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PRACTICA 2: REFRACTOMETRIA
I. OBJETIVO
Conocer el fundamento del uso del instrumento y sus aplicaciones en la determinacin del ndice
de refraccin como un mtodo de anlisis en los alimentos que permita determinar el contenido
de solidos solubles, obtener aproximaciones de solidos totales, establecer relaciones tabulares o
graficas entre la gravedad especfica, grados brix, ndice de refraccin solidos solubles, solidos
totales, etc.
II. FUNDAMENTO
Cuando un rayo de luz pasa de un medio hacia otro, el rayo sufre un cambio en su direccin, es
decir este es desviado o refractado. El ngulo que forma el rayo incidente con una perpendicular
al punto de incidencia se denomina ngulo de incidencia, i; mientras que el ngulo entre la
perpendicular y el rayo refractado se denomina ngulo de refraccin, r. La relacin entre el seno
del ngulo de incidencia y el seno del ngulo de refraccin se denomina ndice de refraccin, .
Esta relacin es siempre una cantidad constante para dos medios dados, bajo condiciones de luz
de la misma longitud de onda y a la misma temperatura de lectura.
1
=
sin 2
Con el objeto de expresar los datos del ndice de refraccin de forma que permita hacer
comparaciones entre las lecturas, se ha procedido a estandarizar los valores de los factores que
afectan y se le representa en la forma siguiente:
Asimismo, con el objeto de facilitar las operaciones de lectura y de uso general se han diseado
aparatos que tienden a compensar los efectos de la temperatura y de la luz.
Existen aparatos que tienen mecanismos de compensacin cuando se hacen lecturas con luz
blanca. Los resultados en las lecturas pueden estar expresados en una escala arbitraria, en ndice
de refraccin o como contenido de solidos o grado brix.
Termometro
Papel tissue
Centrifuga y tubos de centrifugacin
Papel filtro
Vasos de 50 mL
Embudos de 60 mL
Erlenmeyers de 650 mL
Baguetas
Cocina
Probetas
3.2. Muestras:
Pulpa de tomate
Aceite comestible
Jugo de naranja simple y con diferentes concentraciones de azcar; 10%, 15%,
20%.
Solucin de azcar: 10%, 30%.
3.3. Mtodos:
a. Chequear el instrumento con agua destilada y el ndice de refraccin debe ser 1.3330 a
20C y 1.3328 a 22C.
b. Despus de limpiar cuidadosamente el prisma, colocar una gota de la sustancia problema.
Debe ser lo suficientemente transparente para que deje pasar la luz y debe tener la
temperatura de 20 C. Si la temperatura es diferente debe hacerse correcciones al ndice
de refraccin; de acuerdo a tablas para los productos especficos.
c. Preparacin de la muestra:
Pulpa y ctchup de tomate. - Los slidos totales en tomate pueden ser determinados a
partir de secado en estufa al vaco a 70 C, en estufa a presin atmosfrica a 100 105
C o calculados a partir de la gravedad especifica o ndice de refraccin del filtrado, para
lo cual se pueden establecer ecuaciones segn los rangos los rangos de contenido en
solidos totales.
Enseguida filtrar la muestra utilizando un embudo y telas de algodn (de saco de harina)
limpias y secas de 24 cm. Colocar la tela en un soporte, luego sobre ella la muestra y
recibir el filtrado en un Erlenmeyer o en un vaso.
En vez de filtrar se puede centrifugar la muestra y utilizar el sobrenadante; tomar unas
gotas y hacer la lectura con el refractmetro.
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Sustraer 0.0001 a la lectura de ndice de refraccin, cuando la sal aadida est en el rango
de 0.4 a 1.0%; 0.0002 para el rango de 1.0 a 1.4%; 0.0003 para el rango de 1.4 a 2.0%.
d. Soluciones de sacarosa
Preparamos solucin de azcar-agua para concentraciones de porcentaje en peso: 10, 20,
35, 50, 65, 80, 85.
