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METABOLISMO DE

MICRORGANISMOS:
FUNGOS E BACTRIAS
Crescimento de fungos e bactrias
EXOENZIMAS

Enzimas extracelulares que degradam molculas


orgnicas complexas em molculas simples
assimilveis pelo microrganismo

Celulases
Celulose Glicose

Proteases
Protenas Aminocidos

Amilases
Amido Glicose

Lipases
Lipdeos cidos graxos
DIGESTO POR FUNGOS*

Enzima A
Polmero
Hifa insolvel

Assimilao
pela hifa

Produtos
Unidades solveis
intermedirios
de polmero

*Tambm vlido para bactrias


METABOLISMO

Soma total de todas as reaes qumicas


que suportam a vida

CATABOLISMO

(reaes exergnicas quebra)

ATP, NADH, NADPH

ANABOLISMO

(reaes endergnicas sntese)

Carboidratos, protenas, etc


Viso simplificada do metabolismo celular

Descarte
Nutrientes para biossntese (produtos
fermentao, cidos,
alcois, CO2, etc;

Energia para
biossntese
Energia para
motilidade,
Anabolismo transporte de
(biossntese) nutrientes, etc

Macromolculas e outros Catabolismo


componentes celulares

Subst. qumicas / luz


(fonte de energia)
Toda a vida no planeta depende em ltima
instncia das atividades
dos microrganismos !

Unidade em bioqumica muitos dos


processos bioqumicos que ocorrem
nos microrganismos so
essencialmente os mesmos em todas
as formas de vida

Metabolismo primrio x Metabolismo secundrio


METABOLISMO

PRIMRIO
METABOLISMO
Energy
PRIMRIO

Caminhos metablicos
nos fungos

Energy
METABLITOS PRIMRIOS
METABOLISMO PRIMRIO

Fermentao alcolica /
ltica
METABOLISMO
Energy
PRIMRIO

Fermentao

alcolica /

ltica

Caminhos metablicos
nos fungos

Energy
Fermentao Alcolica
(Degradao parcial, anaerbia, de glicose a CO2 e etanol)

Glicose
2 NAD+ 2 ADP

2 NADH 2 ATP

2 cido Pirvico
2 NADH + 2H+

2 CO2
2 NAD+

2 Acetaldeido
2 NADH + 2H+
2 cido Ltico

2 NAD+
2 Etanol
Fermentao alcolica

a) Degradao parcial, anaerbia, de glicose a CO2 e etanol

C6H12O6 2CH3CH2OH + 2CO2

b) Agente: levedura Saccharomyces cerevisiae

c) Substratos: Polissacardeos

d) Produtos: Vinhos (polissacardeos de frutas)

Cervejas (polissacardeos de cereais)

Po
Levedura Saccharomyces cerevisiae

Formas leveduriformes no so fundamentalmente diferentes das hifas apenas


representam uma forma de crescimento diferente
Produo de lcool
METABOLISMO

SECUNDRIO
Energy

METABOLISMO

SECUNDRIO

Energy
METABOLISMO SECUNDRIO
METABLITOS SECUNDRIOS

Um metablito secundrio no essencial para o


crescimento vegetativo de um microrganismo em cultura
pura
Crescimento de um fungo filamentoso em meio de cultivo lquido

Trofofase feeding phase caracterizada pelo metabolismo primrio / crescimento


Crescimento de um fungo filamentoso em meio de cultivo lquido

Idiofase declnio da taxa de crescimento / incio da reproduo /


produo de metablitos secundrios
Metablitos
secundrios

Derivam-se a
partir de
diferentes
intermedirios
do
metabolismo
primrio
http://en.wikipedia.org/wiki/File:Actinomycetes_sp_01.png
http://en.wikipedia.org/wiki/Acrem
onium

http://www.bios.niu.edu/meganathan/smell_of_soil.shtml
Penicillium notatum, produtor de
penicilina,
inibindo a bactria Bacillus subtilis
cido 6-amino-penicilnico

Cadeia lateral

A B
R1

A anel -lactmico

B anel tiazolidnico
Cadeias laterais de algumas penicilinas
-Lactmicos

Caminho biossntese

Os nomes das Penicilina G


enzimas e dos
respectivos genes
esto indicados

Cefalosporina C
Esporodesmina e -Amanitina

Esporodesmina
(Aspergillus sp)

