a partir de
libreras de anticuerpos expresadas en fagos.

Humanizacin de sistemas modelo animales:

2003-2006 MCyT
induccin de tumores por oncogenes Ras.

Lneas knockin de genes reporteros en genes

especficos de endotelio para el estudio de la
2003-2006 MCyT
angiognesis tumoral in vivo mediante tcnicas no
invasivas.

Gentica y genmica en modelos experimentales Fundacin

2003-2006
del cncer humano. La Caixa

Identificacin genmica de nuevos marcadores del

2003-2004 CAM
proceso tumoral en ratones knock in Cdk4 R24C.

Estudio funcional de K-ras in vivo: knock-out

2003-2004 CAM
condicional.

Redundancia funcional de las quinasas dependientes

de ciclinas Cdk2 y Cdk4: validacin como dianas 2003-2006 FIS
Centro Nacional de
teraputicas en tratamientos antiproliferativos.
Investigaciones
Oncolgicas
(CNIO-ISCIII) Genmica funcional del ratn: biochips y modelos
2002-2005 MCyT
genticos en cncer.

Understanding human molecular physiology and

pathology through integrated functional genomics 2002-2005 UE
in the mouse model.

Diseo de una estirpe de ratn por reemplazamiento

gnico necesaria para la generacin de mutantes
2001-2004 MCyT
condicionales: un til de uso universal para el
desarrollo de la genmica funcional.

Desarrollo de ratones genticamente modificados

para el estudio del papel del oncogen k-ras in vivo 2001-2003 FIS
y el ensayo de terapias antitumorales especficas.

Identification, lead generation, structural biology

and validation of targets for cancer therapy. An 2000-2003 UE
integrated methodological approach.

Obtencin de ratones transgnicos con expresin

constitutiva de actividad telomerasa en tejidos adultos:
2001-2004 MCyT
implicaciones para la terapia gnica de enfermedades
asociadas al envejecimiento y terapia del cncer.

73
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Uso de modelos animales para el estudio de la

relacin entre la reparacin del dao en DNA y la
2001-2004 CAM
funcin telomrica implicaciones para cncer,
envejecimiento y su teraputica.

Nuevos modelos animales para el estudio del cncer. 2002-2005 MCyT

Aplicacin de nuevas tecnologas al estudio del

linfoma de Hodgkin: tissue arrays (matrices de
2002-2004 FIS
multitejidos), microdiseccin y anlisis de
expresin con microarrays de cDNA.

Diferenciacin celular en linfomas B de clula

pequea. Anlisis de expresin con microarrays de 2002-2004 CAM
cDNA.

Diferenciacin celular en linfomas B de clula

pequea. Anlisis de expresin con microarrays de 2001-2003 FIS
cDNA.

Anlisis genmico en modelos animales y tumores

humanos de la funcin del sistema de regulacin 2002-2004 MCyT
transcripcional polycomb.

Patrones de expresin gentica en cncer de

endometrio: estudio mediante microarrays de 2002-2004 FIS
cDNA.

Centro Nacional de Estudio mediante arrays de cDNA de los genes

Investigaciones implicados en la sensibilidad y resistencia a 2002-2004 MCyT
Oncolgicas paclitaxel.
(CNIO-ISCIII)
Identificacin de nuevas dianas de inactivacin
epigentica (metilacin aberrante del DNA y
2002-2004 MCyT
alteraciones de la cromatina) en cncer humano
usando microarrays y otras tcnicas genmicas.

Aproximacin multidisciplinaria al cncer de mama

hereditario no asociado a mutaciones en los genes
2002-2004 MCyT
BRCAs. Desarrollo de un biochip de expresin de
cDNAs.

Desarrollo de ensayos celulares basados en la va

PI3K/Akt para el descubrimiento de molculas 2002-2005 MCyT
lder con potencial antitumoral.

Identificacin de genes de susceptibilidad a la

diabetes de tipo 2 mediante la aplicacin de 2002-2005 MCyT
transcriptmica.

Redes temticas de grupos: Mieloma mltiple y

otras gammapatas: de gnesis a la teraputica:
1) Gnesis y desarrollo de estas enfermedades, 2003 FIS
2) Nuevos factores pronsticos y de monitorizacin
de enfermedad, 3) Modelos teraputicos.

Marcadores genticos del mal pronstico en

leucemias mieloides agudas y mielodisplasias:
2002-2004 MCyT
anlisis por citogentica molecular y perfiles de
expresin con cDNA arrays.

74
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Diseo y fabricacin de un biochip de DNA de baja

complejidad para la evaluacin pronstica del 2003 MCyT
cncer de mama.

Desarrollo de metodologas de matrices de DNA en

soportes interactivos (CD-ROM) para anlisis de 2001 MCyT
polimorfismos y expresin gnica (CD-DNA)

Obtencin y caracterizacin funcional de libreras

Centro Nacional de de anticuerpos expresados en fagos con inters 2003-2004 CAM
Investigaciones diagnstico y teraputico en cncer.
Oncolgicas
(CNIO-ISCIII) Validacin de dianas genmicas en cncer
colorrectal y preparacin de anticuerpos humanos
2003-2006 MCyT
de inters diagnstico y teraputico a partir de
libreras de anticuerpos expresados en fagos.

Utilizacin de libreras de anticuerpos expresados en

fagos para la obtencin de nuevos anticuerpos de 2003 MCyT
inters diagnstico y teraputico en cncer de vejiga.

Genomic approaches to microarray data analysis. 2003 ESF

Lnea de investigacin: accin de los eicosanoides

y NFAT en modelos de angiognesis tanto in vitro

como in vivo y patologas caracterizadas por
neovascularizacin mediada por VEGF.

Lnea de investigacin: aproximaciones

experimentales tanto en cultivos celulares como
in vivo, para aportar nueva informacin sobre la
integracin de las vas de sealizacin intracelular
que gobiernan el proceso apopttico.
Centro Nacional de
Investigaciones
Lnea de investigacin: estudio del mecanismo que
Cardiovasculares
asocia las seales de estrs oxidativo con la
Carlos III
inhibicin de la unin al DNA mediante
(CNIC-ISCIII)
aproximaciones protemicas en clulas vivas.

Regulacin i paper funcional dels factor de

Fundaci la
transcripci NFAT i NFATC en la resposta 2004-2006
Marat de TV3
inflamatoria: studi in vivo i in vitro.

xido ntrico y regulacin de la respuesta

inmunitaria adaptativa: implicaciones
2005-2007 MSC
fisiopatolgicas en modelos experimentales de
inflamacin crnica.

Sndrome de Walker-Warburg: estudios funcionales

de POMT1, bsqueda de otros genes implicados y 2003 MCyT
utilizacin de animales modelo para su estudio.

Defectos en la migracin neuronal causados por

Universidad
mutaciones en el gen POMT1. Estudios funcionales
Autnoma de Madrid 2003-2004 CAM
y generacin en el ratn Knock out para estudiar
Facultad de Medicina
futuras terapias.
Dpto. de Bioqumica

Identificacin de genes de susceptibilidad a la

diabetes de tipo 2 mediante la aplicacin
2002 MCyT
metrascriptomica. Genmica funcional y anlisis
masivo de snps.

75
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Estudio de la inhibicin de la sntesis de

prostaglandina E2 sobre la inflamacin sinovial y el
2003 MCyT
Universidad remodelamiento del hueso subcodral en la artrosis
Autnoma de Madrid humana y experimental.
Facultad de Medicina
Dpto. de Medicina Regulacin de la transduccin de seales por
hidroxilacin de protenas. Aplicacin al desarrollo 2002 MCyT
de nuevas terapias.

Universidad Anlisis morflogico de las alteraciones de

Autnoma de Madrid proteinas asociadas a microtbulos en
2002 MCyT
Facultad de Medicina degeneracin neurofibrilar de cerebros humanos y
Dpto. de Morfologa ratones transgnicos.

Universidad
Autnoma de Madrid Modelos de ratn para la caracterizacin de genes
2002 FIS
Facultad de Ciencias supresores y modificadores en linfomas.
Dpto. de Biologa

Inhibicin de la neurodegeneracin en modelos de

2003 MCyT
ataxia de Friedreich mediante transferencia gnica.

Estudio del proteoma mitocondrial humano.

Identificacin y funcionalidad de genes humanos 2003-2006 MCyT
implicados en el metabolismo celular.

Utilizacion de ARN de interferencia en el diseo y

2003 CAM
Universidad experimentacin de terapias contra el cncer.
Autnoma de Madrid
Facultad de Ciencias Uso de Sacharomyces cerevisae para la bsqueda
2002 FIPSE
Dpto. de Biologa de nuevas dianas teraputicas de VIH.
Molecular
Estudio de la activacin por calcio de la lanzadera
de NADH aspartato malato y su papel en la
2003 CAM
muerte neural por amiloide mediante clulas
troncales neurales deficientes en aralar1.

Estudios funcionales de aralar1: Activacin por calcio

de la lanzadera de nadh aspartato-malato y papel en 2002 MCyT
la supervivencia neuronal en modelos celulares.

Univ. de Barcelona
Explotacin de las diferencias metablicas entre la
Facultat de Qumica Fundacin
clula normal y tumoral en la bsqueda de nuevas 2003
Dpto. Bioqumica i La Caixa
dianas antitumorales.
Biologia Molecular

Univ. de Barcelona Diabetes y estrs oxidativo. Estudio de los efectos

Facultat de Farmcia de los agonistas PPAR (A y G) sobre la produccin
2003 MCyT
Dpto. Farmacologia i de especies reactivas del oxgeno en modelos
Qumica Teraputica celulares y animales de diabetes mellitus tipo 2.

Canvis bioqumics, mecnics i estructurals (3D)

associats a isqumia cerebral en artries cerebrals 2003-2006 MCyT
de rates SHR. Paper del tractament farmacolgic.

Univ. Autnoma de Efecte de lexpressi i de la regulaci de la

Barcelona ciclooxigenasa-2 (COX-2) en el broncoespasme i en la 2003-2006 FIS
Facultad de Medicina inflamaci pulmonar en un model dasma en el ratol.

Identificacin de genes de susceptibilidad a la diabetes

de tipo 2 mediante la aplicacin de transcriptomica, 2002-2005 MCyT
genmica funcional y anlisis masivo de SNPs.

76
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Efecto antiapopttico del PF 9601N y derivados en

Univ. Autnoma de
neuroblastomas humanos tipo SH-SY5Y tratados con
Barcelona
MPP+ como modelo de toxicidad dopaminrgica: 2003 MCyT
Unitat de Bioqumica
implicaciones teraputicas en la enfermedad de
de Medicina
Parkinson.

Univ. Autnoma de Estudio de la va de la sealizacin de CD44 e

Barcelona identificacin de genes clave en los procesos de 2003 MCyT
Facultad de Veterinaria adhesin, migracin e invasin de melanoma.

Institut de
Lnea de investigacin: Bioinformtica: Disseny
Biotecnologia i de
dalgorismes i programes per a lanlisi i predicci
Biomedicina
destructura/funci de protenes. Aplicaci de la
(IIB-UAB)
Bioinformtica a lidentificaci de dianes
Unitat de Biologia
teraputiques, vacunals i per a kits de diagnstic.
Molecular

Institut de
Biotecnologia i de Lnea de investigacin: citogentica molecular de
Biomedicina tumors slids: Hibridaci Genmica Comparada en
(IIB-UAB) microarrays de DNA.
Unitat de Citogentica

Unitat de Producci dAnimals Transgnics:

Centre de Especialitzada en el disseny i obtenci danimals
Biotecnologia Animal transgnics per microinjecci de DNA a embrions i

i de Terpia Gnica danimals knock-out totals o especfics de teixit, en
(CBATEG-UAB) criopreservaci dembrions de ratol, desperma i
fecundaci in vitro i en rederiva danimals.

Univ. Pompeu Fabra

Etude molculaire du Syndrome de Williams:
Dpto. Cincies Fondation
identification des gnes laide de ltablissement
Experimentals i de la 2003-2004 Jerme
de corrlations clinique-molculaires et de la
Salut Lejeune
cration dun modle de souris.
Unidad de Gentica

Univ. Pompeu Fabra

Lnea de investigacin: bases neuroqumicas y
Dpto. Cincies
neuroanatmicas de los fenmenos de
Experimentals i de la
dependencia de opiceos y cannabinoides,
Salut
animales modificados genticamente, en particular
Unitat de
ratones knock-out.
Neurofarmacologia

Univ. Pompeu Fabra

Dpto. Cincies Lnea de investigacin: identification of the
Experimentals i de la molecular targets of oestrogens and the

Salut mechanisms of action used by these oestrogenic
Unitat de compounds.
Senyalitzaci Cellular

Instituto Municipal de
Lnea de investigacin: molecular targets of snail
Investigacin Mdica
involved in epithelial to mesenchymal transition of
(IMIM-Univ. Pompeu
tumor cells.
Fabra).

Lnies de recerca: desenvolupament del sistema

Univ. de Lleida
nervis, mort neuronal, excitotoxicitat, models
Facultat de Medicina
desclerosi lateral amiotrfica.

Univ. de Girona
Lnea de investigacin: desarrollo de molculas
Facultat de Cincies
antitumorales que vayan contra dianas especficas
Grupo de Bioqumica
de las clulas cancerosas.
del Cncer

77
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

La deficiencia de perlecan implica diversas

patologas. Caracterizacin molecular y generacin
2003 MCyT
de ratones condicionalmente deficientes en
perlecan mediante la tcnica CRE/LOXP.

Enfermedad de Parkinson: modelos animales e

2004-2006 MCyT
integracin de datos genmicos y protemicos.

Plataforma bioinformtica NEUROGENMICA.

Subproyecto del proyecto coordinado denominado
2003-2006 MCyT
Univ. de Valencia Caracterizacin genmica y protemica de la
enfermedad de Parkinson.

Anlisis funcional y bioinformtico de modelos de

2004-2005 GV
neurodegeneracin parkinsoniana.

Genmica Funcional y terapia celular en la

2003-2005 FIS
enfermedad de Parkinson.

Mecanismos moleculares de muerte neuronal en

2003-2005 FIS
modelos animales y patologa humana.

