Francisco Lozano Gmez Andrea Saori Majluf Trejo

Puntos ms importantes:

El opern lac de E. coli contiene los genes involucrados

en el metabolismo de la lactosa. Se expresa solamente
cuando la lactosa est presente y la glucosa est ausente.

Dos reguladores "encienden" y "apagan" el opern en

respuesta a los niveles de lactosa y de glucosa: el
represor lac y la protena activadora por catabolito (CAP).

El represor lac acta como un sensor de la lactosa.

Normalmente bloquea la transcripcin del opern, pero deja
de actuar como represor cuando la lactosa est presente. El
represor lac detecta la lactosa indirectamente, a travs de su
ismero alolactosa.

Protena activadora de catabolitos (CAP) acta

como un sensor de la glucosa. Activa la transcripcin del
opern, pero solamente cuando los niveles de glucosa son
bajos. CAP detecta la glucosa indirectamente, a travs de la
molcula de seal de hambre AMPc.

Introduccin

Lactosa: es lo que hay para la cena! Aunque eso puede no

sonar delicioso para nosotros (la lactosa es el azcar principal
en la leche y probablemente no quieras comerla sola), la
lactosa puede ser una comida excelente para la bacteria E.
coli. Sin embargo, solo engullirn la lactosa cuando otros
azcares mejores, como la glucosa, no estn disponibles.
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Con eso como contexto, qu es exactamente el opern lac?

El opern lac es un opern o grupo de genes con un solo
promotor (transcrito como un solo ARNm). Los genes en el
opern codifican las protenas que permiten que las bacterias
utilicen la lactosa como fuente de energa.
Que es lo activa al opern lac?
La bacteria E. coli puede descomponer la lactosa, pero no es
su alimento preferido. Si la glucosa est presente, la
preferirn por mucho. La glucosa requiere pocos pasos y
menos energa para descomponerse que la lactosa. Sin
embargo, si la lactosa es el nico azcar disponible, E. coli no
dudar y la utilizar como fuente de energa.

Para utilizar la lactosa, las bacterias deben expresar los genes

del opern lac, que codifica enzimas claves para el consumo y
el metabolismo de la lactosa. Para ser tan eficiente como sea
posible, E. coli debe expresar el opern lac solamente cuando
se cumplan dos condiciones:

La lactosa est disponible y

La glucosa no est disponible
Cmo se detectan los niveles de lactosa y de glucosa y cmo
los cambios en los niveles afectan la transcripcin del
opern lac? Dos protenas reguladoras estn involucradas:

Una, el represor lac, acta como un sensor de lactosa.

La otra, la protena activadora por catabolito (CAP), acta
como un sensor de glucosa.
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Estas protenas se fijan al ADN del opern lac y regulan su

transcripcin con base en los niveles de lactosa y de glucosa.
Veamos cmo funciona esto.
Estructura del opern lac
El opern lac contiene tres genes: lacZ, lacY y lacA. Estos
genes se transcriben como un solo ARNm, bajo el control de
un promotor.

Los genes en el opern lac especifican las protenas que

ayudan a la clula a utilizar la lactosa. El gen lacZ codifica una
enzima que divide la lactosa en monosacridos (azcares de
una sola unidad) que pueden formar parte de la gluclisis. De
forma similar, lacY codifica un transportador integrado en la
membrana que ayuda a llevar la lactosa dentro de la clula.
Adems de los tres genes, el opern lac tambin contiene un
nmero de secuencias de ADN reguladoras. Estas son las
regiones del ADN a las que se pueden unir protenas
reguladoras particulares, lo que controla la transcripcin del
opern.
Secrecin en bacterias Gram negativas
La secrecin no es exclusiva slo de los organismos eucariotas sino
que est presente tambin en bacterias y organismos
multicelulares Archaea.

Las bacterias Gram negativas (G-) tienen dos membranas, haciendo

as la secrecin topolgicamente ms compleja. Hay al menos seis
sistemas de secrecin especializados en bacterias Gram negativas.

Sistema de secrecin de tipo I

Es similar al transportador ABC, pero tiene protenas adicionales que,

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junto con la protena ABC, forma un canal contiguo que cruza las
membranas interiores y exteriores de las bacterias Gram negativas.

Este es un sistema simple, que consiste de slo tres subunidades de

protena: la protena ABC, protena de fusin a la membrana y
protena de la membrana externa. Este sistema de secrecin
transporta diversas molculas, como iones, medicamentos y protenas
de varios tamaos (de 20 a 100 kDa).