-Amanitina
(Amanita sp)

Esporodesmina - (trp/ala) - fotossensibilizao

-Amanitina (peptdeo cclico 8 a.a.) inibidor RNA polimerase (mRNA)


Zearalenona e Fusicoccina

Zearalenona
(Fusarium sp)

Fusicoccina A
(Fusicoccum sp)

Zearalenona - (policetdeo) atividade estrognica em animais

Fusicoccina A (terpenide) translocada pelo xilema / aumenta o volume


celular / altera abertura dos estmatos
Identificao de toxinas

Postulados de Koch

Bioensaios

- Animais - Alimentao / injeo sobrevivncia dos indivduos


-Testes derme inflamao / necrose

- Plantas - Mancha folha (injria + toxina = rea necrtica)


- Liberao de eletrlitos
- Inibio do crescimento
Sarna comum doena em batata

Agente causal bactria Streptomyces sp (S. scabies - mais comum)


Taxtomina A - fitotoxina

NO2 H O
N
N N OH
OH
H O

Importante para a colonizao dos tecidos pela bactria e


manifestao dos sintomas da doena
Produo da taxtomina

cultivo em extrao identificao por TLC


meio lquido c/ acetato
quantificao por HPLC*
(pH 7,2) de etila

*(HPLC high performance liquid chromatography)


Taxtomina A : Identificao

taxtomina A

Controle 254 nm

TLC = thin layer chromatography


Taxtomina A : produo por diferentes
isolados da bactria

16 Altamente produtor
79 Intermedirio
26 Pouco produtor
Raphanus sativus
Arabidopsis sp.

Triticum sp.

Ao sobre vrias espcies vegetais


Taxtomina A mecanismos de ao

Taxtomina A

Mecanismo de ao

Alteraes no processo de diviso mittica

Bloqueio da biossntese de celulose

Alteraes no fluxo de Ca2+ e H+


na membrana plasmtica

Morte celular programada


Reao de cultivares de batata a
taxtomina A

24 horas
Seces de leses
tubrculos de necrticas
batata Taxtomina A
Reao de cultivares de batata a Taxtomina A

- Resistncia +

gata Bintije Monalisa Asterix Mondial Atlantic

+ Sensibilidade -
Micotoxina
Aflatoxinas
Biossntese da aflatoxina

*
Hypothetical

Norsolorinic acid
Averantin

21 enzimas envolvidas na
Averufin biossntese da aflatoxina B1

Versiconal acetate
Versicolorin A

Sterigmatocystin
Aflatoxin B1

* ( 9 unidades acetil do malonil CoA + 1 acetil CoA primer )


Os principais fungos produtores de micotoxinas so:

- Aspergillus sp
- Grande nmero de toxinas

- Penicillium sp - Grande variedade de toxinas

- Fusarium sp
(http://labmed.ucsf.edu)

Fusarium graminearum
Aspergillus flavus

Penicillium citrinum

(http://www.bcrc.firdi.org.tw/fungi/fungal_
http://healthyhay.vt.tuwien.ac.at/division/project.php?project_id=85 detail.jsp?id=FU200802260014)
(http://www.plantpath.cornell.edu)
Bactrias
PIGMENTOS - Bactrias
- compostos coloridos produzidos por algumas bactrias

- em meio de cultivo cores diversas: amarela, marrom, verde, azul, vermelho

- caracteres usados na identificao bactrias

Meio gar eosina-azul de metileno (EMB)

Quadrante 1: Crescimento de Escherichia coli (Gram-


negativa) - colorao verde metlica.

Quadrante 3: Crescimento de Aerobacter aerogenes (Gram-


negativa) - colorao rosa.
Melanina
Hormnios substncias difusveis regulando o processo de acasalamento
Sirenina /
Parasina
Meio rico

Meio mnimo

Isolado A isolado B

5h 30h

6-MSA 6-MSA

Os isolados exibiam curva crescimento


(biomassa; peso seco) similar
The multiplicity of
products related to a common
secondary pathway is typical of
many microorganisms
METABLITOS SECUNDRIOS

Aflatoxinas

Melanina

Sirenina /
Parasina