Univ. de Zaragoza
Fac. de Veterinaria
Desarrollo de modelos animales de enfermedades
Dpto. de Bioqumica 2000-2003 MCyT
provocadas por alteraciones del DNA mitocondrial.
y Biologa Molecular y
Celular

Univ. de Zaragoza
Fac. de Veterinaria
Lab. de Neurobiologa. Enfermedad de Alzheimer: desarrollo de nuevos
2003 MCyT
Dpto. de Anatoma, modelos animales.
Embriologa y Gentica
Animal

Lnea de investigacin: creacin de animales

transgnicos, para modelos de enfermedades
Univ. Zaragoza humanas (en desarrollo).
Fac. de Veterinaria
Lab. Gentica Mecanismos moleculares de la neuropatologa
Bioqumica asociada a scrapie: anlisis de la apoptosis
2003-2005
neuronal y de perfiles de expresin gnica a nivel
genmico (diferencial display).

Univ. Salamanca
Instituto de Clonacin y caracterizacin de receptores opioides
2000-2002 JCYL
Neurociencias de en Zebrafish II.
Castilla y Len

Lnea de investigacin: anticuerpos monoclonales

Univ. de Vigo humanos obtenidos a partir de ratones transgnicos
Facultad de Biologa portadores de genes de inmunoglobulinas humanas.
Grupo de
Investigacin
Inmunoloxa Lnea de investigacin: desarrollo de ratones

knockout.

Univ. de Vigo
Facultad de Biologa Lnea de investigacin: hormona de Crecemento
Grupo de Investigacin (GH). Diabetes e obesidade. Modelos animais e
Fisioloxia Endocrina e humanos. GHRH, GRF, GHRP-6.
Neurofisioloxia

78
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Univ. de Oviedo Modelo de progresin en el cncer de laringe.

2002-2005 FIS
IUOPA - Instituto Estudio por hibridacin genmica comparativa.
Universitario de
Oncologa Principado Genmica funcional aplicada al diagnstico y
2002-2004 FIS
de Asturias tratamiento de las neoplasias linfoides.
Unidad Investigacin
en Oncologa de Modelo de progresin en el cncer de laringe.
Cabeza y Cuello 2002-2005 FIS
Estudio por hibridacin genmica comparativa.

Perfiles de expresin gnica, mecanismos

moleculares de la regulacin e interacciones
Univ. de Oviedo 2002-2005 MCyT
proteicas de las anexinas en modelos de
Facultad de Medicina diferenciacin celular.
Dpto. de Bioqumica
y Biologa Molecular
Diseo de modelos experimentales para el estudio
2001-2002 FIS
de la farmacologa del dolor neoplsico.

GPBP en la patognesis de la fibrosis tisular

Univ. de Cantabria asociada a procesos autoinmunes: ensayos 2003 MCyT
Facultad de Medicina teraputicos en modelos murinos.
Grupo de
Inmunopatologa
Dpto. de Biologa Evaluacin in vivo e in vitro del efecto de nuevos
Molecular inmunomoduladores sobre la funcin TH1/TH2 y el 2000-2001 CYCIT
desarrollo de autoinmunidad.

Univ. de Cantabria
Facultad de Medicina.
Grupo de Biologa
Lnea de investigacin: estudio de la expresin del
Molecular de las
gen de la apolipoprotena E mediante ratones
Apolipoproteinas y la
knock out como cultivos celulares.
Aterosclerosis
Dpto. de Biologa
Molecular

Estudio de los efectos de estrategias teraputicas

farmacolgicas y conductuales sobre las
Univ. de Cantabria alteraciones cognitivas y neuroqumicas 2002 MCyT
Facultad de Medicina. observadas en el ratn TS65DN, un modelo
Lab. de Neurobiologa murino de sndrome de down.
del Desarrollo
Dpto. de Fisiologa y Study of the therapeutic effects of
Farmacologa acetylcholinesterase inhibitors and GVS-1 11 on
2004
the cognitive deficits, neurogenesis and apoptosis
of TS65DN mice, a model of down syndrome.

Proyecto bipo-med identificacin de marcadores

Univ. de Cantabria moleculares y dianas teraputicas para los 2004
Facultad de Medicina. trastornos bipolares.
Grupo de Receptores
de Neurotransmisores Identificacin de marcadores moleculares y dianas
Dpto. de Fisiologa y teraputicas para la depresin mayor, basada en la
Farmacologa 2004
tecnologa DNA - chip. Estudio en cerebro humano
postmortem.

Univ. Complutense de
Madrid
Facultad de Ciencias Accin antitumoral de los cannabinoides: anlisis
Biolgicas de la expresin gnica en gliomas mediante arrays 2005-2006 CAM
Dpto. de Biologa de DNA.
Molecular y
Bioqumica I

79
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Univ. Complutense de Lnea de investigacin: regulacin de la expresin

Madrid del gen del receptor de insulina por distintas
Facultad de Medicina hormonas: mineralcorticoides, glucocorticoides,
Dpto. de Bioqumica y vitamina D y catecolaminas. Utilizacin de
Biologa Molecular III modelos in vivo e in vitro.

Univ. Complutense de Lnea de investigacin: farmacologa

Madrid cardiovascular: estudios con animales diabticos,

Facultad de Medicina animales hipercolesterolmicos y Cultivos celulares
Dpto. de Farmacologa de fibra vascular.

Univ. Complutense de
Madrid Inhibidores de proteasas en Plasmodium
Facultad de Medicina falciparum para la identificacin de nuevas dianas 2003 MCyT
Dpto. de Bioqumica y teraputicas en malaria.
Biologa Molecular IV

Univ. de Alcal
Receptor del pptido intestinal y vasoactivo (VIP)
Facultad de Medicina
como posibles dianas de agentes citotxicos en 2002
Dpto. de Anatoma y
cncer de prstata.
Embriologa Humana

Estudio del papel de las quimioquinas y sus

receptores en el dao renal en un modelo de 2002-2004 CAM
isquemia/reperfusin.

Univ. de Alcal
Molculas de adhesin y enfermedad renal:
Facultad de Medicina
evidencia funcional de las integrinas beta 1 2001-2004 FIS
Dpto. de Anatoma
activadas en un modelo de nefritis autoinmune.
Patolgica

Quimioquinas y receptores de quimioquinas como

potenciales dianas teraputicas en la nefritis 2001-2004 MCyT
experimental autoinmune.

Papel de la protena relacionada con la parathormona

en los mecanismos de lesin y reparacin renal.
2001-2002
Estudio coordinado integral en nefropatas humanas
Univ. de Alcal y en modelos experimentales.
Facultad de Medicina
Dpto. de Fisiologa
Caracterizacin molecular, celular y electrofisiolgica
de la degeneracin retiniana en ratones RD y de su 2001-2004 MCyT
posible atenuacin por (PRO) insulina.

La cirrosis heptica como enfermedad inflamatoria.

Univ. de Alcal
Anlisis de los mecanismos patognicos
Facultad de Medicina 2003 MCyT
leucocitarios en modelos experimentales y en
Dpto. Medicina
enfermedad humana.

Anlisis de los perfiles de expresin de genes y

protenas en ratones MAT1A KNOCKOUT:
2001-2004 MCyT
identificacin de marcadores moleculares de
Univ. de Navarra esteatohepatitis no alcohlica (NASH).
Clnica Universitaria
de Navarra
Dpto. de Medicina Posible papel etiopatognico de la expresin
Interna disminuida del intercambiador de aciones AE2 en
la cirrosis biliar primaria: produccin de ratones 2001-2003 FIS
knock-out y bsqueda de alteraciones hepticas
compatibles con la enfermedad.

80
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Univ. de Navarra Utilidad de la transferencia gnica del gen de la

Clnica Universitaria timidina kinasa, del gen de la interleucina-12 y de
Fundacin
de Navarra clulas dendrticas transducidas con el gen de la 2001-2003
Echbano
Dpto. de Medicina interleucina-12 en el tratamiento de cultivos celulares
Interna y modelos animales singnicos de cncer de pulmn.

Valor patogentico de la exposicin de c-kit en el

2002-2005 FIS
tumor de Ewing. Una posible diana teraputica.

Caracterizacin de la expresin gnica del

Univ. de Navarra
carcinoma renal mediante anlisis protemico.
Clnica Universitaria 2002-2005 FIS
Identificacin de nuevas protenas potencialmente
de Navarra
tiles en el diagnstico, pronstico y tratamiento.
Dpto. de Histologa y
Anatoma Patolgica
Caracterizacin de la expresin gnica del
hapatocarcinoma mediante anlisis protemico.
2002-2005 GN
Identificacin de protenas potencialmente tiles
de diagnstico y pronstico.

Univ. de Navarra
Clnica Universitaria
de Navarra Functional proteomics of heart failure in arterial Empresa
2002-2004
Dpto. de Cardiologa hypertensin. privada
y Ciruga
Cardiovascular

Balance angiognico en melanoma humano.

Estudio in vivo e in vitro de factores implicados en
la coagulacin, metaloproteinasas e inhibidores,
2001-2002 GN
endostatina, angiogenina y PDGF. Valoracin de la
eficacia del tratamiento con antitrombina III en un
modelo de melanoma animal.
Univ. de Navarra
Clnica Universitaria
Papel de la NADPH oxidasa, del xido ntrico y del
de Navarra
NF-KB en la acantolisis del pnfigo vulgar en un 2002-2005 FIS
Dpto. Dermatologa
modelo murino.

Estudio de la conformacin estructural de la

antitrombina plasmtica en pacientes con melanoma.
2002-2004 FUNA
Efecto antiangiognico de la antitrombina latente en
un modelo murino de melanoma.

Estudio del patrn diferencial de expresin gnica en

tejido adiposo de pacientes obesos e individuos con 2001-2002 GN
Univ. de Navarra normopeso mediante la tcnica de microarrays.
Clnica Universitaria
de Navarra
Dpto. Endocrinologa Papel de la leptina en la regeneracin heptica.
y Nutricin Estudio de la interaccin entre leptina y xido
2004-2006 MCyT
ntrico mediante la generacin de un ratn doble
knockout ob/ob-INOS/.

Univ. de Navarra
Clnica Universitaria Diseo de vectores polimricos para la liberacin
de Navarra controlada de factores neurotrficos tipo GDNF en
2004-2006 GN
Dpto. Farmacia y modelos animales de enfermedad de Parkinson.
Tecnologa Perspectivas teraputicas.
Farmacutica

Univ. de Navarra Anlisis protemico y funcional de las alteraciones

Clnica Universitaria inducidas por las protenas p210 y p190
de Navarra dependientes del oncogen VER-ABL en la 2002-2004 GN
Dpto. de Hematologa regulacin del ciclo celular y su papel en el
y Hemoterapia mecanismo de transformacin.

81
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Animales transgnicos como modelos

Fundacin
experimentales de las enfermedades de Parkinson 2001-2003
Echbano
y Alzheimer.

Ratones transgnicos para UCH-L1 humana mutada

(Ile93Met) como modelo in vivo de enfermedades 2001-2004 GN
neurodegenerativas humanas por cuerpos de Lewy.

Efecto del tratamiento con trifusal en la

prevencin/aclaracin del depsito de material Empresa
2002-2005
amiloide humano como modelo in vivo de privada
enfermedad de Alzheimer y neurodegeneracin.

Univ. de Navarra
Ratones transgnicos como modelos experimentales
Clnica Universitaria 2001 MCyT
de patologas neurodegenerativas humanas.
de Navarra
Dpto. de Neurologa y
Neurociruga Coexpresin de las protenas precursoras del
amiloide y tau humanas mutadas en el cerebro de
MCyT
ratones transgnicos como modelo in vivo de
enfermedad de Alzheimer y neurodegeneracin.

Identificacin, caracterizacin y determinacin

ontolgica de nuevas dianas moleculares de la
2003-2004 GN
S-adenosilmetionina (AdoMet) mediante
aproximaciones de Genmica Estructural.

Ratones transgnicos como modelos

experimentales de patologas neurodegenerativas
2000 MCyT
humanas: enfermedad de Parkinson y demencia
con cuerpos de Lewy.

Centro de
Investigacin Mdica Significado de la sobreexpresin del gen EVI1 y
Fundacin
Aplicada diseo de nuevas estrategias teraputicas
2004 Cientfica de la
(CIMA - Univ. de mediante siRNA (short interfering RNA) en
aecc. GN
Navarra) pacientes con leucemia mieloide aguda.
rea de Oncologa

Anlisis de la expresin vascular de la

metaloproteinasa-10 (MMP-10) en un modelo 2004 SEA
murino de aterosclerosis.

Centro de Anlisis de la expresin vascular de la

Investigacin Mdica metaloproteinasa-10 (MMP-10) en la aterosclerosis 2004 SEC
Aplicada humana y murina.
(CIMA - Univ. de
Navarra)
rea de Implicacin del PPAR alfa en la transicin de la
Fisiopatologa hipertrofia ventricular izquierda a la insuficiencia
2004 Pfizer
Cardiovascular cardaca en la cardiopata hipertensiva humana y
experimental.

Protemica funcional del miocardio en la cardiopata

2003 Pfizer
hipertensiva. Estudio clnico y experimental.

Centro de
Investigacin Mdica
Terapia celular mediante clulas madre adultas en
Aplicada
modelos experimentales de Enfermedad de 2003 GN
(CIMA - Univ. de
Parkinson.
Navarra)
rea de Neurociencias

82
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Caracterizacin funcional de la prohibitina. Implicacin

en el desarrollo de enfermedades hepticas y 2004 MEC
hepatocarcinoma mediante tcnicas de protemica.

Anlisis de ratones knock-out para el gen de

cardiotrofina-1 en el desarrollo del hgado y en 2004-2005 GN
modelos de dao heptico.

Centro de Anticuerpos intracelulares frente a la protena del core

Investigacin Mdica del virus de la hepatitis C (VHC) como estrategia para 2002-2005 FIS
Aplicada el tratamiento de la hepatitis crnica C.
(CIMA - Univ. de
Navarra)
rea de Terapia Importancia de la metionina adenosiltransferasa
Gnica y Hepatologa en la iniciacin de la lesin heptica: estudio de un 2001-2004 FIS
modelo de ratn knockout del gen MAT1A.

Desarrollo y anlisis de la inhibicin especfica de la

2003-2006 MCyT
expresin gnica basada en snRNAs U1 modificados.