Para todas concentraciones seguir el siguiente procedimiento para determinar el ndice de
refraccin.
Abrir el prisma. Frotar ambas caras del prisma con un pedazo de algodn humedecido
con alcohol.
Una vez limpias y secas introducir una gota de solucin de azcar y cerrar el prisma.
Girar el prisma hasta una delineacin bien definida entre el campo claro y oscuro con la
interseccin de los hilos entrecruzados.
Abrir el prisma y limpiar suavemente con algodn empapado con etanol. Una vez
hecho proceder con la otra concentracin.
Evitar restregar los prismas ni tratar de limpiarlos en seco, ya que estos se pueden
rayar y deteriorar
Todos los valores encontrados debern ser debidamente discutidos y fundamentados con los
datos tericos.
Elaborar graficas nD vs. % w de uno de los componentes para cada sistema del azcar.
Elaborar graficas Brix vs. % w de uno de los componentes para cada sistema del azcar.
V. CONCLUSIONES
VI. BIBLIOGRAFIA
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I. OBJETIVO
Conocer el fundamento del uso del instrumento y sus aplicaciones en la determinacin del
pH como un mtodo de anlisis en los alimentos que permita determinar el contenido de H+.
II. FUNDAMENTO
Otro parmetro para determinar el estado en el que se encuentran los alimentos es la acidez
titulable, es decir el contenido actual de cidos presentes en la muestra y se expresa en
porcentajes y generalmente en funcin del cido predominante en el producto a analizar.
1
= log
[ ]
Limpiar los electrodos con agua destilada, secando con papel toalla suave, sumergirlos en el
tampn fosfato, cuidando de no golpear el fondo del beacker. Realizar la lectura del pH, el cual
debiera estar alrededor de 7 considerando las correcciones por la temperatura.
De igual forma sumergir los electrodos en el tampn de biftalato de potasio, la lectura debiera
indicar pH: 4 considerando las correcciones por temperatura.
b. Dilucin de un tampn
Diluir el tampn fosfato dos veces y cuatro veces y medir los valores de pH para cada caso despus
de la calibracin del equipo.
d. pH de alimentos
Muestras liquidas: Agua de grifo, agua destilada, jugo de naranja, gaseosa, caf, leche, solucin
de 2.0 g de NaHCO3 en 100 mL de agua.
Harina de trigo: Pesar 10 g de harina de trigo en un Erlenmeyer y agregar 100 mL de agua hervida
y enfriada a 25C. Agitar hasta que las partculas estn suspendidas uniformemente, dejar en
agitacin frecuente por 30 minutos, luego dejar reposar por 10 minutos y tomar el sobrenadante
para determinar el pH.
Para carne, queso, papa, etc. Pesar 10 g de muestra ya aadir 100 mL de agua destilad, licuar o
moler en un mortero, decantar el sobrenadante y filtrar, medir el pH. Para quesos la relacin
queso: agua es de 1:3.
Llenar la bureta con NaOH 0.1 N pesar una cantidad conveniente de muestra en un beacker y
adicionar 50 mL de agua destilada, en muestras de gaseosa es necesario retirar el CO2 antes de la
titulacin.
Colocar el beacker que contiene la muestra, colocar la barra magntica cuidando que no rompa
los electrodos, registrar el pH inicial, comenzar la titulacin rpidamente hasta acercarse al pH 6,
continuar ms despacio hasta pH 7, ir agregando cada cuatro gotas y registrando el pH, hasta un
pH de 8.1, el gasto se obtiene interpolando a pH 7.
Para alimentos sin color se puede realizar una titulacin colorimtrica, utilizando como indicador
fenolftalena (2 a 3 gotas), hasta lograr un viraje tenue a rosa palido.
( )
% = ( )()(. )( ) .
