CUESTIONARIOS DE MICROBIOLOGA EXPERIMENTAL

P1 Buenas prcticas de laboratorio.

1. Qu es un microorganismo?
2. Escribe el nombre de 5 microorganismos patgenos que conozcas y la enfermedad producen.
3. Escribe el nombre de 5 microorganismos que no sean patgenos y donde se encuentran.
4. Qu es y que se hace en un laboratorio de Microbiologa?
5. Cules son las consideraciones que hacen a este laboratorio diferente a otros que hayas cursados
durante la carrera (Qumica General, Analtica, Orgnica, etc.)?
6. Cules son las principales reglas de higiene y seguridad que deben observarse en el laboratorio?
7. Indica la importancia de cada una de ellas.
8. Define los siguientes conceptos: de asepsia, desinfeccin y esterilizacin
9. Qu entiende por tcnica asptica?
10. Cules son los desinfectantes ms empleados en un laboratorio de Microbiologa?
11. Elabora un esquema que indique que hacer en caso de derrame con los siguientes puntos:
.Avisar al profesor o encargado de laboratorio.
.Desinfectar el rea del derrame.
.Cubrir el derrame con material absorbente.
.Impregnar el derrame con un desinfectante.
.Dejar transcurrir 10 min.
.Recoger los vidrios con una bolsa plstica protegida con algodn.
.Esterilizar los desechos.
.Despus de esterilizar colocar los vidrios en el contenedor y los dems residuos en los contenedores
destinados a Residuos Biolgicos Potencialmente Infecciosos

P2 Uso y cuidados del microscopio de campo claro.

1.Describe el fundamento y la utilidad del microscopio de campo claro y el microscopio electrnico.

2. Esquematiza las partes del microscopio de campo claro y menciona cul es la funcin de cada una de
ellas.
3.Qu es la apertura numrica?
4.Qu es el poder de resolucin y de qu depende?
5.Qu es y cul es la funcin del aceite de inmersin.
6.Cmo se calcula el aumento total de un microscopio?
7.Enlista los pasos para realizar un correcto enfoque con el microscopio.
8.Qu microorganismos se pueden observar con cada uno de los objetivos?
P3 Estudio microscpico de los microorganismos

Preparaciones
1.Cul es la aplicacin de las preparaciones en fresco?
2.Qu grupos microbianos se observan con las preparaciones en fresco?
3. Qu es un frotis y para que se sirve?
4.Cul es el objeto de dejar secar al aire la muestra?
5.Para que se fija una muestra?
6.Describe los mtodos que se emplean para fijar una muestra?

Tinciones
1. Por qu es necesario teir a los microorganismos o bien el fondo de la preparacin?
2. Qu es un colorante? Cmo est constituido? Qu factores intervienen para que los colorantes
se combinen con los componentes celulares?
3. Para que se emplean los mordentes? Describe algunos ejemplos.
4. Qu es una tincin? Cuntos tipos existen?
5. Describe las diferencias entre una tincin positiva y una negativa

Tinciones simples
1. En que consiste una tincin simple?
2. Qu es y cules son las principales caractersticas de un colorante vital y para que se emplean?

Tinciones diferenciales
1. Qu es una tincin diferencial?
2. Indica las diferencias que existen entre una tincin simple y una diferencial
3. Describe el fundamento de la tincin de Gram y de Ziehl Neelsen
4. Cul es la importancia de ambas tinciones?
5. Describe los reactivos empleados en la tincin de Gram y la funcin de cada uno de ellos
6. Cmo se denomina a las bacterias que retienen el primer colorante y de que color se observan?
7. Cmo se denomina a las bacterias que pierden el primer colorante, indique de que color se observan
y explique el por qu?
8. De que color se observan las bacterias cido alcohol resistentes? Indique la causa
9. De que color se observan las bacterias no cido alcohol resistentes? Indique la causa.

