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Diversidade de fungos filamentosos em solo de

monocultivo de erva-mate, Ilex paraguariensis St. Hil.

ISSN 0103-989X
Licenciado sob uma Licena Creative Commons
Diversity of filamentous fungi in soil with monoculture
of yerba mat, Ilex paraguariensis St. Hil.

Larissa Rolim Borges[a], Sonia Maria Noemberg Lazzari[b], Ida Chapaval Pimentel[c], Meiriana Xavier Vila Nova[d]

[a]
Biloga, Doutora, Laboratrio de Entomologia do Instituto Agronmico de Pernambuco, Recife, PE - Brasil, e-mail:
larissarolimborges@gmail.com
[b]
Biloga, Ph.D., Departamento de Zoologia da Universidade Federal do Paran, Curitiba, PR - Brasil, e-mail: lazzari@ufpr.br
[c]
Engenheira agrnoma, Doutora, Departamento de Patologia Bsica da Universidade Federal do Paran, Curitiba, PR -
Brasil, e-mail: ida@ufpr.br
[d]
Biloga, Doutora, Departamento de Micologia da Universidade Federal de Pernambuco, Recife, PE - Brasil, e-mail:
meiriana_vilanova@yahoo.com.br

Resumo
O solo um dos principais habitats para o desenvolvimento de populaes de micro-organismos, incluindo
fungos. O presente trabalho teve como objetivo isolar e identificar os fungos que ocorrem em monocultivo
de erva-mate, no municpio de Campo Alegre, SC, Brasil, visando a detectar a ocorrncia de grupos patogni-
cos para a cultura e de entomopatgenos potenciais para o controle de pragas. As amostras de solo foram co-
letadas mensalmente durante o perodo de novembro de 2005 a outubro de 2006. Os gneros identificados
foram: Filo Deuteromycota Aspergillus, Penicillium, Acremonium, Cladosporium, Fusarium e Trichoderma;
Filo Ascomycota Paecilomyces (anamorfo do gnero Melanospora), Metarhizium, Gliocladium (anamorfo
do gnero Nectria) e Lecanicillium e Filo Zygomycota Rhizopus. Os gneros Aspergillus e Penicillium foram
mais frequentes e os nicos que persistiram no solo do erval em todas as estaes do ano.

Palavras-chave: Aquifoliaceae. Comunidade fngica. Solo.

Abstract
The soil is one of the most important habitats for microorganisms, including fungi. The present research aimed
to isolate and identify fungi occurring in the soil of an area with monoculture of yerba mat, in the county of
Campo Alegre, State of Santa Catarina, Brazil, in order to evaluate the presence of potential pathogenic and en-
tomopathogenic groups. Soil samples were collected in a period from November/2005 to October/2006. The fol-
lowing genera were identified: Phylum Deuteromycota Aspergillus, Penicillium, Acremonium, Cladosporium,
Fusarium, and Trichoderma; Phylum Ascomycota Paecilomyces (the anamorphic form of the Melanospora
genus), Metarhizium, Gliocladium (the anamorphic form of the Nectria genus), and Lecanicillium; and Phylum

Rev. Acad., Cinc. Agrr. Ambient., Curitiba, v. 9, n. 2, p. 185-194, abr./jun. 2011


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Zygomycota Rhizopus, Aspergillus and Penicillium were the fungi with the highest frequency of occurrence
and the only genera that persisted in the soil in all seasons.

Keywords: Aquifoliaceae. Fungal community. Soil.

