METABOLISMO PROTENAS

PROTENAS: Principales polmeros estructurales y funcionales de los seres

vivos

Representan, al menos, el 50% del peso en seco en la mayora de los seres vivos. Se
estima que en los seres humanos hay unas 30.000 protenas distintas.
Intervienen en:
- la estructura de los tejidos y en el crecimiento y mantenimiento de las
clulas
- la transmisin nerviosa, la contraccin muscular y la motilidad celular
- la catlisis de reacciones enzimticas
- el transporte de vitaminas, minerales, oxgeno, combustibles.
- La coagulacin sangunea, defensa inmunolgica
- Regulacin hormonal
-

PROTENAS: Polmeros de aminocidos

Todas las protenas contienen carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno, mientras

que casi todas contienen adems azufre. Hay otros elementos que aparecen
solamente en algunas protenas (fsforo, cobre, zinc, hierro, etc.).
Las protenas son grandes molculas compuestas por la unin de otras ms
sencillas llamadas aminocidos.
En las protenas los aminocidos se hallan unidos covalentemente entre s
mediante enlaces peptdicos, formando largos polmeros no ramificados.

AMINOCIDOS

Son las unidades estructurales que

constituyen las protenas.
En los microorganismos, plantas y
animales se encuentran unos 300
aminocidos, pero slo 20 de ellos son
codificados por el ADN para formar protenas.
Muchas protenas contienen aminocidos modificados y partes no proteicas
(grupos prostticos)
Los 20 aminocidos proteicos codificados en el ADN, excepto la prolina, responden
a la siguiente frmula general:
Los 20 aa. codificados en el ADN

Otros aminocidos

Presentes en protenas

No presentes en protenas, pero desempean funciones importantes en el

organismo
Segn su metabolismo intermediario se clasifican en:
Aminocidos glucognicos (Arg, Val, Ala, Asp, Asn, Glu, Gln, Gly, Cys, His, Pro
y Ser)
Aminocidos cetognicos (Leu y Lys)
Aminocidos mixtos (Ile, Phe, Trp, Tyr, Met y Thr)

Segn su esencialidad se clasifican en:

Aminocidos no esenciales
Aminocidos esenciales: Val, Leu, Ile, Thr, Met, Lys, Phe, Trp, His (y Arg)

Propiedades de aa: Estereoisomera

Propiedades de aa: Comportamiento anftero

Derivados de aminocidos de importancia biolgica
Prdida grupo carboxilo
Catecolaminas
Serotonina
Histamina
Prdida grupo amino (alfa-cetocidos)
Alfa-cetoglutarato
Oxalacetato
Piruvato

ENLACE PEPTDICO

PPTIDOS
La unin de 2 o ms aa. hasta un mximo de 100 mediante enlaces
peptdicos da lugar a los pptidos
2 aa: dipptido
3 aa: tripptido
De 4 a 10 aa: oligopptido
De 10 a 100 aa: polipptido
Mas de 100 aa: protena

ESTRUCTURA DE LAS PROTENAS

Las molculas proteicas estn formadas, generalmente, por miles de tomos y sus
estructuras compleja y difcil de diferencias, sobre todo en un modelo como este
en el que los cientos de tomos que la forman se han representado por esferas
(bolas).
Las estructura compleja de una protena se empieza ya apreciar si representamos
nicamente la cadena NCCNCCNCCNCCN Vemos una serie de estructuras
helicoidales replegadas.
Estructura de las protenas
Vemos pues que la estructura de las protenas hay que estudiarla a
diferentes niveles
Nivel o estructura primaria
Nivel o estructura secundaria
Nivel o estructura terciaria
Nivel o estructura cuaternaria

Estructura primaria
Viene dada por su secuencia: orden que siguen los aminocidos de una
protena
Va a determinar el resto de los niveles y como consecuencia la funcin de la
protena
La alteracin de la estructura primaria por eliminacin, adicin o
intercambio de los aminocidos puede cambiar la configuracin general de
una protena y dar lugar a que disminuya o desaparezca su accin biolgica.

Estructura primaria de la insulina: formada por dos cadenas polipeptdicas

de 21 y 30 aminocidos respectivamente.