Tinciones selectivas
1. Qu es una tincin selectiva?
2. Por qu es necesario efectuar el calentamiento durante la tincin del las endosporas bacterianas
3. Por qu se emplea la tincin negativa para la observacin de la cpsula?
P4 Esterilizacin y Medios de cultivo.
1. Esquematice una autoclave, indicando cuales son las partes que la conforman, as como la funcin de
cada una de ellas.
2. Qu es y como se lleva a cabo la esterilizacin por calor hmedo?
3. Qu es y como se lleva a cabo la esterilizacin por calor seco?
4. Describe los siguientes mtodos de esterilizacin: tindalizacin, pasteurizacin, filtracin,
radiaciones, gases.
5. Qu es una sustancia termolbil? y Cmo se esteriliza?
6. Qu significa termorresistencia en Microbiologa?
7. Qu tipo de indicadores se utilizan para verificar el proceso de esterilizacin?
8. Qu es una espora bacteriana?
9. Qu es un indicador de pH? Menciona 5 ejemplos, indicando el intervalo de pH de cada uno.

Medios de cultivo
1. A que se le llama medio de cultivo? y Para que se utiliza?
2. Qu es el agar?. Menciona la forma de obtencin, as como su uso.
3. Indica la clasificacin de los medios de cultivo de acuerdo a su estado fsico y la utilidad de cada
uno de ellos
4. Qu en un medio de cultivo natural o complejo?
5. Qu en un medio de cultivo sinttico?
6. Define los medios de cultivo de acuerdo a su utilidad: enriquecido, enriquecimiento, selectivo,
diferencial, prueba bioqumica, de transporte y de conservacin. Menciona un ejemplo de cada
uno de ellos.
7. Qu es un factor de crecimiento?
8. Indica los cuidados que se deben tener al preparar los medios de cultivo
9. Escribe el nombre y frmula de 3 ejemplos de sustancias que son utilizadas en los medios de
cultivo como fuente de: Carbono, Nitrgeno, Fsforo y Azufre.
10. Qu factores fsicos y qumicos afectan la estabilidad de los medios de cultivo?
11. Investiga la frmula y preparacin de los medios de cultivo indicados en el siguiente cuadro y
completa la informacin del mismo
MEDIO DE CULTIVO TIPO DE MEDIO DE COMPUESTO(S) QUE TIPO DE CARACTERSTICAS
CULTIVO. LO HACEN SELECTIVO MICROORGANISMOS COLONIALES DE LOS
O DIFERENCIAL QUE DESARROLLAN MICROORGANISMOS
EN EL MEDIO QUE DESARROLLAN
EN EL MEDIO

AGAR CASOY o
CASEINA DE SOYA

AGAR SABOURAUD

AGAR EMB

MANITOL SAL AGAR

AGAR CETRIMIDA

GELOSA NUTRITIVA

CALDO NUTRITIVO
P5 Tcnicas de cultivo de bacterias y hongos..

1. Qu es un cultivo bacteriano?
2. Definir los siguientes trminos:
Cepa
Colonia bacteriana
Cepario
Cultivo puro
Cultivo axnico
Inoculacin
3. Cmo se puede describir el crecimiento bacteriano en medios lquidos?
4. Qu trminos se utilizan para describir el crecimiento bacteriano en medios slidos?
5. Por qu algunas bacterias producen pigmentos en los medios de cultivo?
6. investiga la composicin, funcin de cada compuesto, mtodos de esterilizacin y usos de los
siguientes medios de cultivo
a. Caldo tetrationato
b. Agar EMB
c. Agar Mac Conkey
d. Agar sal manitol
e. Agar Sabouraud Rosa de bengala
f. Agar 110
7. Si un medio de cultivo se contamina A qu atribuiras dicha contaminacin?
8. Qu diferencias existen entre los hongos filamentosos y los levaduriformes
9. En qu ambientes se encuentran este tipo de microorganismos?
10. Indica en nombre cientfico de 3 hongos filamentosos y de 3 levaduriformes
11. Describe la tcnica que se emplea para sembrar hogos filamentosos y levaduriformes en placa.
12. Cules son las condiciones ptimas para el crecimiento de hongos filamentosos y levaduras?
13. Qu son las hifas y los micelios? Cuntos tipos se conocen?
14. Como se denomina al micelio de acuerdo a su posicin y funcin?
15. Qu caractersticas culturales de hongos levaduriformes se observan en un cultivo en placa
16. Qu caractersticas culturales de hongos filamentosos se observan en un cultivo en placa
17. Esquematiza diferentes estructuras microscpicas de reproduccin axesual en hongos
microscpicos.