Introduo Em culturas comerciais, fundamental o conheci-


mento dos efeitos das prticas agrcolas na dinmica
A erva-mate, Ilex paraguariensis St. Hil. (Aquifo- das comunidades de fungos do solo, em funo das
liaceae), uma espcie arbrea que cresce natural- transformaes que esses micro-organismos promo-
mente na Floresta Ombrfila Mista, um ecossistema vem, influenciando a qualidade dos produtos e a pro-
associado Mata Atlntica, onde pode atingir densi- dutividade agrcola. Alm disso, a avaliao da diver-
dades de centenas de rvores/ha (MIRANDA; URBAN, sidade de fungos uma ferramenta importante na
1998). Tais caractersticas propiciaram que essa esp- busca de uma agricultura sustentvel, que permita a
cie florestal fosse explorada durante muito tempo de manuteno da biodiversidade do solo (CARVALHO,
modo extrativista nas florestas nativas onde vegetava. 2008). Assim sendo, as informaes a respeito da
Entretanto, a partir da dcada de 1970, em funo do quantificao, identificao e rol funcional dos mi-
seu importante papel socioeconmico na regio Sul cro-organismos servem como indicadores do esta-
do Brasil, passou a ser amplamente cultivada em re- do do solo com aplicabilidade no seu monitoramen-
florestamentos adensados ou puros, constituindo-se to e conservao (ALTIERI, 1999; MORENO, 2001).
em uma fonte de renda e emprego para os pequenos Estudos sobre esses organismos em solo ou rizos-
e mdios produtores (SOARES; IEDE, 1997). Contudo, fera de ambientes agrcolas tm sido realizados nos
o aumento dos plantios em monocultura de erva-ma- cultivos de girassol, Helianthus annus (SOUZA-MOTA
te desencadeou uma srie de problemas fitossanit- et al., 2003); soja, Glycine max, e algodo, Gossypium
rios, intensificados por prticas silviculturais, manejo hirsutum (CARVALHO, 2008); goiaba, Psidium guajava
e cultivo inadequados, que podem alterar a sobrevi- (SILVRIO, 2007) e em reas agroflorestais em cultivos
vncia da microbiota do solo (POLETTO et al., 2006). de uva-do-japo, Hovenia dulcis (PRADE et al., 2006);
O solo um componente imprescindvel para a citros, Citrus sinensis (PRADE et al., 2007) e serrapi-
manuteno da qualidade ambiental, constituindo- lheira de acculas de pinus, Pinus taeda (GHIZELINI
-se em um dos principais habitats para o desenvolvi- et al., 2006) (Tabela 1).
mento dos micro-organismos envolvidos na decom- Com base nessas consideraes, esta pesquisa ob-
posio da matria orgnica, ciclagem de nutrientes, jetivou o conhecimento da diversidade de fungos fi-
entre outros (EGGINS; ALLSOPP, 1975; HYDE, 1997; lamentosos do solo em um plantio em monocultura
ANDERSON; CAIRNEY, 2004). So tambm impor- de erva-mate.
tantes na supresso de doenas causadas por outros
micro-organismos, na promoo do crescimento de
plantas e contribuio para a fertilidade e estrutu- Materiais e mtodos
ra do solo (DORAN et al., 1996; KIRK et al., 2004),
podendo ocorrer tambm espcies fitopatognicas Os estudos de campo foram conduzidos em uma
e entomopatognicas. rea de monocultura de erva-mate, estabelecida em
Em funo da importncia do conhecimento da 1998, no municpio de Campo Alegre, SC (2611'S,
diversidade da microbiota de solo em diferentes re- 4914'W). A rea experimental totalizou aproxima-
gies para manejo de solos e de pragas, diversos estu- damente 28 ha plantados com erva-mate, com espa-
dos tm sido realizados em biomas brasileiros, entre amento de 1,5 m 3,0 m. O trato cultural adotado
eles a Caatinga (CAVALCANTI et al., 2006; SIMES; no erval durante o experimento foi apenas a capina
TAUK-TORNISIELO, 2006); o Cerrado (CARVALHO, mecnica realizada mensalmente.
2008; DUTRA et al., 2005) e a Mata Atlntica (GARLIPP, O clima da regio, segundo classificao de Kppen
1995; TAUK-TORNISIELO et al., 2005). Cfb mesotrmico subtropical mido, com veres

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Tabela 1 - Ocorrncia de gneros de fungos filamentosos em solo de cultivos agrcolas e florestais


(Continua)

Cultivos agrcolas Cultivos florestais


Gneros
de fungos citrus girassol algodo soja goiaba serrapilheira de pinus uva-do-japo