Estructura secundaria
Las caractersticas de los enlaces peptdicos imponen determinadas
restricciones que obligan a que las protenas adopten una determinada
estructura secundaria
En hlice alfa
En conformacin beta o lmina beta
Sin estructura secundaria: zonas irregulares.
 Esta cadena va a poder
disponerse en el espacio
en diferentes
conformaciones que
constituyen las
estructuras de orden
superior a la primaria.

Las hlices alfa son la forma

ms simple y comn.
En este tipo de estructuras la
molcula adopta una
disposicin helicoidal, los
restos R de los aminocidos y
los H del carbono alfa se
sitan hacia el exterior de la
hlice y cada 3,6 aminocidos
de sta da una vuelta
completa.
La hlice se estabiliza al
establecerse enlaces
hidrgeno entre en grupo
N-H de un aminocido y el
grupo C=O del situado n+4 por debajo de l en la hlice.
Las hlices alfa suelen representarse con cintas retorcidas.

La conformacin

Se origina cuando la molcula

proteica, o una parte de la
molcula adoptan una
disposicin en zigzag. La
estabilidad se consigue mediante
la disposicin en paralelo de
varias cadenas con esta
conformacin, cadenas que
pueden permanecer a protenas
diferentes o ser partes de una
misma molcula. De esta manera
pueden establecerse puentes de
hidrgeno entre los grupos C=O
y N-H. Los restos van
quedando alternativamente
hacia arriba y hacia abajo. No obstante, si la molcula presenta prximos entre s
restos muy voluminosos o con las mismas cargas elctricas se desestabilizar.
ESTRUCTURA TERCIARIA
La molcula proteica, segn las condiciones fisicoqumicas del medio, se pliega
y repliega en el espacio adoptando una forma especial y caracterstica Esta forma
es la estructura terciaria.
Se distinguen dos formas bsicas de estructura terciaria:
Fibrosa o filamentosa. Suelen tener funcin estructural, de
proteccin o ambas a la vez y son insolubles en agua y en soluciones
salinas. Por ejemplo: beta-queratina, el colgeno, elastina. Algunos
autores consideran que las protenas filamentosas son protenas que
carecen de estructura terciaria.
Globular. Suelen ser solubles en agua y/o en disoluciones salinas.
Por ejemplo, las enzimas, las protenas de membrana y muchas
protenas con funcin transportadora. Estas protenas suelen tener
diferentes fragmentos con alfa-hlices y conformaciones beta, pero
las conformaciones beta suelen disponerse en la periferia y las
hlices alfa en el centro de la molcula.

ESTRUCTURA CUATERNARIA

Si varias cadenas de aminocidos, iguales o diferentes, se unen para formar un

edificio proteico de orden superior, se disponen segn lo que llamamos estructura
cuaternaria.
Esto es frecuente en protenas con masas moleculares superiores a 50.000.
Un ejemplo es la hemoglobina (transportadora de oxgeno) que est formada
por 4 cadenas iguales dos a dos.
Los anticuerpos son protenas con estructura cuaternaria formada por cuatro
cadenas.

CLASIFICACIN DE LAS PROTEINAS

Segn su conformacin.
Fibrosas.
Globulares.
Segn su composicin qumica.
Holoprotenas o protenas simples: slo aminocidos. Ejemplos:
Histonas, prolaminas, gluteninas, albminas, globulinas,
escleroprotenas.
Heteroprotenas o protenas conjugadas: aminocidos + grupo
prosttico. Ejemplos: Cromoprotenas, nucleoprotenas,
glucoprotenas, fosfoprotenas, lipoprotenas.
Segn su funcin. Hemostatica, coagulacin, cataltica, estructural,
transporte, reserva (no reserva energtica), movimiento, defensiva,
hormonal, receptor.
PROPIEDADES DE LAS PROTEINAS

