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NCLEO DE SUCRE
ESCUELA DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOANLISIS
MANUAL
Equipo docente:
Lcda. Evelin M. Flores Fernndez
Prof. Agregado
Dr. Anbal Lobo
Prof. Asociado
Lcda. Solange Vsquez
Prof. Instructor
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INTRODUCCIN
En los ltimos 30 aos, se ha reconocido que este manual ha proporcionado las normas
mundiales, siendo usado ampliamente en la investigacin y por los laboratorios clnicos
de todo el mundo.
Movidos por estas consideraciones, la OMS estableci un comit editorial para revisar
todos los mtodos descritos en el manual, con miras a suscribir, a cambiar o
actualizarlos, crendose la quinta edicin del Manual para el Anlisis del Lquido
Seminal.
Los mtodos descritos en esta nueva edicin, son creados como directrices para mejorar
la calidad de anlisis de semen y la comparacin de los resultados. No necesariamente,
deben tomarse como obligatorias por instituciones locales, nacionales o mundiales de
acreditacin de laboratorios. El anlisis del semen es til, tanto en clnica como en
investigacin, para estudiar la fertilidad del hombre.
Este manual de anlisis del semen humano, OMS 2010, describir el anlisis estndar
del lquido seminal que incluir procedimientos, clculos e interpretacin, y valores de
referencia actuales.
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Para estudiar al hombre en quien se sospecha problemas de infertilidad hay que hacerlo
desde dos puntos de vista:
El sistema glandular est representado por los testculo, cada uno se aloja en el escroto
y est compuesto por una estructura lobulillar donde se encuentran los tbulos
seminferos y el epiddimo. Los tbulos seminferos estn formados por un epitelio
complejo, correspondiendo a ese epitelio las espermatogonias, los espermatocitos, las
clulas de Sertoli y las espermtides. En el intersticio se encuentran las clulas de
Leydig.
A partir de la cola del epiddimo se inicia el conducto deferente, el cual se contina con
las vesculas seminales y stas se continan con cada conducto eyaculador,
desembocando stos en la uretra prosttica.
El rgano de cpula, el pene, es una estructura que est formado por dos cuerpos
cavernosos, uno esponjoso y la uretra peneana; siendo los cuerpos cavernosos los
responsables de la ereccin del pene.
Para poder saber si un hombre es frtil o no, se debe tener bien claro el concepto de
FERTILIDAD, el cual se define como El hombre que durante un ao ha tenido
relaciones sexuales, sin usar mtodos anticonceptivos y no ha logrado embarazar a una
mujer; en ese momento se hace indispensable hacer una buena historia clnica, con un
interrogatorio que evale antecedentes importantes con la fertilidad, un examen fsico
detallado para conocer las caractersticas androlgicas del paciente, un espermatograma
y todos los exmenes de laboratorio indispensables que permitan conocer el estado
funcional de ese paciente.
El volumen total de lquido, aportado por las glndulas accesorias. Esto refleja la
actividad secretora de las glndulas.
Durante las relaciones sexuales, la fraccin inicial prosttica del eyaculado, rica en
espermatozoides, puede entrar en contacto con el moco cervical extendido sobre la
superficie de la vagina, el resto del lquido queda como una piscina en la vagina. Por el
contrario, en el laboratorio, el eyaculado se recoge completamente en un envase, donde
los espermatozoides se encuentran atrapados en un cogulo formado por protenas de la
vescula seminal. Este cogulo es posteriormente licuado por la accin de las proteasas
prostticas, tiempo durante el cual su osmolalidad se eleva.
relacin sexual en el hogar. Esta diferencia puede reflejar una forma distinta de
excitacin sexual, ya que el tiempo dedicado a la produccin de una muestra por
masturbacin - que refleja la extensin de la emisin seminal antes de la eyaculacin -
tambin influye en la calidad del semen.
Los resultados del laboratorio que miden la calidad del semen dependen de:
Comentario: La gran variacin biolgica en la calidad del semen, refleja los muchos
factores antes mencionados, y requiere que todas las mediciones en semen sean muy
precisas.