100
V. CONCLUSIONES
VI. BIBLIOGRAFIA
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I. OBJETIVO
II. FUNDAMENTO
Todos los alimentos, cualquiera que sea el mtodo de industrializacin a que hayan sido
sometidos, contienen agua en mayor o menor proporcin. Las cifras de contenido en agua varan
entre un 60 y un 95% en los alimentos naturales. En los tejidos vegetales y animales, puede decirse
que existe en dos formas generales: agua libre Y agua ligada. El agua libre o absorbida, que
es la forma predominante, se libera con gran facilidad. El agua ligada se halla combinada o
absorbida. Se encuentra en los alimentos como agua de cristalizacin (en los hidratos) o ligada a
las protenas y a las molculas de sacridos y absorbida sobre la superficie de las partculas
coloidales. (Hart, 1991)
Existen varias razones por las cuales, la mayora de las industrias de alimentos determinan la
humedad, las principales son las siguientes:
Los mtodos de secado son los ms comunes para valorar el contenido de humedad en los
alimentos; se calcula el porcentaje en agua por la perdida en peso debida a su eliminacin por
calentamiento bajo condiciones normalizadas. Aunque estos mtodos dan buenos resultados que
pueden interpretarse sobre bases de comparacin, es preciso tener presente que a) algunas veces
es difcil eliminar por secado toda la humedad presente; b) a cierta temperatura el alimento es
susceptible de descomponerse, con lo que se volatilizan otras sustancias adems de agua, y c)
tambin pueden perderse otras materias voltiles aparte de agua. (Kirk et al, 1996)
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Tabla 1. Comparacin entre los mtodos para determinar humedad (Nollet, 1996).
Karl Fischer Es un mtodo estndar para Los reactivos deben ser RA para
ensayos de humedad preparar el reactivo de Fischer
Precisin y exactitud ms altos que El punto de equivalencia de
otros mtodos titulacin puede ser difcil de
Es til para determinar agua en determinar
grasas y aceites previniendo que la El reactivo de Fischer es inestable y
muestra se oxide. debe estandarizarse in situ.
Una vez que el dispositivo se El dispositivo de la titulacin debe
monta la determinacin toma protegerse de la humedad
pocos minutos atmosfrica debido a la excesiva
sensibilidad del reactivo a la
humedad.
El uso de la piridina que es muy
reactiva.
3.3. Mtodos
a. Mtodo por secado en estufa (Nielsen, 2003)
Retirar de la estufa, tapar, dejar enfriar en el desecador y pesar tan pronto como se equilibre con
la temperatura ambiente. Repetir hasta peso constante.
Pesar de 0.3 a 0.5 g de muestra y colocarlos en un platillo de aluminio formando una capa lo ms
homognea posible. Colocar el platillo con muestra en el espacio destinado para ello en la
termobalanza y encender el equipo. Registrar la prdida de peso o en su caso, el porcentaje de
humedad (segn el equipo) despus de 10-15 min o bien cuando ya no haya variacin en la lectura.
Nota: Dependiendo del equipo, es necesario regular la intensidad de la lmpara para evitar que la
muestra se queme y el resultado sea errneo.
Todos los valores encontrados debern ser debidamente discutidos y fundamentados con los
datos tericos.
V. CONCLUSIONES
VI. BIBLIOGRAFIA
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I. OBJETIVO
II. FUNDAMENTO
Las cenizas de un alimento son un trmino analtico equivalente al residuo inorgnico que queda
despus de calcinar la materia orgnica. Las cenizas normalmente, no son las mismas sustancias
inorgnicas presentes en el alimento original, debido a las perdidas por volatilizacin o a las
interacciones qumicas entre los constituyentes.
En los vegetales predominan los derivados de potasio y en las cenizas animales los del sodio. El
carbonato potsico se volatiliza apreciablemente a 700C y se pierde casi por completo a 900C.
El carbonato sdico permanece inalterado a 700C, pero sufre prdidas considerables a 900C.