Estudio del mecanismo de accin de U1 SNRNP y

desarrollo de U1 SNRNPS modificados para la 2000-2003 MCyT
inhibicin de la expresin gnica.

Univ. Pas Vasco

Caracterizacin del microambiente pro-metastsico
Facultad de Medicina
de la inflamacin y la angiognesis en modelos 2001-2003 UPV
Dpto. Biologa Celular
preclnicos de cncer diseminado.
y Ciencias Morfolgicas

Univ. Pas Vasco Implicaciones de la muerte oligodendroglial

Facultad de Farmacia excitotoxica en la esclerosis mltiple: una
2001-2003 UPV
Dpto. de estrategia experimental para el descubrimiento de
Neurociencias nuevas dianas teraputicas.

Univ. de Santiago de
Compostela Potenciales sistemas de neuroproteccin en
Facultad de Medicina modelos experimentales de enfermedad de
2003 MCyT
y Odontologa Parkinson y en neuroesferas de clulas precursoras
Dpto. de Ciencias pluripotenciales.
Morfolgicas

Nuevas estrategias teraputicas en enfermedades

Univ. de Santiago de respiratorias. Bsqueda de efectos teraputicos 2003 MCyT
Compostela mediante la activacin de fosfodiesterasas.
Facultad de Medicina
y Odontologa
Dpto. de Fisioloxa Estudio de la funcin supresora de tumores de
2003 MCyT
p130rb2 y p107 en modelos murinos.

Lnea de investigacin: mecanismos inflamatorios

en la hipertensin arterial: modelo experimental
en rata hipertensa.

Lnea de investigacin: penumbra isqumica:

Univ. de Santiago de
modelos experimentales.
Compostela
Facultad de Medicina
y Odontologa Lnea de investigacin: enfermedades genticas
Dpto. de Medicina del rin. Poliquistosis Renal. Gen PKD1. Gen de la
uromodulina.

Lnea de investigacin: identificacin y validacin de

dianas teraputicas en enfermedades reumticas.

83
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Univ. de Santiago de
Compostela
Envejecimiento cerebral en el perro. Un posible
Facultad de Veterinaria 2003 MCyT
modelo natural de la enfermedad de Alzheimer.
Dpto. de Anatoma y
Produccin Animal

Univ. de Santiago de
Compostela
Construccin de vectores y lneas celulares para el
Complejo Hospitalario 2002 FIPSE
anlisis fenotpico de la infeccin por VIH.
Universitario de
Santiago

Univ. da Corua
Facultad de Ciencias Sistema de determinacin de niveles de expresin

Dpto. de Bioloxa gnica por microarray.
Celular e Molecular

Univ. da Corua
Facultad de INBIOMED: plataforma de almacenamiento,
Informtica integracin y anlisis de datos clnicos, genticos,
2003 FIS
Dpto. de Tecnologas epidemiolgicos e imgenes orientada a la
de la Informacin y investigacin sobre patologas.
las Comunicaciones

Univ. da Corua
Instituto de Ciencias Marcadores moleculares de la patognesis de la
de la Salud cardiomiopata dilatada: estudio de la expresin 2001 MCyT
Unidad de Biologa gnica en el miocardio porcino y humano.
del Desarrollo

Univ. Castilla
La Mancha
Facultad de
Nuevas dianas teraputicas en neuroproteccin:
Qumicas/Centro 2000 CICYT
canales inicos y mecanismos antioxidantes.
Regional
Investigaciones
Biomdicas

Univ. Alicante Alteraciones celulares y moleculares en la retina

Facultad de Ciencias de mamferos asociadas al Parkinson experimental 2003 MCyT
Dpto. de Biotecnologa y posible terapia.

Diferenciacin celular y quimiorresistencia en cncer

Univ. Miguel Aventis
de colon. Identificacin de dianas moleculares y 1999-2002
Hernndez Pharma; MCyT
diseo de estrategias farmacolgicas.
Hospital Universitario
Elche - Instituto
Biologa Molecular y Caracterizacin y validacin teraputica de
Celular compuestos analgsicos y quimiosensibilizadores 2003-2005 MEC
de extractos vegetales.

Univ. Miguel
Transcriptional regulation in synaptic plasticity,
Hernndez
learning and memory under normal and 2004-2008 CE
Instituto de
pathological situations.
Neurociencias

Univ. de Crdoba
Facultad de
Hormonodependencia de los carcinomas de mama
Veterinaria
caninos y felinos como modelo natural del 1999-2002 MEC
Unidad Docente de
carcinoma de mama humano.
Histologa y Anatoma
Patolgica

84
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Univ. de Crdoba
Facultad de Medicina Lnea de investigacin: modelos experimentales de

Dpto. de Bioqumica Alzheimer.
y Biologa Molecular

Univ. de Crdoba Lnea de investigacin: investigacin de los

Facultad de Ciencias fenmenos de integracin neuroendocrina
Dpto. de Biologa mediante clulas melanotropas (MSH) como
Celular, Fisiologa e modelo experimental. Estudios de aplicacin
Inmunologa farmacolgica.

Univ. de Len
Facultad de Veterinaria Bsqueda de dianas con potencial teraputico en
2003 MCyT
Dpto. de Farmacologa el tratamiento de la criptosporidiosis.
y Toxicologa

Univ. de Len Lnea de investigacin: purificacin y caracterizacin

Facultad de Biologa y localizacin de neurorreceptores de GABA A,

Dpto. de Bioqumica dopamina y NMDA. Produccin de anticuerpos contra
y Biologa Molecular pptidos sintticos de sus subunidades.

Estudio de la correlacin entre la evolucin clnica

Univ. Valladolid
y pronstico, y la expresin de la p75 y TrkA en
Facultad de Medicina
tumores de origen epitelial en humanos. 2001-2003 JCYL
Dpto. Anatoma y
Evaluacin terapetica del inhibidor de TrkA en
Radiologa
tumores epiteliales.

Univ. Valladolid
Nuevos modelos y estrategias para estudiar los
Facultad de Medicina
quimiorreptores arteriales: preparacin in vitro de
Dpto. Bioqumica y 2001-2003 FIS
ratones modificados genticamente y aplicacin de
Biologa Molecular y
microelectrodos sensibles a acetilcolina.
Fisiologa

Univ. Valladolid
Nuevos blancos moleculares de drogas anti-
Instituto de Biologa
inflamatorias: modulacin farmacolgica de la 2003-2004 JCYL
y Gentica Molecular
funcin transcripcional de NFATI.
(IBGM)

Establecimiento de un modelo in vivo para el

desarrollo de frmacos contra la enfermedad de 2003-2005 MCyT
Alzheimer.

Identification of early markers of disease Aventis Pharma.

Univ. De Sevilla progression in a murine transgenic model of 2003-2004 Recherche-
Facultad de Farmacia alzheimers disease. Dveloppement
Dpto. Bioqumica,
Bromatologa,
Toxicologa y Caracterizacin molecular de cambios en el Aventis Pharma.
Medicina Legal sistema GABArgico en el hipocampos de un ratn 2001-2003 Recherche-
transgnico que expresa una mutacin APP. Dveloppement

Cambios durante el envejecimiento en los sistemas

GABArgico, colinrgico y glutamatrgico en modelos 2003-2005 MCyT
transgnicos de la enfermedad de alzheimer.

Univ. de Sevilla
Facultad de Farmacia Lnea de investigacin: patognesis de la
Farmacologia enfermedad inflamatoria intestinal y cncer

Experimental y colorrectal: mecanismos inmunoinflamatorios.
Farmacia Clnica. Nuevas dianas teraputicas.
Dpto. de Farmacologa

85
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Univ. de Sevilla
Caracterizacin de nuevas dianas en el patgeno
Facultad de Biologa
Salmonella enterica: anlisis gentico y molecular
Grupo de Gentica 2004 MCyT
de funciones de virulencia en los regulones IgaA-
Bacteriana.
RcsBC y Dam.
Dpto. de Gentica

Univ. de Sevilla
Facultad de Medicina Nuevas tcnicas de genmica funcional: anlisis
Grupo de Expresin mediante DNA-arrays de potenciales genes blanco
2003-2005 FIS
Gnica en de los immunosupresores en clulas linfoides y
Eucariontes. granulocticas.
Dpto. de Gentica

Universidad Pablo de
Olavide
Centro Andaluz de
Desarrollo de un modelo experimental de la
Biologa del Aventis-Pharma
enfermedad de Alzheimer en ratn.
Desarrollo
Divisin de
Neurociencias

Univ. de Murcia
Bsqueda de nuevos elementos genticos
Centro Regional de
responsables de la malignizacin celular inducida 2003 MCyT
Hemodonacin de
por TGF-beta.
Murcia

Univ. Extremadura
Facultad de Medicina
Dpto. de Modelling during drug development. 1998-2003 UE
Farmacologa y
Psiquiatra

Univ. Granada
Facultad de Farmacia
Lnea de investigacin: estudios en modelos de
Grupo de
Parkinson experimental, epilepsia experimental y
Comunicacin
en clnica peditrica.
Intercelular
Dpto. de Fisiologa

Univ. Granada
Facultad de Medicina
Lnea de investigacin: modelos experimentales de
Grupo de Inmunologa
inmunopatologa.
Microbiana
Dpto. de Microbiologa

U. Cdiz
Servicio de Lnea de investigacin: modelos de

Dermatologa. experimentacin en toxicologa y alergia cutnea.
Hospital Universitario
de Puerto Real
Modelos cutneos de
Lnea de investigacin: modelos de
experimentacin de
experimentacin en oncologa cutnea y sus
alergia, toxicologa y
nuevas alternativas teraputicas.
cancerologa

Univ. Jan
Grupo de
Inmunobiologa Lnea de investigacin: estudio del proceso

Tumoral metastsico en modelos experimentales murinos.
Dpto. de Ciencias de
la Salud

86
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Univ. Mlaga Lnea de investigacin: estudios a nivel molecular

Facultad de Ciencias del metabolismo de aminas bigenas y de sus
Dpto. de Biologa aplicaciones farmacolgicas potenciales.
Molecular y Aproximaciones genmicas, protemicas y
Bioqumica bioinformticas.

U. Mlaga
Facultad de Ciencias Anlisis gentico y funcional de la glutaminasa
Dpto. Bioqumica, humana: terapia gnica basada en antisentidos de 2003-2006 MCyT
Biologa Molecular y la enzima.
Qumica Orgnica

Alteraciones del epitelio ependimario como causa de

hidrocefalia y procesos neurodegenerativos. Estudio
Univ. Mlaga en modelos animales y casos clnicos humanos.
Facultad de Ciencias
Dpto. de Biologa Estudio de la vulnerabilidad neuronal gabargica y
Celular su relacin con la inflamacin y el estrs de retculo

en procesos neurodegenerativos asociados con la
edad: envejecimiento y enfermedad de alzheimer.

Univ. Mlaga Papel del cido lisofosfatdico (LPA) en la

Facultad de Ciencias neurognesis embrionaria y de adultos. Estudio de
FIS
Dpto. de Biologa ratones mutantes para el receptor lpA1
Animal aprendizaje y memoria.

Lnea de investigacin: modelo experimental de

hipertensin intraocular. Estudio
Univ. Mlaga
inmunohistoqumico y ultraestructural de la
Facultad de Medicina
degeneracin neuronal y su relacin con la
Dpto. de Histologa
microvascularizacin. Modificaciones en el
transporte axoplstico.

Univ. Las Palmas de

Gran Canaria COX-2, GTPasas Rho y STATs: su posible
Dpto. Bioqumica y asociacin en tumorignesis y su estudio como 2002-2003
Biologa Molecular, posibles dianas teraputicas.
Fisiologa

Lnea de investigacin: bases moleculares del

cncer: estudio de las alteraciones de las vas de
transduccin de seales y mecanismos de regulacin
FIS
del ciclo celular que suceden como consecuencia de
la actividad oncognica; nuevas dianas teraputicas
y herramientas de diagnstico precoz.

Regulacin gnica de la formacin de biofilms por

Staphylococcos: identificacin de nuevas dianas
2003-2005 MCYT
Univ. Cardenal para el tratamiento de infecciones persistentes
Herrera-CEU sobre implantes.

Desarrollo de un modelo animal de infeccin

Conselleria de
experimental y de nuevas estrategias para el
2003 Cincia i
tratamiento conservador de la infeccin asociada a
Tecnologa
dispositivos intravasculares.

Accin antifibrtica del TNFalfa y fibrosis mediada

por TGFbeta en arteria cartida de ratas 2003-2004
espontneamente hipertensas normotensas.

87
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Centro Superior en
Alta Tecnologa Validacin teraputica y desarrollo de
Cientfica neuroprotectores de nueva generacin basados en 2002-2004 MCYT
(CSAT-FVIB) trialquilglinas.
Lab. de Neurobiologa

Identificacin mediante qumica combinatoria de

Centro Superior en compuestos moduladores de la actividad de GPBP
Alta Tecnologa 2001-2004 CICYT
y utilizacin de los mismos con finalidad
Cientfica teraputica en modelos animales con lupus renal.
(CSAT-FVIB)
Dpto. Inmunobiologa.
Lab. de Patologa GPBP en la patognesis de la fibrosis tisular
Autoinmune asociada a procesos autoinmunes: ensayos 2004-2006 CICYT
teraputicos en modelos murinos.