Sistema de secrecin de tipo II

Las protenas secretadas por este sistema, dependen del sistema Sec
para el transporte inicial en el periplasma. Una vez all, pasan por la
membrana externa a travs de un complejo multimrico de protenas
secretinas. Adems de las secretinas, otras 10-15 protenas de la
membrana interior y exterior forman el aparato de secrecin
completo, muchas con funcin an desconocida. Los pili de las Gram
negativas tipo IV usan una versin modificada del sistema tipo II para
su biognesis, y en algunos casos ciertas protenas se comparten
entre un complejo pilus y el sistema tipo 2 dentro de una misma
especie bacteriana.

Sistema de secrecin de tipo III

Este sistema es homlogo al del cuerpo basal flagelar bacteriano. Se

parece a una jeringuilla molecular por la cual una bacteria (por
ejemplo, ciertos tipos de Salmonela, Shigella, Yersinia) puede
inyectar protenas en clulas eucariticas. Una baja concentracin de
Ca2+ en el citosol abre la puerta que regula el sistema. El sistema
Hrp, en patgenos de plantas, inyecta harpinas por mecanismos
similares. Este sistema de secrecin fue descubierto en la
bacteria Yersinia pestis, causante de la peste bubnica, y mostr que
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las toxinas podan ser inyectadas directamente desde el citoplasma

bacteriano al citoplasma de las clulas del anfitrin ms que a travs
del medio extracelular.

Sistema de secrecin de tipo IV

Es un sistema homlogo a la maquinaria de conjugacin de las
bacterias (y los flagelos de Archaea). Es capaz de transportar tanto
ADN como protenas. Fue descubierto en Agrobacterium tumefaciens,
que usa este sistema para introducir el plsmido Ti y protenas en el
anfitrin, lo que desarrolla un tumor. Las Helicobacter pylori usan
este sistema de secrecin para inyectar Cag A en clulas epiteliales
gstricas. La Bordetella pertussis, bacteria causante de la tos ferina,
secreta la toxina pertussis en parte por el sistema tipo IV.
La Legionella pneumophila, causante de la legionela, utiliza tambin
este sistema para translocar numerosas protenas efectoras a su
anfitrin eucaritico.

Sistema de secrecin de tipo V

A este sistema tambin se le llama sistema autotransportador, ya que

la secrecin de tipo V implica el uso del sistema Sec para cruzar la
membrana interior. Las protenas que usan esta ruta tienen la
capacidad de formar un barril beta con su terminal C, que se inserta
en la membrana externa permitiendo al resto del pptido alcanzar el
exterior de la clula. Algunos investigadores piensan que los
remanentes de los autotransportadores dieron lugar a las porinas, que
forman estructuras similares de barril beta.

Sistema de secrecin de tipo VI

La secrecin de varias protenas de este sistema ha sido descrita

recientemente en Vibrio cholerae y Pseudomonas aeruginosa. Estas
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proteinas carecen de las secuencias sealizadoras con terminal N.

Translocacin de arginina gemela

Las bacterias, as como las mitocondrias y los cloroplastos, tambin

usan muchos otros sistemas de transporte especiales como el
desplazamiento de arginina gemela (que encajan), ruta que, en
contraste con la exportacin dependiente de Sec, transporta
protenas totalmente plegadas a travs de la membrana. El nombre
del sistema viene del requerimiento de dos argininas consecutivas en
la secuencia de seales necesaria para disparar este sistema.

Liberacin de vesculas de la membrana externa

Adems del uso de complejos multiproteinicos indicados

anteriormente, las bacterias Gram- poseen otro mtodo para la
liberacin de sustancias: la formacin de vesculas en la membrana
externa. Partes de la membrana externa forman estructuras
esfricas, compuestas de una bicapa de lpidos, que encierran
sustancias periplsmicas. Las vesculas de varias especies bacterianas
pueden contener sustancias patgenas, tener efectos
inmunomoduladores, y tambin adherirse directamente e intoxicar
las clulas husped. Mientras que la liberacin de vesculas es una
respuesta general a condiciones de estrs, el proceso de cargar
protenas transportadoras parece ser selectivo.

Sistemas de secrecin bacterianos El sistema de secrecin tipo I es un sistema

simple, que consiste de solo tres subunidades de protena: la protena ABC,
protena de fusin a la membrana y protena de la membrana externa que
juntas forman un canal contiguo que cruza las membranas interiores y
exteriores de las bacterias Gram-negativas. Este sistema de secrecin
transporta diversas molculas, como iones, medicamentos y protenas de
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varios tamaos (de 20 a 100 kDa). Sistema de secrecin tipo II (TTSS II): este
tipo utiliza el sistema Sec para transportar protenas del citoplasma al espacio
periplsmico, mediante otras protenas llamadas secretinas; atraviesan la
membrana citoplasmtica (interna) y la membrana externa para alcanzar el
medio externo. Sistema de secrecin tipo III (TTSS III): este sistema se
describe como una jeringa molecular o complejo aguja, por medio del cual la
bacteria inyecta diferentes protenas a la clula hospedera. El TTSS III consiste
en una maquinaria de ms de 20 protenas. Este sistema lo utilizan
Escherichia coli enteropatgena y enterohemorrgica, entre otras