Los fosfatos y carbonatos reaccionan adems entre s. (Hart, 1991)
Notas:
a) Los productos que contienen mucha agua se secan primero sobre un plato elctrico
caliente o al bao Mara.
b) La consideracin principal es que el producto no desprenda humos.
c) En general, la temperatura adecuada de la mufla son 500C. Sin embargo, los cloruros,
pueden volatilizarse a esta temperatura.
d) Las cenizas se utilizan muchas veces para la determinacin de constituyentes
individuales, por ejemplo, cloruros, fosfatos, calcio y hierro. (Kirk et al, 1996)
Mechero o cocinilla
Desecador
Balanza analtica.
Muestras de alimentos.
3.2. Mtodos
Pesar de 3 a 5 g de muestra en el crisol (la muestra no debe sobrepasar la mitad del crisol)
previamente pesado. Calcinar la muestra, primeramente, con un mechero o cocinilla en la
campana hasta que no se desprendan humos y posteriormente meter a la mufla 2 hrs. cuidando
que la temperatura no pase de 550C. Repetir la operacin anterior si es necesario, hasta conseguir
unas cenizas blancas o ligeramente grises, homogneas. Enfriar en desecador y pesar.
I. OBJETIVO
II. FUNDAMENTO
Cuando una solucin alcalina de hidrxido de cobre se calienta se convierte en oxido cprico
insoluble de color negro (Reaccin I), pero cuando est presente un agente reductor (algunos
azucares), el hidrxido de cobre es reducido a oxido cuproso (cambio en el estado de oxidacin
del cobre desde Cu+2 a Cu+1) producindose un precipitado insoluble de color rojo ladrillo
(Reaccin II). Estos cambios se indican en las siguientes reacciones:
Otros agentes reductores como los fenoles, aminofenoles, hidracinas pueden reducir al hidrxido
de cobre. En anlisis de alimentos el rango de confianza es bastante bueno, razn por la que se le
usa mucho en la determinacin de azucares reductores.
Preparacin de la muestra.
Procedimiento
Cuando las muestras son turbias o muy coloridas se requiere de clarificacin, para lo cual
tomar una alcuota (entre 10 y 50 mL, dependiendo de la cantidad de azcares que
contienen), y colocar en un matraz aforado de 100 mL. Diluir aproximadamente 50 mL y
tratar con 1mL de solucin saturada de acetato de plomo, diluir al volumen y filtrar sobre
papel Whatman N 1, recuperando una solucin clara. Para eliminar el exceso de plomo
adicionar oxalato de sodio o potasio slido, mezclar y filtrar nuevamente, descartando los
primeros mL.
IV. CALCULOS
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El gasto de sulfato ferroso ser equivalente a la cantidad de dicromato en exceso, por tanto, si lo
restamos de 20 mL (cantidad de dicromato adicionada) obtendremos el gasto real que sirvi para
oxidar el cobre (Cu2O).
V. RESULTADOS Y DISCUSION
Exprese los resultados en base al azcar reductor que este en mayor cantidad en la muestra.
Compare los resultados obtenidos en el laboratorio con lo reportado en la bibliografa.
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFIA
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I. OBJETIVO
II. FUNDAMENTO
Este mtodo es relativamente rpido, se usa una solucin alcalina de Cu+2 formando un complejo
con tartrato y titulando con una solucin de azcar reductor, formando Cu2O y el cido del azcar.
El indicador oxido reductor es el azul de metileno, su forma reducida es incolora. Una solucin
hirviente es usada por dos motivos: para aumentar la velocidad de la reaccin de xido reduccin
y para prevenir el ingreso de oxgeno, que puede oxidar al azul de metileno, por la formacin de
vapor de aguade la ebullicin.
Se hace una primera titulacin, donde es obtenido el contenido de azucares reductores. Una
segunda porcin es calentada con cido concentrado, que hidroliza a los azucares no reductores
formando azucares reductores. La titulacin de esta segunda porcin determina los azucares
totales.