Absidia
Acremonium
Alternaria
Aspergillus
Bipolaris
Chaetomium
Chloridium
Cladosporium
Clonostachys
Colletotrichum
Cunninghamella
Curvularia
Emericella
Epicoccum
Eupenicillium
Fusarium
Gliocladium
Gonytrichum
Humicola
Lecanicillium
Metarhizium
Monilia
Mortierella
Mucor
Myrothecium
Neocosmopora
Neosartorya
Paecilomyces
Paraconiohtyrium
Penicillium
Pestalotia
Pestalotiopsis
Phialophora
Phoma
Pleospora
Podospora
Rhizoctonia
Rhizopus
Robillarda
Scopulariopsis
Sordaria

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Tabela 1 - Ocorrncia de gneros de fungos filamentosos em solo de cultivos agrcolas e florestais


(Concluso)

Cultivos agrcolas Cultivos florestais


Gneros
de fungos citrus girassol algodo soja goiaba serrapilheira de pinus uva-do-japo

Thielavia
Torula
Trichoderma
Ulocladium

Total 18 23 34 26 12 12 13

Legenda: = demais gneros so descritos como raros, sem diferenciao entre o cultivo de algodo eou soja.
Fonte: citrus (PRADE et al., 2007); girassol (SOUZA-MOTA et al., 2003); algodo e soja (CARVALHO, 2008); goiaba (SILVRIO, 2007); serrapilheira de pinus (GHIZELINI
et al., 2006); uva-do-japo (PRADE et al., 2006).

frescos, sem estao seca, com geadas severas fre- dextrose gar (BDA) acrescido de estreptomicina
quentes, temperatura mdia anual de 18,3 C e preci- (0,03 g/L), em trs repeties. As placas dessa dilui-
pitao mdia anual de aproximadamente 1.500 mm/ o foram inoculadas e incubadas em cmara incu-
ano (CHAFFE; KOBIYAMA, 2010). Segundo Embrapa badora tipo BOD a 26 1 C por um perodo mdio
(1984, 1999), na rea de estudo predomina a classe de cinco dias em escuro contnuo.
de solo cambissolo lico. O horizonte A nessa classe, As colnias que apresentaram macromorfologias
na maior parte das vezes, proeminente e a textu- distintas foram isoladas em BDA, incubadas a 25
ra argilosa. So solos bastante suscetveis eroso 1 C por 10 dias. Aps o crescimento, os isolados fo-
quando o relevo fortemente ondulado e moderada- ram mantidos sob refrigerao a 4 C. Para a iden-
mente suscetvel em relevo suavemente ondulado. tificao foram utilizados critrios macro e micro-
As amostras do solo foram coletadas mensalmen- morfolgicos pelo mtodo de cultura em lmina ou
te no perodo de novembro de 2005 a outubro de microcultivo (KERN; BLEVINS, 1999) e chaves de
2006, a uma profundidade da superfcie de 5 cm, tota- identificao especficas (ALVES, 1998; BARNETT;
lizando 12 coletas. A rea amostrada foi de 5.000 m, HUNTER, 1999; HOOG; GUARRO, 2004; KONEMAN
sendo feitas coletas em trs pontos distintos, cons- et al., 2006; LARONE, 2002). As lminas foram fixa-
tituindo-se uma amostra composta. O material cole- das em lactofenol de Amman e analisadas no micros-
tado foi armazenado em saco plstico e conservado cpio tico, sob aumento de 100x.
sob refrigerao por 24 horas. As anlises foram re- Aps a identificao dos gneros foi realizada a
alizadas no Laboratrio de Microbiologia e Biologia quantificao da frequncia absoluta das colnias,
Molecular (LabMicro) do Departamento de Patologia estimando-se a quantidade total dos fungos isola-
Bsica da Universidade Federal do Paran (UFPR). dos em unidades formadoras de colnia (UFC). Os
Para o isolamento dos fungos aplicou-se a tcni- dados foram submetidos anlise estatstica pelo
ca de diluio sucessiva (CLARK, 1965), utilizando teste do qui-quadrado.
10 g de solo mido previamente peneirado em ma-
lha de 2 mm, transferido para frascos de vidro con-
tendo 90 mL de soluo salina (NaCl a 0,9%) com Resultados e discusso
prolas de vidro (5-6 mm de dimetro) e agitados
por 20 minutos em agitador (100 rpm). Dessa dilui- Nas coletas realizadas durante o perodo de 12
o, 1 mL foi adicionado a 9 mL de gua destilada meses em solo de erval em monocultura, foram identi-
esterilizada obtendo-se a diluio de 10; repetiu- ficados 11 gneros de fungos, totalizando 1.300 UFC/g.
-se esse procedimento para se obter a diluio 10. O Aspergillus apresentou o maior nmero de isola-
Da diluio 10 retirou-se 0,1 mL, que foi colocado dos, seguido por Penicillium, Acremonium, Cladospo-
em placa de Petri contendo 20 mL do meio batata rium, Fusarium, Paecilomyces, Rhizopus, Trichoderma,

