Demanda Bioqumica de Oxignio (DBO)

PREPARO DE SOLUES:

o Soluo de tiossulfato de sdio (0,025 M)

Dissolver 6,205 g de Na2S2O3.5H2O em gua destilada. Adicionar 0,4 g de NaOH slido soluo
e completar o balo volumtrico para 1000 mL com gua destilada. Esta soluo deve ser
mantida ao abrigo de luz.

o Soluo indicadora de amido

Dilua 1g (pese na balana analtica) de amido solvel em pequena quantidade de gua

destilada, reserve.

Logo aps, coloque 105 mL de gua destilada para ferver (use um bquer para aquecer a gua
na chapa aquecedora).

Aps a fervura, despeje o preparo de amido reservado na gua que est fervendo. Deixar
ferver por 5 minutos.

Aps resfriamento, filtrar a soluo (no funil de vidro) utilizando algodo.

Essa soluo no pode ser reaproveitada. Aconselha-se preparar essa soluo assim que se
chega ao laboratrio, pois a filtrao demorada.

Soluo tampo de fosfatos

Dissolver 4,25 g de KH2PO4 (fosfato de potssio monobsico anidro) + 10,88 g de K2HP4 (fosfato
de potssio dibsico anidro) + 16,55 g de Na2PO4.7H2O (fosfato de sdio heptahidratado) +
0,85 g de NH4Cl (cloreto de amnio anidro) em 500 mL de gua destilada. O pH da soluo
deve ser 7,2 sem requerer qualquer ajuste (caso necessrio, use NaOH ou HCl 10%). Colocar
em frasco de vidro e envolver com papel alumnio. Conservar em geladeira.

OBS: caso no tenha os reagentes acima para preparo da soluo tampo de fosfatos, uma
outra alternativa fazer essa soluo com os seguintes reagentes e procedimentos:

Soluo A: Dissolver 1,42 g de fosfato de sdio dibsico anidro (Na2HPO4) em 100 mL de gua
destilada. Pese essa massa de 1,42g em um bquer na balana analtica e use uma proveta
para adicionar os 100mL de gua destilada. Essa soluo deve ter pH 7,4.

Para ajustar o pH, preparar a seguinte soluo (B). Dissolver 1,38 g de fosfato de sdio
monobsico monohidratado (NaH2PO4.H2O) em 100 mL de gua destilada. Pese essa massa de
1,38 g em um bquer na balana analtica, use um pouco de gua destilada para dissolver,
transfira para um balo volumtrico de 100 mL e complete o volume com gua destilada.

Correo do pH da soluo A: colocar a soluo A em um bquer e agitar com agitador

magntico. Fazer a leitura do pH. Durante a leitura, deve-se parar a agitao. Adicionar soluo
B e agitar novamente. A quantidade de soluo B que foi utilizada quando o pH estava maior
que 9 foi em torno de 8 pipetas de pasteur, logo, coloque de primeira umas 5 pipetas e agite.
Parar a agitao novamente e fazer leitura do pH. Repetir o procedimento at que o pH seja
7,4 colocando de 2 em 2 pipetas. No precisa ser exatamente 7,40 pode ser 7,42 ou 7,43 o que
no pode ser 7,49, porque a quase 7,5.

Soluo de sulfato manganoso

Dissolver 480 g de MnSO4.4H2O ou 400 g de MnSO4.2H2O ou 364 g de MnSO4.H2O em gua

destilada, filtrar com bomba vcuo e completar volume com gua destilada at 1 L.

Soluo sulfato de magnsio

Dissolver 11,25 g de MgSO4.7H2O (pegar com tcnico dos laboratrios da engenharia qumica)
em gua destilada e completar volume at 500 ML. Colocar em frasco de vidro e envolver com
papel alumnio. Conservar em geladeira.

Soluo cloreto de clcio

Dissolver 13,75 g de CaCl2 anidro em gua destilada e completar volume at 500 ML. Colocar
em frasco de vidro e envolver com papel alumnio. Conservar em geladeira.

Soluo cloreto frrico

Dissolver 0,125 g de FeCl3.6H2O (cloreto frrico hexahidratado) em gua destilada e completar

volume at 500 ML. Colocar em frasco de vidro e envolver com papel alumnio. Conservar em
geladeira.