Centro Superior en
Alta Tecnologa
Cientfica
(CSAT-FVIB) Estudios de estructura-funcin de nuevas posibles
Dpto. de Biologa dianas para la teraputica antimicrobiana:
2000-2003 DGESIC
Celular, Molecular y carbamato quinasa, acetilglutamatoquinasa y
Gentica aspartoquinasa
Lab. de
Reconocimiento
Molecular

Caracterizacin de dianas moleculares para la

regulacin de la apoptosis celular. Desarrollo de Fundacin
ensayos de alto rendimiento para la identificacin 2001-2003 SALVAT
Centro Superior en de moduladores con fines teraputicos en cncer y Inquifarma
Alta Tecnologa neurodegeneracin.
Cientfica
(CSAT-FVIB)
Caracterizacin de dianas moleculares para la
Dpto. de Qumica
regulacin de la apoptosis celular. Desarrollo de
Mdica.
ensayos de alto rendimiento para la identificacin 2002-2004 MCYT
Lab. de Pptidos y
de moduladores con fines teraputicos en cncer y
Desarrollo de
neurodegeneracin.
Ensayos

Inhibidores de CDK-2, caracterizacin de Merck Farma y

2003
compuestos y protenas reguladoras. Qumica SA

Lneas de investigacin: mecanismo de regulacin

de la transcitosis por el retromero. Identificacin
de dianas del retrmero y determinacin de su
funcin. Diseo de frmacos que acten sobre las
Centro Superior en dianas del retrmero.
Alta Tecnologa
Cientfica Lneas de investigacin: identificacin de nuevas
(CSAT-FVIB) dianas farmacolgicas para su aplicacin dentro de
Programa de los Programas de Cribado y Desarrollo Preclnico.
Genmica y Estudio de los mecanismos moleculares
Farmacoprotemica. responsables de la accin antitumoral de
Identificacin de compuestos, con un especial nfasis en dilucidar
Dianas Moleculares su potencial de activacin de las cascadas
apoptticas (muerte programada) de la clula
tumoral, sobre los procesos de proliferacin celular
y en el proceso de vascularizacin del tumor
(angiognesis).

88
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Centro Superior en Lneas de Investigacin: anlisis in vivo de la

Alta Tecnologa inflamacin y carcinognesis epiteliales: interferencia
Cientfica biolgica entre el receptor de glucocorticoides y NF-
(CSAT-FVIB) kB. Mecanismos moleculares que median la accin de
Programa de las hormonas glucocorticoides: identificacin de
Genmica y dianas teraputicas. Modelos animales transgnicos
Farmacoprotemica. para el estudio de malformaciones epiteliales. Bases
Identificacin de moleculares del sndrome humano Displasia
Dianas Moleculares Ectodrmica.

Institut de Recerca Lnea de investigacin: estudio de la fisiopatologa

Oncolgica de la cistinuria en el ratn knockout de Slc7a9.
(IRO)
Centro de Gentica Lnea de investigacin: estudio de la funcin de los
Mdica y Molecular
HAT mediante animales knockout.

Fundacin Reina
Mercedes para la
Caracterizacin del mecanismo sensor de glucosa
Investigacin
en el cuerpo carotideo de rata y su modificacin 2003 MCyT
Sanitaria
en condiciones de hiperglucemia crnica.
Hospital Universitario
Virgen del Roco

Fundacin Parque Lnea de investigacin: Murine models

Cientfico de of disease.
Barcelona
CRG - Centre de
Regulaci Genmica Lnea de investigacin: Neurobehavioral

Genes and disease phenotyping of mouse models of disease.

Instituto Canario de
Investigacin del
Aplicacin de la tecnologa de BIOCHIPS al estudio
Cncer
de los mecanismos moleculares de la hormona de
(ICIC) 2003-2003 FULP
crecimiento Identificacin de perfiles de
Seccin de Oncologa
expresin gnica inducidos por hormonas.
Molecular y Biologa
del Cncer

Instituto Canario de
Investigacin del Micrometstasis seas de cncer de mama.
Cncer Deteccin de dianas teraputicas en clulas
2002-2003 ACAETCA
(ICIC) tumorales presentes en sangre y mdula sea de
Seccin de Nuevas pacientes de cncer de mama.
terapias para el cncer

Anlisis fenotpico y protemico de la inhibicin

especfica de NF-KB en clulas malignas: 2003 MCYT
implicaciones teraputicas.

Hospital Clnico y Papel fisiopatolgico de los eicosanoides derivados

Universitario de de la 5-lipooxigenasa y la ciclooxigenasa-2 en la
2003 MCYT
Barcelona inflamacin y fibrosis heptica. Estudios en
ratones modificados genticamente.

Dianas metablicas y moleculares del efecto del

tungstato sdico sobre la prdida de peso en la 2003 MCYT
obesidad.

89
 Centro Ttulo Proyecto Duracin Financiacin

Hospital Univ. Vall

dHebron
Centre Lnea de investigacin: Molecular profiling of

dInvestigacions en target genes in tumors of the mutator phenotype.
Bioquimica i Biologia
Molecular (CIBBIM)

Fundaci irsiCaixa.
Interferencia de RNA: aplicacin en la bsqueda
Hospital Universitari 2002 FIPSE
de nuevas dianas antivirales.
Germans Trias i Pujol

Hospital La Fe
Centro de Desarrollo de un modelo hepatocelular humano
Investigacin diferenciado para estudios de metabolismo y 2003 MCYT
Unidad Hepatologa potencial inductor de nuevos frmacos.
Experimental

Genmica funcional del linfoma Malt con un nuevo

Hospital Clnico Fundacin
reordenamiento del oncogn Malt1: implicaciones 2004
Universitario Valencia La Caixa
como diana teraputica potencial.

Patrn de expresin gnica mediante microarrays

en las hiperlipemias genticas. Red temtica de
investigacin cooperativa Estudio gentico, 2003-2005 FIS
metablico, clnico, teraputico y epidemiolgico de
las hiperlipemias hereditarias genticas en Espaa.

Seleccin de oligonucletidos (Aptmeros) capaces

Hospital Ramn de interaccionar de forma especfica con protenas
y Cajal reguladoras del proceso de apoptosis. Anlisis de
2002-2004 FIS
la capacidad de los aptmeros seleccionados de
modular la actividad de estas protenas en
enfermedades neurodegenerativas.

Seleccin de aptmeros frente a protenas especficas

que intervienen en la regulacin de la apoptsis 2003-2005 FIS
durante la infeccin por Leishmania infantum.

Cardiomiopata hipertrfica familiar:

Hospital Universitario caracterizacin de las mutaciones asociadas y
CAM
La Paz desarrollo de un modelo experimental para el
anlisis funcional de los genes mutados.

Hospital Gregorio
Mapas protemicos de leucocitos
Maran
polimorfonucleares neutrfilos (PMNS). Modelos
Lab. de Biologa
animal y humano.
Celular

Papel del receptor cannabinoide CB1 en modelos

animales de enfermedad de Parkinson y estudios de
Hospital Doce de Fundacin
la eficacia y complicaciones del tratamiento con 2003
Octubre La Caixa
I-DOPA o agonistas dopaminrgicos en ratones
desprovistos del gen del receptor cannabinoide CB1

Hospital General
Universitario de Elche
Diferenciacin celular y quimiorresistencia en
(HGUE)
cncer de colon. Identificacin de dianas
Grupo de Oncologa 1999-2002 CICYT
moleculares y diseo de estrategias
Molecular
farmacolgicas.
Unidad de
Investigacin

90
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Centro Titulo Proyecto Duracin Financiacin

Modelo murino de infeccin pulmonar crnica por

Pseudomonas aeruginosa: efecto de la
Hospital Son Dureta 2003 MCYT
hipermutacin sobre la adaptacin, virulencia y
resistencia a antibiticos

Hospital Universitario
Bsqueda de nuevas dianas contra las infecciones
Ntra. Sra. de 2000-2006 PDCAN
causadas por estafilococos.
Candelaria

Fundacin privada
Instituto de Inhibicin de la replicacin del VIH mediada por
2003 MCYT
Investigacin del RNAs interferentes.
SIDA-Caixa

Diagnstico molecular y dianas teraputicas de la

Owl Genomics IMADE
esteatohepatitis.

Inhibidores de GSK-3. Una nueva estrategia

Neuropharma teraputica para la enfermedad de Alzheimer y
otros procesos neurodegenerativos.

Identificacin de marcadores moleculares y dianas

Proteomika SL teraputicas en cncer de vejiga, empleando
herramientas de protemica.

Fig. 29. Proyectos de I+D espaoles en validacin de dianas.

Fuente: elaboracin propia.
Acrnimos
PN, Plan Nacional; FIS, Fondo de Investigaciones Sanitarias; MCyT, Ministerio de Ciencia y Tecnologa; CAM, Comunidad de
Madrid; DGESI, MEyC, Ministerio de Educacin y Cultura; FRA, Fundacin Ramn Areces; CICYT, Comisin Interministerial
de Ciencia y Tecnologa; UAB, Universidad Autnoma de Barcelona; UE, Unin Europea; PGI y DT, Plan Gallego de
Investigacin y Desarrollo Tecnolgico; DGES, Direccin General de Enseanza Superior; FCRG, Fundacin Centro de
Regulacin Genmic; CSIC, Consejo Superior de Investigaciones Cientficas; SEA, Sociedad Espaola de Arteriosclerosis;
GV, Gobierno Vasco; MTAS, Ministerio de Trabajo y Asuntos Sociales; ACM, Asociacin de Celacos de Madrid; FIPSE,
Fundacin para la Investigacin y la Prevencin del Sida; MMA, Mutua Madrilea Automovilista; MSC, Ministerio de
Sanidad y Consumo; JCYL, Junta de Castilla y Len; GN, Gobierno de Navarra; SEC, Sociedad Espaola de Cardiologa;
IMADE, Instituto Madrileo de Desarrollo.

91
Anexo II: Empresas internacionales en validacin de dianas

Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Desarrollo de anticuerpos Lexicon Genetics Inc.,

Anticuerpos
Abgenix Microarrays de teraputicos Pfizer, Amgen, Ambit
(XenoMouse
www.abgenix.com tejidos principalmente frente al Biosciences, Schering-
XenoMax)
cncer Plough, Celltech

Desarrollo de
Alnylam tratamientos basados en
Reactivos para
Pharmaceuticals ARNi para Parkinson, Merck
siRNA
www.alnylam.com degeneracin macular,
VRS y lesin medular

Anlisis de la
Servicios de apoyo en
Althea Technologies ARNsi para validar expresin gnica Expression Analysis,
las diferentes fases de la
www.altheatech.com dianas (eXpress Profiling, Inc.
I+D farmacutica
Signature Discovery)

Kits fabricacin
de ARNsi
Cenix BioScience,
Vectores de
Proveedor de productos Applied Biosystems,
Ambion expresin de ARNsi
de biologa molecular Caliper Technologies
www.ambion.com (pSilencer 5.1)
basados en ARN Corp., Sigma Aldrich
Reactivos
Corp., Qiagen
ARNsi (Silencer)
Microarrays

Desarrollo de frmacos y
anticuerpos teraputicos
Validacin de dianas Abgenix, ISIS
frente a cncer,
Amgen mediante Pharmaceuticals,
inflamacin,
www.amgen.com microarrays, Cambridge Antibody
enfermedades
protemica, ARNi Technology
metablicas, neurologa
y hematologa

Productos de biologa
Anlisis de la
Applied Biosystems molecular dirigidos a
Kits para la sntesis expresin gnica Myriad genetics,
www.appliedbiosyste investigacin bsica,
de PNAs (TaqMan, arrays, Ambion
ms.com farmacutica, y tests
LS*LIMS)
estandarizados

Aptmeros (SELEX) Aptmeros teraputicos

Archemix
Ribozimas frente a enfermedades sirna Therapeutics
www.archemix.com
(Riboreporter) crnicas y agudas

Aventis, Xantos
Proveedor de tejidos
Arrays de tejidos biomedicine,
humanos y productos
Ardais (Ardais tissue Astrazeneca, Bristol
relacionados para
www.ardais.com arrays) Myers Squibb,
investigacin
Tejidos humanos Affymetrix, Abgenix,
farmacutica
Curagen

Merck, Bayer AG,

Ratones manipulados Sanofi-Aventis,
(ArteMice Biovitrum, EVOTEC
Artemis Servicios de generacin
CONDITIONAL, Neurosciences,
Pharmaceuticals de ratones trangnicos y
ArteMice Regeneron
www.artemis- herramientas
CONSTITUTIVE, Pharmaceuticals,
pharmaceuticals.de relacionadas
ArteMiceHUMANIZED, Schering AG,
ArteMice RNAi) Boehringer Ingelheim,
Aventis, Benitec

92
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Aventis, Schering,
ISIS Pharmac.,
GeneBloc MetaGen Pharmac.,
Diseo, seleccin y Desarrollo de ARNi
ARNsi Byk Gulden,
Atugen sntesis de teraputicos en
Vectores Astrazeneca, Kinetek
www.atugen.com antisentidos y oncologa y
Reactivos de Pharma, Novo Nordisc,
reactivos a la carta enfermedades hepticas
administracin Arena Pharma.,
Phogen ltd., Serono,
Axys

Productos y servicios
Aviva Biosciences
Microarrays de dirigidos al
Corporation Axon Instruments
clulas descubrimiento de
www.avivabio.com
frmacos

Tecnologa propia Desarrollo de nuevas Artemis

Benitec Acuerdos de
de silenciamiento terapias basadas en Pharmaceuticals,
www.benitec.com.au investigacin
de ARNi (ddRNAi) ARNsi y ddARNsi Promega

Desarrollo de nuevos AstraZeneca,

Validacin basada en
Beyond Genomics tratamientos mediante GlaxoSmithKline,
protemica, genmica,
www.beyondgenomics su plataforma de Novartis, DiaDexus,
metabolmica y
.com farmacologa de Boston Univ. School of
software
sistemas Medicine

Microarrays de Proveedor de sistemas

Biacore estudio de de anlisis de
www.biacore.com interacciones entre interacciones entre
protenas protenas

Kits antisentido
Servicios de diseo Fabricante de kits de Promega, Tranzyme
Biognostik prediseado
de antisentidos anlisis de la funcin de Inc., Antisense
www.biognostik.com Antisentidos a la
(R.A.D.A.R.) protenas Pharma
carta

Merck & Co Inc.,

Vectores para Desarrollo de vacunas
Astrazeneca,
Biovex validar dianas del para prevenir y tratar
GlaxoSmithKline,
www.biovex.com sistema nervioso cncer y enfermedades
Aventis Pharma,
(NeuroVEX) infecciosas crnicas
Wyeth

Software para
Bioinformtica aplicada
identificacin y
Inpharmatica al descubrimiento de Galapagos, Novartis,
validacin
www.inpharmatica.co. nuevas dianas Serono S.A, Chiron
(PharmaCarta,
uk teraputicas y nuevos Corp., Genentech
Biopendium,
tratamientos
Chematica)

Cambridge Antibody Descubrimiento y Abbott, Lonza

Anticuerpos
Technology plc desarrollo de anticuerpos Biologics , Amgen ,
monoclonales para
www.cambridgeantibo monoclonales para Merck, Pfizer, Chugai,
validacin
dy.com terapia Wyeth-Research

Seattle Genetics Inc.,

Merck, Pfizer, Bristol-
Myers, Genzyme,
Plataforma Desarrollo de nuevos
Pharmacia, Immunex,
Celera Genomics bioinformtica on- tratamientos frente al
Oxagen, Seattle
Corporation line (Celera cncer, enfermedades
Genetics, ISIS Pharm.,
www.celera.com Discovery autoinmunes e
Somalogic, Aventis,
System) inflamatorias
Maxim Pharm., Abbott
Laboratories, Seattle
Genetics

93
 Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Becton Dickinson and

Co., Norak Biosciences
Microarrays de Inc., Wyeth-Ayerst Lab.,
clulas e Serono S.A., Discovery
Plataforma de screening
Cellomics instrumental Partners International
y anlisis de clulas a
www.cellomics.com (ArrayScan, Inc., Boehringer
gran escala
KineticScan, Ingelheim, Abgenix,
CellSelect) AstraZeneca, Aclara
BioSciences, Merck,
Carl Zeiss Jena.