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Metarhizium, Gliocladium e Lecanicillium (Tabela 2). goiaba (12), Ghizelini et al. (2006) em serrapilheira
Segundo Domsch et al. (1993), Wicklow e Carroll de pinus (12), Prade et al. (2006) em uva-do-japo
(1983) e Stamford et al. (2005), todos os gneros (13) e Prade et al. (2007) em citrus (18). Entretanto,
identificados so habitantes comuns do solo de flo- Carvalho (2008) isolou 26 e 34 gneros de fungos
restas, campos, solos arenosos ou reas cultivadas. em solo de cultivo de soja e algodo, respectivamen-
Moreira e Siqueira (2002) descrevem que os g- te. Esse autor relata que a prtica sustentvel da uti-
neros Aspergillus, Penicillium, Rhizopus, Trichoderma, lizao dos recursos naturais, como o plantio direto,
Fusarium, Lecanicillium, Alternaria, Mucor e Pythium pode favorecer a manuteno da biodiversidade em
so fungos comumente isolados no solo. O presen- solos em que ocorre a substituio da vegetao na-
te estudo confirma em grande parte esses dados, tiva por plantaes.
pois Aspergillus, Penicillium, Rhizopus, Trichoderma, Entre os fatores que podem estar diretamente
Fusarium e Lecanicillium tambm foram isolados e associados baixa diversidade da microbiota fngi-
corresponderam a 64,75% do total de UFC isoladas ca do solo, de acordo com Klich (2002), esto a va-
(Tabela 2). riedade florstica reduzida, fatores abiticos e ma-
Persiani et al. (1998) relataram que a diversida- nejo inadequado das reas cultivadas. Gliessmann
de fngica em solo de ecossistema perturbado pode (2000) ressalta que o manejo correto do solo e das
favorecer a prevalncia de algumas espcies de Pe- culturas pode influenciar as dinmicas populacio-
nicillium, Acremonium, Metarhizium, Paecilomyces, nais dos organismos do solo e que a rotao de cul-
Trichoderma, Beniowskia e Gonytrichum. Os resul- tura, cultivos de cobertura e o aproveitamento de
tados deste estudo foram semelhantes, com exce- resduos (de culturas) e esterco so prticas que
o dos dois ltimos gneros citados, que no foram promovem uma populao biologicamente diver-
isolados. sificada no solo. Em erva-mate, entretanto, poucas
Em relao diversidade de gneros identifica- prticas culturais so realizadas e Philipovsky et al.
dos (11), esse resultado foi bastante prximo aos (2003) alertam que a prtica de limpeza rotineira
obtidos por Silvrio (2007) em monocultivo de (capinas) realizada nesse cultivo uma das causas
fundamentais do empobrecimento do solo.
Neste estudo observou-se a ocorrncia de diver-
Tabela 2 - Nmero de unidades formadoras de colnias sos gneros de fungos com potencial fitopatognico,
(UFC 10) e porcentagem de fungos (%) como Aspergillus, Fusarium, Cladosporium, Verticil-
isolados de amostras de solo, em um plantio lium e Penicillium (DOMSCH et al., 1993). De acordo
em monocultura de erva-mate no municpio com Bergamin et al. (1995), isso indica que a bai-
de Campo Alegre, SC, Brasil, de novembro de xa variabilidade florstica pode afetar o desenvolvi-
2005 a outubro de 2006 mento de gneros que atuem como antagonistas, as-
sim como a uniformidade de espcies vegetais pode
Gneros Nmero de UFC % direcionar a ocorrncia de habitats especficos para
Aspergillus 363 27,92%
determinadas espcies fngicas. Alm disso, os g-
neros isolados possuem caractersticas ecolgicas pe-
Penicillium 313 24,08%
culiares quanto a interaes de patogenicidade ou
Acremonium 270 20,77%
no a plantas, outros grupos de fungos e tambm sua
Cladosporium 93 7,15%
patogenicidade a insetos.
Fusarium 82 6,30% O gnero Aspergillus, com maior nmero de UFC
Paecilomyces 45 3,47% neste trabalho, representa um grupo de fungos am-
Rhizopus 41 3,15% plamente difundido, ocorrendo com grande frequn-
Trichoderma 35 2,69% cia em reas cultivadas e solos de florestas tropicais
Metarhizium 26 2,00% (CHRISTENSEN; TUTHILL, 1985), sendo, normalmente,
Gliocladium 24 1,85% dominante em nmero de UFC e de espcies em bio-
Lecanicillium 08 0,61% mas como a Caatinga (SILVRIO, 2007; CAVALCANTI
et al., 2006).
Fonte: Dados da pesquisa.