Cuando una solucin alcalina de hidrxido de cobre se calienta se convierte en oxido cprico
insoluble de color negro (Reaccin I), pero cuando est presente un agente reductor (algunos
azucares), el hidrxido de cobre es reducido a oxido cuproso (cambio en el estado de oxidacin
del cobre desde Cu+2 a Cu+1) producindose un precipitado insoluble de color rojo ladrillo
(Reaccin II). Estos cambios se indican en las siguientes reacciones:
Otros agentes reductores como los fenoles, aminofenoles, hidracinas pueden reducir al hidrxido
de cobre. En anlisis de alimentos el rango de confianza es bastante bueno, razn por la que se le
usa mucho en la determinacin de azucares reductores.
3.2. Materiales
Erlenmeyers de 250 mL y 125 mL.
Balones de 250 mL y 100 Ml
Pipetas de 5, 10 y 25 mL.
Mechero bunsen o cocinilla, malla y trpode.
Buretas de 50 mL y soporte universal.
Bao maria a 68 70 C
Termometros
Embudos
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Probeta de 10 mL.
3.3. Procedimiento
a. Preparacin de la muestra
Pesar o pipetear en un beacker de 150 mL una cantidad de muestra suficiente para proporcionar
250 mL de una solucin que contenga cerca de 1% de azucares, y agrega 50 mL de agua destilada.
Agitar con una bagueta de vidrio, dejando la bagueta dentro del beacker, verificar el pH de la
solucin y neutralizar hasta pH 7 adicionando NaOH 0.1 N, agitando con la bagueta despus de
cada adicin, pasar la solucin neutralizada a un baln de 250 mL. Lavar el beacker con agua
destilada tres veces y colocar el agua de lavado en el baln cuidando de no sobrepasar el aforo.
Preparar el licor de Fehling, mezclando partes iguales de las soluciones A y B (debe ser preparado
al momento de la titulacin) en un Erlenmeyer de 500 mL Preparar un volumen suficiente para
todas las titulaciones que se van a realizar. El licor de Fehling tiene un ttulo de 1 mL= 5 mg de
glucosa.
Pipetear 10 mL (u otra cantidad) de licor de Fehling en un Erlenmeyer de 125 o 250 mL. Aadir
igual volumen de agua destilada.
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Usando un mechero de Bunsen o una cocinilla, calentar el licor de Fehling hasta que hierva.
Agregar aproximadamente 5 mL de la solucin de la bureta, dejar hervir nuevamente y adicionar
3 a 4 gotas de la solucin de azul de metileno 1%. Continuar con la titulacin agregando cada vez
0.5 mL de la solucin de la bureta, mantener el licor hirviendo y titular rpidamente, el tiempo de
titulacin no debe sobrepasar los 3 minutos.
Cuando el punto final de la titulacin este prximo, el color azul de la espuma sobrenadante
comienza a desaparecer, dejando ver ms claramente un precipitado rojo ladrillo del xido
cuproso. Desde este punto en adelante continuar con la titulacin gota a gota.
Repetir el ensayo agregando desde el inicio el volumen gastado menos 1 Ml, hacerlo hervir y
cuando esto comience, agregar 3 a 4 gotas de azul de metileno y continuar con la titulacin gota
a gota hasta la desaparicin del color azul del indicador.
V. CONCLUSIONES
VI. BIBLIOGRAFIA
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I. OBJETIVO
Introducir una tcnica muy comn, simple y econmica, que deber ser utilizada con frecuencia
por el analista de alimentos.
II. FUNDAMENTO
En el trabajo de rutina se determina mucho ms frecuentemente la protena total que las protenas
o aminocidos individuales. En general, el procedimiento de referencia Kjeldahl determina la
materia nitrogenada total, que incluye tanto las no protenas como las protenas verdaderas
(Aurand et al, 1987)
El amoniaco en el destilado se retiene o bien por un cido normalizado y se valora por retroceso,
o en cido brico y valora directamente. El mtodo Kjeldahl no determina, sin embargo, todas las
formas de nitrgeno a menos que se modifiquen adecuadamente; esto incluye nitratos y nitritos.