Solubilidad. El grado de solubilidad vara en funcin de diversos factores

cono PH, temperatura, concentracin salina
Fibrosas: insolubles
Globulares: solubles
Especificidad.
Especifidad de especie. Existen protenas que son exclusivas de cada
especie. Lo ms comn es que las protenas que desempean la
misma funcin en diferentes especies que tengan una composicin y
estructuras similares.
Especificidad de funcin: centro activo. Reside en la posicin que
ocupan determinados aminocidos de los que constituyen su
secuencia lineal. Esta secuencia condiciona la estructura cuaternaria
de la protena, responsable en ltima instancia de su funcin
caracterstica.
Capacidad amortiguadora. Las protenas tienen un comportamiento
anftero y esto las hace capaces de neutralizar las variaciones de pH del
medio, ya que pueden comportarse como un cido o una base y por tanto
liberar o retirar protones (H+) del medio donde se encuentran.
Desnaturalizacin. Se refiere a la ruptura de los enlaces que mantenan
sus estructuras cuaternaria, terciaria y secundaria, conservndose
solamente la primaria Algunos de los agentes desnaturalizantes fsicos o
qumicos son: pH, temperatura, concentracin salina. La
desnaturalizacin puede ser reversible o irreversible. Lo efectos que
produce pueden ser:
Prdida de la actividad biolgica
Disminucin de la solubilidad
Aumento de la sensibilidad a proteasas
Aumento de la digestibilidad de las protenas.

METABOLISMO DE LAS PROTEINAS

La mayora de las protenas presentes en los alimentos son degradadas a

aminocidos o pptidos muy sencillos por la accin de distintas enzimas
proteolticas presentes en el estmago y en el duodeno.
Los aminocidos, dipptidos y tripptidos resultantes de esta digestin son
absorbidos en el intestino delgado y transportados a travs de la sangre al resto de
los tejidos.
Sntesis y degradacin continua de protenas del organismo: recambio proteico.

DEGRADACIN DE LAS PROTEINAS

Utilizacin de aminocidos procedentes de la degradacin de protenas:

Sntesis proteica
Convertirse en compuestos nitrogenados no proteicos
Oxidacin para obtener energa
Transformarse en grasas o glcidos segn necesidades
 Degradacin de aminocidos:
Eliminacin del grupo amino
Transaminacin
Desaminacin oxidativa
Oxidacin de la cadena carbonada.

OXIDACIN DE LA CADENA CARBONADA

METABOLISMO DE LOS AMINOCIDOS

FLUJO GENERAL DEL NITRGENO EN EL CATABOLISMO DE LOS

AMINOCIDOS

Transaminacin

Desaminacin

Transporte

Ciclo de la urea
TRANSPORTE DEL AMONIO HASTA EL HGADO

CICLO DE LA UREA

Enzimas del ciclo de la urea:

1- Carbamil-fosfato sintetasa I
2- Ornitina transcarbamilasa
3- Argininosuccinato sintetasa
4- Argininosuccinato liasa
5- Arginasa

Para formar un mol de

urea se utilizan 4 enlaces ricos
en energa.
CONEXIN CICLO DE LA UREA Y CICLO KREBS

