CENTRO DE GESTION INDUSTRIAL

TECNOLOGIA EN QUIMICA APLICADA A LA INDUSTRIA

GUIA DE LABORATORIO
PRACTICA: SEPARCION DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIA SOBRE PAPEL
GRUPO 6

Objetivo:
Extraer los pigmentos fotosintticos y separarlos mediante una tcnica sencilla de cromatografa en
papel, esto con el fin de identificar el proceso cromatogrfico y sus respectivas fases.

Referencias conceptuales:
La cromatografa se define como un mtodo de separacin relativamente rpido, basado en la
distribucin selectiva de los componentes a separar, entre dos fases inmiscibles, denominadas fase
estacionaria y fase mvil.

Pigmentos vegetales:
Los pigmentos se caracterizan por absorber luz y presentar color por el reflejo de ciertos espectros
de luz; en los vegetales las hojas, los tallos y las races contienen diversos pigmentos entre ellos las
quinonas o flavinas (colorante de las flores), pero a pesar de esto son los pigmentos fotosintticos
que absorben la luz solar, esos pigmentos son la clorofila y los carotenoides. Estos pigmentos
fotosintticos utilizan la energa solar que absorben en su estructura molecular y cumplen funciones
dentro de la clula, la ms importante es llevar a cabo la fotosntesis, es decir, que es fundamental
para la existencia de los vegetales. La espinaca, que es un vegetal, cuenta con los siguientes
pigmentos:

Clorofila: es el pigmento que lleva a cabo la fotosntesis, esta absorbe toda la luz
exceptuando la de color verde, pues se refleja en el color verde caracterstico de la espinaca.
Cuenta con la clorofila a y la clorofila b, la primera es de color verde azulado y se encarga
de la fotosntesis, mientras la segunda es un pigmento de apoyo.
Carotenoides: estos se descomponen en el cuerpo humano, al ser consumidos, y se
convierten en vitamina A. Se considera esencial para la salud; en las espinacas el pigmento
beta carotenoide es el ms abundante. Se caracteriza por una coloracin naranja presente
en las zanahorias.
Feofitinas: este pigmento se considera un producto de la descomposicin, pues pierde un
ion de magnesio que permanece en la hoja y esto permite una continua coloracin verde
en las espinacas.
Xantofilas: estos pigmentos son carotenoides oxidados, por tanto se produce un cambio en
su estructura, se caracterizan por ser de color amarillo.
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Materiales, equipos y reactivos:

Mortero
Embudo
Papel filtro
Erlenmeyer
Beaker de 200 ml o placa petri
Hojas de espinaca
Alcohol Etlico 96

Procedimiento:

1. Colocar en un mortero trozos de hojas lavadas (quitando las nerviaciones ms gruesas)

junto con 50 o 60 cm3 de alcohol y una cucharadita de arena. Triturar sin golpear hasta que
el lquido adquiera una coloracin verde intensa.
2. Filtrar, recogiendo el filtrado en un Erlenmeyer. Se obtiene as una solucin en alcohol de
pigmentos.
3. La solucin antes obtenida se vierte sobre un beaker o una caja de Petri. Se coloca un papel
de filtro doblado en ngulo sobre la solucin y se deja en reposo el tiempo necesario.
4. Observar las diferentes pigmentaciones obtenidas en el papel filtro.

Al observar el papel donde hemos hecho la cromatografa, vemos cuatro bandas o zonas, que
corresponden a los distintos pigmentos fotosintticos presentes en las hojas de espinaca. Segn su
grado de solubilidad con el alcohol se reconocen estas bandas y en este orden:

clorofila b
clorofila a
xantofila
carotenos

Bibliografa:

QUMICA. LA CIENCIA CENTRAL. Novena edicin. Brown, LeMay, Bursten.

Separacin de los pigmentos de la hoja de espinaca mediante cromatografa en capa fina.
Quiored v 1.0. http://www.ugr.es/~quiored/doc/p23.pdf