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Penicillium, tambm abundante na rea amostra- himenpteros (LOUREIRO et al., 2005), lepidpteros,
da, um gnero cosmopolita envolvido na decom- colepteros, hompteros e ortpteros (ALVES, 1998).
posio de matria orgnica no solo e antagonista O Lecanicillium considerado entomopatognico, in-
de espcies de fitopatgenos (GOMEZ et al., 2007). fectando frequentemente hompteros (LOUREIRO
De acordo com Carvalho (2008), a predominncia et al., 2003), himenpteros (LOUREIRO et al., 2004)
desse gnero pode estar diretamente relacionada e colepteros (BAUTISTA, 2000).
produo de metablitos secundrios, ou indireta- O Rhizopus, considerado saprfita e fungo de se-
mente, pela competio nutricional, maior produo mente de erva-mate (AUER; GRIGOLETTI JNIOR,
de esporos e maior capacidade de crescimento em 2002), tambm foi relatado como contaminante em
meio de cultura. marcas comerciais de erva-mate por Borges et al.
Fusarium apresenta espcies patognicas e no (2002) e Bernardi et al. (2005).
patognicas, abrigadas em solos naturais ou cultiva- O Trichoderma um fungo comum em solos, po-
dos, onde podem permanecer por longo tempo sob dendo habitar diversos substratos, especialmente
a forma saproftica (EDEL et al., 1997). relatado florestais, j que possui grande potencial saproftico
tambm como patgeno de coccdeos e outras co- (KUTER, 1986). Domsch et al. (1993) descrevem esp-
chonilhas em algumas espcies de frutferas (ALVES, cies de Trichoderma como antagonistas de fungos fi-
1998; AZEVEDO et al., 2000b). Esse gnero, de acor- topatognicos, destacando-se a espcie T. harzianum,
do com Poletto et al. (2006), um habitante natu- em relao ao controle de Pyhtium, Helmintosporium,
ral do solo em plantaes de erva-mate. Contudo, Verticillium, Alternaria, Rhizoctonia e Fusarium oxys-
provavelmente em razo de prticas de manejo ina- porum. O Gliocladium citado como parasita de ou-
dequadas, como excesso de adubao, estresse da tros fungos (BETTIOL, 2003) e saprfita em erva-
erveira, modificaes genticas e/ou mudanas cli- -mate (AUER; GRIGOLETTI JNIOR, 2002).
mticas, esse fungo sofreu modificaes, deixando de O Metarhizium um gnero amplamente distri-
ser saproftico e passando a ser patognico, causan- budo na natureza, podendo ser facilmente encon-
do a podrido de razes nessa cultura. trado no solo onde sobrevive por longos perodos
Os fungos dos gneros Aspergillus e Fusarium des- (ALVES, 1998), porm foi pouco abundante na rea
tacam-se por serem contaminantes de produtos agr- estudada. O M. anisopliae apontado como um agen-
colas e/ou alimentos e por produzirem metablitos te de controle biolgico de grande potencialidade e
secundrios txicos, denominados micotoxinas, que vem sendo utilizado com sucesso contra cigarrinhas
podem provocar intoxicaes em seres humanos e (Hemiptera, Cercopidae), como a da cana-de-acar,
animais (ELLIS et al., 1991; LAZZARI, 1997). Em pes- Mahanarva posticata (Stal, 1855); das pastagens,
quisa realizada por Borges et al. (2002), em mar- Zulia entreriana (Berg, 1879) e Deois flavopicta (Stal,
cas comerciais de erva-mate, os gneros Aspergillus 1854) (FARIA; MAGALHES, 2001).
e Penicillium tambm foram isolados indicando que Comparando-se a frequncia dos gneros isola-
a contaminao com estes fungos pode ser provenien- dos nas diferentes estaes do ano, observou-se que
te do solo do erval quando as folhas colhidas so co- houve diferena significativa, com o maior nmero
locadas diretamente no cho. de UFC obtido no vero, seguido do outono, prima-
O gnero Acremonium comumente encontrado vera e inverno. Os gneros que ocorreram em todas
em solo e na serrapilheira (GHIZELINI et al., 2006). as estaes foram apenas Aspergillus e Penicillium
Tambm considerado um fungo entomopatog- (Tabela 3). Prade et al. (2007) tambm isolaram es-
nico, infectando hempteros, himenpteros e cole- ses fungos em plantao de citrus em todas as esta-
pteros (ALVES, 1998; AZEVEDO et al., 2000a, b), es do ano. Contudo, Prade et al. (2006), mesmo
alm de ser endoftico na erva-mate (PENNA, 2000; tendo isolado Aspergillus em todas as estaes em
PIMENTEL et al., 2006). solo de plantao de uva-do-japo, no observaram
O Cladosporium considerado um colonizador sa- a presena de Penicillium durante o perodo experi-
proftico primrio (DOMSCH et al., 1993) e fungo de mental de 24 meses.
semente de erva-mate (AUER; GRIGOLETTI JNIOR, Garlipp (1995) e Tauk-Tornisielo et al. (2005),
2002). O gnero Paecilomyces, considerado um fungo analisando o solo na Floresta Atlntica de Banhado
saprfita, apresenta espcies entomopatognicas de Grande no Estado de So Paulo , e Cavalcanti et al.