BIOSNTESIS DE AMINOCIDOS
BIOSNTESIS DE AMINOCIDOS NO ESENCIALES
PROTEINAS PLASMTIVAS

Clasificacin:
Hsticas
Hemticas:
Protenas de los hemates incluida la hemoglobina
Protenas plasmticas:
Especficas
No especficas
Importancia de las protenas plasmticas en el laboratorio clnico:
Accesibilidad
ntima relacin con el metabolismo proteico.
Constituyen la porcin principal de los componentes del plasma/suero (6,5-8,3
g/dl).
Suero: Albmina, globulinas, gammaglobulinas
Plasma: dem + fibringeno
Funciones:
Conservar la presin osmtica de la sangre (balance de fluidos)
Transporte y almacenamiento de numerosas sustancias.
Actan como amortiguadores del pH sanguneo.
Participar en los mecanismos de defensa.
Enzimas.
Actuar como factores de la coagulacin
Reserva de protenas para regeneracin y crecimiento de tejidos.
Fracciones. Segn la separacin electrofortica:
Prealbumina.
Funcin: transporte de hormonas tiroideas y de vitamina A
(complejo con la protena fijadora de vitamina A RBG-).
Es un indicador sensible del estado nutricional ya que tiene una
vida media muy corta y disminuye rpidamente cuando el
consumo de protenas y caloras disminuye.
Los niveles de prealbmina estn bajos en casos de desnutricin
y procesos inflamatorios, as como en infeccin crnica y
enfermedad heptica grave.
Albmina (57-74%)
Constituye aproximadamente el 60% de las protenas sricas.
Valores normales: 4-5,2 g/dL.
Funciones:
Transporte: bilirrubina, cidos grasos, frmacos.
Osmtica
Amortiguadora
La concentracin de albmina aumenta slo en casos de
hemoconcentracin.
La hipoalbuminemia:
Disminucin de la sntesis: malnutricin, malabsorcin,
enfermedad heptica crnica
Excrecin anormal o degradacin: sndrome nefrtico,
quemados, hemorragias, enteropata pierde protenas
Distribucin anormal o dilucin: sobrehidratacin
 Globulinas alfa-1 (3-5%)
Alfa1- antitripsina.
Funcin: antiproteasa
Elevacin: es un reactante de fase aguda positivo.
Aumenta en procesos infecciosos o inflamatorios agudos o
crnicos, neoplasias, embarazo
Disminucin: enfisema pulmonar
Alfa1-glucoprotena cida u orosomucoide.
Funcin: relacionada con matriz extracelular.
Aumenta: inflamacin (protena de fase aguda) y algunos
errores congnitos del metabolismo
Alfa1-lipoprotenas
Corresponden a las HDL
Funcin: transporte lpidos
Transcobalamina
Funcin: transporte vitamina B12
Disminuye: en malnutricin
Aumentada: algunos tipos de leucemia y policitemia
Transcortina
TBG.
Funcin: fijacin y transporte de hormonas tiroideas
Aumenta: embarazo
Disminuye: sndrome nefrtico
Protrombina.
Es el factor II de la coagulacin
Disminuye: hepatopatas y tratamiento con
anticoagulantes orales.
Globulinas alfa-2 ( 5-9%)
Alfa2-macroglobulina.
Inhibidor de distintas enzimas, generalmente proteasas.
Aumenta: procesos inflamatorios, sndrome nefrtico,
hepatopatas crnicas, diabetes, tratamientos
estrognicos
Haptoglobina.
Se une a la Hb libre procedente de la hemlisis de los
hemates.
Aumenta: infecciones, procesos inflamatorios agudos y
crnicos, neoplasias, etc.
Desciende: anemias hemolticas, hepatopatas crnicas.
Ceruloplasmina.
Fija y transporta Cu.
Aumenta en los procesos inflamatorios agudos,
neoplasias, embarazo, administracin de estrgenos, etc.
Disminuye en la enfermedad de Wilson, hepatopatas, etc.
Alfa2-lipoprotenas.
Corresponden a las VLDL
Funcin: transporte de lpidos
Eritropoyetina.
Hormona de la eritropoyesis
 Aumenta: ciertas anemias
Disminuye: nefropatas y hepatopatas.
Globulinas beta (9-14%). En la electroforesis en gel de agarosa la banda
se separa en beta-1 y beta-2.
Transferrina.
Transporta hierro.
Aumenta en anemias con deficiencia de hierro.
Disminuye en procesos inflamatorios, nefrosis, cnceres y
hemocromatosis.
Hemopexina.
Transporte del grupo hemo.
Aumenta: infecciones, procesos inflamatorios agudos y
crnicos, neoplasias, etc.
Desciende: anemias hemolticas, hepatopatas crnicas.
Plasmingeno.
Forma inactiva de la plasmina (acta lisando la fibrina)
Aumenta en casos de embarazo y en mujeres que toman
anticonceptivos orales.
Beta-lipoprotenas
Algunos factores del complemento (C3 y C4).
Aumenta en los procesos inflamatorios y
Disminuye durante la activacin del complemento
Globulinas gamma (12-20)
Ig G, Ig M, Ig A, Ig D e Ig E
Normal: Ig heterogneas (policlonal: varias lneas celulares)
Anormal: Ig monoclonales (procede de una lnea celular)
Fibringeno.
Aparece slo en el plasma.
Precursor de la fibrina (bsica en el proceso de coagulacin
sangunea)

PROTENAS REACTANTES DE FASE AGUDA

Protenas plasmticas cuya concentracin aumenta ante un dao tisular

Existen otros reactantes de fase aguda que no son protenas como la VSG o
distintos marcadores celulares.
Las protenas de fase aguda se sintetizan en el hgado en detrimento de la
albmina, prealbmina, transferrina y TBG, principalmente (estas seran protenas
de fase aguda negativa).
Estos cambios en la sntesis de protenas no son especficos ni simultneos para
todas las protenas afectadas, tampoco la proporcin en que se aumentan es la
misma.
PROTENA Valores de referencia (g/L) Tiempo de respuesta (h)