Desarrollo de frmacos y
anticuerpos
Celltech Anticuerpos monoclonales frente a
www.celltechgroup. monoclonales (Fab, enfermedades del Atugen, Abgenix
com SLAM) sistema nervioso,
enfermedades inmunes
y cncer

Servicios de
Cenix Bioscience investigacin basados en
ARN para validacin a Ambion, Alnylam,
www.cenix- ARNi aplicado en clulas
gran escala (HT-RNAi) Bayer, Schering
bioscience.com humanas, de Drosophila
y C. elegans

Herramientas y servicios
Arrays de protenas de investigacin en
Ciphergen Biosystems
(ProteinChip) protemica orientada al MediGene AG
www.ciphergen.com
Software desarrollo de nuevos
frmacos

Genmica para
Sequenom,
desarrollo de nuevos
Microarrays GlaxoSmithKline,
frmacos, protenas y
Curagen Corporation (CuraChip) y Roche, Bayer, Ardais,
anticuerpos teraputicos
www.curagen.com anlisis de interaccin Abgenix, Seattle
en cncer, enfermedades
de protenas Genetics, Bayer,
inflamatorias y
TopoTarget
metablicas

Servicios de
Cytogenix Desarrollo de agentes Endovasc Ltd.,
validacin con
www.cytogenix.com teraputicos de ADN Omnimmune Corp.
tecnologa ssDNA

BioXell SpA,
Desarrollo de frmacos
CombinatoRx Inc.,
Servicios de para enfermedades
DanioLabs Modelos de pez Oxagen Ltd., KS
validacin con pez neurolgicas,
www.daniolabs.com cebra Biomedix Ltd., Sosei
cebra oftalmologa,
Co. Ltd., ProSkelia,
osteoporosis
BioXell

Pfizer, GlaxoSmithKline,
Bases de datos de Herramientas y servicios Merck, Hyseq Inc., Eli
Ratones knock-out y
Deltagen funcin de genes de validacin para el Lilly and Co., Lexicon
transgnicos a la
www.deltagen.com de mamferos descubrimiento de Genetics Inc., Vertex,
carta (DeltaOne)
(Deltabase) frmacos Schering-Plough, Roche
Bioscience, Tularik Inc.

Desarrollo de nuevos
Develogen AG. Servicios de frmacos frente a Evotec OAI,
Dianas validadas
www.develogen.com validacin de dianas enfermedades DoubleTwist Inc.
metablicas

94
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Servicios de Identificacin y
validacin con ARNi, validacin de dianas y
Degven Base de datos modelos vivos, C. compuestos qumicos Genentech, Metabolex,
www.devgen.com (Pheno Base) elegans (Function para enfermedades Sumitomo Pharm. Co.
Factory) y bases de metablicas y
datos (Pheno Base) cardiovasculares

Kits, RNAs a la
carta, grupos de
Proveedor de productos Bayer, Odyssey Thera
Dharmacon siRNA validados
relacionados con ARNi y Inc., Exelixis Inc.,
www.dharmacon.com (siGENOME,
ARNsi Upstate Group Inc.
siARRAY,
SMARTpool)

Desarrollo de
Discovery Genomics,
herramientas de terapia AngioGenetics AB,
Inc. Morfolinos en pez
gnica para Sequitur Inc., Techne
www.discoverygenomic cebra (Morphant)
enfermedades de la Corp.
s.net/morphant.phtml
sangre

N.V. Organon, Johnson

Colaboracin con
Validacin mediante & Johnson, Zen-Bio
Entelos empresas farmacuticas
bioinformtica Inc., Bristol-Myers
www.entelos.com para acelerar el desarrollo
(PhysioLab) Squibb, Aventis, Bayer
de tratamientos
AG, AstraZeneca

Microarrays
(GEArray)
SuperArray Bioscience
siRNA, LAN, PNAs a Proveedor de
Corp., Epoch
Eurogentec la carta herramientas
Biosciences Inc.,
www.eurogentec.com Anticuerpos, genmicas, protemicas
Mosaic Technologies
pptidos y biolgicas
Inc.
Microarrays de
protenas

Plataforma de
validacin GPRCs Investigacin en
Euroscreen Lneas celulares (modelos vivos, receptores acoplados a
www.euroscreen.be (AequoScreen) anticuerpos, protenas G y desarrollo
microarrays, de frmacos
AequoScreen)

Identificacin y GlaxoSmithKline plc.,

validacin de dianas Desarrollo de frmacos Bristol-Myers Squibb,
Exelixis
(ARNi, modelos de frente a cncer basados Protein Design Labs
www.exelixis.com
Drosophyla, C. elegans, en genmica Inc., Pharmacia Corp.,
raton y pez cebra) Bayer, AVI BioPharma

LNA Comercializacin de
Exiqon Microarrays de tecnologas propias
Proligo LLC
www.exiqon.com protenas mediante licencias y
(AQ-Link) colaboraciones

Diseo y sntesis de Desarrollo de nuevos AstraZeneca,

ExpressOn BioSystems
oligonucletidos oligonucletidos Auvation, Sankyo
www.expresson.co.uk
(ACCESSarray 4000) antisentido y ARNsi Pharma

Boehringer Ingelheim,
GlaxoSmithKline,
Descubrimiento de Celgene, Wyeth,
Galpagos Bases de datos Validacin mediante frmacos frente a BioFocus, Bayer, Procter
www.galapagosgenom (SilenceSelect, ARNi y cultivos osteoporosis, artritis & Gamble,
ics.com FleXSelect) celulares reumatoide, Alzheimer y Inpharmatica, Exelixis,
asma Euroscreen, Pharmacia,
Incyte Genomics, Vertex
Pharm, UCB Pharma

95
 Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Aventis, Solvay S.A.,

Wyeth, Takeda
Chemical, Daiichi
Pharm.l Co. Ltd.,
Bases de datos y Servicios de I+D Artesian, Morphochem,
Gene Logic software Validacin bajo dirigidos a empresas UCB Pharma,
www.genelogic.com (Bioexpress, contrato farmacuticas y GlaxoSmithKline,
Ascenta) biotecnolgicas PsychoGenics,
AstraZeneca, Sankyo
Co. Ltd., LG Chemical
Ltd, Japan Tobacco Inc.,
Procter&Gamble

Descubrimiento,
desarrollo, fabricacin y
Tecnologas comercializacin de
Lexicon Genetics,
Genentech antisentido nuevos frmacos para
Phenomix,
www.gene.com Anticuerpos oncologa e inmunologa
Inpharmatica, Devgen
monoclonales basados en el
conocimiento del
genoma humano

Proveedor de
Oligonucletidos Open Biosystems Inc.,
Gene Tools oligonucletidos tipo
antisentido Mermaid Pharm., AVI
www.gene-tools.com morfolino para
(Morfolinos) BioPharma Inc.
investigacin

Altana AG, Degussa

Software
Proveedor de software AG, MWG Biotech AG,
Genedata (Genedata
para el descubrimiento Schering AG, Novartis
www.genedata.com PhylosopherR,
de frmacos AG, Affymetrix,
ExpressionistRPro)
Schering, Bayer

Desarrollo de
anticuerpos humanos
Anticuerpos
Genmab para tratamiento de Roche, Amgen,
monoclonales
www.genmab.com enfermedades Medarex Inc.
(HuMax)
autoinmunes, infecciosas
y cncer

Desarrollo de
Genomics Muestras de suero, Bases de datos y herramientas para
Collaborative ADN y tejidos (GCI software (GCI validar dianas y
www.genomicsinc.com Tissue Access) Access) comercializacin de
dianas validadas

Produccin de anticuerpos
Anticuerpos
Genovac Purificacin, marcaje monoclonales y Adquirido por Aldevron
prediseados y a la
www.genovac.com de anticuerpos policlonales por LLC
carta
inmunizacin gentica

Ratones y ratas
transgnicas (Safe
Desarrollo de modelos Sanofi-synthelabo,
DNA Transgenesis,
Genoway genticamente SynX Pharma Inc.,
Quick Knock-in,
www.genoway.com modificados de ratn y Laboratoires Servier,
RNAi Transgenesis)
rata Altana Pharma
ARNi in vivo (SAFE in
vivo RNAi)

Identificacin y Desarrollo y
Genta validacin comercializacin de
Oasis Biosciences
www.genta.com (Antisentidos, ARNi, nuevos tratamientos
OptiSense) para cncer

96
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Diagnstico de
enfermedades y
Validacin de dianas y desarrollo de nuevos Mirus, Imgenex,
Genzyme
SAGE desarrollo de tratamientos para Celera, Myriad
www.genzyme.com
frmacos enfermedades genticas, Genetics
cardiovasculares,
inmunes y cncer

Medtronic Inc.,
MethylGene,
Isis Pharm. Inc.,
I+D y comercializacin
Tecnologas Aegera Therapeutics
de nuevas terapias
Hybridon antisentido Inc., The Immune
antisentido para cncer,
www.hybridon.com (oligonucletidos Response Corporation,
asma/alergias e
sintticos) Alnylam Pharm. Inc.
infecciones
Migenix Inc.,
Epignesis, Integrated
DNA Technologies Inc.

Servier Research
Group, Mindsense
Estudio de Descubrimiento de
Biosystems Ltd., Oxford
interacciones de frmacos mediante el
GlycoSciences plc.,
Hybrigenics protenas (doble estudio de interacciones
Lynx Therapeutics Inc.,
www.hybrigenics.com hbrido, PIM, proteicas, validacin
Genome Express, Small
LIMS) funcional de dianas y
Molecule Therapeutics
Modelos animales screening de compuestos
Inc., Apoxis, Incyte ,
Merck, XTL Biopharm.

Desarrollo de anticuerpos
Iclectus
Intracuerpos que funcionan en el
www.iclectus.com
interior de clulas

Anticuerpos Desarrollo y
ARNi comercializacin de Genzyme Molecular
Imgenex Vectores reactivos para estudio Oncology,
www.imgenex.com (GeneSuppressor) de enfermedades, kits SuperBioChip
Arrays de tejidos de diagnstico y nuevos Laboratories
(Histo-Array) tratamientos

Desarrollo de
Plataforma de tratamientos frente a Affimetrix, Novartis,
Immusol
validacin in vivo con enfermedades Medarex, Chugai,
www.immusol.com
ARNsi y microarrays infecciosas, metablicas Pfizer
y cncer

Base de datos de Desarrollo de nuevos Galapagos, Ingenium,

Plataforma de
Incyte Corporation secuencias frmacos para cncer, VIH, Medarex, Lexicon
validacin con
www.incyte.com expresadas enfermedades metablicas Genetics Inc., Bayer,
animales modelo
(LifeSeq) y autoinmunes Pfizer, Pharmasset Ltd.

Elan, Roche, Bayer AG,

Incyte Corp., Merck,
Gruenenthal GmbH,
Ingenium Identificacin y Desarrollo de
Wyeth, Molecular
pharmaceuticals validacin de dianas tecnologas de validacin
Engines Laboratories
www.ingenium- en ratones (Deductive de dianas in vivo y de
SA, Oxagen Ltd.,
ag.com/ Genomics) desarrollo de frmacos
Sequenom Inc., Incyte
Genomics Inc., Lynkeus
BioTech GmbH

Tecnologas
Integrated DNA Proveedor de Promega Corp., Isis
antisentido a la
Technologies oligonucletidos a la Pharm. Inc.,
carta: LNA, ARNi,
www.idtdna.com carta Sequenom Inc.
ddARNi, miARN

97
 Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Desarrollo de tecnologa
ARNsi in vitro e in Qiagen, Sequitur,
Intradigm Corporation Validacin de dianas de ARNi in vivo para
vivo DirectGene,
www.intradigm.com por contrato terapia de cncer y otras
Vectores Europroteome
enfermedades.