Sistema de secrecin tipo IV (TTSS IV): es un sistema homlogo a la

maquinaria de la conjugacin bacteriana y puede transportar tanto DNA
como protenas. Este sistema lo usa Helicobacter pylori para transferir la
protena CagA dentro de las clulas gstricas. Tambin Bordetella pertusis
secreta su toxina por ese mecanismo. Sistema de secrecin tipo V (TTSS V): a
este sistema se le conoce como sistema autotransporte, aunque tambin
utiliza el sistema Sec para cruzar la membrana externa; las bacterias que usan
este sistema forman una estructura beta barril en su extremo carboxilo, el
cual se inserta en la membrana externa y permite al resto del pptido
(pptido seal), llegar al medio externo.17,18 Sistema de secrecin tipo VI: la
secrecin de varias protenas de este sistema ha sido descrita recientemente
en Vibrio cholerae y Pseudomonas aeruginosa. Estas protenas carecen de las
secuencias sealizadoras con terminal N

Transporte de protenas

Ocurre en las clulas de los tres dominios de la vida. La tercera parte de

las protenas de las clulas es secretada a travs o insertada en las
membranas. Bacterias Gram positivas solo en la membrana citoplasmtica.
Bacterias Gram negativos tambin ocurre en la membrana externa.
Bacterias fottrofas adems en las membranas fotosnteticas. Clulas
eucariotas en las membranas de los organelos. Bacterias patgenas en la
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membrana citoplasmtica de las clulas hospederas y las toxinas en su sitio

blanco.

Enzimas hidrolticas. Lipoprotenas periplsmicas. Toxinas. Apndices

de superficie

Protenas integrales de membrana: ~Transporte. ~Produccin de energa.

~Divisin celular. ~Receptores de seales extracelulares. ~Biognes

Sistema Sec SecYEG + Sec A= translocasa. Es la responsable del movimiento

de la protena a travs de la membrana citoplasmtica. El complejo SecYE
forma un canal conocido como translocn o canal conductor de protenas
(CCP). SecG, estimula el transporte y SecD, SecF y yajC son regulatorias.
Nature Reviews Microbiology 5, 839-851 (Nov 2007) Pptido lder
(secuencia lder o secuencia seal). La protena que ser translocada es
sintetizada con este pptido y es removido durante la translocacin.
Peptidasa del pptido seal (SPaseI). Libera la protena translocada del
translocn.

Sistema Sec 1. Reconocimiento y gua a la protena (translocacin co-

traduccional y post-traduccional) 2. Translocacin. 3. Liberacin y maduracin

Translocacin post-traduccional. Sistema Sec

1) La protena chaperona SecB se une a una preprotena naciente en el

citosol, estabilizando su conformacin no plegada. 2a) El complejo SecB-
preprotena es dirigido hacia la translocasa SecYEG unida a SecA (3a). 2b) El
complejo SecB-preprotena se asocia a la protena SecA y se dirige a SecYEG
en la MI (3b)

4) Se une la secuencia seal a SecA, lo cual estabiliza la interaccin SecB-

SecA. 5) La preprotena se transfiere a SecA. La unin de ATP por SecA
promueve el inicio de la translocacin y la liberacin de SecB del complejo
ternario. La hidrlisis del ATP permite el paso de la protena a travs del
translocn.
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Las protenas son transportadas a travs de la membrana citoplasmtica

mediante al menos 3 mecanismos: 1. Via general de secrecin (GSP o Sec) 2.
Via ABC 3. Via de las argininas gemelas (Twin-arginine Traslocation TAT-
Pathway) Las bacterias Gram poseen, adems, sistemas para transportar las
protenas a travs de la membrana externa: sistemas de secrecin de
protenas

Via de transporte de protenas ABC Permite el transporte de protenas al

medio extracelular en un solo paso. Frecuentemente usado por bacterias
patgenas para secretar factores de virulencia Protenas sustratos poseen
pptido seal en extremo C-terminal, no se remueve despus del transporte.
Transporta protenas desplegadas. Depende de ATP. Posee complejo de la flia
transportadores ABC en membrana citoplasmtica

Cadena Respiratoria
Conceptos Generales
La misin de la cadena transportadora de electrones es la de
crear un gradiente electroqumico que se utiliza para la
sntesis de ATP. Dicho gradiente electroqumico se consigue
mediante el flujo de electrones entre diversas sustancias de
esta cadena que favorecen en ltimo caso la translocacin de
protones que generan el gradiente anteriormente
mencionado. De esta forma podemos deducir la existencia de
tres procesos totalmente dependientes:

Un flujo de electrones desde sustancias individuales

Un uso de la energa desprendida de ese flujo de
electrones que se utiliza para la translocacin de
protones en contra de gradiente, por lo que
energticamente estamos hablando de un proceso
desfavorable.
Un uso de ese gradiente electroqumico para la
formacin de ATP mediante un proceso favorable desde
un punto de vista energtico.
La Cadena Respiratoria
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En este punto la clula ha ganado solo 4 ATP, 2 en la gluclisis

y dos en el ciclo de Krebs, sin embargo ha capturado
electrones energticos en 10 NADH2 y 2 FADH2. Estos
transportadores depositan sus electrones en el sistema de
transporte de electrones localizado en la membrana
interna de la mitocondria.
La cadena respiratoria est formada por una serie de
transportadores de electrones situados en la cara interna de
las crestas mitocondriales y que son capaces de transferir los
electrones procedentes de la oxidacin del sustrato hasta el
oxgeno molecular, que se reducir formndose agua.

Como resultado de esta transferencia de electrones, los

transportadores se oxidan y se reducen alternativamente,
liberndose una energa que en algunos casos es suficiente
para fosforilar el ADP y formar una molcula de ATP. Se trata
de la fosforilacin oxidativa que permite ir almacenando
en enlaces ricos en energa la energa contenida en las
molculas NADH2, FADH2, NADPH2, que se liberan en la
gluclisis y en el ciclo de Krebs y que ser ms tarde
fcilmente utilizada. Toda cadena respiratoria que comience
por el NAD conduce a la formacin de 3 ATP mientras que si
comienza por el FAD produce slo 2 ATP. El rendimiento
energtico del NADP es similar al del NAD, as como el del
GTP lo es al del ATP.
Funcionamiento de la ATP sintasa
Las enzimas conocidas como ATP sintasas son aquellas
con capacidad para generar molculas de ATP (adenina
trifosfato), a partir de ADP (adenina difosfato) y Pi
(fosfato inorgnico). El ATP es la molcula principal de
intercambio de energa entre los diferentes sistemas
metablicos de la clula. Es por eso que su sntesis, y
por lo tanto la protena encargada de ello, es tan
importante. Puedes leer ms sobre donde se localiza
esta enzima en procariotas y eucariotas en el artculo
que le dedicamos a ello
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Las ATP sintasas funcionan gracias la diferencia de

potencial elctrico entre los dos lados de la membrana
en la que se encuentra. la cadena de transporte
electrnico asociado a la misma membrana genera un
gradiente de protones (H+) en una direccin y la ATP
sintasa los devuelve al interior del compartimento
celular. De esta manera se mantiene el equilibrio
elctrico y se obtiene energa. Lee ms sobre la cadena
de electrones aqu. La ATP sintasa hace pasar a su
travs los protones de un lado de la membrana al otro, en
este transporte el complejo ATP sintasa cambia su
conformacin de tal manera que acerca el ADP y el Pi
para que se forme un enlace covalente entre ellos.

El ATP es una molcula que contiene mucha ms energa

qumica (en forma de enlaces moleculares) que el ADP.
Es por esto que el paso de una a otro es endergnico, es
decir, requiere energa puesto que no se da de forma
espontnea, debido a las diferencias energticas entre
ambas molculas. Si quieres saber ms puedes leer
sobre la importancia del ATP en este artculo
(prximamente).

Mecnicamente el ATP sintasa tiene tres estados, cada

uno de sus tres heterodmeros (de la unin de una
subunidad alfa y una beta), se encuentra
alternativamente en cada estado. Cuando un protn
atraviesa el anillo c del complejo, ste rota 120 grados.
Con cada rotacin la conformacin de la subunidad beta
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cambia. En el estado L (libre), la subunidad beta es capaz

de unir ADP y Pi, al pasar el protn, la subunidad se
mueve, cambia de conformacin. Pasando al estado T (de
unin tensa) en la que se condensan el ADP y el Pi para
formar un enlace fosfodister. La conformacin T es ms
afn por el ATP que por el ADP y el Pi, de tal forma que
la velocidad de la reaccin entre el sustrato y el
producto se acerca a 1, permitiendo as el intercambio
entre las dos conformaciones del ATP-ADP en
equimolaridad. Con el siguiente protn volver a rotar
hasta la conformacin O (abierta, open en ingls), en la
que el ATP quedar libre en el citoplasma celular.

La liberacin de la molcula de ATP en la conformacin

O, es simultnea a la unin de dos nuevas molculas de
ADP y Pi, que son indispensables para permitir la
rotacin de la subunidad gamma. Es la subunidad gamma
la responsable de las diferentes conformaciones de los
tres dmeros y permite a su vez el paso de la
conformacin T a la conformacin O.

Con cada paso de protones se mueven los tres

heterodmeros, de forma continua y cclica, por lo que
una rotacin entera generar 3 molculas de ATP.