Grupo I (aumentos hasta 100-1000 veces los valores medios)

Protena C reactiva < 0.008 6-10

SAA < 0.030 6-10

Grupo II (aumentos entre 2 y 4 veces)

Alfa-1-antitripsina 0.9-2.0 24

Alfa-1-glucoprotena 0.5-1.2 24
cida
Haptoglobina 0.7-4.0 24

Fibringeno 2.0-4.5 24

Grupo III (aumentos de alrededor del 50%)

Ceruloplasmina 0.2-0.6 48-72

C3 0.9-1.8 48-72

C4 0.1-0.4 48-72

METODOS DE DETERMINACIN DE PROTENAS PLASMATIVAS TOTALES

Mtodo de Kjeldahl: Se basa en la determinacin del nitrgeno proteico. Es un

mtodo muy exacto, pero es lento y complicado y por ello no se utiliza para las
determinaciones rutinarias.
se fundamenta en la conversin del nitrgeno total presente en la
muestra a sales de amonio que son posteriormente valoradas por
volumetra cido base.
 Mtodo de Biuret. Es el mtodo de referencia y el ms utilizado. El in cobre en
soluciones alcalinas fuertes se combina con el enlace peptdico de las protenas,
dando un complejo de color prpura o violeta (que se lee a 540 nm) cuya
intensidad de color es directamente proporcional al nmero de enlaces
peptdicos, y por tanto a la cantidad de protenas presentes en la muestra.
Refractomera. Mide el ndice de refraccin del suero. Parmetro que est
relacionado directamente con la concentracin de la sustancia a medir. Para
sueros claros permite una valoracin rpida y con bastante exactitud de las
protenas plasmticas. Est sujeto a error cuando el suero es lipmico,
hemolizado, etc.
Mtodo de Lowry. Primero se trata la muestra con una solucin alcalina de
cobre para que reaccionen con el cobre los enlaces peptdicos (semejante al
Biuret). A continuacin se aade el reactivo fenlico de Folin-Ciocalteau (cido
fosfotngstico y fosfomolbdico en fenol). El complejo cobre-enlace peptdico, y
tambin los aminocidos triptfano y tirosina presentes en la protena, reducen
los cidos fosfotngstico y fosfomolbdico a azul de tungsteno y azul de
molibdeno, respectivamente, cromgenos de color azul, cuya intensidad de
color y concentracin ser proporcional al de la protena de la muestra.
Mtodo de absorcin en el UV. Consiste en la absorcin de radiacin en el UV
(270 nm) por los enlaces peptdicos de las protenas. Es un mtodo con una
exactitud, sensibilidad y precisin aceptables.
Mtodos turbidimtricos. Consisten en poner las protenas de la muestra en
contacto con ciertos agentes qumicos (cidos tricloroactico o cido
sulfosaliclico) que las insolubiliza, formndose partculas de mayor o menor
tamao, y medir ulteriormente la cantidad de luz que es bloqueada por las
partculas, cuando la muestra se pone en contacto con una fuente de luz.

MTODOS DE DETERMINACIN DE FRACCIONES PROTEICAS EN SANGRE

Mtodo de fijacin de colorantes para la determinacin especfica de albmina

srica: se pueden emplear distintos colorantes que se ligan ms o menos
especficamente con la albmina, pero que no reaccionan con las dems fracciones,
como el verde de bromocresol (VBC) y el cido 2-(-4-hidroxiazo benceno)
benzoico (HABA). Como resultado se produce un desplazamiento en el mximo de
absorcin.
Electroforesis de protenas plasmticas.
Tcnicas inmunolgicas:
La inmunoelectroforesis combina la separacin electrofortica con
la reaccin inmunolgica entre estas protenas y anticuerpos
especficos contra ellas. Las distintas fracciones proteicas se
detectan mediante la aparicin de arcos de precipitacin. Esta
tcnica tiene un gran valor cualitativo.
La inmunodifusin radial consiste en colocar el suero a analizar
en un orificio o pocillo practicado en un placa de agar impregnada
con anticuerpos dirigidos especficamente contra la protena que se
desea valorar. La reaccin entre la protena y el anticuerpo
especfico forma un anillo de precipitacin de dimetro proporcional
a la cantidad de protena presente en la muestra.
 La inmunofijacin: para identificacin de Ig en gammapatias
monoclonales.
Tcnicas turbidimtricas y nefelomtricas: inmunoturbidimetra e
inmunonefelometra.
Tcnicas cromatogrficas.