ARNi (Stealth Proveedor de tecnologas

RNAi, BLOCK-iTTM Anticuerpos y para investigacin
Invitrogen (Sequitur) Procter&Gamble,
ARNsi pptidos a la carta bsica, desarrollo de
www.invitrogen.com Zyomix
Modelos celulares Doble hbrido frmacos y
(CellSensor) bioproduccin

ARNsi
Vectores
Proveedor de
Invivogen (psiRNA)
herramientas para
www.invivogen.com Software de
investigacin
seleccin de ARNsi
(siRNA Wizard)

Alnylam, Amgen,
Chiron, Abott, Pfizzer,
GlaxoSmithKline, Merck,
ISIS Pharmaceuticals Desarrollo de frmacos Aventis, Astrazeneca,
Tecnologas
www.isispharm.com/f que actan sobre ARNm, Atugen, Sequitur,
antisentido
unc_genomics.html terapias antisentido Amgen, Chiron Corp.,
Pharmacia,
Johnson&Johnson,
Celera

Microarrays de
Jerini array Desarrollo de nuevos
pptidos (PepStar, Pptidos a la carta y
technology frmacos peptdicos y
PepSpots, libreras de pptidos
www.jerini.com qumicos
RepliTope)

Descubrimiento y
desarrollo de nuevos
Kalypsis Qumica gentica, Merck, CV
frmacos frente a cncer,
www.kalypsys.com bioinformtica Therapeutics Inc.
enfermedades metablicas
e inflamatorias

Servicios a la carta Investigacin y

KeyNeurotek Animales modelo, desarrollo de frmacos
Evotec OAI
www.keyneurotek.de ensayos in vivo e in para enfermedades del
vitro (TELOMICS) sistema nervioso central

Bristol-Myers Squibb.,
Genentech Inc.,
Desarrollo de frmacos
Ratones knock-out y Takeda Pharmaceutical
frente a enfermedades
transgnicos Company Limited,
Lexicon genetics humanas mediante
(Genome5000, Gene Abgenix Inc., Pfizer,
www.lexgen.com bsqueda de nuevas
Targeting, Gene Johnson & Johnson,
dianas a escala
Trapping) Aventis, Roche, Merck,
genmica
Eli Lilly, Bayer,
Immunex

Desarrollo de anticuerpos Incyte, Sangamo,

humanos para terapia de Athersys, Pfizer,
Medarex Anticuerpos (Trans-
enfermedades Ability, Biosite, Eli Lilly,
www.medarex.com PhageSM, UltiMAb)
auntoinmunes, infecciosas Oxford GlycoSciences,
y cncer Eos

Microarrays de ADNc
Perfilado de la expresin
Memorec (PIQOR)
mediante microarrays de
www.memorec.com Ratones transgnicos
ADNc
Bioinformtica

98
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Plataforma de Descubrimiento de
descubrimiento de nuevos tratamientos a
Millenium
dianas y frmacos partir del conocimiento
Pharmaceuticals Roche
basada en genmica, de los distintos procesos
www.mlnm.com
protemica y implicados en la
bioinformtica enfermedad

Tecnologas, Descubrimiento y
herramientas y comercializacin de
Mirus Servicios de Genzyme Corp.,
reactivos antisentido tecnologas y productos
www.mirusbio.com laboratorio a la carta Transgene
in vitro e in vivo innovadores basados en
(TransIT) cidos nucleicos

MWG Biotech Libreras de ARNsi Sntesis y purificacin de

www.mwg- y ARNsi a la carta oligonucletidos y ARNsi GeneData
biotech.com (siMAX) a la carta

Genmica, protemica Desarrollo de frmacos

Abbott, Bayer, Lilly,
Myriad Genetics y bioinformtica para frente a cncer y
Searle, Genzyme,
www.myriad.com identificacin y enfermedad de
Applied Biosystems
validacin de dianas. Alzheimer

Kit de sntesis de
ARNi Proveedor de productos
New England Biolabs RheoGene Inc., Dyax
ARNsi y reactivos de alta pureza para
www.neb.com Corp.
(TransPass, investigacin
ShortCut)

Desarrollo y
Tecnologas de
Nucleonics comercializacin de Apath LLC, Novosom
interferencia y
www.nucleonicsinc.com terapias basadas en AG, Wyeth
vectores (eiRNA)
tecnologas de ARNi

ARNsi a la carta y Proveedor de

OligoEngine
vectores (pSUPER oligonucletidos a la
www.oligoengine.com
RNAi System) carta

Plataforma basada en Desarrollo de

datos clnicos, estudios compuestos
Oxagen Celera, Daniolabs,
de funcin biolgica y biofarmacuticos para
www.oxagen.co.uk Ingenium Pharm.
bioinformtica dianas validadas en su
(CartaGena) plataforma gentica

Desarrollo de terapias
Vectores para
frente a cncer y AstraZeneca, Wyeth,
Oxford BioMedica administrar
enfermedades Merck, Biogen Idec,
www.oxfordbiomedica. tecnologas
neurolgicas basadas en Amersham, Molmed,
co.uk antisentido y genes
el conocimiento de la Arius Research, Kiadis
(LentiVector)
funcin de genes

OzGen Ratones transgnicos Desarrollo de ratones

www.ozgene.com y knock-out modificados genticamente

Allergan , Bayer, Bristol-

Myers Squibb, Cubist ,
Software y base de Johnson & Johnson ,
datos de perfiles de Schering-Plough,
expresin de tejidos Proveer herramientas Amersham,
Pharmagene
(TargetEvaluator) que permitan acelerar el AstraZeneca, Bayer UK,
www.pharmagene.com
Screening, qumica desarrollo de frmacos Boehringer Ingelheim,
gentica (Phase GlaxoSmithKline,
ZERO) Janssen , Merck, Oxford
Biomedica, Pfizer,
Roche, Vernalis

99
 Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Phenomix Desarrollo de frmacos

Mutagnesis de Genentech, Inc.,
www.phenomixcorp. para enfermedades
ratones al azar Plexxikon Inc.
com inmunes y metablicas

Pez cebra, morfolinos, Investigacin bajo

Phylonix
anlisis de la contrato con pez cebra
Pharmaceuticals Inc
expresin gnica, para desarrollo y
www.phylonix.com
hibridacin in situ screening de frmacos

Oligonucletidos de Proveedor de soluciones

Proligo
ADN o ARN (LNA), basadas en cidos Inex Pharm. Corp.
www.proligo.com
y ARNsi nucleicos innovadores

Microarrays
ARNi
Integrated DNA
(CodeBreaker Proveedor de reactivos
Technologies Inc.,
Promega RiboMAX) biolgicos para
Benitec, EraGen
www.promega.com Vectores investigacin y
Biosciences Inc.,
(psiCHECK, aplicaciones tecnolgicas
Serologicals Corp.
siLentGene,
siSTRIKE)

Desarrollo de
ProQinase Modelos in vitro e tratamientos para cncer
www.proqinase.com in vivo que actan sobre
proteinquinasas

Estudio de expresin Tecnologas protemicas Eli Lilly Canada Inc.,

Protana inc. e interacciones entre punteras aplicables a Cephalon Inc.,
www.protana.com protenas (PathMap, todo el proceso de I+D Abgenix Inc., Agilent
PhosMap) farmacutica Technologies

Compaa biotecnolgica
Proteome Factory Validacin de dianas
especializada en
www.proteomefactory en cultivos celulares y
protemica y validacin
.com modelos de ratn
de dianas

Desarrollo y
comercializacin de
Qiagen siRNA validados y a herramientas para Ambion, Affymetrix
www.qiagen.com la carta, reactivos investigacin biolgica, Inc.
desarrollo de frmacos y
diagnstico molecular

Desarrollo y
ARNi, ratones comercializacin de
Regeneron
transgnicos y knock- medicamentos para Sanofi-Aventis
www.regeneron.com
out (Velocigene) tratamiento de obesidad,
artritis reumatoide

Desarrollo de frmacos
Estudio de rutas
para tratamiento de Novartis, Pfizer,
Rigel Inc. implicadas en la
asma/alergia, hepatitis Johnsons&Johnsons,
www.rigel.com progresin de la
C, artritis reumatoide y Daiichi
enfermedad
cncer

RNA-TEC Proveedor de ARN para

RNAi, ribozimas y
http://www.rna- uso in vitro e in vivo,
aptmeros
tec.com ribozimas y aptmeros

Experimentos con Tecnologas de validacin Proligo, Quiagen,

RNAx
ARNsi sobre lneas de alto rendimiento Charit, metaGen
www.rnax.de
celulares basadas en ARNi Pharm.

100
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Desarrollo de
Microarrays y tecnologas de
Rosetta Inpharmatics
software de anlisis investigacin genmica y Filial de Merck
www.rii.com
(Rosetta Resolver) anlisis de datos para
seleccin de dianas

Tecnologas Desarrollo y
Santaris antisentido comercializacin de
www.santaris.com (oligonucletidos, nuevos frmacos para el
LNA, ARNsi) tratamiento de cncer

Proveedor de productos
de anlisis gentico para CuraGen Corp.,
Sequenom Microarrays Validacin de dianas
investigacin biomdica, Morphochem AG,
www.sequenom.com (MassARRAY) en cultivos celulares
medicina molecular y Autogen Ltd.
agricultura

Sigma-Genosys Oligonucletidos Proveedor de

www.sigma- antisentido herramientas y reactivos Compugen Ltd.
genosys.com Pptidos de biologa molecular

Desarrollo de terapias
Sirna Therapeutics Eli Lilly, Archemix,
ARNsi basadas en la tecnologa
www.rpi.com Abott
del ARNi

Tecnologas
Tecnologas basadas en
Somagenics antisentido (oligos,
ARN para diagnstico y
www.somagenics.com ARNsi, ribozimas,
desarrollo de frmacos
RNA Lassos)

Chips de Desarrollo de sistemas

Somalogic aptmeros para de diagnstico a partir
Celera
www.somalogic.com deteccin de del perfil de expresin
protenas de protenas

Productos, herramientas
y servicios de clonaje,
Spring Bioscience Kits de ARNsi,
screening de dianas y
www.springbio.com anticuerpos
anlisis de la expresin
de protenas

Desarrollo y
comercializacin de
productos y tecnologas
Stratagen ARNsi y reactivos
de biologa molecular, Affymetrix Inc.
www.stratagene.com de transfeccin
genmica, protemica
frmacologa y
toxicologa

Desarrollo y
Identificacin y
comercializacin de Invitrogen, EMD
Tecan caracterizacin de
soluciones para I+D Biosciences, Inc.,
www.tecan.com protenas y estudio
farmacutica, genmica, Pierce
de su expresin
protemica y diagnstico

Servicios para
investigadores en
terapia gnica,
Trilink Oligonucletidos
quimioterapia con
www.trilinkbiotech.com modificados
nuclesidos,
oligonucletidos y
diagnstico

101
 Empresa Productos Servicios Actividad Colaboraciones

Desarrollar productos de
anlisis de la
ARNsi (siRNA Estudio de
sealizacin celular,
Upstate siAb, siRNA interacciones Phylos Inc.,
plataformas
www.upstate.com SMARTpools, proteicas Dharmacon
tecnolgicas, servicios
pKD) (PathwayProfiler)
de investigacin bsica y
desarrollo farmacutico

Servicios de desarrollo
Genmica qumica de frmacos y de
VASTox limited
con pez cebra y toxicologa para la
www.vastox.com
Drosophila industria farmacutica y
biotecnolgica

Tecnologas de
Modelos celulares Servicios basados en
trangnesis e imagen
xenogen (Bioware) y ratones y ratas Morphochem AG,
dirigidas a la I+D
www.xenogen.com animales (LPTA transgnicas y Pfizer
farmacutica,
Animal Models) knock-out
biotecnolgica y qumica

Compaa biotecnolgica
especializada en Stemline Therapeutics
Xerion
protemica funcional y Inc., ARIUS Research
Pharmaceuticals Tecnologas
validacin de dianas que Inc., ALTANA AG,
www.xerion- protemicas y CALI
proporciona dianas PROCORDE GmbH,
pharma.com
validadas y anticuerpos Xerion Pharm., Aventis
teraputicos

Genentech Inc.,
I+D preclnica y clnica
Millennium Pharm.
de anticuerpos y
Inc., Alexion Pharm.
Xoma Anticuerpos protenas recombinantes
Inc., Chiron Corp.,
www.xoma.com monoclonales para tratamiento de
Aphton Corp., Triton
cncer, enfermedades
BioSystems, Zephyr
inmunes e infecciosas
Sciences Inc.

Modelos de pez
Desarrollo de frmacos
cebra, librera de
Znomics con pez cebra como
mutantes de pez
www.znomics.com modelo de enfermedad y
cebra
sistema de screening
(ZeneMarkTM)

Desarrollo de modelos
de pez cebra para
Becton Dickinson and
Peces cebra preclnica de frmacos
Zygogen Co., Aventis, NuTec
transgnicos (Z-Tag, frente a enfermedades
www.zygogen.com Sciences Inc., Ariad
Z-Lipotrack) cardiovasculares,
Pharm., Curis Inc.
neurodegenerativas y
cncer

Desarrollo y
Zyomix Microarrays de comercializacin de Invitrogen
www.zyomyx.com protenas plataformas de anlisis
de protenas

Fig. 30. Empresas internacionales en validacin de dianas.

Fuente: elaboracin propia.

102
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Anexo III: Empresas espaolas en validacin de dianas163

Advanced In Vitro Cell Technologies, S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Contribuir a la obtencin de nuevos medicamentos a partir de nuevas

Misin tecnologas adquiridas en universidades espaolas y/o desarrolladas por
Advancell (modelos celulares in vitro).

Servicios relacionados Servicios de validacin de dianas a la carta mediante modelos celulares ad hoc
con identificacin y para el estudio de dianas concretas y screening de potenciales frmacos frente
validacin de dianas a las mismas.

Modelos in vitro para estudios ADMET, administracin de frmacos, Cncer,

I+D
dermatologa, inflamacin, cosmtica, biocompatibilidad, toxicidad, etc.

Acuerdos y Pharma Mar, Smith&Nephew, Merck, Cytochroma, Grifols, ICN, Lipotec S.A.,
colaboraciones DiverDrugs SL, NorayBio, Cognis, Myrurgia, Progenika, Crystax, Oryzon,
cientficas Crystax y Laboratorios Esteve.

Direccin: Parc Cientfic de Barcelona. Baldiri Reixac, 10-12. 08028 Barcelona.

Contacto
Web: http://www.advancell.net

Bioalma, S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Misin Bioinformtica.

Servicios relacionados
Consultora, formacin y desarrollo de software aplicado a los microarrays de
con identificacin y
ADN.
validacin de dianas

Bioinfomtica aplicada a microarrays de ADN.

I+D
Sistemas de extraccin de informacin.

Acuerdos y
colaboraciones CNIO, Genetrix.
cientficas

Direccin: Centro Empresarial Euronova. Ronda de Poniente, 4 - 2 planta,

Contacto Unidad C-D. 28760 Tres Cantos, Madrid.
Web: http://www.almabioinfo.com

163
Advancell (www.advancell.net)
Bioalma (www.almabioinfo.com)
Dominion Pharmakine (www.pharmakine.com)
Instituto de Farmacia Industrial (www.usc.es/farmind/doc/servicios.htm)
Oryzon Genomics (www.oryzon.com)
Progenika (www.progenika.com)
Proteomika (www.proteomika.com)
Unidad Mixta Almirall Prodesfarma-PCB (www.almirall.eswww.pcb.ub.es)

103
 Biomedal S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Desarrollo de tecnologas innovadoras para el progreso de la investigacin post-

Misin genmica y la produccin industrial eficiente de nuevas biomleculas tiles para
la sociedad.