P6 Tcnicas de aislamiento de microorganismos.

1. Investiga la composicin y el uso de los siguientes medios de cultivo: Agar Mc. Conkey, Agar
ENDO, Agar YMPD, Agar Anaerbico de Brewer.
2. Cul es la clasificacin de los microorganismos de acuerdo a sus condiciones ptimas de
crecimiento (temperatura y necesidad de oxgeno)
3. Qu caractersticas especiales se aprovechan de los microorganismos para su aislamiento?
4. Esquematiza las tcnicas de aislamiento fsico (diluciones y agotamiento)
5. Cules son las diferencias morfolgicas macroscpicas y microscpicas entre una bacteria no
filamentosa y un hongo levaduriforme?
6. Cules son las diferenciaas morfolgicas macroscpicas y microscpicas entre una
actinobacteria y un hongo filamentoso.
P7 Tcnicas para la enumeracin de microorganismos

1 Qu tipo de mtodos se emplean para cuantificar los microorganismos totales? Da dos ejemplos
2. Qu tipo de mtodos se emplean para cuantificar los microorganismos viables en una muestra? Da
dos ejemplos.
3. En el mtodo de dilucin y vaciado en placa por que se recomienda agitar cada una de las diluciones
un nmero constante de veces?
4. En la preparacin de diluciones emplearas agua destilada? Indique el por qu.
5. Qu temperatura debe tener el medio de cultivo antes de vaciarlo a las cajas que contienen la
muestra
6. Qu se entiende por el trmino de dilucin aparente?
7. Qu debe hacerse cuando en las cajas inoculadas con diferentes diluciones no se observa el efecto de
dilucin aparente?Cul es el significado de UFC y NMP?
8. Para qu tipo de muestra se emplea el recuento por filtro de membrana?
9. Para qu se utilizan estas tcnicas en la industria o en la clnica?

PROBLEMAS
1. Para comparar la calidad de 2 muestras de leche, entregaste una muestra de cada leche a 2 de
tus tcnicos, y les indicaste aplicar el mtodo de Breed. Los reportes a partir de los cuales hars
la interpretacin se especifican a continuacin:

Tcnico 1
Dimetro de campo microscpico =70 m
rea en la que se coloc la muestra = 2.0 cm2
Volumen de la muestra = 0.01 mL

Nmero de 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
campo
Nmero de 14 3 25 12 1 10 8 12 5 20
microorganismos

Tcnico 2
Dimetro de campo microscpico = 0.65 m
rea en la que se coloc la muestra = 1.0 cm2
Volumen de la muestra = 0.01 mL
Campos observados = 10
Promedio de microorganismos/ campo microscpico =18
2. En una planta de aguas residuales se est probando la eficiencia de dos productos para disminuir la
cantidad de microorganismos presentes. Con tal motivo, se procedi a analizar 3 lotes de muestras en
las que determin:
a) La cantidad de microorganismos totales/ 100 mL de agua
b) la cantidad de coliformes/ 100 mL de agua
Los lotes y resultados obtenidos se especifican a continuacin:

Cuadro 1 Resultados del mtodo de Dilucin y siembra por placa vertida

Diluciones
Lotes Repeticiones 10-4 10-5 10-6 10-7
Nmero de UFC por placa
1 Incontables 900 250 45
agua sin tratar 2 Incontables 750 150 32
3 Incontables 820 200 35
1 920 120 30 1
II Agua tratada con
cloro 2 880 550 70
3 950 150 35 3
1 300 10 3 0
III Agua tratada con
plata coloidal 2 400 50 200 50
3 350 70 7 1

Cuadro 2 Resultados del mtodo de Dilucin y siembra en tubos que contienen caldo lactosado
diluciones
Lotes Repeticiones 10-4 10-5 10-6 10-7
Nmero de tubos positivos
1 3 3 3 3
agua sin tratar 2 3 3 3 2
3 3 3 3 2
1 3 3 1 0
II Agua tratada con
cloro 2 2 2 2 0
3 3 2 0 0
1 3 3 1 0
III Agua tratada con
plata coloidal 2 2 0 0 0
3 1 1 1 0