Despus de 4 horas:
1. RECOGIDA DE LA MUESTRA
1.1. PREPARACIN
La muestra se debe recoger en un cuarto privado cerca del laboratorio, con el fin
de limitar la exposicin del semen a las fluctuaciones de temperatura y para el
control del tiempo entre la recogida y el anlisis.
2. EXAMEN MACROSCPICO
El anlisis del semen debe comenzarse con una simple inspeccin poco despus de la
licuefaccin, preferiblemente a los 30 min, pero no despus de una hora de la
eyaculacin, para evitar deshidratacin o cambios en la temperatura que afecten la
calidad del semen.
2.1. LICUEFACCIN
Es normal que las muestras de semen licuadas, contengan grnulos gelatinosos (cuerpos
gelatinosos) que no se lican, lo cual no tiene importancia clnica.
temperatura ambiente o en una incubadora a 37C, lo que ayuda a obtener una muestra
homognea.
En contraste, para una muestra parcialmente licuada, una muestra de semen viscosa
exhibe pegajosidad homognea y su consistencia no vara con el tiempo. Una muestra
altamente viscosa se reconoce por sus propiedades de elasticidad. La muestra se adhiere
firmemente a s misma cuando se hacen intentos para pipetearla. Los mtodos para
reducir la viscosidad, son los aplicados para la licuefaccin tarda.
Una muestra normal de semen licuado tiene un aspecto homogneo, de color gris
opalescente. Puede aparecer menos opaco si la concentracin de espermatozoides es
muy baja y el color tambin puede ser diferente, es decir, rojo-marrn cuando los
glbulos rojos estn presentes (hemospermia) o amarillo en un paciente con ictericia o
por administracin de vitaminas o medicamentos.
Nota: Los envases vacos para recoger la muestra pueden tener pesos distintos, por lo
que cada envase debe, individualmente, pesarse previamente. El peso se puede registrar
en el recipiente antes de entregrselo al paciente. Se debe usar un marcador de tinta
permanente para rotular o una etiqueta. Si se utiliza etiqueta para registrar el peso,
debe colocarse antes de pesar el recolector vaco.
Nota: Medir el volumen por aspiracin de la muestra con una pipeta o jeringa, o por
decantacin en un cilindro, no es recomendable, porque no toda la muestra es
recuperada y el volumen, por lo tanto, es subestimado. El volumen perdido puede ser
entre 0,3 y 0,9 ml.
Comentario 2: El volumen bajo del semen, puede ser tambin por problema en la
recogida de la muestra (prdida de una fraccin del eyaculado), eyaculacin retrgrada
parcial o deficiencia de andrgenos.
Comentario 3: Un volumen de semen alto, puede indicar exudacin activa en los casos
de una activa inflamacin de los rganos accesorios.
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El lmite inferior de referencia del volumen del semen es 1,5 ml (percentil 5, intervalo
de confianza del 95% (IC), 1,4-1,7).
El pH del semen refleja el equilibrio entre los valores de pH de las secreciones de las
diferentes glndulas accesorias, principalmente, la secrecin alcalina de las vesculas
seminales y la secrecin cida de la prstata. El pH debe ser medido despus de la
licuefaccin en un tiempo uniforme, preferiblemente, despus de 30 min, pero en
cualquier caso dentro de la primera hora despus de la eyaculacin, ya que, est influida
por la prdida de CO2 que se produce despus de la eyaculacin.
Para las muestras, de modo normal, se debe utilizar el papel pH en el rango de 6,0 a
10,0.
Nota: La precisin del papel de pH debe verificarse con los estndares conocidos.
Para muestras viscosas, el pH de una pequea alcuota del semen se puede medir
utilizando un pHmetro, diseado para la medicin de soluciones de viscosidad.
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Valores de referencia
3. ANLISIS MICROSCPICO
D= V/A
a b c d
Fotomicrografa cortesa de C Brazil
Se debe registrar el tipo principal de aglutinacin (el que refleja el grado (grados 1-4) y
el sitio de unin (grados A-E)) (figura 2):
Grado 4: denso (todos los espermatozoides estn aglutinados y las aglutinaciones estn
interconectadas).