Servicios relacionados Lectura y procesamiento de ADN arrays.

con identificacin y Asesoramiento y gestin de proyectos de I+D en biomedicina (estudios de
validacin de dianas expresin semi-cuantitativa empleando tecnologas de DNA arrays).

Desarrollo de vectores para genmica funcional en un amplio rango de

organismos.
I+D Desarrollo de herramientas para mejorar la eficiencia en la expresin y
purificacin de protenas.
Desarrollo de herramientas para diagnstico molecular.

Acuerdos y Universidad de Sevilla, Universit Clermont-Ferrand, Universidad Miguel

colaboraciones Hernndez, Universidad Pablo de Olavide, Centro de Investigaciones Biolgicas
cientficas (CSIC), Instituto de Biomedicina Lpez Neyra (CSIC).

Direccin: Avenida Amrico Vespucio, 5, Bloque E - Planta 1 Mdulo 12.

Contacto Isla de la Cartuja, 41092 Sevilla.
Web: http://www.biomedal.es

Crystax Pharmaceuticals S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Empresa biotecnolgica que se dedica al desarrollo de molculas de inters

Misin
teraputico a partir de la determinacin estructural de dianas farmacolgicas.

Servicios relacionados
con identificacin y Determinacin de la estructura de dianas proteicas y complejos diana-ligando.
validacin de dianas

I+D High-Throughput NMR, Fragment Screening.

Acuerdos y
colaboraciones Advancell, Oryzon Genomics, Uriach Laboratories.
cientficas

Direccin: Parque Cientfico de Barcelona. Josep Samitier, 1-5.

Contacto 08028 Barcelona.
Web: http://www.crystax.com

104
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Dominion Pharmakine S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Compaa biofarmacutica enfocada al desarrollo de productos y servicios que

Misin
permitan avanzar en la investigacin, el diagnstico y tratamiento del cncer.

Arrays de tejidos:
Human Hepatic Colon-Carcinoma Metastasis Tissue Array.
Organ-Specific Metastasis Melanoma Tissue Array.
Productos Multi-Organ Animal Tissue-Arrays.
relacionados con Array de tejidos personalizado.
identificacin y
validacin de dianas. Arrays de clulas:
Array de clulas especfico de hgado (humano, rata, ratn).
Array de lnea celular de melanoma humano.
Array de clulas personalizado.

Genmica funcional:
Anlisis de la expresin gnica.
Diseo de microarrays de ADN personalizados.
Frmaco-genmica.
Servicios relacionados Anlisis de sistemas de expresin modificados.
con identificacin y Protemica funcional:
validacin de dianas Anlisis de la expresin proteica.
Identificacin de protenas.
Protemica comparativa.
Frmaco-protemica.
Fenmica funcional.

I+D

Direccin: Parque Tecnolgico de Bizkaia, Edificio 801, 1 planta.

Contacto
Web: http://www.pharmakine.com

Ebiointel, S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Desarrollo de plataformas bioinformticas para el anlisis de secuencias, de la

Misin diversidad gentica y de datos gnomicos en general, con el objetivo de
simplificar y acelerar la investigacin biomdica.

EbioSNP: plataforma para la representacin y anlisis de la diversidad gentica.

Servicios relacionados
Servicio de anlisis experto en los siguientes campos: asociacin de factores
con identificacin y
genticos y rasgos fenotpicos, bsqueda de dianas farmacolgicas, anlisis
validacin de dianas
epidemiolgicos y filogenticos.

I+D Diseo de plataformas bioinformticas.

Acuerdos y
colaboraciones Noray Bioinformatics.
cientficas

Direccin: Edifici M - Campus de la UAB, Vivero de Empresas de Biotecnologa y

Contacto Biomedicina (VE3B). 08193 Bellaterra, Barcelona.
Web: http://www.ebiointel.com

105
 Genetrix S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Desarrollo de plataformas biotecnolgicas en las reas de medicina molecular y

regenerativa, abordando programas de investigacin orientados a patologas
inflamatorias, infecciosas y neurodegenerativas, entre ellas:
Misin Cellerix, centrada en el desarrollo de nuevas terapias en el campo de la
ingeniera, reparacin y regeneracin de tejidos utilizando clulas madre.
Biotherapix, enfocada al desarrollo de una plataforma de productos
teraputicos dirigidos a enfermedades inflamatorias.

Productos
Biotherapix:
relacionados con
Generacin de nuevas molculas teraputicas basadas en anticuerpos para el
identificacin y
tratamiento de enfermedades infecciosas, degenerativas e inflamatorias.
validacin de dianas

Cellerix:
Plataforma propia que combina libreras de anticuerpos producidas dentro de
I+D en identificacin
la empresa con tecnologa de clulas madre.
y validacin de dianas
Determinar nuevos factores y molculas capaces de iniciar y/o mejorar
programas especficos de diferenciacin de clulas madre adultas.

Consejo Superior de Investigaciones Cientficas (CSIC), Centro Nacional de

Biotecnologa (CNB), Centro Nacional de Microelectrnica (CNM), Centro de
Biologa Molecular Severo Ochoa (CBM-SO), Centro de Astrobiologa (CAB),
Centro de Investigaciones Biolgicas (CIB), Instituto de Ciencia y Tecnologa de
Polmeros (ICTP), Instituto de Parasitologa y Biomedicina Lpez Neyra, Centro
de Investigaciones Energticas y Medio ambientales (CIEMAT), Centro de
Investigacin en Medicina Regenerativa, Instituto de Cermica de Galicia (ICG),
Acuerdos y
Universidad Autnoma de Madrid (UAM), Universidad Complutense de Madrid
colaboraciones
(UCM), Universidad Francisco de Vitoria, Gene Expression Laboratory, Salk
cientficas
Institute, Centre Nationale de la Recherche Scientifique (CNRS), Hospital
Donostia, Hospital Universitario La Paz, Hospital General Universitario Gregorio
Maran, Hospital Universitario 12 de Octubre, Hospital Vall dHebrn,
Sanatorio Virgen del Mar, Clnica Universitaria de Navarra, Fundacin Hospital
Alcorcn, Evrogen, Logitest, Laboratorios INDAS, Keramat, Bionostra, Sensia,
Biobide, Alma Bioinformtica, Fundacin Inbiomed, Asociacin de Epidermolisis
Bullosa de Espaa (AEBE), INASMET.

Direccin: Calle Marconi 1, Parque Tecnolgico de Madrid.

Contacto 28760 Tres Cantos, Madrid.
Web: http://www.genetrix.es

106
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Integromics, S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Proporcionar soluciones tecnolgicas que faciliten la adquisicin, manejo,

Misin
procesamiento y anlisis de grandes volmenes de datos en la era post-genmica.

Servicios relacionados
ArrayHub (gestin de datos de anlisis de la expresin gnica).
con identificacin y
Formacin en bioinformtica.
validacin de dianas

I+D

Acuerdos y
colaboraciones Applied Biosystems, Spotfire.
cientficas

Direccin: Parque Cientfico de Madrid, Ciudad Universitaria Cantoblanco,

Contacto Einstein, 13, Pabelln C, 1 planta. 28049 Madrid
Web: http://www.integromics.com

Neocodex S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Empresa dedicada a la investigacin y desarrollo en biomedicina y al

Misin
diagnstico molecular de enfermedades humanas.

Servicios relacionados
con identificacin y Expresin gnica mediante microarrays de ADN.
validacin de dianas

I+D Trazado de marcadores de susceptibilidad gentica en la poblacin espaola.

Centro Nacional de Investigaciones Oncolgicas de Madrid (CNIO), Centro de

Acuerdos y Investigaciones Biolgicas de Madrid (CIB/CSIC), Hospital Clnico San Carlos,
colaboraciones Hospital Doce de Octubre (Madrid), Hospital Virgen del Roco y Valme (Sevilla)
cientficas Genetix (UK), Universidad de Utrech (Holanda), Universidad Tor Vergata
(Roma).

Direccin: Avda. Averroes, 8, Ed. Acrpolis, Mod. 110-111, Sevilla

Contacto
Web: http://www.neocodex.es

107
 Neuropharma S.A.

rea de aplicacin Salud humana.

Compaa bio-farmacutica participada por el grupo Zeltia, centrada en la

Misin investigacin y desarrollo de frmacos novedosos para el tratamiento y
prevencin de enfermedades del Sistema Nervioso.

Identificacin y validacin de dianas teraputicas especficas con el objeto de

desarrollar una nueva generacin de frmacos que proporcionen tratamientos
I+D
ms selectivos y efectivos para enfermedades neurodegenerativas tales como la
enfermedad de Alzheimer.

Universidad Autnoma de Madrid (Medicina), Universidad de Alcal de Henares

de Madrid (Farmacia), Universidad Central de Barcelona (Farmacia), Universidad
Miguel Hernndez (Instituto de Neurociencias), Universite de Rennes (Francia),
Universidad de Vigo (Facultad de Qumicas), Centro de Biologa Molecular
Acuerdos y Severo Ochoa (CSIC-UAM), Instituto de Investigaciones Biomdicas Alberto
colaboraciones Sols (CSIC-UAM), Instituto de Qumica Fsica Rocasolano (CSIC), Instituto
cientficas Ramn y Cajal (CSIC), Advancell, CEREP, Charles River Laboratories, CIDA
(Centro de Investigacin y Desarrollo Aplicado S.A.L.), CIT (Centre
Internacional de Toxicologie), Covance Laboratorios Ltd, Gaiker (Zamudio,
Bizkaia), Gen Pharm Tox, Instituto Biomar S.A., JSW Research, KYMOS Pharma
Services S.L., LONZA, reMYND, RTC (Research Toxicology Centre).

Direccin: Avda. de la Industria, 52, Parque Tecnolgico de Madrid.

Contacto 28760 Tres Cantos, Madrid
Web: http://www.neuropharma.es

Noray Bioinformatics, S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Diseo, desarrollo e implantacin de software a medida, con el objeto de servir

Misin
como soporte en tecnologas de la informacin al sector de la biotecnologa.

Genmica funcional: software para el anlisis correlacional de datos clnico-

Servicios relacionados
patolgicos con datos genmicos en estudios de cncer (BITIATM).
con identificacin y
Servicios: consultora bioinformtica, herramientas de gestin y explotacin de
validacin de dianas
resultados de laboratorio, proyectos de outsourcing en bioinformtica.

I+D Bioinformtica

Acuerdos y
Azeretia, H.U. La Paz, Dominion Pharmakine, Advancell, Owl Genomics, Aethia,
colaboraciones
Universidad de Barcelona, Biolex, Judo, PharmaDatum, eBiointel.
cientficas

Direccin: Parque Tecnolgico,801 A. 48160 Derio, Bizkaia

Contacto
Web: http://www.noraybio.com

108
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Owl Genomics, S.L.

rea de aplicacin Salud humana.

Identificacin de marcadores moleculares y agentes teraputicos para el

Misin
diagnstico temprano y tratamiento de enfermedades hepticas.

Productos
relacionados con Hepatochip: chip de ADN que permite conocer la presencia de esteatohepatitis
identificacin y no alcohlica (NASH) a partir de la coexpresin de 85 genes.
validacin de dianas

Diagnstico temprano de esteatosis heptica (EH) y esteatohepatitis no

I+D
alcohlica (NASH).

Universidad de Navarrra, Centro de Estudios e Investigaciones Tcnicas de

Acuerdos y
Guipzcoa, Hospital Clnico de Barcelona, Hospital Gregorio Maran, Hospital
colaboraciones
Universitario Prncipe de Asturias, Hospital Italiano de Buenos Aires, Noray
cientficas
Bioinformatics, Progenika, Protemica.

Direccin: Parque Tecnolgico de Bizkaia, Edificio 801, planta 2. 48160 Derio.

Contacto
Web: http://www.owlgenomics.com

Progenika Biopharma, S.A.

rea de aplicacin Salud humana.

Identificacin y validacin de genes y protenas implicadas en procesos

Misin patolgicos, y su empleo en el desarrollo de nuevos frmacos y mtodos de
diagnstico.

Affymetrix genechip probe arrays

Microarrays de Genotipado:
Human Familiar Hypercholesterolemia DNA Array (Lipochip, comercializado).
Human Blood genotyping DNA Array (Bloodchip).
Productos Inflammatory Bowel Disease DNA Array (IBDchip).
relacionados con Arrays de anlisis de la expresin gnica:
identificacin y Human Blood Neoplasias Classification Array (hematochip).
validacin de dianas Rat Genome 5K Microarray.
Pseudomonas putida Genome Array.
Pseudomonas aeruginosa Genome Array.
Medplant Small Cell Lung Cancer Chemotherapy Resistance microarray (en
fase de validacin clnica).

Identificacin y validacin de genes y protenas relacionadas con enfermedades

I+D
psiquitricas, neurolgicas y cncer.

Acuerdos y
colaboraciones Owl Genomics.
cientficas

Direccin: Parque Tecnolgico de Zamudio, Edificio 801 -A-

Contacto 48160 Derio, Bizkaia
Web: http://www.progenika.com

109
 Protemica S.A.

rea de aplicacin Salud humana.

Empresa subsidiaria de Progenika S.A. dedicada a la investigacin y desarrollo

Misin
en el campo de la Protemica.

Identificacin y validacin de marcadores de diagnstico y pronstico, as como

I+D
dianas teraputicas en cncer y enfermedades psiquitricas.

Acuerdos y
Pepscan Systems BV, Algonomics NV, Proteomika, CNIO, University Louis
colaboraciones
Pasteur, UMC Utrecht.
cientficas

Direccin: Parque Tecnolgico de Zamudio, Edificio 801 -A-. 48160 Derio, Bizkaia.
Contacto
Web: http://www.proteomika.com

Sistemas Genmicos S.L.

rea de aplicacin Salud humana y agroalimentacin.

En el rea de la Biomedicina, el reto de la empresa consiste en integrar

Ciencia y Tecnologa para crear y proveer a la sociedad de mtodos de
diagnstico que mejoren la salud y la calidad de vida. En el rea de la
Misin
Agroalimentacin, su reto es satisfacer aquellas necesidades analticas de las
empresas del sector que nicamente pueden cubrirse mediante el anlisis de
ADN de los alimentos.

