Universidad de Santiago de Chile

Facultad de Qumica y Biologa

Departamento de Biologa
CURSO DE GENTICA

Material gentico y su organizacin

Dr. Renato Chvez R

Laboratorio de Microbiologa Bsica y Aplicada
Desde el cromosoma al ADN: empaquetamiento de cromatina
 Requerimientos para un material hereditario

- Debe ser duplicable, a fin de transmitir el material a la descendencia

- Relativamente estable
- Debe contener informacin

Conoce Ud. alguna molcula que cumpla estas caractersticas?

 Es el DNA la molcula transmisora de las caractersticas
genticas??
El experimento de Griffith (1928): Demostracin de que existe una entidad
biolgica de naturaleza qumica que transmite la herencia.
Suponga que Ud. es un eminente cientfico de los aos 1940, y en esa
poca, ud. sabe lo sgte:

- Ud. conoce el experimento de Griffith.

- Ud. conoce las macromolculas qumicas bsicas que forman una
clula.

Elabore una idea que le permita discriminar cual es la molcula

transmisora de la herencia.
Avery et al (1944).
Sugieren por descarte
que el ADN sera la
molcula de la herencia
Harsey y Chase (1952). La prueba directa usando radioactividad
Qu significa esto en trminos
qumicos?

5-ATTGCGGAATGC-3
Estructura qumica del ADN:

Se requiere voluntario(a)
 Qumica de un nucletido
NH2
N
O N
-
O P O CH2 N
O N
O- H H
H
OH OH

Pentosa Base

Fosfato Nuclesido

Nucletido
 Las bases nitrogenadas
Purinas Pirimidinas
6 7 4
5
1 N 3
N 5
N 8
2 2 6
4 NH
N N
3 9 1
 Purinas Pirimidinas

NH2 NH2

N N
N Citosina
Adenina
NH O N
N
O

HN Uracilo
O
O N
N
HN
Guanina O
H 2N N NH CH3
HN Timina

O N
 Nuclesidos
Unin de una base a una pentosa a travs de un enlace de
tipo -N-glicosdico:
H2 N Enlace H2 N
N -N-glicosdico
N N
N
HOCH2 N N
O HOCH2 N N
O

OH OH
OH H
Adenosina Desoxiadenosina
(pentosa es ribosa) (pentosa es desoxirribosa)

Purinas: enlace entre carbono anomrico (1) y N9 de la base

 Nuclesidos
Unin de una base a una pentosa a travs de un enlace de
tipo -N-glicosdico:

NH2 NH2
N N
O O
HOCH2 N
O HOCH2 N
O

OH OH OH H

Citidina Desoxicitidina

Pirimidinas: enlace entre carbono anomrico (1) y N1 de la base

 Numeracin Nomenclatura

H 2N
6 Base Nuclesido
7N N1
5
5' 8 4 2 Adenina Adenosina
HOCH2 N9 N Guanina Guanosina
O 3
4' 3' 2' 1'

Citosina Citidina
OH OH
Uracilo Uridina
Timina Timidina
 Polifosfatos en nucletidos
NH2

O
N
N 5-Adenosina
-
O P O CH2
O N monofosfato, AMP
N
-
O

OH OH NH2
N
O O N 5-Adenosina
- O P O P O CH2
- -
O N
N difosfato, ADP
O O

OH OH NH2
N
O O O N
-
5-Adenosina
O P O P O P O CH2 N
O- -
O -
O
O N trifosfato, ATP

OH OH
 NH2
N
N
O P O CH2 N
O N
-
O NH2
N
O N
OH
O P O CH2 N
O N
-
O NH2
N
O N
OH
O P O CH2 N
Enlaces -
O N
fosfoster O
Enlace
O OH -glicosdico
Extremo 5
O
H

HOCH2
N N

N
H Polinucletido
N N
O H

-
O O
P H H
-
N
O
O
N
H2C Forma de representacin de
N O
O polinucletidos
-
O O
P O
-
O H3C H

Enlace
O N 5- GCTAG - 3
H2C N O
fosfoster O

-
O O H
H N
P
-
O N
O N

H2C N N
O

-
O O
P O
- H
O N
O N
H
N
H2C N N
O H

Extremo 3 OH
 Regla de Chargaff

Conclusiones?
-La razn purina/pirimidina es 1!!!! (A+G=C+T)
-En todos los organismos estudiados, la proporcin
molar de A=T y de G=C
 Descubrimiento de estructura del ADN

Cristalografa de rayos X:

- Es una hlice!!!
- Periodicidades a 3,6 nm y 0,34 nm..