Grados de aglutinacin: 1 2 3 4
Sitios de unin:
A. Cabeza a cabeza.
Nota 2: Se recomienda el uso de un ocular con retcula cuadriculada (figura 3a) para
limitar el rea vista, lo que permite que la misma zona de la lmina, sea evaluada en
ambas fases del conteo. Evaluar en primer lugar la motilidad progresiva, a continuacin,
la motilidad no progresiva y los inmviles. Limitar la zona y, por lo tanto, el nmero de
espermatozoides evaluados, asegura que varias reas de la preparacin sean examinadas
para la motilidad.
Motilidad no progresiva (NP): todos los otros patrones de movilidad con una ausencia
de progresin.
velocidad superior a 25 m/s a 37C, denominado "grado A". Sin embargo, es difcil
para el analista definir la progresin hacia adelante con exactitud y sin sesgo.
Explorar sistemticamente la lmina para evitar ver varias veces la misma zona.
Cambiar con frecuencia los campos. No se deben elegir los campos sobre la base
del nmero de espermatozoides mviles visto (la eleccin del campo debe ser al
azar).
Calcular la media y la diferencia entre los dos porcentajes para los grados de
motilidad ms frecuente (PR, NP o IM) en las preparaciones hmedas.
Nota 1: Se debe evaluar slo los espermatozoides intactos (definido como aquellos que
poseen una cabeza y una cola, ya que slo los espermatozoides intactos se cuentan para
la concentracin de espermatozoides. No contar los llamados cabezas de alfiler
mviles.
Nota 2: Si los espermatozoides se contaron en dos fases (es decir, primero PR, seguido
de NP e IM en una misma rea) y se realiza un recuento de 200 espermatozoides antes
de contar todas las categoras de motilidad en esa misma zona, se debe continuar
contando ms all de 200 espermatozoides, hasta que todas las categoras se hayan
contado, con el fin de evitar inclinacin hacia la categora de la motilidad que se registra
primero.
Nota 4: En raras ocasiones, con muestras no homogneas, incluso una tercera serie de
repeticiones puede ofrecer diferencias inaceptables. En este caso, calcular la media de
todas las rplicas y tomar en cuenta esto en el reporte.
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(b) >5 mm
(a)
Ejemplo 1: Los valores del recuento de 200 espermatozoides por duplicado son:
La categora ms comn es inmviles, con una media de 50% y una diferencia de 30%.
Para una media de 50%, la diferencia aceptada es 10%, como la diferencia= 30%, es
mayor a 10% (tabla 1), los valores se rechazan, y se deben montar dos nuevas
preparaciones hmedas y evaluarlas otra vez.
Ejemplo 2: Los valores del recuento de 200 espermatozoides por duplicado son:
La categora ms comn es inmviles, con una media de 63% y una diferencia de 6%.
Se espera que para una media de 63%, una diferencia de hasta 10% ocurra por azar.
Como la diferencia= 6%, es menor, los valores son aceptados y la media de los valores
se reportan: PR: 32%; NP: 4%; IM: 63%.
Este mtodo es fcil y rpido, sin embargo, las lminas no pueden conservarse para
fines de control de calidad.
2. Eosina Y 0,5% (p/v): disolver 0,5 g de esosina Y (ndice de color 45380) en 100
ml de NaCl 0,9 g.
3.6.1.2. Procedimiento
3.6.1.3. Anotaciones
1. Los espermatozoides vivos tienen cabezas blancas y rosado claro, mientras que
los espermatozoides muertos tienen cabezas coloreadas de rojo o rosado oscuro.
Examinar una preparacin bien mezclada de semen licuado sin diluir, entre
cubreobjetos y portaobjetos, para determinar la dilucin apropiada y cmaras
adecuadas a usar. Esto es, por lo general, la preparacin hmeda utilizada para la
evaluacin de la motilidad.
El hemocitmetro de Neubauer tiene dos cmaras separadas para contar, cada una tiene
gravada unas lneas de cuadrcula microscpica de 3 x 3 mm sobre la superficie del
vidrio. Se utiliza con un cubreobjetos grueso especial (nmero 4, 0,44 mm de espesor),
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que se coloca sobre las cuadrculas y se apoya en pilares de vidrio de 0,1 mm por
encima del piso de la cmara. Cada rea de conteo se divide en nueve cuadrados de 1
mm x 1 mm. Estos cuadrados son referidos por los nmeros que aparecen en la figura 4.