(Pearson, 1993)
Mtodo de Kjeldahl
DIGESTION:
Ajustar la unidad de evacuacin de gases con las juntas colocadas sobre los tubos de digestin.
Accionar la trampa de succin de gases antes de que se produzcan stos. Calentar hasta total
destruccin de la materia orgnica, es decir hasta que el lquido quede transparente, con una
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coloracin azul verdosa. Una vez finalizada la digestin, sin retirar la unidad de evacuacin de
gases, colgar el portatubos para enfriar.
Despus del enfriamiento, terminar la digestin con la tecla stop y desconectar la trampa.
DESTILACIN:
Conectar el equipo de destilacin y esperar unos instantes para que se genere vapor.
Colocar el tubo de digestin con la muestra diluida y las sales disueltas en un volumen no mayor
de 10 mL de agua destilada, en el aparato de destilacin cuidando de introducir la alargadera hasta
el fondo de la solucin.
Presionar el botn para adicionar sosa al 36% (hasta 40 mL aproximadamente). Colocar la palanca
de vapor en posicin ON hasta alcanzar un volumen de destilado en el matraz Erlenmeyer de
100-150mL, lavar la alargadera con agua destilada, recoger el agua de lavado sobre el destilado.
Una vez finalizada la destilacin, regresar la palanca de vapor a la posicin original.
Titular el exceso de cido (en el caso de recibir el destilado en HCl 0.1N) con una solucin de
NaOH 0.1 N. En el caso de recibir con cido brico, con una solucin de HCl 0.1N. Calcular el
% de protena considerando las reacciones que se llevan a cabo.
I. OBJETIVO
II. FUNDAMENTO
Los lpidos, junto con las protenas y carbohidratos, constituyen los principales componentes
estructurales de los alimentos. (Nielsen, 1998).
Los lpidos se definen como un grupo heterogneo de compuestos que son insolubles en agua
pero solubles en disolventes orgnicos tales como ter, cloroformo, benceno o acetona. Todos los
lpidos contienen carbn, hidrgeno y oxigeno, y algunos tambin contienen fsforo y nitrgeno
(Aurand et al, 1987). Los lpidos comprenden un grupo de sustancias que tienen propiedades
comunes y similitudes en la composicin, sin embargo algunos, tales como los triacilgliceroles
son muy hidrofbicos. Otros, tales como los di y monoacilgliceroles tienen movilidad hidrofbica
e hidroflica en su molcula por lo que pueden ser solubles en disolventes relativamente polares
(Nielsen, 1998)
El contenido total de lpidos se determina comnmente por mtodos de extraccin con disolventes
orgnicos (por ejemplo Soxhlet, Goldfish, Mojonnier), sin embargo tambin puede cuantificarse
por mtodos de extraccin que no incluyen disolventes (por ejemplo, Babcock, Gerber) y por
mtodos instrumentales que se basan en propiedades fsicas o qumicas de los lpidos (por
ejemplo, infrarrojo, densidad y absorcin es rayos X) (Nielsen, 2003).
El mtodo Soxhlet, Es una extraccin semicontinua con un disolvente orgnico. En este mtodo
el disolvente se calienta, se volatiliza y condensa goteando sobre la muestra la cual queda
sumergida en el disolvente. Posteriormente ste es sifoneado al matraz de calentamiento para
empezar de nuevo el proceso. El contenido de grasa se cuantifica por diferencia de peso (Nielsen,
2003)
3.2. Procedimiento
Colocar a peso constante un matraz bola de fondo plano con perlas o piedras de ebullicin en la
estufa a 100C, aproximadamente 2 hrs.
Una vez extrada toda la grasa, quitar el cartucho con la muestra desengrasada, seguir calentando
hasta la casi total eliminacin del disolvente, recuperndolo antes de que se descargue. Quitar el
matraz y secar el extracto en la estufa a 100C por 30 min., enfriar y pesar.