Analice los resultados del cuadro 1 e indique:

a) Se observa el efecto de dilucin en todas las series de los 3 lotes?.
b) En caso de que la respuesta sea negativa indique en cules no se observa este efecto
c) De cada lote cules resultados eligi para efectuar sus clculos? E indique el criterio en que
basa su eleccin
d) Cul es la cantidad de UFC/ 100 mL de agua en cada uno de los lotes?
Cul es el NMP/ 100 mL de muestra? Que result en cada lote
Cul de los productos tiene mayor capacidad de desinfeccin?
P8 Efecto de los factores qumicos y fsicos
1. De acuerdo a su temperatura ptima de crecimiento y necesidades de oxgeno, Cmo se clasifican
las bacterias?
2. Define los siguientes trminos:
a) Periodo trmico mortal
b) Punto trmico mortal
c) Psicrfilo
d) Mesfilo
e) Termfilo
f) Hipertermfilo
g) Halfilo
h) Xerfilo
i) Osmfilo
3. Qu efecto tiene el pH sobre el crecimiento de los microorganismos?
4. Cmo afecta la presin osmtica a los microorganismos?
5. Cmo pueden regular este efecto algunos microorganismos?.
6. Qu dao causa la luz ultravioleta a los microorganismos? Esquematiza
7. Qu mecanismos utiliza la bacteria para revertir el efecto de la luz UV?
8. Define los siguientes trminos y da un ejemplo de cada uno de ellos
Antibitico
a) Biocida
b) Bioesttico
c) Desinfectante
d) Antisptico
e) Agente qumioteraputico
9. Investiga 4 microorganismos productores de antibiticos, mencionando el antibitico que producen
y como acta
10. Qu es la resistencia a antibiticos? Y Cmo se transmite?
11. Qu es la concentracin mnima inhibitoria?
12. En qu consiste la tcnica de difusin en placa?

P9 Metabolismo microbiano.
1.Qu es una enzima Cmo actua?
2. nvestiga el fundamento de las pruebas bioqumicas empleadas en la prctica.
3.Consulta una tabla que contenga las pruebas bioqumicas utilizadas para la identificacin de las
bacterias inoculadas.

P10 Estudio de la diversidad microbianaa en un microambiente.(Columna de

Winogradky)

1.Describe la importancia ecolgica de los protozoarios

2.Qu se requiere para cultivar protozoarios parsitos?
3.Qu se utiliza para inhibir el movimiento de los protozoarios y facilitar su observacin en
preparaciones en fresco?
4.Cuntos tipos de rganos de locomocin presentan los protozoarios?
5Cules son las estructuras que se observan con los siguientes colorantes: a) Rojo neutro diluido b)
Lugol c) Verde de metilo d) Solucin de Noland
6.Esquematiza 3 protozoarios (un sarcodario, un flagelado y un ciliado) e indica en cada uno de ellos las
estructuras que se observan
7. Describe las caractersticas de las algas
8.Cul es la diferencia fundamental de las algas con los hongos y los protozoarios?
9.Describe la importancia ecolgica e industrial de las algas
10.Cules son los componentes que se utilizan en los medios de cultivo para algas
11.Indica el nombre cientfico de 5 algas y esquematzalas.

P11 Nutricin Microbiana.

1.Cmo se clasifican los microorganismos de acuerdo a la fuente de carbono que utilizan?

2.Cmo se clasifican los microorganismos de acuerdo a la fuente de energa que utilizan?
3.Define microorganismo auxtrofo y da algunos ejemplos
4.Cules son los microorganismos prototrofos?
5.Indica como son utilizados por los microorganismos los siguientes compuestos qumicos: a)
Peptona de carne, b) Extracto de levadura, c) NaCl, FeSO4, d) MgSO4, e) (NH4)2SO4, f)
K2HPO4, g) KH2PO4, h) glucosa, i) sacarosa j) almidn.
6.Investiga las necesidades nutricionales de los siguientes microorganismos:
Escherichia coli Micrococcus luteus Azotobacter sp Rhodotorula Aspergillus Nger Spirulina sp
e indica cules son auttrofos o hetertrofos Cules son fottrofos, cules quimitrofos