MTODOS DE DETERMINACIN DE PROTENAS EN ORINA Y LCR

Mtodos turbidimtricos: el ms empleado es el del cido tricloroactico.

Tiene gran exactitud y precisin.
Mtodos que fijan colorantes: algunos de los ms empleados son el Rojo
de Pirogalol o el azul brillante de Coomasie.

INTERPRETACIN DEL PROTEINOGRAMA

Trazo inflamatorio
Agudo: aumento de alfa-1 y alfa-2 (tambin puede aumentar la
fraccin beta) y albmina y gammaglobulinas bajas
Crnico: semejante a la anterior pero las gammaglobulinas estn
elevadas.

Enfermedad heptica crnica.

Aumento de gammaglobulinas
Solapamiento o fusin de las bandas beta
y gamma en el proteinograma
Disminucin de albmina.
Las alfa2 tienden a disminuir.

Sndrome nefrtico.
Disminucin de la albmina, alfa-1 y
gammaglobulinas
Incremento de las alfa-2 globlulinas
La fraccin beta puede estar normal
disminuida o aumentada.
 Gammapatas policlonales. Son aquellas en las que se producen
alteraciones cuantitativas globales de la fraccin ya sea por aumento o por
disminucin, o incluso por ausencia. La fraccin aparece en el
proteinograma con un color ms intenso o ms tenue, pero con una
anchura normal.
Hipergammaglobulinemas policlonales:
aparecen siempre que existe proliferacin
de clulas plasmticas
Inflamaciones crnicas (cirrosis,
hepatitis, brucelosis, poliartritis
crnica, etc.)
En la fase tarda de las inflamaciones
agudas aparece una discreta
hipergammaglobulinemia.

Hipogammaglobulinemas policlonales: se
producen por defecto de sntesis o prdidas
exageradas. Pueden ser primarias
(genticas) o secundarias:
Sndrome nefrtico
Cuadros carenciales avanzados
En algunas leucemias.

Gammapatas monoclonales. Son

disproteinemias por alteraciones cuantitativas de
las subfracciones de las Ig. El proteinograma
muestra una banda muy estrecha en la fraccin
gamma, correspondiente a la fraccin que se
encuentra alterada.
Gammapatias monoclonales benignas.
La concentracin de protena
alterada permanece constante en el
tiempo.
Deben estudiarse peridicamente para demostrar el nivel
constante de la Ig monoclonal y demostrar la ausencia de
otras patologas.
Se denominan idiopticas o esenciales para diferenciarlas de
las gammapatas monoclonales asociadas a otras patologas
(enfermedades autoinmunes, nefropatas, hepatopatas, )
Gammapatias monoclonales malignas.
Mieloma mltiple: neoplasia de un clon de clulas plasmticas
en mdula sea. Puede ser de Ig G (ms frecuente), Ig A, Ig D o
Ig E
 Macroglobulinemia de Waldestrm: caracterizada por la
proliferacin de linfocitos B que pueden evolucionar a clulas
plasmticas. Es de tipo Ig M
Enfermedad de las cadenas pesadas: caracterizada por la
presencia en suero y/u orina del fragmento Fc de Ig,
desprovisto de cadenas ligeras.
Fracciones anormales. Paraprotenas.
Crioglobulinas: protenas que precipitan con el fro y se disuelven a
37 C
Protena de Bence-Jones: protena compuesta por caderas ligeras de
Ig. Est presente en MM, leucemias y carcinomas. Su bajo peso
molecular permite su paso a la orina (proteinuria de Bence-Jones)
Paraprotena amiloidea: aparece sobre todo en infecciones crnicas.
Macroglobulina: protenas de alto Pm que ocupan la banda gamma.