Con una profundidad de 100 m cada cuadrado grande tiene una capacidad en volumen
de 100 nl. Los cuadrados grandes enumerados como 1, 3, 7 y 9, contienen 4 filas de 4
cuadrados medianos, con 6,25 nl de capacidad cada uno. Los cuadrados grandes
nmeros 2 y 8 contienen 4 filas de 5 cuadrados medianos, cada uno de 5 nl; y el
cuadrado grande central nmero 5, contiene 5 filas de 5 cuadrados medianos, cada uno
de 4 nl (figura 4, panel central). Cada uno de los 25 cuadrados medianos del cuadrado
grande central es subdividido en 16 cuadrados pequeos (figura 4, panel derecho). Por
lo tanto, los cuadrados 1, 2, 3, 7, 8 y 9 tienen 4 filas que cargan un volumen de 25 nl por
fila, mientras que los cuadrados 4, 5 y 6, tienen 5 filas que cargan un volumen de 20 nl
por fila.
1+1 (1:2), se deben contar todos los 9 cuadrados grandes, si es necesario para lograr una
cuenta de 200 espermatozoides.
Nota: Si hay muchos espermatozoides sin cabezas (cabezas de alfiler) o sin colas
(cabezas solas), su presencia debe ser reportada. Si se considera necesario, su
concentracin puede ser evaluada de la misma manera que para los espermatozoides o
su frecuencia relativa puede determinarse a partir de preparaciones teidas.
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Para reducir los errores de muestreo, un nmero crtico de espermatozoides tienen que
ser contados (de preferencia un total de al menos 400, a partir de las rplicas con
recuentos de aproximadamente 200 cada uno) (vase tabla 2).
Las diluciones 1+4 (1:5) y 1+19 (1:20) son apropiadas para un amplio rango de
concentraciones de espermatozoides, obtenindose alrededor de 200 espermatozoides en
uno o todos los cuadrados del hemocitmetro enumerados como 4, 5 y 6 (vase
recuadros 1 y 3).
Si hay 100 espermatozoides por campo de alto poder (CAP), de 4 nl (vase recuadro 4)
en la preparacin hmeda inicial, hay tericamente 25 espermatozoides por nl
(25.000/l o 25.000.000/ ml). Como el cuadrado grande central (nmero 5) almacena
100 nl, habra 2.500 espermatozoides dentro del mismo. Diluir la muestra 1+4 (1:5)
reducira el fondo y el nmero de espermatozoides a alrededor de 500 por cuadrado, lo
cual es suficiente para un error de muestreo bajo aceptable.
Si hay 10 espermatozoides por CAP de la preparacin hmeda, habra 2,5 por nl y 250
en el cuadrado grande central. Diluir la muestra 1+1 (1:2), reducira el fondo y el
nmero de espermatozoides a alrededor de 125 por cuadrado, lo que dara 375
espermatozoides, en los tres cuadrados enumerados como 4, 5 y 6, esto es suficiente
para un aceptable error de muestreo bajo.
El volumen de semen observado en cada campo microscpico depende del rea del
campo (r2, donde es de aproximadamente 3,142 y r es el radio del campo
microscpico) y la profundidad de la cmara (20,7 m, para la preparacin
hmeda). El dimetro del campo microscpico se puede medir con un micrmetro o
se puede calcular dividiendo el dimetro de la apertura del ocular por el aumento del
objetivo.
Espermatozoides Espermatozoides
Dilucin l de l de rea a
por campo de por campo de Cmara
requerida semen fijador evaluar
400x 200x
1:20 Neubauer cuadrados
>101 >404 50 950 5, 4, 6
(1+19) mejora
1:5 Neubauer cuadrados
16-100 64-400 50 200
(1+4) mejorada 5, 4, 6
1:2 Neubauer cuadrados
2-15 8-60 50 50
(1+1) mejorada 5, 4, 6
Neubauer todos los 9
mejorada cuadrados
1:2
<2 <8 50 50 o
(1+1) lmina
Gran
volumen completa
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Nota 1: Las pipetas de clulas blancas de la sangre y las automticas que dependen del
desplazamiento de aire, no son lo suficientemente exactas como para hacer diluciones
volumtricas del semen viscoso, usar pipetas de desplazamiento positivo.