Servicios relacionados
con identificacin y Aplicaciones en el desarrollo de chips de ADN.
validacin de dianas

Secuenciacin de genomas.
Desarrollo de nuevas herramientas de bioinformtica para el anlisis de
secuencias a gran escala.
Optimizacin de la PCR (Polymerase Chain Reaction) a tiempo real aplicada al
diagnstico molecular.
I+D Generacin de una amplia base de datos de marcadores genticos que
contiene especies de inters agronmico.
Tecnologa de AFLPs.
Tecnologa de Microsatlites.
Aplicaciones basadas en el desarrollo de Chips de ADN, tanto en el rea del
diagnstico molecular, como en el anlisis de alimentos.

Direccin: Parque Tecnolgico de Valencia. Avda. Benjamn Franklin, 12.

Contacto 46980 Paterna, Valencia.
Web: http://www.sistemasgenomicos.com

Tabla. 31. Empresas espaolas en validacin de dianas.

Fuente: elaboracin propia.

110
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Anexo IV: Principales dianas teraputicas

Principales dianas teraputicas

Estado del Tcnica

Diana Frmaco Empresa Indicacin
ensayo clnico de validacin

Clulas knock-out
Receptor de ADP Clopidogrel
Sanofi Trombosis Comercializado Ratones knock-
P2Y12 (Plavix)
out

Antiemtico
TAK-637 (prevencin de
Abbott y Takeda
Receptor NK1 Aprepitant nusea y vmito), Comercializado Ratn knock-out
Merck & Company
(Emend) depresin,
ansiedad

Vasopeptidasa: Vanlev y Bristol- Enfermedad

enzima de Omapatrilat Comercializado
Myers Squibb cardiovascular
conversin de
angiotensina Ratn knock-out
(ECA)
Enfermedad
+ endopeptidasa Fasidotril Lilly Comercializado
cardiovascular
neutra (EPN)

Omalizumab Genentech Rinitis alrgica,

Comercializado
(Xolair) y Novartis asma
IgE Ratn knock-out
Tanox, Genentech Alergia al
TNX-901 Fase II
y Novartis cacahuete

Erlotinib Genentech y OSI

Cncer de pulmn Comercializado
(Tarceva) Pharmaceuticals
Knock-outs

Cetuximab
Merck & Company Cncer colorrectal Comercializado
(Erbitux)

Receptor EGF Ratn knock-out

GS-572016 GlaxoSmithKline Cncer de pecho Fase III

Gefitinib
AstraZeneca Tumores slidos Fase III
(Iressa)

CI-1033 Pfizer Cncer de pecho Fase II

bevacizumab
Genentech Cncer colorrectal Comercializado
(Avastin)

Degeneracin
Ranibizumab
Genentech macular asociada Fase III
(Lucentis)
a la edad

Receptor VEGF Degeneracin Ratn knock-out

Pegaptanib
Eyetech/Pfizer macular asociada Fase III
(Macugen)
a la edad

Vatalanib Novartis Cncer Fase II

ZD-6474 AstraZeneca Cncer de pulmn Fase II

Cicloxigenasa
(COX) y
Licofelone Merckle Osteoartritis Fase III Ratn knock-out
Lipoxigenasa
(LOX)

111
 Principales dianas teraputicas (continuacin)

Estado del Tcnica

Diana Frmaco Empresa Indicacin
ensayo clnico de validacin

Enfermedades
cardiovasculares
(Obesidad,
Rimonabant
Receptor CB1 Sanofi-Aventis Tabaquismo), Fase III Ratn knock-out
(Acomplia)
psicosis,
esquizofrenia,
shock sptico

Enfermedades
autoinmunes
(esclerosis Ratn knock-out
Receptor de la Natalizumab Biogen Idec y
mltiple, Fase III Anticuerpos
integrina alfa-4 (Tysabri) Elan Corporation
enfermedad de monoclonales.
Crohn, artritis
reumatoide)

Receptor Glp-1 Exenatide, GLP-1 Lilly Obesidad, diabetes Fase III Ratn knockout

Parke-Davis & Co Hiperlipidemia

ACAT-2 Avasimibe Fase III Ratn knock-out
Pfizer Arteriosclerosis

Enfermedad
Roflumilast pulmonar
Pfizer Fase III
(Daxas) obstructiva crnica
Fosfodiesterasa-4 (EPOC), asma Ratn knock-out

Cilomilast rinitis alrgica,

GlaxoSmithKline Fase III
(Ariflo) artritis reumatoide

Lesiones del
sistema nervioso,
Knock-outs

mucosistis,
Enfermedad
Factor de GlaxoSmithKline
inflamatoria
crecimiento de Repifermin y Human Genome Fase III Ratn knockout
intestinal, colitis
queratinocitos 2 Sciences
ulcerosa,
enfermedad de
Crohn, lceras en
la piel

GlaxoSmithKline
Receptor 5-HT2C BVT-933 Obesidad Fase II Ratn knockout
y Biovitrum

Receptor CCK1 GI-181771 GlaxoSmithKline Obesidad Fase II Ratn knockout

Receptor
GW-493838 GlaxoSmithKline Dolor, migraa Fase II Ratn knockout
Adenosina A1

Diabetes no
Dipeptidil LAF-237 Novartis
dependiente de Fase II Ratn knockout
peptidasa V P32/98 Merck
insulina

Enfermedad
Receptor del Ifetroban Bristol-Myers vascular perifrica,
Fase II Ratn knockout
tromboxano A2 (BMS-180291) Squibb tromboembolismo,
lcera, isquemia

Glaucoma, fallo
cardaco
congestivo,
Receptor V2 de Sndrome
SR-121463 Sanofi-Synthelabo Fase II Ratn knockout
la vasopresina inadecuado de
ADH (hormona
antidiurtica),
hipertensin

112
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Principales dianas teraputicas (continuacin)

Estado del Tcnica

Diana Frmaco Empresa Indicacin
ensayo clnico de validacin

Esclerosis
multiple,
transplantes de
BMS-188667 Bristol-Myers rganos,
CTLA-4 Fase II Ratn knockout
BMS-224818 Squibb psoriasis, artritis
reumatoide,
enfermedades
autoinmunes

Enfermedad
Bristol-Myers inflamatoria
TACE BMS-561392 Fase II Ratn knockout
Squibb intestinal, artritis
reumatoide
Knock-outs

Rinitis alrgica,
GW-559090 GlaxoSmithKline Fase II
asma
Integrina _4/`1
Ratn knockout
(VLA-4)
Rinitis alrgica,
R-411 Roche Fase II
asma

Enfermedades
autoinmunes,
Receptores EDG FTY-720 Novartis Fase II Ratn knockout
trasplante de
rganos

Catepsina K AAE-581 Novartis Osteoporosis Fase II Ratn knockout

RhoB Cncer Preclnica Ratn knockout

ARNsi anti-Bcr-Abl
Tirosina quinasa Imatinib Cncer (Leucemia en lneas celulares
Novartis Comercializado
Bcr-Abl (Glivec) mieloide crnica) humanas sensibles
a imatinib

Psoriasis,
National Cancer Fase II
LMB-2 leucemia y
Institute Fase I
linfoma

Denileukin diftitox Seragen y Ligand linfoma cutneo

Comercializado
(Ontak) Pharmaceuticals de clulas T

Denileukin diftitox Seragen y Ligand Melanoma, cncer

Fase II
Tecnologas antisentido

(Ontak) Pharmaceuticals de rin

CD25 ARNsi
Rechazo de
Daclizumab
Roche rganos Comercializado
Zenapax
transplantados

Daclizumab
Roche Leucemia Fase II
Zenapax

Daclizumab
Roche Infeccin por VIH Fase I
Zenapax

GenasenseR Genta Cncer (leucemia Oligonucletidos

Bcl-2 Fase III
(oblimersen) Incorporated linfoctica crnica) antisentido.

Enfermedad
Canales de Morfolinos en pez
Dronedarone Sanofi-Synthelabo cardiovascular Fase III
potasio HERG cebra
(arritmia cardiaca)

Receptor CCR5 UK-427,857 Pfizer Infeccin de HIV-1 Fase-III ARNsi

113
 Principales dianas teraputicas (continuacin)

Estado del Tcnica

Diana Frmaco Empresa Indicacin
ensayo clnico de validacin

Receptor CXCR4 AMD11070 AnorMED Inc Infeccin de HIV-1 Fase II ARNsi

Subunidad R2 de
Lorus Oligonucletidos
la ribonucletido GTI-2040 Cncer renal Fase II
Therapeutics antisentido
reductasa

European Verrugas
Pptido E6 del Organization for genitales, cncer
Vacuna de
virus del papiloma Research and genital: reduccin Fase II ARNsi
pptido E6
humano 16 Treatment of del crecimiento
Cancer celular

Zarnestra Johnson & Leucemias y

Oncogn Ras Fase II ARNsi
(tipifarnib) Johnson linfomas

National Cncer
Terapia gnica Cncer Fase II
Institute
P53 ARNsi
Vacuna de National Cncer
Cncer Fase II
pptidos p53 Institute

Antgeno p24 del Vacuna de

Chiron Corp. Infeccin por VIH Fase I ARNsi
VIH antgeno p24

National Institute
Protena rev del Vacuna rMVA-HIV of Allergy and
Tecnologas antisentido

Infeccin por VIH Fase I ARNsi

VIH y rFPV-HIV Infectious
Diseases

National Institute
Vacuna rMVA-HIV of Allergy and
Tat Infeccin por VIH Fase I ARNsi
y rFPV-HIV Infectious
Diseases

Oligonucletidos
Oncogn Raf-1 LErafAON Neopharm Tumores slidos Fase I
antisentido

Factor nuclear Carcinoma de

... ... Preclnica ARNsi
heptico HNF-1` ovario

53bp1: proteina
... ... Cncer Preclnica ARNsi
de unin a p53

Neuroblastoma y
P73Dn ... ... Preclnica ARNsi
otros tumores

Hepatitis ARNsi,
Receptor Fas ... ... Preclnica
autoinmune anticuerpos

Microarrays de
ADNc
1 DDRT-PCR
COX17 ... ... Cncer de pulmn Preclnica
Oligonucletidos
antisentido
ARNsi

ARNsi, expresin
de ARNsi
Vif Infeccin por VIH Preclnica
mediante
plsmidos

114
 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
DE DIANAS TERAPUTICAS

Principales dianas teraputicas (continuacin)

Estado del Tcnica

Diana Frmaco Empresa Indicacin
ensayo clnico de validacin

LTR mRNA Infeccin por VIH Preclnica ARNsi

Protena
estructural de la Infeccin por
Preclnica ARNsi
capside del poliovirus
poliovirus
Tecnologas antisentido

RNAP del Infeccin por

Preclnica ARNsi
polivirus poliovirus

Protena P del Enfermedad

virus respiratorio respiratoria por Preclnica ARNsi
sincitial (VRS) VRS

Enfermedad
Protena F del
respiratoria por Preclnica ARNsi
VRS
VRS

Protena 5B y
ARNm de la Hepatitis C,
polimerasa del cirrosis, cncer Preclnica ARNsi in vivo
virus de la de hgado
hepatitis C

Tabla 4. Principales dianas teraputicas mediante ratones Knockout y tecnologas antisentido.

Fuente: Zambrowicz, B. P., et al. (2003). Predicting drug efficacy: knockouts model pipeline drugs of the pharmaceutical
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Acrnimos: EDG: genes de diferenciacin endothelial;

VEGF: factor de crecimiento del endotelio vascular;
EGF: factor de Crecimiento Epidrmico;
HMG-CoA: 3-hidroxi-metil-glutaril-CoA.

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 BIOTECNOLOGA APLICADA A LA IDENTIFICACIN Y VALIDACIN
Glosario
ADN (cido desoxirribonucleico): molcula de
gran tamao que se encuentra en todos los
seres vivos y que es portadora de la informacin
gentica.
Anticuerpos monoclonales: anticuerpos
especficos que pueden ser producidos en
grandes cantidades por clulas que se originan a
partir de una lnea celular (hibridoma). Todos los
anticuerpos monoclonales producidos por una
clula hbrida son idnticos.
ARN (cido ribonucleico): molcula parecida al
ADN en cuanto a sus caractersticas qumicas,
que tambin est relacionada con la transmisin
de la informacin gentica, ya que acta como
intermediario en el proceso de traduccin o
formacin de protenas.
Diana teraputica: molcula localizada en
cualquier parte de la clula, capaz de reconocer
a un frmaco y producir una respuesta celular
que modifique el curso de una enfermedad.
Dianas o genes homlogos: genes o dianas
que poseen similitud entre s, tanto en la misma
especie como entre distintas especies. Esta
similitud puede derivarse de una ascendencia
comn (genes ortlogos) asumindose que
tienen la misma funcin, o bien surgir a partir de
la duplicacin de un gen dentro de un mismo
genoma (genes parlogos), que en este caso
tendran diferente funcin o especializacin.
Factor de transcripcin: protenas que regulan
la expresin de determinados genes, mediante
DE DIANAS TERAPUTICAS
la unin a los mismos activando o reprimiendo
su expresin.
Fenotipo: rasgos o caractersticas visibles de un
organismo, determinado por su constitucin
gentica (genotipo) y por el ambiente en el que
crece y se desarrolla.
Gen candidato: gen localizado en una regin de
un cromosoma sospechosa de estar involucrada
en una enfermedad y cuyos productos proteicos
sugieren que podra ser el gen de la enfermedad
en cuestin.
Gen mutado: gen que contiene cualquier
cambio respecto al gen original.
Librera de compuestos: repertorio de
compuestos que presentan variaciones entre s
en cuanto a sus caractersticas y que muestran
una potencial actividad de inters.
Oligonucletidos: molculas de cido nucleico
de longitud reducida que pueden ser de ADN,
ARN o modificaciones qumicas de stos.
Tecnologas antisentido: tecnologas basadas
en el empleo de molculas complementarias a
un fragmento del ARN diana que permiten su
unin al ARN de forma especfica, bloqueando su
expresin e impidiendo la produccin de la
protena diana.
Vectores de expresin: molculas de ADN que
contienen la informacin necesaria para dirigir la
sntesis de oligonucletidos o protenas en el
interior de la clula.
119
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Telfono: 91 449 12 50 Fax: 91 571 54 89
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