3 cosas se juntaron:
-La regla de Chargaff (proporcin)
-Los datos cristalogrficos: se deduce que es
doble hlice y con los nucletidos hacia
adentro y ribosa-fosfato hacia afuera
Puente de hidrgeno entre bases nitrogenadas
 H O

5 -
O O H
N
O
3
N
P O N CH2
- H
O N O
O O

ADN: Polinucletido
N O-
H
N P
H 2C N N
O H O O-

-
O O O
N
N O
en doble hlice
H H CH2
P N
-
O N N O
O H O-
N
N P
H 2C H H
N O O O-
O

- O
H
N
N
N O 5-CATTGCGGAATGCC-3
O H CH2
-
O
P
H 3C
O
H
N N 3-GTAACGCCTTACGG-5
O
O N O-
P
H 2C N O H 3C O O-
O

O
-
O O H O
H N N CH2
P N
- H
O N O O
O N O-

H 2C
O
N N
H O
P
O- Las hebras son antiparalelas
N
-
O O H O
N
O N CH2
P
- H
O N O
O N O
H O-
N P
H 2C N N
O H O O-

O
3 5
Polimerizacin del ADN
AZT: antiretroviral contra el sida

O
O
CH3
HN CH3
HN
HOCH2 O N
O HOCH2 O N
O

C C
N3

AZT, Zidovudina D4T, Estavudina

se le ocurre como podra funcionar?

REPRESENTACIONES DEL ADN
 Propiedades del ADN

1. Absorcin de luz UV a 260 nm

2. Solubilidad mejorada respecto a los nuclotidos y

nuclesidos

3. Reaccin con agentes intercalantes

4. Desnaturable por calor.

5. Tiene carga negativa

 Desnaturalizacin del ADN

Tomando en cuenta:
- La estructura de doble hlice del ADN y las fuerzas que la
estabilizan
- que los nucletidos libres tienen una absorbancia mayor
que cuando estn formando ptes de H

1) Cmo se imagina una curva de desnaturacin de ADN en

funcin de la T?
2) Cmo se imagina una curva de desnaturacin de ADN en
funcin de la temperatura y del contenido de A, C, G y T?
Desnaturalizacin del ADN
Qu es el GENOMA??
Contenido gentico de un organismo
-Eucariontes: ADN genmico, ADN organelos, EGE

-Procariontes: ADN nucleoide, plasmidios

ADN de Escherichia coli

Una sola molcula circular

cuya circunferencia mide
1 mm
 Contenido gentico de un organismo

-Procariontes: Haploides

-Eucariontes: haploides, poliploides

-Ej Diploide humano 2X23 (ploida x N de cromosomas)

Pregunta: Los organismos mas desarrollados tendrn ms o

menos ADN que los menos desarrollados?????
 Contenido gentico de un organismo
- Antiguamente se hablaba de la paradoja del valor C

Entonces, Cuales de estos organismos son ms complejos?

Complejidad del genoma

Genes/Mb
1000
Bacterias

750

500 Levadura.

Hongos
250 C. elegans.

0 Drosophila Hombre, ratn

10 100 1000
Tamao del genoma

Porqu se dar este hecho?

Topografa de genes en organismos
Un momento!!

Mucha gentica, mucho genoma, pero..

Qu es un gen????????

AYUDE AL PROFE A DIBUJAR LA

ESTRUCTURA DE UN GEN
 ESTRUCTURA DE UN GEN

Definicin molecular de un gen: secuencia de cido nucleico

necesaria para la sntesis de un producto gnico funcional (un
polipptido o un RNA).
Exones vs intrones
Unidades transcripcionales ms complejas

Splicing alternativo

Sitios de poliadenilacin
alternativos

Promotores alternativos