Nota 2: Con fines de diagnstico, las muestras de semen para su anlisis no deben ser
inferiores a 50 l de volumen, para evitar errores asociados al pipetear volmenes
pequeos.
Un nmero de espermatozoides por CAP de 400x <4 es, aproximadamente, <1x10 6/ml,
esto es suficiente para la mayora de los propsitos clnicos, reportar la concentracin de
espermatozoides como <2x106/ml (tomar en cuenta el alto error de muestreo asociado
con bajo nmero de espermatozoides), con una nota que indique si se observaron o no
espermatozoides mviles.
Toque la punta de la pipeta con cuidado contra el borde inferior de una de las
cmaras en el surco en forma de V.
Tabla 4. Diferencias aceptables entre dos cuentas a partir de los replicados para una
suma determinada.
Para una dilucin 1+4 (1:5), usando los cuadrados 4, 5 y 6, la concentracin C = (N/n) x
(1/20) x 5 espermatozoides por nl = (N/n) x (1/4) espermatozoides/nl (o 106 por mililitro
de semen).
Ejemplo 5: Con una dilucin 1+4 (1:5), el replicado 1 se contaron 224 espermatozoides
en 8 filas, mientras que en el replicado 2 se contaron 213 espermatozoides en 8 filas. La
suma de los valores (224+213) es de 437 en 16 filas y la diferencia (224-213) es de 11.
En la tabla 4, se ve que la diferencia es menor a la esperada (41), por lo que los valores
son aceptados.
Nota: Para una dilucin de 1+4 (1:5), la concentracin tambin es fcil de calcular, pero
el nmero total de espermatozoides contados, dividido por el nmero total de filas
evaluadas se divide entre 4. En el ejemplo anterior el clculo es ((224 +213)/(8 +8))/4 =
(437/16)/4 = 27,3/4 = 6,8x106 espermatozoides/ml de semen.
Fijacin y coloracin.
La filosofa subyacente del sistema de clasificacin descrito aqu es limitar que sea
identificada como normal a la subpoblacin potencialmente fecundante de
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Deben realizarse dos o ms frotis, por si hay problema con la coloracin o se rompe la
lmina. La evaluacin debe realizarse por duplicado, porque podra ser significativa la
variacin entre las lminas. Los portaobjetos deben estar limpios por ambas caras e
identificados.
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Figura 6. Mtodos para realizar el frotis de semen. (a) Mtodo Feathering para el
semen sin diluir (muestras de semen normal): se coloca la alcuota en un extremo del
portaobjeto, inmediatamente, con otra lmina en un ngulo de 45, permitir que el
semen se extienda a lo largo del borde posterior de la lmina y formar el frotis con un
movimiento lento (ms de 1 s) hacia adelante. Este mtodo es apropiado para muestras
con viscosidad baja, ms no, para semen muy viscoso. (b) Mtodo de la Pipeta para el
semen lavado: la gota de la suspensin del semen se extiende sobre el portaobjetos con
una pipeta Pasteur en posicin horizontal. Este mtodo se aplica en muestras cargadas
de detritos o muy viscosas, cuando el semen hay que lavarlo.
Comentario: Los mtodos de coloracin rpida en la que se aade una gota de semen al
fijador y se colorean sobre la lmina, estn disponibles comercialmente. Estos no son
recomendables, porque sin la distribucin uniforme de los espermatozoides mediante la
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tcnica del extendido, no es posible observar los detalles necesarios para la clasificacin
morfolgica que se describe en este manual.
El siguiente mtodo se utiliz para preparar las fotomicrografas de este manual, a partir
de frotis que se montaron con un medio de montaje insoluble en etanol.
3.9.1.1. Reactivos
Se pueden montar o no las lminas, para el montaje se puede utilizar medio de montaje
soluble en etanol o montaje insoluble en etanol, en este caso, la lmina debe pasarse
primero por una solucin de xilol/etanol (1:2) por 1 min, luego por xilol al 100% por 1
min.