Rev. Acad., Cinc. Agrr. Ambient., Curitiba, v. 9, n. 2, p. 185-194, abr./jun. 2011


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Tabela 3 - Nmero de unidades formadoras de colnias Concluso


de fungos (UFC 10) isolados de amostras
de solo, nas estaes do ano, em um plantio Dos 11 gneros de fungos filamentosos identifi-
em monocultura de erva-mate no municpio cados, Aspergillus e Penicillium foram os mais fre-
de Campo Alegre, SC, Brasil, de novembro de quentes e os nicos que persistem no solo do erval
2005 a outubro de 2006 avaliado por todas as estaes do ano. Espcies sa-
prfitas, fitopatognicas e entomopatognicas ocor-
Primavera* Vero** Outono*** Inverno**** rem na rea, demonstrando que, apesar do sistema
Aspergillus 65 134 75 89 de monocultura, a diversidade dos fungos filamento-
Penicillium 44 87 96 86
sos de solo compatvel com reas de diversas cultu-
ras, apresentando inclusive inculos de espcies que
Acremonium 29 207 34 00
podem ser utilizadas para o controle de pragas e do-
Cladosporium 00 36 57 00
enas da erva-mate.
Fusarium 00 48 34 00
Paecilomyces 08 00 00 37
Rhizopus 00 00 41 00
Agradecimentos
Trichoderma 00 00 00 35
Metarhizium 00 20 06 00 Ao CNPq, pela bolsa de Doutorado concedida
Gliocladium 24 00 00 00 primeira autora e pela bolsa de pesquisa concedida
Lecanicillium 00 00 00 08 para a segunda. Aos pesquisadores do Laboratrio
Total 205a 532c 343b 181c de Entomologia da Embrapa Florestas, Colombo,
PR. Ao senhor Paulo Corra, pela concesso da rea
Legenda: *primavera = setembro, outubro, novembro; **vero = dezembro, janei- experimental.
ro e fevereiro; ***outono = maro, abril, maio; ****inverno = junho, julho
e agosto. Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo
teste do X (p = 0,01%). Referncias
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