I. OBJETIVO
II. FUNDAMENTO
Las reacciones qumicas que se dan en los seres vivos no podran tener lugar sin la presencia de
los enzimas. Estas macromolculas, que generalmente son protenas, catalizan las reacciones
bioqumicas, permitiendo que los sustratos se conviertan en los productos que necesita la clula.
Como todo catalizador, los enzimas no se consumen en las reacciones que catalizan, pero a
diferencia de otros catalizadores de naturaleza inorgnica, las reacciones que catalizan son muy
especficas: slo interaccionan con determinados sustratos, y slo facilitan el curso de
determinadas reacciones.
Un enzima que podemos encontrar en todos los seres vivos es la catalasa, necesaria para
descomponer el perxido de hidrgeno, un compuesto txico, que se produce durante el
metabolismo celular.
2 2 +
3.2. Procedimiento:
Llenar los tubos de ensayo con la disolucin correspondiente y con mucho cuidado para que no
entre aire introducirlos por la parte estrecha del embudo.
A continuacin, medir el volmen de oxgeno, llenando el tubo de ensayo con agua hasta la marca
realizada, con ayuda de una pipeta de 10 ml.
Repetir el experimento, con papa escaldada y sin papa, este ultimo servir de control.
4. RESULTADOS Y DISCUSION
Expresar los resultados en funcin al volumen desplazado por el oxgeno como una medida de
la actividad enzimtica de la catalasa.
5. CONCLUSIONES
6. BIBLIOGRAFIA
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I. OBJETIVO
II. FUNDAMENTO
El mtodo de titulacin visual se basa en la reduccin del colorante 2,6 diclorofenolindofenol por
una solucin de cido ascrbico. El contenido de cido ascrbico es directamente proporcional a
la capacidad de un extracto de la muestra para reducir una solucin estndar de colorante
determinada por titulacin.
Separar el material en dos porciones, una pequea (muestra fresca) y otra de casi 2 kg
que ser escaldada.
Pesar y escaldar o blanquear la muestra en un recipiente con agua hirviente por dos
minutos.
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Separar una alcuota (aprox. 200 mL) del agua del blanqueo y enfriarla
inmediatamente. Toda la muestra blanqueada deber tambin ser enfriada
inmediatamente en agua corriente y/o bao maria.
Escurrir el agua del producto blanqueado y pesar.
Hacer determinaciones de cido ascrbico por duplicado en:
Producto fresco
Producto blanqueado
Agua de blanqueado
Blanco general
3.2. Preparacin de los estndares de trabajo
Disolver 100 mg de cido ascrbico en 100 mL de una solucin de cido oxlico al 0.5%
en una fiola de 100 mL. Esta solucin contiene 0.1 % de cido ascrbico y es inestable
por lo que deber utilizarse inmediatamente.
Disolver 100 mg de 2,6 diclorofenolindofenol en 100 mL de agua destilada. Utilizar agua
destilada hirviente y enrazar a 100 mL cuando este fra. Almacenar en botella de color
oscuro y en refrigeracin.
Tomar 1 mL de la solucin del punto (3.1.) y colocarla en un Erlenmeyer de 50 Ml.
Agregar 30 mL de una solucin de cido oxlico al 0.5 % y titular con la solucin de 2,6
diclorofenolindofenol.
Titulacin: Para la titulacin utilizar una microbureta de aproximadamente 10 mL la cual
contendr el 2,6 diclorofenolindofeno. El final de la titulacin ser indicado por un
cambio de color rosado dbil; color que debe persistir por 10 15 segundos.
Lecturas a mayor tiempo dan coloracin algo ms rosadas la cual es una fuente de error. La
solucin 2,6 diclorofenolindofenol deber ser estandarizada cada dia.
Calculo del equivalente del cido ascrbico por mL de solucin 2,6, diclorofenol
indofenol.
X mg de cido ascrbico por Y mL de solucin 2,6 diclorofenolindofenol.
3.3. Determinacin de vitamina C reducida por titulacin con 2,6 diclorofenolindofenol.