Nota 1: El xilol es peligroso para la salud y debe ser manejado en una campana de
extraccin.
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Nota 2: Los frotis deben secarse al aire durante al menos 4 h, se pueden almacenar por
un mximo de 1 semana, antes de la fijacin y tincin.
Nota 1: La fijacin con etanol provoca la deshidratacin de las clulas. Por lo tanto, los
frotis tomados directamente de la fase de fijacin en etanol al 95%, en la coloracin
pueden necesitar slo 10 s en el etanol a 80%, mientras que los frotis que se han secado
al aire despus de la fijacin deben permanecer ms tiempo (2-3 min) en etanol al 50%.
Nota 2: En el paso 6, comience con 4 baos, contine hasta que los resultados sean
satisfactorios. Este es un paso crtico, ya que la duracin de la decoloracin altera
dramticamente la intensidad final de la tincin. Si se omite este paso, los
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Comentario 2: Puede ser til un micrmetro ocular para distinguir entre el tamao
normal y anormal de la cabeza del espermatozoide.
Comentario 5: Las colas en espiral (>360, figura 8m) puede indicar disfuncin del
epiddimo.
Esta evaluacin de la morfologa normal del espermatozoide puede mejor ser aplicada
para aprender a reconocer las variaciones sutiles en la forma del espermatozoide
completo (cabezas y colas de espermatozoides normales/borderline, ver lminas 1-5 y
sus comentarios).
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Las categoras de defectos de los espermatozoides son las siguientes (figura 8):
A. Defectos de cabeza
<40% acr menos del 40% de la cabeza del espermatozoide es ocupada por el
acrosoma
>70% acr ms del 70% de la cabeza del espermatozoide es ocupada por el
acrosoma
>un tercio citoplasma anormal (mayor a un tercio del tamao de la cabeza) (ECR)
<un tercio citoplasma normal (menor a un tercio del tamao de la cabeza) (GC)
anormal se explica por s mismo
amorfa forma de la cabeza
bacilo bacteria
doblada forma no natural de angulacin
enrollada se explica por s mismo
GC gota citoplasmtica
citoplasma cualquier exceso de citoplasma residual o gota citoplasmtica, depende
del tamao
leucocito degenerado se explica por s mismo
espermtide degenerada se explica por s mismo
defectuosa se explica por s mismo
doble se explica por s mismo
clula epitelial del sistema de ductos masculino
ECR exceso de citoplasma residual
base base de la cabeza del espermatozoide no oval
foco fuera de foco
si PP bien no se observaron todas las piezas principales en la fotomicrografa (pero
si eran normales, los espermatozoides deberan considerarse normales)
inserc el sitio de insercin de la cola, est a un lado del eje longitudinal de la
cabeza
irreg contorno irregular
en asa cola doblada sobre s misma
macrfago leucocito fagoctico
monocito leucocito agranulocito
espermtide clula germinal inmadura
no acro acrosoma ausente
normal parecidos a los hallados en moco endocervical
no evaluado por superposicin o pobre enfoque
superposicin cabezas oscurecidas por cola
vac PA vacuola en regin postacrosmica
cabeza de alfiler no es un espermatozoide: no presenta cromatina
polimorfo leucocito polimorfonuclear
piriforme forma de la cabeza
redonda forma de la cabeza
vista lateral espermatozoide observado sobre el borde
pequea tamao de la cabeza
espermatocito clula germinal inmadura
cua forma de la cabeza
gruesa se explica por s mismo
larga se explica por s mismo
vac vacuola
>2 vac ms de dos vacuolas
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10 micras Lmina 1
10 micras Lmina 2
10 micras Lmina 3
10 micras Lmina 4
10 micras Lmina 5
Nota1: Debe contarse espermatozoides intactos, es decir, que tengan cabeza y cola,
dado a que slo los espermatozoides intactos son contados en la determinacin de la
concentracin espermtica. No contar clulas inmaduras germinales (redondas).
Nota 2: No evaluar los espermatozoides que se superponen y los que se encuentran con
la cabeza en el borde de la lmina, los cuales no pueden ser analizados adecuadamente.