Soluo nutriente (gua de diluio)

1. Deixar gua destilada aerando com bomba de aqurio, 24 horas antes da
anlise. Calcular a quantidade total de gua destilada necessria (cada frasco
necessita de 350 ML de gua destilada). SEMPRE QUE FOR TRANSFERIR A
GUA AERADA PARA OUTRO FRASCO, TRANSFERIR PELA PAREDE PARA EVITAR
A FORMAO DE BOLHAS, OU SEJA, A EVAPORAO DO OXIGNIO
DISSOLVIDO NA GUA.
2. Adicionar 1 mL das solues de sulfato de magnsio, cloreto de clcio, cloreto
frrico e soluo tampo de fosfato, para cada 1000 mL de gua destilada
utilizada. TODAS ESSAS SOLUES ESTO GUARDADAS NA GELADEIRA DO
LABORATRIO DE QUMICA.
3. Homogeneizar a soluo final e deixar descansar por 30 minutos.

REALIZAO DA ANLISE

1. Retirar 350 mL de amostra mais 350 mL de soluo nutriente, homogeneiz-las

e transferir para dois frascos de Winkler, formando 2 amostras, sendo uma
para anlise imediata e outra para incubao por 5 dias em geladeira BOD, a
20C. OBS: FAZER EM TRIPLICATA.
 2. Encaminhar os frascos para encubao. Seguir os prximos procedimentos
para os frascos que no sero encubados.
3. Determinar a concentrao de oxignio dissolvido (OD0) do primeiro frasco
pela metodologia de OXIGNIO DISSOLVIDO. Anotar o volume de tiossulfato de
sdio gasto na titulao. A SOLUO DE TIOSSULFATO ENCONTRA-SE EM UM
FRASCO DENTRO DO ARMRIO DA EQUACIONE NO LABORATRIO.
4. Aps o perodo de incubao de 5 dias, determinar a concentrao de oxignio
dissolvido (OD5) da segunda amostra, tambm pela metodologia de OXIGNIO
DISSOLVIDO. Anotar o volume de tiossulfato de sdio gasto na titulao.
5. Calcular a DBO segundo as equaes abaixo:

V T *M *F *8000
OD(mL/L) = Va

(OD0 OD5 )*V F

DBO5 (mL/L) = Va

OD0: mg/L de OD da amostra diluda imediatamente aps o preparo;

OD5: mg/L de OD da amostra diluda aps 5 dias de incubao a 20C;

Va: Volume da amostra (ML);

VF: Volume do frasco (ML).

OXIGNIO DISSOLVIDO (OD)

1) Coletar as amostras em frasco Winkler (frasco de vidro mbar) sem deixar formar
bolhas;
2) Adicionar imediatamente, ainda no local de coleta, 2 mL de soluo de sulfato
manganoso (EST NA PORTA DA GELADEIRA) e, em seguida, 2 mL de soluo reagente
lcali-iodeto azida (EST NA PORTA DA GELADEIRA), tendo o cuidado de verter
lentamente os reagentes na borda do frasco e no trocar a ordem dos reagentes.
Misturar, invertendo repetidamente o frasco. Aguardar o precipitado sedimentar.
PARA DBO: esse passo deve ser feito no laboratrio, no havendo necessidade de
adio no momento da coleta.
3) Ao chegar no laboratrio, acrescentar 2 mL de soluo de cido sulfrico 1:1 (A
SOLUO DE C. SULFRICO EST ARMAZENADA EM UM FRASQUINHO NO ARMRIO
DA EQUACIONE NO LABORATRIO), com cuidado (no tem problema se transbordar).
Fechar o frasco e agitar 30 vezes. Envolver a parte superior dos frascos com plstico
filme e deixar por 30 minutos no escuro.
4) Aps os 30 minutos, transferir 50 mL de amostra para um erlenmeyer (FAZER EM
TRIPLICATA), com auxlio de uma proveta de 50 mL. Fazer ambiente na proveta e nos
erlenmeyers.
5) Titular a amostra com soluo de tiossulfato de sdio 0,025 N (EST NO ARMRIO)
at a deteco da cor amarelo palha. Aps a deteco da colorao, pingar 5 gotas da
soluo indicadora de amido, a soluo apresentar colorao azulada. Continuar a
 titulao at o desaparecimento da cor azul.
6) Anotar o volume de tiossulfato gasto na titulao.

O Clculo do oxignio dissolvido feito pela seguinte equao:

(T *N *f *8*1000)
OD = (50*[(V f rasco 4)/V f rasco ]

OD = oxignio dissolvido

T = volume de tiossulfato gasto na titulao

N = normalidade do tiossulfato de sdio;

f = fator de correo do tiossulfato;

8 = equivalente grama do oxignio;

50 = volume de amostra usada na titulao

V f rasco = volume do frasco de Winkler (300 mL)

1000 = correo do volume por litro.