No deben estar presentes en un buen frotis, sin embargo, puede ocurrir cuando los
detritos y una gran cantidad de material particulado estn. Estas muestras deben ser
lavadas y examinarse los frotis antes de la tincin.
Nota 1: Las cabezas de alfiler (colas libres) no se cuentan como defectos de la cabeza,
ya que no poseen cromatina o la estructura anterior de la cabeza a la placa basal.
Nota 2: Las colas libres (cabezas de alfiler) y cabezas libres no se cuentan como
espermatozoides (definido como tener una cabeza y la cola), debido a que ellas no se
consideran anormalidades del espermatozoide.
Aquellos hombres donde el total de espermatozoides exhiban uno de estos defectos son
generalmente estriles. Tales casos son raros, pero es fundamental que se identifiquen e
informen correctamente. As pues, reportar la presencia de defectos especficos en los
espermatozoides, por ejemplo, cabezas de espermatozoides libres, cabezas de alfiler
(colas libres), cabezas carentes de acrosomas.
BIBLIOGRAFA
WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen. 2010.
Fith edition. p 271.
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APNDICE
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APNDICE 1
FORMULARIO DE INFORME
Nombre:
N:
Fecha ( / / )
Recoleccin (1, en el laboratorio; 2, en la casa)
Tiempo de recoleccin de la muestra (hora: minutos)
Muestra entregada (hora: minutos)
Inicio del anlisis de la muestra (hora: minutos)
Paciente
Tiempo de abstinencia (das)
Medicamentos
Dificultades en la recoleccin
Semen
Tratamiento (p. ejm. bromelina)
Muestra completa? (1, completa; 2, incompleta)
Apariencia (1, normal; 2, anormal)
Viscosidad (1, normal; 2, anormal)
Licuefaccin (1, normal; 2, anormal (minutos))
Aglutinacin (14, AE)
pH [7,2]
Volumen (ml) [1,5]
Espermatozoides
6
Nmero total (10 por eyaculado) [39]
Concentracin (106 por ml) [15]
Error (%) si hay menos de 400 clulas contadas
Vitalidad (% vivo) [58]
Motilidad total PR+NP (%) [40]
Progresivos PR (%) [32]
No progresivos NP (%)
Inmviles IM (%)
Formas normales (%) [ 4]
Cabezas anormales (%)
Piezas medias anormales (%)
Piezas principales anormales(%)
Exceso de citoplasma residual (%)
MAR-test IgG directo (%) (3 10 minutos) [<50]
MAR-test IgA directo (%) (3 10 minutos) [<50]
IB-test IgG directo (% con beads) [<50]
IB-test IgA directo (% con beads) [<50]
Clulas no espermticas
6
Clulas peroxidasa positivo, concentracin(10 por ml) [<1,0]
Funcin de glndulas accesorias
Zinc (mol por eyaculado) [2,4]
Fructosa (mol por eyaculado) [13]
a-Glucosidasa (neutral) (mU/eyaculado) [20]
Lic:
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APNDICE 2
Nota 1: Para evitar la precipitacin, agregue el CaCl2 por separado, lentamente y con
agitacin.
APNDICE 3
COLORACIN PAPANICOLAOU
Constituyentes
6. cido fosfotngstico 4g
Soluciones madre
Preparar por separado cada una de las soluciones al 10% (100 g/l), sealadas a
continuacin:
Preparacin
Naranja G6
Constituyentes
2. Agua destilada 10 ml
2. Agite bien. Dejar reposar en una botella de color marrn oscuro o forrada con
papel de aluminio a temperatura ambiente durante 1 semana antes de usar.
3. Agite bien. Dejar reposar en una botella de color marrn oscuro o forrada con
papel de aluminio a temperatura ambiente.
Constituyentes
Preparacin
4. Calentar la mezcla a 95 C.
10. Diluir la cantidad requerida con una cantidad igual de agua destilada.
Nota: La solucin de Scott se utiliza slo cuando el agua del grifo es insuficiente para
devolver el color azul a los ncleos, debindose cambiar frecuentemente, por ejemplo,
despus de lavar 20-25 lminas.
Constituyentes
Constituyentes
BIBLIOGRAFA
WHO laboratory manual for the examination of human semen and spermcervical
mucus interaction. Fifth Edition. 2010.